Biologia Celular I - Vol.3 PDF

4e5
Volume
3 edio
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Biologia Celular I
Biologia Celular I
Volume 3 - Mdulos 4 e 5
3 edio
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Mrcia Attias
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Mrcia Attias
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A885b
Attias, Mrcia.
Biologia celular I. v.3 / Marcia Attias.
3.ed. Rio de Janeiro : Fundao CECIERJ, 2006.
169p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 85-7648-029-8
2008/1
1. Citoesqueleto. 2. Microfilamentos. 3. Mitocndria.

4. Cloroplastos. I. Silva, Narcisa Cunha e. II. Ttulo.
CDD: 515
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Biologia Celular I
SUMRIO
Volume 3 - Mdulos 4 e 5
Mdulo 4
Aula 21 Organizao Geral do Citoesqueleto
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva
Aula 22 Os Filamentos Intermedirios
15
Aula 23 Microtbulos
27
Aula 24 Microfilamentos
45
Aula 25 Trfego Intracelular de Vesculas
69
Mdulo 5
Aula 26 Mitocndria
89
Aula 27 Mitocndria II
109
Aula 28 Cloroplastos I: Caractersticas principais. Membranas

e compartimentos
125
Aula 29 Cloroplastos II: O complexo antena. Fases dependente

e independente de luz
135
Aula 30 Peroxissomos
151
Gabarito
161
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

Reconhecer a existncia de um sistema de suporte e
motilidade para as clulas;
Listar e definir os principais tipos de movimentos
celulares;
Caracterizar os tipos de filamento que compem o
citoesqueleto.
21
10
AULA
Organizao Geral do
Citoesqueleto
Biologia Celular I | Organizao Geral do Citoesqueleto

INTRODUO
J conhecemos vrios dos aspectos gerais da organizao e do funcionamento

das clulas. Nas aulas anteriores tambm usamos diversos tipos celulares para
exemplificar os fenmenos que estavam sendo estudados. Assim, acreditamos
que voc seja capaz de identificar os tipos celulares reproduzidos a seguir (Figuras
21.1 a 21.3) e fazer algum comentrio sobre as funes deles. Vamos l!
Oba, vdeo!
O plo dispe de um timo material em vdeo sobre o citoesqueleto. Voc
pode utiliz-lo tanto durante quanto aps a leitura do material impresso. O
vdeo Cellebration ilustra vrios tipos de movimentos celulares. No CD-ROM do
Molecular Cell Biology e do Molecular Biology of the Cell h animaes e vdeos
sobre a dinmica de formao de microfilamentos e microtbulos e movimentos
celulares. Dvidas? Consulte o seu tutor.
Figura 21.1
Figura 21.2
Figura 21.3
Acreditamos que no houve qualquer dificuldade em identificar

corretamente as clulas. Tambm podemos apostar que o critrio usado
na identificao foi a forma dessas clulas. A propsito, as clulas so:
21.1, 21.2, 21.3.
O que ser que mantm a forma desses tipos celulares? Se voc
respondeu a membrana, pare um pouquinho e pense: ser que uma
bicamada lipdica fluida seria capaz de sustentar a forma de uma clula?
E as organelas internas, no tenderiam a se depositar no fundo da
clula? Observe a Figura 21.4.
8 CEDERJ
Tamanho documento?
Se pensarmos em termos evolutivos, forma e tamanho s passaram a
constituir problemas para os eucariontes. Os procariontes, isto , as
bactrias, so clulas pequenas e no compartimentalizadas. A forma da
clula mantida pela parede celular bacteriana (Figura 21.4a). Tambm
devido a seu tamanho, a distncia entre dois pontos da clula procarionte
nunca muito grande, de modo que as molculas requeridas para uma
determinada funo sempre estaro acessveis.
Bem, podemos ento concluir que o modelo de clula eucarionte

atual requer um sistema que confira sustentao e forma. Esse sistema
formado por filamentos proticos e se chama citoesqueleto.
O citoesqueleto no apenas confere a forma caracterstica s clulas, mas
tambm responsvel por todos os seus movimentos. Veja a seguir.
PARADINHA ESPERTA
Do que voc pode se lembrar quando falamos de movimentos celulares? Execute
alguns movimentos (espreguice-se, bata palmas, v tomar um copo dgua, d
uma piscada, etc.), e procure fazer uma lista com movimentos que as clulas
executam. S v ao final da aula para ver o resultado depois de tentar.
Forma, sustentao, movimento

Alm de manter a forma das clulas, o citoesqueleto responsvel
pela capacidade das clulas se deslocarem no meio em que vivem, seja
atravs da emisso de projees, como as amebas e as clulas do tecido
conjuntivo, seja por clios e flagelos, como vrios protozorios ou os
espermatozides. Mesmo as clulas que permanecem fixas, como os
neurnios, esto constantemente emitindo finas projees de membrana
em sua superfcie para fazer ou desfazer contatos com as clulas vizinhas.
O citoesqueleto determina a distribuio das estruturas intracelulares e
impede que as clulas desabem sob seu prprio peso (Figura 21.4c). As
clulas musculares so especializadas em contrair-se num determinado
sentido e mesmo nas clulas que nos parecem imveis h um intenso
trfego citoplasmtico de organelas e vesculas.
CEDERJ 9
21 MDULO 4
AULA
Figura 21.4: Uma clula pequena e com uma parede

semi-rgida (a) sustenta-se sem alterar substancialmente sua forma. Esse o modelo de sustentao de
bactrias e outros procariotos. A clula em (b) tende
a se acomodar ao substrato e tomar a forma de (c).
Porm, se houver um sistema interno de sustentao,
a forma mantida, mesmo com um tamanho relativamente grande (d).
Os componentes do citoesqueleto
Trs tipos de filamento compem o citoesqueleto das clulas
eucariontes:
microfilamentos;
microtbulos;
filamentos intermedirios.
A Figura 21.5 resume as principais caractersticas de cada um
deles.
Os microfilamentos so formados pela protena actina, e os
microtbulos, pela protena tubulina. Ambas se mantiveram bastante
conservadas ao longo da evoluo dos eucariontes. J os filamentos
intermedirios so protenas fibrosas de natureza diversa, de acordo
com o tipo celular.
Microfilamentos so os mais finos (5-9nm
de dimetro). So flexveis e formam feixes
paralelos ou redes na parte mais perifrica
da clula, embora se distribuam por todo o
citoplasma.
25nm
25m
Microtbulos so muito mais rgidos que

os microfilamentos. Partem sempre de
uma regio definida do citoplasma: o
centrossomo ou centro organizador de
microtbulos (COMt). As subunidades de
tubulina formam cilindros ocos de 25nm de
dimetro externo.
25nm
25m
Filamentos intermedirios so formados

por protenas fibrosas e medem cerca de
10nm de espessura. So os mais estveis e
conferem clula resistncia mecnica. So
formados por vrias protenas diferentes,
de acordo com o tipo celular.
25nm
25m
Figura 21.5: Cada tipo de filamento mostrado tal como visto por contrastao negativa ao microscpio
eletrnico de transmisso, num esquema que mostra a disposio das protenas que os formam e sua
distribuio em uma clula epitelial do intestino.
10 CEDERJ
21 MDULO 4
Por que trs tipos de filamento?
AULA
Microfilamentos, microtbulos e filamentos intermedirios possuem

cada um caractersticas prprias de resistncia a tenses, flexibilidade e
estabilidade. Todos os filamentos do citoesqueleto so formados atravs da
polimerizao (vide glossrio) de protenas. Todos podem polimerizar-se
e despolimerizar-se rapidamente; entretanto, os filamentos intermedirios
podem suportar nveis de tenso e deformao que causariam a ruptura
deformao
de microfilamentos e microtbulos (Figura 21.6).
filamentos
intermedirios
microtbulos
Figura 21.6: O grfico analisa a capacidade de

suportar deformao dos filamentos do citoesqueleto
em funo de uma fora aplicada ao filamento. Os
filamentos que melhor combinam fora e flexibilidade
so os filamentos intermedirios. Os microtbulos se
deformam sob pequenas foras, mas logo se partem
e os microfilamentos suportam melhor a fora sobre
eles, mas pouco se deformam.
microfilamentos
fora de deformao
Os microtbulos determinam a forma geral da clula e a disposio

de suas organelas. A posio relativa do ncleo, do complexo de Golgi,
das mitocndrias e ainda outras estruturas citoplasmticas depende
da disposio dos microtbulos (Figura 21.7). Todos os microtbulos
partem de uma regio definida, o centro organizador de microtbulos
(COMt), ou centrossomo.
Figura 21.7: O formato geral da clula resulta da

distribuio dos microtbulos (linhas pontilhadas).
Estes partem de uma regio especfica junto ao
ncleo (N), o centrossomo (c). Sua disposio
determina a posio do complexo de Golgi (G) e do
retculo endoplasmtico (linhas espessas).
CEDERJ 11

A disposio dos filamentos intermedirios tambm acompanha
a dos microtbulos. Os microfilamentos se distribuem por todo o
citoplasma, mas principalmente nas regies perifricas, o chamado crtex
celular. Projees finas da membrana, estveis como as microvilosidades
das clulas do epitlio intestinal (Figura 21.5) ou dinmicas como os
filopdios de uma ameba (Figura 21.8), dependem da formao de feixes
Foto: Evander Batista
de actina no seu interior.
Figura 21.8: O parasita

i n te sti n a l E n ta mo e b a
h i sto l y ti ca adere s
superfcies e se desloca
emitindo filopdios que
so p r e e n c h i d o s por
filamentos de actina.
A combinao destes trs tipos de filamento confere a cada tipo

de clula o balano entre estabilidade e dinmica, alm de resistncia
mecnica, todos fatores necessrios sua sobrevivncia e atividade.
RESUMO
O citoesqueleto um sistema de filamentos responsvel pela sustentao
da clula, conferindo-lhe a forma e determinando a disposio interna das
organelas. Os movimentos celulares so feitos atravs da reorganizao dos
filamentos do citoesqueleto. Microfilamentos, microtbulos e filamentos
intermedirios so os trs tipos de filamento que compem o citoesqueleto.
Todos so polmeros de protenas. Enquanto microtbulos e microfilamentos
so constitudos, respectivamente, pelas protenas tubulina e actina, vrias
protenas diferentes podem constituir os filamentos intermedirios. Enquanto
microtbulos e microfilamentos esto mais associados a movimentos celulares, os
filamentos intermedirios conferem maior resistncia e sustentao s clulas.
12 CEDERJ
21 MDULO 4
AULA
EXERCCIOS DE AUTO-AVALIAO
1. Por que as clulas eucariontes no podem prescindir de um citoesqueleto?
2. Por que os procariontes no precisam de um citoesqueleto? Que estrutura
responsvel pela manuteno da forma das bactrias?
3. Quais as funes do citoesqueleto?
4. Quais os componentes do citoesqueleto?
5. Caracterize cada um dos tipos de filamento do citoesqueleto quanto a:
a. Dimetro
b. Protena caracterstica
c. Estabilidade
d. Resistncia
e. Localizao na clula
CEDERJ 13
objetivos

Compreender a organizao estrutural dos filamentos
intermedirios;
Compreender a diversidade e as funes das
protenas que formam os filamentos intermedirios.
10
22
AULA
Os Filamentos Intermedirios
Biologia Celular I | Os Filamentos Intermedirios

INTRODUO
Como j vimos na aula 21, o sucesso do modelo eucarionte de clula se deve,

em grande parte, existncia do citoesqueleto, sistema dinmico de filamentos
proticos que confere s clulas forma, motilidade, resistncia e suporte das
estruturas intracelulares. Trs classes de filamentos formam o citoesqueleto:
os microfilamentos, os microtbulos e os filamentos intermedirios, assunto
desta aula.
Os filamentos intermedirios conferem s clulas resistncia mecnica ao
esticamento. Essa propriedade importante para os tecidos de modo geral
e particularmente para aqueles que normalmente so submetidos a tenso e
compresso, como as clulas musculares, cardacas e a pele (Figura 22.1).
Figura 22.1: A fora

e a resistncia de um
organismo complexo
dependem da fora e
resistncia das clulas
que o compem.
Dados histricos
Estes filamentos foram denominados intermedirios por haverem sido descritos pela primeira vez em clulas musculares lisas, onde
seu dimetro (~10nm) se situava entre o dos microfilamentos de actina
e o dos feixes espessos de miosina. Se, por um lado, a denominao foi
incorreta, na medida em que os feixes de miosina no so filamentos,
por uma feliz coincidncia, quando comparados com os microfilamentos
e os microtbulos (os dois outros tipos de filamento do citoesqueleto),
eles tambm apresentam uma espessura intermediria, o que torna a
designao correta.
16 CEDERJ
22 MDULO 4
Caracterizao
AULA
Quando comparados aos demais elementos do citoesqueleto

(microtbulos e microfilamentos), so os mais resistentes e durveis: em
clulas submetidas a tratamento com detergentes no inicos e solues
concentradas de sais, o citoesqueleto praticamente todo destrudo,
com exceo dos filamentos intermedirios. Nas clulas de nossa pele,
que naturalmente se descamam, tambm s existem praticamente os
filamentos intermedirios.
Os filamentos intermedirios so encontrados no citoplasma
de quase todas as clulas eucariontes, embora haja excees, como as
hemcias. Tipicamente formam uma rede no citoplasma, envolvendo o
ncleo e se distribuindo para a periferia. Freqentemente se ancoram
membrana plasmtica em reas de juno clula-clula (desmossomas)
ou clula-lmina basal (hemidesmossomas). H tambm um tipo de
filamento intermedirio que se distribui na face interna do envoltrio
nuclear, formando a lmina nuclear.
Estrutura
J comentamos na aula 21 que, diferentemente dos microfilamentos
e microtbulos, os filamentos intermedirios so formados por protenas
fibrilares. Estas formam dmeros em que as duas extremidades NH2 das
molculas participantes se alinham na mesma direo. Esses dmeros do
origem a tetrmeros ponta-cabea, isto , as extremidades NH2 de um
dmero se alinham com as extremidades COOH do outro. Os tetrmeros
assim formados se encaixam com outros tetrmeros, formando longos
filamentos helicoidais que se justapem e se retorcem, formando
cordes muito resistentes (Figura 22.2). Os filamentos assim formados,
ao contrrio de microtbulos e microfilamentos, no so polarizados,
isto , suas extremidades so equivalentes. Essa organizao torna os
filamentos intermedirios comparveis aos cordes dos sapatos: ao
mesmo tempo que podem ser dobrados ou enrolados com facilidade, so
muito resistentes e difceis de arrebentar quando puxados. A espessura
de um filamento intermedirio corresponde a oito tetrmeros, isto , 32
unidades da protena inicial.
CEDERJ 17

COOH
NH2
a
regio em -hlice
NH2
COOH
b
NH2
COOH
0,5m
filamento intermedirio
observado ao microscpio eletrnico
dmero tranado
NH2
COOH
NH2
COOH
NH2
COOH
c
COOH
NH2
tetrmero formado
pela justaposio dos dmetos
dois tetrmeros interligados
e
resultado da adio tetrmeros
para formao do filamento
10nm
Figura 22.2: Os filamentos intermedirios so formados pela adio de tetrmeros grupos de 4 molculas
fibrilares que se organizam de modo que as extremidades do filamento so idnticas.
Dinmica
Comparados a microtbulos e microfilamentos, sabe-se relativamente pouco sobre a dinmica de polimerizao/despolimerizao desses
filamentos. Entretanto, embora eles sejam responsveis pela estabilidade mecnica das clulas, so claramente estruturas dinmicas, que se
reorganizam constantemente, aumentando ou diminuindo seu comprimento e mudando sua localizao na clula. Acredita-se que a adio de
um grupo fosfato extremidade amino (NH2) da protena formadora de
um filamento promova a desassociao desta do filamento.
18 CEDERJ
22 MDULO 4
Diversidade
AULA
Diferentemente dos microtbulos e dos microfilamentos, formados

pelas protenas tubulina e actina respectivamente, cada tipo celular possui
filamentos intermedirios especficos. Dentre os tipos de protenas que
formam os filamentos intermedirios, as queratinas formam o maior
grupo. Mais de 20 tipos de queratina j foram identificadas em clulas
epiteliais humanas e outros 10 tipos em cabelos e unhas. Cada tipo de
epitlio possui determinados tipos de queratina.
Filamentos intermedirios so, praticamente, o que resta de ns aps a morte

Alm de dentes e ossos, as sepulturas antigas contm, em geral, restos de
pele, cabelos e unhas dos falecidos. Nessas estruturas, a queratina estabilizada por pontes de dissulfeto entre os filamentos, o que confere uma
grande estabilidade a essa protena.
O ditado do p vieste, ao p retornars bem mais do que filosofia.
Grande parte da poeira que se acumula nas nossas casas formada por
clulas mortas que se descamam naturalmente de nossa pele. Dessas clulas
j mortas, resta apenas uma rede de queratina que serve de alimento para
caros microscpicos que coabitam conosco e so causadores de vrios tipos
de alergia.
As queratinas so especialmente abundantes nas clulas epiteliais

de locais sujeitos a estresse mecnico (no focinho dos bovinos e sunos,
no nosso calcanhar etc.). Nos desmossomas e hemidesmossomas dos
epitlios, os filamentos intracelulares de ancoragem so de queratina,
ou seja, o cabeamento para a transduo da tenso aplicada ao tecido feito por estes filamentos (desmossomas e hemidesmossomas so
estruturas que se formam entre duas clulas (os primeiros) ou entre uma
clula e o tecido conjuntivo (os segundos), para aumentar a adeso entre
elas. Voc estudar mais sobre eles em Biologia Celular II).
Os filamentos intermedirios podem ajudar no tratamento do cncer

A clula cancerosa perde muitas das caractersticas da clula normal da
qual se originou; entretanto, os filamentos intermedirios caractersticos de
determinado tipo celular permanecem presentes mesmo quando este se torna
canceroso. Ao identificar os tipos de filamento intermedirio das clulas de
um tumor, o mdico pode saber em que tipo celular ele se originou e com isso
escolher o melhor tratamento, evitando usar drogas ou outras terapias que
no seriam eficazes para aquele tipo de cncer.
CEDERJ 19

Indivduos que possuem um gene para queratina mutado produzem
filamentos incapazes de suportar as tenses que, ao se romperem, levam
formao de bolhas. Essa anomalia, bastante grave, conhecida como
epidermolisis bullosa (Figura 22.3).
presso
lmina
basal
queratina defeituosa
hemidesmossomas
Figura 22.3: Na anomalia gentica conhecida como epidermolisis bullosa, os filamentos de

queratina so muito frgeis, rompendo-se. O acmulo de fluido extracelular sob a pele forma
bolhas, j que a presso exercida pelo fluido no suportada pela adeso da pele ao tecido
subcutneo.
Mutaes em outros tipos de queratina podem provocar doenas

relacionadas ao epitlio da boca, do esfago e da crnea, todas provocando o aparecimento de bolhas.
20 CEDERJ
22 MDULO 4
Neurofilamentos
AULA
Enquanto os filamentos de queratina so caractersticos de clulas

epiteliais, os neurofilamentos so tipicamente encontrados nos neurnios
(Figura 22.4).
Figura 22.4: O axnio
um prolongamento
do corpo celular do
neurnio atravs do
qual so transportadas
as vesculas contendo os
neurotransmissores.
Alguns podem chegar
a medir 1m ou mais,
dependendo do tamanho
do animal.
Os neurofilamentos se distribuem ao longo dos axnios,

contribuindo tanto para a sustentao destes quanto para o transporte
axonal. Alguns neurofilamentos atingem grande comprimento e sua
estrutura difere da de outros filamentos intermedirios pela presena de
espaadores que mantm os neurofilamentos paralelamente dispostos
ao longo do axnio (Figura 22.5).
microtbulos
neurofilamentos
Figura 22.5: Os neurofilamentos (a) possuem

pontes que os mantm
eqidistantes ao longo de
sua extenso. Outros filamentos interme-dirios (b)
no possuem esses espaadores. (c) Num corte transversal de um axnio v-se
um grande nmero de neurofilamentos regularmente
espaados e uns poucos
microtbulos dispersos.
J foram identificadas trs protenas formadoras de neurofilamentos
uma de baixo peso molecular (NF-L), outra de peso
molecular mdio (NF-M) e a terceira de alto peso molecular (NFH). Durante o crescimento da fibra nervosa, novas subunidades so
adicionadas a ambas as extremidades dos neurofilamentos j existentes,
CLULA EFETORA
aumentando seu comprimento. Quando o axnio termina seu crescimento

e se conecta a uma cLULA
EFETORA,
seu dimetro ainda pode aumentar
cerca de cinco vezes, aumentando a velocidade com que os estmulos

eltricos sero transmitidos. Por outro lado, a proliferao excessiva de
neurofilamentos pode prejudicar o fluxo dos neurotransmissores, levando
aquela que
efetivamente responde a
um estmulo. No caso de
uma glndula, a resposta
a secreo de uma
substncia; no caso do
msculo, a contrao.
a doenas neurolgicas (veja Box).

CEDERJ 21
Em exagero, tudo faz mal

Na doena degenerativa conhecida como esclerose amiotrfica lateral ou
doena de Lou Gehrig (um esportista norte-americano vitimado por ela),
ocorre acmulo de neurofilamentos no interior do axnio, o que dificulta e
termina por impedir o transporte de neurotransmissores para a extremidade
do axnio onde eles so utilizados.
Protena acdica glial, periferina, vimentina e desmina

Em outras clulas do sistema nervoso que no os neurnios,
os filamentos intermedirios so formados pela protena acdica glial
(GFAP). Essas clulas, coletivamente chamadas glia, compreendem os
astrcitos, as clulas de Schwan e outros tipos celulares responsveis pela
imunidade, nutrio e proteo mecnica dos neurnios.
Nos neurnios do sistema nervoso perifrico, foi identificado mais
um tipo de filamento intermedirio, formado pela protena periferina,
sobre o qual pouco se sabe.
A protena acdica glial e a periferina fazem parte de um grupo de
protenas formadoras de filamentos intermedirios que tambm inclui a
vimentina e a desmina. A vimentina caracterstica de CLULAS DE ORIGEM
Os tecidos que possuem
CLULAS DE ORIGEM
MESENQUIMAL so as
cartilagens, os tecidos
conjuntivo e sseo, o
sangue e o endotlio,
epitlio que reveste os
vasos sanguneos.
MESENQUIMAL . Esse tipo de filamento intermedirio encontrado na maior
diversidade de tipos celulares. Sua distribuio geralmente acompanha a

dos microtbulos. J foi inclusive identificada uma protena, a plectina,
que forma pontes entre os filamentos de vimentina e os microtbulos.
Os filamentos de vimentina ajudam a sustentar a membrana plasmtica e
a definir a posio do ncleo e outras organelas. Alguns tipos de epitlio
podem ter simultaneamente vimentina e queratina.
J a desmina encontrada em clulas musculares (esquelticas,
lisas e cardacas). No msculo esqueltico seu papel contribuir para
estabilizar as unidades contrteis, os sarcmeros.
Micitos unidos jamais sero vencidos!

A importncia dos filamentos intermedirios para a integridade dos tecidos pode
ser bem compreendida se analisarmos a estrutura e o funcionamento do msculo
cardaco. Formado por clulas uninucleadas que se contraem em seqncia, esse
tecido deve exercer uma presso eficiente sobre o sangue nas cmaras cardacas
para bombe-lo. natural portanto, que existam entre as clulas cardacas muitas
junes formadas por filamentos de desmina (Figura 22.6).
22 CEDERJ
clula 2
clula 1
junes
As laminas nucleares
No, no est faltando um acento circunflexo em lamina nuclear.
Diferentemente dos filamentos intermedirios exemplificados at aqui,
todos localizados no citoplasma das clulas e formando arranjos
tridimensionais, as laminas nucleares (pronuncia-se lamna) formam
uma malha na superfcie interna do envoltrio nuclear
a lmina
nuclear (Figura 22.7). Essa rede de filamentos intermedirios refora o

envoltrio nuclear e se despolimeriza a cada diviso celular, refazendo-se
depois, assim como o prprio envoltrio.
A organizao e a desorganizao da lmina nuclear so controladas por protenas quinases que fosforilam as laminas, enfraquecendo
as ligaes entre elas e causando o colapso da lmina nuclear. A posterior
defosforilao dessas protenas ao final da mitose leva recomposio
da lmina. Coincidncia ou no, nas clulas que sofrem mitose fechada
(sem o desaparecimento do envoltrio nuclear), no foi identificada a
presena desses filamentos. Voc vai saber mais sobre esse assunto em
Biologia Celular II.
Figura 22.7: Os filamentos formados por laminas se dispem

como uma rede entre a face
interna do envoltrio nuclear e a
cromatina (a). Formam uma rede
bidimensional (b).
envoltrio nuclear
1m
lmina nuclear
b
CEDERJ 23
22 MDULO 4
AULA
Figura 22.6: Junes que

reforam a adeso entre
as clulas musculares
cardacas. Filamentos
intermedirios formados
por desmina participam
dessas estruturas.

Grupos e principais caractersticas dos filamentos intermedirios.
Tabela 22.1
Tipo de filamento
Queratina
Neurofilamento
Protenas componentes
Queratinas tipo I (cidas)
Queratinas tipo II (bsicas)
NF-L (baixo peso molecular)
Localizao celular
Clulas epiteliais eeus
derivados (cabelos, unhas,
plos, cascos)
neurnios
NF-M (mdio peso molecular)

NF-H (alto peso molecular)
Vimentina
Vimentina
Tecido conjuntivo,
cartilaginoso,
clulas do sangue
Desmina
Msculo
Protena acdica glial (GFAP)
Clulas da glia
(astrcitos, clulas de
Schwan, microglia)
Periferina
Alguns neurnios
perifricos
Lamina
Laminas A, B e C
Revestimento interno
do envoltrio nuclear
(lmina)
RESUMO
Os filamentos intermedirios so formados por protenas fibrilares que se organizam
em tetrmeros onde as duas extremidades so idnticas.
Os filamentos intermedirios no so polarizados, isto , suas duas extremidades
so idnticas. Novos tetrmeros podem ser acrescentados ou subtrados de ambas
as extremidades.
Embora se comportem dinamicamente, os filamentos intermedirios so mais estveis
que microfilamentos e microtbulos.
Os filamentos intermedirios so mais resistentes deformao que microfilamentos
e microtbulos.
24 CEDERJ
membrana plasmtica, do envoltrio nuclear e ao posicionamento das organelas no

citoplasma.
Os filamentos intermedirios conferem aos tecidos muscular e epitelial resistncia s
tenses.
Os filamentos intermedirios podem ser agrupados em famlias de acordo com a
tabela 22.1.
Os filamentos intermedirios podem formar conexes com os microtbulos,
acompanhando sua distribuio celular.
1. Diferencie uma protena fibrilar de uma globular, fazendo um esquema da

cada tipo.
2. Que tipo de protena forma os filamentos intermedirios: fibrilar ou
globular?
3. O que um tetrmero? Por que os tetrmeros que formam os filamentos
intermedirios no so polarizados? Como as protenas poderiam se organizar
para formar tetrmeros polarizados?
4. Em que tipos celulares so encontrados filamentos de queratina? Que outras
estruturas so formadas por queratina?
5. Quais os tipos de filamentos intermedirios encontrados nas clulas do sistema
nervoso (neurnios, clulas gliais e neurnios perifricos)?
6. Como os filamentos intermedirios podem ser teis no diagnstico do
cncer?
7. De que tipos celulares so caractersticos os filamentos de vimentina e desmina,
respectivamente?
CEDERJ 25
22 MDULO 4
AULA
As principais funes dos filamentos intermedirios esto ligadas sustentao da
8. Qual a doena associada ao aumento excessivo de neurofilamentos?

9. Por que as laminas nucleares devem se despolimerizar durante a diviso mittica?
O que ocorre durante a diviso nas clulas que no possuem laminas?
10. Com os conhecimentos adquiridos nesta aula, comente a frase: do p vieste
e ao p retornars.
objetivos

A organizao estrutural dos microtbulos;
As funes desempenhadas pelos microtbulos
numa clula;
O conceito de instabilidade dinmica;
O conceito de centro organizador de microtbulos;
A diversidade e as funes das principais drogas que
interagem com microtbulos;
A diversidade e as funes das protenas que se
associam aos microtbulos.
23
AULA
Microtbulos
Biologia Celular I | Microtbulos

INTRODUO
Vimos na aula 22 que os microtbulos so filamentos longos e ocos, responsveis

pela formao de estruturas transitrias, como o fuso mitico, ou permanentes,
como os flagelos. A forma geral e a disposio do ncleo e das organelas
celulares tambm so determinadas pela distribuio desses filamentos.
ORGANIZAO GERAL DOS MICROTBULOS

HOMOPOLMERO
polmero em que todas
as molculas so iguais.
Como os microfilamentos, os microtbulos tambm se formam pela

polimerizao de uma protena globular. Porm, enquanto os microfilamentos
so hOMOPOLMERO de actina, os microtbulos so hETEROPOLMEROS de duas
HETEROPOLMERO
formas da protena tubulina, a e a -tubulinas (Figura 23.1).
polmero onde duas

(ou mais) molculas
diferentes se alteram.
DMERO
duas molculas que juntas
formam uma unidade
funcional; podem ser
iguais (homodmero) ou
diferentes (heterodmero).
Figura 23.1: Esquema de um microtbulo em corte transversal (a) e em vista lateral (b). Cada esfera em A corresponde a uma molcula (dmero ) de tubulina.
Os protofilamentos so formados por cadeias lineares de tubulina.
Treze protofilamentos formam a circunferncia dos microtbulos.

