Parsitos Protozoarios

Entricos en Ambientes Acuticos:

Mtodos de Concentracin y Deteccin
Walter Q. Betancourt y Luis J. Querales
RESUMEN
La transmisin de parsitos protozoarios patgenos a travs
del agua representa uno de los problemas de salud pblica ms
prominentes en el mundo entero. Los estudios sobre presencia de
parsitos protozoarios en aguas son fundamentales para conocer
a fondo la epidemiologa de enfermedades que afectan a poblaciones humanas en diferentes zonas geogrficas. De esta manera,
se pueden implementar en todo el mundo las medidas de salud
pblica que permitan el control y prevencin de enfermedades
transmitidas a travs del agua. Los mtodos corrientes para el
monitoreo de Cryptosporidium parvum, C. hominis y Giardia intestinalis son empleados para la deteccin de Toxoplasma gondii

a transmisin ambiental de microorganismos

patgenos constituye un
medio altamente efectivo para la diseminacin de enfermedades a una gran proporcin de la poblacin. La Organizacin Mundial de la Salud estima que un
24% de las enfermedades que ocurren
en el mundo estn asociadas con factores ambientales, entre ellos el agua de
calidad insegura y precarias condiciones
higinicas (WHO, 2007). Los cuerpos
de aguas naturales que reciben desechos
fecales de animales y humanos contienen numerosos microorganismos patgenos capaces de sobrevivir fuera de su
hospedero. Estos microorganismos son
transmitidos indirectamente a poblaciones susceptibles a travs de las aguas de
distribucin inadecuadamente tratadas o
a travs de aguas recreacionales fuerte-

y Cyclospora cayetanensis en ambientes acuticos. La combinacin de nuevas tcnicas de filtracin y concentracin junto con
los mtodos moleculares y cultivo celular forma parte de la estrategia cientfica dirigida a evaluar la significancia de microorganismos patgenos actuales y emergentes de inters para la
salud pblica. Este artculo revisa avances recientes en mtodos
de concentracin y deteccin de protozoarios patgenos transmitidos a travs del agua, cuya aplicacin reviste importancia en
ambientes acuticos de toda Amrica Latina, donde se requiere
mayor investigacin cientfica en esta rea.

mente impactadas con aguas residuales

y desechos fecales de animales domsticos (Hurst y Murphy, 1996).
Los
parsitos
protozoarios Giardia intestinalis (sinnimo para
G. lamblia y G. duodenalis), Cryptosporidium parvum y C. hominis son patgenos
intestinales excretados con las heces de
humanos y animales infectados en concentraciones de hasta 1109 (oo)quistes por
gramo de heces (Danciger y Lpez, 1975;
Pickering et al., 1984; Jokipii y Jokipii,
1986; Chappell et al., 1996; Morgan-Ryan
et al., 2002; Chappell et al., 2006). Los
(oo)quistes (abreviacin para ooquiste y
quiste) son las formas infectantes y constituyen un estadio del ciclo de vida de estos
parsitos que los capacita para sobrevivir
en el ambiente acutico y resistir los procesos de tratamiento de aguas de distribucin
y aguas de desecho domstico (Betancourt

y Rose, 2004). La ingestin no intencional

de (oo)quistes infecciosos con las aguas y
alimentos contaminados, as como la ingestin inadvertida de aguas contaminadas
durante las actividades recreacionales, puede ocasionar problemas de salud pblica.
En pases en vas de desarrollo, las enfermedades causadas por Cryptosporidium y
Giardia forman parte del complejo grupo
de enfermedades parasitarias que, junto
con las enfermedades bacterianas y virales,
son un factor que impide el avance potencial y el progreso social y econmico de
sus habitantes. Estos parsitos fueron incluidos recientemente en la Iniciativa de la
Organizacin Mundial de la Salud para las
enfermedades desatendidas (Savioli et al.,
2006). La Iniciativa persigue abordar enfermedades parasitarias y otras enfermedades tropicales (entre ellas las helmintiasis
intestinales, esquistosomosis, leishmaniasis,

PALABRAS CLAVE / Aguas / Concentracin / Deteccin / Mtodos / Protozoarios /

Recibido: 27/11/2007. Modificado: 10/05/2008. Aceptado: 13/05/2008.

