Captulo 10

Metodologa diagnostica
Animales de laboratorio

METODOLOGIA DIAGNOSTICA
ANIMALES DE LABORATORIO

Introduccin
Antecedentes
Ronda d einstalaciones
Verificacin del ambiente
Manejo fsico de animales d elaboratorio
Mtodos de contensin fsica
Manejo qumico
Vas de sangrado
Vas de aplicacin de medicamentos
Verificacin d einstalaciones
Ronda clnica
Deteccin de animales enfermos
Toma de muestras
Pruebas de laboratorio
Integracin del diagnstico
Diagnstico definitivo
Caso clnico
Literatura consultada

METODOLOGIA DIAGNOSTICA
ANIMALES DE LABORATORIO
Dr. Carlos A. Tena Betancourt
Dr. F. Eduardo Tena Betancourt

INTRODUCCIN
En la investigacin de cualquier problema relacionado con la salud de los animales el
mdico veterinario, debe llevar a cabo necesariamente un cuidadoso y completo
examen fsico e historia clnica, los que consideran la informacin referente al pasado,
las circunstancias inmediatas, el manejo, ambiente, alojamiento, adems del
comportamiento animal mostrado, entre otras facetas, lo anterior, con objeto de
conocer la naturaleza de la afeccin y poder establecer un tratamiento eficaz y cuando
sea aplicable adoptar las medidas necesarias de vigilancia y control. Es menester
recordar que los datos clnicos, son la base ms segura para desarrollar pericia y
experiencia, en donde la aplicacin sistemtica de los mtodos clnicos aunado al
conocimiento etolgico del animal en cuestin, permite al mdico veterinario, conocer
la diferencia entre un animal enfermo y uno sano. Figura 38
Generalmente la enfermedad se manifiesta con cambios en la estructura de un
rgano o tejido, o en su funcin, as como en el comportamiento del organismo, en
donde tales cambios pueden ser cuantitativos, cualitativos o ambas a la vez, los que
pueden ser descritos como signos clnicos de la enfermedad y el proceso de deducir, a
partir de ellos la naturaleza de la enfermedad existente, se llama Hacer un
Diagnstico.
Siempre que sea posible, el diagnstico debe basarse en una consideracin
racional de todos los datos evidentes a partir de caractersticas que presenta una
situacin anormal en la salud del individuo, aunada a una conclusin razonada que
proporcionar la ayuda ms til para llegar al diagnstico. En ocasiones en medicina
veterinaria el diagnstico se hace sobre la base de experiencias anteriores; empero

este mtodo puede fallar, cuando las caractersticas clnicas de una enfermedad son
atpicas o cuando se presenta por primera vez una enfermedad nueva.
Formular un pronstico significa

expresar una opinin respecto a la

probable duracin y desenlace de una enfermedad. Generalmente siempre estamos

interesados en el pronstico, es decir, deseamos conocer si se puede esperar una
pronta mejora o si se restablecer totalmente. Sin embargo, para el mdico
veterinario, la mayor importancia radica en el diagnstico, ya que slo su conocimiento
le permitir formular el pronstico requerido y cuando sea necesario prescribir el
tratamiento adecuado y/o establecer las medidas profilcticas oportunas.
No siempre es posible hacer un diagnstico exacto, es decir, determinar la
causa y naturaleza de la anormalidad o enfermedad, por lo que en ocasiones se
establece un Diagnstico etiolgico, esto es, determinar la causa de la enfermedad.
Figura 37.
Si la enfermedad no se puede identificar con certeza, se dice entonces, que el
Diagnstico es tentativo o presuntivo. Si existe un signo particularmente
destacado, pero se desconoce el origen y la causa de la anormalidad primaria, puede
denominarse Diagnstico sintomtico, por ejemplo, la ictericia no es una
enfermedad, sino slo un signo clnico de varios trastornos que pueden ocasionarla,
tales como la obstruccin del conducto biliar, anemias hemolticas producidas entre
otras causas por ciertas infestaciones protozoarias de sangre y algunas afecciones
que causan lesiones al hgado.
Existen muy pocos signos clnicos con los que, por s solos, se pueda
establecer

un

diagnstico

correcto,

los

cuales

constituirn

los

Signos

patognomnicos, por ejemplo; el pulso venoso positivo en la insuficiencia de la

vlvula tricspide, el prolapso de la membrana nictitante en el ttanos de equinos.
Ahora bien, s slo se tuviera que tomar en consideracin los signos patognomnicos,
la tcnica de diagnstico clnico se denominara fcilmente, sin embargo, como la

mayora de los signos pueden deberse a varias causas, el Diagnstico requiere en

cada caso la aplicacin de conocimientos precisos, junto con la experiencia prctica,
de lo cual se deduce, que el estudio de los signos y circunstancias presentes en una
enfermedad como tales, (propedutica clnica o metodologa diagnstica) es un
antecedente necesario para realizar el diagnstico. Por lo que, revierte importancia
conocer el comportamiento y la forma en que se presentan los signos y los mtodos
para poder ponerlos de manifiesto o deducirlos, considerando su posible origen e
importancia.
De ah, que la metodologa diagnstica (propedutica clnica) sea una parte
esencial y bsica en la prctica de la medicina veterinaria, ya que brinda al mdico las
herramientas necesarias para poder complementar y expedir un correcto diagnstico,
inicialmente en forma de pronstico o diagnstico presuntivo, para que al
complementar la informacin obtenida basada en evidencias, pueda integrar e
interpretar los resultados obtenidos y poder emitir as un Diagnstico definitivo,
apoyado en evidencias. Figura 1.
ANTECEDENTES
Es requisito indispensable establecer una correcto diagnstico, basado en aquellos
factores de manejo que pueden afectar el bienestar y la productividad de los animales
alojados en el Bioterio. Si tomamos en consideracin, que por definicin el manejo es
Un conjunto de normas prcticas encaminadas a obtener una mayor
produccin, proporcionando al animal el confort, seguridad y un desarrollo
corporal adecuado acorde a su fin zootcnico. Ya que situaciones adversas, su
modificacin o ausencia de alguna de stas, ocasionarn disturbios y problemas,
repercutiendo en un estado que es considerado como estrs.

A su vez el estrs puede ser definido como Un conjunto de reacciones

internas de tipo fisiolgico, inmunolgico y de comportamiento que el animal

pone en funcionamiento como respuesta ha cualquier factor o causa externa al

organismo, que intente modificar su estado de bienestar psicofsico u
homeostasis, alejndolo de su estado normal.
De acuerdo con Stott, los factores contrarios al bienestar animal, que
intervienen en la presencia de estrs pueden ser clasificados desde cinco aspectos:
a) Factor Humano
Quizs el ms importante de todos, en vista de que los animales de un Bioterio
dependen totalmente del trabajo y la calidad de las actividades desarrolladas en la
atencin y cuidado diario proporcionados, entre las cuales se encuentran:
1) Alimentacin
El alimento suministrado debe ser acorde a la especie o estirpe alojada. Otro
aspecto, que puede influir es el referente al propsito experimental, en el cual, el
sujeto experimental puede ser sometido a dietas diversas tales como dieta baja en
sodio, con alto contenido de grasa o protena, entre otros o simplemente podra
requerir de una dieta especial (purificada o semipurificada).
Otro aspecto a considerar es la calidad y la digestibilidad de la dieta, ya que el
consumo de alimento proporcionado puede variar en base a la calidad de la misma.
Por otro lado, es necesario evitar cambios imprevistos de dieta o privaciones de
alimento (conejo) y agua, salvo que el bioensayo lo contemple por cortos periodos
de tiempo (ayuno), lo cual podra ocasionar hipoglucemia en los animales.
2) Higiene
Es otro aspecto importante que tiene por objeto eliminar la polucin generada
durante la operacin diaria y programada.
La rutina de limpieza diaria incluir; la desinfeccin del alojamiento animal,
equipo accesorio (comederos, bebederos, etc.), adems del cambio de material de
cama o lecho. La limpieza programada deber de incluir; fumigaciones, limpieza de
las reas de alojamiento primario (piso, paredes, etc.), as como del encierro

secundario o reas anexas. La limpieza y desinfeccin estar determinada acuerdo

al nivel de bioseguridad o calidad microbial de los sujetos experimentales alojados y
bajo un estricto apego al manual de operacin del bioterio, (descripcin de las
actividades del personal). Por ltimo, debe llevarse a cabo la rotacin de
desinfectantes, considerando para ello el tipo, caractersticas y capacidad residual
de los desinfectantes empleados. Figura 3
3) Alojamiento
Incluye las jaulas, el encierro primario o cuartos de alojamiento y el encierro
secundario. Estos revierten importancia, ya que brindarn bienestar y un adecuado
desarrollo corporal y reproductivo. Este deber ser acorde a la especie (roedores,
lagomorfos, etc.) y a los lineamientos establecidos en la normatividad respectiva
para espacio fsico. Por otro lado, el encierro primario, puede estar influenciado por
la distribucin, caractersticas de la construccin (paredes, techos, pisos, etc.), as
como del tipo de equipamiento, el sistema de ventilacin y su distribucin dentro del
encierro primario. Por ltimo, deber de considerarse las medidas de control de
insectos y roedores silvestres.
4) Manipulacin de animales
Aspecto que debe ser realizado de acuerdo a la especie, ya que una manipulacin
proporcionada a una especie determinada no corresponder a otra, adems de que
si sta es inadecuada, puede afectar en la salud, conducta y reproduccin del
sujeto experimental, adems de repercutir en el procedimiento experimental. Este
tema ser abordado ms adelante con detalle. Figura 2
b) Factores Fsicos
Estn determinados por las condiciones del macroambiente, el cual a su vez
determinar el microclima prevaleciente dentro de la jaula, el cual es un factor
preponderante para el bienestar animal. Figura 4. El macroambiente esta conformado
por los siguientes parmetros:

