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I.
OBJETIVOS:
Preparar casena.
Realizar pruebas caractersticas de la casena.
Realizar pruebas con protenas coagulables.
Materiales:
Tubos de ensayo
Vasos de precipitado de 50 ml
Una gradilla para tubos de ensayo
Un erlenmeyer de 250 ml
Un erlenmeyer de 150 ml
Probeta de 50 ml
Dos pipetas graduadas de 5.0 ml
HNO3 (c)
Hidrxido de calcio
Reactivo de Biuret
Reactivo de Fehling A
Reactivo de Fehling B
3.2 Reactivos:
Agua destilada
cido actico
Carbonato de calcio
HCl al 2%
NaOH al 1%
NaCl al 10%
3.3 EQUIPOS:
Mquina de centrifugacin
1.
AISLAMIENTO DE LA CASENA:
AADIMOS HCl
HASTA QUE TENGA
UN pH DE 4.0
SE SEPARA EL
LIQUIDO DE LA
SUPERFICIE Y SE
SE ELIMINA
EL
15 SOBRENADA
min
LECHE
PURA DE
VACA
CENTRIFUGAMO
S POR 5 Min A
3000 rpm
CENTRIFUGAMO
S POR 10 Min A
2000 rpm
SE ELIMINA
EL
SOBRENADA
LECHE
SE
DESCREMAD PASA A
A CON 20ml
UN
DE AGUA
TUBO
DESTILADA
DE
EQUILIBR
A-MOS
CON AGUA
CON EL
MISMO
PESO EN
UN TUBO
SE ELIMINA
EL
EL
PRECIPITAD
SOBRENADA
O SE
GUARD
HASTA QUE
CENTRIFUGAMO
S POR 10 Min A
2000 rpm
FASE
CENTRIFUGA
SLIDA + MOS POR 10
10 ml de Min A 2000
rpm
FASE SLIDA +
5 ml de CIDO
ACTICO + 5
ml DE TER
CENTRIFUGA
MOS POR 10
Min A 2000
rpm
CASEN
A EN
POLVO
HUMOS
BLANQUECI
NOS
GOTAS
DE
AGUA
RESIDU
OS DE
COLOR
NEGRO
2.2. Solubilidad
1. Marcamos 5 tunos de ensayo como: A, B, C, D y E. Pusimos a cada tubo una
pequea porcin de casena.
2. Agregamos a los tubos 5 ml de: al tubo A, agua destilada, al B, cloruro de sodio al
10%, al C, solucin de HCl al 0.2%, al D, solucin de NaOH al 1% y al E, solucin
saturada de hidrxido de calcio. Agitamos los tubos y anotamos las observaciones
relativas a la solubilidad de la casena.
CASEN
A EN
POLVO
5 ml de
AGUA
DESTILA
DA
INSOLUB
LE
CASEN
A EN
POLVO
5 ml de
CLORUR
O DE
SODIO
AL 10%
INSOLUB
LE
CASEN
A EN
POLVO
5 ml de
CIDO
CLORHIDRI
CO AL
INSOLUB
LE
CASEN
A EN
POLVO
CASEN
A EN
N POLVO
ES:
5 ml de
HIDRXID
O DE
SODIO AL
1%
SOLUBLE
5 ml de
HIDRXI
DO DE
CALCIO
INSOLUB
LE
REACCIO
+ NaOH al
1%
3 GOTAS
DE
CuSO4
PRUEBA
POSITIVA
CASEN
A
PRUEB
A
POSITI
3. PROTENAS
COAGULABLES:
5 gotas
de NaOH
al 1%
3 gotas de
cido
actico
SUER
O
TOMA
UN
COLOR
SUER
O
V.
REACTIV
O DE
FEHLING
RESULTADOS:
1. AISLAMIENTO DE LA CASENA
CIDO
NTRIC
O
SUER
O
TOMA
UN
COLOR
AMARILL
consideramos su densidad de 1,030 g/ml a 15C) de leche pura de vaca, por lo que se el
rendimiento fue de 0.77% segn la siguiente frmula:
Rendi
miento
Peso seco de la
casena
X
10
0
g de leche
utilizados
0.
0.
77
10
grasa de la casena.
2. PROPIEDADES Y PRUEBAS CARACTERISTICAS DE LAS PROTENAS:
VII. CUESTIONARIO
1. Responda brevemente:
a) Qu son: albminas, globulinas, seudoglobulinas y fosfoprotenas?
ALBUMINAS:
La albmina es una protena que se encuentra abundantemente en la sangre del
ser humano y es sintetizada en el hgado, representando el 54,31% de la protena
plasmtica. Normalmente tiene una presencia en sangre humana de 3,5 a 5 gramos
por decilitro.