Walter Q. Betancourt. PhD. Ciencias Marinas, Universidad del Sur de Florida, EEUU. Investigador, Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC), Venezuela. Direccin: IVIC, Centro de Microbiologa y Biologa
Celular. Laboratorio de Gentica Molecular. Apartado Postal: 20632. Caracas, Venezuela 1020A. e-mail: wbetanco@ivic.ve
Luis J. Querales. Estudiante Doctoral del Postgrado en Ciencias Biolgicas, Mencin Microbiologa. IVIC, Venezuela. e-mail: lquerale@ivic.ve

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leptospirosis, etc.) de manera integrada a

fin de garantizar el manejo efectivo (control y eliminacin) de estas enfermedades
(www.paho.org, www.who.int).
Numerosos brotes epidmicos de enfermedades gastrointestinales han ocurrido por transmisin indirecta
de los parsitos protozoarios Giardia y
Cryptosporidium a travs de aguas de distribucin y cuerpos de aguas naturales y
artificiales (lagos, ros, playas y piscinas)
empleados para recreacin (Thompson et
al., 1993; MacKenzie et al., 1994; Fayer et
al., 2000; Rose et al., 2002; Nygrd et al.,
2006). De igual manera, los protozoarios
Cyclospora cayetanensis y Toxoplasma
gondii han estado asociados con brotes
de enfermedades transmitidas a travs del
agua (Benenson et al., 1982; Rabold et al.,
1994; Bowie et al., 1997; Isaac-Renton et
al., 1998; Aramini et al., 1999; Dubey,
2004; Schuster y Visvesvara, 2004; Karanis et al., 2007). A esta lista se suman
los protozoarios intestinales Entamoeba
histolytica y Balantidium coli, los cuales
son considerados patgenos de atencin
para la salud pblica y con potencial de
transmisin a travs de las aguas, particularmente en pases en vas de desarrollo
(Ashbolt, 2004; Karanis et al., 2007). En
poblaciones de zonas urbanas y rurales de
estos pases son comunes las protozoosis
intestinales ocasionadas por todos los parsitos anteriormente mencionados (ChacnBonilla et al., 1998, 2006a, b; Daz et al.,
2000; Xiao et al., 2001; Alarcn de Noya
et al., 2003; Seppo et al., 2005).
La transmisin de los
protozoarios intestinales Cryptosporidium y
Giardia a travs del agua se considera uno
de los problemas de salud pblica ms prominentes en el mundo entero (Rose et al.,
2002; Carey et al., 2004). Esto es evidente al considerar las bajas dosis infecciosas
de C. parvum (9-1042 ooquistes; DuPont
et al., 1995; Okhuysen et al., 1999), de C.
hominis (10-83 ooquistes; Chappell et al.,
2006) y de G. intestinalis (10-100 quistes;
Rendtorff, 1954) y su resistencia a los tratamientos. En Venezuela existen estudios
sobre protozoarios entricos en ambientes
acuticos (Arcay y Bruzual, 1993; Quintero-Betancourt y Botero, 2000); sin embargo, son pocos y se requiere de mayor informacin en zonas costeras y sistemas de
tratamiento de aguas para suministro.
Existen numerosos mtodos de concentracin y deteccin de protozoarios entricos en aguas, que aplicados
en conjunto con los mtodos moleculares
y cultivo celular permiten determinar de
manera eficiente y sensible las especies y
genotipos asociados con enfermedades en
humanos. Conocer la importancia relativa
de vas especficas de transmisin de protozoarios intestinales, incluyendo las fuen-

