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1.

Introduccin
Astaxantina (3,30-dihidroxi-b, b-caroteno-4,40-diona), conocido como '' el rey de
los antioxidantes '' es un cetocarotenoide rojo con capacidad antioxidante
extraordinario y por lo tanto tiene amplias aplicaciones y un enorme valor de
mercado de ms de $ 200M por ao (Guerin et al., 2003; Higuera-Ciapara et al,
2006;. Li et al, 2011;. Milledge, 2011; Olaizola, 2003). Astaxantina sinttica domina
el mercado de astaxantina comercial actual. Sin embargo, la astaxantina natural
es ms de 50 veces y 20 veces ms fuerte en el bloqueo del oxgeno singlete y la
eliminacin de los radicales libres que la astaxantina sinttica, respectivamente
(Capelli et al., 2013). En particular, la astaxantina natural ha sido demostrado ser
seguro para la salud humana y ampliamente utilizado ms de 15 aos como un
suplemento nutracutico, pero astaxantina sinttica nunca se ha demostrado ser
seguro y beneficios para la salud humana (Capelli et al., 2013). Por lo tanto, la
astaxantina natural es ms favorable que la astaxantina sinttica debido a las
ventajas en trminos de estructura, funcin, uso, y la seguridad (Capelli et al,
2013;. Choubert y Heinrich, 1993). Como astaxantina contenido de hasta 1.5% del
peso seco celular (He et al., 2007; Lorenz y Cysewski, 2000), el verde unicelular
Haematococcus pluvialis algas es ampliamente considerado la mejor fuente
biolgica para la astaxantina natural (Lorenz y Cysewski, 2000).
Hasta la fecha, el sistema de cultivo de dos etapas que se adopte en la estrategia
de xito para la produccin comercial de H. pluvialis: fase verde para el
crecimiento celular y la etapa de induccin para la acumulacin de astaxantina (..
Aflalo et al, 2007; Sarada et al, 2002) . En el escenario verde, el crecimiento
celular es rpido, pero el contenido de astaxantina es baja. Sin embargo, en la
etapa de induccin, las clulas crecen lentamente, pero pueden acumular
astaxantina rpidamente. Por lo tanto, H. pluvialis se cultiva para obtener
suficiente densidad celular en la etapa verde, y luego se induce a incrementar el
contenido de astaxantina en la fase de induccin por el cambio de condiciones de
cultivo. Por lo tanto, la induccin de H. pluvialis tiene una correlacin directa con el
contenido de astaxantina de clulas y la productividad total de astaxantina. Para la
produccin comercial de H. pluvialis, el photoinduction al aire libre es la mejor
opcin debido a su bajo costo y gran escala. En este caso, las clulas tienen que
ser cultivado con un ciclo de luz-oscuridad (Huang et al., 2014). Los cambios de la
biomasa de algas y los componentes celulares bajo un ciclo de luz-oscuridad son
diferentes a las de las clulas cultivadas bajo iluminacin continua (Han et al.,
2013). La prdida de biomasa noche, as como el cambio en el contenido de
astaxantina durante el periodo de oscuridad pueden afectar la productividad de
astaxantina. En el cultivo de H. pluvialis, la temperatura es un factor importante y
bsico influir en la concentracin de biomasa y el contenido de astaxantina debido
a las fluctuaciones estacionales y diurnos (Borowitzka et al., 1991; Fan et al.,
1994; Harker et al., 1995; Tripathi et al., 2002).

