Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del Compromiso Climtico "

UNIVERSIDAD NACIONAL INTERCULTURAL DE LA

AMAZONA

Facultad de Ingeniera y Ciencias Ambientales

TEMA:
INHIBICIN ENZIMTICA Y LA REGULACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

ESTUDIANTE:

SANDI CHAVEEZ
GONZALES BARDALES
DIAZ GARCIA
DADSAFSDGS
Docente:

Blgo. CUCHO FLORES,

Carrera profesional:

Ing. Agroindustrial
Semestre:

2014 I

YARINA COCHA - PUCALLPA PER

06 DE JUNIO DEL 2014

I.

OBJETIVOS
Dar a conocer los mecanismos de inhibicin de las enzimas en las reacciones
en las que son protagonistas, y dar a conocer tambin los tipos de
inhibidores.
Conocer regulacin de la actividad enzimtica as como los tipos de
reguladores que ayudan a regular las reacciones enzimticas.

II.

INHIBICIN ENZIMTICA.

Existen sustancias que pueden impedir que la enzima desarrolle su actividad cataltica,
ralentizando o paralizando la reaccin enzimtica. A estas sustancias se las denomina
inhibidores enzimticos. Teniendo en cuenta que las reacciones qumicas en la
clula estn catalizadas por enzimas, es fcil intuir el papel de muchos inhibidores
enzimticos que actan como frmacos, antibiticos o conservantes; otros pueden ser
txicos, potentes venenos. Por ejemplo, la aspirina (acetilsalicilato) es un analgsico
que inhibe la enzima que cataliza el primer paso en la sntesis de prostaglandinas,
implicadas en la produccin del dolor.
Debemos aclarar que no deben ser incluidos en este grupo de sustancias, aquellos
agentes que producen simplemente una destruccin irreversible de la enzima, como
podran ser todos aquellos que conducen a su desnaturalizacin, como por ejemplo los
cidos fuertes.
La inhibicin enzimtica es de gran importancia fisiolgica, ya que a veces la inhibicin
de una sola enzima que forma parte de una cadena de reacciones metablicas puede
inhibir por completo a todo el proceso metablico involucrado y ejercer en esa forma
un efecto profundo y a veces fatal sobre el organismo.
Se conocen dos tipos principales de inhibicin: la reversible y a la irreversible. La
primera implica una unin no covalente del inhibidor y, por lo tanto, siempre puede
revertirse. En la inhibicin irreversible, el inhibidor se une al enzima de forma
covalente y permanente.
Los inhibidores pueden clasificarse en dos grandes grupos:
1) Reversibles
Ms comn, tiene lugar cuando la enzima vuelve a tener actividad una vez eliminada
la sustancia inhibidora. En este caso, la unin del inhibidor con el enzima se realiza
por enlaces no covalentes, ms fciles de romper. Entre ellos estn la inhibicin
competitiva, la acompetitiva y la no competitiva.
o El inhibidor competitivo
El inhibidor se combina reversiblemente con la enzima en el sitio por el cual se debera
unir el sustrato, formando as un complejo enzima-inhibidor, impidiendo por lo tanto la
formacin del complejo activo enzima-sustrato. De ah el nombre de competitiva
porque efectivamente tanto el inhibidor como el sustrato compiten por el mismo sitio y
tratan de desplazarse mutuamente de la enzima. Las posibles formas de reaccionar
del sustrato y el inhibidor con la enzima pueden presentarse por las ecuaciones:

La eficacia de un inhibidor competitivo depende de su concentracin respecto a la del

sustrato. Si hay un exceso de inhibidor ste bloquear los centros activos de las
molculas de enzima, resultando una inhibicin total. No obstante, el proceso es
reversible si se procura exceso de sustrato, que desplazara totalmente al inhibidor.
En este tipo de inhibidores se incluyen sustancias que estructuralmente son muy
parecidas al sustrato y que por lo pueden ocupar el lugar que ocupara el mismo sobre
la enzima pero que no pueden ser atacas por la misma.
Un ejemplo clsico de este tipo de inhibicin es el de la inhibicin de la succinato
deshidrogenasa, enzima que tiene por sustrato el cido succnico, por otras
sustancias estructuralmente parecidas al cido succnico, como el cido malnico, el
cido oxlico, y el cido glutrico.
La succinato deshidrogenasa cataliza la formacin del fumarato, mediante la
eliminacin de un tomo de hidrgeno de cada tomo de carbono alfa del succinato.