1) Temperatura
2) Humedad relativa
3) Ventilacin o reciclaje de aire
4) Iluminacin
5) Ruido
Estos parmetros sern abordados ampliamente en la seccin correspondiente a la
ronda de instalaciones.
c) Factores qumicos
Son producto de la interaccin de factores humanos y fsicos, derivados de un
deficiente desarrollo de las actividades por la presencia y acumulo de
fermentaciones generadas por la presencia de cama, excretas, detritus y alimento
acumulado. Dentro de la polucin provocada se encuentran la presencia de vapores
y/o gases de CO2, SH3, NH3, (Bixido de carbono, cido sulfhdrico, amonaco),
entre otros, que se incorporan al medio ambiente. Asimismo, se debe considerar los
qumicos que son empleados durante la rutina diaria como insecticidas,
desinfectantes o de los que se incorporan al agua de bebida y/o alimento.

d) Factores Patolgicos
Predispuesto por la presencia y prevalencia de agentes infecciosos y parasitarios
presentes en una colonia determinada, que pueden ser originados por distintas
causas como las deficiencias de manejo, inadecuada rutina de trabajo (higiene), la
falta de acatamiento en las disposiciones sobre medicina preventiva (intromisin de
animales de nuevo ingreso), falta de previsin en los procesos de esterilizacin o
de desinfeccin de material de cama, del rea fsica, o por la presencia de estrs,
los que ocasionarn alteracin en la homeostasis de los animales.
d) Factores Fisiolgicos o Sociales

Esta determinado por la estimulacin que se ejerce sobre los diferentes rganos
olfativos, visuales, auditivos y tctiles del animal, los cuales le permiten al animal
relacionarse con el entorno y sus congneres en la jaula. Sobrepasar la capacidad
fsica del alojamiento (cuarto/jaula), propicia estrs en los animales, derivado de
la

sobrepoblacin

(sndrome

Whytten,

Bruce),

lo

que

predispondr

al

establecimiento de jerarquas, agresiones e infertilidad, generado por competencia

por el espacio vital, alimentacin, agua, etctera, lo cual modificar el
comportamiento y con ello el bienestar animal. Figura 30
Dichos factores se encuentran interactuando constantemente y una forma
de controlarlas o corregirlos es implementar un manual de operacin y
procedimientos, que est apoyado en el desarrollo tecnolgico y los avances en la
zootecnia, que han determinado el paso de bioterios de tipo convencionales a
bioterios de barrera con diferentes niveles en su estatus microbiolgico.
Es comn encontrar en Bioterios de laboratorios, centros de investigacin,
docencia y empresas comerciales que producen y multiplican sujetos de prueba y
para experimentacin que estn expuestos a una mayor densidad poblacional,
llevndolos ha exigencias productivas casi al limite de sus posibilidades
fisiolgicas, con mayores ritmos reproductivos, entre otros.
Asimismo existen especies que son ms sensibles al estrs, como el ratn
DBA/2 cobayos y los jerbos, que debido a sus hbitos crepusculares o al instinto
de vivir en madrigueras subterrneas, presentan un carcter tmido y miedoso.
Otro ejemplo, pueden ser el conejo y roedores, los cuales presentan un elevado
metabolismo, que les permite incrementos ponderadles en los primeros das de
vida (3 primeros meses), los cuales son superiores a los de cualquier mamfero
domstico. De igual forma, el denso pelaje en el caso del conejo es un serio
problema, ya que no cuenta con glndulas sudorparas, hacindolo ms
susceptible a las altas temperaturas, que afectan el bienestar.

Es por ello, que para mantener estas exigencias productivas y sanitarias, as

como garantizar su bienestar, los animales de laboratorio requieren de condiciones
ambientales y de manejo ptimos, las cuales al verse modificadas o carecer de
ellas, repercutirn ocasionando incomodidades, disturbios, tensin y estrs que
conlleven a cambios conductuales y productivos, incluso de tipo aberrante.
RONDA DE INSTALACIONES
El examen clnico es efectuado por medio de los sentidos como la vista, el tacto, odo
e incluso el olfato y comprende dos partes:
a) Examen general y particular incluyendo la primera inspeccin
b) Examen fsico
La inspeccin preliminar o ronda de instalaciones, debe iniciarse estableciendo
un canal de comunicacin (mdico veterinario, personal e investigador), para recabar
los antecedentes del problema. Posteriormente se verifica el entorno, el cual incluir la
inspeccin a distancia de los animales, considerndose el aspecto fsico, postura,
comportamiento y su desplazamiento en la jaula. Figura 30
La informacin podr ser reunida a travs de un sencillo interrogatorio con
preguntas orientadas hacia el problema, el manejo entre otros aspectos de manejo.
Dicho listado puede ser orientado a los aspectos de manejo, higiene, alimentacin,
reproductivos o productivos, sanitarios.
El siguiente listado podra servir de gua, aunque las preguntas pueden variar
dependiendo de las circunstancias presentes, tipo de Bioterio y causas que lo
ocasionan.
1. Identificar cual puede ser el problema?
2. Cuando se inici el problema?
3. E posible establecer la causa del problema?
4. Cuantos animales presentan el problema?
5. Se a difundido a otros animales?

6. Qu tan rpido y como se ha difundido?

7. Qu cambios clnicos se ha observado en los animales?
8. Ha habido animales muertos?
9. Cuntos animales han muerto?
10. Cmo se disponen de los cadveres?
11. Se implementaron medidas o tratamientos para solucionar el problema?
12. Ingresan personas ajenas a las reas de alojamiento animal?
13. Existe control sobre el ambiente?
14. Existe manejo reproductivo de las colonias?
15. El sistema reproductivo implementado corresponde a la cepa o estirpe gentica
reproducida?
16. Quin es responsable de aplicar y manejar el sistema reproductivo?
17. Qu medidas de control sanitario se implementaron?
18. Las medidas sanitarias son acordes al tipo de bioterio y/o estatus microbiolgico
de la estirpe o cepa?
19. Se cumplen con las medidas de control sanitario?
20. Son supervisadas las rutinas de trabajo desarrolladas?
21. Existe control de fauna nociva?
22. Qu fauna nociva ha sido capturadas y donde?
23. Qu tipo de alimentacin es empleado?
24. El alimento proporcionado es especfico para la especie?
25. Siempre es suministrado el mismo tipo y marca de alimento?
26. Cmo es suministrado el alimento a los animales?
27. Dnde y como es almacenado el alimento?
28. En caso de proporcionar forrajes:
a) Qu tipo de forraje se proporciona?
b) En donde y cmo es almacenado el forraje?
c) Se toma alguna medida sanitaria con el forraje?

d) A que especies se les proporciona?