Por otra parte, se ha encontrado en Chlorella que las temperaturas diurnas y


nocturnas, tanto afectaron a los cambios en la concentracin de biomasa y los
componentes celulares durante el perodo oscuro, y sus efectos fueron diferentes
(Han et al., 2013), lo que sugiere temperatura en la luz-oscuridad cultura cclica
debe ser estudiado por separado, como las temperaturas diurnas y nocturnas. Sin
embargo, los efectos de las temperaturas diurnas y nocturnas en el contenido de
concentracin de biomasa y la astaxantina de H. pluvialis han recibido poca
atencin hasta ahora.
Aqu, la concentracin de biomasa y el contenido de astaxantina durante todo el
cultivo cclico de luz-oscuridad en respuesta a la diferente temperatura durante el
da y la noche fueron investigados.
De acuerdo con los resultados de interior, se estableci una estrategia de control
de la temperatura para mejorar la productividad de astaxantina y aplicada en el
cultivo al aire libre de H. pluvialis para examinar su desempeo real.
2. Mtodos
2.1. Cepa microalga y cultivo de siembra
H. pluvialis ZY-18 se obtuvo de Laboratorio Estatal Clave de biorreactor de
Ingeniera, Universidad del Este de China de Ciencia y Tecnologa (Shanghai,
China). El medio de siembra basal fue medio NIES-C con acetato de sodio 10 mM
como fuente de carbono orgnico (Hata et al., 2001). Las clulas de semillas se
cultivaron en el escenario verde utilizando fermentadores 50 Litros. Las
velocidades de temperatura cultura y la agitacin se controlaron a 25? C y 40 rpm,
respectivamente. El pH se mantuvo entre 7,5 y 8 por la alimentacin intermitente
de un medio concentrado descrito por Hata et al. (2001). La tasa de aireacin se
mantuvo a 0,04 vvm para los primeros cuatro das y luego se increment
gradualmente con el aumento de la concentracin de clulas (Hata et al., 2001).
2.2. Las condiciones de cultivo interior
Despus de clulas de semillas se cultiv para llegar a la densidad celular alta (10
g / L) en la etapa verde, las clulas se transfirieron al medio de NIES-N (Kang et
al., 2005) en la etapa de induccin. La concentracin celular inicial fue de
aproximadamente 0,4 g / L en todos los experimentos. Biorreactores 1 L de
columna (altura: 26 cm, dimetro: 7 cm,) utilizadas para cultivo celular fue un tubo
de vidrio cilndrico con un fondo cnico (altura: 6 cm). Un rociador de gas se
coloc centralmente en la parte inferior. En el experimento de interior, la intensidad
de la luz fue aproximadamente 250 lmol / m2 / s. La mezcla se hizo por aire
ahorradores suplementado con un caudal de 0,5 L / min.
Para estudiar el efecto de la temperatura durante el da en los cambios de la
biomasa y el contenido de astaxantina en las 12 h:?? 12 h ciclo de luz-oscuridad,
la temperatura durante el da se vari de 8 a C 33 C y la noche temperatura se

mantuvo a 28 C? . Adems, la temperatura durante el da se mantuvo a 28 C y la


temperatura de la noche se vari de 8? C a 33? C para estudiar el efecto de la
temperatura de la noche. La temperatura se refera a la de medio, y fue controlada
con precisin por el sistema de control que consta de vlvula termosttica, el
gabinete de agua termosttico, pipa de agua de calor / fro en el interior del medio
de cultivo. Todos los experimentos se repitieron tres veces.
2.3. experimentos al aire libre
Las temperaturas ptimas durante el da y la noche se adoptaron en el
experimento al aire libre utilizando 200 estanques L de rodadura en la ciudad de
Jiaxing, provincia de Zhejiang, China (latitud: 30 15 ', longitud: 120 20?'?). El
estanque pista de rodadura 200 L fue hecha de polietileno y tena una longitud de
2 m, una anchura de 0,8 m, y un rea de 1,56 m2. Y cada extremo de la pista de
rodadura estanque fue un semicrculo con el dimetro de 0,8 m. La temperatura de
cultivo era natural (2-18? C) en el experimento de control, y que en la estrategia
mejorada fue controlada en el rango ptimo de acuerdo con el resultado del
experimento de interior. La temperatura fue controlada con precisin por el sistema
de control, similar a la que en la cultura interior. La intensidad de la luz y la
temperatura diurna en el proceso de experimento eran naturales y grabado
(Material complementario Fig. 1). Todos los experimentos se repitieron tres veces
simultneamente. Y el cultivo continu durante 20 das.
2.4. Mtodos analticos
2.4.1. Peso en seco
Las clulas de algas se recogieron por centrifugacin a diario el medio para la
induccin de clulas (ERI-N) en 4000? g durante 10 min, se lav con agua
destilada y se sec a 80? C durante 24 h. Se recogieron muestras de tres
repeticiones biolgicos fueron analizados y los datos para calcular los errores
estndar. Se calcul el cambio de la biomasa noche como:
Biomasa Noche % LMD? MDTH = ml? 100 donde el ml (g / L) fue el peso
seco antes de la induccin en el oscuro, MD (g / L) fue el peso seco despus de la
induccin en la oscuridad durante 12 h.
Productividad de la biomasa neta en el bioreactor g columna = L = DTH:? DMT
m0 = t donde, mt (g / L) fue de peso seco despus de la induccin, m0 (g / L) fue
el inicial peso seco, t (d) fue el tiempo de induccin.
Productividad de la biomasa neta en el biorreactor de columna DG = L = DTH:?
DMT m0 = t donde, mt (g / L) fue de peso seco despus de la induccin, m0 (g /
L) fue el inicial peso seco, t (d) fue el tiempo de induccin.
Productividad de la biomasa neta en el biorreactor de columna DG = L = DTH:?
DMT m0 = t donde, mt (g / L) fue de peso seco despus de la induccin, m0 (g /
L) fue el inicial peso seco, t (d) fue el tiempo de induccin.