Cada protofilamento, por sua vez, formado por DMEROS de e tubulinas alternadamente dispostos (Figura 23.2). A molcula de
-tubulina possui um stio ao qual se liga uma molcula de GTP
(Figura 23.2). Os dmeros de e as -tubulinas formam protofilamentos
que fecham o tubo em grupos de 13.
dmero de tubulina
Protofilamento em formao
GTP
Figura 23.2: Os dmeros de tubulina se ligam sempre na mesma orientao: a

subunidade de um dmero se liga subunidade do dmero seguinte. essencial
que uma molcula de GTP se ligue subunidade para que os dmeros se associem,
formando o protofilamento.
Esse tal de GTP
A sigla GTP corresponde a guanosina trifosfato, uma molcula que, assim como o
ATP (adenosina trifosfato), pode ser hidrolisada, gerando o guanosina difosfato,
ou GDP, e liberando energia para algumas atividades celulares, como a dinmica
de polimerizao dos microtbulos. No entanto, a quantidade de energia liberada
bem menor que a da hidrlise do ATP. Por isso a hidrlise de GTP usada muito
mais freqentemente como um sinal do que como fonte de energia. Geralmente,
a molcula associada a GTP est ativa e a associada a GDP est inativa (tambm
assim com a protena G, voc lembra da aula 13?). Ah! Sim, ATP e GTP contm
nucleosdeos que tambm esto presentes na estrutura do DNA e RNA.
28 CEDERJ
23 MDULO 4
AULA
Figura 23.3: Microscopia

eletrnica mostrando um
feixe de microtbulos onde
est havendo crescimento
preferencial na extremidade
plus (Foto: Gary Borisi, fonte:
Molecular biology of the cell,
Alberts et al. 3rd ed. Garland
Publishing Co., 1994.)
1m
Observe o protofilamento na Figura 23.3. Voc reparou que uma

extremidade diferente da outra? Numa delas, a -tubulina fica exposta,
e na outra, a -tubulina. Graas maneira de o protofilamento se
formar isso vai se manter at mesmo no microtbulo. Assim, a disposio
dos dmeros de e -tubulinas confere aos microtbulos polaridade,
isto , as duas extremidades de um microtbulo so diferentes. Uma
conseqncia disso que a incorporao de novos dmeros de tubulina
ocorre preferencialmente em uma das extremidades do microtbulo,
enquanto a outra extremidade tende a liberar dmeros de tubulina com
maior rapidez e facilidade (Figura 23.3).
Essas propriedades conferem aos microtbulos um sentido
preferencial de crescimento e fazem deles estruturas muito dinmicas,
capazes de crescer ou encolher rapidamente. A extremidade onde
preferencialmente incoporam-se novos dmeros chamada positiva ou
plus, enquanto a extremidade oposta negativa ou minus (Figura 23.3).
DINMICA DE POLIMERIZAO DOS MICROTBULOS

Na maioria das clulas, os microtbulos so estruturas extremamente lbeis e dinmicas, desaparecendo e reorganizando-se rapidamente. Essa atividade pode ser exemplificada pelo fuso mittico, estrutura
formada por microtbulos e presente apenas durante a diviso celular,
ao final da qual desaparece.
Novos microtbulos podem se formar espontaneamente a 37C num
tubo de ensaio onde sejam adicionadas molculas de e -tubulina acima de
certa concentrao, ons Mg++ e GTP (assim foram feitos os microtbuos
mostrados na Figura 23.3). Nessas condies, novos microtbulos comeam
a se formar aps um intervalo no qual nada parece est acontecendo.
CEDERJ 29

Essa fase corresponde ao perodo de nucleao, quando so formados
os primeiros protofilamentos. A partir da formao desses ncleos, o
alongamento dos novos microtbulos passa a ser um processo rpido
(Figura 23.4).
Podemos ento considerar condies de polimerizao de microtbulos: a presena da concentrao mnima necessria de dmeros de
tubulina - (concentrao crtica), a temperatura adequada (37C), a
presena de GTP e Mg++. Correspondentemente, existem condies de
despolimerizao: a temperatura baixa (4C), a falta de GTP, a presena
de ons Ca++ (mais uma razo para a concentrao citoplasmtica de
clcio se manter baixa!) e a concentrao de tubulina no polimerizada
abaixo da crtica. Essas condies foram determinadas in vitro, mas
depois se comprovou que tambm controlam a dinmica de polimerizao in vivo. Conhecer essas condies tambm ajuda a entender por que
no fcil manter microtbulos polimerizados depois de romper uma
clula, em experimentos de fracionamento celular. Poderamos escrever
as condies de polimerizao e despolimerizao de microtbulos como
uma equao qumica, que obedea Lei de Ao das Massas: nas condies adequadas, a polimerizao prossegue at que a concentrao de
dmeros caia abaixo da crtica e a a reao passa a tender para a esquerda,
isto , para a despolimerizao. O contrrio tambm verdade!
37C + GTP + Mg++

Dmeros de
tubulina
Figura 23.4: A partir

de uma concentrao
mnima (concentrao
crtica), as subunidades
de tubulina agregam-se
em protofilamentos e
logo em microtbulos. A
partir da, o crescimento
dos microtbulos bastante rpido, at atingir
o ponto de equilbrio
dinmico entre a quantidade de tubulina polimerizada e livre no
citoplasma.
30 CEDERJ
Microtbulos
polimerizados
4C + GDP + Ca++
23 MDULO 4
In vivo, as clulas possuem um centro organizador de microtbulos
AULA
ou centrossoma, de onde partem todos os seus microtbulos. Em geral, os

microtbulos se orientam com a extremidade minus voltada para o centro
organizador e a extremidade plus voltada para periferia celular (Figura 23.6).
O estudo dos processos de alongamento e encurtamento de microtbulos feito com a utilizao de vrias substncias. Para saber um
pouco sobre elas, consulte o box.
Drogas, poderosas aliadas no estudo dos microtbulos
Sabe-se h muitos anos que diversas substncias so capazes de interferir

na formao do fuso mittico (formado por microtbulos), interrompendo
a mitose. Essas drogas vm sendo utilizadas tanto no estudo da participao
dos microtbulos nas atividades da clulas como no tratamento de algumas
doenas.
Uma dessas drogas a colchicina, extrada de um tipo de aafro, que j era
utilizada pelos egpicios no tratamento da gota.
A colchicina, assim como seus derivados sintticos, se liga tubulina livre do
citoplasma, impedindo que ela se agregue ao fuso mittico, o que impede a
clula de se dividir e termina por acarretar sua morte. A vincristina e a vinblastina,
tambm obtidas a partir de uma planta (a Vinca, Figura 23.5), possuem efeito
semelhante. Todas essas substncias so empregadas no tratamento do cncer,
visando a eliminar as clulas do tumor que se multiplicam numa velocidade muito
superior das clulas normais.
Figura 23.5: Alm de
servir para fabricar
medicamentos e de
dar uma fora no estudo dos microtbulos, a Vinca d uma
flor linda!
Outra substncia empregada na quimioterapia do cncer o taxol, extrada do

teixo (gnero Taxus), uma rvore americana. Diferente das substncias j descritas,
o taxol age como um estabilizador dos microtbulos, agregando a tubulina
citoplasmtica em microtbulos e impedindo que eles se despolimerizem. Essa
droga tambm termina por bloquear a diviso celular, ao impedir a dinmica de
polimerizao e despolimerizao dos microtbulos.
CEDERJ 31

Figura 23.6: Em geral, os
microtbulos orientam
suas extremidades minus
na direo do centro
organizador (setas) e as
extremidades plus para
a periferia celular. Conforme o tipo de clula
ou a fase do ciclo celular,
o centro organizador
recebe nomes como centrossoma (a), em clulas
interfsicas, e corpsculo
basal, nas clulas flageladas (b). J as clulas em
diviso (c) possuem dois
centros organizadores (os
plos do fuso mittico),
de onde partiro os
microtbulos do fuso.
Nas clulas nervosas
(d), os microtbulos do
axnio tambm partem
do centro organizador.
O CENTRO ORGANIZADOR DOS MICROTBULOS

Todos sabemos que o fuso mittico se organiza a partir dos
centrolos e que clios e flagelos partem de um corpsculo basal (Figura
23.6). No por acaso essas estruturas so formadas por microtbulos
(Figura 23.7). Entretanto, o que define o centro organizador de
microtbulos no a presena do centrolo, e sim uma forma especfica
de tubulina, a -tubulina, que se distribui no material pericentriolar (em
torno dos centrolos). A -tubulina forma um complexo em anel de tubulina que se acredita ser o molde a partir do qual os protofilamentos
e a estrutura tubular so formados. Alm de funcionarem como centro
de nucleao para os microtbulos, os anis de -tubulina formam uma
espcie de tampa, estabilizando a extremidade minus e impedindo a
perda de subunidades.
a
32 CEDERJ
Figura 23.7: (a) Centrolos ortogonalmente dispostos,

conforme observados em microscopia eletrnica de
transmisso. (b) Interpretao esquemtica da estrutura
do centrolo, composto por nove trios de microtbulos
interligados por pontes proticas. [foto: McGill M. et al,
J. Ultrastruct. Res., 57:43-53 (1976)].
23 MDULO 4
AULA
A POLIMERIZAO E A DESPOLIMERIZAO DE MICROTBULOS

SO CONTNUAS
A utilizao da videomicroscopia para a observao de clulas
nas quais a tubulina foi marcada com molculas fluorescentes (procure material em vdeo ou Cd-Rom disponvel no plo ou na Internet)
mostrou claramente que os microtbulos de uma clula tpica esto
constantemente se alongando e encurtando, num processo conhecido
como instabilidade dinmica. J foi demonstrado que a vida mdia de
uma molcula de tubulina de 20 horas, enquanto um microtbulo se
mantm por cerca de dez minutos, em outras palavras, uma molcula
de tubulina "participa" da construo de vrios microtbulos durante
sua vida celular.
Essa instabilidade dinmica resulta da hidrlise expontnea
da molcula de GTP ligada subunidade da tubulina em GDP.
Enquanto a associao ao GTP favorece a polimerizao e mantm
o protofilamento esticado, o GDP diminui a ligao entre os dmeros
de tubulina, encurvando o filamento e favorecendo o desligamento do
dmero do protofilameto (Figura 23.8).
O crescimento de um microtbulo favorecido quando h um
acrscimo contnuo de subunidades ligadas a GTP. Naturalmente, para
que isso ocorra, necessrio que haja um estoque citoplasmtico de
tubulinas ligadas a GTP, que continuamente substituiro as subunidades
ligadas GDP que forem se soltando da extremidade plus. Essas tubulinas
ligadas GTP formam um quepe de GTP na extremidade do filamento.
Se esse quepe de GTP se desfizer (pela hidrlise do GTP a GDP no
seguida de substituio por novas subunidades ligadas a GTP), ocorre
o rpido encolhimento do microtbulo, um fenmeno descrito como
despolimerizao catastrfica. Esse fenmeno pode ser comparado
imploso de um prdio: quando os alicerces so dinamitados, toda a
estrutura colapsa (Figura 23.8). J foram identificadas protenas que
contribuem para essa rpida despolimerizao. Muito adequadamente
essas protenas foram denominadas catastrofinas.
CEDERJ 33
Figura 23.8: (a) H uma

dinmica de incorporao de novos dmeros de
tubulina ligados a GTP em
substituio a dmeros
ligados a GDP que se
soltam do filamento com
facilidade.
(b) Microtbulos com
a extremidade rica em
dmeros ligados a GTP
tendem a crescer, enquanto as extremidades que
expem tubulina ligada
a GDP tendem a se soltar,
fazendo com que o
microtbulo diminua de
tamanho.
34 CEDERJ
23 MDULO 4
OS MICROTBULOS ORGANIZAM A FORMA DA CLULA
AULA
Como voc pode notar na Figura 23.6, a forma geral das clulas
depende da distribuio dos microtbulos a partir do centrossomo,
que, por sua vez, est sempre prximo ao ncleo, exceto durante a
diviso celular.
Isso j nos d uma"pista" sobre a importncia do centro
organizador de microtbulos. Numa clula como a representada na
Figura 23.6A, os microtbulos partem do centrossomo, irradiando-se
em todas as direes, mas preferencialmente no sentido para o qual
essa clula parece est se deslocando. J numa clula como o neurnio
representada na Figura 23.6D, muitos microtbulos se orientam
paralelamente na direo do axnio, conferindo a forma bsica
dessa clula. Alm disso, conforme j comentado nas aulas 17 e 21,
o complexo de Golgi se posiciona sempre em torno do centrossoma
e as cisternas do retculo endoplasmtico se distribuem com a mesma
orientao dos microtbulos. Mais adiante, veremos tambm que
vesculas citoplasmticas e organelas como as mitocndrias utilizam
os microtbulos como trilhos para se deslocar dentro da clula. Os
filamentos intermedirios, outro tipo de filamento do citoesqueleto,
tambm se distribuem paralelamente aos microtbulos.
Se, por um estmulo natural (ver box) ou por micromanipulao, o centrossoma de uma clula for deslocado de sua posio, todas
as organelas celulares se reposicionaro em relao a ela, inclusive o
ncleo. Por essas evidncias, considera-se que o centro organizador de
microtbulos corresponde ao centro da clula.
As clulas T citotxicas so um tipo de linfcito especializado em reconhecer e

destruir clulas invasoras do organismo ou clulas infectadas por vrus. Nesse
processo, a membrana da clula T faz contato com a membrana da invasora,
desencadeando uma reorganizao do seu citoesqueleto. O centrossoma e os
microtbulos da clula T se concentram na rea de contato com a clula-alvo. O
ncleo e o complexo de Golgi da clula T tambm se reposicionam, fazendo com
que as protenas que esto sendo produzidas para a distribuio da clula invasora
sejam direcionadas com maior eficincia para a rea de contato. Acompanhe a
seqncia no esquema a seguir (Figura 23.9).
CEDERJ 35

Figura 23.9: Em A, o
esquema das modificaes da distribuio dos
microtbulos na clula
T citotxica quando vai
atacara clula-alvo.
Em B, imunofluorescncia com anticorpos
antitubulina, mostrando
que o centrossoma da
clula T se desloca para
a regio de contato com
a clula-alvo. Note que,
nesta ltima, a distribuio dos microtbulos
normal. Foto: Geiger,
B. et al., J. Cell Biol. 95:
137-143 (1982) Rockfeller
University press.
COMO OS MICROTBULOS SE ORIENTAM NA CLULA

O centrossomo corresponde ao centro da clula (voc pensava que
Figura 23.10: A seqncia
esquematiza como uma
protena da membrana
da clula pode proteger os microtbulos a
ela associados, estimulando e funcionando
como polarizadora de
seu crescimento, determinando assim o sentido em
que uma clula se deformar. Na verdade, o processo mais complexo do
que a representao.
era o ncleo da clula, n?), mas como ser que os microtbulos crescem
na direo certa? O natural seria que os microtbulos se irradiassem em
todas as direes, o que resultaria numa clula esfrica, o que no o caso
para a maioria dos sistemas (ver box). A instabilidade dinmica explica
bem a ausncia dos microtbulos de uma regio; em contrapartida, j
foram identificadas outras protenas, especialmente associadas face
citoplasmtica da membrana plasmtica, capazes de "estimular" a
incorporao de novos dmeros de tubulina e, conseqentemente, o
crescimento do microtbulo (Figura 23.10).
a
36 CEDERJ
23 MDULO 4
AS MAPS (PROTENAS ASSOCIADAS AOS MICROTBULOS)
AULA
Alm de protenas que promovem o crescimento do filamento

a partir de sua extremidade, outras protenas interagem lateralmente
com os microtbuos, ajudando a manter a ligao entre os dmeros
de tubulina (Figura 23.11). Essas protenas pertencem a um grupo
de protenas cuja funo associar-se a microtbulos com o objetivo
de manter sua estrutura: as protenas associadas a microtbulos ou,
simplesmente, MAPs.
Figura 23.11: Tipos de MAP que formam ligaes ao longo dos

protofilamentos, ajudando a manter a estabilidade do microtbulo.
MAPs so protenas to estreitamente associadas aos microtbulos que fazem

parte do prprio polmero. Essa noo vem de experimentos de polimerizao
de microtbulos in vitro , a partir de um extrato citoplasmtico em que, alm dos
dmeros de tubulina, havia muitas outras protenas solveis. A polimerizao foi
induzida, pelas condies adequadas e pelos microtbulos produzidos separados
do resto do extrato e purificados. Depois, a despolimerizao foi induzida
acrescentando-se clcio e abaixando-se a temperatura; a (surpresa!) descobriu-se,
fazendo eletroforese, que alm de tubulina, os microtbulos, ao despolimerizar,
liberava outras protenas tambm: eram as MAPs. Duas das protenas capazes de
estabilizar os microtbulos so a MAP2 e a Tau. Caso voc esteja se perguntando,
"mas por que duas protenas para mesma coisa?", j lhe adiantamos a resposta:
a distncia determinada entre dois microtbulos pela MAP2 bem maior que a
determinada pela Tau. Assim, os feixes de microtbulos estabilizados pela Tau
so bem mais compactos do que os da MAP2.
PROTENAS ASSOCIADAS TUBULINA CITOPLASMTICA

Recentemente, foram identificadas mais duas protenas importantes no comportamento dinmico dos microtbulos: a statmina,
que liga dois dmeros citoplasmticos de tubulina, ajudando a manter
um estoque de tubulina no polimerizada, e a katanina, que picota
microtbulos j formados. A espada dos samurais se chama katan,
em japons, da o nome dessa protena.
CEDERJ 37

Antes que voc pense que a katanina e a catastrofina atuam da mesma
forma, esclarecemos que enquanto a catastrofina atua na extremidade positiva
do microtbulo, onde est o quepe de GTP, a katanina fragmenta o microtbulo
em vrios pontos.
Uma concluso interessante vermos como os microtbulos, sempre formados pelas mesmas protenas ( e -tubulinas) podem se tornar
mais estveis ou mais dinmicos conforme se associam a um grupo de
protenas (MAPs e Tau) ou outro (catastrofina, katanina).
Mas mesmo antes de conhecer as protenas que ajudam a estabilizar ou despolimerizar os microtbulos, eles j eram classificados em dois
grandes grupos funcionais: a) os microtbulos lbeis, que esto sob as
condies descritas anteriormente de instabilidade dinmica; nesse grupo,
sem dvida, o exemplo mais notvel o dos microtbulos que formam
o fuso mittico; b) os microtbulos estveis, que no despolimerizam,
mesmo estando em condies de despolimerizao, como baixa temperatura e presena de clcio; nesse grupo, o exemplo mais conhecido o
dos microtbulos que formam clios e flagelos.
PROTENAS MOTORAS
As protenas motoras que se associam a microtbulos pertencem a
duas famlias: as cinesinas (do grego kynetos, movimento) e as dinenas.
As cinesinas formam uma superfamlia de protenas motoras e
possuem vrios pontos em comum com a miosina do tipo II, abordada na
aula sobre microfilamentos. A cinesina tambm uma molcula formada
por duas cadeias pesadas e duas cadeias leves. Enquanto a regio globular
da molcula possui as propriedades motoras, pela regio em -hlice
da molcula que os dmeros so formados (Figura 23.12).
Figura 23.12: As protenas

motoras se ligam por uma
extremidade ao microtbulo
e pela outra a uma organela
ou vescula que ser transportada, como sobre um
trilho. Note que cinesina e
dinena se movem em sentidos opostos.
38 CEDERJ
23 MDULO 4
AULA
Existe uma enorme variedade de cinesinas. As primeiras foram observadas fazendo

o transporte de vesculas contendo neurotransmissores no axnio gigante de lula
(o axnio dessa espcie tem 1mm de espessura, o que enorme se comparado a
outras clulas nervosas). Num organismo simples como a levedura Sacharomices
cerevisae (o fermento de po), foram descritos 6 tipos de cinesinas; na espcie
humana, foram 40 (at o momento)!
As cinesinas se ligam aos microtbulos pelo seu domnio motor.

A outra extremidade se liga partcula que ser transportada. s custas
da hidrlise de ATP, as cabeas globulares da cinesina se ligam e se
desligam do microtbulo, fazendo com que a carga associada outra
extremidade seja transportada ao longo desse trilho. Quando ligada ao
ATP, a molcula de cinesina fica no seu estado de rigor, isto , permanece
ligada ao microtbulo. a hidrlise de ATP que promove o desligamento
da cinesina e seu deslizamento sobre o microtbulo (Figura 23.13). Se
pudssemos ver uma molcula de cinesina, veramos que as cabeas
globulares da molcula se parecem com pezinhos que efetivamente
se desligam alternadamente do filamento em vrios ciclos. Assim, as
molculas (e as cargas a elas associadas) caminham por uma grande
extenso e a uma velocidade razovel (0,2 a 2m/seg). As cargas, como j
comentamos, so organelas limitadas por membrana como mitocndrias
e elementos do complexo de Golgi, retculo ou outras. claro que para
transportar uma mitocndria so necessrias muitas cinesinas atuando
em conjunto. A mitocndria ficaria com o aspecto de uma centopia
molecular. As vesculas sinpticas (ver box) que so formadas no
corpo celular e transportadas para a extremidade do axnio onde
sero exocitadas tambm viajam ao longo dos microtbulos, movidas
a cinesina. No toa, portanto, que essas protenas so chamadas de
motores moleculares.
a
Figura 23.13: A cinesina (a) e a miosina (b)
so protenas capazes de hidrolisar ATP,
o que provoca mudanas em sua conformao. A associao da cinesina a um
microtbulo e da miosina a um microfilamento promove movimento do filamento
ou de alguma carga associada a essas
protenas motoras. Note que a cinesina
ligada ao ATP se liga ao microtbulo,
enquanto a miosina depende de ATP
justo para desligar-se do filamento.
CEDERJ 39
Muito do que se sabe sobre o transporte intracelular de vesculas e organelas

foi observado em neurnios gigantes de lula. Essa clula mostrou ser um timo
modelo tanto pelo seu tamanho como pela sua forma e sua funo. Apenas para
maior clareza, inclumos aqui um modelo de clula nervosa (Figura 23.14) para
que voc no tenha dvidas sobre estruturas como axnio e vesculas sinpticas,
referidas no texto.
Figura 23.14: Esquema

geral de um neurnio.
corpo celular
axnio
(pode chegar a 1m)
dendritos
extremidades sinpticas
(onde se localizam as
vesculas)
Uma caracterstica importante das cinesinas que elas caminham

ao longo do microtbulo sempre no sentido plus, isto , em direo
periferia celular. O transporte centrpeto (devia ser celulpeto, para o
centro da clula!) feito por protenas motoras da famlia das dinenas,
que caminham ao longo do microtbulo, sempre no sentido minus.
atravs das dinenas que as cisternas do complexo de Golgi so
mantidas junto ao ncleo, prximo ao centro organizador de microtbulos.
Enquanto miosinas e cinesinas guardam algumas similaridades, as
dinenas diferem de ambas em vrios pontos:
as cabeas globulares das dinenas so muito maiores que as das
miosinas e cinesinas (Figura 23.15);
as dinenas trafegam no sentido minus do microtbulo (Figura 23.12);
o transporte feito via dinenas bem mais rpido (14m/seg!)
que o das cinesinas (~2m/seg);
alm da dinena citoplasmtica, h um grupo de dinenas ciliares
e flagelares que pode ter trs domnios globulares, ao invs dos dois
normalmente encontrados (Figura 23.15).
Figura 23.15: Molculas de

(a) cinesina e (b e c) dinena
observadas ao microscpio
eletrnico de transmisso.
Repare como os domnios
globulares (as cabeas) das
dinenas so bem maiores que os da cinesina. A
dinena flagelar (c) possui 3
domnios globulares. (Fotos:
John Heuser).
a
40 CEDERJ
23 MDULO 4
MOVIMENTO CILIAR E FLAGELAR
AULA
Clios e flagelos so estruturas motoras encontradas em protozorios (os ciliados e os flagelados) e tambm em clulas de organismos
pluricelulares, como os espermatozides (flagelo) e o epitlio ciliado das
vias respiratrias (clios).
A estrutura interna de clios e flagelos idntica. Mesmo assim, eles
so prontamente diferenciados: os clios costumam ser curtos e se dispor em
fileiras que executam um movimento ondulatrio sincronizado semelhante
ao de um remo (Figura 23.16A e B). Os flagelos so bem mais longos e em
menor nmero (um no espermatozide humano, oito na Giardia lamblia
etc.). O movimento dos flagelos ondulatrio (Figura 23.16C).
Figura 23.16: (a) O movimento do clio se d em
duas etapas: uma puxada
rpida num sentido (1
e 2) que efetivamente
resulta em deslocamento
e uma recuperao lenta
no outro sentido (3 a 5)
que prepara o clio para
um novo batimento.
(b) Esquema de um
ciliado (Paramecium).
As fileiras de clios se
movem sincronicamente.
( c ) O movimento flagelar
se d como uma onda que
se propaga.
c
a
A estrutura bsica de clios e flagelos chamada axonema e est

representada na Figura 23.17. Ao redor de um par central de microtbulos,
arranjam-se 9 duplas de microtbulos. Cada dupla formada pelos 13
protofilamentos do microtbulo A e pelos 9 protofilamentos do B. A
cada microtbulo A, ligam-se duas molculas de dinena (os braos de
dinena). Alm de pontes radiais que ligam os pares perifricos ao par
central, os pares perifricos se conectam por uma protena que forma
pontes entre eles: a nexina. O movimento do clio ou flagelo produzido
pela inclinao do axonema.
Figura 23.17: esquerda,

um axonema em corte
transversal conforme visto
ao mi-croscpio eletrnico
de transmisso. Note que
as subunidades de tubulina podem ser contadas.
No esquema direita, os
principais componentes
da estrutura do axonema
esto representados.
(Foto: Lewis Tilney).
b
CEDERJ 41

Essa inclinao resultado da interao dos braos de dinena de
um microtbulo A com o microtbulo B do par seguinte (Figura 23.18).
Se as pontes de nexina e as pontes radiais forem desfeitas, o movimento
das dinenas far com que dois pares de microtbulos adjacentes deslizem
em sentidos opostos (Figura 23.18). Isso no acontece principalmente
devido s nexinas.
NOTA: No confunda tubulina e com os microtbulos A e B dos pares que
formam o axonema de clios e flagelos.
A cada momento, pares diferentes do axonema esto interagindo

via dinena. Isso resulta em um movimento ondulatrio para o flagelo.
Figura 23.18: A dinena faz com

que os microtbulos de um par se
desloquem em relao a seu par
vizinho. Como ambos esto presos
por pontes de nexina, o resultado
o encurvamento do clio ou flagelo.
A propagao desta onda resulta no
movimento de chicote do clio e de
ondulao do flagelo .
Pares de microtbulos
ligados por nexina
O deslizamento entre os
pares leva ao encurvamento
do clio ou flagelo
RESUMO
Os microtbulos so tbulos ocos formados por dmeros da protena tubulina
na sua forma
e . So estruturas polarizadas, sendo a extremidade plus a
que cresce mais rapidamente e a minus a de crescimento mais lento.

Os microtbulos so nucleados a partir de uma regio especfica da clula, o
centro organizador de microtbulos. A protena caracterstica desse centro
organizador a -tubulina. Todas as extremidades minus ficam voltadas para
o centro organizador e as extremidades plus para a periferia celular.
A incorporao de um dmero de tubulina a um microtbulo em crescimento
leva hidrlise de uma molcula de GTP ligada subunidade b desse dmero.
A disponibilidade de dmeros ligados GTP leva formao de uma tampa de
GTP que protege e confere ao microtbulo uma tendncia a crescer.
Os microtbulos so dotados de instabilidade dinmica, crescendo e encolhendo a
todo momento, redirecionando, assim, a forma e o deslocamento da clula.
42 CEDERJ
As cinesinas e dinenas so protenas que se associam aos microtbulos e so capazes de

promover o deslizamento entre eles ou o transporte de organela e vesculas atravs do
citoplasma, utilizando-os como trilhos.
Clios e flagelos so estruturas motoras de protozorios e tipos celulares como
espermatozides e epitlios ciliados que conjugam em sua estrutura microtbulos e
protenas acessrias estruturais e motoras.
Vrias drogas interferem na dinmica de polimerizao e despolimerizao dos microtbulos
e muitas delas so usadas na pesquisa e no tratamento de doenas como cncer e a gota.
A seguir, listamos as principais caractersticas das protenas e drogas que se ligam
a microtbulos.
Droga
Funo
Interao
Colchicina
Se liga a dmeros de tubulina
Impede a polimerizao
Vinblastina
Vincristina
Taxol
Se liga aos microtbulos,

estabilizando-os
Impede a despolimerizao
-tubulina
Nucleao de novos
microtbulos
Protege a extremidade minus,

impedindo que perca dmeros
Tau
Estabilizar o microtbulo
Forma pontes laterais entre

microtbulos, originando feixes
Map2
Estabilizar o microtbulo
Forma pontes laterais entre

microtbulos, originando feixes
Catastrofina
Desestabilizar
Favorece a rpida despolimerizao na extremidade plus
Nexina
Mantm a estrutura de nove pares

Forma pontes entre os microtbulos
perifricos no axonema de clios e
do axonema
flagelos
Statmina
Liga-se a dmeros
Liga-se ao estoque citoplasmtico

de tubulina impedindo que toda
ela se polimerize
Dinena
Protena motora na direo

minus
Liga-se a vesculas e organelas,

transportando-as na direo do
centrossoma. Tambm promove
a inclinao dos microtbulos dos
axonemas
Cinesina
Protena motora na direo plus
Liga-se a vesculas e organelas,

transportando-as na direo da
periferia da clula
Protena
CEDERJ 43
23 MDULO 4
estabilidade atravs da formao de pontes entre as subunidades de tubulina.
AULA
Os microtbulos podem estar associados a protenas acessrios que aumentam sua
1. O que um protofilamento? Quantos protofilamentos formam um microtbulos?

2. Qual a relao do GTP com o crescimento de um microtbulo?
3. O que voc entende por instabilidade dinmica?
4. O que o centro organizador de microtbulos?
5. De que depende a nucleao de um novo microtbulo?
6. Por que so teis na quimioterapia do cncer tanto drogas que evitam a
polimerizao de microtbulo quanto aquelas que evitam sua despolimerizao?
7. A que funes ou estruturas celulares esto relacionados os microtbulos?
8. Como atuam as protenas motoras cinesina e dinena?
9. Como se d o movimento de clios e flagelos?
44 CEDERJ
objetivos
Ao final desta aula, voc dever se capaz de:

caracterizar os microfilamentos e sua protena
formadora, a actina;
descrever a dinmica de polimerizao dos
microfilamentos;
listar e definir os principais tipos de movimentos
celulares;
caracterizar as principais estruturas celulares
formadas por microfilamentos;
relacionar as principais protenas acessrias da actina
a suas funes especficas;
relacionar as principais drogas que interagem com a
actina e seus efeitos.
24
AULA
Microfilamentos
Biologia Celular I | Microfilamentos
INTRODUO
Como vimos na aula 21, todos os microfilamentos so formados pela protena

actina. Os microfilamentos esto associados a vrios fenmenos celulares. O
mais conhecido talvez seja a contrao muscular, mas tambm dependem
destes filamentos a adeso das clulas matriz extracelular ou a substratos,
a separao das clulas-filhas ao final da diviso celular, a preservao da
estrutura das microvilosidades intestinais, os movimentos amebides e muitos
outros processos celulares (Figura 24.1).
microvilosidades
anel contrtil
fibras de
tenso
Figura 24.1: Filamentos

de actina participam na
separao de (a) clulas em
diviso, (b) no preenchimento de microvilosidades
intestinais e (c) na adeso
de clulas.
LEVEDURA
Forma do ciclo
de vida de alguns
fungos. O fermento
de po e a Candida
albicans, causadora
do sapinho, so
leveduras.
ISOFORMA
Pequenas variaes
de uma molcula
que podem resultar
de modificaes
sutis na cadeia
primria, como a
substituio de um
aminocido, ou o
acrscimo de um
grupamento, como
um acetil ou um
metil.
46 CEDERJ
CARACTERSTICAS DA ACTINA
A actina est presente em todas as clulas eucariontes, sendo
uma protena muito conservada, isto , sua seqncia de aminocidos
muito semelhante em organismos filogeneticamente bem distantes,
como fungos e animais. De acordo com o tipo celular, a actina pode
corresponder a at 20% do peso seco da clula, como o caso das
clulas musculares. Eucariontes mais simples, como as
LEVEDURAS,
possuem apenas um gene para actina. J os mamferos possuem

vrios genes para actina e ainda produzem vrias
ISOFORMAS
dessa
molcula. Pelo menos seis formas de actina j foram descritas. As mais

importantes so a actina , presente em clulas musculares, e a actina
, encontrada em clulas no musculares. Alm dessas ainda existe a
actina , tambm em clulas no musculares.
Seguindo a estratgia fundamental

para formao de filamentos, os microfilamentos
so formados pela ligao de vrias molculas
de actina, formando longos filamentos de
8nm de espessura (Figura 24.2), ou seja os
microfilamentos tambm so polmeros. A
actina no seu estado monomrico chamada de
24 MDULO 4
Figura 24.2: (a) Embora a

actina G seja uma protena
globular, ela aprisiona a
molcula de ATP numa
regio especfica. (b) Conforme os monmeros de
actina G se ligam, formase um filamento. Cada
monmero adicionado
sempre na mesma posio,
conferindo uma polaridade
especfica ao filamento.
A extremidade oposta
molcula de ATP a extremidade positiva ou plus.
AULA
ESTRUTURA DOS MICROFILAMENTOS
actina G (de globular) e, quando incorporada

ao microfilamento, de actina F (de filamentosa).
Dois monmeros de actina s se encaixam em
uma determinada posio. O resultado disso
que o filamento de actina se torna polarizado,
isto , as extremidades so diferentes.
Filamento no polarizado
Filamento polarizado
Quando um filamento polarizado, ele possui uma direo.

