BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMON

FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGA
CARRERA DE INGENIERIA QUMICA

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO

EMPACADO CON FLUJO CONTINUO

MATERIA: Laboratorio de investigacin

TUTOR: Ing. Henry Antezana Fernndez
ESTUDIANTES:

Guzman Villarroel Mayra Alexandra

Ugarte Huanca Danitza Anahi

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CAPTULO I
BIODEGRADACIN DE LA ATRAZINA EN LECHO EMPACADO
CON FLUJO CONTINUO
1.1.

INTRODUCCIN

Una de las caractersticas que mejor define la sociedad actual en lo que se

entiende por pases desarrollados es la utilizacin de diversos productos qumicos.
Estos productos qumicos impactan directamente o a travs de sus residuos sobre
el medio.
Hasta no hace mucho tiempo, el vertido de los contaminantes en la naturaleza era
el medio o forma de eliminarlos. Hoy en da, la capacidad auto-depuradora del
medio ambiente ha dejado de ser suficiente, se han sobrepasado con creces los
niveles permitidos, haciendo inservibles los recursos naturales y alterando sus
caractersticas, por todo ello surge la necesidad de desarrollar metodologas para
eliminacin y/o reciclaje de estos contaminantes y reducir as su impacto en el
Medio Ambiente.
El origen principal de los contaminantes en el Medio Ambiente, son los
procedentes de la industria y la agricultura y en menor medida los provocados por
la propia poblacin.
Los plaguicidas ms preocupantes desde el punto de vista medioambiental, son
los denominados no biodegradables o persistentes ya que, en caso de no recibir
un tratamiento especfico para su destruccin o inertizacin, pueden producir una
serie de daos muy diversos e irreversibles que van desde el deterioro o
desaparicin de un entorno determinado hasta la alteracin de la salud de los
individuos que viven en dicho entorno.
Durante el ciclo del agua se pueden producir alteraciones en la calidad de la
misma. La lluvia y las aguas de riego pueden arrastrar contaminantes atmosfricos
o presentes en el suelo, como pesticidas y/o herbicidas, que acaben disueltos en

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la hidrosfera teniendo especial importancia el caso de las aguas subterrneas que
tienen una menor renovacin.
La dinmica de interaccin del compuesto con el medio acutico y terrestre es
bastante compleja y depende de una combinacin de procesos fsicos-qumicos y
biolgicos.
Entre los procesos fsico-qumicos destaca la lixiviacin debida a la solubilidad, la
adsorcin-desorcin con el suelo y la volatilizacin, que marcan la preferencia del
medio en el que predominar el contaminante
Entre los procesos de descomposicin estrictamente qumicos que se pueden
producir en el agua se incluyen la ionizacin, hidrlisis, oxidacin qumica y la
fotodescomposicin. Este ltimo, es el proceso predominante en la degradacin
natural de muchos compuestos, sin embargo no acta en el caso de las aguas
subterrneas.

Ilustracin 1 Posibles mecanismos de transporte y transformacin de plaguicidas en el ambiente.

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Algunos pesticidas y herbicidas, como es el caso de la atrazina, son
biodegradables por la accin de microorganismos presentes en el agua. Las
condiciones ambientales, como la concentracin de oxgeno disuelto, pH, salinidad
y temperatura, influyen en el nmero de microorganismos y en la velocidad de
biodegradacin de los pesticidas en medio acuoso.
1.2. ANTECEDENTES
El uso extensivo de atrazina en la agricultura ha provocado grandes niveles de
contaminacin del agua con este herbicida. Con el fin de eliminarlo, se han
desarrollado

numerosas

investigaciones

utilizando

diversos

tratamientos,

algunas de las tecnologas convencionales empleadas y su eficiencia en la

remocin, se resumen en la tabla 1.
Eficiencias de remocin de atrazina para diferentes tecnologas
convencionales de tratamiento de agua (Miltner y col., 1987)
Tabla 1

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El uso de biotecnologas para el tratamiento de aguas residuales representa
una excelente alternativa para el tratamiento de efluentes contaminados con
compuestos cuya eliminacin mediante tcnicas de tratamiento convencionales
resulta poco eficaz. El empleo de microorganismos conocidos para el
tratamiento de desechos potencialmente txicos ya es una prctica habitual en
pases desarrollados.
Estos compuestos qumicos constituyen una adecuada fuente de carbono y
donadores de electrones para ciertos microorganismos del suelo.
Para la degradacin de compuestos txicos en el ambiente, las bacterias son las
ms empleadas en los procesos de biorremediacin, aunque tambin se han
utilizado otros microorganismos como hongos y algas.
La capacidad de estos microorganismos para degradar compuestos depende del
tiempo de contacto con el compuesto, las condiciones ambientales en las que se
desarrollen y su versatilidad fisiolgica.
1.3.

JUSTIFICACIN

En la actualidad, los herbicidas son aplicados en las tierras de cultivo, que si bien
han trado ciertos beneficios, tambin han ocasionado serios problemas de
contaminacin por su uso indiscriminado. En particular aquellos del grupo de
las triazinas (atrazina y simazina) han ocasionado problemas de contaminacin
ambiental con los consecuentes daos a los ecosistemas y al ser humano. Dichas
sustancias se utilizan generalmente combinadas o secuenciadas (una despus de
la otra). La gran acumulacin de herbicidas no logra eliminarse en forma natural
(adsorcin y degradacin) y suele infiltrarse a las aguas subterrneas, lo que
constituye un problema de contaminacin de los recursos hdricos; ste es un
problema a nivel mundial es necesario desarrollar procesos destinados a su
depuracin.
Una alternativa es el empleo de mtodos biolgicos, donde se pueden utilizar
bacterias capaces de degradar estos herbicidas, as como sus productos de
degradacin, en particular el cido cianrico, el cual es un intermediario en la
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degradacin de las triazinas que debe tratar de eliminarse para lograr una
completa depuracin de las aguas contaminadas.
1.4.

OBJETIVOS

1.4.1. OBJETIVO GENERAL

Estudiar la biodegradacin de la atrazina en lechos empacados con flujo continuo,
para la remediacin de aguas contaminadas artificialmente con atrazina.

1.4.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

Evaluar la capacidad de la comunidad microbiana para degradar atrazina.

Evaluar el efecto de la velocidad del fluido en la remocin de atrazina en

reactores de lecho empacado.

Analizar las muestras durante el proceso de biodegradacin de atrazina
mediante tcnicas de HPLC y Densidad ptica.

CAPTULO II
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FUNDAMENTO TERICO
2.1.