Productividad de la biomasa neta en la pista de rodadura pud DG = m2 = DTH:?


DMT m0 = t donde, mt (g / m2) fue de peso seco despus de la induccin, m0
(g / m2) fue el peso seco inicial, t (d) fue el tiempo de induccin. La unidad de '' g /
m2 '' clulas peso seco significaba por rea de estanques rodadura.
2.4.2. Determinacin de astaxantina
El contenido de astaxantina fue medida por un mtodo Boussiba modificado
(Boussiba y Vonshak, 1991). Muestra de cultivo 5 ml se centrifug durante 10 min
a 4000 r / min, y el sedimento primera saponifica mediante el uso de una solucin
de 5% de KOH en 30% (v / v) de metanol a 65? C durante 15 min para destruir la
clorofila. A continuacin, se descart el sobrenadante, y el sedimento se lav tres
veces con agua desionizada para eliminar la leja residual. El sedimento restante
se extrajo con 5 ml de DMSO (Labkim AR, 99,5%) utilizando un procesador de
ultrasonidos durante 10 min para recuperar la astaxantina. El procedimiento de
extraccin se repiti al menos tres veces hasta que los restos celulares era casi
incoloro. Se recogieron muestras de tres repeticiones biolgicos, y se analizaron
los datos para calcular las medias y los errores estndar. La absorbancia de los
extractos combinados se midi a 490 nm.
3. Resultados y discusin
3.1. Efecto de la temperatura sobre la biomasa y la astaxantina contenido de H.
pluvialis bajo la iluminacin continua H. pluvialis se cultiv en diversas
temperaturas para confirmar la temperatura ptima para la induccin bajo la
iluminacin continua.
Segn los resultados (Fig. 1), la biomasa en 28? C fue el ms alto, seguido por
que en 23? C, y la biomasa disminuy con la disminucin de la temperatura. El
efecto de la temperatura sobre el contenido de astaxantina era similar a la de la
biomasa. Adems, las clulas en 33? C estaban muertos en el proceso de
induccin, lo que sugiere 33? C no es adecuado para la astaxantina induccin de
esta cepa. Se ha informado ampliamente de que la temperatura adecuada para la
acumulacin de astaxantina de H. pluvialis fue entre el 20 C y 28 C?? (Fan et al.,
1994; Jiang et al., 2005; Kang et al., 2005). La mejor temperatura para la induccin
en este estudio fue similar a los de otros informes. Adems, se inform de que H.
pluvialis se puede acumular, la astaxantina en 35? C (Tjahjono et al., 1994). El
celular se lis gradualmente, y fue result ser fallecimiento a los 33? C en este
estudio puede ser debido a la diferencia entre especfico. Adems, los ms altos
de biomasa y la astaxantina productividades netas fueron de 0,12 g / L / da y 5,4
mg / L / da a la temperatura de 28 C, respectivamente.
Por unidad concentracin en volumen de astaxantina (c) se calcul como (Davies,
1976): c mg = LTH 4: 5? A490? Va = Vb donde el Va (L) era el volumen de los
extractos, la Vb (L) era el volumen de muestra de cultivo, y A490 era la
absorbancia de los extractos a 490 nm.