o El inhibidor no competitivo
Se postula que el inhibidor se une con la enzima en otro sitio, que no es aquel por el
cual se une el sustrato. Por esa razn la unin del sustrato con la enzima no es
afectada por la presencia del inhibidor y se puede formar entones un complejo
enzimasustrato- inhibidor. Pero este complejo es catalticamente inactivo y no puede
escindirse en productos de la reaccin y complejo enzima-inhibidor. En este caso, las
posibles formas de reaccionar del sustrato y el inhibidor con la enzima se representan
por las ecuaciones siguientes.

Este tipo de inhibicin se caracteriza entonces porque no puede ser revertido por un
aumento de la concentracin de sustrato. El sustrato no puede desplazar al inhibidor
unido a la enzima. Experimentalmente ambos tipos de inhibicin pueden distinguirse
fundamentalmente mediante la aplicacin del mtodo de Lineweaver y Burk antes
descripto a la reaccin enzimtica con y sin inhibidor.
Este tipo de inhibicin se caracteriza entonces porque no puede ser revertido por un
aumento de la concentracin de sustrato. El sustrato no puede desplazar al inhibidor
unido a la enzima.

*En resumen.
Tipo de
Inhibicin
reversible

Sitio de unin de la
enzima

competitiva

- La unin del substrato y del

inhibidor
son
mutuamente
excluyentes
- A muy altas
concentraciones de
sustrato desaparece la inhibicin
- Por lo general, el
inhibidor
ompetitivo es un
anlogo qumico del
substrato.
- Se une a un lugar
diferente del sitio activo la
enzima
- Se une a la enzima libre y
tambin al complejo
enzima-sustrato

no
competitiva

esquema

o Inhibicin acompetitiva
En este tipo de inhibicin, el I y el S no compiten por el centro activo del E (de ah
que se le llame inhibicin acompetitiva). El inhibidor (I) solo se une al complejo ES
ya formado, produciendo un complejo inactivo ESI estable.

2) Irreversibles.
La enzima no recobra su actividad por remocin del inhibidor libre. Esto es debido a
que el inhibidor irreversible, acta por lo general modificando irreversiblemente o an
destruyendo algunos de los grupos esenciales del centro activo. En el segundo caso,
la enzima recobra su actividad por remocin del inhibidor libre (por ejemplo por simple
dilisis).
Lo cual demuestra que hay un equilibrio entre el inhibidor libre y la enzima. Ejemplos
de uno y otro tipo de inhibidores los encontramos entre los llamados reactivos de
tioles. Estas sustancias tienen la particularidad de reaccionar especficamente con
grupos sulfhidrilos de las proteinas, aportados por los grupos laterales
correspondientes a los residuos de cistena. Existen ciertas enzimas que requieren
para actuar que algunos de esos grupos sulfhidrilos estn libres. Es evidente que en
esos casos los reactivos de tioles, al bloquear los grupos sulfhdrilos esenciales de
estas enzimas, pueden actuar como inhibidores. Entre algunos reactivos de tioles
podemos mencionar al p-cloromercuribenzoato y el alquilante iodoacetato, que
ejemplifican a un inhibidor reversible y aun inhibidor irreversible respectivamente.
Ambos reaccionan con los grupos sulfhidrilos libres (-SH) de las proteinas, pero en
tanto que el primer lo hace formando un complejo reversible (mercaptida), el segundo
forma un carboximetil-derivado de gran estabilidad, incapaz de disociarse.

En el primer caso, una vez establecido el equilibrio, si se elimina el

pcloromercuribenzoato, la reaccin, por el principio de accin en masa, se va a
desplazar hacia la izquierda, disocindose el complejo enzima-inhibidor en enzima
libre e inhibidor. Si la eliminacin es total, toda la enzima recuperar su forma libre
activa.
En cambio, en el segundo caso, una vez formado el carboximetil-derivado, es
imposible disociarlo dada su extraordinaria estabilidad, por ende, la eliminacin del
exceso del inhibidor ser ineficaz para hacer recuperar la actividad original.