PLAGUICIDAS

Los plaguicidas o pesticidas son sustancias qumicas empleadas por el hombre

para controlar o combatir algunos seres vivos considerados como plagas (debido a
que pueden estropear los campos y los frutos cultivados). A este proceso se le
llama fumigacin.
En la definicin de plaga se incluyen insectos, hierbas, pjaros, mamferos,
moluscos, peces, nematodos, o microbios que compiten con los humanos para
conseguir alimento, destruyen la propiedad, propagan enfermedades o son
vectores de estas, o causan molestias. Los plaguicidas no son necesariamente
venenos, pero pueden ser txicos para los humanos u otros animales.
Pero de acuerdo a la Convencin de Estocolmo sobre contaminantes orgnicos
persistentes, 9 de los 12 ms peligrosos y persistentes compuestos orgnicos son
plaguicidas.
Durante los aos 1980, la aplicacin masiva de plaguicidas fue considerada,
generalmente, como una revolucin de la agricultura. Eran relativamente
econmicos y altamente efectivos. Su aplicacin lleg a ser una prctica comn
como medida preventiva aun sin ningn ataque visible. Desde entonces, la
experiencia ha demostrado que este mtodo no slo perjudica el medio ambiente,
sino que a la larga es tambin ineficaz. Donde se han utilizado los plaguicidas de
manera indiscriminada, las especies de las plagas se han vuelto resistentes y
difciles o imposibles de controlar. Por ejemplo, todos los caros fueron
fomentados por los plaguicidas, porque no abundaban antes de su empleo. En
base a esta experiencia, los especialistas en la proteccin de cultivos han
desarrollado un mtodo ms diversificado y duradero: el manejo integrado de
plagas.
2.2.

USOS
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Los plaguicidas se usan para matar ratas y mosquitos que pueden transmitir
enfermedades como la fiebre amarilla y la malaria. Tambin pueden matar
insectos que nos causan picaduras o que daan a nuestros animales o a nuestras
propiedades. Los pesticidas tambin pueden proteger nuestras frutas y verduras.
Los herbicidas se usan para eliminar las malezas y tambin para controlar a las
plantas invasoras que pueden infligir daos en el medio ambiente. Los herbicidas
tambin se usan en lagos y lagunas para controlar el crecimiento de algas y
plantas acuticas que puedan interferir con la natacin, la pesca o que den malos
olores. Se usan para controlar las termitas y el moho que pueden daar las
construcciones. En los lugares de almacenaje de alimentos se usan para controlar
a los roedores e insectos que infectan los granos y otros alimentos. Cada pesticida
trae aparejados algunos riesgos; el uso adecuado de pesticidas reduce esos
riesgos a un nivel considerado aceptable por las agencias que regulan su uso,
tales como la Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos (EPA por
sus siglas en ingls) y por la Agencia Reguladora del Manejo de Pestes (PMRA)
de Canad.
2.3.

CLASIFICACIN

Los plaguicidas pueden clasificarse atendiendo a diversos aspectos:

Segn el destino de su aplicacin pueden considerarse:

Plaguicidas de uso fitosanitario, productos fitosanitarios: destinados a su

utilizacin en el mbito de la sanidad vegetal o el control de vegetales.

Plaguicidas de uso ganadero: destinados a su utilizacin en el entorno de

los animales o en actividades relacionadas con su explotacin.

Plaguicidas de uso en la industria alimentaria: destinados a tratamientos de

productos o dispositivos relacionados con la industria alimentaria.

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Plaguicidas de uso ambiental: destinados al saneamiento de locales o

establecimientos pblicos o privados.

Plaguicidas de uso en higiene personal: preparados tiles para la aplicacin

directa sobre el ser humano.

Plaguicidas de uso domstico: destinados para aplicacin por personas no

especialmente calificadas en viviendas o locales habitados, el ms
peligroso, ya que alrededor de 10 millones de personas mueren a
causa.Segn su accin especfica pueden considerarse:

1. Insecticida
2. Acaricida
3. Fungicidas
4. Desinfectante y Bactericida
5. Herbicida
6. Fitorregulador y productos afines
7. Rodenticida y varios
8. Especficos post-cosecha y simientes
9. Protectores de maderas, fibras y derivados
10. Plaguicidas especficos varios
Segn su constitucin qumica, los plaguicidas pueden clasificarse en varios
grupos, los ms importantes son:

Arsenicales.
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Carbamatos.

Derivados de cumarina.

Derivados de urea.

Dinitrocompuestos.

Organoclorados.

Organofosforados.

Organometlicos.

Piretroides.

Tiocarbamatos.

Triazinas.

2.4.

EFECTOS AMBIENTALES

El uso de pesticidas crea una serie de problemas para el medio ambiente. Ms del
98% de los insecticidas fumigados y del 95% de los herbicidas llegan a un destino
diferente del buscado, incluyendo especies vegetales y animales, aire, agua,
sedimentos de ros, mares y alimentos. La deriva de pesticidas ocurre cuando las
partculas de pesticidas suspendidas en el aire son llevadas por el viento a otras
reas, pudiendo llegar a contaminarlas. Los pesticidas son una de las causas
principales de la contaminacin del agua y ciertos pesticidas son contaminantes
orgnicos persistentes que contribuyen a la contaminacin atmosfrica.
En adicin, el uso de pesticida reduce la biodiversidad, reduce la fijacin de
nitrgeno, contribuye al declive de polinizadores (reduccin de los polinizadores en
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muchos ecosistemas, desde finales del siglo 20), destruye hbitats (especialmente
para aves), y amenaza a especies en peligro de extincin.
Tambin ocurre que algunas pestes se adaptan a los pesticidas y no mueren. Lo
que es llamado resistencia a pesticidas, para eliminar la descendencia de esta
peste, ser necesario un nuevo pesticida o un aumento de la dosis de pesticida.
Esto causara un empeoramiento del problema de contaminacin del ambiente.
2.5.

EFECTOS EN LA SALUD

Segn datos de la OMS, unas 10 personas mueren al ao por el uso de pesticidas

y 20 quedan intoxicadas de forma aguda por su utilizacin en la agricultura y la
ganadera.
Aunque para la poblacin en general, en cuanto consumidora de productos
agrcolas, los riesgos de sufrir consecuencias en su salud por el uso de pesticidas
son muy bajos, siempre que las condiciones de aplicacin y eliminacin de
residuos hayan sido cumplidas correctamente, para los obreros de su
manufactura, transporte y aplicacin, as como para los agricultores, sobre todo
del tercer mundo y de cultivos intensivos, el riesgo es muy grande.
Por estas razones la Asociacin Mdica de Estados Unidos recomienda limitar la
exposicin a los pesticidas y el uso de alternativas menos peligrosas:
Existe incertidumbre acerca de los efectos de la exposicin prolongada de dosis
bajas de pesticidas. Los sistemas de supervisin actuales son inadecuados para
definir los riesgos potenciales relacionados con el uso de pesticidas y con
enfermedades relacionadas a pesticidas. Teniendo en cuenta estas faltas de
datos, es prudente limitar la exposicin a pesticidas y usar los pesticidas qumicos
menos txicos o recurrir a alternativas no qumicas.
De hecho, recientemente se ha demostrado cmo los pesticidas propician la
propagacin y el inicio del Parkinson.
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2.6.