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tes potenciales de contaminacin ambiental, constituyen aspectos fundamentales que

permiten entender la epidemiologa de las
enfermedades parasitarias, de esta manera
se pueden aplicar medidas correctivas que
minimicen la prevalencia e incidencia de
estas enfermedades en la poblacin.
Mtodos para el Estudio de
Protozoarios Entricos en Aguas
Los mtodos de deteccin de protozoarios intestinales en ambientes acuticos, desarrollados en instituciones de diversos pases, son evaluados
constantemente con el fin de optimizar
los diferentes procedimientos que permitan detectar de manera sensible y especfica los protozoarios patgenos en aguas
(Annimo, 1999; EPA, 1999a, b, 2005).
Inicialmente, los mtodos fueron diseados y aprobados para el monitoreo de la
presencia de Cryptosporidium y Giardia
en aguas de distribucin y cuerpos de
aguas naturales; sin embargo, han sido
adaptados para el estudio y deteccin de
Toxoplasma gondii y Cyclospora cayetanensis (Sturbaum et al., 1998; QuinteroBetancourt et al., 2002; Villena et al.,
2004; Dumetre y Darde, 2005).
El mtodo estndar para
el estudio de Cryptosporidium y Giardia en aguas incluye tres procedimientos bsicos: concentracin, purificacin y
deteccin. Los procedimientos iniciales
de concentracin y purificacin incluyen
los siguientes pasos: 1) filtracin de un
volumen determinado de agua (10-1000
litros) con el propsito de capturar los
(oo)quistes en una matriz de filtracin; 2)
lavado del filtro con soluciones detergentes para desprender los (oo)quistes capturados en la matriz de filtracin; 3) centrifugacin a velocidad moderada (11001500g) a fin de reducir el volumen de
muestra (5ml) y concentrar el material

en suspensin junto con los (oo)quistes;

4) separacin selectiva de (oo)quistes de
los materiales inespecficos en suspensin,
utilizando partculas magnticas conjugadas con anticuerpos especficos para
protozoarios (separacin inmunomagntica). La deteccin de (oo)quistes se realiza mediante microscopa de fluorescencia
utilizando anticuerpos monoclonales o
policlonales marcados con isotiocianato
de fluorescena (ITFC), lo que permite
incrementar la capacidad de visualizar los
(oo)quistes y diferenciarlos de materiales
inespecficos y algas microscpicas (microalgas) presentes en ambientes acuticos. La confirmacin de (oo)quistes aislados de ambientes acuticos se lleva a cabo
mediante microscopa por contraste de
fases o tambin mediante microscopa de
interferencia diferencial. Adicionalmente
se aplican fluorocromos especficos para
cidos nuclecos tales como el 4`,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) y el yoduro
de propidio o PI por sus siglas en Ingles
(Propidium Iodide). La microscopa por
contraste de fases y de interferencia diferencial permite visualizar la morfologa
y estructuras internas de los (oo)quistes,
tales como esporozoitos (Cryptosporidium) axonema y ncleos (Giardia). La
tincin con los fluorocromos DAPI y PI
permite no solo confirmar la presencia
de (oo)quistes esporulados, sino que suministra adems informacin acerca de la
viabilidad de los (oo)quistes. Esto se debe
a la habilidad que tienen los fluorocromos
de penetrar de manera selectiva al interior
de la estructura parasitaria (Campbell et
al., 1992). El DAPI es un fluorocromo de
tamao pequeo que penetra fcilmente
al interior de las clulas y tie selectivamente las regiones del DNA ricas en adenina y timina, por ello permite distinguir
(oo)quistes esporulados potencialmente
viables (Figura 1). El PI es un fluorocromo de gran tamao que penetra el inte-

Figura 1. Fotomicrografas de Cryptosporidium parvum obtenidas con microscopa de inmunofluorescencia. Ntese en la imagen izquierda un ooquiste no viable de Cryptosporidium teido con fluorescena y yoduro de propidio. La micrografa a la derecha corresponde a cuatro ooquistes esporulados
(DAPI+) teidos con fluorescena, Alexa fluor y DAPI (ntese los cuatro esporozoitos en el interior de
los ooquistes) (imgenes digitales de Walter Q. Betancourt y G. D. Digiovanni).

