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Universidad Andrs Bello

Facultad de Ciencias Biolgicas


Laboratorio de Biologa Celular
Profesores: Daniela Eliozondo Muoz
Giorgia Ugarte Marin

TRABAJO PRCTICO N2:


MICROSCOPA I
BIO130

Autores: Katherine Beas Parada.


Mnica Moreno Parra.
Katherine Valenzuela Baltra.
Seccin: 5
2015

Introduccin
En este trabajo prctico de laboratorio se aprender la utilizacin correcta del microscopio
ptico, el cual ser nuestro instrumento para observar muestras frescas y permanentes. El
microscopio ptico es un elemento esencial para los estudios generales de histologa, dado
que nos permite observar diferentes caractersticas morfolgicas de la clula y los tejidos.
Este instrumento ocupa para su principal funcin una fuente de luz que atraviesa las
muestras y lentes que aumentan los rayos de luz que atraviesan una muestra de tejido y
aumentan la imagen de las secciones de tejido haciendo visible al ojo humano detalles
ntidos que sin este aparato sera imposible observar.1
Observaremos distintos tejidos con distintas tinciones, analizaremos la muestra ya hecha de
una letra pequea impresa, para demostrar que el microscopio al aumentar la imagen
tambin la invierte2, ademas dentro de las muestras fijas preparadas veremos tejido de
intestino humano y frotis de sangre humana. Luego tendremos que preparar muestras
frescas de protozoo, ctafilo de cebolla con y sin tincin y posterior a esto analizaremos
cada una al ponerla en el microscopio. Despus de analizar cada muestra se deber dibujar
todo lo que vimos a travs del microscopio y luego identificar cada parte del tejido, para
esto necesitaremos una posterior investigacin al trabajo prctico, bsqueda de bibliografa.
Nos parece complicado identificar con exactitud cada parte de las muestras vistas y
completar de buena manera el informe, observaremos tejido jams observado antes,
prepararemos muestras nunca antes hechas con la ayuda de nuestra profesora y utilizaremos
un instrumento desconocido hasta ahora.
En la primera muestra la letra e observaremos esta de manera invertida, si es as
comprobaremos que el microscopio genera una imagen aumentada e invertida, como se
mencion antes. Para nuestra segunda muestra esperamos encontrar clulas epiteliales,
microvellosidades intestinales, vasos sanguneos del intestino humano, con tonos rosados o
morados por la tincin que se utiliza, se trata de una tincin general hematoxilina-eosina
que en el montaje a travs de distintos procesos toma tales coloraciones3. Para nuestra
tercera muestra encontraremos clulas sanguneas, tales como leucocitos, eritrocitos o
plaquetas. La cuarta muestra se trata de una muestra fresca, muestra viva de protozoo
esperamos visualizar microorganismos unicelulares en movimiento. Para la quinta y sexta
muestra haremos un corte a parte de una cebolla de forma transversal consiguiendo el
epitelio de cebolla, la primera de estas muestras la prepararemos sin tincin y a la segunda
le aplicaremos azul de metileno para teir la muestra y se vean ms diferenciadas las
clulas vegetales, las veremos inmviles, con una estructura fija similar a un rectngulo,
podramos ver tambin algunos componentes internos de la clula, como cloroplastos, la
pared celular que protege la clula.
1 http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/6-optico.php
2 guia laboratorio pagina
3 http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/5-general.php