ALTERNATIVA

Manejo integrado de plagas

Hay alternativas al uso de pesticidas que incluyen mtodos de cultivo usando
controles biolgicos, tales como feromonas y pesticidas microbianos, ingeniera
gentica, mtodos de disrupcin de la reproduccin de insectos. Estos mtodos
estn ganando popularidad por ser ms saludables y a veces tambin ms
efectivos. En Estados Unidos la Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados
Unidos (EPA) est registrando mayores nmeros de pesticidas de bajo riesgo. Las
prcticas de cultivo incluyen los policultivos (cultivar una variedad de plantas, lo
opuesto a monocultivo), rotacin de cosechas, cultivar una cosecha donde las
plagas estn ausentes o en pocas en que sean menos problemticas, usar las
llamadas cosechas trampas que atraen a las pestes hacia otras plantas para que
no ataquen a la cosecha principal. Medidas mecnicas en vez de qumicas, por
ejemplo el agua caliente puede tener casi tan buen efecto sobre pulgones como
los pesticidas.
Otro mtodo es la liberacin de otros organismos que combaten a las plagas,
como ser sus predadores y parsitos naturales. Tambin se usan pesticidas
biolgicos como hongos patgenos de la peste, bacterias, virus.
Tambin es posible alterar el ciclo biolgico del insecto por medio de esterilizacin
de los machos que luego son liberados para que se apareen con hembras que no
podrn producir cras. Estos procedimientos pueden ser costosos, llevar mucho
tiempo y servir slo para ciertas especies de pestes.
No obstante algunos problemas hay evidencias de que los pesticidas alternativos
pueden ser tan efectivos o an ms que los tradicionales. Por ejemplo en Suecia
fue posible reducir a la mitad el uso de pesticidas en los cultivos con una
reduccin mnima de las cosechas. En Indonesia los agricultores redujeron el uso

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de pesticidas en las plantaciones de arroz en un 65% y experimentaron un
aumento del 15% de las cosechas.
2.7.

VENTAJAS Y RIESGOS

Las ventajas del uso de pesticidas son la reduccin de la brecha de productividad

y la del nivel de insalubridad en la agricultura.
Los compuestos triaznicos son los herbicidas ms utilizados actualmente en el
mundo, representan entre el 12 y 15% de todos los pesticidas empleados en los
Estados Unidos en cultivos de maz, sorgo y caa de azcar. Tienen un gran
potencial de contaminacin del agua subterrnea a pesar de su moderada
solubilidad en agua debido a sus caractersticas qumicas como: hidrlisis lenta,
solubilidad en agua de moderada a baja y alta solubilidad en disolventes
orgnicos. Se ha demostrado que son txicos ambientales importantes y por lo
mismo es necesaria su remocin de suelos y aguas superficiales o subterrneas
contaminadas.

2.8.

TRIAZINAS

La atrazina, (2-cloro-4-(etilamino)-6-(isopropilamino)-s-triazina) es un herbicida

selectivo perteneciente a la familia de las s-triazinas. Estructuralmente est
constituida por una anillo hexagonal, aromtico y simtrico formado por tres
tomos de carbn y otros tres de nitrgeno ocupando posiciones alternas.
Fue, y aunque en muchos pases se ha prohibido o limitado su utilizacin, es
mundialmente usada, frecuentemente en conjunto con otros herbicidas y
derivados de las triazinas para el control de malas hierbas y hierbas foliares en la
agricultura, especialmente en la agricultura del maz, caa de azcar, sorgo as
como en la plantacin de conferas de reforestacin (US Environmental Protection
Agency).

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2.8.1. Propiedades fsicas.
La atrazina pura es un polvo blanco sin olor, no muy voltil, reactivo o inflamable.
Su frmula qumica es C8H14ClN5 y su masa molecular de 215,7 g/mol.
Tabla 2 Propiedades fsico-qumicas y biolgicas de la atrazina

Se trata de un pesticida de solubilidad baja y preferencia por los suelos moderada,

una volatilidad muy baja y una persistencia elevada. Sus caractersticas justifican
su elevada presencia y persistencia en el agua subterrnea.
Comparando la toxicidad de hasta 40 herbicidas diferentes, estudios llegaron a la
conclusin que la toxicidad de la atrazina era la ms elevada y peligrosa para el
medio de todas las triazinas, pudiendo producir alteraciones en la estructura y
funcionalidad de las comunidades, acaba con las malas hierbas y todas aquellas
plantas susceptibles mediante enlace quinome-proteico y la inhibicin de la
fotosntesis del electrn transporte. La planta muere por inanicin y el dao
oxidativo causado por un fallo en el proceso de transporte de electrones. Como
puede observarse en la tabla superior La atrazina es un inhibidor del fotosistema.
Aunque la atrazina tenga efectos txicos, sus metabolitos, incluidos el
dietilatrazina y el diisopropilatrazina se han asumido como mucho menos txicos y
por este motivo surge la bsqueda de mtodos para la degradacin de la atrazina
y obtencin de sus metabolitos (Mandelbaum et al. 1995; Guzzella et al. 2003).
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2.9.

BIODEGRADACIN

Biodegradable es el producto o sustancia que puede descomponerse en los

elementos qumicos que lo conforman, debido a la accin de agentes biolgicos,
como plantas, animales, microorganismos y hongos, bajo condiciones ambientales
naturales.
No todas las sustancias son biodegradables bajo condiciones ambientales
naturales. A dichas sustancias se les llama sustancias recalcitrantes. La velocidad
de biodegradacin de las sustancias depende de varios factores, principalmente
de la estabilidad que presenta su molcula, del medio en el que se encuentran,
que les permite estar biodisponibles para los agentes biolgicos y de las enzimas
de dichos agentes.
La biodegradacin es la caracterstica de algunas sustancias qumicas de poder
ser utilizadas como sustrato por microorganismos, que las emplean para producir
energa (por respiracin celular) y crear otras sustancias como aminocidos,
nuevos tejidos y nuevos organismos. Puede emplearse en la eliminacin de
ciertos

contaminantes

como

los

desechos

orgnicos

urbanos,

papel,

hidrocarburos, etc. No obstante en vertidos que presenten materia biodegradable

estos tratamientos pueden no ser efectivos si nos encontramos con otras
sustancias como metales pesados, o si el medio tiene un pH extremo. En estos
casos se hace necesario un tratamiento previo que deje el vertido en unas
condiciones en la que las bacterias puedan realizar su funcin a una velocidad
aceptable.
2.9.1. Vas para la degradacin
La degradacin de estos compuestos puede producirse por dos vas:
Degradacin aerobia.
Degradacin anaerobia.
2.9.2. Biodegradacin de la atrazina

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La atrazina se caracteriza por su relativa alta resistencia a la transformacin fsicoqumica, pero son eficientemente utilizados como fuente de nitrgeno por
numerosas bacterias.
En su ruta metablica intervienen los siguientes genes: atzA, atzB, atzC, atzD,
atzE y atzF, los que codifican las enzimas correspondientes a cada conversin,
siendo las tres primeras enzimas del grupo de las amidohidrolasas, este tipo de
enzima se ha encontrado nicamente en los tres tipos de organismos: Eubactria,
Archae y Escaria y se cree que los genes que codifican a dichas enzimas han
evolucionado recientemente, con lo cual se ha permitido la biodegradacin de la
atrazina (De Sousa, col 1998).
Determinan la presencia de los genes atzA, atzB, atzC, en diferentes bacterias
capaces de transformar atrazina en cido cianrico. Entre los gneros
mencionados se encuentran: Pseudnimas, Gastonia, Clavibacter, Agrobacterium
y alcaligenes. (Souza y Col, 1998)
Se ha estudiado ampliamente el mecanismo de la biodegradacin de atrazina por
Pseudomonas. Encontrando que este microorganismo contiene un plsmido
natural (p-ADP-1) donde estn incluidos seis genes, (atzA, atzB, atzC, atzD, atzE
y atzE.) que codifican enzimas involucradas en la mineralizacin de este herbicida.
(Falo, 2004)

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Ilustracin 2 Esquema de biodegradacin de atrazina.