419

Tabla I
Mtodos Convencionales para la Concentracin, Purificacin
y Deteccin de Giardia y Cryptosporidium en Ambientes Acuticos
Tcnica de concentracin

Mtodo 1622/1623
(EPA, 1999a,b; 2005)

Procedimiento general
10-1000 litros de agua
Filtracin: cpsula Envirocheck HV
(Oo)quistes recuperados por agitacin continua
de la cpsula
Solucin para recuperar (oo)quistes:
Laureth 12
1 M Tris pH 7,4
0,5 M EDTA, 2 Na, pH 8,0
Antiespumante A
Agua deionizada
Centrifugacin (1000 g por 15min)
Separacin inmunomagntica (DYNAL, Aureon)
Deteccin con anticuerpos fluorescentes
y microscopa de inmunofluorescencia.
Confirmacin por microscopa de contraste de
fases o interferencia diferencial y tincin con
DAPI

10-1000 litros de agua

Filtracin: Membranas de filtracin Filta-Max
(Oo)quistes recuperados mediante lavado
Protocolo operacional
Solucin para recuperar (oo)quistes:
estndar para el
Buffer Fosfato Salino
monitoreo de ooquistes de
0,1% Tween 80
Cryptosporidium en aguas Centrifugacin (1100 g por 15min)
tratadas, SI No. 1524
Separacin inmunomagntica (DYNAL)
(Annimo, 1999)
Deteccin con anticuerpos fluorescentes
y microscopa de inmunofluorescencia.
Confirmacin por microscopa de interferencia
diferencial y tincin con DAPI.

Eficiencia de
recuperacin
21-100%*

30-50%**

* Criterio de aceptacin del Mtodo Estndar de la Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos
** Criterio de aceptacin del Mtodo Estndar en el Reino Unido

Tabla II
Mtodos alternos para la concentracin y deteccin de
Cryptosporidium y Giardia en ambientes acuticos
Tcnica

Procedimiento general

Centrifugacin por
flujo continuo

10-1000 litros de agua

Tecnologa Haemonetics (Braintree,
MA, EEUU). Emplea equipo
porttil de centrifugacin de flujo
continuo.
Separacin inmunomagntica
Deteccin por inmunofluorescencia

Floculacin con
carbonato
de calcio*

10-20 litros de agua

Cloruro de calcio 1M
cido sulfmico 10%
Centrifugacin
Purificacin y deteccin
por citometra de flujo e
inmunofluorescencia

Eficiencia de
recuperacin
37-84%

Referencia
Zuckerman y
Tzipori (2006)

69%

Vesey et al.
(1993, 1994)

49-73%

Sistema de
filtro espumoso
comprimido

10-100 litros de agua

Filta-Max
Purificacin automatizada
(Chemunex, Pars, Francia)
Separacin inmunomagntica
Deteccin por ChemScan
(Chemunex)

Sartory et al.
(1998)
Rushton et al.
(2000)

Ultrafiltracin
sistema filtro de
fibra horadada

10-100 litros de agua

Filtro AHP-0013 Microza (Pall
Corp., Glen Cove, EEUU)
Separacin inmunomagntica
Deteccin por inmunofluorescencia

68-81%

Kuhn y Oshima
(2001)

* Mtodo desarrollado y aplicado en Australia para la deteccin de Cryptosporidium en aguas crudas