Contenido de astaxantina %; w = Wth: C ct = MT donde ct (mg / L) fue la


concentracin de astaxantina despus de la induccin y MT (mg / L) fue el peso
seco despus de la induccin.
Cambio en astaxantina content % DCL? CDTH = CL? 100 donde el CL (%)
fue el contenido de astaxantina antes de la induccin en la oscuridad, CD (%) fue
el contenido de astaxantina despus de la induccin en la oscuridad durante 12 h.
Astaxantina productividad neta en la columna bioreactor mg = L = DTH: Ct? C0 =
t donde Ct (mg / L) fue la concentracin de astaxantina en el reactor despus de la
induccin y C0 (mg / L) fue la concentracin inicial astaxantina. t (d) fue el tiempo
de induccin. La productividad de astaxantina neto en el pud alcantarilla mg = m2
= DTH: Ct? C0 = t donde Ct (mg / m2) fue la concentracin de astaxantina en el
reactor despus de la induccin y C0 (mg / m2) fue la concentracin inicial de
astaxantina. t (d) fue el tiempo de induccin. La unidad de '' mg / m2 '' significaba
peso astaxantina por rea de estanques de rodadura

3.2. El efecto de la temperatura diurna en el contenido el crecimiento y la


astaxantina de H. pluvialis
La luz es un factor clave para el crecimiento y la acumulacin de astaxantina de H.
pluvialis, pero no es necesario. La acumulacin de crecimiento y astaxantina de H.
pluvialis tambin puede ocurrir en la oscuridad con cultivo heterotrficas
(Kobayashi et al., 1992). El contenido de biomasa y de astaxantina en las etapas
de induccin con varios temperatura durante el da durante el perodo de luz fue
muestra en la Fig. 2. Cuando inducida a 28? C, la concentracin de biomasa se
alcanz el mximo. El fin de aumentar la biomasa temperatura era de 28 C> 23
C> 18 C> 13? C? 8 C. Mientras tanto, la temperatura durante el da
de 33? C an causan la muerte de las clulas, incluso si la temperatura de la
noche fue de 28? C. La acumulacin crecimiento celular y la astaxantina se
produjo en 3 das antes de la muerte celular, lo que sugiere la clula puede
soportar alta temperatura de 33? C durante un corto tiempo.
Como se muestra en la Fig. 2 y 28? C fue la temperatura durante el da ptimo
para la acumulacin de astaxantina en el cultivo cclico de luz-oscuridad, y la
orden de acumulacin de temperatura mejorar astaxantina fue 28? C> 23 C> 18
C> 13? C? 8 C.
Por encima de todos los resultados mostr que el contenido de astaxantina
crecimiento y aument con el aumento de temperatura durante el da, y alcanz un
mximo a 28? C. El resultado que 28? C es ptimo para la acumulacin y el
crecimiento de la astaxantina fue similar con otra estudios (Ding y Lee, 1994;. Fan
et al, 1994; Jiang et al, 2005;.. Wan et al, 2014).