28. De donde se abastece de agua suministrada?
29. El agua se almacena en cisterna o tinacos?
a) Cada cuando se limpian y desinfectan stos?
30. Recibe algn tratamiento de potabilizacin al agua antes de utilizarla?
31. Cmo se administra el agua a los animales?
En caso de sistema automatizado o semiautomtico
a) A qu intervalos se limpian y desinfectan las lneas de abastecimiento o
botellas, chupones de agua?
32. El equipo es acorde a la especie que aloja?
33. Cul es la frecuencia de limpieza y/o desinfeccin del equipo?
34. Frecuencia de limpieza y/o desinfeccin del encierro primario?
35. Frecuencia del cambio de material de cama o lecho?
36. Cul es el destino final de los residuos biolgico-infecciosos?
37. El procedimiento experimental interfiere en la salud del animal?
VERIFICACION DEL AMBIENTE
Recabada la informacin, se procede ha realizar el recorrido por las instalaciones con
el objeto de determinar y constatar las condiciones imperantes, incluyendo un anlisis
de las condiciones ambientales (temperatura, humedad relativa, ventilacin y
luminosidad, ruido), las actividades del personal y flujos, as como las caractersticas
fsicas del alojamiento, la distribucin de reas funcionales, (drenaje), higiene y
manipulacin de animales. Los aspectos bsicos que deben ser evaluados en una
verificacin son:
1. Condiciones ambientales
La evaluacin del ambiente del bioterio es bsico, ya que stos son totalmente
cerrados y requieren tener un control total del ambiente, a efecto de evitar
fluctuaciones en las condiciones del ambiente que puedan interferir o afectar la el

bienestar animal y repercutir en su reproduccin o en el procedimiento

experimental. Los bioterios son instalaciones que cuentan con sistemas de aire
acondicionado con distintas grados de sofisticacin (con o sin filtrado en diferentes
grados), de acuerdo al tipo o caractersticas de los animales alojados en el bioterio.
Figura 31
Los parmetros a evaluar comprenden:
a) Temperatura
La temperatura, humedad relativa y ventilacin se encuentran ntimamente
relacionados e interactan entre s, ya que s uno de ellos es afectado, los otros
parmetros se vern modificados. Es por ello, que se requiere

verificar el

registro de control de temperatura, asimismo, se estima necesario conocer el

nmero y la distribucin de las rejillas de inyeccin y extraccin de aire dentro
de las reas funcionales.
Otro aspecto a verificar es s el sistema ambiental cuenta con la
capacidad para mantener rangos de temperatura, humedad y ventilacin de
acuerdo a las especies alojadas en forma independiente o general. En el caso
de que el equipo no tenga sa capacidad, entonces se deber considerar
establecer un rango intermedio, a fin de mantener el confort de las distintas
especies.
La densidad poblacional, el diseo de la jaula, la presencia o no de
filtros en la jaula, as como el tamao de los cuartos y

la distribucin o

localizacin de las rejillas de inyeccin y extraccin de aire dentro del

alojamiento animal, son causas a considerar para establecer el volumen,
velocidad del aire y el rango de temperatura ms adecuado, dado que estos
aspectos son variables que pueden modificar o influenciar el microclima o el
ambiente animal. Por ejemplo, en jaulas de alojamiento para roedores con tapa
filtros, la temperatura se incrementar de 0.55 a 2.2 C por arriba del ambiente

del cuarto, as tambin, una elevacin cercana a los 30 C, puede predisponer a

la muerte por golpe de calor o temperaturas bajas a la presencia de problemas
respiratorios o hipotermia. Asimismo, puede producir alteraciones metablicas,
cambios fisiolgicos y conductuales, repercutiendo y modificando en los
resultados experimentales del sujeto experimental. Figura 30
Las modificaciones de temperatura ventilacin y humedad, ocasionan
generalmente cambios conductuales y fsicos, esto con el objeto de llevar a
cabo la regulacin fsica, qumica y conductual de la temperatura corporal. Esta
regulacin puede verse reflejada en disminucin o incremento de la ingesta de
alimento, agua, modificaciones en la posicin del animal (enconchados o
estirados sobre el piso o revolcndose sobre sus excretas, entre otros), o puede
incluso llegar

modificar

la termognesis

con

o sin

presencia

de

estremecimientos musculares, a efecto de compensar las variaciones de

temperatura ambiental.
Los rangos temperatura que se debern observarse como normales podrn
depender de la especie en cuestin:
a)

ESPECIE

RANGO

Ratn

22 25 C

Rata

20 25 C

Hamster

21 24 C

Cobayo

16 20 C

Conejo

15 20 C

Cuadro 1. Temperatura ambiental

b) Humedad relativa
Puede ser mantenida a travs del uso de humidificadores porttiles o por medio de
un sistema de aire acondicionado automatizado. Dicho tipo de equipo proporcionar
una gran estabilidad ambiental. La presencia de una sobrepoblacin en el cuarto,
podr elevar los niveles de amonaco (20 o + ppm), y del bixido de carbono

ambiental (CO2), lo que ocasionar un incremento en la humedad relativa

ambiental, lo cual predispondr a la presencia de Rinitis, o procesos respiratorios,
as como a micosis cutneas o superficiales (tia). Por otro lado, cuando se
presentan disminuciones acentuadas en el porcentaje de humedad relativa del
ambiente, est predispondr a un padecimiento en ratas conocido como Cola
Anillada.

El rango de humedad relativa, puede variar con la especie de acuerdo al siguiente

cuadro:
b)

ESPECIE

RANGO

Ratn

50 70 %

Rata

50 55 %

Hamster

45 65 %

Cobayo

50 60 %

Conejo

40 50 %

Cuadro 2. Humedad relativa.

c) Ventilacin
El objetivo principal de la ventilacin es asegurar la oxigenacin y sustituir el
aire viciado por gases nocivos, generados en un rea, debido a la presencia de
fermentaciones del alimento, material de cama, polvo, CO2, NH3, entre otros. La
ventilacin dinmica es esencial en el bioterio, ya que ste es una instalacin
cerrada, por lo que necesariamente se requerir de un sistema de intercambio
gaseoso eficiente, con capacidad preservar la temperatura, humedad, adems
de que puede incluir preferentemente el filtrado del aire, acorde al nivel del
bioterio y estatus microbiolgico de los animales.

a.

Cuando el sistema de ventilacin resulta deficiente, lo primero que se

incrementar ser el nivel de

NH3 y CO2, ms all de los niveles

permisibles (+ 8 - 10 ppm). Para mantener ste rango, se requiere

forzosamente de un correcto nmero de cambios de aire por hora, y
regular la temperatura y humedad relativa
En la ventilacin dinmica, es necesario considerar que un caudal de
ventilacin alto, obliga a una mayor velocidad de aire, lo que ocasiona; menor
temperatura y humedad relativa dentro del cuarto, por lo que este tipo de

caudales de ventilacin precisar de temperaturas elevadas y de una

higrometra tambin alta. Asimismo, es esencial considerar el gradiente de
presin dentro de las reas funcionales, ya que ste puede fungir como barrera
fsica, de acuerdo al flujo o volumen inyectado (presin +) o extrado (presin -),
aunado al cual nmero y distribucin de las rejillas de inyeccin y extraccin de
aire. De igual forma la ubicacin permitir un barrido longitudinal adecuado y
evitar as la formacin de zonas grises u oscuras dentro de las reas. Cuando
las rejillas de inyeccin quedan por encima de las jaulas de alojamiento animal,
predisponen a la prevalencia de procesos respiratorios en los animales,
(corriente continua).
Los aspectos a evaluar, debern de contemplar; la concentracin de gases o
de vapores ambientales en el rea (NH3, CO2), la polucin generada de la
operacin diaria (polvo, partculas, pelos), mantenimiento de los gradientes de
presin, estado o capacidad de filtrado del aire, adems de determinar el barrido y
la densidad poblacional del rea.
El avance en la tecnologa en el mbito de la ciencia en los animales de
laboratorio e investigacin, ha permitido la implementacin de sofisticados sistemas
de alojamiento animal, los cuales proveen al animal de un microambiente dotado de
barrera ambiental o tapas filtros, as como el filtrado de aire, con filtros de alta
eficiencia tipo HEPA, mismos que garantizan el estatus microbial o esterilidad del
entorno animal, manteniendo de esta forma la barrera de bioseguridad, misma que
se realiza a travs de un flujo aire de entrada y de salida estril, al tiempo de
regular la temperatura y humedad relativa. El manejo de este tipo animales requiere
del uso de de campanas de flujo laminar con filtrado de tipo HEPA (99.97% de
filtrado). Figura 37

Estos equipos, permiten mantener un microambiente estril, de tal forma que

no se requiere de aire acondicionado con capacidad de filtracin alta (tipo HEPA),
los cuales facilitan y mantienen la barrera. Figura 37
El control y eficiencia de gradientes de presin y del flujo de aire, es llevado a
cabo a travs de barmetros y anemmetros. Los cambios de aire por hora
recomendados acorde a la especie se describen a continuacin:
c)

ESPECIE

RANGO

Ratn

8 12

Rata

10 20

Hamster

6 12

Cobayo

48

Conejo

10 20

Cuadro 3. Cambios de aire/hora.

d) Iluminacin
Durante la inspeccin es necesario determinar si los animales alojados son
estacionales o no estacionales, a efecto de considerar el fotoperodo es el
correcto. De igual forma se debe observar la fotointensidad, para determinar la
calidad del espectro lumnico, acorde a la especie.
Por ejemplo, la rata, el ratn y el hmster son animales no estacionales
y tienden a presentar ciclos estrales normales durante todo el ao, adems de
que dichas especies muestran respuestas importantes a las variaciones en la
intensidad lumnica y al fotoperodo, por tal motivo, es importante evitar que las
luces del alumbrado pblico o de pasillos del bioterio no interfieran durante la
noche con el ciclo circadiano de los animales, (interferencias en el fotoperodo).
Asimismo, lograr una difusin homognea del haz o arco de luz dentro de las
reas, evitar la presencia de zonas grises u oscuras, que tambin afectarn el
ciclo.