420

rior de las clulas nicamente cuando la

continuidad de las barreras fsicas (pared
celular y membrana celular) han sido interrumpidas (Belosevic et al., 1997), de ah
que los (oo)quistes que han incluido PI se
consideran no viables.
En la Tabla I se describen los mtodos estandarizados para el
estudio de Cryptosporidium y Giardia
en aguas. El mtodo 1622 fue aceptado y
aprobado para el estudio de Cryptosporidium por la Agencia de Proteccin Ambiental de los EEUU y forma parte de la
regulacin ms reciente instaurada en ese
pas para el control de ese parsito en
aguas. La regla LT2 establece un nivel de
cero ooquistes en aguas tratadas o un requerimiento de 99% (2-log10) de remocin
de ooquistes cuando se emplea nicamente tratamiento por filtracin (EPA, 2006).
En el Reino Unido, la regulacin vigente
dictada en 1999 establece el monitoreo
diario de Cryptosporidium en aguas tratadas. La regulacin requiere un nivel
mximo de 10 ooquistes por 100 litros y
cualquier valor por encima constituye una
ofensa criminal (Fairley et al., 1999).
El mtodo 1622 fue rigurosamente validado por diferentes laboratorios y los principios generales se describen
en la Tabla I. El mtodo 1623, tambin
validado, fue posteriormente desarrollado
para la deteccin simultnea de Cryptosporidium y Giardia en aguas (EPA, 1999b).
Existen variaciones de los mtodos 1622 y
1623 que incluyen procedimientos alternos
de filtracin y separacin inmunomagntica, as como diferentes anticuerpos monoclonales y mtodos de deteccin. Los
procedimientos alternos se describen en
la Tabla II y pueden ser utilizados para el
estudio y monitoreo de Cryptosporidium
y Giardia en aguas una vez aplicados los
controles especficos de calidad (EPA,
2005). Los controles de calidad son ensayos de laboratorio que permiten evaluar la
eficiencia de recuperacin tanto del mtodo
estndar como del mtodo alterno. En estos ensayos se utilizan muestras de aguas
sembradas con (oo)quistes, se cuantifican
los (oo)quistes recuperados y se determina la eficiencia de recuperacin. Los valores obtenidos deben satisfacer criterios
de aceptacin establecidos para que tanto
el mtodo estndar como el mtodo alterno puedan ser utilizados por laboratorios
de referencia en el estudio y monitoreo de
Cryptosporidium y Giardia en aguas. Con
el desarrollo reciente de controles positivos
internos (ColorSeed, BTF Precise Microbiology, Australia) se puede evaluar simultneamente la eficiencia de recuperacin y
el numero de (oo)quistes presentes en ambientes acuticos. Los controles positivos
internos consisten de (oo)quistes inactivados por irradiacin gamma y marcados con

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un fluorocromo diferente al que se emplea

para evaluar la presencia de (oo)quistes en
ambientes naturales. Una vez procesada la
muestra, los (oo)quistes se cuantifican con
el microscopio de fluorescencia utilizando
de forma simultnea filtros especficos para
cada fluorocromo, de manera de diferenciar
los (oo)quistes sembrados de los recuperados del ambiente. La eficiencia de recuperacin se expresa en base al nmero y
porcentaje de (oo)quistes recuperados. Con
este procedimiento se determinan las interferencias que pueden ocasionar una baja
eficiencia de recuperacin y se estiman con
mayor precisin la presencia y nmero de
(oo)quistes en una muestra de agua (Quintero-Betancourt et al., 2003).
Deteccin de Protozoarios Entricos en
Aguas
La microscopa de inmu
nofluorescencia es el mtodo estndar para
la deteccin de Cryptosporidium y Giardia
en aguas, tanto para el mtodo 1622/1623
en los EEUU como para el Protocolo
Operacional Estndar en Australia y el
Reino Unido. En este mtodo se utilizan
anticuerpos monoclonales o policlonales
conjugados con ITFC. Sin embargo, se ha
determinado que existen diferencias significativas en cuanto a la avidez y especificidad de los anticuerpos disponibles comercialmente (Hoffman et al., 1999). Diversos
estudios han demostrado que la deteccin
de Cryptosporidium y Giardia en aguas es
ms eficiente cuando se emplean anticuerpos monoclonales de tipo IgG1, los cuales
poseen mayor avidez y especificidad que
los anticuerpos policlonales u otras clases
de anticuerpos monoclonales (por ejemplo,
IgG3 e IgM) (Ferrari et al., 1999; Weir
et al., 2000; Quintero-Betancourt et al.,
2003). Estas observaciones fueron confirmadas en muestras ambientales utilizando
dos clases diferentes de anticuerpos monoclonales (IgG1 e IgM) marcados con
isotiocianato de fluorescena. La aplicacin del anticuerpo monoclonal IgG1
(EasyStain, BTF Precise Microbiology,
Australia) produjo mucho menos fluores-