Novos
monmeros
podem
ser
adicionados (ou removidos) de qualquer

uma das extremidades do filamento, desde
lado minus
que na posio correta, mas existe maior

probabilidade de incorporao de novos
monmeros
uma
das
extremidades,
que chamada de positiva, ou plus. Esta

extremidade de crescimento est, em geral,
voltada para a membrana plasmtica.
Como voc tambm pode observar na
Figura 24.3, cada molcula de actina G possui
em seu interior uma molcula de ATP. Ela
lado plus
Figura 24.3: Estrutura da molcula de actina
baseada em anlise de difrao por raios X
(A). No centro da molcula (seta) est o stio
de ligao do ATP.
importante para a manuteno da estrutura da

molcula. Sem o ATP em seu interior, a actina
se desnatura (perde a forma caracterstica da
molcula) rapidamente. Quando a actina G
se incorpora ao filamento, hidrolisa o ATP,
formando ADP, que fica aprisionado no
filamento (Figura 24.2).
CEDERJ 47
A POLIMERIZAO DINMICA
Comparada, em termos quantitativos, maioria das protenas
citoplasmticas, a actina uma das principais protenas celulares. Parte
dessa actina se encontra na forma no polimerizada (actina G) e a outra
parte, na forma de microfilamentos (actina F).
necessria uma concentrao citoplasmtica mnima de
molculas de actina G, chamada concentrao crtica, para que os
microfilamentos se formem. Um novo microfilamento tem incio pela
formao de um ncleo. Para que esse ncleo se forme so necessrias
pelo menos duas outras protenas relacionadas actina, as ARPs (actin
related proteins) do tipo 2 e do tipo 3. Essas molculas so relativamente
parecidas com a actina e se associam formando um complexo ARP 2-3
ao qual molculas de actina G passam a se associar, formando um novo
Complexo Arp 2 - 3
Monmeros incorporados
ao ncleo formado por
Arp2 e Arp3
Complexo
Arp 2-3
Figura 24.4: O microfilamento se forma a

partir do complexo formado pela Arp 2 e
pela Arp 3. O filamento cresce na direo
da extremidade plus, pela incorporao de
novos monmeros de actina.
PARADINHA ESPER TA
Nesta altura, voc deve estar achando que microfilamentos e
microtbulos compartilham muitas caractersticas. De fato, ambos
resultam da polimerizao de protenas e formam filamentos
polarizados e dinmicos. Embora a estratgia de formao de
ambos seja semelhante, tubulina e actina so protenas completamente distintas e os filamentos por elas formados possuem
caractersticas de flexibilidade e resistncia muito diferentes.
48 CEDERJ
24 MDULO 4
Normalmente a concentrao citoplas-
AULA
mtica de actina G muitas vezes superior

concentrao crtica (necessria para dar
incio a um novo microfilamento). Isto, em
tese, poderia acarretar a total polimerizao
da actina da clula. Entretanto, isto no ocorre,
poque a actina citoplasmtica fica protegida
por uma pequena protena, a timosina que se
mantm ligada aos monmeros, impedindo
Stio de ligao ao
filamento de actina
Timosina ligada ao
monmero de actina
Figura 24.5: A timosina impede

que o monmero a ela ligado se
incorpore a um microfilamento.
sua incorporao extremidade positiva do

J a profilina outra protena que se liga ao monmero de actina,

competindo com a timosina, mas tem caractersticas diferentes dela: a
profilina se liga regio da molcula oposta ao ATP (Figura 24.6) e
capaz de responder a estmulos de sinalizao, como a picos de AMPc,
por exemplo. A actina ligada profilina fica estimulada a se associar
extremidade plus de um microfilamento. Assim, indiretamente, o
Figura 24.6: A profilina
liga-se actina do lado
oposto ao ATP.
crescimento da extremidade plus (e, conseqentemente, do filamento)

estimulado. Assim que o complexo actina-profilina se incorpora ao
filamento, a actina muda de conformao e libera a profilina.
Geralmente, a profilina se localiza junto membrana plasmtica

e, em resposta a estmulos do meio ambiente, promove o crescimento
de filamentos de actina em direo membrana, empurrando-a. Note
que um monmero de actina ou se liga timosina, ou profilina, nunca
s duas molculas ao mesmo tempo. O balano entre as molculas de
actina G ligadas a uma ou outra protena resulta na instabilidade
dinmica dos microfilamentos. Da mesma forma que os microtbulos,
os microfilamentos esto constantemente se alongando e encolhendo.
Mais que isso, mesmo que o comprimento de um microfilamento parea
inalterado, constantemente algumas subunidades de actina se soltam
na extremidade menos enquanto novas subunidades se incorporam
extremidade positiva.
CEDERJ 49
A dinmica de polimerizao dos microfilamentos pode ser comparada fila que

enfrentamos para assistir a um bom filme ou partida de futebol: os primeiros a
chegar (ncleo) vo fazendo com que a fila cresa. Quando a bilheteria aberta,
os primeiros comeam a comprar e a sair da fila, mas essa permanecer longa se
mais gente for chegando; entretanto, aqueles que estavam atrs cada vez mais
se aproximaro da bilheteria. Se todas as pessoas da fila conseguirem comprar
seu ingresso, aps algum tempo a fila terminar. Acompanhe o raciocnio no
esquema abaixo.
Fim da fila
primeiro da fila
Se a fila anda, mas continua entrando gente na mesma:
Todos chegaro a ser o primeiro da fila, mas ela ficar do mesmo tamanho.
Se a fila anda e pra de entrar gente :
Voc tambm chega a ser o primeiro da fila, mas a fila acaba!
MUITOS MOVIMENTOS CELULARES DEPENDEM DE ACTINA

Vimos na aula sobre microtbulos que algumas clulas se
deslocam pela ao de clios e flagelos. Os microtbulos tambm so
responsveis por guiar os cromossomas para as clulas filhas durante a
diviso celular e pela distribuio de organelas celulares, como retculo,
complexo de Golgi e mitocndrias. Por outro lado, a contrao
muscular (que estudaremos em Biologia Celular II), o movimento
amebide e o estrangulamento final que separa as duas clulas filhas
aps a diviso, dependem da participao de microfilamentos.
Ao se deslocar numa determinada direo, as clulas
emitem prolongamentos de seu citoplasma que podem ser lobulares
(lobopdios), lamelares (lamelipdios) ou filamentosos (filopdios)
(Figura 24.7). Todos resultam da incorporao de novos monmeros
de actina na extremidade voltada para a membrana plasmtica de
microfilamentos j existentes (Figura 24.8).
50 CEDERJ
24 MDULO 4
AULA
Estaro disponveis, na plataforma ou no plo,

vdeos mostrando a relao entre a incorporao de
monmeros de actina ao filamento e os movimentos
celulares; em caso de dvida, consulte o tutor.
Figura 24.7: Lamelipdios (L) e filopdios (F) so formados sob a membrana plasmtica pela polimerizao de
filamentos de actina. Foto de Mrcia Attias.
Figura 24.8: Novos monmeros de actina (pontilhado) se

incorporam extremidade plus dos microfilamentos preexistentes, empurrando a membrana plasmtica e sustentando
o deslocamento da clula naquela direo (seta).
CEDERJ 51
LOBOPDIOS, LAMELIPDIOS OU FILOPDIOS? AS

PROTENAS ASSOCIADAS ACTINA
Embora a morfologia de lamelipdios, fiopdios e lobopdios
seja bem distinta, todos so constitudos por microfilamentos. O que
faz com que um mesmo tipo de protena possa formar estruturas to
Figura 24.9: Os microfilamentos podem formar
arranjos em feixes paralelos
(a e b) ou em redes cruzadas
(c). Nos feixes os filamentos
podem ter todos a mesma
orientao (a) ou no (b),
como indicam as cabeas
de seta.
a
A
distintas, ainda que associadas a funes semelhantes? Assim, como

os microtbulos, os microfilamentos se associam a protenas que
lhes conferem diferentes propriedades. Estas protenas permitem que
os microfilamentos formem redes ou feixes paralelos (Figura 24.9),
capazes de suportar grandes tenses e de rapidamente se desmontarem,
dando origem a novos feixes, em outro ponto da clula.
bB
Cc
Cada um desses arranjos resulta da associao da actina com

diferentes protenas, das quais as mais comuns so: -actinina (Figura
24.9B), fimbrina (Figura 24.9A) e filamina (Figura 24.9C).
A -actinina e a fimbrina formam pontes entre dois filamentos de
actina, dando origem a feixes paralelos (Figura 24.10). Essas protenas
funcionam como espaadores, mantendo eqidistantes os filamentos do
feixe. Observando a Figura 24.10, vemos que a -actinina mantm os
microfilamentos mais distanciados que a fimbrina.
Actina e -actina
Figura:24.10: A -actinina
mantm uma distncia (D)
entre os microfilamentos
maior que a fimbrina(d).
Isso permite que outras
protenas se insiram entre
os filamentos.
52 CEDERJ
Actina e fimbrina
d
d
24 MDULO 4
No difcil concluir que os feixes formados pela fimbrina so finos
AULA
e compactos, como os encontrados nas microvilosidades (Figura 24.11).
Figura: 24.11 as microvilosidades

(A) so sustentadas por um feixe
interno de microfilamentos associados a fimbrina.
Fimbrina
protenas que ligam
os microfilamentos
membrana
membrana
plasmtica
extremidade plus dos

microfilamentos
J a -actinina permite um espaamento maior entre os

microfilamentos. Por isso mesmo, outras protenas podem se inserir,
dando origem a outras estruturas. A -actinina encontrada em muitas
clulas, formando feixes capazes de suportar tenses, promovendo assim
a adeso dessas clulas ao substrato (Figura 24.12). Por isso mesmo
esses feixes so chamandos fibras de tenso ou stress fibers, no original
em ingls. Tambm essa protena que mantm o espaamento regular
entre os filamentos de actina nas clulas musculares esquelticas, sobre
as quais voc saber mais em Biologia Celular II. Na Figura 24.12, os
locais marcados na clula correspondem aos arranjos de filamentos
da Figura 24.9: os filopdios ao arranjo apertado da Figura 24.9B, o
crtex celular ao arranjo entrecruzado da Figura 24.9C e as fibras de
tenso ao arranjo paralelo da Figura 24.9A.
CEDERJ 53
a
A
fibras de tenso
filopdio
crtex celular
B
b
CITOPLASMA
MATRIZ EXTRACELULAR
filamento de
actina
-actinina
CITOPLASMA
Cc
vinculina
paxilina
talina
integrina
fibronectina
MATRIZ
50 nm
54 CEDERJ
Figura 24.12: As fibras de tenso promovem a

adeso das clulas a uma superfcie (a). Em (b)
vemos que elas so formadas por feixes de actina
associados a outras protenas e espaados por
-actinina. Em (c), detalhamento de um dos filamentos da fibra e as protenas a ele associadas,
fazendo ligao com o meio extracelular.
24 MDULO 4
A filamina tambm uma protena que interliga filamentos de actina,
AULA
mas, ao invs de formar pontes entre filamentos dispostos em paralelo, os

filamentos ligados por essa protena formam uma rede (Figura 24.13).
Dmero de filamina
Figura 24.13: A filamina forma dmeros

cuja distncia entre as extremidades que
se ligam ao filamento de actina permite
a formao de redes de filamentos que
se entrecruzam.
Na verdade, o que determina se a ligao actina de cada uma dessas

protenas dar origem a feixes paralelos, redes ou mesmo se conectar
o microfilamento membrana plasmtica conseqncia de sua forma
e tamanho (Figura 24.14).
fimbrina
-actinina
filamina
50 nm
Figura 24.14: Enquanto a fimbrina possui apenas

um stio de ligao para actina, a -actinina, por
formar um dmero, pode ligar simultaneamente
dois filamentos, assim como a filamina, onde o
espaamento e flexibilidade do dmero permitem
a ligao de filamentos entrecruzados.
CEDERJ 55

Uma clula aderida precisa soltar do substrato para poder se
deslocar, mas se ela soltar todos os pontos de contato ao mesmo tempo
vai ficar boiando! Assim, ela precisa soltar apenas alguns contatos
com o substrato na regio prxima direo de migrao. A clula
faz isso despolimerizando nesses locais filamentos de actina associados
-actinina (como os da Figura 24.12B) e polimerizando novos
microfilamentos mas agora associados fimbrina para formar filopdios
que vo explorar o caminho. Caso a clula se decida a realmente ir
nessa direo, vai precisar estabelecer novos contatos com o substrato
e eles tm de ser sustentados por fibras de tenso para agentar a trao
de puxar o resto da clula para a frente (Figura 24.15).
crtex
filopdio
substrato
actina nova polimerizando

para estender o filopdio
movimento de actina no polimerizada
novos contatos focais se

estabelecendo
Figura 24.15: Movimento de uma clula

aderida ao substrato.
56 CEDERJ
24 MDULO 4
AULA
Do caldeiro da bruxa
Algumas molculas se ligam de forma especfica actina e impedem a dinmica

normal de polimerizao-despolimerizao dos microfilamentos, sendo, portanto,
txicas para as clulas.
A faloidina uma dessas substncias. Extrada do cogumelo Amanita phaloides, a
faloidina forma ligaes laterais com os filamentos de actina, estabilizando-os. Envenenamentos com esse cogumelo (que pode ser confundido com espcies comestveis)
so tratados dando-se carne crua ao paciente. A actina contida na carne se liga a esta
toxina e impede sua absoro. A faloidina muito til no estudo dos microfilamentos em laboratrio, tanto pelo seu poder de estabilizar os microfilamentos e com
isso ser capaz de estabelecer se os mesmos participam de certos processos celulares
quanto pela possibilidade de visualizar os microfilamentos, tornando-os fluorescentes pela ligao falacidina, um derivado fluorescente da faloidina.
A citocalasina tambm uma toxina derivada de um fungo, capaz de ligar-se especificamente actina. Difere da faloidina por ligar-se especificamente aos monmeros da
actina, impedindo assim sua adio aos microfilamentos. Devido dinmica de polimerizao-despolimerizao, os microfilamentos acabam sendo todos despolimerizados, levando a clula a arredondar-se e desprender-se do substrato.
Embora atuem de maneiras diferentes, tanto a citocalasina quanto a faloidina impedem a participao dos microfilamentos em fenmenos celulares como o movimento
amebide e a fagocitose de partculas. Seriam os Amanitas os cogumelos venenosos
das bruxas ms?
OUTRAS ESTRUTURAS LIGADAS ACTINA

As hemcias humanas (Figura 24.16) so clulas que durante
o processo de diferenciao perdem o ncleo e todas as organelas e
membranas internas. Seu formato caracterstico de disco bicncavo
dado pelo citoesqueleto associado face interna de sua membrana
plasmtica. Nessas clulas, os filamentos de actina so curtos e a
membrana se sustenta numa rede formada pela protena espectrina
(Figura 24.16). Esta arquitetura permite a distribuio homognea das
protenas da membrana da hemcia e garante sua flexibilidade, fazendo
com que ela possa se deformar para atingir os capilares mais finos.
CEDERJ 57
Figura 24.16: As hemcias (A) mantm seu formato bicncavo graas a uma rede interna de
espectrina (B), que se liga a filamentos curtos
de actina. Estes filamentos, por sua vez, associam-se a protenas transmembrana da hemcia, garantindo sua distribuio homognea em
toda a membrana. O esquema B representa a
face citoplasmtica da membrana da hemcia.
5m
Espectrina
(dmero)
Actina (filamento
muito curto
Anquirina
Banda 3
Glicoforim
Banda 4.1
50 nm
Curiosidade fantasmagrica
A hemcia foi o modelo de estudo da membrana plasmtica que ajudou a produzir a

maioria dos conhecimentos bsicos sobre essa estrutura. Geralmente, antes de iniciar
os experimentos, as hemcias eram delicadamente rompidas apenas para vazar o
contedo de hemoglobina que atrapalhava bastante as anlises. Depois do esvaziamento, a membrana da hemcia tornava a fechar e a hemcia esvaziada passava a
ser chamada ghost (fantasma). Quando o citoesqueleto sob a membrana foi descoberto, suas protenas foram analisadas por eletroforese e numeradas; algumas so
conhecidas pelo nmero at hoje, apesar de importantes, como a banda 3, principal
transportadora de cloreto, ou a banda 4.1, que ancora o citoesqueleto membrana;
mas a mais abundante foi batizada de a protena do fantasma: espectrina.
58 CEDERJ
24 MDULO 4
AULA
Trada pela prpria actina: a estratgia da Listeria monocytogenes
A bactria patognica Listeria monocytogenes, responsvel por um tipo grave de intoxicao alimentar, desenvolveu uma estratgia particular para movimentar-se dentro
das clulas que invade. Inicialmente, a bactria englobada pela clula hospedeira
em um vacolo, do qual rapidamente escapa para o citoplasma. Embora no possua
estruturas locomotoras, a bactria capaz de formar em uma de suas extremidades
uma cauda de filamentos de actina que, ao crescer, funciona como a cauda de um
foguete, empurrando-a pelo citoplasma. Eventualmente, a cauda de actina acaba
empurrando a Listeria na direo da membrana plasmtica, levando-a a invadir as
clulas vizinhas, onde se multiplicar e repetir a estratgia de escape. Acompanhe
as principais etapas desse processo na Figura 24.17. Um vdeo documentando este
curioso fenmeno tambm estar sua disposio na plataforma.
bactria
livre
fagocitose
a bactria
escapa
formao da
cauda da actina
a bactria
induz uma
projeo
Figura 24.17: Esquema (a) e fluorescncia (b) de uma

clula parasitada pela bactria Listeria monocitogenes.
(Foto: Tim Mitchinson e Julie Theriot)
Clula vizinha fagocita a

projeo contendo a bactria
a
CEDERJ 59
OS MICROFILAMENTOS PODEM SE FRAGMENTAR

RAPIDAMENTE
Assim como algumas substncias so capazes de estimular o
rpido crescimento dos microfilamentos, determinadas circunstncias
provocam sua sbita fragmentao. o que acontece quando a
protena citoplasmtica gelsolina se liga a Ca++. Nessas condies
h uma imediata fragmentao dos microfilamentos, provocando o
desaparecimento de estruturas mantidas por eles. Em algumas clulas,
observa-se que, quando a maior parte da actina se encontra na forma
filamentosa, o citoplasma adquire uma consistncia gelatinosa, sendo
esse estado chamado gel. Quando a actina se encontra fragmentada,
diz-se que o citoplasma est no estado sol. A constante transio
entre os estados sol e gel de certas regies perifricas do citoplasma
fundamental para o deslocamento da clula num substrato. Quando a
clula tratada com citocalasina (vide box), o citossol tender a ficar
no estado sol. J a faloidina levar ao estado gel.
OS MICROFILAMENTOS E OS MOVIMENTOS CELULARES:

PROTENAS MOTORAS
A simples polimerizao-despolimerizao de microfilamentos
no suficiente para justificar a participao dos mesmos em fenmenos
como a contrao muscular ou o estrangulamento das clulas-filhas
aps a mitose. Estes eventos requerem, alm de protenas estruturais
que mantenham as conexes entre microfilamentos e destes com a
membrana plasmtica, as chamadas protenas motoras. As protenas
motoras associadas aos microfilamentos pertencem a uma mesma
famlia: as miosinas.
Todas as miosinas so capazes de hidrolisar ATP a ADP e
fosfato inorgnico (Pi) quando se associam a microfilamentos. Durante
o processo, a molcula de miosina promove o deslocamento do
microfilamento. Este movimento pode ser registrado quando se reveste
uma lmina com molculas de miosina e microfilamentos marcados com
uma substncia fluorescente e ATP so adicionados. Ao microscpio de
fluorescncia os microfilamentos se deslocam de um lado ao outro da
lmina. Um clipe deste experimento se encontra disponvel no plo.
60 CEDERJ
24 MDULO 4
A superfamlia das miosinas engloba vrias subfamlias. Dessas,
AULA
as mais importantes so as miosinas I, II e V. Evolutivamente, a miosina

I mais primitiva e acredita-se que tenha dado origem miosina II e
todas as outras. A miosina I tambm chamada miosina no muscular
e o tipo mais abundante na maioria das clulas. J a miosina II
caracterstica das clulas musculares. A miosina V foi descoberta mais
recentemente e responsvel pelo transporte de vesculas ao longo
de microfilamentos. Tanto a actina quanto a miosina foram primeiro
descritas em clulas musculares.
Todas as miosinas possuem uma regio da molcula conservada,
o chamado domnio motor. Trata-se de uma regio globular onde a
hidrlise do ATP a ADP e Pi catalisada. A hidrlise do ATP provoca
uma modificao na posio relativa entre a miosina e o microfilamento
que lhe esteja prximo que leva liberao do Pi. Deste ponto em
diante, a ligao entre actina e miosina se fortalece, ao mesmo tempo
que uma regio flexvel logo abaixo da cabea globular da miosina se
deforma, fazendo com que a miosina acabe por puxar o filamento de
actina ao qual inicialmente havia se ligado. A dinmica do processo
est esquematizada na Figura 24.18.
CEDERJ 61

Figura 24.18
minus
Filamento de actina
Cabea da miosina
Filamento espesso de
miosina II
Uma molcula de ATP se liga ao

domnio globular da molcula de
miosina.
A hidrlise do ATP produz ADP e Pi

e muda o ngulo entre a cabea e a
cauda da miosina, fazendo com que o
domnio globular da miosina se aproxime do filamento de actina.
A liberao do Pi favorece a ligao

entre actina e miosina.
A liberao do ADP provoca uma

flexo da molcula de miosina que
puxa o filamento de actina ligado a
ela.
A associao entre actina e miosina s

se desfar com a ligao a uma nova
molcula de ATP, permitindo o reincio
do ciclo.
62 CEDERJ
24 MDULO 4
Alm do domnio motor, todas as miosinas possuem uma
AULA
cauda que pode manter a molcula ligada membrana ou a outro

filamento (Figuras 24.19 e 24.20). No caso da miosina I, a cauda
bastante curta; j a miosina II um dmero em que as duas caudas se
entrelaam de modo que os domnios globulares se posicionem em uma
das extremidades da molcula (Figura 24.19). Na miosina V, a poro
flexvel da molcula mais longa, permitindo que seu passo seja maior
do que o da miosina II.
Miosina I
Miosina II
Miosina V
a
(A)
b
(B)
cadeias
leves
cauda
Cabeas
globulares
2 nm
150 nm
Figura 24.19 (a): Esquema comparativo das molculas de miosina I, II e V. As setas apontam a regio flexvel da
molcula, que se dobra para produzir o deslocamento do filamento de actina. Na miosina V, a distncia entre
as cabeas globulares maior, permitindo um deslocamento maior que o da miosina II. (b) Detalhamento da
organizao da molcula de miosina II. Na regio globular da molcula, esto localizados tanto os stios catalticos
para a hidrlise do ATP quanto a regio que se liga ao filamento de actina.
CEDERJ 63
aa
Miosina V
vescula
bb
Miosina II
cc
Miosina I
Membrana plasmtica
Figura 24.20: A miosina pode provocar (a) movimento de uma vescula por
sobre um filamento, (b) o deslizamento antiparalelo de dois filamentos
de actina, ou (c) prender-se membrana e puxar um microfilamento. O
sinal de + indica a extremidade plus do filamento de actina.
Da interao actina-miosina dependem algumas atividades

essenciais do ciclo celular. Assim, o estrangulamento que separa as
clulas-filhas aps uma diviso resultante de um anel de contrao
formado por feixes de actina que deslizam uns em relao aos outros
diminuindo o dimetro do anel e trazendo consigo a membrana. Desse
processo participam, alm da actina, miosina II e protenas que ligam o
feixe de actina membrana plasmtica (Figura 24.21).
anel contrtil
64 CEDERJ
Figura 24.21: O estrangulamento que resultar na

separao das clulas ao
final da diviso depende
de um anel contrtil de
actina e miosina. Foto de
Marcia Attias.
24 MDULO 4
AULA
PERMANENTES OU TRANSITRIAS: AS ESTRUTURAS

FORMADAS POR MICROFILAMENTOS
Enquanto nas clulas musculares os microfilamentos e a miosina
a eles associada formam um arranjo estvel, o anel de contrao uma
estrutura transitria, que se forma apenas ao final da diviso celular. Em
clulas que aderem ou se deslocam num substrato, feixes de filamentos
de actina esto sempre se formando e se associando a complexos de
adeso localizados na membrana plasmtica. So os contatos focais
(Figura 24.22). Os contatos focais, por estarem associados s fibras de
tenso, conferem clula uma resistncia que a membrana plasmtica
(composta essencialmente por uma bicapa fluida de lipdeos) por si s
no seria capaz de proporcionar. Estas regies de adeso se reorganizam
de forma dinmica, conforme mostrado na Figura 24.15, permitindo a
adeso, sem impedir o deslocamento da clula.
Figura 24.22: Iluminadas pelo sistema de

contraste de fase, possvel ver como
se distribuem as fibras de tenso numa
clula aderida a um substrato. As reas
escuras correspondem aos contatos
focais, regies onde os feixes de fibras
se ancoram.(foto: Grenham Ireland)
CONCLUSES
Os microfilamentos so certamente um dos mais versteis
componentes celulares. De acordo com as protenas a que se associem
podem formar estruturas completamente diferentes e desempenhar uma
enorme diversidade de funes. Esses componentes do citoesqueleto
esto presentes tanto nos eucariontes animais quanto em vegetais
e fungos. Processos fundamentais como a contrao muscular, o
movimento e a
adeso celular, o englobamento de partculas e a
separao de clulas ao fim da mitose so todos dependentes desses

filamentos. Igualmente notveis so as miosinas, protenas motoras
que interagem com a actina. A seguir, inserimos uma tabela onde as
principais caractersticas da actina e das protenas a ela associadas
esto relacionadas.
CEDERJ 65
Tabela 24.1
Funo da protena
Exemplo
Forma filamentos
Actina
Fortalece o
filamento
Tropomiosina
Forma feixes a partir

dos filamentos
Forma feixes a partir
dos filamentos
Forma ligaes cruzadas entre filamentos
Associao com a
peso molecular
actina
50 nm
370 x 43 kD/m
2 x 35 kD
14nm
68 kD
Fimbrina
-actinina
2 x 100 kD
Filamina
2 x 270 kD
Fragmenta filamentos
Gelsolina
Desliza filamentos
Miosina II
Move filamentos ou
vesculas
Miosina I
Associa a ponta dos filamentos membrana
Espectrina
Seqestra monmeros
de actina
Timosina
66 CEDERJ
Forma, tamanho e
40nm
Ca2+
90 kD
2 x 260 kD
ATP
150 kD
2 x 265 kD plus 2 x 260 kD
5 kD
ATP
24 MDULO 4
AULA
RESUMO
Os microfilamentos so filamentos formados por monmeros da protena
actina. So estruturas polarizadas, sendo a extremidade plus a que cresce
mais rapidamente e a minus a de crescimento mais lento.Os microfilamentos
so nucleados a partir de trs monmeros de actina que se combinam a
outras protenas relacionadas actina. Geralmente, as extremidades plus
do filamento ficam voltadas para a periferia celular.
A incorporao de um monmero de actina a um microfilamento em
crescimento leva hidrlise de uma molcula de ATP aprisionada no
monmero de actina.
Os microfilamentos so dotados de instabilidade dinmica, crescendo
e encolhendo a todo momento, redirecionando, assim, a forma e o
deslocamento da clula.
Os microfilamentos podem estar associados a protenas acessrias que
aumentam sua estabilidade atravs da formao de pontes entre as
subunidades de actina. A tropomiosina (veja tabela 24.1) uma dessas
protenas. A faloidina, embora seja uma toxina, tambm estabiliza os
microfilamentos.
As miosinas so protenas que se associam aos microfilamentos e so capazes
de promover o deslizamento entre eles ou o transporte de organelas e
vesculas atravs do citoplasma, utilizando-os como trilhos.
Filopdios e lamelipdios so estruturas motoras de protozorios e tipos
celulares como fibroblastos, microfilamentos e protenas acessrias estruturais
e motoras.
Vrias drogas interferem com a dinmica de polimerizao e despolimerizao
dos microfilamentos e muitas delas so usadas na pesquisa.
CEDERJ 67
AVALIAO
1. O que um microfilamento?
2. Qual a relao do ATP com o crescimento de um microfilamento?
3. O que voc entende por instabilidade dinmica? Como caminha uma molcula de
actina em um microfilamento?
4. Existe um centro organizador de microfilamentos?
5. De que depende a nucleao de um novo microfilamento?
6. Como atuam as drogas faloidina e citocalasina?
7. A que funes ou estruturas celulares esto relacionados os microfilamentos?
8. O que so fibras de tenso?
9. Como se organiza o anel de contrao das clulas que se dividem?
10. Como atuam as miosinas?
68 CEDERJ
objetivos

Compreender o equilbrio entre o compartimentos das
vias endoctica e secretria;.
Conhecer os mecanismos de direcionamento de
vesculas.
Enumerar os diferentes tipos de revestimento de
vessculas e sua funo.
Correlacionar o mecanismo de fuso de membranas
com a sua especificidade.
25
AULA
Trfego Intracelular
de Vesculas
Biologia Celular I | Trfego Intracelular de Vesculas
INTRODUO
Na aula 16, voc aprendeu que as novas molculas (protenas, glicoprotenas,

lipdios) produzidas no retculo endoplasmtico passam dessa organela para
o complexo de Golgi em vesculas. Depois, na aula 17, voc aprendeu que
para percorrer o complexo de Golgi as molculas precisam ser colocadas em
vesculas que brotam de cada lamela e se fundem com a lamela seguinte, j
que as lamelas do Golgi no so contnuas. A princpio, isso pode parecer
uma trabalheira absurda, mas como a cada lamela essas molculas ganham
cadeias de acar que vo sendo modificadas, com certeza o processamento
dessas molculas fica mais organizado. No final, j na rede trans do Golgi, as
molculas seguiro para a membrana plasmtica ou para os lisossomas, sempre
dentro de vesculas.
Repare bem, voc no acha que, de tanto receber vesculas, a membrana
plasmtica ficaria enorme? (daria para fazer babados, ou, no mnimo, umas
preguinhas...). Esse aumento da rea da membrana plasmtica seria muito
prejudicial para a clula, j que, por conter o citoplasma fluido, o aumento
de rea seria acompanhado por um aumento de volume. Colocando um
pouquinho de matemtica nesse raciocnio, voc vai lembrar que: se a rea
da membrana aumenta ao quadrado, o volume que ela delimita aumenta ao
cubo. Se o volume da clula aumentasse muito, certamente haveria entrada de
gua (por osmose), o que diluiria o citoplasma, alterando o equilbrio de todas
as reaes que l se desenrolam. Por isso, acrscimos de superfcie precisam
estar bem controlados.
Em contrapartida, as clulas precisam se nutrir, inclusive de molculas que no
atravessam a membrana, e para isso endocitam o fluido extracelular. A formao
de vesculas endocticas reduz a rea da membrana plasmtica, contrapondo-se,
assim, ao processo secretrio. Observando a Figura 25.1, podemos ter uma
idia do trnsito de vesculas envolvidas nas duas principais vias da fisiologia
celular: a endoctica e a secretria.
70 CEDERJ
25 MDULO 4
lisossoma
endossoma
tardio
RE
AULA
MP
endossoma
inicial
CGN
Golgi
TGN
grnulo de
secreo
Complexo de Golgi
Figura 25.1: Trfego de vesculas que transportam material do retculo endoplasmtico

para o complexo de Golgi e da para a membrana (via secretria) e de vesculas que
transportam material endocitado para os lisossomas (via endoctica). MP, membrana
plasmtica; N, ncleo; RE, retculo endoplasmtico; CGN, rede cis do Golgi; TGN, rede
trans do Golgi.
Conclumos, ento, que a rea da membrana plasmtica e o

volume celular podem ser mantidos pelo equilbrio entre a chegada
de vesculas da via secretria e o brotamento de vesculas endocticas.
Mas ser que o controle desse equilbrio simples? Considerando
apenas a via endoctica, lembremos que, na endocitose mediada por
receptor, vesculas so devolvidas membrana quando os receptores
so reciclados.
Um experimento relativamente simples buscou testar esse equilbrio
impedindo a formao de vesculas revestidas por clatrina. A idia era
perturbar o equilbrio de rea da membrana atravs do bloqueio de um
dos tipos de endocitose. Isso foi feito eliminando o gene de uma das
adaptinas (recorde na Aula 20). O resultado esperado era o aumento de
rea da membrana plasmtica. Mas o resultado encontrado foi que, ainda
assim, a rea da membrana se mantinha aproximadamente constante!
Isso aconteceu porque a taxa de endocitose de fase fluida aumentou. Esse
experimento sugeriu que o equilbrio dinmico e no to simples.
Um ponto intrigante : como os compartimentos intracelulares
manteriam a composio de sua membrana e seu lmen apesar de
trocarem vesculas entre si? Essa questo particularmente importante
entre lamelas do Golgi. A nica resposta possvel parece ser que cada
compartimento tem de selecionar as molculas que faro parte de uma
vescula antes que ela se solte.
CEDERJ 71