Los ciclos de luz/oscuridad pueden ser de 14 x 10 hrs. o de 12 x 12 hrs.

de acuerdo a la especie. En algunas especies como el conejo, pueden ser de 8
x 14 (gazapos) o 16 x 8 hrs. (reproductora), el control de los dichos ciclos
pueden ser logrados a travs del empleo de relojes de tiempo programables
(timers), que determinarn las horas luz/oscuridad y pueden ser elctricos,
digitales y electromecnicos.
En relacin a la intensidad de luz (fotointensidad) en el alojamiento
animal, es determina por medio de la unidad de medida conocida como lumens
o buja pie a 1 metro del piso, a travs de dimmers, ste generalmente depende
del nmero de focos e intensidad (watts), as como por su distribucin en el
rea. En cuanto al espectro lumnico, ste tendr que tener preferentemente
una calidad similar al espectro solar o la luz de da, con el objeto de no afectar
los procesos reproductivos y fisiolgicos de los animales. Figura 39
Asimismo, se debe evitar que el haz de luz se proyecte directamente
sobre las jaulas de los animales, con el objeto de evitar una sobre exposicin
lumnica, sobretodo en cepas de roedores albinas. Ztotzer en 1970 y Greenman
y colaboradores, en 1982, demostraron que niveles de 806 a 1076 lmenes (lx)
o buja pie (a 1 mt. del piso), son consideradas como una iluminacin adecuada
para el humano, pero no as, en el caso de ratas y ratones albinos, ya que se
ocasiona degeneracin retinal debido a la presencia de dichos lmenes, por lo
que stos no debern de exceder los 323 lmenes, a un metro del piso alojados
en cajas y/o racks (100 bujas pie).
Por lo que, es necesario determinar si las lmparas se encuentran
ubicadas preferentemente sobre los pasillos, de tal forma que el haz de luz que
forma permita un ngulo o arco de luz se distribuya diagonalmente hacia los
estantes con jaulas, logrando as una distribucin ms homognea dentro del
cuarto y se evita que la luz quede directamente sobre los animales del bioterio.
Cabe sealar, que las lmparas de luz incandescente no se recomiendan en los

cuartos de alojamiento animal, ya que stos varan la temperatura ambiental del

cuarto, derivado del calor generado por la incandescencia.
e) Ruido
Factor que influir directamente el bienestar animal y modificar el proceso
reproductivo y el comportamiento, derivando del estado de alerta o estrs que
ocasionar en los animales. De acuerdo con estudios realizados por Peterson y
colaboradores, el ruido, es capas de impactar en los parmetros metablicos y
de tipo endocrino, provocando incrementos en la presin arterial, por ejemplo, en
primates. Otro aspecto a considerar, es el alojamiento de especies antagnicas
o enemigos naturales, as cuando especies demasiado ruidosas (perros,
primates, gatos), lo que constituye un factor estresante para roedores y
lagomorfos, los cuales normalmente son silenciosos. Tambin se tiene que
considerar el ruido, que es atribuible a las actividades de las rutinas de trabajo
diario (manejo de equipo, racks, jaulas), as como por el ocasionado por el
personal (chiflidos, gritos, msica, etc.).
Existen reportes, como el de Anthony y colaboradores, que mencionan
la capacidad de dao que ocasiona el ruido y ste es medible en decibeles. Los
decibeles se traducen en presin de sonido, que dependiendo de la intensidad y
exposicin puede ocasionar desde dao mecnico en odo (+ 160 db), hasta
lesiones por exposicin prolongada (100 db), como las ocasionadas por el ratn
DBA/2, el cual sufre de convulsiones audiognicas a exposicin de ruidos
superiores a los 85 decibles de presin de sonido.
Es necesario considerar que los animales toleran ruidos acsticos
similares a los tolerados por el humano, motivo por el cual, es menester verificar
el tipo de especie alojada, las rutinas de trabajo y la distribucin de la planta
fsica del bioterio, para verificar si las reas cuentan con un adecuado
asilamiento acstico,

ya sea a travs

de la presencia de trampas de aire,

puertas (o doble puerta), paredes, (con buena densidad), pasillos y materiales

diversos que proporcionan un correcto asilamiento acstico.
2. Manejo fsico de animales
El manejo de animales requiere que el personal cuente con la tcnica y destreza
necesaria para manipular a los animales, acorde a la especie en cuestin.
Durante el manejo se deben considerar tres aspectos bsicos, consistentes en
capturar, manipular y levantar, adems el manejo esta condicionado acorde a la
ocasin, la especie y el temperamento del animal, considerando para ello la actitud
y comportamiento mostrado por el animal durante el acercamiento previo al manejo.
Uno de los objetivos del manejo es la de proveer al manejador de un acceso al
rea de auscultacin, evitando una excesiva manipulacin, estrs, dolor o que
influencie cambios de conducta. Asimismo, el manejo debe estar regido por tres
premisas bsicas, mismas que se mencionan a continuacin: firmeza, cuidado o
gentileza y seguridad.
La manipulacin fsica, permite realizar diagnstico de preez,

revisiones

clnicas, obtencin y administracin de lquidos corporales, el manejo de animales y

procedimientos experimentales. En ocasiones un mtodo fsico inicial permitir la
induccin de un mtodo qumico, que facilite la manipulacin o sujecin del animal.
A continuacin se mencionan diferentes tcnicas para la manipulacin fsica de los
animales de laboratorio.
MANEJO FSICO DE ANIMALES DE LABORATORIO
a)

Ratn:

Sujetando de la parte media o base de la cola, por medio de los dedos

ndice y pulgar o por el empleo de pinzas con punta ahulada.

Por retraccin o repliegue de la piel de la espalda y/o el cuello, con

sujecin de la cola. Figuras 5 y 6

b) Rata:

Sujetando la cola, en su porcin media o base, utilizando para ello los

dedos ndice y pulgar.

Se sujeta inicialmente la cola en zona media o base con los dedos ndice
y pulgar, colocndola sobre una superficie spera (que se afiance), y
haciendo una ligera pero firme traccin hacia atrs, se emplea la otra
mano para colocar el dedo ndice sobre el hombro, mientras el pulgar se
desliza por la axila del lado contrario al dedo ndice y los dedos medio,
anular y meique, son colocados por debajo de la otra axila, permitiendo
rodear el trax de la rata. Por ltimo la cola se coloca entre el dedo
meique y anular de la misma mano que sujeta a la rata.

Sosteniendo el cuerpo (trax y abdomen) en posicin dorso-ventral, sin

ejercer presin excesiva durante el proceso de traslado a otra jaula en el
cambio de cama. Figuras 7,8,9,10

c) Hmster:

Aprovechando su naturaleza curiosa, el hmster puede ser manejado

introduciendo un bote colocando dentro de la jaula, para que se introduzca
en l.

Formando una oquedad con ambas manos e introducindolas dentro de la

jaula para que se introduzca por curiosidad.

Por medio del repliegue de la piel de la espalda y cuello, empleando para

ello, el dedo pulgar e ndice y junto con los dems dedos se repliegan
sosteniendo la piel contra la palma de la mano.

d) Cobayo:

Se coloca al cuyo sentado sobre la palma de la mano, dejando que la

espalda y grupa del animal, se recargue sobre la palma de la mano.
(animales pequeos)

Se sujeta al cobayo por el trax por debajo de las axilas, soportando el

peso del animal en la palma de la otra mano. (animales adultos y
gestantes)

Sujetando al animal alrededor del cuerpo (trax y abdomen), sin

presionarlo excesivamente, para trasladarlo a otra jaula durante la rutina.
Figura 11,12,13

MTODOS DE CONTENCIN FSICOS

a) Cepos o restrictores de contencin fsica para roedores
Son dispositivos que permiten la introduccin de roedores o lagomorfos. En el
caso de roedores, la cola queda fuera del cepo y en la base del mismo presenta
orificios que permiten tener acceso al cuerpo del animal.

Los cepos para

conejos, exponen bsicamente la cabeza del animal. Existen diferentes diseos

y

son

manufacturados

diversos

materiales

como

plstico

(acrlico

policarbonato) o metal. Esto permite tener las manos libres para realizar diversos
procedimientos (inyecciones, sangrado, toma de presiones o constantes
fisiolgicas).Figura 14
b) Bases de inmovilizacin o para uso quirrgico
Los restrictores permiten sujetar al animal por las extremidades en una posicin
dorso-ventral o en decbito ventral, (con o sin anestesia). Este procedimiento
permite realizar diversos procedimientos tcnico-quirrgicos o experimentales,
tales

como

laparotomas,

punciones

cardacas,

entubado

endotraqueal,

curaciones, entre otros. Estos dispositivos son generalmente manufacturados en

distintos materiales. Figura 40.
MANEJO QUMICO
El empleo de sustancias qumicas deber ser utilizado cuando el manejo o
procedimiento experimental pueda ocasionar estrs, dolor, malestar o altere el
bienestar del sujeto experimental, siempre y cuando el empleo de ste no afecte
o interfiera en o los resultados del procedimiento experimental.