2.10. LECHOS EMPACADOS EN SISTEMA CONTINUO

Un balance apropiado entre ambos procesos permite no slo mantener un
contenido ptimo de microorganismos en el sistema, sino tambin es condicin
necesaria para sostener el reactor en operacin continua. La mayor eficiencia en
la remocin de sustratos depende en gran medida de la obtencin de la cantidad
adecuada de biopelcula adherida al material de soporte.
Conforme se incrementa la cantidad de microorganismos, mayor es la tasa de
remocin del substrato de acuerdo con la ecuacin de Monod, pero existe un nivel
crtico en el que la difusin de sustrato, nutriente u oxgeno puede ser un factor
limitante que afecta la tasa de biodegradacin.
La aplicacin de altas velocidades de recirculacin favorece el desprendimiento
del exceso de biomasa y propician la fluidizacin del lecho. Sin embargo, esas
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altas tasas de fluido crean a menudo un efecto de recorte hidrodinmico lo que
conduce a una prdida excesiva de biopelcula. Por el contrario, cuando se
disminuye la velocidad de recirculacin, llega un momento en que el reactor se
comporta como un lecho fijo, en el que es prcticamente imposible eliminar el
exceso de biomasa, conduciendo al estancamiento del lecho, lograron eliminar el
exceso de biomasa mediante la induccin de turbulencias peridicas, inyectando
agua o aire comprimido dentro del reactor.
Tavares et al. (1995) utilizaron un material de soporte de baja densidad, cuyo
exceso de biomasa era eliminado por el choque entre partculas durante el
proceso de fluidizacin. Lo anterior coincide con lo expresado por Traspaso quien
manipul la altura del lecho como medio para agitar las partculas en la parte alta
del lecho y regresarlas a la parte baja del reactor, despus del lavado del exceso
de biopelcula.
En los reactores de lecho fijo y de lecho fluido solo difieren en la movilidad del
soporte para la biopelcula en ambos casos puede ingresar al birreactor en forma
concurrente o en contracorriente. En los lechos empacados se proporcionan los
nutrientes esenciales para que los microorganismos puedan llevar a cabo la
biodegradacin de los contaminantes. En este tipo de birreactores se ha logrado la
remocin de compuestos qumicos de origen agrcola, entre los que destacan:
nitratos, atrazina y alaclor. (Saucedo, 2007)
2.11.

CARACTERSTICAS DE LA CASCARILLA DE ARROZ

La cascarilla de arroz es un subproducto de la industria molinera, que resulta

abundantemente en las zonas arroceras de muchos pases y que ofrece buenas
propiedades para ser usado como sustrato hidropnico. Entre sus principales
propiedades fsico-qumicas tenemos que es un sustrato orgnico de baja tasa de
descomposicin, es liviano, de buen drenaje, buena aireacin y su principal costo
es el transporte.

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El principal inconveniente que presenta la cascarilla de arroz es su baja capacidad
de retencin de humedad y lo difcil que es lograr el reparto homogneo de la
misma (humectabilidad) cuando se usa como sustrato nico en camas o
bancadas. Para mejorar la retencin de Humedad de la cascarilla, se ha recurrido
a la quema parcial de la misma.
Esta prctica aunque mejora notablemente la humectabilidad, es en realidad muy
poco lo que aumenta la capilaridad ascensional y la retencin de humedad.

La densidad dela cascarilla de arroz es baja, por lo cual al apilarse ocupa grandes
espacios. El peso especfico es de 125 kg/ m 3, es decir, 1 tonelada ocupa un
espacio de 8 m3 a granel (Varn 2005). La composicin qumica de la cascarilla de
arroz y de sus cenizas se muestra en la Tabla 2.
Tabla 3 Composicin Qumica de la Cascarilla de Arroz y de las Cenizas de la Cascarilla de Arroz

Tabla 4 Carbono

39.1

Hidrgeno

5.2

Nitrgeno

0.6

Oxgeno

37.2

Azufre

0.1

Cenizas

17.8

La temperatura mxima que se obtiene al ser quemada vara de acuerdo con su

condicin: 970C (seca), 650C (con algn grado de humedad) y hasta los 1000C
(mezclada con combustible).
La cascarilla de arroz al quemarse, genera 17.8 % de ceniza, rica en Slice (94.5
%), (Varn 2005, Valverde, 2007).
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La cascarilla de arroz tiene una forma de canoa, superficie rugosa y presenta un

color amarillento, su longitud depende de la variedad, y esta entre 8 a 10mm de
largo por 1 a 2 mm de ancho, que corresponde del 30 al 40% de su longitud. De
acuerdo con su tamao una cascarilla pesa entre 2.5 y 4.8 mg.
El proceso para medir la porosidad consiste en distinguir entre el volumen de aire
de un lecho de cascarilla y el volumen de aire o de los poros en s. El volumen de
lecho en un rea transversal alcanza el 85% de aire, el 15% restante lo ocupa la
parte solida (cascarilla). El volumen de porosidad de la cascarilla es del 54%.
(Quinceno Villada David, 2010)
2.12.

