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Prctica No. 1
Tipificacin del sistema ABO
Objetivo: Al trmino de la prctica el alumno determinara los cuatro grupos sanguneos en sangre del
sistema ABO.
Generalidades: En la membrana del glbulo rojo existen complejos qumicos que representan los
llamados grupos o factores sanguneos Fu Landsteiner quin realiz en 1900 el importante
descubrimiento de que los eritrocitos del hombre pertenecen a varios sistemas Antignicos diferentes,
este autor descubri el sistema A B O.
La clasificacin del grupo sanguneo est, determinada por la presencia o ausencia de los
aglutingenos en el eritrocito y las aglutininas en el suero. Para la identificacin del grupo sanguneo ABO
se deben hacer dos investigaciones consecutivas: la primera se llama tipado globular y es la
determinacin de los aglutingenos eritrocticos con antisueros o aglutininas conocidas, la segunda se
llama tipado srico o contratipado y es la identificacin de las aglutininas utilizando glbulos rojos con
antisueros conocidos, los sueros patrones deben ser de alto titulo, estos sueros pueden ser preparados
en el laboratorio o en su defecto, se consiguen en las casas comerciales de productos biolgicos. La
investigacin de los aglutingenos eritrociticos se deben realizarse por el mtodo de tubo de ensayo.
Se utilizan tres reactivos llamados: suero anti A (de sangre b), de color azul y que contiene
aglutininas alfa, suero anti B (de sangre a), de color amarillo y que contiene aglutininas beta, existe
adems otro suero, el anti AB que contiene las dos aglutininas, alfa y beta.
Fundamento: Los antgenos de los hemates son estructuras qumicas que proporcionan propiedades
especficas a su superficie y que solo pueden detectarse con anticuerpos que corresponden a esos
antgenos la mayora de estas reacciones antgeno-anticuerpo implican la aglutinacin o hemlisis de los
hemates.
Material y equipo:
1 gradilla
16 tubos 10 x 75
4 tubos 13 x 100
Centrifuga clnica
Centrfugas Serofuge
Sangre problema
Tipificacin en tubo.
Tcnica:
1.
Se prepara una suspensin de glbulos rojos al 5%, previamente lavado en solucin fisiolgica.
2.
En una gradilla colocar 4 tubos de ensaye de 10 x 75, marcados con las letras A, B, AB y Control.
3.
En cada tubo poner una gota de suspensin de glbulos rojos al 5%.
4.
En el tubo marcado con A poner una gota de suero anti A, en el tubo marcado con B, poner una
gota de suero anti B, en el tubo AB una gota de suero anti AB
5.
Se debe hacer un control agregando a 1 tubo con una gota de albmina bovina al 22 %
6.
Mezclar perfectamente los tubos y dejar reposar por dos minutos.
7.
Mezclar nuevamente y se procede a centrifugar a 2,500 r p m durante un minuto
8.
Se sacan los tubos cuidadosamente de la centrifuga evitando que se mezclen los glbulos rojos
que quedan depositados en el fondo de los tubos y para efectuar la lectura se sacuden
cuidadosamente el botn del fondo, uno por uno buscando si existe aglutinacin macroscpica.
9.
Si la aglutinacin tuvo lugar, puede comprobarse en el seno del liquido claro los hematies que
nadan y se flotan formando pequeos agrupamientos, si el resultado es negativo los glbulos rojos
se distribuyen uniformemente por el lquido.
10. El resultado se reporta de acuerdo a la intensidad del grupo y al color del
liquido sobre nadante, de
una o varias cruces, hasta cuatro.
11. Si existe duda en la lectura se podr observar al microscopio una gota o
incubar los tubos a 37 C. durante 30 minutos.
tambin se pueden
Interpretacin de resultados:
Anti A
Anti-B
Grupo A
Positivo
Negativo
Grupo B
Negativo
Positivo
Grupo AB
Positivo
Positivo
Grupo O
Negativo
Negativo
4 cruces; la aglutinacin se presentar como un botn slido con fondo claro y grumos
gruesos.
3 cruces; la aglutinacin sern varios grumos grandes con el fondo claro o rosado
2 cruces pocos grumos y muy pequeos, una suspensin uniforme
1 cruz pocos grumos, muy pequeos, el fondo muy rosado.
Negativo: Una suspensin uniforme de color rojo.
Comentarios: Los principales errores que pueden existir en la clasificacin sangunea, son los siguientes:
Si se ha colocado poca sangre (La mezcla color rosa muy plido) la escases de glbulos
dificultar la lectura macroscpicamente.
c)