La temperatura durante el da tuvo impacto en la energa almacenada en el


perodo de luz, y luego la energa obtenida fue utilizada por la clula en el perodo
oscuro (Raven y Beardall, 1981;. Van Dongen et al, 2011) para la sntesis de otros
componentes celulares, tales como protenas y lpidos (Peschek et al., 1982). Por
lo tanto, los cambios de la noche en la biomasa y el metabolismo se vieron
afectados por la temperatura diurna. Es bien conocido que la biomasa de H.
pluvialis puede aumentar 3 veces o ms bajo la condicin de induccin (Wang et
al., 2013). Del mismo modo, el peso celular aument ms de 3 veces a 28 C
durante un cultivo cclico de luz-oscuridad. Debido a NIES-N (sin fuente de
nitrgeno) medio, las clulas no pueden obtener ms nitrgeno del medio
ambiente, pero todava adquirir carbono a travs de la fotosntesis.
En condiciones de induccin, incluyendo nitrgeno agotan, el aumento de la
densidad de la biomasa fue aportado principalmente por el aumento de las
sustancias intracelulares sin nitrgeno. Las variaciones de la noche la prdida de
biomasa y el contenido de astaxantina con diferentes temperaturas durante el da
durante el perodo oscuro se ilustran en la Fig. 3. La prdida de biomasa por la
noche en el mismo punto de tiempo experiment una tendencia al aumento en
primer lugar, y luego disminuir en el rango de 8 a 28? C. El valor de la prdida de
biomasa alcanz el mximo a 18? C. Mientras tanto, la menor prdida de biomasa
noche era a las 8? C y 28? C. En el rango de temperatura diurna de 18-28? C para
el crecimiento celular, la prdida de biomasa noche disminuy con el tiempo de
incubacin en la etapa de induccin.
De acuerdo con los resultados en la Fig. 3B, la clula puede sintetizar astaxantina
incluso en el perodo oscuro. Y los cambios nocturnos de contenido de astaxantina
bajo diversas temperaturas diurnas eran diferentes. En el primer perodo, el
cambio de la noche del contenido de astaxantina fue menos a 8 C, y los cambios
de contenido de astaxantina en 23 y 28? C fueron mayores que los de 8, 13 y 18?
C. Como la induccin continu, se redujeron los cambios de contenido de
astaxantina. Y el contenido de astaxantina disminuy gradualmente en la noche en
el final de la induccin. En otras palabras, la tasa de acumulacin de astaxantina
en el perodo temprano fue ms rpido que en el perodo final. Del mismo modo,
se redujo el cambio noche del contenido de astaxantina como la induccin
continu. Por lo tanto, el cambio de noche del contenido de astaxantina puede ser
responsable de la tasa de acumulacin de astaxantina. Cuanto antes la
acumulacin de astaxantina fue en el perodo de luz, mayor es el cambio de la
noche del contenido de astaxantina fue en el perodo oscuro.
Adems, el contenido de astaxantina a 28? C casi estabilizado y alcanzar las ms
altas de las condiciones photoinduction despus de 11 das. Aunque el contenido
de astaxantina disminuy ligeramente en el periodo de la noche del da 11, el
contenido de astaxantina se increment en el perodo de luz para volver a lo ms
alto, por lo tanto el cambio negativo no se reflej en el contenido total de
astaxantina. Pero, el cambio negativo llev el contenido de astaxantina no llegar a