cencia de trasfondo y la unin del anticuerpo a los (oo)quistes fue ms especfica

que con el anticuerpo IgM (Waterborne
Inc, New Orleans, EEUU). La distincin
fue ms evidente en muestras de agua que
contenan altos niveles de microalgas y partculas minerales (Quintero-Betancourt et
al., 2003). La Tabla III describe los diferentes anticuerpos disponibles comercialmente para la deteccin de Cryptosporidium y
Giardia en muestras clnicas y ambientales.
En Australia fue desarrollado un mtodo para la deteccin y
enumeracin selectiva de ooquistes de
Cryptosporidium que aplica citometra de
flujo con activadores fluorescentes capaces de clasificar clulas segn la fluorescencia y el tamao (Vesey et al., 1997).
Este mtodo (Ferrari et al., 2000) mejora
sustancialmente el proceso de deteccin,
especialmente cuando se utilizan anticuerpos monoclonales de tipo IgG1 conjugados
con ITFC (CRY104- ITFC) y ficoeritrina
(CRY104-PE). Los anticuerpos monoclonales conjugados con estos fluorocromos
facilitan la visualizacin de muestras ambientales bajo el microscopio, ya que se
disminuye la fluorescencia inespecfica.
En Francia se desarroll
un equipo automatizado (ChemScan RDI,
Chemunex, France) que utiliza amplificacin de luz por emisin estimulada de radiacin (Laser) capaz de localizar de manera especfica ooquistes de Cryptosporidium y diferenciarlos de partculas y otros
microorganismos inespecficos (Rushton et
al., 2000).
Para la deteccin de
ooquistes de T. gondii y C. cayetanensis
no se han desarrollado aun anticuerpos
fluorescentes, sin embargo los ooquistes de
ambos protozoarios son capaces de emitir
fluorescencia (autofluorescencia) al ser excitados con luz ultravioleta (Lindquist et
al., 2003). Este procedimiento facilita la
visualizacin de las estructuras parasitarias
bajo el microscopio de fluorescencia. No
obstante, el procedimiento es muy tedioso, sobre todo cuando se trata de muestras
ambientales en las cuales estn presentes
microalgas y materiales inertes capaces de

Tabla III
Anticuerpos disponibles comercialmente para la deteccin de
Cryptosporidium y Giardia en muestras clnicas y ambientales
Nombre comercial

Clase de anticuerpo

EasyStain
Crypto-Cel
Crypto-a-gloTM
Giardia-a-gloTM
ImmucellTM
HydrofluorTMCombo

IgG1-ITFC*
IgM-ITFC
IgM-ITFC
IgG-ITFC
IgG3-ITFC
IgM no conjugado

* ITFC: Isotiocianato de fluorescena.

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Compaa
BTF, Australia
Cell-Labs, Australia
Waterborne, EEUU.
Waterborne, EEUU.
Immucell, EEUU.
Meridian, ENSYS, EEUU.

emitir fluorescencia similar a los ooquistes.

La tincin cido-resistente, particularmente
usada para el diagnstico de Cyclospora
en heces, tampoco se recomienda para la
deteccin del ooquiste en ambientes acuticos, debido a que muchas veces no permite ni siquiera la identificacin correcta de
ooquistes en muestras clnicas (Marshall et
al., 1997; Mota et al., 2000).
La deteccin de quistes
de E. histolytica en ambientes acuticos
resulta igualmente tediosa cuando se utilizan tinciones diseadas para la deteccin
de quistes en muestras clnicas de heces,
tales como la solucin de lugol (Healy y
Ravdin, 1988), ya que la abundancia de
microalgas de morfologa y tamao similar
a los quistes dificulta la diferenciacin bajo
el microscopio de luz. A finales de los
aos 90 se desarroll un anticuerpo monoclonal para la deteccin especfica de quistes de E. histolytica en muestras de heces
(Walderich et al., 1998); sin embargo, este
anticuerpo no se encuentra disponible comercialmente. Hasta ahora, no hay trabajos
sobre la aplicabilidad de este u otros anticuerpos monoclonales para la deteccin de
quistes de Entamoeba en muestras ambientales. Ms aun, son escasos los trabajos publicados sobre presencia de E. histolytica y
otros protozoarios intestinales (Blastocystis
hominis, Balantidium coli e Isospora belli)
en aguas, a pesar de haber sido demostrada
su asociacin con brotes epidmicos de enfermedades gastrointestinales en humanos
(Karanis et al., 2007).
Conclusin
La aplicacin de mtodos
de deteccin de protozoarios patgenos en
aguas ha sido fundamental en el esclarecimiento de aspectos que son importantes
para entender la transmisin de protozoosis
intestinales a travs de ambientes acuticos.
Los nuevos sistemas de concentracin (filtracin y purificacin) permiten recuperar
selectivamente los (oo)quistes facilitando
de esta manera el mtodo subsecuente de
deteccin. No se incluye en esta revisin
las tcnicas moleculares y cultivo celular,
las cuales han permitido identificar modos
de transmisin y fuentes de contaminacin
de los parsitos protozoarios intestinales
Cryptosporidium y Giardia que constituyen hoy en da junto con otros protozoarios
emergentes (Cyclospora, Toxoplasma) problemas de salud pblica en el mundo entero. Estos mtodos y su importancia para la
determinacin de riesgos de salud pblica
sern cubiertos en una revisin aparte.
Aun queda por establecerse el papel del agua en la transmisin
de las protozoosis intestinales causadas
por E. histolytica, B. hominis, B. coli, I.
belli. De all que el potencial de transmi-