Depois da vescula formada, ela deve seguir pelo citoplasma
transportando sua
CARGA
para o destino certo. Ser que seu
deslocamento pelo citoplasma aleatrio, ou seja, ela vai sendo levada

pelos movimentos dos outros componentes do citoplasma?
Aleatrio ou no, uma vescula certamente encontrar pelo seu
caminho citoplasmtico muitas outras vesculas e compartimentos.
Por que ela no se funde com o compartimento errado, levando, por
CARGA DE UMA VESCULA
O conjunto de
molculas que ela
transporta, o que inclui
no s o seu lmen mas
tambm as molculas
que compem a prpria
membrana que a
delimita.
exemplo, molculas recm-sintetizadas do retculo para o lisossoma ao

invs de para o Golgi?
Alis, falando em fundir, como ser que uma vescula se funde
a outra?
Como voc pode ver, perguntas no faltam! Nos ltimos anos,
muitas delas comearam a ser respondidas. Vamos organizar o assunto
tratando dos seguintes pontos: direcionamento das vesculas, sua
composio incluindo a seleo da carga e por ltimo fuso de vesculas
a compartimentos.
Daqui para a frente esta aula contm muitas informaes incompletas,

como voc poder perceber, mas isso devido falta de informaes
sobre certos processos celulares reconhecidamente importantes. Nossa
inteno trazer as informaes mais atuais. Muitas dessas informaes
sero suprfluas para voc hoje, mas decidimos escrev-las porque, por
enquanto, no h outro texto em portugus que voc possa usar como
fonte de consulta sobre esse assunto. No se preocupe em guardar nomes
de molculas, importante mesmo perceber como funciona em geral o
trfego intracelular de vesculas (at onde se sabe!).
DIRECIONAMENTO
Quando analisamos as direes seguidas pelas vesculas no
citoplasma de uma clula de mamfero (Figura 25.1), podemos perceber
que as vesculas da via secretria se deslocam da regio prxima ao
ncleo, onde se encontram retculo endoplasmtico e complexo de
Golgi, para a periferia da clula, at chegar membrana plasmtica.
Convencionou-se chamar essa direo de trfego de antergrada. J
as vesculas endocticas se deslocam passando pelos endossomas
inicial e tardio em direo aos lisossomas, que costumam estar
preferencialmente na regio perinuclear; essa direo de trfego
dita retrgrada.
Com o que voc aprendeu nas ltimas aulas, j poderia apostar
que algum tipo de filamento do citoesqueleto estaria envolvido no
72 CEDERJ
25 MDULO 4
direcionamento das vesculas, j que as protenas motoras podem
AULA
fazer com que vesculas ou mesmo organelas inteiras deslizem ao

longo de microtbulos ou microfilamentos. Para testar essa hiptese,
um experimento simples seria usar drogas que despolimerizam esses
filamentos e observar se as vesculas continuam se deslocando.
Os resultados desses experimentos foram muito interessantes.
Ao despolimerizar microfilamentos usando citocalasina, as clulas no
conseguem mais fazer fagocitose, porque a emisso de pseudpodos
depende do remodelamento dos microfilamentos naquela regio. Outra
alterao que chamou a ateno dos pesquisadores foi o encolhimento
do retculo endoplasmtico: ao invs de se manter espalhado por uma
grande rea do citoplasma ele se tornou menos ramificado. Entretanto,
os resultados mais marcantes foram obtidos com o uso do nocodazol,
uma droga que provoca a despolimerizao dos microtbulos. Nessa
situao, a via endoctica ficava bastante prejudicada, a maior parte
das vesculas formadas no conseguia passar o material endocitado
para os outros compartimentos, principalmente do endossoma inicial
em diante (Figura 25.2). Em muitas clulas, a despolimerizao dos
microtbulos causava a redistribuio dos lisossomos, que deixam de
ser encontrados principalmente na regio perinuclear para se espalhar
na periferia da clula.
MP
endossoma inicial
Figura 25.2: O direcionamento das vesculas
transportadoras da via
endoctica depende dos
microtbulos.
microtbulo
TGN
endossoma tardio
lisossoma
CEDERJ 73

No era s na via endoctica que se notavam os efeitos da
despolimerizao dos microtbulos. A troca de vesculas entre retculo
endoplasmtico e complexo de Golgi tambm se mostrava alterada.
Como j foi comentado antes (aula 17), a manuteno da identidade de
cada uma das lamelas do Golgi essencial, j que cada lamela rene
um conjunto de enzimas responsveis por uma etapa da sntese de
glicoconjugados. Do mesmo modo, muito importante que protenas
mal formadas que tenham escapado para o Golgi voltem para o
retculo endoplasmtico, de onde sero translocadas para o citoplasma
e destrudas pelo sistema ubiquitina-proteassomos (aula 18). Se os
microtbulos forem despolimerizados, tambm essas etapas do trfego
de vesculas deixam de acontecer (Figura 25.3).
Golgi
RE
Figura 25.3: O deslocamento

de vesculas do complexo
de Golgi para o retculo
endoplasmtico depende de
microtbulos.
microtbulo
Analisando em conjunto os efeitos da despolimerizao de

microtbulos sobre o trfego de vesculas, voc vai notar que os trechos
afetados so aqueles em que as vesculas se deslocam da regio perifrica
para o centro da clula, portanto, na direo retrgrada. J foi testado
experimentalmente, mas voc at poderia advinhar: o trfego retrgrado
usa protenas motoras da famlia das dinenas para transportar vesculas ao
longo dos microtbulos em direo extremidade minus desses filamentos.
Quanto aos microfilamentos, alguns pesquisadores tm conseguido
registrar pequenos filamentos de actina, com o aspecto de cauda de cometa,
propelindo uma vescula, assim como acontece com a bactria Listeria
monocitogenes (veja box na aula 24). Entretanto, essa uma idia ainda no
muito generalizada, porque foi observada poucas vezes (Figura 25.4).
74 CEDERJ
25 MDULO 4
AULA
Figura 25.4: Esquema de propulso de uma vescula por uma cauda de filamentos
de actina. Micrografias de endossomas de ovcito de r com a cauda de actina
formada. Fotos de Taunton et al. J. Cell Biol.148:519, 2000.
SELEO DA CARGA
Vimos na aula 20 que a grande eficincia da endocitose mediada
por receptor se deve concentrao do contedo das vesculas
revestidas por clatrina. O mecanismo de concentrao a reunio
de vrios complexos receptor-ligante na pequena rea de membrana
plasmtica que vai formar a vescula, graas interao das caudas
citoplasmticas dos receptores com adaptinas e clatrina (Figura 25.5).
receptor
adaptina
clatrina
carga
Figura 25.5: Formao de

uma vescula revestida
por clatrina.
Na sada da regio trans do complexo de Golgi, ocorre a mesma

concentrao de contedo, tambm com auxlio do revestimento de
clatrina, s que com outras adaptinas. As adaptinas so grupos de protenas
que fazem pontes entre a cauda citoplasmtica de receptores, na membrana
plasmtica ou no Golgi, e a clatrina. So conhecidos h bastante tempo
dois complexos de adaptinas, o complexo AP1, que funciona no complexo
de Golgi, e o complexo AP2, que funciona na endocitose mediada por
receptor. Recentemente, mais dois complexos foram descobertos, o AP3,
envolvido na formao de lisossomas especiais, como os melanossomas, e
o complexo AP4, presente em neurnios.
CEDERJ 75

Assim, na sada do Golgi, formam-se vesculas transportadoras
que praticamente s contm enzimas lisossomais e se dirigem ao
endossoma tardio e depois ao lisossoma. Nesse caso, o receptor que
interage com as adaptinas do complexo AP1 o receptor de manose-6P
(aula 20). Voc no acha adequado que as enzimas lisossomais sejam
transportadas em vesculas exclusivas? Com o contedo concentrado,
outras protenas so excludas da vescula e no iro parar no lisossoma
por engano.
O mecanismo de concentrao de carga tambm muito adequado
formao de grnulos de secreo. Esses grnulos so formados no TGN e
contm grande quantidade de uma mesma carga. Podemos citar como exemplos
os grnulos dos mastcitos, que contm histamina, as vesculas sinpticas, que
contm acetilcolina, os grnulos de adrenalina etc. (Figura 25.6).
Figura 25.6: Um mastcito com o citoplasma carregado de grnulos de histamina,

antes (A) e depois (B) do estmulo para exocitose. Micrografias de Lawson et al., J.
Exp. Med. 142: 391, 1975.
Todos esses grnulos ficam estocados no citoplasma da clula

que os produziu at que um sinal vindo de fora seja transmitido ao
citoplasma (voc estudou esses mecanismos nas aulas 13 e 14) e
provoque a exocitose de muitos grnulos de uma vez s, aumentando
a concentrao do contedo do grnulo no meio extracelular ou at
na corrente sangunea. A exocitose de grnulos desse tipo chamada
secreo regulada, enquanto a exocitose de vesculas que no tm o
contedo concentrado, carregando novas molculas para a prpria
membrana, sem esperar ou depender de nenhum sinal, no passando
por nenhuma etapa de estocagem no citoplasma, chama-se secreo
constitutiva (Figura 25.7).
76 CEDERJ
seleo
25 MDULO 4
protenas misturadas
PARA
LISOSSOMAS
RE
AULA
SECREO CONSTITUTIVA
GOLGI
SECREO REGULADA
Figura 25.7: Distribuio de molculas

na regio trans do Golgi.
OUTROS REVESTIMENTOS
Seguindo a idia de que o revestimento de clatrina no serve
apenas para concentrar a carga, mas tambm contribui para a formao
da prpria vescula, os pesquisadores procuraram revestimentos
citoplasmticos em trechos do trfego intracelular que no envolvem
concentrao de contedo, apenas sua seleo.
A busca focalizou especialmente o trfego de vesculas entre
o retculo endoplasmtico e o complexo de Golgi. Nas vesculas que
brotam do retculo, foi encontrado o revestimento de COP II, e nas
vesculas que brotam da rede cis do Golgi, foi encontrado o revestimento
de COP I (Figura 25.8).
Figura 25.8: Micrografias

eletrnicas de vesculas
revestidas de clatrina
(A), COP I (B) e COP II (C).
As fotos esto na mesma
escala. A e B, de Orci et
al., Cell, 46:171, 1986; C,
foto de Barlowe e Orci.
Esses revestimentos tm muito em comum, apesar de as protenas

que formam cada um deles serem diferentes. O revestimento de COP
I formado por sete protenas, e o de COP II por quatro. Ambos tm
em comum o mecanismo de associao com a membrana de onde a
vescula vai brotar (compartimento doador): uma GTPase monomrica
serve como adaptadora do resto do revestimento.
CEDERJ 77

As GTPASE
MONOMRICA
que regulam o trfego intracelular
tm uma outra caracterstica em comum: so protenas ligadas

covalentemente a uma cadeia de cido graxo, o que lhes permite
inserir-se em membranas. A cadeia de cido graxo fica exposta quando
GTPASE
a protena est ligada a GTP e se esconde quando a protena est ligada
MONOMRICA
a GDP. Por isso, o estado ligado a GTP ativo e o ligado a GDP desliga
uma protena
formada por uma
nica cadeia que est
ligada a GTP e capaz
de hidroliz-lo. Assim
como as outras GTPases
que voc conheceu na
aula de sinalizao
celular (aula 13), essas
protenas esto ativas
quando ligadas a GTP e
ficam inativas depois de
hidroliz-lo.
a protena da membrana, inativando sua funo (Figura 25.9).
GDP
GTP
cadeia lipdica
Figura 25.9: Uma GTPase fica inativa quando est ligada a GDP e tem a cadeia
lipdica oculta em uma reentrncia da molcula, estando solvel no citoplasma da
clula. A mesma protena ligada a GTP expe a cadeia lipca e vai funcionar inserida
em uma membrana.
PARADINHA ESPER TA
Ateno! Para que a GTPase ligada a GDP passe a estar ligada a GTP,
preciso que o nucleotdeo inteiro seja retirado. Logo ele ser substitudo
por GTP, que muito mais abundante no citoplasma que a forma GDP. A
converso direta de GDP a GTP pelo acrscimo do terceiro fosfato demanda
energia e s acontece na mitocndria, como vamos ver nas prximas aulas.
Para a formao de um revestimento do tipo COP, preciso

que as adaptadoras desse revestimento, que so GTPases solveis no
citoplasma, tenham o GDP substitudo por GTP, para que exponham a
cadeia lipdica e possam inserir-se na membrana do compartimento de
onde a vescula vai brotar (Figura 25.10).
GTPase solvel no
citoplasma
GDP
GDP GTP
GTP
membrana do
compartimento de onde vai
brotar a vescula
GEF
78 CEDERJ
GTPase
inserida e ativa
Figura 25.10: Para que a

GTPase fique ativa, uma
protena da membrana
do compartimento doador rouba o GDP, que
logo substitudo por
GTP, ativando a GTPase. A
protena que rouba o GDP
conhecida como GEF, de
GTP exchanging factor.
25 MDULO 4
Depois de inserida na membrana, a GTPase vai servir de
AULA
adaptadora das outras protenas do revestimento (Figura 25.11). As

adaptadoras foram identificadas em leveduras e so semelhantes, mas
no iguais, nas vrias etapas do trfego de vesculas. A adaptadora de
COP I se chama ARF e a de COP II se chama Sar 1.
protenas do
revestimento
vescula brotando
Sar 1 - GTP
subunidades
de COP II
aA
CITOPLASMA
carga
transmembrana
carga transmembrana
carga solvel
LMEN
DO RE
b
B
chaperonas ligadas a
protenas malformadas
Figura 25.11: Em A, esquema representando apenas as protenas do revestimento, inclusive
a adaptadora inserida na membrana do compartimento doador. Em B, um brotamento de
vesculas no retculo endoplasmtico revestido por COP II e sua adaptadora Sar1, onde, alm
das protenas do revestimento, foram tambm representadas protenas transmembrana
e protenas solveis do lmen do compartimento doador que sero includas como carga
na vescula em formao e outras protenas, como chaperonas, por exemplo, que sendo
residentes no retculo no sero includas.
De novo as leveduras
Muitas etapas do trfego intracelular de vesculas foram primeiro identificadas em
leveduras. A razo disso que muito mais fcil produzir nesses fungos mutantes
estveis deficientes em alguma etapa do trfego intracelular. Correlacionando o
fentipo do mutante, ou seja, a etapa que ele no consegue fazer, com o gene
que foi deletado pode-se inferir qual o papel da protena que est faltando. Os
mutantes de levedura deficientes na secreo celular foram classificados como
mutantes sec. A maioria das protenas de mamfero que funcionam no trfego de
vesculas tem uma protena correspondente em leveduras classificada como sec.
CEDERJ 79

Ao contrrio do revestimento de clatrina, que despolimeriza logo
que a vescula se solta do compartimento doador, as COPs continuam
revestindo as vesculas at que elas atinjam seu destino. Por isso, quando
os revestimentos do tipo COP foram descobertos, tentou-se correlacionar
as etapas do trfego em que cada um deles ocorria com a direo que a
vescula iria seguir, antergrada ou retrgrada. Depois, com tantas etapas
identificadas, essa idia no ficou muito clara (Figura 25.12).
via endoctica
LEGENDA
clatrina
COP I
COP II
secreo constitutiva
MP
secreo regulada
RE
GOLGI
Figura 25.12: As etapas do trfego e os revestimentos que as regulam.
FUSO DE MEMBRANAS E A ESPECIFICIDADE DO TRFEGO

DE VESCULAS
Por que as vesculas s se fundem com o compartimento a que esto
destinadas? O que significa estarem destinadas? Cada vescula tem em sua
membrana, voltado para o citoplasma, um conjunto de marcadores que ser
reconhecido por marcadores complementares no compartimento-alvo (Figura
25.13). Assim, todas as vesculas se fundiro ao compartimento certo.
Os dois tipos mais importantes de marcadores de membrana das
vesculas e compartimentos celulares so as SNAREs e as Rabs.
Compartimento A
Compartimento
doador
Compartimento B
80 CEDERJ
Figura 25.13: Duas vesculas que tiverem brotado do mesmo compartimento doador, mas carregando
marcadores diferentes, vo se fundir com compartimentos-alvo diferentes, onde cada uma encontrar
marcadores complementares.
25 MDULO 4
AULA
SNARES
As SNAREs so protenas de cadeia longa e superespiralada
responsveis pelo reconhecimento entre vesculas e compartimentos e
tambm pela prpria fuso entre suas membranas. Elas esto presentes
tanto na membrana da vescula quanto na membrana do compartimento
receptor. A SNARE do compartimento doador, que vai ser includa na
vescula que est brotando, dita v-SNARE (de vesicle SNARE) e a
SNARE complementar que est na membrana do compartimento-alvo
a t-SNARE (de target SNARE) (Figura 25.14).
Figura 25.14: O reconhecimento entre v-SNARE e

t-SNARE o responsvel
pela especificidade da
fuso entre vesculas e
compartimentos.
Compartimento
doador
Compartimento A
t-SNARE
carga A
v-SNARE
carga B
t-SNARE
Compartimento B
As SNAREs j tinham sido identificadas em leveduras (pelo

mtodo da seleo de mutantes) e em neurnios de mamfero (veja o
box). Sua semelhana com protenas virais que promovem fuso de
membrana fez com que durante alguns anos se acreditasse que tinham
apenas essa funo. Lipossomas (vesculas compostas apenas por
bicamada lipdica, sem protenas) a que se adicionaram apenas SNAREs
fundiram-se in vitro. Esses experimentos mostraram que apenas essas
protenas j eram suficientes para conferir especificidade aos eventos
de fuso. Traduzindo: para que dois lipossomas se fundissem era
necessrio que estivessem carregando SNAREs complementares.
CEDERJ 81
A liberao de neurotransmissores depende das SNAREs

O mecanismo de estocagem de vesculas sinpticas no terminal pr-sinptico e sua
exocitose regulada na membrana do neurnio tem sido objeto de intensos estudos
(voc vai saber muito mais sobre o assunto em uma aula dedicada aos neurnios, em
Biologia Celular II). Associados aos estudos genticos em levedura e aos experimentos
de fuso de vesculas in vitro, os resultados obtidos em neurnio formam todo o
conjunto de conhecimentos atuais sobre o assunto. A estrutura do complexo
SNARE formado antes da fuso de vesculas foi resolvido pelo seqenciamento
das protenas envolvidas e modelagem molecular de sua interao (Figura 25.15).
t-SNARE
(sinaptobrevina)
CITOPLASMA
t-SNARE
(sanap-25)
membrana plasmtica
do neurnio
t-SNARE
(sintaxina)
Figura 25.15: Quando uma vescula sinptica vai ser exocitada, a sinaptobrevina (vSNARE) que est em sua membrana ser reconhecida pela sintaxina e pela snap-25
(t-SNAREs) que esto na face citoplasmtica da membrana do neurnio.
A fuso de membranas pode ser dividida em duas etapas:

1) ancoramento (docking): as SNAREs da vescula e do comparFigura 25.16: Etapas da
fuso entre duas vesculas,
que levam cargas diferentes, a seus respectivos
compartimentos-alvo. Note
que depois da fuso propriamente dita o complexo
v-SNARE e t-SNARE fica no
mesmo compartimento.
timento se reconhecem e a vescula ali se ancora (Figura 25.16).
1 - RECONHECIMENTO
complexo v-t-SNARE
82 CEDERJ
2 - FUSO
complexo v-t-SNARE
25 MDULO 4
2) fuso propriamente dita: as SNAREs mudam de conformao
AULA
puxando as membranas da vescula e do compartimento uma de encontro

outra, tornando-as to prximas que a gua que separa as duas bicamadas
excluda, possibilitando a fuso. O prprio processo de fuso das duas
bicamadas passa por etapas, mas estas so to rpidas que ainda no possvel
discriminar experimentalmente, sendo estudadas por hipteses baseadas nas
propriedades fisico-qumicas das bicamadas lipdicas (Figura 25.17).
H2O
H 2O
H 2O
H2O
Figura 25.17: As etapas

hipotticas do processo
de fuso de membranas. Em A, a vescula
se aproximou do compartimento-alvo e os
complexos v-t SNARE se
reconheceram, levando a
uma mudana de conformao que os aproxima
(b), chegando a excluir
a gua da rea entre as
duas membranas. Com o
contato estreito forado
pelas SNAREs, forma-se
um poro de fuso (c),
que transforma as duas
bicamadas em uma s
(d), que termina por se
romper (e).
H2O
H2O
H
O
H2O
2
H2O
H2O H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
a
A
H2O
H2O
H2O
H2O
H 2O
dD
B
b
eE
10nm
Volte Figura 25.16 e repare que as duas SNAREs, a que veio com
a vescula e a que estava no compartimento, passaram a estar na mesma
membrana, o que inviabiliza sua funo. Para separ-las, necessrio ATP
e o trabalho de protenas auxiliares. A mais conhecida chamada NSF,
uma espcie de chaperona solvel no citoplasma, que pode agir, com a
ajuda de protenas adaptadoras, na separao de complexos v-t SNARE
de qualquer membrana (Figura 25.18). Depois de separar o complexo,
a SNARE que veio com a vescula pode voltar ao seu compartimento de
origem, numa nova vescula que vai brotar, fazendo o caminho de volta.
complexo
v-t SNARE
NSF
adaptadoras
RECONHECIMENTO FUSO
SNARE
desacopladas
Figura 25.18: O mecanismo de separao das SNAREs.

CEDERJ 83
A ESPECIFICIDADE DOS PROCESSOS DE FUSO DE

VESCULAS TEM GARANTIAS: O PAPEL DAS RABS
As Rabs tambm so marcadores de vesculas, assim como as
SNAREs, e agem em conjunto com elas para garantir a especificidade
do processo de fuso, ou seja, para garantir que uma vescula no
v se fundir acidentalmente com o compartimento errado. Rabs so
GTPases monomricas que tm uma cadeia lipdica exposta no estado
ativo ligado a GTP e escondida no estado inativo ligado a GDP
quando ento a Rab fica solvel no citoplasma, exatamente como na
Figura 25.9. Veja na Figura 25.19 como as Rabs agem em conjunto
com as SNAREs.
Figura 25.19: No compartimento doador, a

Rab ser ativada por
uma GEF (como na
figura 25.10), que rouba
seu GDP e substitui
por GTP, causando a
exposio da cadeia
lipdica e a conseqente
insero na membrana
daquele compartimento
( a membrana que
est mais perto e a
cadeia lipdica preci-sa
se esconder da gua
rpido!).
No
compartimento-alvo a Rab
ser reconhecida por
uma molcula que vai
prend-la, funcionando
como receptor, e depois
estimular sua atividade
GTPsica. Ao hidrolizar o
GTP, a Rab volta ao estado
solvel no citoplasma.
Rab ativa
2
v-SNARE
Rab inativa
1
CITOPLASMA
RECONHECIMENTO
FUSO
COMPARTIMENTO ALVO
Nem todas as funes das Rabs so conhecidas. Enquanto uma

Rab est ativada e inserida em uma membrana, ela pode ativar outras
molculas, que so ditas efetoras de Rab. Dentre os efetores de Rab,
supe-se que estejam as molculas que interagem com as protenas
motoras e fazem as vesculas deslizarem ao longo de microtbulos.
84 CEDERJ
25 MDULO 4
Sopa de letrinhas
AULA
Voc achou complicados os nomes das molculas nesse assunto de fuso de

membranas? Realmente fica mais fcil de entender esses nomes se a gente sabe
de onde eles saram. Um dos primeiros resultados dos experimentos programados
para estudar os fatores que regulam a fuso entre os compartimentos celulares
foi usando uma droga que bloqueava completamente todos os processos
de fuso de membrana, a N-etilmaleimida. O prximo passo foi identificar a
molcula que era sensvel a essa droga: era o NSF, fator sensvel a N-etilmaleimida
(N-etilmaleimide sensitive factor). Mais alguns estudos e descobriram que
o NSF no agia sozinho, precisava de auxiliares, que foram coletivamente
chamadas SNAP (soluble NSF adaptor proteins, protenas solveis adaptadoras
de NSF). Pouco tempo depois, foram identificadas, sempre em leveduras ou
neurnios, as protenas de membrana s quais o NSF e o SNAP se acoplavam:
finalmente eram descobertas as SNARE (SNAP receptors, receptores de SNAP).
Rabs, uma grande famlia

As Rabs e as adaptadoras de COP I e II (chamam-se ARF e Sar1, respectivamente)
so componentes da superfamlia Ras das GTPases monomricas, qual tambm pertencem outras molculas que voc j conhece, como a prpria Ras
(aula 14), a dinamina (aula 20), a tubulina (aula 23), e outras que voc ainda
vai conhecer em Biologia Celular II, como Rac e Rho (funcionam no controle
do ciclo celular) e Ran (funciona no transporte entre ncleo e citoplasma).
Elas tm em comum a caracterstica de funcionarem como um interruptor
molecular, que liga quando associado a GTP e desliga quando associado a GDP.
Com quase 40 membros conhecidos, a subfamlia das Rab sem dvida a maior de todas. Cada compartimento celular tem pelo menos
uma Rab caracterstica em sua membrana. Veja quadro 25.1 a seguir.
Protena
Organela
Rab 1
Retculo e Golgi
Rab 2
Rab 3A
Rab 4
Rab 5A
Rab 5C
Rab 6
Rab 7
Rab 9
Rede cis do Golgi

Vesculas sinpticas, grnulos de secreo
Endossoma de reciclagem
Membrana plasmtica, vesculas revestidas de clatrina
Endossoma inicial
Golgi medial e trans
Endossoma tardio
Endossoma tardio
Rab 11
Endossoma de reciclagem
CEDERJ 85
RESUMO
O trfego intracelular de vesculas est organizado em duas direes:

TRFEGO RETRGRADO
TRFEGO ANTERGRADO
(setas cheias)
(setas pontilhadas)
Membrana plasmtica
retculo endoplasmtico
endossoma inicial
complexo de Golgi
endossoma tardio
lisossomas
grnulos de secreo
membrana plasmtica
As setas maiores representam a direo majoritria e as menores representam

trfego em menor escala, geralmente vias de reciclagem.
O trfego retrgrado depende de microtbulos.
A secreo de vesculas da rede trans do Golgi para a membrana plasmtica pode ser:
constitutiva, reciclando elementos da prpria membrana;
regulada, ficando estocada no citoplasma, aguardando um sinal para
exocitose.
Alm da via endoctica, o revestimento de clatrina tambm funciona no complexo
de Golgi, concentrando o contedo de vesculas de secreo regulada ou que vo
para os lisossomas.
Os revestimentos de COP I e II funcionam selecionando a carga que ser includa
em vesculas que brotam do retculo e do complexo de Golgi, mas no concentram
o contedo.
As vesculas possuem marcadores moleculares em sua face citoplasmtica.
Esses marcadores regulam a especificidade do trfego e medeiam a fuso de
vesculas.
86 CEDERJ
25 MDULO 4
AULA
Os marcadores de vesculas do tipo SNARE promovem a fuso das membranas

aproximando as bicamadas at que se fundam.
Os marcadores Rab garantem a especificidade do trfego e identificam os
compartimentos.
CEDERJ 87
objetivos
AULA
Mitocndria
26

Conhecer as principais caractersticas das membranas
e compartimentos mitocondriais.
Discutir a origem simbitica de mitocndrias e
cloroplastos.
Pr-requisitos
Conhecer as caractersticas
de fluidez e permeabilidade
das membranas biolgicas.
Saber as caractersticas de
eucariotos e procariotos.
Biologia Celular I | Mitocndria

INTRODUO
Muito antes do surgimento dos seres eucariontes, todas as reaes metablicas

que resultam na gerao de energia j eram executadas em sistemas procariontes ou mesmo pr-biticos. Nos seres vivos atuais, a energia produzida
nesses sistemas armazenada em molculas como o ATP e o NADH.H+ e utilizada para gerao de calor (nos seres homeotrmicos), movimentos (como o
batimento ciliar), na sntese de novas molculas e outros processos essenciais
para a manuteno da vida celular. Duas organelas se destacam na produo
de ATP para as clulas: mitocndrias e cloroplastos. Estes ltimos, voc sabe,
s existem nos vegetais e sero estudados mais adiante neste mesmo mdulo.
Nesta aula e na prxima, vamos tratar das mitocndrias.
Na disciplina de Bioqumica, voc viu que as mitocndrias produzem ATP, a
principal molcula armazenadora de energia, em dois conjuntos de reaes: o
ciclo de Krebs e a cadeia respiratria.
As mitocndrias esto entre as organelas mais conhecidas, sendo estudadas
h muito tempo. A razo do interesse to antigo por essa organela pode estar
baseada em dois fatores:
a facilidade com que as mitocndrias podem ser visualizadas, j que esto
acima do limite de resoluo do microscpio ptico;
so muito antigos os registros do consumo de O2 e liberao de CO2 por clulas
vivas, assim como a associao dessa atividade com a produo de ATP.
Mitocndria, ontem e hoje

Mais de 100 anos aps sua descoberta, sabemos muito sobre a produo
de ATP nas mitocndrias e conhecemos sua enorme importncia para a
sobrevivncia das clulas. No entanto, essa interessante organela ainda pode
nos surpreender: h menos de 10 anos foi descoberto e vem sendo estudado
seu papel central na morte celular programada; ainda h muito por descobrir,
como voc vai saber em Biologia Celular II.
AS MITOCNDRIAS EXISTEM EM TODAS AS CLULAS EUCARITICAS?

As mitocndrias esto presentes no citoplasma de quase todas as
clulas eucariticas, incluindo animais, vegetais, fungos, protozorios e
algas. As excees so protozorios que vivem em ambientes anaerbicos:
amebas, Giardia e Trichomonas.
90 CEDERJ
26 MDULO 5
Como j mencionamos anteriormente, possvel observar
Pelo menos dois grupos
mitocndrias ao microscpio ptico sem qualquer tipo de processamento
de PROTOZORIOS, os
tripanosomatdeos que
incluem o Trypanosoma
cruzi, agente da
doena de Chagas, e
as Leishmanias, que
causam as leishmanioses
tegumentar e visceral
e os Apicomplexa que
incluem Toxoplasma
e Plasmodium,
agentes causadores,
respectivamente,
da toxoplasmose
e da malria
possuem apenas
uma mitocndria.
Nesses protozorios, a
mitocndria bastante
grande e pode ser
ramificada.
ou colorao porque seu tamanho, entre 0,5 e 1m, est acima do limite
de resoluo do microscpio. Alm disso, a observao de mitocndrias
tambm foi facilitada pela descoberta de que um corante histolgico,
o verde Janus, associa-se especificamente a essa organela. Mas, para
usar o corante, as clulas precisam ser fixadas; portanto, estaro mortas
quando forem observadas. Assim, foi possvel observar que o nmero de
mitocndrias variava entre diferentes tipos celulares; da mesma forma,
tambm era evidente que algumas mitocndrias eram mais arredondadas,
outras mais alongadas. A maioria dos tipos celulares possui muitas
mitocndrias, de novo com exceo de alguns PROTOZORIOS (vide box).
MITOCNDRIAS EM MOVIMENTO
Depois que foi possvel observar as mitocndrias em clulas vivas,
os pesquisadores se surpreenderam com a dinmica dessas organelas:
CORANTE VITAL
elas se dividem por fisso e tambm se fundem com muita freqncia,
aquele que s cora

clulas vivas. Existe
ainda outra classe de
corante que evidencia
clulas vivas: os
corantes de excluso.
As clulas vivas so
capazes de impedir a
entrada dos corantes
de excluso, que assim
s entram em
clulas mortas.
de modo que o nmero de mitocndrias numa clula o resultado do

equilbrio entre a fisso e a fuso das vrias mitocndrias existentes.
O aperfeioamento das tcnicas de videomicroscopia e a descoberta
de um
CORANTE VITAL
fluorescente, a rodamina 123, que se concentra
em mitocndrias apenas se elas estiverem funcionando, permitiu a

observao da distribuio das mitocndrias nas clulas, seu formato
alongado, o equilbrio dinmico entre fisso e fuso das organelas e seu
deslocamento, rpido e direcionado.
CEDERJ 91
AULA
MITOCNDRIAS EM FORMAS E NMEROS

Usando a rodamina 123, foi possvel observar que as mitocndrias
so capazes de se deslocar usando microtbulos como trilhos (Figura 26.1)
e, diferentemente de outras organelas que tambm se deslocam usando
o citoesqueleto (por exemplo, vesculas secretrias), as mitocndrias
se deslocam nas duas direes, para a extremidade minus ou para a
extremidade plus, associando-se ora dinena ora kinesina.
Figura 26.1: Distribuio das mitocndrias (a) num fibroblasto vivo corado com
rodamina 123. Note o formato alongado das organelas. Depois de fixada, a mesma
clula foi incubada com anticorpos antitubulina num procedimento de imunofluorescncia (b), que revelou a grande coincidncia entre a distribuio de mitocndrias
e microtbulos. Fotos: Lan Bo Chen.
Evidentemente, a ultra-estrutura das mitocndrias s pode ser

observada ao microscpio eletrnico. Em cortes ultrafinos, observamos que
as mitocndrias possuem duas membranas, a mais interna, com invaginaes
chamadas cristas, e uma matriz eletrondensa (Figura 26.2).
Figura 26.2: Micrografia

eletrnica de transmisso
de um corte ultrafino de
mitocndria. Note as
invaginaes da membrana mitocondrial interna,
formando as cristas, e a
matriz eletrondensa.
Foto: Daniel Friend.
No entanto, s a observao em microscpio de alta voltagem

(veja a Aula 2) permitiu a visualizao do formato alongado e fino das
mitocndrias, com ramificaes que podem ser processos de fisso ou
de fuso (Figura 26.3).
92 CEDERJ
O nmero de MITOCNDRIAS presentes no citoplasma de uma clula

eucaritica pode variar de algumas dezenas a milhares, dependendo
da necessidade de energia daquele tipo celular naquele momento. Se a
demanda por ATP se mantiver alta por algum tempo, a quantidade de
mitocndrias aumentar.
PARA ONDE SE MOVEM AS MITOCNDRIAS?

