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I- PRCTICA N 1

MANEJO DE LOS PRINCIPALES EQUIPOS E INSTRUMENTOS, PREPARACIN DE


MATERIAL DE VIDRIO, MATERIAL AUXILIAR Y S-U FORMA DE ESTERILIZACIN
1.1 Marco terico
En el laboratorio de Microbiologa es necesario utilizar material limpio, sin trazas de
detergente y estriles para el aislamiento y posterior identificacin de los grmenes que
se est investigando, se entiende por
Limpieza al proceso fsico utilizado en los objetos en uso del laboratorio para eliminar
materia orgnica y residuos, mediante el lavado con agua con o sin detergente.
Desinfeccin Es un proceso en el que se utilizan principalmente agentes qumicos y
Esterilizacin que viene a ser la destruccin de toda forma de vida, sta puede ser por
vapor saturado (autoclave) o por calor seco ( horno )
1.2 Competencias

Maneja y equipos y materiales en el usa Laboratorio.


Estudia in Vitro a los microorganismos.
Prepara e identifica el material de vidrio y su forma de esterilizacin

1. 3 Materiales y equipos

Equipos e instrumentos tales como: Autoclave, horno, incubadora, bao Mara,


refrigeradora,, equipo para luz ultravioleta , equipo de esterilizacin por filtracin,
cmara de flujo laminar, centrifuga y microscopio compuesto,
Portaobjetos y cubreobjetos
Papel para lente
Aceite de inmersin
Torundas de algodn
Gasa
Asa de Kolle
Cultivo bacteriano
Papel kraft
Tubos de prueba
Placas Petri
Balones, vaso de precipitados, pipetas y matraces de vidrio
Cinta indicadora de esterilizacin (para autoclave)

1. 4 Procedimiento
1. Examina laminar , bao mara, equipo de esterilizacin por filtracin, centrifuga y
microscopio e identifica sus componentes , su aplicacin y utilizacin en el laboratorio

cada uno de los siguientes equipos e instrumentos del laboratorio: autoclave, horno,
incubadora, cmara de flujo

2. Observa al microscopio las muestras que a continuacin se indican:


Cultivo bacteriano:
Coloca sobre la lmina portaobjeto una gota de cultivo bacteriano y deja caer la
lmina cubreobjeto.
3. .Preparacin de material de vidrio y material auxiliar

Confecciona tapones de algodn para el material de vidrio proporcionado, estos deben


ser consistentes y de un tamao apropiado que permita su manipulacin.

Empaqueta este material con papel kraft, en igual forma tambin se procede
con todo el material auxiliar que se use en el laboratorio para someterlo a un
proceso de esterilizacin y luego conservar su esterilidad .un tiempo adecuado

Las placas Petri y los tubos de prueba (previamente taponados) se envuelven


formando paquetes de tres y seis unidades respectivamente. Debe tenerse
especial cuidado en que el papel utilizado se encuentre ntegro y sin orificios. Para
las torundas e hisopos se procede de igual forma.

En el caso de las pipetas, se cortan bandas largas (tiras) de papel kraft y se las
envuelve en forma diagonal y empezando por la punta, colocando un refuerzo de
papel en esta seccin, de esta forma la pipeta quedar ntegramente cubierta por
el papel. Al final de la envoltura se dejar una porcin en la que se escribir en
nmeros la capacidad de volumen de la pipeta.

1. 5 Resultados
Se registra detalladamente cada una de las observaciones hechas Y se realiza los
esquemas y dibujos necesarios: Equipo de laboratorio (indicando sus componentes).
Procede de igual forma con el material de laboratorio empleado
1. 6 Cuestionario.
1. Con qu propsito se envuelve totalmente el material a esterilizar?
2. En un cuadro comparativo explicar las diferentes formas y condiciones del proceso de
esterilizacin que se emplea segn el tipo de material a esterilizar.
3. Informar en forma concisa el uso e importancia de los equipos descritos en la
prctica

1. 7 Fuentes de informacin

Tortora,Berdell, Funke Christine.L.Case Introduccin a la Microbiologa 9 Edicion.