CARACTERSTICAS DEL ASERRN

El aserrn es el residuo comn en todos los aserraderos encuestados y es el que

ms variedad de uso tiene. Los materiales lignocelulsicos constituyen una fuente
de materia prima importante para la obtencin de productos de amplia utilizacin
en la agricultura. Dentro de estos materiales se encuentran el aserrn y la corteza
que resultan desechos de la industria de la elaboracin primaria de la madera.
La bsqueda de nuevos materiales, de tipo orgnico, ha contribuido a remediar
problemas ambientales como la contaminacin acutica, logrando una mejor
disposicin y utilizacin de residuos slidos, para nuestro caso en particular el
aserrn, se usar para lograr la disminucin de la concentracin de atrazina en
aguas residuales.
La madera est constituida fundamentalmente por materias orgnicas tales como:
carbono (50%), hidrgeno (6%), oxgeno (44%) y nitrgeno (0.1%). Es un producto
de desecho del procesamiento de la madera compuesto de tres componentes
principales: la lignina, celulosa y la hemicelulosa.
La lignina, que se produce naturalmente en las capas de recubrimiento de celulosa
y hemicelulosa, capas de xilema y paredes de fibra de la clula; es el componente
ms recalcitrante, y por lo tanto protege a los componentes menos recalcitrantes
de polisacridos contra el ataque microbiano. La lignina es un polmero complejo
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sobre la base de propano fenilo, un monmero con aromticos (fenil) y residuos
de hidrocarburos alifticos (propano).
Una de las principales ventajas que presenta este material es su bajo costo, ya
que requiere un procesamiento mnimo y es abundante como residuo de la
industria forestal. Este material es relativamente hidrfilo, por lo tanto, su
superficie tiene que ser modificada para mejorar la eficacia de la adsorcin. En los
ltimos aos el uso de aserrn como material adsorbente de diferentes materiales
ha tomado gran auge alrededor del mundo.
El aserrn de Bamb se utiliz como materia prima adsorbente, para eliminar
metales pesados y colorantes en agua ya que posee una estructura polimrica
constituida por celulosa-lignina, capaz de efectuar el mecanismo de la adsorcin
de protones de los contaminantes.
En Sur frica, demostraron la capacidad de adsorcin, adems, del bajo costo que
posee el aserrn de pino, para el tratamiento de aguas residuales que contenan
nquel (II) y otros iones de metales pesados.
En este estudio, se indic que el uso de aserrn de pino podra ser una
prometedora solucin para la eliminacin de los iones de nquel a partir de varios
componentes de soluciones acuosas. En Brasil, tomaron muestras de aserrn para
la adsorcin de Cr (VI) en curtiembres de aguas residuales presentando una
capacidad eficiente de adsorber dicho material de esta clase de efluentes. (Mara
Elvira Jimnez Villadiego, 2012)
2.13. HPLC CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN
La

Cromatografa

lquida

de

alta

eficacia

High

performance

liquid

chromatography (HPLC) es un tipo de cromatografa en columna utilizada

frecuentemente en bioqumica y qumica analtica.
Es una tcnica cromatogrfica usada para separar componentes de una mezcla
basndose en los diferentes tipos de interacciones qumicas entre las substancias
analizadas y la columna cromatogrfica. Bsicamente, es un sistema compuesto
21

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
de un reservorio de fase mvil, bomba, inyector, columna de separacin y detector
(ver figura 5.4).
Se hace circular al compuesto por la columna cromatogrfica a travs de la fase
estacionaria mediante su bombeo a alta presin. La muestra a analizar es
introducida

en

pequeas

cantidades

sus

componentes

se

retrasan

diferencialmente dependiendo de las interacciones qumicas o fsicas con la fase

estacionaria.
El grado de retencin de los componentes de la muestra depende de la naturaleza
del compuesto, de la composicin de la fase estacionaria y de la fase mvil. El
tiempo de retencin se considera una propiedad identificativa y caracterstica de
un compuesto en una determinada fase mvil y estacionaria.

La utilizacin de presin en este tipo de cromatografas incrementa la velocidad

lineal de los compuestos dentro la columna y reduce as su difusin dentro de la
columna mejorando la resolucin de la cromatografa.

Los disolventes ms utilizados en la fase mvil son el agua, el metanol y el

acetonitrilo. Una mejora introducida a la tcnica de HPLC descrita es la variacin
en la composicin de la fase mvil durante el anlisis, conocida como elucin en
gradiente.
Un gradiente normal en una cromatografa de fase reversa puede empezar a un
5% de acetonitrilo y progresar de forma lineal hasta un 50% en 25 minutos. El
gradiente utilizado vara en funcin de la hidrofobicidad del compuesto. El
gradiente separa los componentes de la muestra como una funcin de la afinidad
del compuesto por la fase mvil utilizada respecto a la afinidad por la fase
estacionaria. Utilizando un gradiente agua/acetonitrilo los compuestos ms
hidroflicos eluirn a mayor concentracin de agua, mientras que los compuestos
ms hidrofbicos eluirn a concentraciones elevadas de acetonitrilo.

22

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Ilustracin 3 Esquema del sistema de cromatografa lquida de alta eficiencia, HPLC.

2.14. DETERMINACIN

DEL

CRECIMIENTO

DE

POBLACIONES

BACTERIANAS
Control del crecimiento de la masa bacteriana
Mtodos turbidimtricos (pticos). Es un mtodo indirecto, la base comn de
estos mtodos consiste en la medicin de la cantidad de luz dispersada o
transmitida a travs de un cultivo bacteriano.
Recordemos aqu que las suspensiones bacterianas dispersan la luz, al igual que
cualquier partcula pequea suspendida en agua. La dispersin de la luz es,
dentro de ciertos lmites, proporcional a la masa del cultivo.

23

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
Una de las formas de medir la biomasa y determinar las fases de crecimiento de la
misma es utilizando un mtodo que relacione dicha biomasa con una magnitud
fsica tal como la absorbancia de luz. Para estas determinaciones se utiliza un
espectrofotmetro, en el cual la luz atraviesa un tubo conteniendo el cultivo
bacteriano. El cambio entre la intensidad de luz que incide en el cultivo (Io) y la
transmitida (I) se registra en el espectrofotmetro como absorbancia (A) o
densidad ptica (D.O.), valor derivado del log del cociente entre Io y la de la luz
transmitida por la suspensin:
A = log Io/Ia
A medida que la concentracin celular aumenta, el cultivo se hace ms turbio y se
reduce la cantidad de luz transmitida que alcanza la clula fotoelctrica (dicha
intensidad se detecta como corriente en un galvanmetro).
Esta reduccin de la intensidad de luz transmitida es consecuencia de la difraccin
de la luz por parte de las clulas. Sin embargo, la absorbancia no es una medida
directa del nmero de clulas, por lo cual es necesario realizar una curva de
calibracin para obtener la correspondencia entre las medidas de la biomasa en el
cultivo y las de Absorbancia (medidas a 600 nm de longitud de onda).
El crecimiento de clulas en el medio de cultivo se monitoriza mediante la toma
intermitente de muestras de pequeas cantidades del cultivo y midiendo la
densidad ptica del medio de cultivo con el uso de un espectrofotmetro externo.
A ttulo de explicacin, la medida de la densidad ptica a aproximadamente 600
nm detecta la dispersin de la luz por microorganismos, y la lectura de la OD
resultante es proporcional a la densidad celular. Las clulas crecen y se dividen, y,
tpicamente, cuando la densidad ptica del cultivo ha alcanzado un valor deseado,
se induce la sobreexpresin de una protena de inters, por ejemplo mediante un
cambio en la temperatura o la adicin de un inductor, etc.