Materiales y mtodos:
La primera muestra es de tipo permanente y consta de una letra e impresa con tinta, esta
se preparo anteriormente y se situ en un porta objetos. Luego se coloc en la platina del
microscopio en un aumento de objetivo 4X para su posterior visualizacin. A continuacin
se gir el revolver hasta el objetivo 10X enfocando con el sistema de enfoque
micromtrico. Posteriormente se llev hasta el objetivo 40X, con el propsito de verificar la
orientacin de la letra con los distintos aumentos que se trabajaron.
La segunda preparacin consta de una corte de intestino humano de muestra permanente,
que se preparo con tincin llamada Hermatoxilina-eosina componentes cidos y bsicos,
que produce una diferenciacin en el tejido, parte del tejido tom un color rosado y otra
parte violeta, haciendo posible la diferenciacin de partes del tejido. La muestra se coloc
en la platina del microscopio ajustndola al menor aumento (4X), luego de enfocarla
seguimos cambiando el lente del microscopio hasta llegar al objetivo 40X.
La tercera preparacin consiste en un frotis de sangre la cual se empleo un mtodo de
tincin llamado Giemsa. Esta muestra fue colocada en la platina del microscopio para luego
ser observada en el menor aumento (4X), para luego ir incrementado los objetivos hasta
llegar al 40X. El objetivo de este procedimiento es observar claramente la estructura de la
muestra fija.
En la cuarta actividad se tom un porta objetos en la cual se le agrego una gota de la
preparacin que contiene protozoo, luego se le aplico una gota de agua y se cubri la
muestra con un cubre objetos. Esta muestra es de tipo en fresco o temporal, con tejidoorganismo vivo. Se observ la preparacin desde el objetivo 4X para luego aumentar
gradualmente hasta el 40X. El objetivo fue identificar cuales eran los protozoo y su
estructura.
En la ltima, se hicieron dos muestras del mismo tejido preparadas a travs de distintos
mtodos. En ambos se extrajo un catafilo de cebolla con la ayuda de un corte transversal
hecho con un bistur, luego las muestras se colocaron en un porta objetos cuidando que no
se contaminara, en una muestra se le coloco un mtodo de tincin llamado Azul de metileno
y en la otra se le aplico con una pipeta Pasteur con gotario agua. Ambas muestras se
colocaron en el microspio con el menor aumento para aumentar gradualemente hasta el
40X. Con el fin de visualizar y comparar la estructuras vistas en ambas muestras.

Resultados

Experimento1:
Origen de muestra: Letra e
Tipo de preparacin: Permanente
Tipo de tincin: Sin tincin
Aumento Ocular: 10X
Objetivo: 4X
Aumento total: 40X

Experimento 2:
Origen de muestra: Intestino Humano
Tipo de preparacin: Permanente
Tipo de tincin: Hermatoxilina-eosina
Aumento Ocular: 10X
Objetivo: 40X
Aumento total: 400X

Experimento 3:
Origen de muestra: Frotis de sangre
Tipo de preparacin: Permanente
Tipo de tincin: Giemsa
Aumento Ocular: 10X
Objetivo: 40X
Aumento total: 400X

Muestra 4:
Origen de muestra: Protozoo
Tipo de preparacin: Temporal
Tipo de tincin: Sin tincin
Aumento Ocular: 10X
Objetivo: 40X
Aumento total: 400X

Muestra 5:

Origen de muestra: Allium cepa


Tipo de preparacin: Temporal
Tipo de tincin: Sin tincin
Aumento Ocular: 10X
Objetivo: 10X
Aumento total: 100X

Muestra 6:

Origen de muestra: Allium cepa


Tipo de preparacin: Temporal
Tipo de tincin: Azul de metileno
Aumento Ocular: 10X
Objetivo: 10X
Aumento total: 100X

Tabla: Observacin y caractersticas de la letra e y de clulas sanguneas, epiteliales humanas,


vegetales y protozoarias.
Origen Preparaci Tincin
Aument Foto
Observaci
de la n
o total
n
muestr
a
Permanente Sin tincin
40X
Muestr Letra
e
a1

Muestr Intestin
o
a2

Permanente

Hermatoxilin
a-eosina

400X

Muestr Frotis
de
a3

Permanente

Giemsa

400X

Muestr Protozo Temporal


o
a4

Sin tincin

400X

Muestr Allium
cepa
a5

Sin tincin

100X

Human
o

sangre

Temporal

Muestr Allium
cepa
a6

Temporal

Azul
metileno

de 100X

La tabla muestra las caractersticas de la letra e y de clulas sanguneas, epiteliales


humanas, vegetales y protozoarias. Estas caractersticas son; preparacin, el aumento en el
que se vio, nombre de la muestra y tincin con la que se trabaj, adjunto de esta hay una
foto obtenida directa del microscopio ptico.

Por qu se ve invertida la imagen en el microscopio ptico?


En la primera muestra, la letra e se vea invertida debido a que el microscopio forma la
imagen por una transmisin de rayos proveniente de una fuente luminosa a travs del
objeto. Los rayos atraviesan el diafragma, donde el iris delimita el dimetro del haz de luz
que es penetrado por el condensador. Este est formado por un conjunto de lentes
convergentes donde proyecta el haz de luz sobre el objeto a examinar, a travs de la
abertura de la platina. El objetivo absorbe la luz que atraves el objeto observado
proyectado la imagen real, invertida y aumentada que se forma en el tubo y que es recogida
por el ocular que es el segundo lente, as formando una imagen virtual, invertida
aumentada.(1)
Pudimos observar que al cambiar los aumentos no generaba un cambio en la orientacin de
la letra observada en el microscopio ptico.

Bibliografia:
1) http://dea.unsj.edu.ar/biologia1/micro.pdf

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