Voc pode notar, comparando as Figuras 26.1 e 26.3, que o
posicionamento das mitocndrias no citoplasma das clulas varia muito.
Na Figura 26.4, esquematizamos a distribuio de mitocndrias nos
dois tipos celulares das fotos citadas.
Figura 26.4: Em clulas como os fibroblastos (a) as mitocndrias se distribuem

acompanhando os microtbulos. J no epitlio de absoro (b), as mitocndrias se
concentram na regio apical, onde ocorre a absoro de nutrientes.
26 MDULO 5
AULA
Figura 26.3: Mitocndrias

alongadas em clulas de
epitlio de caramujo observadas ao microscpio de alta
voltagem. As mitocndrias
so muito mais eletrondensas do que o citoplasma e se
concentram na regio apical
da clula. possvel observar
cristas e ramificaes.
Foto de Pierre Favard.
A MULTIPLICAO
DAS MITOCNDRIAS
Como assim, a
quantidade de
mitocndrias
aumenta? Quer dizer
que elas proliferam?
Sim! Elas se dividem
independentemente
do ciclo celular, ou
seja, de modo no
coordenado com a
diviso da prpria
clula. Claro que
voc lembrou que
as mitocndrias tm
DNA! Voc tambm j
conhece a hiptese de
que as mitocndrias
se originaram
de procariotos
fagocitados pelo
eucarioto ancestral (ou
clula pr-eucaritica,
reveja a Figura 15.3,
na Aula 15) que se
tornaram simbiontes.
Ao longo desta aula,
vamos colecionar
semelhanas e
diferenas entre
mitocndrias e
procariotos. Segure s
um pouquinho mais
a curiosidade que a
gente j vai conversar
sobre isso, mais
adiante.
CEDERJ 93

No apenas isso, na maioria das clulas, elas se deslocam muito,
como se corressem ao longo dos microtbulos para atender necessidade
de ATP em diferentes pontos da clula (Figura 26.4a). Em alguns tecidos,
essa necessidade alta (Figura 26.4b) e muito localizada, fazendo com
que as mitocndrias fiquem paradas nesses locais. O parada est
entre aspas porque mitocndrias na verdade nunca esto paradas;
mesmo sem se deslocar, elas tm uma vibrao que resulta do grande
movimento de cargas associado s suas membranas, como veremos na
prxima aula. Bons exemplos de clulas em que as mitocndrias esto
imobilizadas so o espermatozide e o tecido muscular cardaco. No
espermatozide (Figura 26.5), todas as mitocndrias se encontram na
cauda, isto , no flagelo, enroladas ao redor do axonema. Como voc
provavelmente sabe, um espermatozide precisa nadar sem parar no
trato urogenital feminino, buscando o vulo. Para garantir que no falte
ATP para as dinenas flagelares (veja a Aula 23), as mitocndrias esto
bem ali ao lado. Essa localizao das mitocndrias do espermatozide
somente no flagelo tem uma conseqncia interessante: como na maioria
dos processos de fertilizao dos mamferos o flagelo do espermatozide
no entra no ovcito, todas as mitocndrias do zigoto sero herdadas
da me (herana uniparental).
a
(a)
b
(b)
Figura 26.5: Esquema (a) e micrografia (b) mostrando mitocndrias ao redor do axonema do flagelo do espermatozide. Foto da coleo do Laboratrio de Microscopia
Eletrnica da Uerj.
94 CEDERJ
26 MDULO 5
No corao, as mitocndrias ficam comprimidas entre as
AULA
miofibrilas do msculo cardaco, garantindo que no falte ATP para

a contrao. O substrato para a produo de ATP tambm pode estar
associado, na forma de gotculas de gordura (Figura 26.6). Voc j pensou
se para contrair o msculo cardaco dependesse da chegada de ATP por
difuso, a partir de mitocndrias que estivessem distantes?
b
(b)
Figura 26.6: Esquema (a) e micrografia

(b) mostrando mitocndrias comprimidas entre as miofibrilas cardacas,
prximas a gotculas de lipdeo.
a
(a)
PRINCIPAIS CARACTERSTICAS DAS MEMBRANAS E COMPARTIMENTOS MITOCONDRIAIS

As mitocndrias so delimitadas por duas membranas no coladas,
uma externa e uma interna, que assim definem dois compartimentos, o
espao intermembranar e a matriz mitocondrial. As principais caractersticas
de cada um desses componentes foram estudadas separadamente, em
experimentos de fracionamento celular (Figura 26.7). Em seguida,
examinaremos essas caractersticas.
CEDERJ 95
Figura 26.7: Separao

dos componentes mitocondriais por fracionamento celular.
Membrana mitocondrial externa uma membrana cuja

DALTON
bicamada lipdica no possui caractersticas especiais, assemelhando-
uma unidade
de massa ou
raio molecular,
que expressa a
velocidade com
que uma molcula
sedimenta por
ultracentrifugao.
A velocidade de
sedimentao varia
tambm com as
caractersticas do
lquido em que
ela est dissolvida
(densidade,
viscosidade), e
a velocidade de
ultracentrifugao.
se bicamada lipdica do retculo endoplasmtico. J as protenas
96 CEDERJ
inseridas nessa membrana so especiais. Podemos citar como tpica dessa

membrana e essencial para o funcionamento da organela a presena da
porina. A porina uma protena transmembrana (reveja a Figura 8.8)
que tem uma conformao tridimensional to diferente que forma um
poro hidroflico, permitindo a passagem de molculas com at 5000
DALTONS pela membrana mitocondrial externa. Ou seja, devido presena
da porina, a membrana mitocondrial externa no forma uma barreira

para ons e pequenas molculas. Curiosamente, a porina da membrana
mitocondrial externa muito similar a protenas formadoras de poros
encontradas na membrana de bactrias Gram negativas.
26 MDULO 5
Alm da porina, a membrana externa da mitocndria possui com-
AULA
plexos transportadores que reconhecem seqncias sinalizadoras para

importao de protenas e as transportam do citoplasma para dentro da
mitocndria. Vamos conhecer mais sobre esses complexos adiante.
Espao intermembranar como a membrana externa no forma
uma barreira, a composio inica desse compartimento semelhante
do citoplasma. Esse espao nada teria de especial, no fosse a presena dos
complexos enzimticos de interconverso de nucleotdeos. Parece complicado?
Na verdade s as palavras so complicadas. Voc j viu, em Bioqumica, e
vamos relembrar na prxima aula, que o metabolismo mitocondrial produz
muito ATP, mas s uma molcula de GTP por volta do ciclo de Krebs. Voc
j sabe tambm que a clula usa GTP e outros nucleotdeos trifosfatados em
vrios processos de sinalizao interna para polimerizar microtbulos, para
transportar vesculas etc. Claro que a produo mitocondrial de GTP no ia dar
nem para a sada! Mas a esperta da mitocndria consegue transferir o fosfato
do ATP diretamente para um GDP, formando GTP (e ADP, claro, mas este volta
para a matriz mitocondrial para ser refosforilado). Isso tambm funciona para
formar CTP e UTP, nucleotdeos usados na adio de acares. Essa converso
irreversvel, isto , os outros nucleotdeos no conseguem devolver o fosfato
para o ADP. Os complexos enzimticos que fazem isso so solveis, mas so
grandes demais para sair pela porina, e assim ficam presos logo ali no espao
entre as membranas (Figura 26.8), esperando os ATPs recm-formados para
roubar o fosfato de alguns e transferir para GDP, CTP e UTP (no parece
O AT P, a d e n o si n a
trifosfato, o nucleotdeo fosfatado mais
conhecido na gerao
de energia. Alm
dele, existem tambm
o G T P, g u a n i d i n a
trifosfato, importante
na polimerizao de
microtbulos e na
sinalizao celular; o
CTP, citosina trifosfato,
e o U T P, u r i d i n a
trifosfato, que atuam
na adio de acares.
a histria do Robin Hood, que tirava dos ricos para dar aos pobres?).
Figura 26.8: Os complexos enzimticos existentes no espao intermembranas transferem

o fosfato de parte do ATP produzido para outros nucleotdeos, como o UDP e o GDP.
CEDERJ 97

Membrana mitocondrial interna essa membrana, sim, muito
especial. a bicamada lipdica mais fluida e menos permevel de uma
clula. Voc lembra que as membranas so tanto mais fluidas quanto mais
fosfolipdeos com cadeias de cido graxo curtas e insaturadas e menos
colesterol tiverem? A bicamada da membrana mitocondrial interna tem
fosfolipdeos com essas caractersticas e no possui nenhum colesterol.
importantssimo que ela seja bastante fluida porque o funcionamento da
cadeia transportadora de eltrons depende do choque entre as molculas.
J a quase impermeabilidade (quase, porque a membrana mitocondrial
interna permevel gua e a gases, como O2, CO2 e NO) atribuda
a um fosfolipdeo especial: a cardiolipina. A cardiolipina tem esse nome
porque foi descrita primeiro em mitocndrias do msculo cardaco, mas
depois foi encontrada em todas as mitocndrias. Esse fosfolipdeo
resultado da juno de duas fosfatidilcolinas, formando um fosfolipdeo
com quatro cadeias de cido graxo ( quadrpede!). Dessa forma, a rea
ocupada pela cabea polar corresponde ao dobro do nmero de cadeias
hidrofbicas na regio hidrofbica da membrana (Figura 26.9).
Figura 26.9: Esquema comparativo dos fosfolipdeos fosfatidilcolina, cardiolipina

(verde) e uma bicamada lipdica semelhante membrana mitocondrial interna.
Quando se faz uma extrao bioqumica que separa os lipdeos e

as protenas da membrana mitocondrial interna e depois se seca e pesa
o contedo, constata-se que essa membrana tem muito mais protenas
do que lipdeos. a maior relao protena/lipdeo da clula (70/30).
No difcil imaginar por que a membrana mitocondrial interna tem
tantas protenas:
nela que ocorre a cadeia transportadora de eltrons, e seus
componentes so protenas da membrana interna;
na membrana interna que est a enzima que sintetiza ATP, a
ATP sintase, em grande nmero de cpias;
98 CEDERJ
26 MDULO 5
se a bicamada lipdica da membrana interna bastante imper-
AULA
mevel e, no entanto, preciso que muitas molculas cheguem matriz

e de l saiam atravessando essa membrana, ela tem de ter muitos transportadores, carreadores etc.
Matriz mitocondrial o contedo da matriz mitocondrial to
concentrado que no se espalha logo que a membrana mitocondrial
interna rompida, como representado na Figura 26.7. A matriz como
um colide que vai se dispersando devagar. Como est isolada por uma
membrana bastante impermevel, a matriz mitocondrial tem composio
inica muito particular. Seu pH, por exemplo, bem maior que o do
citoplasma, cerca de 8, porque a cadeia respiratria bombeia prtons
para fora da mitocndria, alcalinizando a organela (mas sem acidificar
o citoplasma, j que o volume deste muito maior).
O estado fsico coloidal da matriz resultado de uma grande
concentrao de macromolculas, em que se destacam:
a) protenas solveis:
as enzimas do ciclo de Krebs;
as enzimas que fazem a -oxidao dos cidos graxos;
a piruvato desidrogenase, complexo enzimtico muito grande
e abundante que essencial para o funcionamento do ciclo de Krebs a
partir de glicose (e que vamos ver na prxima aula);
b) cidos nuclicos:
DNA;
RNAs: ribossomais (rRNA), transportador (tRNA), e o equivalente ao mensageiro (mRNA).
Na prxima aula, vamos abordar o metabolismo mitocondrial,
com as protenas e enzimas que dele participam, do ponto de vista celular.
Por ora, vamos nos deter nos cidos nuclicos encontrados na matriz
mitocondrial.
O GENOMA DAS MITOCNDRIAS E CLOROPLASTOS

A descoberta de que mitocndrias e cloroplastos (Aulas 28 e 29)
possuem cidos nuclicos (DNA e RNA) despertou enorme curiosidade
entre os pesquisadores. Procuramos incluir nesta aula algumas das concluses dessas pesquisas, que tiveram enorme influncia na elaborao
das teorias sobre a evoluo da vida em nosso planeta.
CEDERJ 99

De novo, os
protozorios!
Por alguma razo, nos
tripanosomatdeos, os
crculos de DNA esto
presos uns aos outros
como os elos de uma
corrente. Por isso,
formam um aglomerado
eletrondenso na regio
da mitocndria que
fica prxima base
do flagelo (Figura
26.10b). Devido a essa
proximidade, pensava-se
que era uma estrutura
ligada ao batimento
flagelar e deu-se a ela
o nome de cinetoplasto
(que significa corpsculo
do movimento). Nesses
protozorios, os genes
contidos no cinetoplasto
parecem ter relao
com a infectividade do
parasito e so muito
estudados.
Diferentemente do DNA nuclear, nas mitocndrias e nos

cloroplastos essas molculas so circulares (Figura 26.10a) e no possuem
histonas, como o DNA de procariotos. Em cada organela, esto presentes
vrias molculas de DNA iguais que geralmente esto associadas em
pequenos grupos espalhados pela matriz mitocondrial (e pelo estroma
dos cloroplastos).
Figura 26.10: Micrografias de um crculo de DNA mitocondrial isolado (a) e do cinetoplasto (seta em b) do Trypanosoma cruzi, formado por vrios crculos associados; M,
mitocndria; N, ncleo. Foto a, de David Clayton; foto b, de Isabel Porto Carreiro.
As muitas molculas de DNA de uma mitocndria so produzidas por replicao. No entanto, a replicao do DNA de mitocndrias
e cloroplastos no est regulada pelos mesmos mecanismos que a
replicao do DNA nuclear. Alm de replicadas, as molculas de
DNA de mitocndrias e cloroplastos tambm so transcritas por
enzimas prprias das organelas, produzindo RNAs que, por sua vez,
so traduzidos por ribossomos tambm nas prprias organelas.
Os ribossomos de mitocndrias e cloroplastos so diferentes
dos ribossomos citoplasmticos. Especialmente os dos cloroplastos
so semelhantes aos ribossomos de bactrias e conseguem at mesmo
funcionar em conjunto com enzimas ou tRNA de bactrias. Quando a
sntese de protenas em mitocndrias e cloroplastos comea, o primeiro
aminocido da cadeia sempre formil-metionina, como nos procariotos,
enquanto nos eucariotos o primeiro aminocido sempre metionina.
Apesar dessas diferenas e do descompasso na replicao, a traduo
nas mitocndrias tem de ser bastante coordenada com a que ocorre no
citoplasma, j que a grande maioria das protenas das mitocndrias est
codificada no ncleo. Os poucos genes presentes na organela codificam
100 CEDERJ
26 MDULO 5
para subunidades de enzimas mitocondriais que dependem da chegada,
AULA
vindas do citoplasma, de outras subunidades da mesma protena para

poder montar a enzima funcional.
Nem tudo igual!

Alm das muitas semelhanas com os cidos nuclicos e as enzimas
de procariotos, existem diferenas marcantes tambm. Talvez a maior
delas esteja no cdigo gentico. No cdigo nuclear de todas as espcies,
o significado de alguns CDONS bastante conservado.
No genoma mitocondrial de animais e fungos, o cdigo universal para fim de leitura (stop codon), por exemplo, no tem esse significado, codificando para o aminocido triptofano. J no genoma das
mitocndrias de plantas, o significado tambm parada de leitura.
CDON
Conjunto de trs
bases nitrogenadas,
codificando um
aminocido, o incio
ou o fim da leitura.
O RNA das mitocndrias e cloroplastos mais permissivo no

pareamento com os cdons. Enquanto nos eucariotos e procariotos cada
cdon tem um significado, nas organelas a terceira base pode variar, sem
mudar o significado. Isso permite usar menos tRNA diferentes (so 22
nas mitocndrias e 30 no citoplasma). Por isso, os bilogos moleculares dizem que o cdigo gentico das mitocndrias mais relaxado, no
sentido de menos exigente.
O genoma de mitocndrias e cloroplastos pode ter tamanhos muito
diferentes, sendo o dos cloroplastos geralmente maior. Numa mesma
planta, o genoma da mitocndria pode ter cerca de 200 mil pares de
bases, enquanto o do cloroplasto tem 250 milhes de pares de bases.
Os menores genomas de organelas so os das mitocndrias de
animais, que tm entre 16 e 19 mil pares de bases. O genoma da mitocndria humana, por exemplo, bem pequeno e j foi completamente
seqenciado.
CEDERJ 101
O genoma mitocondrial humano

O seqenciamento completo do genoma mitocondrial humano mostrou que ele
formado por dois genes que codificam para RNA ribossomal, 22 genes que codificam
para RNA transportador e 13 genes que codificam para protenas. Sua caracterstica
mais marcante (comum a vrios genomas mitocondriais) que todos os 16.569
nucleotdeos presentes fazem parte de algum gene, ou seja, no h regies no
codificantes nem espao para regies reguladoras. Ao mesmo tempo, apresenta alta
taxa de substituio de nucleotdeos, cerca de 10 vezes maior que a taxa nuclear.
Por isso, a comparao de seqncias mitocondriais humanas tem sido muito til
no estudo da migrao de populaes.
O seqenciamento do genoma mitocondrial teve grande impulso depois da
guerra do Vietn porque, pressionado pelas famlias dos soldados mortos que
no aceitavam os tmulos do soldado desconhecido, o exrcito americano
financiou e executou um grande trabalho de anlise do DNA mitocondrial
dos soldados mortos. A razo do interesse que o DNA mitocondrial o mais
adequado para a identificao de cadveres muito destrudos. Por ser menor,
est menos sujeito a quebras; por ser circular, mais fcil saber se a molcula est
completa; por estar presente em mais de mil cpias por clula, mais fcil de ser
encontrado; por ser herdado apenas da me, as comparaes para identificao
so mais fceis. Depois da metodologia estabelecida, o DNA mitocondrial j foi
usado para identificao de cadveres muito antigos ou destrudos (como os
restos mortais da famlia do ltimo czar russo) e vem sendo freqentemente
usado em gentica forense (como, por exemplo, na busca dos netos por avs
argentinos, cujos filhos desapareceram durante a ditadura).
No apenas os cidos nuclicos de mitocndrias e cloroplastos

se parecem com os de procariotos, mas tambm as prprias enzimas
que trabalham na transcrio e na traduo dentro da organela tm
caractersticas em comum com as enzimas dos procariotos, sendo inibidas
pelas mesmas drogas (Figura 26.11). Surpreendentemente, essas enzimas
so elas prprias completamente codificadas por genes do ncleo e
traduzidas no citoplasma.
Figura 26.11: As drogas que inibem a transcrio no ncleo (-amanitina) e a

traduo e citoplasma (ciclo-heximida) de uma clula so diferentes das que inibem transcrio (acridinas) e traduo (cloranfenicol, tetraciclina e eritromicina) em
mitocndrias ou cloroplastos na mesma clula.
102 CEDERJ
26 MDULO 5
AULA
Talvez voc tenha reconhecido algumas drogas na Figura 26.11, j que as drogas
que inibem traduo nas mitocndrias e cloroplastos so as mesmas que inibem
a traduo em bactrias e por isso so usadas como antibiticos. Mas voc no
precisa achar que vai exterminar suas mitocndrias tomando esses antibiticos,
porque eles se concentraro nas bactrias que tm uma taxa de traduo muito
mais acelerada que as mitocndrias.
IMPORTAO DE PROTENAS MITOCONDRIAIS

Como voc viu, a maioria das protenas presentes em mitocndrias e cloroplastos est codificada no genoma nuclear e sintetizada
no citoplasma. Como vo parar dentro das organelas?
Para entrar em mitocndrias e em cloroplastos, as protenas
precisam ter seqncias sinal que sero reconhecidas por receptores na
membrana externa das organelas. Isso lembra a entrada de protenas no
retculo endoplasmtico, no lembra?
Uma diferena muito marcante entre a entrada de uma protena
no retculo e na mitocndria que uma protena s entra na mitocndria depois que foi completamente sintetizada, ou seja, a importao
de protenas pela mitocndria ps-traducional. No entanto, assim
como no retculo, a protena precisa estar desenovelada para passar
pelos translocadores mitocondriais. Por isso, uma protena mitocondrial,
mesmo depois de completamente sintetizada, continua ligada a vrias
chaperonas, que impedem o enovelamento precoce ou a agregao de
vrias protenas (reveja esse conceito na Aula 18). As chaperonas s vo
se soltar da protena depois que ela for reconhecida pelos translocadores
mitocondriais.
Existem dois grupos de translocadores, os complexos TOM (Trans
Outer Membrane, translocase de membrana externa) e TIM (Trans
Inner Membrane, translocase de membrana interna) (Figura 26.12).
Eles podem funcionar separadamente, s o TOM para protenas de
membrana externa e do espao intermembranar e, TOM e TIM para
protenas de membrana interna e protenas da matriz.
CEDERJ 103
Figura 26.12:
Os complexos
de importao
mitocondriais
translocase
da membrana
externa (TOM)
e translocases
de membrana
interna (TIM).
Vamos imaginar uma protena de matriz mitocondrial. Ela

sintetizada no citoplasma, mantida desenovelada por chaperonas at que
sua seqncia de sinal seja reconhecida por uma TOM (Figura 26.13).
Figura 26.13: Importao

de uma protena da matriz
mitocondrial.
Uma vez reconhecidas, as chaperonas se soltam e a hidrlise

de ATP por essas chaperonas contribui para que a TOM transporte a
protena para dentro. Logo que sua seqncia-sinal aparecer no espao
intermembranar, uma TIM vai reconhec-la e transloc-la para a matriz
com a ajuda da energia do gradiente de prtons da cadeia respiratria
(Figura 26.13). Ao chegar matriz, sua seqncia-sinal cortada, e
a conformao funcional adquirida com a ajuda das chaperonas
mitocondriais.
Com certeza, esse mecanismo seria mais eficiente se a passagem
pelas duas membranas fosse consecutiva. Essa idia confirmada pela
existncia de stios de contato entre a duas membranas da mitocndria,
observada em algumas preparaes especiais de microscopia eletrnica
(Figura 26.14), e pela descoberta de que uma das TIM (a TIM 23) uma
protena das duas membranas.
104 CEDERJ
26 MDULO 5
AULA
Figura 26.14: Observando ao microscpio eletrnico de alta voltagem um corte

espesso de mitocndrias do fungo Neurospora crassa preservadas por congelamento,
possvel observar que as membranas externa e interna mantm distncia aproximadamente constante, exceto nos pontos de contato (no detalhe), que se acredita
sejam os locais de importao de protenas para a matriz mitocondrial. Foto de
Daniela Nicastro (J. Struct. Biol. 129:48, 2000).
ORIGEM SIMBITICA DE MITOCNDRIAS E CLOROPLASTOS

Agora que voc j conhece melhor as caractersticas de mitocndrias e cloroplastos, podemos voltar discusso sobre a origem dessas
organelas.
As mitocndrias teriam se originado a partir da fagocitose de
procariotos aerbicos por eucariotos que no os destruram e passaram
a usufruir de grandes vantagens numa poca em que o teor de oxignio da atmosfera terrestre estava aumentando. Os novos eucariotos
desenvolveram, ento, uma relao de simbiose com os procariotos que
fagocitaram e passaram a predominar porque podiam obter muito mais
energia a partir dos substratos disponveis. A aquisio das mitocndrias
tambm liberou a membrana plasmtica das tarefas de produo de
energia, possibilitando outras especializaes que contriburam muito
para o aumento da complexidade dos eucariotos.
Mas ser que essa hiptese verdadeira? Ainda no foi possvel
test-la diretamente, j que ainda no se conseguiu cultivar mitocndrias e depois oferec-las a um eucarioto sem mitocndrias, como uma
ameba, na tentativa de refazer o evento simbitico. O estudo de outras
CEDERJ 105

relaes simbiticas, entre protozorios e bactrias, tem contribudo
bastante para o entendimento do processo. Algumas caractersticas argumentam fortemente a favor da origem procaritica das mitocndrias:
1) A presena de porinas na membrana mitocondrial externa pela
hiptese da origem simbitica, a membrana externa da mitocndria corresponderia membrana do vacolo fagoctico, portanto, a presena de
uma protena tpica de procariotos nessa membrana parece contraditria.
No entanto, o estudo detalhado da membrana do vacolo que envolve
parasitos, como Trypanosoma, Toxoplasma etc. mostrou que comum
a insero de protenas do parasito na membrana do vacolo.
2) A presena de cardiolipina, fosfolipdeo tpico de procariotos,
formado na prpria mitocndria a partir de duas fosfatidilcolinas.
3) A presena de DNA circular em mltiplas cpias, sem histonas.
4) A presena de RNA transportador semelhante ao de procariotos.
5) A presena de ribossomos semelhantes aos de procariotos.
6) A sntese de protenas comeando sempre por formil-metionina.
A tentao de considerar a hiptese verdadeira grande, no?
Mas ainda preciso explicar algumas divergncias, como as diferenas
no cdigo gentico, que no semelhante ao de eucariotos, mas tambm
no semelhante ao de procariotos.
Mitocndrias sempre se originam de outras mitocndrias, que
aumentaram de tamanho e depois sofreram fisso. Apesar de possurem
o prprio DNA e ainda manterem os processos de replicao, transcrio
e traduo, poucas protenas e RNAs esto codificadas pelo genoma da
prpria organela, tornando-as dependentes do genoma nuclear e dos
mecanismos de sntese e transporte citoplasmticos. Durante a evoluo,
a relao simbitica aprofundou-se, envolvendo a transferncia de genes
do simbionte para o ncleo do eucarioto hospedeiro. Essa transferncia
foi lenta, durante milhes de anos, porque, alm de serem transferidos
para o ncleo, os genes precisam se adaptar aos mecanismos de replicao e controle de expresso gnica dos eucariotos, incorporando-se ao
genoma de maneira estvel e produzindo mRNA capaz de ser lido e de
conter em si mesmo o sinal de direcionamento para mitocndria. Assim,
as mitocndrias se tornaram totalmente dependentes do hospedeiro,
deixando de ser um simbionte para se tornar uma organela. Como o
processo de transferncia gnica unidirecional, so considerados mais
evoludos os genomas mitocondriais menores, que j transferiram mais
genes, como o genoma mitocondrial humano.
106 CEDERJ
26 MDULO 5
De que procarioto as mitocndrias e os cloroplastos descedem?
AULA
Certamente, a relao simbitica entre eucariotos e mitocndrias

mais antiga e data de um perodo anterior separao entre animais
e plantas. Acredita-se que o evento endoctico que incorporou as
mitocndrias aos eucariotos data de cerca de 1,5 x 109 anos, quando os
nveis de oxignio na atmosfera aumentaram. Comparando as seqncias
gnicas, as mitocndrias parecem ter se originado de bactrias prpura; e
os cloroplastos, muitos anos depois, com animais e vegetais j separados
evolutivamente, de bactrias fotossintticas (Figura 26.15).
Figura 26.15: A rvore

filogentica da provvel
evoluo de mitocndrias
e cloroplastos e seus ancestrais procariotos.
CEDERJ 107
EXERCCIOS
1. As mitocndrias de todos os tipos celulares so morfologicamente iguais?
2. Como se organiza estruturalmente a mitocndria?
3. Quais as principais caractersticas da membrana mitocondrial externa?
4. Quais as principais caractersticas da membrana mitocondrial interna?
5. Quais as principais caractersticas do espao intermembranas?
6. Quais as principais caractersticas da matriz mitocondrial?
7. Por que as mitocndrias representaram um grande salto evolutivo para os seres
eucariontes?
8. Como se distribuem as mitocndrias em uma clula?
9. Como feita a importao de protenas mitocondriais cujos genes se encontram
no ncleo?
10. Por que se acredita que as mitocndrias resultam de uma relao simbitica
entre uma bactria e uma clula eucarionte primitiva que a fagocitou?
108 CEDERJ
objetivo
27
AULA
Mitocndria II

Associar a estrutura e composio das membranas e
compartimentos mitocondriais ao seu funcionamento.
Pr-requisitos
Todo o contedo de Bioqumica I.
Compartimentos endocticos.
Caractersticas de fluidez e
permeabilidade das
membranas biolgicas.
Biologia Celular I | Mitocndria II

INTRODUO
Agora que voc j conhece melhor a ultra-estrutura das mitocndrias, vamos

rever um pouco do seu funcionamento, que voc j estudou em Bioqumica,
para que melhor possamos correlacionar estrutura e funo.
A principal funo das mitocndrias produzir ATP, e elas fazem isso com
o melhor rendimento possvel. Para isso, precisam obter a energia necessria
para fazer a ligao ADP + Pi, que muito grande.
O mecanismo que deu certo evolutivamente e est presente, em sua essncia,
em todos os eucariotos aerbicos o da obteno dessa energia em etapas.
Em cada uma, a energia obtida armazenada em compostos temporrios,
como NADH.H+ e FADH2, ou em gradientes de concentrao, at que possa
atingir os nveis energticos necessrios para fazer a ligao.
O que vamos estudar nesta aula o aspecto geral dessas etapas, sem detalhar
reaes qumicas nem nomes de molculas, a no ser as inevitveis, porque
isso um assunto que voc est aprendendo em Bioqumica. Em contrapartida,
preocupa-nos mostrar em que locais as reaes ocorrem e o quanto elas so
dependentes do arranjo estrutural desses locais.
DE ONDE VEM A ENERGIA? OS COMBUSTVEIS CELULARES

Para conseguir fazer a ligao ADP + Pi, a clula precisa quebrar
outras ligaes qumicas. Vrias ligaes carbono-carbono so quebradas
at conseguir a energia para formar ATP. As ligaes carbono-carbono
esto presentes em abundncia nos compostos orgnicos e, assim, uma
clula pode escolher as ligaes que vai quebrar. Claro que ela preserva
sua prpria estrutura, do mesmo modo que ningum escolheria obter calor
numa lareira queimando as prprias cadeiras da sala, a no ser que no
houvesse alternativa. Numa clula, mais ou menos assim: ela s quebra
suas protenas, lipdeos e acares estruturais se no houver alternativa.
O combustvel preferencial a glicose, que fica armazenada no
prprio citoplasma das clulas. Para armazenamento, as molculas de
glicose formam polmeros: o amido, no caso das clulas vegetais, e
o glicognio, nas clulas animais, fungos e alguns protozorios.
O glicognio um polmero organizadssimo, no qual as molculas
de glicose ficam empacotadas junto com as enzimas que vo quebrar o
polmero quando for necessrio (Figura 27.1).
110 CEDERJ
27 MDULO 5
AULA
Figura 27.1: Micrografia e esquema de um grnulo de glicognio, que tem o polmero de glicose no meio e enzimas na periferia.
Algumas clulas tm maior capacidade de armazenar glicognio;

entre elas, destacam-se os hepatcitos. Mas o glicognio armazenado
no a nica fonte de glicose. Alis, a clula s comea a quebrar o
polmero se no houver glicose disponvel na circulao sangnea, vinda
diretamente da alimentao. Se houver, o metabolismo celular usa preferencialmente a glicose livre que entrou por transporte passivo do tipo
uniporte ou difuso facilitada pelo simporte com Na+ (veja Aula 10).
Quando a clula absorve mais glicose do que ela precisa naquele momento, o excedente incorporado no polmero de glicognio. Mas isso tem
limite! Se um animal ingere glicose demais (s o homem faz isso!), ela
ser convertida em gordura pelo metabolismo do fgado. Infelizmente, o
contrrio no verdade, o metabolismo animal no consegue converter
gordura em quantidades significativas de glicose (a gliconeognese a
partir de gorduras uma habilidade especial das sementes).
Se a glicose circulante atingir nveis muito baixos, um hormnio
o glucagon se encarrega de mobilizar outro substrato energtico:
as gorduras armazenadas. S que esse estoque energtico no est em
cada clula, e sim em clulas especiais de armazenamento, os adipcitos.
Os adipcitos so clulas do tecido conjuntivo dotadas de algumas
caractersticas especiais: possuem receptores especficos para reconhecer
os hormnios que indicam quando armazenar e quando disponibilizar as
gorduras e um citoesqueleto adequado para acomodar grandes depsitos
de gordura: filamentos intermedirios constitudos por vimentina que
formam uma espcie de gaiola que impede que as gotculas de gordura
CEDERJ 111

fiquem se chocando com as organelas, pressionando-as (Figura 27.2).
Quando o adipcito est muito cheio de gordura, seu ncleo fica
deslocado para a periferia da clula.
a
(a)
Figura 27.2: Os adipcitos

se diferenciam a partir
de um fibroblasto precursor (a), pela acumulao de gordura,
em gotculas que vo
se agrupando e chegam
a empurrar o ncleo.
Com a mobilizao da
gordura pelo metabolismo, o depsito vai se
reduzindo e o adipcito
diminui de tamanho,
mas dificilmente volta a
ser um fibroblasto. Em
b, o depsito de gordura
no citoplasma de um
adipcito.
b
(b)
Quando estimulado pelo hormnio glucagon, o adipcito coloca

em circulao partculas de lipoprotena de baixa densidade (LDL).
As LDL (formadas por uma protena associada a triglicerdeos, colesterol
e fosfolipdeos) transportam molculas hidrofbicas pela corrente
sangnea de maneira adequada (reveja a Figura 20.5). Uma vez na
corrente sangnea, as partculas de LDL sero distribudas para todas
as clulas, que podero endocit-las com a ajuda do receptor de LDL,
como vimos na Aula 20. Depois de percorrer a via endoctica e chegar
aos lisossomos, as partculas sero digeridas e as molculas formadoras
sero transportadas para o citoplasma, estando, assim, disponveis
para serem usadas em reaes de sntese de outras molculas que a
clula precisar ou no metabolismo energtico. Algumas clulas tm seus
prprios depsitos de gordura. O exemplo mais notrio o do msculo
cardaco, j comentado na aula passada, que depende do ATP produzido
pelas mitocndrias, que mantm o estoque do substrato mais energtico
disposio, bem pertinho das mitocndrias e das fibras musculares.
112 CEDERJ
ACARES OU GORDURAS? QUAL O MELHOR COMBUSTVEL?