24

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

CAPTULO III
MATERIALES Y METODOLOGA
3.-1. Materiales
Para la realizacin de las pruebas utilizaremos los siguientes materiales biolgicos
de laboratorio, reactivos y equipos de laboratorio.
3.1.1. Materiales Biolgicos
Para la biodegradacin de atrazina se utiliz un microorganismo aislado de la
Laguna de Alba Rancho que es una bacteria aerbica facultativa, presenta un
crecimiento ptimo a pH 7.5 y temperatura de 30-35 C.
3.1.2. Material de Laboratorio

Vaso precipitado 500 ml

Matraz Erlenmeyer 500 ml
Tips
Aserrn
Cascarilla de arroz
Baln 500ml
Pastilla magntica
Vasos precipitados 100ml y 50ml
Encendedor
Mechero
Probeta 100ml
Varilla
Viales
Mangueras de dimetro mnimo
Soporte universal
Papel aluminio
Alambre
Jeringas

3.1.3. Reactivos
25

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Agua destilada
Acetona
Alcohol
Peptona
Extracto de levadura
Cloruro de potasio
Sulfato de magnesio heptahidratado
Cloruro de calcio dihidratado
Bromuro de sodio
Glucosa
Atrazina

3.1.4. Equipo

Refrigerador
Estufa
Tamices de malla N 12 y 30
Centrifugadora de ependorf
HPLC
Agitador magntico
Bomba peristltica de carga fcil

3.1.5 Metodologa
PRIMERA PARTE
Se utiliz lechos ya saturados de atrazina ya utilizados anteriormente por lo que no
fue necesario saturarlos de atrazina. Se procedi a preparar el medio HM
modificado donde los microorganismos fueron sembrados para posteriormente
llevarlos al empaque y puedan formar sus colonias y proceder con la
biodegradacin.
Los microorganismos son procedentes de la laguna de Alba Rancho, para la
biodegradacin de atrazina se realiza a temperatura ambiente. Se prepara el
medio de cultivo HM y atrazina (13ppm), para un volumen de produccin de 360
ml (cscara de arroz) y 368 ml (aserrn). La composicin del medio de cultivo HM
a utilizarse esta detallada en la Tabla.

26

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
Tabla 4 Composicin del medio de cultivo HM para 100ml de solucin

Medio de cultivo HM
Peptona
Extracto de levadura
KCl

(g)
0.3
0.4
0.05

MgSO4*7H2O

0.025

CaCl2*2 H2O

0.009

NaBr

0.006

Los empaques que se utilizaron al inicio de la investigacin fueron utilizados

anteriormente logrando resultados ptimos, por ello se utilizaron los mismos
empaques, a continuacin se detalla la preparacin de los empaques:
Realizar la limpieza respectiva de cada material residual a utilizar como empaque
(aserrn y cascara de arroz), para obtener un material limpio y homogneo. Para el
aserrn se utiliz un tamiz N 12 al mismo tiempo se apart las impurezas que
contena, del mismo modo se oper con la cascara de arroz el cual primero se
lav tres ocasiones y luego se utiliz un tamiz N 30.
Determinacin del peso del material a utilizar en el empaque y del volumen de
medio HM necesario a utilizar para un lote de 400 ml.
Preparacin del medio de cultiv HM liquido requerido para el crecimiento de los
microorganismos para cada material a utilizar, el cual ser utilizado en un Lecho
Empacado en Lote en primera instancia.
Posteriormente se prepar el pre inculo cultivando los microorganismos en medio
HM en dos matraces Erlenmeyer de 500 ml, un volumen de 360 ml y 368 ml, para
la cascara de arroz y aserrn, respectivamente, los cuales se mantuvieron a una
temperatura de 35oC por 24 horas.
Pasado las 24 horas se realiz el empaque en cada lote respectivo, introduciendo
cada medio de cultivo a su perteneciente lote, para continuar con el crecimiento de
los microorganismos por un tiempo de 5 das a 35 0C.
27

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
Despus de los 5 das de

incubacin y al observarse el crecimiento de los

microorganismos se dren el medio HM para luego continuar con el proceso en

lote aadiendo atrazina al 13 ppm, y se dej en incubacin por 1 semana con el
fin de saturar el lecho con atrazina, y de donde se obtuvieron muestras cada 24
horas, y determin la remocin y/o adsorcin de la atrazina.
Se empac el lecho con la cascarilla de arroz o el aserrn obtenido anteriormente
en las pruebas por lote, ya saturado con atrazina para evitar la interferencia de la
adsorcin. (Ver figura 4)

Ilustracin 4 Lecho empacado con cascarilla de arroz

Luego, los microorganismos pre inoculados en el medio HM fueron aadidos en el

lecho empacado para su asimilacin o inmovilizacin en el empaque por 2 das.
Finalmente, se inyecta una solucin de atrazina a 13 ppm en flujo ascendente a
caudal controlado de aproximadamente 5 ml/h. (Ver figura 5)

28

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Ilustracin 5 Sistema de Lecho Empacado de flujo Ascendente con Atrazina,

a)Cscara de arroz b) aserrn

Se tomar muestras del lquido efluente del lecho y se determinar la Atrazina

remanente por HPLC.
El equipo HPLC trabaj bajo las siguientes condiciones: volumen de inyeccin 10
l, Temperatura 30 0C, flujo 0.5 ml/ min, fase mvil 50% de agua y 50% de
acetonitrilo, columna PAH 5um, detector DAD y longitud de onda 224nm.
El objetivo fue optimizar los resultados obtenidos anteriormente y para esto se
trat de controlar la velocidad del flujo continuo constante de atrazina a 13 ppm
implementando el concepto de presin hidrodinmica controlando as por medio
de alturas el flujo y la velocidad de atrazina que pasa por el lecho de forma
constante y continua con la ayuda de una bomba.
Primeramente con el lecho empacado de cascarilla de arroz (LECA) y
posteriormente con el lecho empacado con aserrn (LEA).

29

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Ilustracin 6 Esquema del proceso

SEGUNDA PARTE
Posteriormente al observar que el flujo no era el deseado se opt por implementar
vlvulas de tres salidas para poder dividir y lograr el flujo ideal y hacer ms ptima
la absorcin, logrando de esta manera utilizando los dos empaques en paralelo al
mismo tiempo, uno de aserrn y otro de cascarilla de arroz y poder de esta manera
observar en los resultados la absorcin a un flujo mnimo.

Ilustracin 7 Vlvulas de tres flujos

30

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Ilustracin 8 Lechos empacados de cascarilla de cascarilla de arroz y aserrn en paralelo

En este caso los lechos son diferentes, no se pudo lograr flujo continuo en el lecho
de aserrn, debido a la posible diferencia de densidades del material del empaque.
TERCERA PARTE
Por otro lado se hicieron pruebas con dos lechos de cascarilla de arroz,
primeramente con un flujo de agua para poder controlar y lograr flujos constantes
en ambos lechos y evitar el desperdicio de reactivo. Se controlaron los flujos y se
obtuvieron resultados ptimos por lo que se procedi a preparar otro lecho de
cascarilla de arroz, saturando este con atrazina.
Una vez lograda la saturacin, se prepar nuevamente el medio HM para inocular
bacterias y sembrarlo en los dos empaques, el nuevo y el antiguo, luego se
realizaron las pruebas respectivas con atrazina en el nuevo sistema.

31

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Ilustracin 9 Medio liquido de inoculacin HM

Obtenidas las muestras en los ependores se centrifuga las muestras para asentar
las borras posibles y trasvasar a los viales previamente lavados y enjuagados con
acetona para evitar cualquier contaminacin. Finalmente se hizo lectura de las
muestras obtenidas durante los proceso en el equipo HPLC.