Los inhibidores suicidas

Son un caso particular de inhibidores irreversibles, son sustratos modificados
que unidos al centro activo del enzima lo transforma en una especie qumica
muy reactiva que modifica covalentemente al enzima, inactivndola. Tienen, por
tanto, la especificidad del inhibidor competitivo y la potencia de los inhibidores
irreversibles.
Actualmente se utilizan como frmacos dirigidos contra enzimas especficas. No
presentan actividad hasta que se unen al centro activo de ellas, por lo que suelen ser
muy efectivos.
La penicilina modifica covalentemente una transpeptidasa responsable de la sntesis
de la pared celular bacteriana.
El alopurinol es un anlogo estructural de la hipoxantina que inhibe la xantina
oxidasa de
forma irreversible, impidiendo que se forme cido rico, responsable de la gota
La aspirina modifica covalentemente una ciclooxigenasa de la ruta de sntesis de las
prostaglandinas involucradas en fenmenos de inflamacin y dolor

III.

REGULACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

La interconversin de biomolculas dentro de la clula se da a partir de vas o rutas

metablicas, secuencias de reacciones qumicas catalizadas por enzimas que llevan a
la produccin de los diferentes componentes celulares. Estas vas pueden ser
denominadas anablicas cuando estn destinadas a la sntesis de un compuesto a
partir de precursores ms pequeos, o catablicas, cuando proceden en el sentido de
degradar compuestos. Algunas vas pueden ser consideradas como anfiblicas,
cuando pueden proceder en uno u otro sentido, y generalmente comparten algunas
enzimas.
Consideremos el camino anfiblico:

Donde E1, E2 y E3 son las enzimas que catalizan cada una de las reacciones. Como
vemos es imposible controlar el flujo en una sola direccin sin afectar la otra. Por eso,
lo que se observa en general es que las etapas regulatorias de una va metablica
anfiblica estn organizadas de la siguiente manera:

Es decir que siempre habr por lo menos una enzima nicamente perteneciente a una
de las direcciones metablicas. Adems, por lo general estas reacciones son
irreversibles.
Las necesidades fisiolgicas de cada clula hacen que las vas metablicas sean
capaces de cambiar rpidamente de velocidad o sentido. En realidad, no todas las
vas metablicas funcionan a su mxima capacidad al mismo tiempo y ms an,
existen rutas que en ciertas fases del ciclo celular son anuladas por completo.
Enzimas reguladores:
Enzimas alostricos, por unin reversible, no covalente, de compuestos
reguladores (moduladores o efectores alostricos), metabolitos o cofactores.
Enzimas regulados por modificaciones covalentes reversibles.
Enzimas regulados por su sntesis inactiva: Zimgenos

Enzimas alostricas
Las enzimas alostricas son aquellos cuya actividad est regulada por la unin de
distintos efectores a sitios diferentes (centros alostricos) al que se une el
sustrato (centro activo). Son muy importantes por estar situados en puntos clave
(encrucijadas) de las rutas metablicas.
Los efectores o moduladores los pueden activar
(positivos) o inhibir (negativos), induciendo un
cambio conformacional del centro activo, que facilita
o inhibe la actividad enzimtica.
La mayora de los enzimas alostricos son
multmeros. Es decir, estn compuestos por varias
subunidades funcionales o protmeros..
Presentan cooperatividad, el enzima puede estar
en dos conformaciones distintas con diferente
actividad enzimtica (estados conformacionales R y
T). La unin de un efector a una subunidad altera el

equilibrio entre ambas conformaciones y el cambio

conformacional se transmite a una o todas las
subunidades vecinas. Como consecuencia de estos
fenmenos los enzimas alostricos presentan curvas
sigmoidales, al representar V0 frente a [S], por lo
que no se ajustan a la cintica de Michaelis-Menten
(curvas hiperblicas).