Qual substrato escolher? Assim como o motor a lcool e o motor
a gasolina tm cada um suas vantagens, as cadeias de cido graxo dos
triglicerdeos tm muito mais ligaes de carbono para quebrar do que
a glicose, (o que resulta em mais energia), mas esto longe (nos adipcitos) e d um trabalho consegui-las. A melhor opo ento quebrar
os polmeros de glicognio, que esto ali mesmo no citoplasma. Nosso
estoque de polmeros de glicose dura aproximadamente 12 horas de
atividade normal; em contrapartida, o estoque de gordura dos adipcitos
de um adulto normal dura cerca de um ms. No possvel mudar essa
relao porque os polmeros de glicose ocupam muito mais espao e so
muito mais densos do que os depsitos de gordura. Se tivesse que estocar substratos energticos suficientes para um ms acumulando apenas
glicose, um homem normal pesaria cerca de 30 quilos a mais.
Portanto, embora a quebra de molculas de cido graxo seja mais
rentvel, porque essas molculas tm mais ligaes carbono-carbono, as
molculas de glicose so mais fceis de obter.
GLICOSE COMO SUBSTRATO

Os polmeros de glicognio so quebrados no citoplasma por
enzimas que esto associadas aos prprios grnulos (Figura 27.1),
liberando molculas de glicose.
Cada molcula de glicose trabalhada separadamente, numa via
metablica tambm citoplasmtica, a via glicoltica. Voc j aprendeu
em Bioqumica que essa via tem vrias etapas, cada uma catalisada por
uma enzima. Neste momento, interessa-nos o rendimento dessa via: uma
CEDERJ 113
27 MDULO 5
AULA
Nem todas as clulas tm receptores para LDL! As excees mais importantes so os neurnios do sistema
nervoso central. Eles s conseguem produzir ATP a partir de glicose. Por isso, o organismo animal no
esgota todos os depsitos de glicognio que possui. As clulas do fgado conseguem obter glicose a
partir de seus depsitos de glicognio e bombear para a corrente sangnea ao invs de us-la em seu
citoplasma, de modo que os neurnios possam obt-la. Essa atividade estimulada pelo glucagon, o
mesmo hormnio que mobiliza os depsitos de gordura dos adipcitos, para sustentar o metabolismo
energtico das outras clulas que no os neurnios. Ah! Esse mesmo hormnio produz a sensao de
fome, fazendo-nos comear a procurar novas fontes de glicose para refazer os estoques.
por isso que depois de algum tempo fazendo exerccio intenso, em jejum, ficamos com tonteira e com
a viso escurecida. Este um estado de hipoglicemia, que independe da mobilizao dos estoques de
gordura e s ser revertido pela ingesto de glicose.

molcula de glicose, que tem seis carbonos, ser quebrada em duas molculas
de piruvato, com trs carbonos cada uma. Claro que essa quebra, alm de
outras arrumaes da molcula, libera energia, que usada para formar
duas molculas de ATP diretamente e reduzir dois NADs a NADH.H+. Na
presena de oxignio, o piruvato entra na mitocndria (Figura 27.3).
Figura 27.3: No citoplasma, ocorre a quebra de

glicognio em n molculas de glicose, e a via
glicoltica quebra cada
glicose em dois piruvatos, que entram na
mitocndria.
ENFIM, CHEGAMOS MATRIZ MITOCONDRIAL!

fcil para o piruvato passar a membrana mitocondrial externa,
mas, por ser uma molcula carregada negativamente, para ultrapassar
a interna ele precisa ser transportado ativamente. Mais adiante, vamos
esclarecer como feito esse transporte.
Uma vez na matriz mitocondrial, o piruvato logo quebrado pela
piruvato desidrogenase. Essa enzima , na verdade, um grande complexo
multienzimtico. Ela separa os trs carbonos do piruvato em uma molcula
de dois carbonos e outra de um carbono s, aproveitando a energia liberada,
evidentemente, para reduzir NAD a NADH.H+ (Figura 27.4).
Figura 27.4: A piruvato desidrogenase

um grande complexo zi-mtico da
matriz mitocondrial, formado por
vrias subunidades representadas
aqui pelos complexos A, B e C. O
complexo age sobre o piruvato,
quebrando-o em acetil-CoA e CO2, e
reduzindo uma molcula de NAD.
114 CEDERJ
27 MDULO 5
No ambiente cheio de oxignio, o carbono liberado logo se torna
AULA
CO2, sendo excretado na respirao e incorporando-se atmosfera. Os

outros dois carbonos so acoplados coenzima A, formando acetil-CoA,
o ponto de entrada no ciclo de Krebs.
CIDOS GRAXOS COMO SUBSTRATO

J vimos que os cidos graxos chegam clula endocitados como
molculas de triglicerdeos dentro de partculas de LDL. Depois de digeridas nos lisossomos, as molculas de triglicerdeos liberam as cadeias
de cido graxo que so transportadas para o citoplasma e chegam s
mitocndrias. Os cidos graxos passam as membranas mitocondriais
atravs de uma seqncia de reaes conhecida como Ciclo da Carnitina
e chegam matriz mitocondrial.
Na matriz mitocondrial, as cadeias de cido graxo so metabolizadas
por um conjunto de enzimas que ligam coenzima A e depois cortam a cadeia
sempre depois do segundo carbono (Figura 27.5). Como o segundo carbono
chamado carbono , esta via se chama -oxidao dos cidos graxos.
Figura 27.5: Na -oxidao dos cidos
graxos, a cadeia recebe uma coenzima
A e logo aps cortada no segundo
carbono. Assim, a cadeia vai produzindo
uma acetil-coenzima A para cada dois
carbonos retirados. No esquema, cada
dois carbonos esto sombreados por
cores diferentes.
CEDERJ 115

Voc reparou que uma molcula de glicose vai render duas acetil
CoA, enquanto um cido graxo de 10 carbonos produz 5 acetil-CoA?
E a maioria dos cidos graxos tem entre 16 e 20 carbonos!
Reparou tambm que, se o metabolismo parasse aqui, teramos
acumulado vrios NADH.H+, mas nenhum ATP teria sido formado? E
para onde vo todas as acetil-CoA?
Corpos cetnicos
Quando gastamos muito ATP sem ingerir glicose e mobilizamos intensamente
os depsitos de gorduras, a quantidade de acetil-CoA formada no fgado
enorme. Nesses casos, duas acetil CoA se condensam para formar acetoacetato,
que transportado pelo sangue para os tecidos. Se a mobilizao de gorduras
continuar por algum tempo, outros produtos podem se formar, como o
hidroxibutirato e a acetona. Esses compostos so chamados corpos cetnicos
e se distribuem por todos os lquidos corporais, desde o sangue e a urina at
o suor e a saliva. So eles os responsveis pelo cheiro de sabo que sentimos
no suor depois de intenso exerccio aerbico em jejum. Como so txicos
para o sistema nervoso central, seus efeitos se somam ao da falta de glicose,
produzindo um desmaio (cuja causa pode ser prontamente identificada pelo
cheiro de acetona no hlito) que coloca o indivduo em repouso forado at
a chegada de mais glicose (s vezes no pronto-socorro!).
Se o objetivo do metabolismo mitocondrial quebrar ligaes

para obter energia suficiente para ligar ADP e Pi, por que a ligao
dos dois ltimos carbonos, tanto do metabolismo de glicose quanto do
metabolismo de cido graxo, no foi desfeita? Em vez disso, recebeu
uma coenzima A?
DEPOIS DE TANTAS PERGUNTAS, ALGUMAS CONSIDERAES

Imagine que a ligao entre os dois carbonos da acetil coenzima A
tivesse sido desfeita. Resultariam carbonos que logo se transformariam
em CO2 e seriam perdidos para a atmosfera! Seria uma maneira rpida
de perder todos os carbonos do substrato para a atmosfera, reduzindo,
assim, o nmero de carbonos incorporados matria viva. Isso acarretaria uma reduo da biomassa que teria sido evolutivamente muito
prejudicial.
A ligao de coenzima A cumpre duas funes: impede que os dois
ltimos carbonos sejam separados, e perdidos, e faz com que eles sejam reconhecidos pela prxima etapa do metabolismo, tambm realizada por enzimas
da matriz mitocondrial: o ciclo de Krebs ou ciclo do cido ctrico.
116 CEDERJ
27 MDULO 5
CICLO DE KREBS
AULA
Como voc j estudou o ciclo de Krebs em Bioqumica, vamos nos

"dar ao luxo" de apenas apontar suas caractersticas gerais. A utilidade
deste ciclo incorporar a acetil-coenzima A com seus 2 carbonos a uma
molcula de 4 carbonos, resultando numa molcula de seis carbonos (o
cido ctrico, que tambm d nome ao ciclo). Desses seis carbonos, dois
so retirados a cada volta do ciclo, transformando-se em CO2 e indo
para a atmosfera, mas no so os dois carbonos que vieram com a acetil
coenzima A que permanecem incorporados por trs voltas do ciclo. Esse
tempo a mais de permanncia dos carbonos na biomassa o suficiente
para que haja equilbrio entre a quantidade de carbonos perdidos portodos os organismos aerbicos e a quantidade de carbonos incorporados
biomassa pela fotossntese dos seres autotrficos. Claro que o equilbrio
entre dois eventos to independentes quanto a respirao e a fotossntese
sofre flutuaes significativas, mas a longo prazo e de maneira global tem
permitido o aumento da biomassa, que sustenta a vida no planeta.
Acompanhe na Figura 27.6 o destino dos carbonos que vieram da
acetil coenzima A e a engenhosa quebra da ligao dos ltimos dois carbonos
de modo a obter toda a energia contida nas molculas de substrato.
Na Figura 27.6, os dois carbonos que vieram com a acetil-CoA
esto marcados. Depois de se juntarem aos outros quatro carbonos e de um
pequeno ajuste na molcula, o primeiro carbono retirado e transformado
em CO2. A energia liberada usada para reduzir NAD a NADH.H+,
sobrando 5 carbonos na molcula. Em seguida, mais um carbono retirado,
produzindo mais NADH.H+. A molcula que sobra tem 4 carbonos, mas
no igual quela capaz de se ligar acetil-CoA. Por isso, a segunda metade
do ciclo dedicada aos ajustes necessrios para reconstituir a molcula
original. Nesses ajustes, mais uma molcula de NADH.H+ e uma de FADH2
so produzidas, alm do nico GTP diretamente formado. Terminados
os ajustes, temos de novo a molcula de quatro carbonos capaz de ligar
nova acetil-CoA, mas repare que ela contm os dois carbonos trazidos pela
acetil-CoA da volta anterior do ciclo.
CEDERJ 117
Figura 27.6: O ciclo de Krebs.
CAD O ATP? AT AGORA, NAD!

Muito bem, todas as ligaes carbono-carbono do substrato foram
quebradas, produzindo muitas acetil-CoA, que giraram o ciclo de Krebs
muitas vezes, mas ATP, que bom, at agora, nada!
A energia liberada pela quebra das ligaes foi temporariamente
armazenada na reao de oxidorreduo de NAD em NADH.H+. Esse
armazenamento realmente temporrio; logo que se reduz, o NADH.H+
alvo da enzima NADH desidrogenase, que o reoxida, roubando seus eltrons
e passando-os adiante, iniciando, dessa forma, a cadeia respiratria.
118 CEDERJ
27 MDULO 5
AULA
CADEIA RESPIRATRIA OU CADEIA TRANSPORTADORA DE

ELTRONS
A enzima NADH desidrogenase a primeira de uma seqncia de
protenas da membrana mitocondrial interna, que tm a capacidade de
atrair eltrons, porque possuem um tomo metlico ligado. Esse tomo
pode ser ferro ou cobre, justamente os elementos capazes de assumir duas
conformaes estveis, de valncia 2+ ou 3+. Cada uma das protenas da
cadeia respiratria tem o tomo metlico ligado de modo a ter maior ou
menor afinidade por eltrons.
A NADH desidrogenase o maior dos complexos proticos que
formam a cadeia respiratria. Na Figura 27.7, esto esquematizados esses
complexos e suas atividades.
Figura 27.7: Cadeia transportadora de eltrons na

mem-brana mitocondrial
interna.
A cadeia respiratria tambm pode ser iniciada pela FADH desidrogenase,

cujo substrato so as molculas de FADH2 formadas no ciclo de Krebs.
A cadeia respiratria formada por trs complexos proticos de

grande porte: a NADH desidrogenase, o complexo citocromo b-c1 e a
citocromo oxidase ou citocromo a-a3. Entre os grandes complexos, h
molculas pequenas, a ubiquinona ou coenzima Q e o citocromo c.
Todos os componentes da cadeia respiratria so protenas da membrana
mitocondrial interna e no esto interligados fisicamente. Para que os eltrons
passem de um componente da cadeia para outro, preciso que eles se choquem, da
a enorme importncia da fluidez da membrana mitocondrial interna. Os choques
devem ser ordenados, de modo que o percurso dos eltrons seja da molcula de
menor afinidade por eltrons at o oxignio, passando por todos os componentes
da cadeia. O que favorece o ordenamento a alternncia entre grandes complexos
enzimticos e protenas pequenas, os grandes em menor nmero, os pequenos em
grande quantidade. Assim, o ordenamento dos componentes da cadeia respiratria, apesar de importante, um fenmeno probabilstico.
CEDERJ 119
FORMANDO UM GRADIENTE DE PRTONS

A NADH desidrogenase, que retirou os eltrons do NADH.H+,
perde esses eltrons ao se chocar com a coenzima Q, porque esta ltima
tem mais afinidade por eltrons. Ter mais afinidade significa precisar de
menos energia para prender os eltrons; a diferena de energia entre a
ligao dos eltrons na NADH desidrogenase e na coenzima Q usada
pela prpria NADH desidrogenase para bombear prtons para o espao
intermembranar atravs da membrana mitocondrial interna. A coenzima
Q, por sua vez, s vai manter os eltrons at se chocar com o complexo
b-c1, que os rouba por ter um pouco mais de afinidade.
J o citocromo c tem muita afinidade por eltrons e consegue
liberar uma boa quantidade de energia ao roub-los do complexo bc1; essa energia tambm usada pelo complexo b-c1 para bombear
prtons para o espao intermembranar. As molculas de citocromo c
so muito mveis na membrana e logo se chocam com o ltimo grande
complexo, a citocromo oxidase, que rouba os eltrons, mas por pouco
tempo, j que eles logo so transferidos ao oxignio. A diferena de
energia de ligao entre os eltrons e a citocromo oxidase e os eltrons
e o oxignio usada pela enzima para bombear prtons para fora (olhe
de novo a Figura 27.7, reparando no bombeamento de prtons atravs
da membrana mitocondrial interna).
O transporte de eltrons ao longo da cadeia respiratria libera
energia aos poucos, de modo que ela pode ser aproveitada para criar
um gradiente de prtons atravs da membrana mitocondrial interna.
Essa membrana bastante impermevel, de modo que o gradiente no
pode se desfazer por difuso. A nica passagem possvel para os prtons
voltarem matriz mitocondrial um complexo protico transmembrana
muito abundante: a ATP sintetase. Essa enzima tem vrias subunidades
(Figura 27.8), formando uma poro transmembrana, dita F0, e uma
poro que fica projetada para dentro da matriz mitocondrial, dita F1.
Quando os prtons acumulados no espao intermembranar passam
por dentro do canal formado pela poro F0, as subunidades catalticas
que esto na poro F1 so ativadas e promovem a ligao ADP + Pi,
formando ATP (finalmente!).
120 CEDERJ
Claro que o ATP s se forma se os prtons voltarem matriz

mitocondrial por dentro da ATP sintase. a impermeabilidade a prtons
da membrana mitocondrial interna que garante isso. Se o gradiente de
prtons pudesse se desfazer por outras passagens no acopladas sntese
de ATP, a energia acumulada se dispersaria, gerando calor.
Desperdcio til
Em algumas situaes, esse aparente desperdcio de energia pode ser interessante:
os bebs de mamferos nascem com o mecanismo de controle da temperatura
corporal ainda imaturo e precisam garantir que certas regies do corpo no
sofram resfriamento. Nessas regies, que so principalmente a base do crnio e
a regio do timo (localiza-se sobre o corao), existe um tecido adiposo especial
que, de to cheio de mitocndrias, fica marrom (por serem ligadas a ferro ou
cobre, as protenas da cadeia respiratria so marrons). As mitocndrias da
gordura marrom so especiais porque elas tm uma protena transmembrana
na membrana mitocondrial interna, a termogenina, que funciona como um
IONFORO de prtons, desfazendo o gradiente sem formar ATP e gerando o calor
necessrio. A prpria atividade mitocondrial vai consumindo a gordura marrom,
que acaba desaparecendo em poucos meses.
IONFORO
uma molcula que se insere em membranas e passa a funcionar como um canal
especfico para certo on e que est sempre aberto.
A Figura 27.9 rene no mesmo esquema a cadeia respiratria e a

sntese de ATP, que so eventos acoplados.
Figura 27.9: A sntese

de ATP acontece graas
ao gradiente de ATP
formado pela cadeia
respiratria.
CEDERJ 121
27 MDULO 5
AULA
Figura 27.8: Esquema da

ATP sintetase (a), com sua
poro transmembrana F0
e a poro F1 se projetando
na matriz mitocondrial.
Em b, a enzima compara
da com uma turbina, onde
a passagem dos prtons,
como se fosse a passagem
de gua, faz girar a turbina, transmitindo a energia
suficiente para formar ATP.
ATP: DA MITOCNDRIA PARA A CLULA

Repare que o ATP foi formado dentro da mitocndria. Como ele
no atravessa a bicamada lipdica, ficaria, em princpio, aprisionado
dentro da organela. Para sair, ele trocado por ADP, num mecanismo que
no apenas garante a disponibilizao do ATP formado, como tambm
serve de controle do metabolismo, j que o ATP s sai da mitocndria
se houver ADP para entrar; se h ADP para entrar, significa que ATP foi
hidrolizado em algum lugar no resto da clula. Se no houver ADP, o
ATP no sai e a ATP sintetase pra de funcionar por falta de substrato,
isto , de ADP. A protena que faz a troca ATP por ADP conhecida
pela sigla ANT (Adenine Nucleotide Transporter, que tambm quer
dizer formiga, em ingls) e uma das mais importantes no metabolismo
mitocondrial. Na Figura 27.10, esto esquematizados os mecanismos de
entrada dos substratos mais importantes do metabolismo mitocondrial,
todos sustentados pelo prprio gradiente de prtons: o ADP, apesar de
menos negativo, entra trocado pelo ATP que sai, enquanto o fosfato e o
piruvato, por serem ambos muito negativos, entram de carona com as
cargas positivas quando o gradiente de prtons se desfaz.
Figura 27.10: Mecanismos de troca sustentados pelo prprio gradiente de prtons

permitem a entrada de substratos importantes.
122 CEDERJ
27 MDULO 5
Agora fica mais fcil entender por que o piruvato s entra na
AULA
mitocndria se houver oxignio? Se no houver oxignio, a cadeia respiratria no acontece, o gradiente de prtons no se forma e o piruvato
no consegue entrar.
Radicais livres
Como vimos, as vrias etapas do mecanismo de converso da energia da
ligao entre os carbonos do substrato em energia de ligao do fosfato
no ATP so muito bem controladas. Mas nem sempre d tudo certo com o
metabolismo mitocondrial. Por exemplo, quando ocorrem choques entre os
componentes da cadeia respiratria fora da ordem correta, pulando um ou
mais elementos, a quantidade de energia liberada grande demais para ser
aproveitada, e parte dela se perde. O maior problema ocorre quando muitos
eltrons so transferidos de uma vez aos tomos de oxignio, formando
perxido de hidrognio (gua oxigenada) e o que chamamos espcies reativas
de oxignio, os famosos radicais livres. Os radicais livres so muito instveis
e difundem-se rapidamente, atravessando as membranas. Ao chocarem-se
com outras molculas, eles as oxidam, danificando-as. As clulas tm muitos
mecanismos de defesa contra essas molculas, especialmente as vrias
superxido dismutases, peroxidases e catalases presentes na mitocndria, no
citoplasma, nos peroxissomos etc.
Com o tempo, os danos causados pelos radicais livres em lipdeos,
protenas e no DNA (mitocondrial e nuclear) vo se acumulando. Muitos
autores consideram que esse acmulo pode ser responsvel pelo fentipo
de envelhecimento. De fato, muitas mutaes no DNA mitocondrial, assim
como uma diminuio no ritmo da cadeia respiratria, foram descritas nos
linfcitos, msculos esquelticos e cardiomicitos de camundongos idosos.
Tais modificaes aumentam ainda mais a produo de radicais livres pela
transferncia direta de eltrons para o oxignio, acelerando o processo.
Assim, as mitocndrias vm sendo consideradas um verdadeiro relgio
do envelhecimento celular.
Doenas mitocondriais
Muitas doenas que afetam o metabolismo energtico aerbico, assim como
doenas degenerativas, como Alzheimer e Parkinson (alguns autores incluem
como doena o prprio processo de envelhecimento!), tm sido consideradas
doenas mitocondriais. A partir de 1988, algumas doenas hereditrias foram
includas nessa lista por serem causadas por danos no DNA mitocondrial.
A maioria delas manifesta-se como encefalopatias ou miopatias. A mais
estudada a LHON (Neuropatia ptica Hereditria de Leber), cujos pacientes
herdam mitocndrias com mutaes. O fato de nem todas as mitocndrias do
zigoto serem afetadas (heteroplasmia) torna a distribuio de mitocndrias
pelos tecidos do indivduo heterognea e retarda o aparecimento da doena.
Se difcil prever que tecidos recebero mitocndrias danificadas, mais difcil
ainda explicar o porqu da alta incidncia de doenas neurolgicas.
CEDERJ 123
RESUMO
Veja, na Figura 27.11, o resumo do metabolismo mitocondrial.
Figura 27.11: Resumo do metabolismo mitocondrial.
Os substratos piruvato ou cido graxo chegam matriz mitocondrial, onde

so metabolizados, formando acetil-CoA.
A acetil-CoA entra no ciclo de Krebs.
Todos os NADH.H+ formados desde o incio da quebra dos substratos alimentam
a cadeia respiratria, que com a energia liberada bombeia prtons para fora.
Os prtons s podem voltar atravs da ATP sintetase, que forma ATP.
A entrada de ADP e a sada de ATP so controladas pela mesma protena
transmembrana.
124 CEDERJ
objetivos

Conceituar os plastdeos e os tipos celulares que os
possuem.
Situar o surgimento dos plastdeos na escala
evolutiva.
Definir proplastdeo e as organelas que dele podem
derivar.
Descrever a organizao ultra-estrutural dos
cloroplastos.
Associar cada compartimento e membrana do
cloroplasto sua funo.
Descrever os princpios de importao e
endereamento de protenas para o cloroplasto.
28
AULA
Cloroplastos I: Caractersticas
principais. Membranas e
compartimentos
Biologia Celular I | Cloroplastos I: Caractersticas principais. Membranas e compartimentos

INTRODUO
Os cloroplastos integram uma famlia de organelas que exclusiva dos vegetais:

os plastdeos. Assim como as mitocndrias, acredita-se que os cloroplastos
resultam de uma relao de simbiose entre uma bactria autotrfica endocitada, mas no digerida, por um eucarionte primitivo. As evidncias a favor desta
hiptese so quase as mesmas das mitocndrias:
Os plastdeos possuem capacidade de autoduplicao;
Possuem DNA e RNA prprios;
So envolvidos por duas membranas, sendo a mais externa considerada um
remanescente da membrana do vacolo fagoctico.
Tambm, da mesma forma que as mitocndrias, partes essenciais do DNA
dos plastdeos foram transferidos para o ncleo, tornando impraticvel sua
sobrevivncia fora do contexto celular.
Apesar dessas semelhanas, mitocndrias e plastdeos se originaram a partir
de precursores diferentes, havendo os segundos surgido muito mais recentemente na escala evolutiva. Uma evidncia disso que as mitocndrias existem
em clulas animais, fungos e vegetais, enquanto os plastdeos so exclusivos
dos vegetais.
Alm de mitocndrias e cloroplastos, algumas outras organelas parecem

haver resultado de relaes de simbiose entre um eucarionte e um procarionte
primitivos.
Os peroxissomas, estudados na aula 30, possivelmente foram as primeiras
organelas a consumir o oxignio gerado pelas bactrias fotossintticas.
Como os primeiros eucariontes eram anaerbios, o oxignio era para eles
uma molcula extremamente txica. Nessa funo foram ultrapassados em
eficincia pelas mitocndrias.
Os hidrogenossomos (Figura 28.1) so organelas envoltas por duas unidades
de membrana exclusivas de alguns fungos e protozorios anaerbios da
famlia dos Tricomonadneos ( qual pertence a Trichomonas vaginalis,
parasita do trato urogenital humano). Nos hidrogenossomos ocorrem reaes
metablicas onde consumido hidrognio molecular (H2) e uma molcula de
ATP produzida.
O apicoplasto (Figura 28.2) uma organela exclusiva dos protozorios do filo
Apicomplexa, que inclui o Plasmdio, causador da malria, e o Toxoplasma,
causador da toxoplasmose. O apicoplasto parece resultar da endocitose de
uma alga primitiva e envolto por 4 membranas, alm de conter ainda
resqucios de DNA. Sua descoberta relativamente recente e ainda no se
sabe qual sua importncia na sobrevivncia desses protozorios.
126 CEDERJ
28 MDULO 5
AULA
Figura 28.1: A Tritrichomonas foetus um protozorio parasita anaerbio. Parte

do ATP que produz provm dos hidrogenossomas (H), organelas capazes de utilizar
hidrognio molecular para produzi-lo. N-ncleo, G-Complexo de Golgi. (Foto: Marlene
Benchimol).
Figura 28.2: O Toxoplasma gondii (a) um protozorio parasita que possui um

plastdeo, o apicoplasto (b), localizado na poro anterior do corpo celular, acima
do ncleo (N). Essa organela envolvida por quatro unidades de membrana, mas seu
papel na sobrevivncia do parasita ainda no foi estabelecido. (Foto: Mrcia Attias).
CEDERJ 127
ORIGEM EMBRIONRIA DOS PLASTDEOS

Todos os plastdeos de um vegetal
tm origem numa organela precursora,
o proplastdeo. Os proplastdeos so
preexistentes no zigoto do vegetal, assim como
as mitocndrias, fazendo parte da herana
citoplasmtica. Os tecidos meristemticos
tambm possuem proplastdeos e, em condies
adequadas, mesmo clulas j diferenciadas
Figura 28.3: Os proplastdeos so pequenos, medindo cerca de 1m. So limitados por duas membranas e sua matriz
contm DNA e RNA prprios. Membranas
internas e gros de amido podem surgir
precocemente. (Foto de B. Gunning & M.
Steer, Plant Cell Biology Structure and
Function.1996)
podem se desdiferenciar e voltar a ter

proplastdeos. A morfologia dos proplastdeos
pouco caracterstica: consiste em vesculas
limitadas por uma dupla membrana, medindo
cerca de 1m de dimetro (Figura 28.3).
Os proplastdeos crescem, dividem-se
e diferenciam-se no apenas em cloroplastos.
De acordo com as condies (fase do
desenvolvimento, rgo ou tecido, estmulos
fsicos e hormonais), os proplastdeos podem
dar origem a leucoplastos, que so brancos
e podem conter molculas de reserva como
amido (os amiloplastos) ou leos e gorduras
(os elaioplastos). Se o vegetal iniciar seu
desenvolvimento na ausncia de luz os
proplastdeos se diferenciaro em etioplastos,
que possuem um arranjo paracristalino de
membranas e um pigmento precursor da
clorofila (Figura 28.4). Nesta fase, se as
condies forem alteradas e a planta comear
a receber luz, os etioplastos se diferenciaro em
cloroplastos, caso contrrio, a planta acabar
no sobrevivendo.
Figura 28.4: Esquema ilustrando o processo

de diferenciao de um proplastdeo em cloroplasto. Caso a planta no receba estmulo
luminoso, sero formados etioplastos. Esses
podem se transformar em cloroplastos se as
condies de iluminao forem corrigidas.
128 CEDERJ
28 MDULO 5
AULA
Cloroplastos em formas e nmeros

Os cloroplastos foram uma das primeiras organelas a serem identificadas.
Tambm pudera, alm de razoavelmente grandes, podendo medir vrios
micrmetros, os cloroplastos so naturalmente coloridos e existem em grande
nmero nas clulas vegetais. Uma clula do parnquima foliar possui, em mdia,
cerca de 50 cloroplastos. Em geral os cloroplastos so lentiformes (em forma
de lentilha), mas algumas algas possuem cloroplastos que, alm de enormes,
possuem formatos muito curiosos; veja na Figura 28.5.
Figura 28.5: Os cloroplastos da alga Spirogyra (a) so em forma de uma fita

espiralada. J na Zignema (b) o cloroplasto nico estrelado.
Fontes: (A) http://www.pgjr.alpine.k12.ut.us/science/whitaker/Plant_Kingdom/
Spirogyra/Spirogyra.html.
(B) http://www.microscopy-uk.org.uk/mag/artjun99/sdzyg.html.
MEMBRANAS E COMPARTIMENTOS DO CLOROPLASTO

