PRCTICA N 6

ANLISIS FARMACOGNSTICO Y TAMIZAJE FITOQUMICO PRELIMINAR EN EXTRACTOS ESTANDARIZADOS

(EXTRACTO ETANLICO)
MTODO DE SEPARACIN Y PURIFICACIN DE DROGAS VEGETALES
(CROMATOGRAFA EN CAPA FINA)

MARCO TERICO:
EXTRACTO ESTANDARIZADO Y TAMIZAJE FITOQUMICO

Tamizaje Fitoqumico:
El tamizaje fitoqumico o screening fitoqumico es una de las etapas iniciales de la investigacin fitoqumica, que
permite determinar cualitativamente los principales grupos qumicos presentes en una planta y a partir de all,
orientar la extraccin y/o fraccionamiento de los extractos para el aislamiento de los grupos de mayor inters.
El tamizaje fitoqumico consiste en la extraccin de la planta con solventes apropiados y la aplicacin de reaccin de
color y precipitacin. Debe de permitir la evaluacin rpida, con reacciones sensibles, reproducibles y de bajo costo.
Los resultados del tamizaje fitoqumico constituyen nicamente en una orientacin y debe de interpretarse en
conjunto con los resultados del screening farmacolgico.
As cuando una planta revela accin sobre el sistema nervioso central durante el tamizaje farmacolgico y presencia
de alcaloides en el tamizaje fitoqumico, es bastante probable que la accin farmacolgica se deba a la fraccin
alcaloidal. De la misma manera, el hecho de evidenciarse accin anti-inflamatoria en el tamizaje farmacolgico y la
presencia de flavonoides en el tamizaje fitoqumico, puede dar lugar a procesos de aislamiento y sometimiento a
pruebas ms especificas de estos compuestos. Efectos catrticos pueden ser asociados a las antraquinonas. La
presencia de glicsidos cianognicos durante la marcha fitoqumica puede dar lugar a la descartacin de la planta por
su alta toxicidad.
Muchos principios activos presentan una estructura qumica perfectamente definida, mientras que otros, al formar
parte de mezclas complejas resulta difcil determinar cul es el compuesto activo.
La extraccin obtiene porciones medicinalmente activas a partir de los tejidos de las plantas y animales, de los
componentes inertes de los mismos, mediante el uso de solventes selectivos, utilizando procedimientos establecidos
y correctamente estandarizados.
Para poder realizar el aislamiento de un principio natural en condiciones ptimas, se debe tener en cuenta una serie
de dificultades, inherentes a la propia planta o materia prima como al tipo de compuesto a extraer.
Por esta razn la planta se somete a una serie de operaciones previas que facilitan y mejoran el rendimiento de la
extraccin.
Existen una serie de mtodos que han sido desarrollados y aplicados para una deteccin de los diferentes
constituyentes qumicos en las plantas, basadas en la extraccin de stos con solventes apropiados y en la aplicacin
de pruebas de coloracin o precipitacin llamado Tamizaje Fitoqumico.

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (CCF o TLC)

La cromatografa en capa fina (en ingls thinlayer chromatography o TLC) es una tcnica analtica rpida y sencilla
que permite:

Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por ejemplo, la efectividad de una
etapa de purificacin.
Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas. Si, por el contrario, corren
distinto entonces no son la misma sustancia.
Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen los reactivos y
cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cundo la reaccin ha acabado.
La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lmina de plstico o aluminio que
previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lmina se
coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclado (eluyente o fase mvil). A medida
que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a travs del adsorbente, se produce un reparto diferencial
de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.

MATERIALES:

Extracto etanlico de la especie vegetal a investigar.

Reactivos para el anlisis cualitativo (tamizaje fitoqumico)
Reactivos para el anlisis cualitativo (cromatografa en capa fina)

Procedimiento:
Prueba de solubilidad
Filtrar el extracto etanlico del mtodo de maceracin de 5 a 7 das

colocar 1 mL del extracto fluido o filtrado en cada tubo de vidrio, luego llevarlo a Bao Mara hasta sequedad.

Resultado:

METABOLITO

COMPUESTOS
FENLICOS

REACCIN

FeCl3

CAMBIOS
OBSERVADOS

Cambio de color a
verde
X gotas de MP + III
gotas de FeCl3 10 %

RESULTADOS

TANINOS

FLAVONOIDES

AMINOCIDOS
LIBRES Y
GRUPOS AMINO

Gelatina

Shinoda

Ninhidrina

Molish

Antrona
CARBOHIDRAT
OS

Fehling

La muestra con unas

gotas de reacctivo
gelatina se torno de
uma color precipitado
denso blanco.

La muestra mas 12virutas de Mg

metlico + III gotas de
HCl cc se encontro la
presencia de
Chalconas, auronas,
isoflavanonas: no hay
coloracin.

La muestra ms III
gotas de ninhidrina +
calentar en B.M 10
min. Se obtuvo un
color violeta

La muetsra problema
+ III gotas de Molish
agitar + III gotas de
H2SO4 CC no hubo reaccin
La muestra problema
+ III gotas de Antrona
no huno reaccin
Si hubo cambio de
uma color
transparente se torno
color verde
(A: CuSO4; B:
tartrato mixto de
potasio y sodio
(KNaC4H4O64H2O))

NAFTAQUINON
AS,
ANTRAQUINON
AS Y
ANTRANONAS

La muestra problema
+ III gotas de
Borntrager si hubo
reaccin de un color
rojo
Borntrager

SAPONINAS

Generacin de espuma

La muestra 1 mL + 5 mL de
agua destilada + agitar
fuertemente por 1 min. Al
agitar se producio espuma

Cuestonario:
Estudio fitoqumico
En la tabla se pueden apreciar los metabolitos secundarios presentes en la decoccin de hojas frescas y en el extracto
fluido de hojas secas; se encontraron diferencia en la composicin entre ambos.

Metabolitos secundarios

Decoccin

Extracto fluido

Flavonoides

Compuestos fenlicos

Triterpenos y esteroides

Alcaloides

Quinonas

Cumarinas y compuestos lactnicos

Aminocidos

Antocianidinas

Azcares reductores

+ significa una respuesta positiva para ese metabolito, - significa una respuesta negativa para ese metabolito.
Ambos extractos mostraron tener compuestos fenlicos, cumarinas y compuestos lactnicos, aminocidos y
azcares reductores.
El extracto fluido present flavonoides, quinonas y antocianidinas en su composicin.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Bruneton J. Plantas Medicinales. Fitoqumica y Farmacognosia. Editorial Acribia. Zaragoza. 2001.

2. Kuklinski C. Farmacognosia. Estudio de las Drogas y Sustancias Medicamentosas. Ediciones Omega.
Barcelona. 2000.
3. Lock de Ugaz O. Investigacin Fitoqumica: Mtodos en el Estudio de los Productos Naturales. Fondo
Editorial de la Universidad Catlica del Per. Lima. 1994.
4. Valdizn H, Maldonado A. La Medicina Popular Peruana (Contribucin al Folklore Mdico del Per). Tomo
II. Imprenta Torres Aguirre. Lima. 1922.
5. Villar del Fresno M. Farmacognosia General. Editorial Sntesis. Madrid. 1999.