421

sin de los primeros protozoarios mencionados sea mayor en pases donde los
sistemas convencionales de tratamiento de
aguas para suministro y aguas de desecho
son inadecuados o inexistentes. Los parsitos unicelulares microsporidios que eran
considerados protozoarios patgenos son
incluidos actualmente dentro del phylum
de los hongos, por ello no forman parte
en esta revisin. No obstante su potencial
de transmisin a travs del ambiente acutico ha sido identificado y comprobado y
por ello hoy en da se aplican los principios de los mtodos de deteccin para
Cryptosporidium y Giardia. En Venezuela y otros pases de Amrica Latina son
muy limitados los estudios sobre parsitos
protozoarios en ambientes acuticos y la
disponibilidad de mtodos de deteccin
de protozoarios entricos en estos ambientes proporciona la estrategia cientfica
requerida en estos pases para enfrentar
algunos de los desafos que representan
los patgenos entricos en aguas.
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Waterborne Enteric Protozoan Parasites: Concentration and Detection Methods

Walter Q. Betancourt and Luis J. Querales
SUMMARY
Waterborne transmission of pathogenic parasitic protozoa represents one of the most prominent public health issues worldwide. Studies on occurrence of waterborne protozoan parasites
are fundamental to the understanding of the epidemiology of waterborne diseases affecting human populations in different geographical regions. Thus, public health measures can be implemented to control and to prevent waterborne infectious diseases.
Current methods for monitoring waterborne Cryptosporidium
parvum, C. hominis and Giardia intestinalis are being applied

for assessing the occurrence of waterborne Toxoplasma gondii

and Cyclospora cayetanensis. The combination of novel filtration
and concentration techniques along with molecular and tissue
cell culture methods is part of the approach aimed to evaluate
the public health significance of current and emerging waterborne pathogens. This paper reviews recent advances in concentration and detection methods that could be applied to assess
occurrence of waterborne protozoan parasites in Latin America,
where further research in this field is needed.

Protozorios parasitas patognicos em ambientes aquticos: mtodos de concentrao e

deteco
Walter Q. Betancourt e Luis J. Querales
RESUMO
A transmisso de patgenos pela gua representa um dos problemas de sade pblica mais proeminentes no mundo. Os estudos sobre ocorrncia de parasitas patognicos so importantes
para entender a epidemiologia das doenas que afetam populaes humanas em regies geogrficas diferentes. Assim, as medidas de sade pblica podem ser implementados para controlar e
prevenir a transmisso de doenas pela gua. Os mtodos atuais para detectar Cryptosporidium parvum, C. hominis e Giardia
intestinalis so usados para determinar ocorrncia de Toxopla-

JUN 2008, VOL. 33 N 6

ma gondii e Cyclospora cayetanensis em ambientes aquaticos.

A aplicao de novas tcnicas para filtrao e concentrao
junto com mtodos moleculares e de cultura de clulas parte
da estratgia para avaliar a importncia de parasitas patognicos correntes e emergentes em guas. Em este artigo se faz
uma reviso dos avanos recentes em mtodos de concentrao
e deteco de protozorios patognicos transmitidos pela gua.
A aplicao desses mtodos em ambientes aquticos da Amrica
Latina importante, pois se requer maior pesquisa nessa rea.

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