El manejo

qumico, requerir de una sujecin fsica previa a la induccin qumica. Figura

40. Los tipos de sustancias que se pueden emplear son:
1) Anestsicos Inhalados
Este tipo de anestesia deber de realizarse a travs de diferentes vas como
el goteo en cono abierto, campana de anestesia, cmara de anestesia o
equipo de anestesia inhalada, los cuales evitarn la inhalacin de vapores por
parte del personal y animales.

Eter

Halotano (no emplear en cobayos produce hepatoxicidad)

Metoxiflurano

Enfluorano, entre otros.

2) Anestsicos inyectables
El uso de ste tipo de anestsicos requiere de habilidad y el conocimiento
tcnico de las diferentes vas de administracin de acuerdo a la especie en
cuestin. El

tipo de sedante depender de la especie,

administracin.
a) Tranquilizantes

Xilacina o rompm

Clorhidrato de ketamina

cepa y va de

Acepromacina

Droperidol (no emplear en cobayos, produce necrosis muscular)

b) Anestsicos

Tiopental sdico

Pentobarbital sdico

Fenobarbital sdico,

Clorhidrato de ketamina

Hidrato de coral

d)

ESPECIE

Corazn Vena
*

Vena Vena Seno

Vena

Dedo

Safena Oreja Cola Orbital* Facial** del

pie

Ratn

Rata

Hamster

Cobayo

Conejo

x
x

x
x

Cuadro 4. Vas de Sangrado.

* Procedimiento requiere de anestesi)
(** Va que sustituye al plexo venoso del seno orbital)

Figuras 19,20,21,22,23,24
e)
f)

ESPECIE

Oral

SC

IM

H2O

Dorso-

Bceps

Alimento

lateral

femoral

Intragstrica y nuca

IP

Msculos
glteo

Ratn

Rata

Hmster

Cobayo

Conejo

Cuadro 5. Vas de administracin.

(SC= subcutnea, IM= Intramuscular, IP= Intraperitoneal, IV = Intravenosa o endovenosa).
Figuras 15,16,17,18

g)

Ubicacin

Ratn Rata

Vena Cola

Vena Safena

Hamster Cobayo Conejo

x
x

Vena Marginal Auricular

Vena Lateral Metatarsiana

Venas Yugulares

Cuadro 6. Vas de administracin endovenosa.

VERIFICACIN DE INSTALACIONES
3. Infraestructura del bioterio
Los bioterios, son instalaciones totalmente cerradas y dotadas de una
infraestructura bsica con diferentes grados de sofisticacin y con control del
ambiente animal. El sistema de ventilacin del aire acondicionado deber de estar
protegido de la presencia de vientos dominantes para que no entorpezcan la
eficiencia y funcionamiento del equipo. Figura 36
Las

instalaciones,

equipamiento

manejo

del

bioterio,

dependern

esencialmente de su propsito, el estatus microbiolgico de los animales y en su

defecto de la duracin del procedimiento experimental. Los bioterios pueden ser
clasificados:
a) De acuerdo al propsito

Centro de produccin

Centros de experimentacin

Centros de produccin y experimentacin (mixtos)

b) Acorde

al

tipo

de

barreras,

microbiolgicos del ambiente.

restricciones

controles

fsicos

Determinado por el estatus microbiolgico de los animales, grado de

sofisticacin de las barreras, manejo y tipo de experimentacin. Figura 35, 36

Axnicos

Gnotobiticos

Libres de patgenos especficos

Convencionales.

c) Duracin del procedimiento experimental que se realiza.

Experimentacin de corto plazo

Experimentacin de largo plazo

Caractersticas de diseo de un bioterio que deben ser consideradas:

1) Caractersticas de las instalaciones
2) Capacidad fsica por rea funcional
3) Categora del bioterio
4) Especies alojadas y caractersticas genticas
5) Tipo de barreras implementadas y estatus microbiolgico de los animales
6) Diagramas de flujos
7) Desarrollo de actividades del personal. Figura 29
A continuacin se describen los aspectos que deben ser considerados durante
la evaluacin.
2)

a) Instalaciones

Estn formadas por reas denominadas funcionales, que incluyen el rea de

lavado o servicios, de alojamiento animal (produccin y experimentacin), de
aislamiento (recepcin y cuarentena), reas especiales o de bioseguridad rea
administrativa, vestidores de personal, bodegas, almacenes, rea tcnica
(equipos), pasillos bsicamente. La presencia de barreras en un bioterio esta
determinado por el diseo de construccin, acabados, equipamiento, medidas de
control y manejo, caractersticas microbiolgicas de los animales alojados y tipo

de experimentacin o propsito del bioterio, aunado a la eficiencia en el

desarrollo de las actividades del personal. Figura 34
La inspeccin deber de incluir los acabados y caractersticas de
paredes, techos, pisos, puertas, lmparas y tubera, distribucin de las reas,
incluyendo el equipo de control ambiental y las rejillas de inyeccin y extraccin
de aire (condiciones ambientales). De igual forma se evaluara el asilamiento de
tipo acstico y lumnico de las reas, as como la capacidad fsica del cuarto y
por unidad de jaula y las especies alojadas (evitar distintas especies o cepas en
el mismo alojamiento). Figura 28
El rea de lavado, constituye un rea de servicio esencial para el
bioterio, ya que es donde se realiza todo el proceso de descontaminacin del
equipo empleado, implementado en el manual de operaciones. Es necesario que
dicha zona cuente con secciones y la implementacin de barreras fsicas, para
mantener un correcto flujo de circulacin, (puertas de apertura en solo sentido),
as como el manejo de gradientes de presin (presiones +/-), e intercambio
gaseoso adecuado. Figura 29
Se deber considerar en la evaluacin de paredes, techos o plafones y
el piso, que stos sean de tipo monoltico resistentes a la humedad y con
presencia de cuervas sanitarias que faciliten su limpieza.

Es necesario determinar la presencia o no de pisos tcnicos Relativo al

techo, es necesario considerar s se cuenta o no con un piso tcnico, de tal
forma que ste facilite realizar las reparaciones necesarias, sin necesidad de
que el personal ingrese a las distintas reas y contamine. La altura recomendada
oscila entre 2.15 a 2.50 m. El piso, deber de ser de acabado monoltico y con

resistencia qumica y mecnica al impacto adems de presentar curva sanitaria y

evitar la presencia de coladeras que contaminen. Figura 25
Las puertas, deben tener una amplitud que oscile entre 1.00 a 1.20 m, y
con una altura promedio de 1.90 a 2.30 m, dependiendo del equipo. Deber de
presentar un empalme correcto y constituir una barrera fsica (lumnica,
ambiental, acstica). Los pasillos, permitirn un adecuado flujo de circulacin y
del personal, debiendo contar con una amplitud que puede oscilar entre 1.20 m a
2.00 m. Con relacin a los gradientes de presin en pasillos, se sugiere que
stos presenten un gradiente de tipo negativo, con relacin a los cuartos de
alojamiento, con el objeto de evitar que la contaminacin penetre a las reas de
alojamiento animal. Figura 27
b) Zonas aisladas y de bioseguridad
Las zonas aisladas son reas que permiten mantener animales en
asilamiento o en observacin, de animales de nuevo ingreso (cuarentena),
enfermos o en experimentacin. Dicha rea deber de contar con la misma
infraestructura que el resto del bioterio y el manejo deber de ser realizado al
final de la rutina, adems de estar ubicados preferentemente a la entrada o
salida del bioterio, estando lo ms retirado o asilado posible de las colonias.
Figura 33
El rea de bioseguridad, es una zona de barrera prioritaria, en donde se
alojan o producen sujetos experimentales con un estatus microbiolgico alto
(SPE, gnotiticos, axnicos), que requieren de alta seguridad biolgica y de
una atencin y cuidados especiales, que incluyen esterilidad y estrictas
restricciones de acceso. ste tipo de reas, mantienen sujetos experimentales
sometidos a procedimientos experimentales de alto riesgo biolgico (vacunas,
estudio de enfermedades infecciosas) que pueden implicar en momento dado
un alto riesgo para la salud pblica o de tipo epizotico. As mismo, el personal