Embora compartilhem vrias caractersticas (ambos esto
envolvidos na produo de energia e se originaram de procariontes
endocitados por clulas primitivas), no nada difcil distinguir entre
uma mitocndria e um cloroplasto: basta comparar a cor e o tamanho
de um e de outro (Figura 28.6).
Figura 28.6: Uma clula
vegetal observada ao
microscpio eletrnico.
Note a diferena de
tamanho e forma entre
mitocndrias (seta) e
cloroplastos (*). N-ncleo
Foto: Raul D. Machado
Analisando de modo comparado a ultra-estrutura de mitocndrias

e cloroplastos (Figura 28.7), vemos que ambos so envoltos por duas
membranas mas, enquanto nas mitocndrias a membrana interna
se invagina, formando as cristas mitocondriais, nos cloroplastos
esta membrana contnua. Em contrapartida, os cloroplastos
CEDERJ 129

possuem um terceiro sistema de membranas que forma pilhas de
cisternas interconectadas, as membranas tilacides, que limitam um
compartimento: o espao tilacide. As trs membranas do cloroplasto
definem trs compartimentos: alm do espao tilacide, h o espao
intermembranas e o estroma, anlogos, respectivamente, ao espao
intermembranas e matriz mitocondrial.
Figura 28.7: Esquema comparativo das principais caractersticas morfolgicas de

mitocndrias e cloroplastos. Alm do tamanho, os pigmentos inseridos nas membranas tilacides conferem cor aos cloroplastos. A matriz mitocondrial semelhante
ao estroma do cloroplasto por conter o DNA e o RNA da organela.
Como j comentado, a membrana externa do cloroplasto

corresponde, evolutivamente, membrana do vacolo endoctico. Ela
dotada de vrios pontos de passagem para molculas que entram e
saem do cloroplasto. Da mesma forma que nas mitocndrias, uma
parcela significativa do genoma das bactrias que deram origem aos
cloroplastos foi incorporada ao DNA nuclear; assim, a maior parte das
protenas e enzimas do cloroplasto sintetizada no citoplasma e, por
apresentar seqncias de endereamento especfico, so importadas
com o auxlio de complexos translocadores para o compartimento ou
membrana apropriados (Figura 28.8). Os complexos translocadores das
membranas externa e interna do cloroplasto so chamados complexos
TIC e TOC (o TIC na membrana interna e o TOC na externa) e so
anlogos ao sistema TIM-TOM existente nas mitocndrias. Esse processo
de importao feito com gasto de energia.
130 CEDERJ
28 MDULO 5
AULA
Figura 28.8: A maior parte das protenas do cloroplasto sintetizada no citossol e

possui uma seqncia sinal que reconhecida por um receptor presente na membrana externa da organela. A membrana externa e a interna possuem protenas que
formam um complexo translocador pelo qual a protena passa para o estroma. A
primeira seqncia sinal clivada, mas se a protena tiver uma segunda seqncia
sinal, endereando-a ao espao tilacide, ela ser transferida para l, onde assumir
sua forma madura (ativa).
A membrana interna do cloroplasto difere bastante da membrana

interna da mitocndria. No apenas no apresenta cristas como tambm
no possui os citocromos transportadores de eltrons e os complexos de
ATP sintase. Essa membrana tambm apresenta complexos proticos que
atuam como pontos de passagem para a importao de molculas.
Como j foi dito o estroma (Figura 28.9) o compartimento
do cloroplasto correspondente matriz mitocondrial. Nesse espao
esto distribudos o DNA e os ribossomos do cloroplasto. A tambm
se processam vrias vias metablicas essenciais para a clula. Todos os
fosfolipdeos das clulas vegetais so sintetizados no estroma, onde se
acumulam como plastoglbulos, assim como vrios aminocidos. O
estroma tambm pode armazenar carboidratos na forma de gros de
amido. Entretanto, de todas as reaes que se processam no estroma, a
mais significativa o ciclo de fixao do carbono, que estudaremos na
prxima aula.
Figura 28.9: Micrografia eletrnica de um cloroplasto onde se observa o estroma (E) , de aspecto
granuloso devido presena de cidos nuclicos.
As membranas tilacides ( ) que se empilham, formando os grana (g) e gros de amido (a). Foto: Dr.
Raul D. Machado.
CEDERJ 131

As membranas tilacides limitam o espao tilacide e consistem em
cisternas achatadas que se empilham, formando os grana (Figura 28.9).
Nas membranas tilacides esto inseridos os pigmentos
fotossensveis, principalmente clorofilas e carotenides, transportadores
de eltrons anlogos aos citocromos das cristas mitocondriais e a ATP
sintase, responsvel pela produo de ATP nessa organela. Na mitocndria
o gradiente de prtons se estabelece atravs da membrana mitocondrial
interna e ATP sintase fica inserida na membrana interna voltada para a
matriz mitocondrial, onde so formadas as novas molculas de ATP. J
no cloroplasto, o gradiente de prtons formado entre o espao tilacide,
onde eles se acumulam, e o estroma. As ATP sintases voltam sua poro
cataltica para o estroma, onde se formam os novos ATP (Figura 28.10).
Esta j uma diferena fundamental entre mitocndrias e cloroplastos
e, ainda mais crucial o fato de que o ATP gerado nas mitocndrias a
partir de energia derivada da quebra de molculas orgnicas, enquanto
no cloroplasto, so necessrias apenas energia luminosa e gua para
produzi-lo. Fantstico e intrigante, no? Vamos saber mais sobre isso
na prxima aula.
Figura 28.10: Esquema comparativo da disposio dos complexos de sntese de ATP

nas mitocndrias e nos cloroplastos. Na mitocndria o gradiente de prtons se acumula no espao intermembranas e o ATP produzido na matriz. J no cloroplasto
os complexos de ATP sintase esto inseridos nas membranas tilacides e os prtons
se acumulam no espao tilacide. O ATP produzido no estroma.
132 CEDERJ
28 MDULO 5
AULA
RESUMO
Os cloroplastos so organelas exclusivas dos vegetais, originando-se a partir
de proplastdeos presentes no zigoto.
Acredita-se que os cloroplastos tiveram origem na endocitose de bactrias
fotossintticas que estabeleceram uma relao simbitica com a clula
hospedeira.
Os cloroplastos so limitados por trs membranas: a membrana externa,
a membrana interna e as membranas tilacides, que delimitam trs
compartimentos: o espao intermembranas, o estroma e o espao tilacide.
A maior parte das protenas dos cloroplastos sintetizada no citossol e
possui seqncias de endereamento que as direcionam para a membrana
ou compartimento ao qual pertencem.
No estroma do cloroplasto esto localizados cidos nuclicos, gros de amido
e enzimas responsveis por vrias atividades como a sntese de lipdeos e o
ciclo de fixao do carbono.
As membranas tilacides possuem pigmentos como a clorofila, transportadores
de eltrons e um complexo ATP sintase, produzindo ATP e NADPH.H+ a partir
de energia luminosa e H2O.
EXERCCIOS
1. Por que acredita-se que os cloroplastos se originaram a partir de uma bactria
fotossinttica englobada por uma clula primitiva?
2. D trs diferenas entre mitocndrias e cloroplastos.
3. Quem surgiu primeiro: as mitocndrias ou os cloroplastos?
4. O que so proplastdeos?
5. O que so: leucoplastos, elaioplastos, amiloplastos, etioplastos?
CEDERJ 133
6. Quais as membranas e compartimentos que formam o cloroplasto?

Esquematize.
7. Que reaes ocorrem no estroma?
8. Que reaes ocorrem nas membranas tilacides?
objetivos

Relacionar as reaes de transferncia de eltrons
ao local onde ocorrem, seus requisitos energticos e
moleculares e seus produtos.
Relacionar as reaes de fixao do carbono ao
local onde ocorrem, seus requisitos energticos e
moleculares e seus produtos.
AULA
Cloroplastos II: O complexo

antena. Fases dependente e
independente de luz
29
Biologia Celular I | Cloroplastos II: O complexo antena. Fases dependente e independente de luz
INTRODUO
Os cloroplastos so organelas que fazem parte da famlia dos plastdeos, exclusiva dos
vegetais. Graas a eles, os vegetais so capazes de realizar fotossntese, um conjunto
de reaes nas quais, a partir de energia luminosa, gua e CO2, so sintetizadas
molculas orgnicas. O O2 atmosfrico do qual dependem as reaes oxidativas da
mitocndria , na verdade, um subproduto das reaes fotossintticas. Vimos, na aula
anterior, as principais caractersticas morfolgicas dos cloroplastos. Vamos, nesta aula,
associar os compartimentos e membranas dos cloroplastos s suas funes.
A fotossntese compreende dois fenmenos distintos

Embora interdependentes, as muitas reaes que compem a
fotossntese podem ser divididas em dois grandes grupos (Figura 29.1):
a) as reaes de transferncia de eltrons;
b) as reaes de fixao do carbono.
Fase clara, fase escura.

Isso est certo?
bem possvel que voc
tenha aprendido que a
fotossntese se compe
de uma fase clara, ou
luminosa, ou dependente de luz; e uma fase
escura, ou independente
de luz. Essa nomenclatura caiu em desuso na
medida em que hoje se
sabe que o pH ideal para
a atividade das enzimas
da fase escura depende das reaes de transferncia de eltrons,
isto , da fase clara.
Portanto, ambas as fases
dependem de luz para
funcionar.
Figura 29.1: A fotossntese compreende dois

grupos de reaes: as
reaes de transferncia
de eltrons, que dependem diretamente de
energia luminosa, e as
reaes de fixao de
carbono, que dependem
de molculas energticas
produzidas na outra fase.
O produto primrio da
fixao do carbono uma
molcula orgnica de trs
carbonos, o gliceraldedo
3-fosfato, precursor de
acares, cidos graxos
e aminocidos.
AS REAES DE TRANSFERNCIA DE ELTRONS

Este conjunto de reaes consiste na absoro de energia luminosa
(ftons) por pigmentos fotossensveis inseridos nas membranas tilacides.
Essas molculas so, principalmente, as clorofilas e os carotenides, mas
em algas e bactrias fotossintticas, existem outros pigmentos como a
bacteriorrodopsina e as xantofilas.
A energia luminosa captada por esses pigmentos ser convertida
em energia qumica e armazenada em molculas de ATP ou, temporariamente, em NADPH (nicotina adenina di-nucleotdeo fosfato). No
processo, molculas de gua so quebradas e oxignio molecular (O2)
liberado.
136 CEDERJ
29 MDULO 5
Aceitamos com naturalidade que a maioria das folhas (o principal local onde feita a fotossntese) seja
verde, pois aprendemos, desde a mais tenra infncia, que as folhas possuem cloroplastos e que estes
contm clorofila, um pigmento verde sem o qual a fotossntese no seria possvel. Contudo, o que a
clorofila? uma protena? Um acar? Um lipdeo? Ser que o cloroplasto um saquinho cheio de
clorofila? Ser que a clorofila contida na frmula dos cremes dentais e outros cosmticos pode, por si
s, fazer fotossntese?
claro que voc sabe que no por escovar os dentes com creme dental clorofilado que a gente vai
fazer fotossntese a cada sorriso, mas apostamos que neste ponto da leitura, sua curiosidade j foi
despertada para vrias outras perguntas.
Na Aula 28, voc aprendeu que, longe de ser um saquinho de clorofila, o cloroplasto possui uma
organizao interna complexa e que os pigmentos fotossensveis se encontram associados s membranas
tilacides.
A clorofila uma molcula complexa (Figura 29.2), formada por um tomo de magnsio contornado por
um anel porfirnico (uma estrutura similar molcula de hemoglobina, na qual um tomo de ferro situase no centro do anel). Os tomos sensveis aos ftons so justamente os do anel porfirnico. A molcula
de clorofila se insere na bicamada lipdica da membrana tilacide por uma longa cadeia hidrofbica.
Outros pigmentos fotossensveis, como os carotenides, tambm possuem cadeias hidrofbicas para
insero na bicamada lipdica das membranas tilacides.
Figura 29.2: A molcula

de clorofila possui um
anel porfirnico e m
torno de um tomo de
magnsio e uma cauda
hidrofbica pela qual
se insere na bicamada
lipdica.
CEDERJ 137
AULA
Clorofilas, carotenides & Cia.: os pigmentos fotossensveis
OS FOTOSSISTEMAS
As clorofilas e demais pigmentos fotossensveis no se distribuem
aleatoriamente na membrana tilacide. Eles se agrupam em fotossistemas,
complexos captadores e transdutores da energia luminosa. De forma
anloga s antenas parablicas, a energia luminosa (ftons) captada
por esses pigmentos repassada aos pigmentos vizinhos e converge para
um complexo protico: o centro de reao fotoqumica (Figura 29.3).
Cada grupo de clorofilas e outros pigmentos dispostos ao redor de um
centro de reao fotoqumica chamado sistema antena, j que, como as
parablicas, serve captao de ftons, assim como as antenas captam
sinais de rdio ou TV.
Sabemos hoje que existem dois tipos de fotossistema: tipo I e tipo
II. Os nomes foram dados pela ordem cronolgica em que foram descobertos, mas a atividade do fotossistema I depende de eltrons originados
do fotossistema II, como veremos mais adiante.
Figura 29.3:As molculas
de clorofila do sistema
antena captam a e
energia contida em
ftons e a repassam,
at que essa energia
ative duas clorofilas
contidas no centro da
reao fotoqumica. Essa
organizao lembra a de
uma antena parablica
(insero).
Pigmentos fotossensveis
As clorofilas, carotenides e outros pigmentos so ditos fotossensveis porque, ao interagir com um fton, um dos eltrons dos tomos que
formam o anel porfirnico adquire energia suficiente para pular para um
orbital de nvel mais alto. Isso significa que a clorofila consegue colocar
a energia de um fton (energia luminosa) em um eltron, que passa a
ser de alta energia. Quando um dos eltrons da clorofila passa para um
orbital superior, dizemos que ela est no estado excitado. No difcil
concluir que, havendo luminosidade, ainda que artificial, as molculas
de clorofila esto constantemente passando a esse estado excitado. Entre138 CEDERJ
29 MDULO 5
tanto, o pulo do gato da fotossntese consiste em fazer essa energia do
AULA
fton que foi transferida para o eltron da clorofila ser repassada, para
que molculas energticas como o ATP possam ser sintetizadas.
Uma vez excitada, a molcula de clorofila fica instvel. Para voltar
ao estado de repouso, a energia desse eltron, que subiu de orbital, pode
ter trs destinos (Figura 29.4):
1- ser dispersada como calor;
2- ser transferida para uma molcula de clorofila vizinha;
3- o eltron de alta energia pode ser doado para uma molcula
receptora e substitudo por um eltron de baixa energia.
Figura 29.4: A energia

luminosa absorvida pela
clorofila eleva um de seus
eltrons a um orbital de
maior energia. Para voltar
ao estado de repouso a
clorofila pode: 1) emitir
luz e calor, 2) repassar essa
energia para uma clorofila
vizinha; 3) doar o eltron
de alta energia para
uma molcula aceptora,
substituindo-o por um
eltron de baixa energia.
CEDERJ 139
A simples emisso de luz e calor, embora ocorra, significa que
nenhuma energia est entrando no sistema biolgico. Se observarmos cloroplastos ao microscpio ptico iluminado por luz ultravioleta, veremos
que eles so autofluorescentes, emitindo luz na faixa do vermelho.
J a transferncia de energia entre clorofilas vizinhas observada
entre as clorofilas do sistema antena. Estas atuam como boas captadoras
e condutoras, mas como transferir efetivamente essa energia para o centro
de reao? Isso s vai acontecer quando as clorofilas do centro de reao
fotoqumica forem excitadas. A no apenas a energia, mas os eltrons
que subiram de orbital sero doados a uma molcula aceptora. Para que
a clorofila no fique carregada, o eltron doado substitudo por um
eltron de baixa energia, doado por uma molcula doadora. Vamos ver
quem so essas molculas?
Transferncia de energia entre as clorofilas do sistema antena pode ser

comparada ao trabalho de funcionrios que se limitam a encaminhar papis
entre si, sem resolver efetivamente nada.
J na transferncia de eltrons, a energia contida neles passada para uma

nova molcula, no podendo mais retroceder ou ser dispersada como luz e
calor. Essa doao acontece porque a molcula aceptora mais estvel que a
clorofila para receber esse eltron.
140 CEDERJ
29 MDULO 5
Eltrons: toma l, d c!
AULA
Uma vez atingindo o centro de reao fotoqumica, o eltron de alta

energia vai ser doado e, assim como ocorre na membrana mitocondrial
interna, vai percorrer uma cadeia de transportadores de eltrons. O eltron
que o substitui doado pela gua numa reao enzimtica muito particular
a fotlise da gua. Nessa reao, a gua quebrada em oxignio (O2),
prtons (H+) e eltrons (e-).
A enzima que catalisa essa reao faz parte do complexo de reao
fotoqumica do fotossistema II e possui um tomo de mangans em sua
estrutura. Voc j deve ter percebido que, para que seja formado O2, mais
de uma molcula de gua tem de ser quebrada. Todo o oxignio atmosfrico,
do qual tanto dependemos, foi formado assim, a partir da atividade das
primeiras bactrias fotossintticas.
Os demais produtos da fotlise da gua so os prtons (H+), que so
estocados no espao tilacide, e os eltrons, que sero usados para substituir
aqueles de alta energia doados pela clorofila.
A jornada dos eltrons

Conforme j comentamos antes, os eltrons de alta energia vo
percorrer uma cadeia de transportadores, que fica na membrana tilacide
e composta por complexos proticos apresentados mais adiante. Durante
o percurso, a energia progressivamente gasta, enquanto ocorre uma srie
de eventos importantes, descritos a seguir e resumidos na Figura 29.5.
1- A plastoquinona uma molcula pequena e hidrofbica que transporta os eltrons entre o centro de reao fotoqumica do fotossistema II e o
complexo de citocromos B6-f, no qual prtons do estroma so transferidos
para o espao tilacide.
2- Do citocromo B6-f os eltrons so transportados por outra molcula
pequena e hidrofbica, a plastocianina, at o fotossistema I.
3- Aqueles eltrons que partiram cheios de energia do fotossistema II
chegam ao fotossistema I no bagao e so utilizados para substituir eltrons
de alta energia doados pela clorofila do centro de reao fotoqumica do
fotossistema I.
4- Os eltrons que partem do fotossistema I so transportados pela
ferredoxina at o complexo enzimtico NADPH reductase, que reduz NADP
formando NADPH+.
CEDERJ 141
A produo de ATP
O resultado dessa cadeia transportadora de eltrons a formao
de NADPH, que ser usado em outros processos metablicos, e uma
grande quantidade de prtons (H+), derivados tanto da quebra da gua
quanto bombeados do estroma, que se acumula no espao tilacide.
Figura 29.5: Trajeto dos eltrons ao longo da membrana tilacide. As setas indicam
a perda progressiva de energia dos eltrons ao longo do processo.
A membrana do espao tilacide , assim como todas as membranas

biolgicas, extremamente impermevel a ons, impedindo que os prtons
se difundam atravs dela. Assim, o pH do espao tilacide muito cido,
prximo de 3. Em contrapartida, como parte dos H+ do estroma foram
importados para o espao tilacide durante a cadeia transportadora
de eltrons, o pH do estroma levemente bsico (cerca de 8,0) nos
perodos em que as reaes de eletrontransferncia esto ocorrendo.
Nessa situao, j deu para perceber que h um forte gradiente favorvel
sada de prtons do espao tilacide. A nica via de passagem um
complexo protico da membrana tilacide em tudo semelhante ATP
sintase da membrana mitocondrial interna (Figura 29.6). No cloroplasto,
em vez de nos referirmos s subunidades do complexo como F0 e F1,
chamamos as mesmas CF0 e CF1. Ao passar pela subunidade CF0, os
prtons fazem girar a subunidade CF1 e promovem a sntese de ATP a
partir de ADP e Pi. Este ATP poder ser utilizado tanto nas reaes de
fixao do carbono, que estudaremos em seguida, quanto em qualquer
outra via metablica do cloroplasto ou do resto da clula.
142 CEDERJ
29 MDULO 5
AULA
Figura 29.6: A partir da luz

que incide nos fotossistemas,
forma-se um gradiente
de prtons entre o estroma e o espao tilacide.
Ao passar pela subunidade CF 0 da ATP sintase
da membrana tilacide,
esses prtons fazem girar
a subunidade CF 1 , o que
propicia a sntese de ATP.
A FIXAO DO CARBONO
O que quer dizer fixao do carbono? Fixar um carbono significa
inserir um tomo de carbono contido numa molcula inorgnica, como
o CO2, em uma molcula orgnica, como a glicose. Alis, foi assim que
a maioria de ns aprendeu a fotossntese. Entretanto, a glicose uma
molcula muito grande e complexa. No seria nada prtico ter uma
molcula como essa como produto inicial, pois para sintetizar todas as
outras molculas (cidos graxos, aminocidos, outros acares etc. ) ela
teria de ser inicialmente desmontada. mais interessante que o produto
primrio da fixao do carbono seja uma molcula mais simples, como
o gliceraldedo 3-fosfato (Figura 29.7).
Figura 29.7: Estrutura

plana das molculas de:
(a) um cido graxo, cido
palmtico;(b) glicose;(c)
um aminocido, alanina
e, (d) o gliceraldedo 3fosfato.
CEDERJ 143
As reaes de fixao do carbono ocorrem no estroma numa
via cclica conhecida como Ciclo de Calvin (voc j estudou isso em
Bioqumica), em homenagem ao seu descobridor. Numerosas enzimas
participam desse ciclo, mas a chave do processo consiste na incorporao
do carbono do CO2 a uma molcula orgnica de cinco carbonos, a
ribulose 1,5-bifosfato. A enzima que catalisa essa reao a ribulose
1,5-bifosfato oxi-carboxilase, a rubisco. Leia um pouco mais sobre ela
no box. Embora a rubisco catalise uma reao na qual uma molcula
de um carbono somada a uma molcula de cinco carbonos, o resultado
dessa operao no uma molcula de seis carbonos (como a glicose), e sim
duas molculas de trs carbonos (gliceraldedo 3-fosfato) (Figura 29.8).
Figura 29.8: A enzima rubisco catalisa a incorporao do carbono do CO2 ribulose

1,5-bifosfato, produzindo duas molculas de trs carbonos, o gliceraldedo 3fosfato. O carbono proveniente do CO2 foi sombreado em cinza, para facilitar sua
localizao.
Rubisco, a protena mais abundante na terra

A rubisco, ou ribulose 1,5-bifosfato oxicarboxilase, um complexo enzimtico
presente em grande quantidade no estroma dos cloroplastos (e no citoplasma
de bactrias fotossintticas). Genes contidos no DNA do cloroplasto codificam
algumas das subunidades desse complexo protico, embora a maior parte
dos genes envolvidos esteja contida no DNA nuclear. Sem ela no haveria a
fixao do carbono, comprometendo a viabilidade de toda a cadeia alimentar.
Seu nome, embora parea complicado, nada mais do que a compilao de
suas propriedades funcionais. Quer ver?
Ribulose: o acar de cinco carbonos que participa da reao.
1,5-bifosfato: a ribulose fosfatada nos carbonos 1 e 5.
Oxi-carboxilase: se a concentrao de O2 no estroma estiver muito alta,
essa enzima catalisa a oxidao da ribulose 1,5-bifosfato; uma reao que
faz parte da fotorrespirao, um fenmeno que voc vai conhecer mais
adiante nesta aula; mas se o CO2 predominar, a reao favorecida ser a de
carboxilao, isto , adio do carbono do CO2.
Por que ser que essa enzima pode funcionar contra ns, consumindo o O2
produzido a partir da quebra da gua e sem produzir as molculas orgnicas
de que dependem no apenas as plantas, mas todos os seres heterotrficos?
Supe-se que, como a atmosfera da Terra primitiva demorou muito para
acumular oxignio em nveis crticos, a ponto de competir com o CO2 pela
rubisco, a seleo natural incorporou a enzima com essa conformao. Alis,
no apenas o funcionamento dessa enzima no sentido de sntese depende
da concentrao do substrato (CO2 ou O2), como ela uma das enzimas
mais lentas que se conhece, mas a nica capaz de catalisar a fixao do
carbono inorgnico. Por isso existe em to grande quantidade: uma forma
de compensar a falta de velocidade! O fato que deu certo, a prova disso a
exuberncia e a variedade de formas de vida no planeta.
144 CEDERJ
29 MDULO 5
COMO FUNCIONA O CICLO DE FIXAO DO CARBONO
AULA
Se a cada volta do ciclo (Figura 29.9) as duas molculas de

gliceraldedo 3-fosfato produzidas fossem sendo usadas para sintetizar
novas molculas como glicose, aminocidos ou cidos graxos, logo no
haveria ribulose 1,5-bifosfato para captar novos carbonos. Assim, como
uma empresa em que apenas a parte do lucro retirada e o capital inicial
sempre reinvestido na firma, o ciclo de fixao do carbono regenera
a ribulose 1,5-bifosfato para que ela seja reutilizada na captao de
mais carbono. Assim, so necessrias trs voltas do ciclo para que uma
molcula de gliceraldedo 3-fosfato seja produzida, ou seja, a ribulose
o "capital de giro" e, aps girar trs vezes, gera o lucro, isto , o
gliceraldedo 3-fosfato.
3 molculas
CO2
1C
3 molculas
ribulose
1,5-bisfosfato
6 molculas
3-fosfoglicerato
5C
3C
ADP
ATP
ATP
ADP
3 molculas
ribulose
5-fosfato
5C
6 molculas
1,3-difosfoglicerato
3C
P1
5 molculas
6 molculas
gliceraldedo
3C
3-fosfato
gliceraldedo
3C
3-fosfato
3 molculas de CO2
fixadas rendem uma
molcula de gliceraldedo 3-fosfato ao
custo de 9 molculas
de ATP e 6 molculas
de NADPH
NADPH
NADP+
P1
1 molculas
gliceraldedo
3-fosfato
3C
ACARES, CIDOS
GRAXOS, AMINOCIDOS
Figura 29.9: O ciclo de fixao do carbono funciona de modo a regenerar as molculas intermedirias. A cada
trs tomos de carbono fixados, produzida uma molcula de gliceraldedo 3-fosfato, precursora das demais
molculas orgnicas.
CEDERJ 145
A FOTORRESPIRAO
As folhas so os rgos fotossintticos por excelncia (Figura 29.10).
O oxignio produzido nos cloroplastos se difunde para os espaos entre as clulas
foliares (parnquima lacunoso), e da para o meio ambiente pelos estmatos.
Tambm por difuso simples que o gs carbnico passa ao parnquima
lacunoso e da para o interior das clulas. o mesmo princpio das trocas
gasosas que ocorrem nos alvolos pulmonares e que j comentamos nas aulas
de transporte atravs da membrana.
cloroplasto
epiderme
abertura
estomtica
lacuna
lacuna
O2
CO2
Figura 29.10: A anatomia de uma

folha. O O2 e o CO2 so trocados
atravs das aberturas estomticas, que comunicam os espaos
do parnquima lacunoso com o
meio ambiente. Foto de Raul D.
Machado.
Pois bem, a transpirao das plantas, isto , a perda de gua

decorrente do aumento da temperatura ambiente, tambm ocorre
atravs das aberturas estomticas. Nas horas mais quentes do dia,
essa perda de gua pode ser bastante significativa e isso evitado pelo
fechamento dos estmatos durante esse perodo. Ora, com os estmatos
fechados, o oxignio produzido no tem como passar do parnquima
lacunoso para a atmosfera, assim como o CO2 fica impedido de entrar.
Nessa condio a concentrao de O2 bem maior que a de CO2, o
que favorece a fotorrespirao, uma reao catalisada pela rubisco na
qual ela atua como oxigenase e no como carboxilase, consumindo O2
e ATP e produzindo fosfo-glicolato, uma molcula metabolicamente
intil. O fosfoglicolato produzido no cloroplasto exportado para
outra organela, o peroxissoma (veja Aula 30) no qual ser convertido
em glicina e da seguir para a mitocndria, gerando CO2 e serina, uma
molcula de trs carbonos. As principais etapas desse ciclo, chamado
via do glicolato, esto representadas na Figura 29.11. O processo no
146 CEDERJ
29 MDULO 5
apenas produz CO2 como tambm consome energia e O2! Apesar dessa
AULA
desvantagem, a fotorrespirao, um fenmeno natural e calcula-se que

cerca de 1/3 do CO2 fixado seja perdido por esse processo. Entretanto, em
climas mais quentes e secos, os estmatos permanecem fechados a maior
parte do dia. Como ser que as plantas se adaptaram para sobreviver
nesse ambiente?
rubisco + O2
fosfoglicolato
Cloroplasto
Ciclo de
Calvin
glicerato
glicolato
glicerato
O2
glicolato
Peroxissoma
glioxilato
serina
glicina
serina
glicina
CO2
Mitocndria
Figura 29.11: A via do glicolato passa pelo peroxissoma e pela mitocndria. A serina produzida na mitocndria ser convertida em glicerato no peroxissoma e esse,
finalmente, ser incorporado ao ciclo de fixao do carbono (Ciclo de Calvin).
As plantas C3 e C4
Em vrias plantas de clima quente e seco, nas quais os estmatos
permanecem fechados a maior parte do dia, a perda energtica devida
fotorrespirao minimizada pela existncia de uma via alternativa para
a fixao do carbono. Nas plantas ditas C3, o processo de fixao do
carbono se d em todas as clulas do parnquima foliar e resulta numa
molcula de trs carbonos (o gliceraldedo 3-fosfato). J nas plantas C4,
a fixao do carbono ocorre principalmente nas clulas que circundam
o feixe vascular que distribuir as molculas sintetizadas (floema ou
seiva elaborada) (Figura 29.12). O CO2 bombeado para essas clulas e
incorporado a uma molcula intermediria de quatro carbonos. O milho
CEDERJ 147
e a cana-de-acar so plantas C4, o que bem exemplifica e comprova a
eficincia dessa via de fixao do carbono para a sntese de compostos
orgnicos como a sacarose da cana e a glicose, e o amido armazenados
nos gros de milho.
CO2 (ar)
clulas em torno
do feixe vascular
mesfilo
molculas
intermedirias
clulas do
mesfilo
epiderme
malato
piruvato
feixe vascular
(floema)
estmato
(fechado)
clulas da
bainha
do feixe
vascular
cloroplasto
piruvato
malato
(3C)
(4C)
CO2
Ciclo de
Calvin
epiderme
Figura 29.12: Nas plantas C4, o CO2 bombeado das clulas do mesfilo para as clulas em torno do feixe vascular, no
qual ocorre a fixao do carbono (Ciclo de Calvin).
RESUMO
A fotossntese compreende duas fases interdependentes: as reaes de
transferncia de eltrons e as reaes de fixao do carbono.
As reaes de transferncia de eltrons ocorrem nos fotossistemas existentes
nas membranas tilacides, nas quais eltrons dos pigmentos como a clorofila
e os carotenides absorvem energia luminosa e so doados para uma cadeia
de transportadores de eltrons.
medida que os eltrons so transferidos de uma molcula para outra, sua
energia vai decaindo e vai sendo utilizada para transferir prtons do estroma
para o espao tilacide e para sintetizar NADPH.
O gradiente de prtons formado no espao tilacide gera um fluxo de prtons
atravs do complexo ATP sintase CF0/CF1 da membrana tilacide, gerando ATP a
partir de ADP e fosfato.
148 CEDERJ
29 MDULO 5
AULA
Os fotossistemas so formados por um sistema antena de clorofilas em torno

de um centro de reao fotoqumica. Existem dois tipos de fotossistema que
atuam em conjunto.
As reaes de fixao do carbono ocorrem no estroma e consistem na
incorporao do carbono de uma molcula de CO 2 a uma molcula
orgnica.
A principal reao da fixao do carbono catalisada pela enzima rubisco,
ou ribulose bifosfato oxi-carboxilase, tendo como substrato a ribulose 1,5bifosfato.
O produto primrio da fixao do carbono o gliceraldedo 3-fosfato. So
necessrias trs molculas de CO2 e trs voltas no ciclo para que uma molcula
de gliceraldedo seja sintetizada.
Quando a concentrao de O2 aumenta, a rubisco catalisa a reao de
fotorrespirao, que no fixa CO2 e gasta energia.
Nas plantas C4, os efeitos negativos da fotorrespirao so minimizados pela
formao de um composto intermedirio de quatro carbonos.
EXERCCIOS
1. Considerando as membranas e espaos do cloroplasto, onde ocorrem,

respectivamente as reaes de transferncia de eltrons e o ciclo de fixao do
carbono?
2. O que um sistema antena?
3. correto nos referirmos ao ciclo de fixao do carbono como sendo a fase
independente de luz da fotossntese? Por qu?
4. Como se d a sntese de ATP no cloroplasto?
5. O que a fotlise da gua? Qual o destino de seus produtos?
CEDERJ 149
6. O que a rubisco? Para que serve?