Editorial Mdical Panamericana Espaa , 2007
Tortora G. J.; Funke, B. R.; Case, C. L.: Introduccin a la Microbiologa, Buenos Aires,
9 d. Editorial Acribia. 2000

Introduccin
La esterilizacin es un proceso a travs del que se logra la destruccin total de los
microorganismos viables presentes en un determinado material. Este procedimiento es de
gran utilidad dentro del campo farmacutico, ya que existen muchos procesos que
requieren la utilizacin de materiales estriles. Entre stos podemos destacar: La
esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso mdico con el propsito de
reducir el riesgo de infecciones en pacientes. El acondicionamiento del material (pipetas,
tubos, placas de Petri, pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de
microbiologa. La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes
propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, equipos o personal, anlisis
microbiolgico de medicamentos, cosmticos, alimentos, etc.) La descontaminacin de
material utilizado.
LaMicrobiologa es una ciencia que estudia a los organismos microscpicos denominados
microorganismos los cuales se definen como aquellos seres vivos unicelulares o
pluricelulares carentes deorganizacin tisular y que no pueden ser visualizados al ojo
humano
necesitando
para
ello
el
microscopio
Para el estudio de este tipo de seres vivos se necesita el conocimiento de tcnicas nicas
denominadasTcnicas
microbiolgicas
Estas Tcnicas han permitido el conocimiento de las diferentes estructuras y composicin
bacteriana pudiendo comprenderse como muchas bacterias se relacionan con el
hombreya sea como integrantes de la flora normal o como agresoras para el mismo
El estudio de la composicin bioqumica de la estructura bacteriana junto al conocimiento
de su metabolismo permite hoyla comprensin del mecanismo de accin de los diferentes
antibiticos
Hoy en da los avances de la gentica bacteriana hacen posible el desarrollo de tcnicas
de Biologa molecular con aplicacionesa nivel de la investigacin cientfica y el diagnstico
donde
los
microorganismos
cumplen
un
rol
protagnico
El conocimiento, ,manejo y utilizacin de los principales equipos, instrumentos ymateriales
utilizados en el laboratorio de microbiologa es indispensable para la ejecucin y
desarrollo de las prcticas durante el curso de microbiologa general que permitirn al
alumno, futuroprofesional de la salud aplicar estos conocimientos en el estudio de
diferentes especialidades en el campo de la microbiologa

Objetivos

Reconocer cuales son los agentes de control ms empleados para


combatir los microorganismos.

Conocer el efecto que causa cada uno de los agentes de control microbiano
sobre la clula.

Reconocer los procesos que se logran para la destruccin total de los


microorganismos viables presentes en un determinado material.

1.1 Marco terico


En el laboratorio de microbiologa es necesario utilizar material limpio, sin trazas de
detergente y estriles para el aislamiento y posterior identificacin de los grmenes que
se est investigando, se entiende por limpieza al proceso fsico utilizado en los objetos en
uso del laboratorio para eliminar materia orgnica y residuos, mediante el lavado con
agua con o sin detergente.
Desinfeccin. Es un uso proceso en el que se utilizan principalmente agentes qumicos y
esterilizacin que viene a ser la destruccin de toda forma de vida, esta puede ser por
vapor saturado (autoclave) o por calor seco (horno)

1.2 Competencias :
Manejo de equipos y materiales que se usa en el laboratorio
Con respecto a las instalaciones:
a)
Las ventanas y puertas deben de abrir adecuadamente, ya que en caso de humos
excesivos es necesaria la mxima ventilacin y en caso de incendio, la mnima.
b)
Las mesas y suelos y el mobiliario en general deben estar en buen estado y para
evitar accidentes.
Con respecto a la disciplina dentro del laboratorio:
a)

Cada grupo se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.

b)
La utilizacin de bata es obligatoria, ya que evita que posibles proyecciones de
sustancias qumicas lleguen a la piel.
c)
Se aconseja, si se tiene el pelo largo, llevarlo recogido o metido en la ropa, as como
no llevar colgantes.
Las pruebas de sensibilidad bacteriana se llevan a cabo mediante el antibiograma que
sirve para medir la sensibilidad de una cepa bacteriana a uno o varios antibiticos. El
estudio de la sensibilidad in vitro es uno de los requisitos previos para la eficacia in vivo
de un tratamiento antibitico. Tambin es importante para realizar estudios sobre la
evolucin de las resistencias bacterianas que permite revisar los protocolos de la
antibioticoterapia emprica.
Preparacin del material de vidrio: este acondicionamiento debe realizarse de manera
tal de asegurar la perfecta esterilizacin del mismo en todos sus puntos y evitar la
posterior contaminacin.
a. Placas de Petri: se envuelven en papel madera segn la tcnica indicada por el
instructor (se esterilizan en estufa a 160- 180C durante dos o una hora
respectivamente).
b.
Esterilizacin previa: Ser necesaria cuando el material y/ o equipos hayan sido
utilizados con material infeccioso o presunto infeccioso, por ejemplo placas de Petri
inoculadas, tubos conteniendo cultivos de microorganismos, frascos empleados en el
cepario, etc. Sern esterilizados en autoclave a 1 atm. de presin durante 15 30 minutos