deber de contar con equipo de proteccin especial, que proporcione

aislamiento y evite contaminacin de los animales o del ambiente. Figura 26
La inspeccin de dichas reas deber de realizarse en estricto apego a
las restricciones y lineamientos de bioseguridad establecidos al efecto. Los
implementos de limpieza y personal debern de ser diferentes a los empleados
en otras reas, para evitar una posible contaminacin.
c) El flujo de circulacin
Se considera la circulacin del equipo y del personal que se lleva a
cabo a travs de pasillos existentes (limpio y sucio), acorde al diseo de la
planta fsica y en concordancia con el manual de operacin del bioterio. Se
entiende por pasillo limpio, aquel por donde transita el equipo limpio proveniente
del rea de lavado de la zona de preparacin y se dirige hacia el rea de
alojamiento animal. El pasillo sucio, permitir el traslado del equipo sucio
proveniente de las reas funcionales hacia el rea de lavado en la zona de
desenvaine. Generalmente la circulacin incluye tambin el transito

del

personal, de tal forma que permita un desarrollo higinico de las rutinas de

trabajo y coadyuva a respetar el flujo recirculacin, as como las barreras y
restricciones implementadas. Existen bioterios con un flujo bidireccional (un
pasillo), el cual implica que el personal y equipo debern transitar por el mismo
pasillo. La inspeccin de este aspecto abarcar su amplitud, acabados, remate
de piso con paredes y techo (zoclo sanitario), puertas y la ausencia de objetos
sobrepuestos, con excepcin de protector de pared. Figura 27,28
d) Desarrollo de actividades del personal
Las actividades del personal deben ser siempre supervisadas, ya que pueden
constituir un factor capaz de provocar factores adversos de tipo no experimental,
los cuales pueden ocasionar estrs, procesos infecciosos entre otros, los cuales

se pueden derivar

de la falta de higiene o de condiciones ambientales

inadecuadas.
Los aspectos a revisar debern de incluir:
1) Manipulacin de animales
Aspecto desarrollado durante la revisin clnica de animales y en la rutina de
trabajo diario, dado que una manipulacin inadecuada, excesiva o deficiente,
propiciar estrs, lesiones, as como cambios en la conducta de los animales,
adems con la posibilidad de un posible abandono de cros o prdida de los
mismos sobre todo durante el cambio de cama.

Otro aspecto a evaluar, es el

manejo de controles y registros reproductivos de donde se pueden obtener

informacin relativa a la eficiencia reproductiva, curvas de crecimientos,
mortalidad y datos clnicos.
2) Higiene
Deber de incluir tanto el equipo de alojamiento animal, as como las
instalaciones y la del personal. De esta forma se podr abatir la carga
bacteriana. Este aspecto tambin reencuentra en relacin directa con el estatus
microbiolgico y clasificacin del bioterio y deber estar implcito en los
manuales de operacin estndar del bioterio. De esta forma se evitar un posible
problema de salud ocupacional (zoonosis) o de epizootias. (estreptococias,
estafilococias, pseudomoniasis, micoplasmosis, legioneliosis, salmonelosis,
leptospirosis, parasitosis, etc.). Figura 32
RONDA CLINICA
La ronda clnica es un proceso clnico propedutico auxiliar, que permite al mdico
veterinario determinar de forma rpida y sencilla el estado de salud de los animales,
as como de las condiciones prevalecientes de ambiente, equipamiento e instalacin
animal.

Dicho aspecto involucra la visita de las diferentes reas del bioterio y

observando a distancia, a los animales detectando cambios de comportamiento,

postura, actitud y presencia de signos evidentes de enfermedad (presencia de
secreciones o exudados, tumoraciones, abscesos, diarreas, desnutricin, entre otras),
as como el posible deterioro de instalaciones o fluctuaciones en las condiciones del
ambiente animal. De esta forma se optimiza el tiempo y esfuerzo del mdico o
responsable para la implementacin de tratamientos, asilamiento de

enfermos y

correccin de fallas.
Asimismo, se deber observar el material de cama, charolas o parrillas en
busca de la presencia de cambios en las deyecciones (diarrea, en forma de rosario,
sangre o secreciones mucopurulentas o sanguinolentas). Tambin se determinar la
densidad poblacional, en base a la capacidad fsica del rea y del equipo de
alojamiento animal existente. El espacio fsico estar determinado con base a las
caractersticas de la especie a alojar. A continuacin, se mencionan la superficie
requerida por especie:
El no cumplir con las especificaciones de espacio fsico vital, puede
predisponer a jerarquizar y peleas, trastornos nutricionales (rechazos), menor
crecimiento, nerviosismo y problemas de viabilidad de camadas y muerte, de igual
forma se presentar ingesta de pelo, y estrs, entre otros.

a)

ESPECIE

SUPERFICIE cm2

Ratn

39 97

Rata

110 552

Hmster

65 123

Cobayo

387 652

Conejo

0.37 0.46 m2

Cuadro 7. rea de superficie de piso.

DETECCIN DE ANIMALES ENFERMOS

Posterior a la ronda clnica y habiendo realizado la lista maestra, en la cual se debe
haber detectado a los enfermos, se proceder a su revisin clnica, para ello se
verificar la integridad y caractersticas del pelaje (hirsuto, enmaraado de pelo, entre
otras), asimismo, si la especie lo permite se tomar la temperatura corporal va rectal y
se palpar la conformacin corporal y la cadena ganglionar superficiales del animal
(masa muscular y esqueleto), tratando de detectar la presencia de protuberancias,
abscesos, heridas. Figura 38
Inmediatamente despus, se inspeccionar los orificios naturales, para buscar
la presencia de inflamacin, exudados o secreciones, asimismo, se auscultarn los
rganos huecos (corazn, pulmones, etc.) siempre y cuando la especie lo permita, por
ltimo, se revisar el abdomen por palpacin y percusin, en busca de inflamacin
abdominal, cuerpos extraos o dolor. Durante ste proceso, se determinar si se
requiere la toma de muestras para envi al laboratorio o de histopatologa, o si el caso
lo amerita, se enviar para necropsia los cadveres o animales enfermos vivos.

TOMA DE MUESTRAS
La toma de muestras de animales enfermos es una herramienta bsica que provee al
Mdico Veterinario Zootecnista del medio para corroborar a travs del laboratorio por
mtodos diagnsticos clnicos y ofrecer un diagnstico veraz.
La toma de muestras debe incluir: la seleccin,

recoleccin, manejo,

identificacin y envo de muestras, acompaado de un resumen clnico que incluya un

diagnstico presuntivo. Estos pasos a seguir permitir obtener resultados veraces y
confiables, evitando posibles confusiones con los resultados y diagnstico final.
a) Seleccin de muestras
Las muestras recolectadas deben ser previamente seleccionadas segn la
enfermedad servicio que se solicite, seleccionando las lesiones representativas.

La muestra ideal es el animal completo, aunque en algunas ocasiones no es posible

no es necesario hacerlo.
La muestra debe tomarse de un caso clnico que sea representativo de la
enfermedad que afecta a la poblacin, seleccionando al animal que haya muerto
recientemente y que no est en estado de descomposicin. En ocasiones para
conocer el origen de un problema de una poblacin y poder prevenirlo ser,
necesario tomar tambin muestras de alimento, agua y ambiente del entorno
animal (hisopos de paredes, comederos, etctera, as como colocacin de cajas de
Petri abiertas en los alojamientos).
b) Manejo de muestras
El manejo de muestras incluir: la toma y empaquetado de la misma. Una vez
seleccionada, sta se recolectar considerando que la muestra sea de tamao
adecuado y representativo, obtenindola en condiciones aspticas para evitar
contaminaciones cambios posmortem que alteren enmascaren los hallazgos. El
tiempo que tarde la muestra en llegar al laboratorio, puede determinar predisponer
a posibles alteraciones y a resultados falsos.
Las muestras se deben guardar segn el tipo, ya sea en frascos o tubos con
cerrado hermtico (tapn de rosca) en bolsas de plstico que sea cerradas con
calor o con liga o bien por cerrado hermtico, debiendo ser empacados para evitar
su ruptura o perforacin y facilitar en sus caso su refrigeracin y traslado.
La preservacin de las muestras, tiene por objeto conservar y evitar la
descomposicin de tejidos o la proliferacin de microorganismos que contaminen.
Entre los mtodos de preservacin se encuentra, la refrigeracin entre los 5 y 10
C, la congelacin la cual se da por debajo la temperatura de refrigeracin (hielo
seco), tomando en consideracin que existen muestras como leche y sangre que se
descomponen con la congelacin, por lo que solo se refrigeran. Las muestras
debern ser empaquetadas preferentemente en cajas de polietileno con cierre
hermtico acompaadas de refrigerantes y un poco de aserrn productos similares

para evitar que se golpeen, rompan o pierdan. Otro mtodo de preservacin, podra
ser el formol al 10 % (en frasco de boca ancha). El tipo de conservador debe de
elegirse de acuerdo con el tipo de muestra y anlisis que se va a solicitar.
Para la toma de muestras se requerir de material limpio y estril. El
material que se requiere ser: material de vidrio (frescos y tubos), jeringas y equipo
de ciruga (bistur, tijeras, pinzas, entre otros)
c) Identificacin y envo de muestras
Toda muestra enviada al laboratorio deber de proporcionar una mnima
informacin consistente en:
1) Nombre, direccin y telfono del remitente o propietario.
2) Descripcin del animal: especie, raza, sexo, edad, entre otros.
3) Fecha de la muerte.
4) Fecha y hora de recoleccin de la muestra.
5) Descripcin de la muestra y conservador usado.
6) Tipo de anlisis que se solicita.
7) Resumen clnico:

Fecha de inicio de la enfermedad

Nmero de animales afectados

Edad de los animales

ndice de morbilidad

ndice de mortalidad

Tratamientos efectuados en su caso

Diagnstico presuntivo emitido por el Mdico Veterinario responsable

PRUEBAS DE LABORATORIO
Constituyen una herramienta valiosa que coadyuva para poder emitir un diagnstico
definitivo y veraz basado en evidencias. Existen diferentes tipos de anlisis de
laboratorio, entre las pruebas de laboratorio que pueden ser realizadas se encuentran;
anatomopataloga, histopatologa, botnica, bromatologa, toxicologa, hematologa,

bioqumica clnica, bacteriologa, urianlisis, parasitologa, micologa, serologa,

virologa e enmunofluorescencia. Los mtodos de diagnstico podrn incluir: rayos X,
resonancia

magntica,

tomografa

computarizada,

endoscopia

diagnstica,

cateterismo, gamagrafa con el empleo de hisopos radiactivos, entre otros, los cuales
son de poco uso en el animales de laboratorio, salvo cunado el procedimiento
experimental lo amerite.
Al respecto, cabe sealar que en el mbito de la produccin de animales de
laboratorio, algunas de estas pruebas de laboratorio no son generalmente empleados,
en parte por el alto costo de stos (costo-beneficio) o por que son imprcticos por el
tamao de la especie, aunque algunas ocasiones son desarrolladas con fines
experimentales
Dentro de las pruebas de laboratorio que se pueden realizar se encuentran:
1. Anatomopatolgico
Tiene por objeto realizar estudios de lesiones tpicas de las enfermedades tratando
de determinar el proceso patolgico que caus la muerte del animal. Estos datos
podrn orientar al Mdico Veterinario respecto a que exmenes de laboratorio
complementarios se necesitan para llegar a un diagnstico final. En ocasiones se
llega a omitir ste tipo de estudio, sin que para ello exista impedimento para poder
realizar otras pruebas de laboratorio, que permitan llegar

a integrar un buen

diagnstico.
2. Histopatologa
Se centra en detectar los cambios bsicos microscpicos presentes en un proceso
patolgico. Las muestras se obtienen durante la necropsia de los animales
utilizando instrumental preferentemente estril en cortes en forma de cubo de 1 cm.
x 1 cm. x 5 cm. de cada lesin seleccionada incluyendo parte del tejido sano
circundante. La muestra se coloca en un frasco de boca ancha que contenga formol
al 10 % como conservador para cubrirlos totalmente.

3. Botnica
Este tipo de pruebas se emplea para identificar plantas o forrajes que hayan
causado algn problema al ser ingeridas por los animales. Las muestras debern
de incluir varias plantas del mismo tipo, para su identificacin (si es chica se
recolecta completa, incluyendo la raz). Si la planta presenta frutos se podr enviar
completos o cortes. Cuando la planta es grande se toman las partes terminales con
las flores o los frutos incluyendo hojas adultas. El material recolectado se coloca en
una hoja de papel peridico procurando no maltratar hojas, flores o frutos (se puede
doblar con cuidado) adems la muestra se colocar entre dos papeles secantes
(cartoncillo de 48 x 30 cm.) y posteriormente se ata entre dos cartones corrugados.

Dicho tipo de estudio requiere de anexar cierta informacin a cerca de la

localizacin de la planta (estado, municipio, rancho o predio y distancia en
kilmetros a la poblacin ms cercana). Si el mismo tipo de planta se localiza en
diferente zonas se deber de anexar otra hoja de datos para hacer estudios sobre
la distribucin de la planta.
4. Bromatologa
Permite conocer los valores nutritivos del alimento, pastos y forrajes. Conociendo
las carencias nutritivas de los alimentos, permite determinar si existen trastornos
carenciales y evitar que la produccin decaiga o se presente enfermedades. Las
muestras debern de enviarse en frascos o bolsas limpias y secas.
5. Toxicologa
Este tipo de estudios permiten analizar las substancias que son causa de
intoxicaciones en los animales. Los principios txicos de ciertas plantas,
insecticidas, herbicidas, medicamentos y otras substancias cuando son ingeridas en
exceso causan serios trastornos e incluso la muerte de los animales por
envenenamiento o bio-acumulacin. Dicha prueba permitir conocer la terapia
especfica y controlar as la situacin. Las muestras requeridas son alimentos y

forrajes enviados en frascos o bolsas de plstico limpias y secas. Todas las

muestras de rganos se recolectarn por separado en frascos o bolsas de plstico
limpias y secas, envindose congelados sin adiccin de conservadores.
Si la muestra es de origen animal se debe de enviar:
a) Si hay signos nerviosos se enviarn: cerebelo, cerebro y mdula.
b) Si hay problemas digestivos, diarreas, vomito, entre otros, se enviar: intestinos,
bazo, hgado, rin y estmago.
c) Si hay alteraciones respiratorias enviar pulmn y trquea.

6. Hematologa
Permite conocer un proceso patolgico a travs de las alteraciones que sufren los
diferentes elementos que constituyen la sangre. Este tipo de pruebas, se realiza a
travs de sangre con anticoagulante. La muestra se obtiene a travs de las venas
superficiales del animal y una vez obtenida se le debe dar un movimiento rotatorio
suave para que la sangre se mezcle perfectamente con el anticoagulante (EDTA,
heparina), debiendo ser depositada lentamente en un tubo. La muestra deber de
ser remitida despus de 8 horas mximo de haberse tomado la muestra.
Generalmente con ste tipo de muestras se acompaan de un frotis.
7. Bioqumica clnica
Permite el diagnstico, pronstico y teraputica a seguir en deficiencias
nutricionales o alteraciones del metabolismo. La

muestra requerida para ste

estudio es el suero sanguneo no hemolizado y centrifugado en una cantidad no

menor de 5 mL. La muestra ser obtenida a travs de las venas accesibles del
animal, llenado el tubo en sus dos terceras partes, si se obtiene el suero, este
puede ser congelado para su preservacin o envo.
8. Bacteriologa
Se pueden obtener muestras de rganos, tejidos, lquidos orgnicos (leche, orina,
lquido peritoneal, semen), as como de exudados, excremento, forrajes,

concentrados, agua e hisopos de bebederos, comederos, jaulas. Las muestras para

ste tipo de estudios, deben tomarse a lo sumo una hora despus de la muerte del
animal y deber de ser enviada sin conservadores, procurando que vayan
refrigeradas. S se van a tardar en enviar la muestra, evitar lo posible que
sobrepase el lmite mximo de 10 horas. Las muestras deben de enviarse cada una
por separado para evitar contaminacin de la muestra. Las tomas de muestras se
realizarn de acuerdo al tipo de muestra a evaluar, entre las cuales se encuentran:
a) rganos y tejidos
Se toman muestras representativas de la lesin, abarcando una zona sana
circundante, guardndolos en frascos limpios de boca ancha. No se deben
almacenar rganos o tejidos diferentes juntos, para evitar contaminaciones.
b) Excremento y exudados de rganos genitales
Se recomienda la toma de muestras a travs de hisopos estriles, va rectal,
vaginal o prepucial (previa desinfeccin del entorno). Una

vez obtenida la

muestra se coloca dentro de un tubo con o sin medio de transporte y tapn de

rosca, evitando dejar dentro del tubo la zona de donde se manejo el hisopo.
c) Lquidos corporales
Orina
La muestra deber de tomarse preferentemente a primera hora, evitando
contacto con el exterior
Leche
Cuando se observa o sospecha de la presencia de mastitis, podr ser
tomada una muestra, desinfectando el pezn y zona aledaa con alcohol al
70 % o benzal, eliminando la primera leche que salga, recolectando la mayor
cantidad posible (hasta 10 mL), acorde a la especie.
Otros lquidos
Se puede recolectar sangre, lquido cefalorraqudeo y asctico, en cuanto al
cadver se puede obtener lquido pleural, peritoneal, hidropericrdico y

contenido estomacal, los cuales pueden ser recolectados con hisopos o con
jeringa estril y colocados en frascos estriles, hermticos y mantenidos en
refrigeracin.