Densidad ptica
Para determinar si hubo lavado de masa bacteriana en los empaques se realiza
las pruebas de densidad ptica tomando muestras de los efluentes para leerlas en
el espectrofotmetro UV visible de doble haz

32

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Ilustracin 10 Sistema de dos lechos empacados con cascarilla de arroz en paralelo

Ilustracin 11 Equipo HPLC

CAPITULO IV
33

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Para interpretar los datos se realiza una curva de calibracin de un patrn de 30
ppm de atrazina.
t = (min)
6,424
6,436
6,318
6,437

rea
122,08
303,95
600,33
912,42

volumen (l)
2
5
10
15

ppm
6
15
30
45

Grficos 1 CURVA DE CALIBRACIN

A =20.215 ppm -0.4721

34

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
PRIMERA PARTE
Una vez realizado la inoculacin individual a cada lecho empacado se realiza la
prueba de la capacidad de remocin de atrazina en un periodo de 32 h con un flujo
promedio de 17 ml/h (1gota/40seg) obteniendo los siguientes resultados:
En la tabla 6 se muestra el porcentaje de remocin al cabo de 32 horas de
circulacin de una solucin de 13 ppm de atrazina, en lecho empacado con
cscara de arroz (LECA).
Tabla 5

Lecturas de remocin de atrazina en LECA

En la tabla 7 se muestra el porcentaje de remocin al cabo de 24 horas de

circulacin de solucin de 13 ppm de atrazina, en lecho empacado con aserrn
(LEA).
Tabla 6

Lecturas de remocin de atrazina en LEA

Comparando los resultados de los lechos en las tablas se pudo observar que el
empaque con aserrn tiene una mayor remocin que en la cascarilla de arroz, esto
puede ser por las caractersticas del aserrn ya que es un material ms poroso
que la cascarilla de arroz donde los microorganismos forman sus colonias con
mayor efectividad a diferencia de la cascarilla de arroz es un material ms liso y
menos poroso.
Tanto el inoculo como los lechos empacados liberaban un olor fuerte caracterstico
y efluentes turbios, debido a la actividad microbiana por la inoculacin. Estos

35

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
factores son indicadores del buen metabolismo de las bacterias; mientras ms
turbio los efluentes mayor actividad bacteriana, mejor rendimiento de remocin.
SEGUNDA PARTE
En esta etapa se colocaron dos empaques en paralelo: 1) lecho empacado con
aserrn (LEA) y 2) lecho empacado con cascarilla de arroz (LECA). Despus de 48
horas de inyeccin; 48 horas de haber sido inoculadas se inici el flujo de atrazina
a 13 ppm y a las 9 horas de flujo continuo se obtuvo una muestra de cada uno de
los empaques. Para un flujo promedio de 21ml/h (1gota/40seg) para el LEA y 7
ml/h para el LECA se obtuvieron las siguientes lecturas y resultados:
Tabla 7

Lecturas de remocin de atrazina en LECA

Tabla 8

Lecturas de remocin de atrazina en LEA

El lograr el mismo flujo en ambos lechos fue complicado ya que estaban

conectados en paralelo y el material, la densidad tanto como la presin interna de
ambos lechos es diferente, en consecuencia haba una pequea variacin en todo
el sistema.
Comparando las tablas de resultados se puede observar que en un sistema en
paralelo y con flujos controlados diferentes pero mnimos los resultados siguen
siendo ptimos para el lecho con aserrn teniendo un 94% de remocin
36

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
comparando con los 86.74% de cascarilla de arroz, se pudo observar tambin que
para el aserrn es ms difcil controlar el flujo, esto puede deberse a la diferencia
de densidades siendo el del aserrn mayor a la de la cascarilla de arroz.
TERCERA PARTE
Se implement un nuevo empaque de cascarilla de arroz, saturando de atrazina al
nuevo material. Para ello se realiz pruebas de adsorcin durante 8 das haciendo
el seguimiento mostrado en la tabla 10
Tabla 9

Lecturas de adsorcin de atrazina en el nuevo LECA

Los ltimos resultados muestras un ascenso de la concentracin de atrazina

indicando que el nuevo material llego a su mxima absorcin. Este procedimiento
evita la interferencia de las pruebas realizadas respecto a la remocin de atrazina
que realizan las bacterias como fuente de alimentacin.

37

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Grficos 2 Adsorcin de la atrazina ppm vs horas

Luego para ver la influencia del flujo sobre la remocin de atrazina, se trabaj con
los dos lechos a diferentes flujos. Se inici el flujo del medio HM modificado por los
empaques por el periodo de 48 horas y se dej en estado estacionario por otras
48 horas, para luego pasar el flujo de atrazina a 13 ppm por los lechos con flujos
promedio de 4.15 ml/h (1gota/45 seg) para el LECA1 y 3.18 ml/h (1 gota/1 min)
para el LECA2 durante un periodo de 82 horas continuas y extrayendo muestras
cada determinado tiempo.

Tabla 10 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 1

38

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Tabla 11 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 2

Grficos 3 Remocin De Atrazina

Se observ los residuos obtenidos de los lechos, presentan una turbidez y olor
bajo en comparacin a las pruebas anteriores lo cual significa que existe un
posible lavado de las bacterias arrastradas por el flujo, temperaturas y
agotamiento del medio, no ptimos para el crecimiento microbiano, que ocasiona
un menor rendimiento de remocin y actividad microbiana. Es de gran importancia
cuidar estos factores, para ello se aadi masa bacteriana de los mismos residuos
a los empaques y se lo encubo durante 24 horas a la temperatura ptima de 35C
para continuar con el ltimo seguimiento.
39

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
El periodo del seguimiento es de 80 horas, los empaque conectados en paralelo
con un flujo promedio de 3 ml/h para LECA 1 y 4 ml/h para LECA2.
Tabla 12 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 1

Tabla 13 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 2

Grficos 4 REMOCIN DE ATRAZINA EN LECA 1 Y LECA 2

40

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Densidad ptica
Tabla 14 Tabla de lecturas de densidad ptica en residuos de los empaques

Ilustracin 12. Lecturas de densidad optica en LECA 1 y LECA 2

Se observa que en la grfica la curva de densidad ptica tiene variacin

dependiendo del caudal del flujo del efluente observando que a mayor caudal
existe mayor lavado de microorganismos y por tanto mayor densidad ptica.

41

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

CAPTULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. CONCLUSIONES.
Se logr realizar el seguimiento y la optimizacin de la biodegradacin de atrazina
en lechos empacados con flujos continuos obteniendo las siguientes conclusiones

En la primera parte de la metodologa se puede observar que existe una

diferencia comparando resultados de los dos empaques sometidos a flujos
similares, para el Lecho Empacado con Cascarilla de Arroz (LECA) se
obtuvo una remocin de 86.91% y para el Lecho Empacado con Aserrn
(LEA) se obtuvo un rendimiento de 96.02%, siendo este ltimo mejor que el

anterior.
En la segunda parte tambin existi diferencia en los resultados, siendo el
ms ptimo para el lecho empacado con aserrn (LEA) con un 96.02% de
remocin comparado con el Lecho Empacado con Cascarilla de Arroz

(LECA) que logro un 86.91% de remocin.