1.3 Materiales:
Portaobjetos y cubreobjetos

Asa de kolle

Papel kraft

Placas Petri

1.4 Procedimiento:

Torundas de algodn

cultivo bacteriano

Tubos de prueba

1. observamos la muestra en el microscopio

1. Obtenemos el cultivo bacteriano para


proceder hacer la siembra calentando el
asa de kolle hasta quedar rojo.

2. Calentamos el porta objeto para


luego agregarle una gota de agua
despus agregar el cultivo

3. Una vez agregado el cultivo


en el porta objeto procedemos
a calentarlo

4. Despus cogemos con la


pinza para llevarlo al
microscopio y observar la
muestra

5. Una vez puesta la muestra


de un parazito en el
microscopio procedemos a
bservar y describir lo que
estamos viendo ya sea forma
tamao .

Confeccionamos tapones de
algodn para el material de
vidrio estos deben ser
2. Preparacion del material de vidrio y material auxiliar
consistentes y de un tamao
apropiado que permita su
manipulacin.

Luego empaquetamos las


placas Petri con papel kraft
para someterlo a un proceso
de esterilizacin y su
conservacin.

Para las pipetas se cortan las


bandas largas de papel kraft
y las envolvemos en forma
diagonal empezando por la
punta.

1.5 Resultados:

Registramos detalladamente cada una de las observaciones realizadas en el


laboratorio y podemos decir :

1. En la primera observamos la muestra de un parazito en el microscopio teniendo lo


siguiente son larvas filariformes, finas y alargadas.
2. En las preparaciones del material de vidrio podemos decir que es un mtodo muy
bueno para la esterilizacion de los materiales que van a hacer empleados para
cualquier tipo de muestra.

1.6 Cuestionario:

1 con que propsito se envuelve totalmente el material a esterilizar?


El propsito de cualquier sistema de envoltorio es el de contener estos objetos y
protegerlos de la contaminacin por suciedad, polvo y bacterias. El paquete debe
preservar la esterilidad de su contenido hasta el momento de su apertura, momento a
partir del cual sern utilizados en rea estril. Los objetos deben estar envueltos de
manera tal que el envoltorio que los contiene pueda ser abierto y su contenido extrado sin
contaminaciones.

2 En un cuadro comparativo explicar las diferentes formas y condiciones del


proceso de esterilizacin que se emplea segn el tipo de material a esterilizar?

PROCESO

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

ESTERILIZACION POR CALOR SECO

ESTERILIZACION POR OXIDO DE ETILENO

ESTERILIZACION POR PLASMA DE


PEROXIDO DE HIDROGENO

EMBALAJE POSIBLE
- Papel grado quirurgico (ideal)
-Papel Kraft norma IRAM 3106
-Cartulinas
-Tela tejida/no tejida
-Pouch polipropileno
-Vidrios (lquidos)
-Contenedor rgido perforado
con filtro

-Caja metal
-Foil aluminio
-Vidrios
-Poliamida

-Papel grado quirrgico


-Papel Kraft normas IRAM 3106
-Pouch polietileno/polipropileno
-Polietileno baja densidad
-Tela tejida/no tejida
-Polipropileno
-Contenedor rgido perforado
con filtro

-Polipropileno
-Pouch de Tyvek

3 . Informar en forma concisa el uso e importancia de los equipos descritos en la


practica

En este informe hayamos los conocimientos adquiridos en la Unidad de esterilizacin la


importancia, el cuidado, la responsabilidad, el inters por la salud del paciente y de
nosotros mismos. Experimentamos el proceso de eliminacin de microorganismos a
utensilios reutilizables por donde ingresan quienes reciben el material, como es el

tratamiento que se le da a este producto para que siga siendo utilizado.y a su vez es muy
importante para tener buenos resultados .

1.7 Bibliografa
http://www.codeinep.org/preparaciondematerialesenvoltoriosymetodos1.htm
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M
%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf
http://www.buenastareas.com/ensayos/Practica-De-Microbiologia/60095067.html

Pudimos observar
una muestra de un
parazito en forma de
un coco

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