7. O que fotorrespirao?
8. Quais so as plantas C4? O que as caracteriza?
objetivos
AULA
Peroxissomos
30

Caracterizar os microcorpos em termos histricos,
morfolgicos e bioqumico.
Evidenciar a importncia evolutiva dos peroxissomos.
Descrever a biognese de peroxissomos.
Relacionar os peroxissomos s funes celulares de:
detoxificao
oxidao de lipdeos;
germinao de sementes;
fotossntese pela via C4;
sntese de lipdeos.
Relacionar peroxissomos e doenas hereditrias.
Pr-requisitos
Metabolismo mitocondrial.
Fotossntese.
Lipdeos de membrana.
Biologia Celular I | Peroxissomos

INTRODUO
No incio da dcada de 60, a combinao de observaes ao microscpio

eletrnico com mtodos bioqumicos levou descoberta de um novo tipo de
organela capaz de produzir perxido de hidrognio (gua oxigenada) e usar
a enzima
CATALASE
(a) RH2 + O2 R + H2O2

(b) 2H2O2 2 H2O + O2
(a) Os peroxissomos
so capazes de oxidar
molculas (RH2),
dando origem gua
oxigenada (H2O2). (b) A
H2O2 gerada , a seguir,
degradada a H2O e O2.
CATALASE
para gerar gua e oxignio mais adiante (Figura 30.1).
Denominadas inicialmente microcorpos, a presena de enzimas oxidativas e a

produo de perxido de hidrognio levou os pesquisadores a criar o termo
peroxissomos para designar essas organelas de formato geralmente esfrico,
medindo cerca de 0,5m de dimetro.
O PEROXISSOMO CAPAZ DE PRODUZIR ENERGIA A PARTIR DE REAES QUMICAS?

Os peroxissomos diferem das mitocndrias e dos cloroplastos
em vrios aspectos:
so envolvidos por apenas uma membrana;
no possuem DNA prprio;
as reaes oxidativas que nele se processam no levam produo de molculas energticas, como ATP e NADH.H+.
ENTO POR QUE ELES ESTO INCLUDOS NO MDULO DE

ORGANELAS COM ORIGEM SIMBITICA E PRODUTORAS
DE ENERGIA?
Assim como mitocndrias e cloroplastos, novos peroxissomos
surgem a partir do crescimento e da fisso de peroxissomos preexistentes. Da mesma forma que essas organelas, os peroxissomos tambm
realizam reaes de oxidao, o que deve ter sido fundamental para a
sobrevivncia dos eucariontes primitivos e anaerbios num planeta onde
o surgimento de bactrias fotossintticas fez aumentar muito o teor de
oxignio. Para esses anaerbios, o oxignio era extremamente txico. O
surgimento, talvez a partir da internalizao de um procarioto, de uma
organela capaz de utilizar o O2, neutralizando assim seus efeitos, permitiu
a sobrevivncia desses eucariontes primitivos. O estabelecimento dos
peroxissomos como organelas bem anterior s mitocndrias, por isso, os
peroxissomos j teriam transferido todo o seu DNA para o ncleo. Com
o estabelecimento da relao simbitica que resultou na mitocndria,
os peroxissomos se tornaram, num certo sentido, organelas obsoletas,
j que as mitocndrias utilizam o oxignio de uma forma muito mais
vantajosa para a clula, levando produo de ATP.
152 CEDERJ
30 MDULO 5
Ento o peroxissomo uma organela dispensvel?
AULA
De forma alguma! Os peroxissomos continuam presentes em

todas as clulas eucariontes, desempenhando importantes funes de
detoxificao e metabolizando lipdeos. De acordo com o tipo celular, as
enzimas peroxissomais podem variar; assim, os peroxissomos formam,
na verdade, uma famlia de organelas com funes especficas em tipos
celulares diversos.
A concentrao de enzimas no interior dos peroxissomos pode
ser to grande que elas chegam a se cristalizar (Figura 30.1). Veremos, a
seguir, a importncia dos peroxissomos em diversos tipos celulares.
O METABOLISMO DO
LCOOL
Figura 30.1: Grupo de trs peroxissomos em hepatcito de rato.

A enzima urato-oxidase forma um arranjo pra-cristalino em dois deles.
Possivelmente, voc j sabe que tanto o fgado quanto os

rins so rgos fundamentais para a neutralizao e eliminao de
molculas txicas que circulam em nosso sangue, sejam elas ingeridas
voluntariamente, como o lcool, ou produzidas pelo
METABOLISMO
celular. As clulas desses rgos so ricas em peroxissomos (Figura

30.2), e cerca de 25% do etanol consumido por uma pessoa oxidado
a acetaldedo pelos peroxissomos. A gua oxigenada gerada no processo
posteriormente convertida em gua pela ao da catalase.
Diversas bebidas, como

o vinho e a cerveja,
so produzidas por
fermentao, isto ,
leveduras convertem
o acar contido nas
uvas e na cevada
anaerobicamente
(gliclise) em piruvato e
subseqentemente em
acetaldedo e etanol.
Nossos peroxissomos,
em especial os dos
hepatcitos, se
encarregam de fazer
o contrrio, converter
etanol em acetaldedo
e da em piruvato, que
poder ser utilizado
pelas mitocndrias
na produo de ATP.
Entende-se, portanto,
porque o consumo
habitual de lcool,
entre outros problemas
ainda mais graves,
pode levar o indivduo
a engordar.
CEDERJ 153
Figura 30.2: As clulas hepticas possuem grande quantidade de peroxissomos,

importantes para que o organismo elimine substncias txicas como o lcool e
outras drogas.
METABOLISMO DE LIPDEOS
Uma das funes mais importantes das reaes oxidativas que
ocorrem nos peroxissomos a -oxidao de lipdeos, que vem a ser
a quebra de cadeias de cidos graxos. Nesse processo, que tambm
ocorre na matriz mitocondrial, as longas cadeias de cidos graxos vo
sendo desmontadas pela remoo de dois tomos de carbono de cada
vez (Figura 30.3), dando origem acetil-coenzima A (acetil-CoA). A
acetil-CoA produzida exportada para o citossol, onde reciclada em
novas reaes de sntese, ou entra na mitocndria, onde toma parte
no ciclo do cido ctrico. Nas clulas dos mamferos, a mitocndria
tambm realiza -oxidao, com a vantagem de que os produtos dessas
reaes so utilizados na cadeia respiratria e no ciclo do cido ctrico,
isto , em ltima instncia, produzem ATP. Em contrapartida, as clulas
vegetais e os fungos so completamente dependentes dos peroxissomos
para essas reaes.
154 CEDERJ
30 MDULO 5
AULA
Figura 30.3: Na -oxidao, os carbonos so removidos em grupos de dois da cadeia

de hidrocarbonetos, dando origem acetil-coenzima A.
SNTESE DE PLASMALOGNIOS
A BAINHA DE MIELINA que reveste os neurnios (veja o box) rica em
um tipo de fosfolipdeo chamado plasmalognio. As primeiras etapas
da sntese dessas molculas ocorre nos peroxissomos. Isso explica por
que muitas anomalias que afetam os peroxissomos resultam em doenas
neurolgicas.
BAINHA DE MIELINA
O sistema nervoso dos animais formado pelos neurnios, clulas capazes
de captar e transmitir sinais para outros neurnios ou para as chamadas
clulas efetoras (msculos e glndulas, por exemplo). As mensagens nervosas
caminham longas distncias entre o local onde so recebidas e o local onde
sero repassadas. Para que esse sinal viaje com rapidez e segurana, isto ,
para que no perca sua intensidade e no seja repassado a clulas s quais
no est direcionado, os neurnios so envolvidos pelas clulas de Schwan.
Estas se enrolam em torno do neurnio, formando camadas e mais camadas de
membranas ricas em fosfolipdeos: a bainha de mielina (Figura 30.4), que atua
como uma fita isolante, impedindo que ocorra um curto circuito entre neurnios
que estejam muito prximos. Observe a figura a seguir e, caso persistam dvidas,
volte aula de transporte ativo. Estudaremos mais sobre essa associao em
Biologia Celular II.
Figura 30.4: A clula de Schwan forma um verdadeiro "rocambole" de membranas

em torno do axnio do neurnio.
CEDERJ 155
IMPORTNCIA DOS PEROXISSOMOS PARA AS CLULAS

VEGETAIS
A utilizao dos cidos graxos armazenados nas sementes
em germinao tambm depende da atuao dos peroxissomos na
sua converso a acares que so utilizados nas primeiras etapas do
desenvolvimento da planta. Essas reaes so conhecidas como ciclo
do glioxilato, o que levou esses peroxissomos a serem batizados de
glioxissomas (Figura 30.5). As clulas animais, em contrapartida, so
incapazes de converter cidos graxos em carboidratos.
Figura 30.5: Nas sementes de
vegetais, os glioxissomos contm
enzimas capazes de quebrar os
lipdeos armazenados na semente
e garantir as primeiras etapas de
desenvolvimento do vegetal.
[de WP Wergin, PJ Gruber & EH
Newcomb, J. Ultrastruct. Res. 30
(1970)]
Na Aula 29, voc tambm viu (Figura 29.11) que o glicolato

produzido no cloroplasto durante a fotorrespirao passa para o
peroxissomo, onde convertido em glicina, e da para a mitocndria,
onde so produzidos CO2 e serina. Voltando ao peroxissomo, a serina
d origem glicina, que volta finalmente ao cloroplasto na forma de
glicerato. Um conjunto de reaes complexo e metabolicamente intil,
j que consome energia e produz CO2.
PAPEL DOS PEROXISSOMOS NO METABOLISMO DE ACARES EM PROTOZORIOS

Alm da denominao genrica de microcorpos, fazem parte dessa
famlia de organelas os peroxissomos propriamente ditos (que contm
catalase), os glioxissomos das sementes e os glicossomos. Este ltimo
uma organela encontrada exclusivamente nos protozorios da famlia
dos tripanosomatdeos (Figura 30.6).
156 CEDERJ
30 MDULO 5
AULA
Figura 30.6: Os glicossomas so organelas exclusivas dos tripanosomatdeos que

contm enzimas da via glicoltica. Em (a) vemos um micrografia eletrnica de
Phytomonas davidi onde esto assinalados os glicossomas (g), a mitocndria (M), o
ncleo (N), o retculo endoplasmtico (ER) e o corpo multivesicular (MVB). Em (b)
vemos alguns glicossomas em grande aumento. So envoltos por uma membrana
e seu contedo tem uma densidade semelhante ao dos peroxissomas de outras
clulas. (Fotos: Mrcia Attias)
Esses protozorios so todos parasitas e muitos so agentes de

doenas das quais voc certamente j ouviu falar: a doena de Chagas,
a leishmaniose e a DOENA DO SONO.
Os glicossomos receberam este nome por concentrarem numa
organela nove das enzimas da via glicoltica, geralmente encontradas no
citoplasma nas outras clulas eucariticas. Essa organela permite que os
parasitas utilizem a via glicoltica com grande eficincia, o que compensa
o baixo rendimento energtico dessa via anaerbia.
Por que DOENA DO SONO?

Na tripanosomase africana, ou doena do sono, os parasitas Trypanosoma
gambiense ou T. rodhesiense se instalam no sangue do hospedeiro humano
e roubam glicose diretamente do sangue dele. Como a via preferencialmente
executada por esses protozorios para produo de energia a glicoltica, a
baixa de glicose no sangue do hospedeiro resulta na fraqueza e sonolncia
que do nome doena.
SNTESE E DUPLICAO DOS PEROXISSOMOS

Os peroxissomos so capazes de reaes diferentes daquelas
executadas pelas mitocndrias ou cloroplastos. Assim, seguem sendo
organelas essenciais, e mutaes que afetem a correta sntese ou importao de protenas peroxissomais resultam em graves anomalias para o
organismo afetado.
As protenas peroxissomais so sintetizadas em ribossomos livres no
citoplasma e, mediante uma seqncia de endereamento especfica, direcionadas
para um peroxissomo preexistente que cresce e se divide (Figura 30.7).
CEDERJ 157
Figura 30.7: Acredita-se que novos

peroxissomos se formam sempre
a partir do crescimento e fisso de
outros preexistentes. O crescimento
depende da importao de protenas
peroxissomais produzidas no citossol
e importadas pelas peroxinas.
Os detalhes do processo ainda no so bem conhecidos, mas

sabe-se que essas seqncias de endereamento so reconhecidas por
protenas do citossol que as importam para os peroxissomos. J foram
identificadas e classificadas como peroxinas mais de 20 protenas que
participam desse processo, que movido pela hidrlise de ATP, isto ,
trata-se de um transporte ativo.
Diferentemente do que acontece na importao de protenas em
mitocndrias e cloroplastos, as protenas peroxissomais so importadas
na sua forma final, j enoveladas, como tambm o caso das protenas
exportadas para o ncleo. Tambm curioso assinalar que a pex5 uma
peroxina que, aps conduzir sua carga para dentro do peroxissomo,
libera-a e volta para o citossol.
Ento os peroxissomos so importantes mesmo?

Uma prova irrefutvel da importncia do correto funcionamento
dos peroxissomos a sndrome de Zellwegger, doena hereditria na
qual a importao das protenas peroxissomais defeituosa, o que resulta
em peroxissomos vazios. Os indivduos que nascem com esta sndrome
possuem graves anomalias em seu crebro, fgado e rins, morrendo em
pouco tempo.
158 CEDERJ
30 MDULO 5
Os peroxissomos so organelas pertencentes a uma famlia, a dos

microcorpos.
Os peroxissomos se caracterizam por possurem enzimas oxidativas que do
origem a perxido de hidrognio e catalase, enzima que converte esse perxido
a gua e O2.
Os peroxissomos participam na eliminao de substncias txicas absorvidas
pelas clulas, do metabolismo de sntese e degradao de lipdeos e de
importantes vias metablicas dos vegetais.
Embora no possuam DNA prprio, acredita-se que os peroxissomos surgiram
como endossimbiontes das clulas eucariontes primitivas, onde ajudaram a
neutralizar os efeitos txicos do acmulo do O2 produzido pelas bactrias
fotossintticas, sendo substitudos nessa funo pelas mitocndrias.
As protenas dos peroxissomos so sintetizadas em ribossomos livres no citossol
e transportadas para a organela, j na sua forma final, pelas peroxinas.
Anomalias hereditrias que afetem a sntese ou endereamento dos
peroxissomos resultam em srias anomalias neurolgicas, hepticas e renais
que comprometem a sobrevida dos indivduos afetados.
EXERCCIOS
1. Por que os peroxissomos tm esse nome?

2. Quais as principais diferenas entre peroxissomos e mitocndrias e
cloroplastos?
3. Por que os peroxissomos formam uma famlia de organelas?
4. Quais so as principais funes dos peroxissomos?
CEDERJ 159
AULA
RESUMO
Gabarito
Biologia Celular I
CEDERJ 161
Aula 21
1. Pelo seu tamanho. So muito grandes, quando comparadas s bactrias e outros procariontes
e desabariam sob seu prprio volume.
2. Porque, alm de pequenos, possuem uma parede celular, que lhes confere forma e a distncia
entre seus espaos internos e a superfcie nunca grande.
3. Forma, sustentao, movimento: da clula como um todo e das estruturas intracelulares.
4. Microfilamentos, microtbulos e filamentos intermedirios.
5.
microfilamentos
microtbulos
filamentos intermedirios
7 nm
25 nm
10 nm
actina
tubulina
queratina, vimentina e
outras
Estabilidade
muito dinmicos, pouco

estveis
muito dinmicos, pouco

estveis
maior estabilidade, pouco

dinmicos
Resistncia
flexveis mas pouco

resistentes
pouco deformveis
maior resistncia
Localizao na clula
periferia
central
acompanham os
microtbulos
Dimetro
Protena caracterstica
Gabarito de identificao das figuras

Figura 21.1: Neurnio. Clula especializada em receber e enviar estmulos para outros neurnios,
msculos ou glndulas.
Figura 21.2: Hemcias. Clulas especializadas em transportar CO2 e O2 de e para as clulas do
organismo.
Figura 21.3: Clulas epiteliais. Especializadas em revestir reas de contato com o meio externo,
como a luz intestinal, e responsveis pela absoro das molculas digeridas.
Gabarito da Paradinha esperta:
movimento amebide
deslocamento de clulas aderidas
movimento flagelar
cromossomos no fuso mittico
162 CEDERJ
anel de constrio entre as clulas-filhas
fagocitose
clula muscular se contraindo
vesculas de secreo sendo exocitadas
trfego intracelular de vesculas Aula 21
Aula 22
1. A protena fibrilar alongada, e a globular enovelada.
2. Os filamentos intermedirios so formados por protenas fibrilares.

3. So estruturas formadas pela combinao de quatro molculas.
Porque ambos possuem NH2 (amina) e COOH (carboxila) nas duas extremidades.
Se numa ponta do tetrmero estivessem todas as extremidades NH2 e na outra todas as
COOH.
4. Tipicamente nos epitlios. A queratina tambm forma cabelos, pelos, unhas, cascos e garras.
As penas das aves tambm so formadas por um tipo diferente de queratina.
5. Nos neurnios, os neurofilamentos; nas clulas da glia, a protena acdica glial; e nos neurnios
perifricos, a periferina.
6. Identificando-se os filamentos intermedirios presentes nas clulas tumorais possvel
descobrir a origem primria do cncer e optar por um melhor tratamento.
7. Vimentina, das clulas de origem mesenquimal: tecidos conjuntivos de modo geral e endotlio dos
vasos.
Desmina, nas clulas musculares.
8. A esclerose amiotrfica lateral, onde o acmulo de neurofilamentos no axnio dificulta o
transporte do estmulo nervoso.
9. Para que o envoltrio nuclear se desagregue. Nas clulas sem lmina nuclear a mitose dita
fechada, isto , ocorre sem que o envoltrio se desfaa.
10. Grande parte da poeira que se acumula numa casa resulta da descamao de clulas
epiteliais, das quais resta principalmente a queratina. Tambm nas sepulturas, os restos mortais
se resumem a ossos, dentes e estruturas formadas por queratina. Quer dizer, podemos no vir
do p, mas certamente ao p retornaremos...
CEDERJ 163
Aula 23
1. So filamentos formados pela ligao linear de dmeros de e - tubulina. Treze
protofilamentos dispostos em paralelo se fecham, formando um tbulo oco: o microtbulo.
2. Os dmeros de tubulina que se incorporam ao microtbulo sempre possuem um GTP ligado
subunidade . Uma vez incorporados ao filamento, o GTP hidrolisado a GDP, mas a contnua
adio de novos dmeros ligados a GTP forma uma verdadeira tampa, que mantm o microtbulo
e estimula seu crescimento. Quando novos dmeros deixam de ser incorporados, a hidrlise do
GTP na extremidade plus levar instabilidade e despolimerizao do microtbulo.
3. a contnua incorporao de dmeros ligados a GTP e s extremidades do microtbulo.
Se a taxa de adio de dmeros na extremidade plus superar a taxa de perda de dmeros
na extremidade minus, o microtbulo crescer. Se poucos dmeros forem incorporados, a
exposio de unidades ligadas a GDP na extremidade do microtbulo levar sua rpida
despolimerizao.
4. a regio da clula onde se originam todos os microtbulos. Tambm chamada centrossomo.
Caracteriza-se por ter protenas especficas que nucleiam a formao de novos microtbulos. A
mais importante dessas protenas a -tubulina. Os centrolos tambm so encontrados nessa
regio, mas os centrossomas NO tm necessariamente centrolo; nem todas as clulas tm
centrolos e todas tm centrossoma.
5. Dependem dos complexos de -tubulina em forma de anel que nucleiam a formao de novos
microtbulos e agem como uma proteo contra a perda de subunidades pela extremidade minus.
6. A estabilizao dos microtbulos far com que o estoque de tubulina citoplasmtica se esgote
e impedir a despolimerizao, por exemplo, do fuso acromtico. Isso impediria a finalizao
da mitose. Contudo, se os microtbulos de uma clula forem desfeitos, a formao do fuso
tambm ser impedida e o resultado tambm ser que a clula (cancerosa) no se dividir e
morrer.
7. Alm do fuso acromtico (durante a mitose) e dos clios e flagelos, os microtbulos conferem
a forma geral da clula e a disposio das organelas, servindo inclusive como trilhos para que
elas trafeguem de um extremo a outro da clula.
8. Elas possuem dois (s vezes trs) domnios globulares capazes de hidrolisar ATP e de se ligar
e desligar alternadamente do microtbulo, caminhando sobre ele. A outra extremidade da
molcula se liga a uma vescula ou organela (que ser transportada) ou a outro microtbulo,
fazendo com que um se mova em relao ao outro.
164 CEDERJ
9. Clios e flagelos se organizam em nove pares de microtbulos perifricos e um par central.

Todos esses pares esto ligados aos adjacentes por nexinas e ao par central por conexes
radiais. Molculas de dinena ligadas a um par interagem com o microtbulo do par adjacente
caminhando sobre ele e causando a deformao do clio ou flagelo. As nexinas e conexes
radiais impedem que os microtbulos deslizem um em relao ao outro, mas provocam seu
encurvamento. Como nem todas as dinenas esto ativas num mesmo momento, um lado do
clio se encurva e o outro no, alternadamente.
Aula 24
1. um filamento formado por molculas de actina.

2. Cada molcula de actina possui em seu interior uma molcula de ATP que hidrolisada a
ADP quando um novo monmero se liga extremidade plus do filamento.
3. o fato de os microfilamentos, mesmo que no variem de tamanho, liberarem monmeros
de actina na extremidade minus e incorporarem novos monmeros na extremidade plus.
4. No.
5. A partir da formao do complexo Arp2/3, os monmeros de actina do incio ao novo
filamento. Neste caso, os monmeros devem se desligar da timosina e se ligar profilina.
6. A faloidina impede a despolimerizao dos microfilamentos. A citocalasina impede a adio
de novos monmeros. A primeira estabiliza os microfilamentos e a segunda promove sua
despolimerizao.
7. Adeso e movimentao das clulas como um todo e de estruturas intracelulares.
8. So feixes de microfilamentos que se conectam membrana plasmtica e conferem adeso
e resistncia clula.
9. um anel formado por feixes de actina que se contrai por ao da miosina entre os filamentos,
fechando-se e levando ao estrangulamento e separao das clulas-filhas.
10. As miosinas possuem uma cabea globular que se liga actina e capaz de hidrolisar ATP;
a regio entre a cabea e a cauda da miosina se dobra nesse processo e faz com que a miosina
puxe a actina, provocando o movimento.
CEDERJ 165
Aula 26
1. No. As mitocndrias podem ser mais ou menos alongadas e diferem em tamanho mesmo
dentro de um mesmo tipo celular. Tipos celulares diferentes tambm tm mitocndrias com
aspecto diferente (nmero e formato das cristas, por exemplo).
2. Membrana externa, membrana interna (com cristas), espao intermembranas e matriz
mitocondrial.
3. Parece-se com a membrana do retculo endoplasmtico. Contm porinas e complexos
proticos de reconhecimento e importao (TOM).
4. muito fluida e impermevel. Possui um fosfolipdeo com 4 cadeias de cidos graxos:
a cardiolipina. Possui a maior relao protena/lipdeo de qualquer membrana (70/30). As
protenas mais importantes so: protenas da cadeia respiratria, ATP sintases, transportadores
e complexos translocadores (TIM).
5. Composio inica e pH semelhantes ao citoplasma. Contm complexos enzimticos que
transferem o fosfato de parte do ATP produzido para outros nucleotdeos (GDP e UDP).
6. um colide, riqussimo em protenas e cidos nuclicos. onde ocorre o ciclo de Krebs.
7. Porque so capazes de utilizar O2 e molculas orgnicas para produzir grande quantidade de
ATP. As clulas que no possuem mitocndrias (anaerbios) possuem um rendimento energtico
muito baixo, pois produzem ATP s atravs da gliclise.
8. As mitocndrias se deslocam atravs do citoplasma, utilizando os microtbulos e protenas
motoras associadas a eles como trilhos. Deslocam-se para as regies da clula onde est havendo
maior necessidade de produo de ATP. Em tipos celulares como o msculo cardaco, h muitas
mitocndrias, sempre prximas s fibrilas contrteis.
9. As protenas so sintetizadas em ribossomos citoplasmticos e, uma vez completada sua
sntese, so transportadas por chaperonas at os complexos translocadores TOM e TIM. De
acordo com a seqncia de endereamento que possuam, dirigem-se ao compartimento ou
s membranas mitocondriais adequados.
10. Existem muitas indicaes:
a) a membrana externa se parece com a membrana de um vacolo fagoctico;
b) as porinas so semelhantes s encontradas na membrana de bactrias gram negativas;
c) a membrana mitocondrial interna possui um fosfolipdio particular, a cardiolipina, que s
encontrado em procariotos;
166 CEDERJ
d) o DNA e os RNAs mitocondriais so semelhantes em vrios aspectos aos de bactrias;

Os inibidores da sntese de DNA mitocondrial so diferentes dos do ncleo e semelhantes aos
que inibem as enzimas bacterianas.
Aula 28
1. Por serem envoltos por 2 membranas, uma da bactria e outra que corresponderia ao
vacolo endoctico, por possurem seu prprio DNA e RNA semelhantes ao de bactrias, por
serem capazes de se auto-duplicar, por sua forma e tamanho e pela sensibilidade aos mesmo
antibiticos que as bactrias.
2. As mitocndrias so muito menores.
As mitocndrias no possuem pigmentos comparveis aos carotenides e clorofilas
As mitocndrias possuem 2 membranas e os cloroplastos 3.
3. As mitocndrias, pois essas existem todos os tipos de eucariontes (animais, vegetais e fungos),
enquanto os cloroplastos s existem nos vegetais.
4. Estruturas presentes na semente que possuem dupla membrana e cidos nuclicos. Podem
se diferenciar em cloroplastos ou outros tipos de plastdeos.
5. Leucoplastos - So plastos de contedo branco,
Elaioplastos - Tambm chamados oleoplastos, so plastos que armazenam leos;
Amiloplastos - So um tipo de leucoplasto, armazenando amido, podem ter origem em um
cloroplasto que acumulou amido em seu estroma; Etioplastos- so proplastdeos que comeam
a se desenvolver na ausncia de luz, formando membranas paracristalinas. Se receberem
iluminao apropriada, se transformaro em cloroplastos.
CEDERJ 167
6.
Membranas: externa,
Int
Tilac
Espaos: intermembran
Estroma
Tilacide
7. Alm do ciclo de fixao do carbono, a sntese de lipdeos e o armazenamento de amido.

8. A fase dependente de luz da fotossntese, quando so produzidas molculas energticas que
sero utilizadas no ciclo de fixao do carbono.
Aula 29
1. Reaes de transferncia de eltrons - nas membranas tilacide.
Ciclo de fixao do carbono - no estroma.
2. um grupamento de clorofilas e outros pigmentos que se dispe em torno do centro
de reao fotoqumica, onde h um par de clorofilas especiais associadas a citocromos e
transportadores de eltrons.
3. No, porque as reaes desse ciclo ocorrem otimamente num pH em torno de 8,0, o que s
atingido quando os H+ do estroma esto sendo concentrados no espao tilacide, o que s
ocorre na presena de luz.
4. Os H+ acumulados no espao tilacide passam, a favor do gradiente eletroqumico, atravs
do complexo protico CF0/CF1, girando a subunidade CF1 e catalisando a sntese de ATP a partir
de ADP e Pi.
5. a quebra da molcula de gua num complexo enzimtico do cloroplasto em O2 (vai para
a atmosfera), H+ (vai para o espao tilacide) e e- (vo substituir o eltron de alta energia que
vai percorrer a cadeia de citocromos).
6. o apelido da enzima ribulose 1,5-bifosfato carboxilase, responsvel pela adio de C do
CO2 a ribulose 1,5-bifosfato, gerando um composto intermedirio de seis carbonos que vai dar
origem a duas molculas de gliceraldedo 3-fosfato.
7. a reao que a rubisco catalisa consumindo ATP e O2 e produzindo CO2. Ocorre quando a
concentrao de O2 no mesfilo aumenta muito. o inverso da fixao do carbono.
168 CEDERJ
8. So plantas de clima quente e seco, que mantm seus estmatos fechados a maior parte do
dia e, para evitar a fotorrespirao, fazem a fixao do carbono apenas nas clulas da bainha do
feixe e por uma via em que ao invs de gliceraldedo 3-fosfato, o CO2 fixado numa molcula
de quatro carbonos.
Aula 30
1. Porque seu metabolismo produz perxido de hidrognio, ou gua oxigenada, que depois
degradado pela catalase.
2. Peroxissomos no possuem DNA, so envoltos por apenas uma membrana e no produzem
ATP e NADH.H+.
3. Porque outras organelas como glicossomos e glioxissomos tambm so consideradas
peroxissomos.
4. Detoxificao, metabolismo de lipdeos, sntese de plasmalognios, gliconeognese nas
sementes.
CEDERJ 169
9 788576 480297
I SBN 85 - 7648 - 029 - 8

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Rua Visconde de Niteri, 1364 Mangueira Rio de Janeiro, RJ CEP 20943-001

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Alexandre Rodrigues Alves

Andra Dias Fies

Ana Tereza de Andrade

Carmen Irene Correia de

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1. Citoesqueleto. 2. Microfilamentos. 3. Mitocndria.

Governo do Estado do Rio de Janeiro

Secretrio de Estado de Cincia e Tecnologia

UFRJ - UNIVERSIDADE FEDERAL DO

UERJ - UNIVERSIDADE DO ESTADO DO

UFRRJ - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL

UFF - UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

UNIRIO - UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESTADO

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 22 Os Filamentos Intermedirios

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 25 Trfego Intracelular de Vesculas

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 28 Cloroplastos I: Caractersticas principais. Membranas

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Aula 29 Cloroplastos II: O complexo antena. Fases dependente

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

Biologia Celular I | Organizao Geral do Citoesqueleto

J conhecemos vrios dos aspectos gerais da organizao e do funcionamento

Acreditamos que no houve qualquer dificuldade em identificar

Bem, podemos ento concluir que o modelo de clula eucarionte

Forma, sustentao, movimento

Figura 21.4: Uma clula pequena e com uma parede

Biologia Celular I | Organizao Geral do Citoesqueleto

Microtbulos so muito mais rgidos que

Filamentos intermedirios so formados

Por que trs tipos de filamento?

Microfilamentos, microtbulos e filamentos intermedirios possuem

de microfilamentos e microtbulos (Figura 21.6).

Figura 21.6: O grfico analisa a capacidade de

Os microtbulos determinam a forma geral da clula e a disposio

Figura 21.7: O formato geral da clula resulta da

Biologia Celular I | Organizao Geral do Citoesqueleto

Foto: Evander Batista

de actina no seu interior.

Figura 21.8: O parasita

A combinao destes trs tipos de filamento confere a cada tipo

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

Biologia Celular I | Os Filamentos Intermedirios

Como j vimos na aula 21, o sucesso do modelo eucarionte de clula se deve,

Figura 22.1: A fora

Quando comparados aos demais elementos do citoesqueleto

Biologia Celular I | Os Filamentos Intermedirios

pela justaposio dos dmetos

dois tetrmeros interligados

Diferentemente dos microtbulos e dos microfilamentos, formados

Filamentos intermedirios so, praticamente, o que resta de ns aps a morte

As queratinas so especialmente abundantes nas clulas epiteliais