En la tercera parte se observa que en el LECA2 se da una remocin
promedio de 70 % a un flujo promedio de 3.18 ml/h y para el LECA 1 con
un flujo de 4.15 ml/h se da una remocin promedio de 79 % en un tiempo
periodo de 82 horas a T = 29 C

42

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

La adsorcin obtenida del nuevo lecho empacado de cascarilla de arroz es

del 61 % en un periodo de 192 horas

En las lecturas de las muestras se generar varios picos el cual indica la
presencia de impurezas debido a la desintegracin de los empaques y el

mismo inoculo.
En las curvas de densidad ptica se puede observar que cuando aumenta
el caudal en los flujos por los lechos existe un lavado de microorganismos,
por ello es importante el control de los flujos y que este no debe pasar de 6
ml/h.

5.2. RECOMENDACIONES

Es de mucha importancia brindarles a las bacterias las mejores condiciones

necesarias para su buen desempeo ya que juegan el papel principal, como
la temperatura (35 C) el medio (inoculacin) y las fuentes de alimentacin
como el flujo adecuado para evitar un lavado, esto sucede a un caudal de 6

ml/h afectando en el rendimiento.

Se precisa hacer seguimiento constante del flujo ya que vara en gran
medida, implementando ms elementos que ayuden en la precisin del

flujo.
Se requiere realizar pruebas de adsorcin antes de empezar con las
pruebas de remocin en los lechos empacados.

5.3. BIBLIOGRAFIA
Ranea, F. 2002. http://www.microbiologia.com.ar/fisiologia/crecimiento.html
Biorreactor systems for industrial waste-water treatment (aerobic methods).
Appeared in Chemical weekly- 3rd , August 1999.
Julian A. Varrilla, Favio Diaz Lopez, Tratamiento de lodos activados a escala de
laboratorio Volumen 7, Diciembre 2008.

43

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
Silvia Galindez Najera, Biodegradacin simultanea de los herbicidas atrazina y
simazina por un cultivo bacteriano binario en un reactor de biopelcula, Mxico D.F.
2010.
Edgar Ernesto Esquivel Soto, Lidia Irene Leal Guadarrama. Cromatografa de
fase reversa. Junio 2004, Cuernavaca, Morelos
Macias A. Tofayo A. y col. Atrazine Biodegradation By a bacterial community
immobilized in two types of packets-bed biofilm reactors, 2009.
Galli. Degradacin por medios bacterianos de compuestos qumicos txicos.
Buenos Aires, ARGENTINA, 2002.
Fialo A. Biorremediacin de suelos contaminados con el herbicida atrazina. Area
cientfica pedaggica de ciencias biolgicas. Departamento de qumica. IST. Brasil.
2004

44

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO

Contenido
1.1.

INTRODUCCION................................................................................2

1.2.

ANTECEDENTES...............................................................................4

1.3.

JUSTIFICACIN.................................................................................5

1.4.

OBJETIVOS.......................................................................................6

1.4.1.

OBJETIVO GENERAL...................................................................6

1.4.2.

OBJETIVOS ESPECFICOS..........................................................6

2.1.

PLAGUICIDAS...................................................................................7

2.2.

USOS................................................................................................8

2.3.

CLASIFICACIN................................................................................8

2.4.

EFECTOS AMBIENTALES.................................................................10

2.5.

EFECTOS EN LA SALUD..................................................................10

2.6.

ALTERNATIVA.................................................................................11

2.7.

VENTAJAS Y RIESGOS....................................................................12

2.8.

TRIAZINAS......................................................................................13

2.8.1.
2.9.

Propiedades fsicas....................................................................13

BIODEGRADACION..........................................................................14

2.9.1.

Vas para la degradacin............................................................15

2.9.2.

Biodegradacin de la atrazina....................................................15
45

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
2.10.

LECHOS EMPACADOS EN SISTEMA CONTINUO............................16

2.11.

CARACTERSTICAS DE LA CASCARILLA DE ARROZ.....................17

2.12. CARACTERSTICAS DEL ASERRN...........................................19

2.13.

HPLC CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN.............21

2.14. DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO DE POBLACIONES

BACTERIANAS.........................................................................................22
3.-1. Materiales.........................................................................................24
3.1.3. Reactivos.....................................................................................25
3.1.4. Equipo.........................................................................................25
3.1.5 Metodologa..................................................................................26
5.1. CONCLUSIONES................................................................................39
5.2. RECOMENDACIONES.........................................................................39
5.3.
BIBLIOGRAFIA
40
NDICE DE ILUSTRACIONES
Ilustracin 1 Posibles mecanismos de transporte y transformacin de plaguicidas en el
ambiente............................................................................................................... 3
Ilustracin 2 Esquema de biodegradacin de atrazina.........................................16
Ilustracin 3 Esquema del sistema de cromatografa lquida de alta eficiencia,
HPLC................................................................................................................. 22
Ilustracin 4 Lecho empacado con cascarilla de arroz.........................................27
Ilustracin 5 Sistema de Lecho Empacado de flujo Ascendente con Atrazina,. .28
Ilustracin 6 Esquema del proceso.....................................................................29
Ilustracin 7 Vlvulas de tres flujos....................................................................29
Ilustracin 8 Lechos empacados de cascarilla de cascarilla de arroz y aserrn en
paralelo.............................................................................................................. 30
Ilustracin 9 Medio liquido de inoculacin HM..................................................31
Ilustracin 10 Sistema de dos lechos empacados con cascarilla de arroz en
paralelo.............................................................................................................. 31
Ilustracin 11 Equipo HPLC............................................................................... 32

NDICE DE TABLAS
46

BIODEGRADACION DE ATRAZINA EN LECHO EMPACADO CON FLUJO

CONTINUO
Tabla 1 Eficiencias de remocin de atrazina para diferentes tecnologas
convencionales de tratamiento de agua (Miltner y col., 1987)..................................4
Tabla 2 Propiedades fsico-qumicas y biolgicas de la atrazina...........................13
Tabla 3 Composicin Qumica de la Cascarilla de Arroz y de las Cenizas de la
Cascarilla de Arroz............................................................................................ 18
Tabla 4 Carbono.................................................................................................. 18
Tabla 5 CURVA DE CALIBRACIN.......................................................................33
Tabla 6 Lecturas de remocin de atrazina en LECA..............................................33
Tabla 7 Lecturas de remocin de atrazina en LEA................................................33
Tabla 8 Lecturas de remocin de atrazina en LECA.............................................34
Tabla 9 Lecturas de remocin de atrazina en LCA................................................34
Tabla 10 Lecturas de adsorcin de atrazina en el nuevo LECA.............................35
Tabla 11 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 1......................................36
Tabla 12 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 2......................................36
Tabla 13 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 1.........................................38
Tabla 14 Lecturas de remocin de atrazina en LECA 2......................................38

NDICE DE GRFICOS
Grficos
Grficos
Grficos
Grficos
Grficos

1 CURVA DE CALIBRACIN..................................................................33
2 Adsorcin de la atrazina ppm vs horas..............................................36
3 Adsorcin de atrazina porcentaje de adsorcin vs horas.....................36
4 Remocin De Atrazina......................................................................37
5 REMOCIN DE ATRAZINA EN LECA 1 Y LECA 2.................................39

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