un valor ms alto del cierre para que bajo iluminacin continua. La acumulacin de
astaxantina se produce principalmente bajo la mayor intensidad de la luz y se
responde a la tensin de oxgeno de las condiciones de estrs (Li et al., 2008). La
temperatura durante el da afect el cambio de oxgeno y el metabolismo celular,
por lo tanto la temperatura durante el da llev diferencias en los cambios de la
biomasa y el contenido de astaxantina en el periodo de oscuridad, indicando que
la temperatura durante el da es uno de los factores clave para la induccin al aire
libre de H. pluvialis. Mientras tanto, se implic en este estudio que el aumento de
la temperatura durante el da razonablemente puede reducir la prdida de biomasa
noche y aumentar el contenido de astaxantina. Por otra parte, la mayor biomasa
neta (0.064 g / L / d) y productividades de astaxantina (2.3 mg / L / d) fueron a la
temperatura de 28 C, y fueron 53% y 43% de los menores de iluminacin
continua, respectivamente. Puede ser debido a la noche la prdida de biomasa,
as como la lenta acumulacin de astaxantina en el perodo oscuro de la cultura
cclica de luz-oscuridad.
Adems, el contenido de astaxantina a 28? C casi estabilizado y alcanzar las ms
altas de las condiciones photoinduction despus de 11 das. Aunque el contenido
de astaxantina disminuy ligeramente en el periodo de la noche del da 11, el
contenido de astaxantina se increment en el perodo de luz para volver a lo ms
alto, por lo tanto el cambio negativo no se reflej en el contenido total de
astaxantina. Pero, el cambio negativo llev el contenido de astaxantina no llegar a
un valor ms alto del cierre para que bajo iluminacin continua. La acumulacin de
astaxantina se produce principalmente bajo la mayor intensidad de la luz y se
responde a la tensin de oxgeno de las condiciones de estrs (Li et al., 2008). La
temperatura durante el da afect el cambio de oxgeno y el metabolismo celular,
por lo tanto la temperatura durante el da llev diferencias en los cambios de la
biomasa y el contenido de astaxantina en el periodo de oscuridad, indicando que
la temperatura durante el da es uno de los factores clave para la induccin al aire
libre de H. pluvialis. Mientras tanto, se implic en este estudio que el aumento de
la temperatura durante el da razonablemente puede reducir la prdida de biomasa
noche y aumentar el contenido de astaxantina. Por otra parte, la mayor biomasa
neta (0.064 g / L / d) y productividades de astaxantina (2.3 mg / L / d) fueron a la
temperatura de 28 C, y fueron 53% y 43% de los menores de iluminacin
continua, respectivamente. Puede ser debido a la noche la prdida de biomasa,
as como la lenta acumulacin de astaxantina en el perodo oscuro de la cultura
cclica de luz-oscuridad.
Puesto que la temperatura durante la oscuridad podra tener impacto en la tasa de
respiracin (Grobbelaar y Soeder, 1985), se inform de la prdida de biomasa
noche para estar estrechamente relacionada con la temperatura de la noche (Han
et al., 2013). Durante la induccin, la prdida de biomasa noche se produjo en el
rango de 8? C-33? C y alcanz el mximo a 33? C (Fig. 5). Como la induccin fue
ir, la prdida de biomasa noche mostr una tendencia decreciente. Mientras que
los valores de prdida de biomasa fueron similares en 8? C y 28? C, al mismo

tiempo, la prdida mxima fue a 33? C. Debido a que la biomasa disminuy


durante la noche. Cuanto mayor es la prdida de biomasa noche era, ms dura es
la acumulacin de biomasa en el cultivo cclico de luz-oscuridad fue. Una vez que
el crecimiento celular durante el da apenas cubierta la prdida de biomasa en la
noche, la concentracin de biomasa llegara a un valor relativamente estable y se
convirti en la concentracin final.
Por lo tanto, la prdida de biomasa alta noche llev a una concentracin de
biomasa final baja. Esta razn puede ser debido a la mejora de la tasa de
respiracin a alta temperatura (Torzillo y Vonshak, 1994). La prdida de biomasa
noche de H. pluvialis estaba por debajo de 5% y menos que los de otras
microalgas, tales como Chlorella pyrenoidosa y Spirulina platensis (Han et al,
2013;.. Torzillo et al, 1991). Se inform de que la noche prdida de biomasa de C.
pyrenoidosa puede reducir a menos del 6% en el mantenimiento de temperatura
de la noche a aproximadamente 15? C (Ogbonna y Tanaka, 1996). Sin embargo,
la prdida de biomasa noche de H. pluvialis a temperatura por debajo de 28? C
fue de menos de 3%, lo que sugiere la respiracin y el metabolismo de H. pluvialis
pueden ser relativamente lento debido a su baja tasa de crecimiento.
Adems, la acumulacin de astaxantina se produjo en el perodo oscuro del ciclo
luz-oscuridad, y fue cambi con la temperatura de la noche. En la fase inicial de la
induccin, los cambios de contenido de astaxantina a temperaturas ms altas de
23 C, 28 C y 33 C fueron superiores a las bajas temperaturas de la noche de
8 C, 13 C y 18 C. El grado de la acumulacin de astaxantina durante la
oscuridad disminuido con el tiempo de induccin aument. Al final de la induccin,
el cambio de contenido de astaxantina disminuy. Mientras tanto, el contenido de
astaxantina comenz a disminuir ligeramente.
En comparacin con la temperatura durante el da, las diferentes temperatura de
la noche tambin caus diferentes cambios noche del contenido de astaxantina.
Cuando el contenido de astaxantina se redujo ligeramente a 33? C en oscuridad
de partida a partir del da 9, el contenido de astaxantina aumentado en el perodo
de luz para alcanzar el valor constante. El fenmeno es similar con la de la
experimento sobre el efecto de la temperatura durante el da de 28? C en el
contenido de astaxantina. Aunque la temperatura de la noche afect directamente
el metabolismo celular y la respiracin en el perodo oscuro del ciclo luz-oscuridad,
la temperatura de la noche en el rango de 8 a 28? C tiene menos efecto sobre la
concentracin de biomasa final y contenido final astaxantina.
Indica los valores mximos de concentracin de biomasa y el contenido de
astaxantina en la cultura cclica de luz-oscuridad fue restringido por otras
condiciones de induccin, como la temperatura durante el da. Aunque la
temperatura de la noche debajo de 28? C disminuy las tasas de crecimiento de
las clulas y la acumulacin de astaxantina, concentracin de biomasa y el