d) Alimento y agua
Se toma una pequea cantidad de alimento principalmente del que los animales
tienen acceso y se introduce en una frasco estril. En el caso del agua se
recomienda esterilizar (flameado) la salida de la toma de donde se tomar la
muestra, dejando correr un poco del agua antes de la toma, depositndolo en un
frasco estril, sellndolo con cinta adhesiva. Estas muestras debern de enviarse
rpidamente al laboratorio y refrigerarlas. (si el agua estaba clorinada, se puede
inactivar el cloro con 1 mL de una solucin al 10 % de tiosulfato de sodio)
9. Urianlisis
Esta prueba permite detectar no slo trastornos en riones, vejiga y rganos
accesorios urinarios, sino tambin del hgado y estudios de bacteriologa. La
muestra debe ser recolecta en un frasco estril o limpio y deber de ser
preferentemente la primera de la maana, permitiendo que salga una muestra
inicial y pequea de orina, para despus recolectar la muestra, evitando el contacto
con las manos del operador y con otras partes del cuerpo o con excretas.
10. Parasitologa
Determinar la presencia de diferentes tipos de parsitos que pueden estar
presentes en el conejo.
Las pruebas pueden involucrar la toma de muestras de:
a) Excremento
La toma se deber depositar en un frasco limpio y seco, procurando
preferentemente que la muestra no caiga al suelo o tomarla directamente del

ano. En el caso de conejos y roedores es comn que durante la manipulacin

stos defequen.

b) Raspado de piel
La muestra es tomada de la orilla de la lesin con una navaja de mango y mojada
en glicerina, raspando hasta que aparezcan puntos rojos, depositndola en
recipiente limpio y seco.
c) Vsceras
Las vsceras empleadas incluyen: hgado, pulmones y tracto gastrointestinal, los
cuales pueden obtenerse durante la necropsia. Asimismo, se puede enviar
exudado de prepucio o de vagina.
11. Micologa
Determinar la presencia de hongos que puedan estar infectando un animal de
laboratorio y provocan diversos tipos de lesiones que pueden ser confundidos por
bacterias, sobretodo si el animal no ha respondido al tratamiento con antibiticos.
La recoleccin de la muestra se realiza por medio un raspado de piel, que incluya
pelos de la zona aledaa y parte de piel sana, depositndola en un frasco limpio y
seco.
12. Serologa
Se emplea cuando una enfermedad no puede ser diagnosticada por medio del
asilamiento e identificacin del agente causal, se tendr que recurrir a pruebas en el
suero sanguneo de animales afectados. La muestra se obtiene a travs de la
sangre obtenida de venas accesibles. El tubo es llenado a sus dos terceras partes
(nunca menor a 2 mL) y se deja en posicin inclinada a temperatura ambiente, para
que forme el cogulo. Una vez formado, se vaca el suero a un tubo limpio y se
congela para enviarse al laboratorio.
13. Virologa

Permite comprobar la presencia de enfermedades virales a travs de cultivo de

tejidos. Para ste tipo de estudios, es preferible tener al animal vivo que muerto,
pero cuando esto no es posible, se envan las vsceras afectadas. Es importante
considerar que los virus se inactivan ms rpidamente que las bacterias, por lo que
deben ser enviados lo antes posible. Las muestras pueden ser conservadas en
refrigeracin, congeladas o en una solucin de glicerina fosfatada o de glicerina al
50n %.
14. Inmunofluorescencia
Es una prueba muy exacta y rpida que es empleada para el diagnstico de rabia,
aunque puede ser empleada para otras enfermedades. La muestra podr variar de
acuerdo a la enfermedad, entre las que se encuentran:
1) Rabia: encfalo (cerebro)
2) Laringotraqueitis: trquea
3) Newcastle: improntas de crnea fijadas en acetona durante 10 min.
4) Clera: ganglios, placas amigdalinas, bazo y rin.
5) Aujesky: cerebro, tejido celular subcutneo.
Las muestras se enviarn en frascos limpios con glicerina al 50 % (mitad agua
y mitad glicerina) para evitar su descomposicin.
INTEGRACIN DEL DIAGNSTICO
La integracin consiste en recopilar y analizar la informacin obtenida durante el
cuestionamiento de la visita, incorporando las observaciones realizadas durante la
ronda clnica de instalaciones, la revisin clnica de los animales, aunado a los
resultados obtenidos de los exmenes de laboratorio llevados a cabo.
DIAGNSTICO DEFINITIVO
Se fundamenta en la integracin de la informacin proporcionada, as como del
anlisis racional de los factores que interactan en la causa del problema o
enfermedad, a travs de las observaciones hechas durante la ronda, informacin

obtenida, as como del examen fsico realizado y la interpretacin de los resultados de

pruebas de laboratorio, a los cuales se aplicarn los conocimientos y criterio
profesional, que permita emitir un diagnostico veraz y confiable, que este basado en
evidencias verificables, con el objeto de implementar la teraputica apropiada e
implementar las medidas preventivas o sanitarias necesarias a efecto.
LITERATURA CITADA
Aluja de Aline S, Constantino C. F. Tcnica de Necropsia en Animales Domsticos.
Mxico: El Manual Moderno, 2002.
Foster L. Henry, Small J. David, Fox James G., The Mouse in biomedical research.
Vol. III, Academic Press, Inc. New York, 1983.
Harkness JE, Wagner JE. The Biology and medicine of rabbits and rodents. 3th ed
Philadelphia: Lea & Febiger,1989.
Jeffrey ML. Laboratory animal medicine and sciencie. Philadelphia: University of
Pennsylvania.
Kelly WR. Diagnstico clnico veterinario. Mxico: Compaa Editorial Continental,
1979.
Soriano Rosales RE. Manual AALAS para entrenamiento de tcnicos en animales
de laboratorio. Tesis de Licenciatura FMVZ., Mxico, DF., 1997.
Pacheco Cruz Pacheco, Gonzlez PR, Propedutica clnica veterinaria. Mxico:
Compaa Editorial Continental,1991.
Sharp Patrick E, Marie C. LaRegina. The laboratory rat. New Cork: CRC Press,
2003.
Zuiga, JM, Tur MJA, Milocco SN, Pieiro R. Ciencia y tecnologa en proteccin y
experimentacin animal. Espaa: McGraw Hill Interamericana, 2001.

FIGURAS INCLUIDAS

Fig. 1. Bases para el diagnstico, microscopio electrnico

computarizado de barrido, estructuras tridimensionales.

Fig. 3. Higiene, factor humano.

Figura 5. Procedimiento de sujecin del ratn

por piel y cola.

Fig.2. Factor humano manejo de primate.

Fig. 4. Condiciones ambientales rea funcional

de alojamiento animal.

Figura 6. Ratn sujetado por piel del dorso.

Figura 7. Sujecin rata por cuello.

Figura 9. Sujecin de rata a dos manos por el cuello

Figura 8. Traccin de cola para sujecin de cuello de rata.

Figura 10. Sujecin de ratn por cola con pinzas ahuladas.

con guante de carnaza.

Figura 11. Sujecin de cobayo por torso a

dos manos.

Figura 12. Sujecin de cobayo por torso con guante.

Figura 13. Sujecin de cobayo envuelto en trapo.

Figura 15. Administracin intragstrica en ratn.

Figura 17. Administracin subcutnea en conejos.

Figura 14. Cepo de contencin, procedimiento de introduccin.

Figura 16. Administracin subcutnea en ratn.

Figura 18. Administracin intraperitoneal ratn.

Figura 19. Sangrado plexo venoso orbital en ratn.

Figura 20. Sangrado plexo venoso orbital en ratn.

Figura 21. Sangrado va cardiaca en ratn.

Figura 22. Sangrado en vena metatarsiana en ratn.

Figura 23. Sangrado en vena metatarsiana

en ratn.

Figura 24. Delimitacin de arteria y venas marginales en conejo.

Figura 25. Pasillo con zoclo sanitario.

Figura 27. Pasillo limpio, amplitud 2 m y

caractersticas monolticas.

Figura 29. Desarrollo de actividades del

personal rea de lavado sin
secciones delimitadas.

Figura 26. rea restringida.

Figura 28.Pasillo bidireccional, amplitud

1.50 m, caractersticas no
monolticas.

Figura 30. Jaulas de polietileno blanco

densidad poblacional.

Figura 31. Deterioro plafn.

Figura 33. rea de aislamiento.

Figura 32. Equipamiento de personal,

rea de lavado.

Figura 34. Protector muro de pasillo.

Figura 35. Piso tcnico instalaciones.

Figura 36. Control computarizado de ambiente.

Figura 37. Equipos ventilados automatizados.

Figura 38. Rata con signos evidentes de

enfermedad.

Figura 39. Hembra con cros.

Figura 40. Proceso experimental en rata.

Gebril

15 24 C

Perro

18 21 C

Gato

20 22 C
Temperatura Ambiental

Gebril

40 50 %

Perro

45 55 %

Gato

45 60 %
Humedad relativa

Gebril

8 10

Perro

8 12

Gato

10 18
Cambios de Aire /hora