FUNCIONES:
- Permite mantener la presin onctica, fundamental para la correcta distribucin de
los lquidos corporales - entre compartimento intravascular y el extravascular,
localizado entre los tejidos.
- Transporta las hormonas tiroideas y las hormonas liposolubles.
- Transporta cidos grasos libres y la bilirrubina no conjugada.
- Transporta muchos frmacos.
- Controla el pH.
TIPOS DE ALBUMINAS:
Seroalbmina: Es la protena del suero sanguneo.
Ovoalbmina: Es la albmina de la clara del huevo.
Lactoalbmina: Es la albmina de la leche.
GLOBULINAS:
Las globulinas son un grupo de protenas insolubles en agua que se encuentran en
todos los animales y vegetales.
Entre las globulinas ms importantes destacan las seroglobulinas (de la sangre), las
lactoglobulinas (de la leche), las ovoglobulinas (del huevo), la legmina, el
fibringeno, los anticuerpos (-globulinas) y numerosas protenas de las semillas.
Las globulinas son un importante componente de la sangre, especficamente del
plasma. stas se pueden dividir en varios grupos.
Principales grupos de globulinas:
globulinas alfa 1 y 2
globulinas beta
globulinas gamma
SEUDOGLOBULINAS:
Son protenas solubles que pueden precipitarse de una solucin acuosa por
saturacin de uno a tres cuartos con una sal acida. Las seudoglobulinas son menos
frecuentes. La podemos encontrar en el suero de la leche
se coagulan por
calentamiento.
FOSFOPROTENAS:
Protenas combinadas con cido fosfrico, o un radical que contiene fsforo que no
sea un fosfolpido ni cido nucleico. Ejemplo: casena.
(Los pKa a considerar para esta ecuacin, en una tabla de pH, son los que contienen
a la especie qumica con carga igual a cero,
cuando tienen ms de un pKa).
Las
molculas complejas, tales como las protenas, se combinan con los
iones hidrgeno y con otros iones presentes en la disolucin, dando lugar a la carga
neta de la molcula. A la concentracin de iones hidrgeno, o al pH, para el cual la
concentracin del ion hbrido de una protena es mxima y el movimiento neto de las
molculas de soluto en un campo elctrico es prcticamente nulo, se le denomina punto
isoelctrico.
2. Exponga en forma ordenada todas sus observaciones sobre:
E
l
suero de leche es un lquido obtenido en el proceso de fabricacin del queso y de la
casena, despus de la separacin de la cuajada o fase micelar. Sus caractersticas
corresponden a un lquido fluido, de color verdoso amarillento, turbio, de sabor fresco,
dbilmente dulce, de carcter cido, con un contenido de nutrientes o extracto seco del
5.5% al 7% provenientes de la leche.
b) Qu elementos se detectaron en la casena? Cmo los certifica? Qu ensayo
realizara para detectar la presencia de azufre?
Se detectaron el C, H, O y N, esto se vio claramente al someter a la casena a la
llama suave del mechero, se produjo un residuo negruzco (carbono), gotitas de agua en
las paredes del tubo de ensayo (oxigeno e hidrogeno) y la presencia de humos
blanquecinos (nitrgeno) y si tendramos que detectar la presencia de azufre
tendramos que realizar la reaccin de la cistina, que consiste en aadir 2 gotas de
solucin de acetato de plomo. Se obtiene un precipitado. Luego aadimos solucin de
hidrxido de Sodio para disolver este y luego hervir. La solucin se torna pardo
obscura (debido a la formacin de sulfuro de plomo).
c) En cul de las soluciones empleadas fue ms soluble la casena?
CASEN
A
HIDRXID SULFAT
O DE
O DE
SODIO
CuSO4
NaO
Na2
SO4
SULFATO
DE
SODIO
COMPLEJO TETRACOORDINADO
DE COBRE
REACCIN
FEHLING:
DERIVADO
DE
DERIVADO
Al someter el suero obtenido con el licor de fehling nos da una coloracin rojiza lo
que nos indica la presencia de glcidos: como la lactosa y la glucosa.
PROTEN
REACTIVO DE
FEHLING
LACTO
SA
PRECIPITADO
ROJO
LADRILLO
GLUCO
SA
REACCIN DE XANTOPROTEICA:
Al tubo de ensayo al agregarle cido ntrico e hidrxido de sodio notamos que nos
da una coloracin amarillenta al ppdo.
VIII.
PROTEN
CIDO
COMPLEJO
BIBLIOGRAFIAS:
FACULTAD
INGENIERIA
ESCUELA
INGENIERA QUMICA
CURSO
BIOQUIMICA
FLORES
NOMBRE
BRYAN MACHICADO
MEDINA
PROFESOR
AO
SEGUNDO
FECHA DE ENTREGA
TACNA - PERU