contenido de astaxantina todava puede llegar a los valores mximos por el tiempo
de induccin prolongado.
3.4. Experimentos al aire libre
Segn los resultados de interior por encima de, la temperatura durante el da en el
rango de 23? C a 28? C era mejor para la acumulacin de astaxantina y la
disminucin de la prdida de biomasa noche, por lo tanto el experimento al aire
libre se mantuvo en este rango por un calentamiento a determinada
la eficiencia de la produccin de astaxantina a partir de H. pluvialis. Mientras tanto,
la temperatura de la noche se confirm a estar por debajo de 28? C. Intensidad de
la luz y la temperatura en el experimento al aire libre se muestran en el material
complementario Fig. 1. El aumento de la temperatura durante el da hasta la
temperatura ptima puede mejorar significativamente la concentracin de biomasa
y el contenido de astaxantina (Fig. 6). El contenido de biomasa y la astaxantina
bajo temperatura controlada fueron 62,5% y 38,6% superior a los menores de la
temperatura natural despus de la induccin de 16 das, respectivamente. La
biomasa neta (2,34 g / m2 / d) y productividades de astaxantina (60 mg / m2 / d)
en el marco del control de temperatura eran 5 veces y 2,9 veces de los menores
de la temperatura natural (biomasa: 0,47 g / m2 / d; astaxantina: 21 mg / m2 / d),
respectivamente. Para la produccin industrial de astaxantina natural a partir de H.
pluvialis, elevando la temperatura del cultivo tiene algunos mtodos de bajo costo
(por ejemplo, cultivando las clulas en el invernadero, utilizando el calor de escape
industrial), que puede equilibrar los costos de cultivo de microalgas (Han et al. ,
2013). Como el alto valor de astaxantina, esta estrategia para controlar la
temperatura para mejorar la productividad de astaxantina es alternativa y el valor
de aplicacin comercial.
4. Conclusiones
En este estudio, se investigaron los efectos de las temperaturas diurnas y
nocturnas en el crecimiento y la astaxantina contenido de H. pluvialis en la cultura
cclica de luz-oscuridad. La temperatura durante el da en el rango de 23 a 28? C
es mejor para photoinduction, mientras tanto la temperatura de la noche debe
mantenerse por debajo de 28? C. Los resultados se confirmaron en interiores al
aire libre, lo que indica las productividades netos de astaxantina y la biomasa bajo
el control de temperatura eran 5 veces y 2,9 veces de los que estn en proceso
anterior photoinduction, respectivamente. Por lo tanto, esta estrategia es digno de
ser popularizado para la produccin industrial de astaxantina natural a partir de H.
pluvialis.

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