REGULACIN POR MODULACIN DE LA ACTIVIDAD

Hay enzimas que pueden adoptar 2 conformaciones interconvertibles llamadas R
(relajada) y T (tensa). R es la forma ms activa porque se une al sustrato con ms
afinidad. Las formas R y T se encuentran en equilibrio R <==> T (Figura inferior):

Ciertas sustancias tienden a estabilizar la forma R. Son los llamados moduladores

positivos. El propio sustrato es a menudo un modulador positivo. Las molculas que
favorecen la forma R pero que actan sobre una regin del enzima distinto del centro
activo son los activadores alostricos (Figura inferior izquierda).
Activador alostrico: favorece la unin del Inhibidor alostrico: impide la unin del
sustrato
sustrato

Las sustancias que favorecen la forma T y disminuyen la actividad enzimtica son

los moduladores negativos. Si estos moduladores actan en lugares distintos del
centro activo del enzima se llaman inhibidores alostricos
EFECTO DE
ENZIMTICA

LA

MODIFICACIN

COVALENTE

SOBRE

LA

ACTIVIDAD

Otros enzimas pasan de una forma menos activa a otra ms activa unindose
covalentemente a un grupo qumico de pequeo tamao como el Pi o el AMP. Tambin
se da el caso inverso, en el que un enzima muy activo se desactiva al liberar algn
grupo qumico. En las enzimas de las vas degradativas del metabolismo, la forma
fosforilada es ms activa que la no fosforilada, mientras que en las vas biosintticas
ocurre lo contrario. En las figuras inferiores se ilustra la activacin de una protena por
fosforilacin.
Elementos
reaccin

de

la El enzima no fosforilado es
El enzima fosforilado es activo
inactivo

Tambin se da el caso inverso, en el que un enzima muy activo se desactiva al liberar

algn grupo qumico (defosforilacin, desadenilacin, etc). En general, las formas
fosforilada de las enzimas de las rutas catablicas (degradativas) del metabolismo,
son ms activas que las defosforiladas, mientras que en las rutas anablicas
(biosintesis) ocurre lo contrario.

Activacin proteoltica: Zimgenos

Algunos enzimas se sintetizan en forma inactiva, proenzimas o zimgenos, para evitar

su accin en el propio tejido que lo sintestiza. Posteriormente, estos se activan en el
lugar donde tienen que realizar su funcin cataltica. Es caracterstico de los enzimas
digestivos.

La enteropeptidasa inicia la cascada de activacin de los zimgenos pancreticos, en

los primeros tramos del intestino delgado, activando al tripsingeno en tripsina, que
despus ser la encargada de activar al resto de zimgenos (proelastasa,
quimotripsingeno, procarboxipeptidasa, prolipasa, al propio tripsingeno, etc), en sus
correspondientes formas activas (elastasa, quimotripsina, carboxipeptidasa, lipasas,
tripsina, etc).

IV.

CONCLUSION
Se conoci los mecanismos de inhibicin de las enzimas en las reacciones en
las que son protagonistas, y dar a conocer tambin los tipos de inhibidores.
Se conoci la regulacin de la actividad enzimtica as como los tipos de
reguladores que ayudan a regular las reacciones enzimticas.

V.

BIBLIOGRAFIA

Murray Robert k. Bioqumica Harper. Bioqumica Ilustrada 28. ed. Editorial:

McGraw-Hill; 2010

Nelson, D.L. y Cox, M.M. (2005). Lehninger Principios de Bioqumica. 4

edicin. Ed. Omega.

Mathews, C.K., Van Holde, K.E. y Ahern KG (2002). Bioqumica. 3 edicin. Ed.
Addison Wesley/Pearson Education. Madrid.

Importancia de la Km
La constante de Michaelis-Menten (Km) es un
parmetro cintico importante por mltiples
razones:
Km es la concentracin de sustrato para la
que la velocidad de reaccin es la mitad
de la velocidad mxima. En efecto, si Km = [S], la
ecuacin de Michaelis-Menten se
reduce a: v = Vmx /2.
El valor de Km da idea de la afinidad del
enzima por el sustrato: A menor Km, mayor
afinidad del enzima por el sustrato, y a mayor
Km, menor afinidad. Este hecho tiene
fcil explicacin si tenemos en cuenta que Km se
define como (k2+k3/k1), donde las
reacciones 2 y 3 destruyen el complejo ES, mientras
que la reaccin 1 lo forma. As, si Km
es grande, el complejo ES es inestable pues
predomina la tendencia a destruirlo (poca
afinidad hacia el sustrato), y si Km es pequea, el
complejo ES ser estable, ya que
predomina la tendencia a formarlo (gran afinidad
hacia el sustrato).
La Km del sustrato natural es menor que la de
los
sustratos anlogos. Si dos sustratos del mismo
enzima tienen distinta Km, el que presente mayor
Km
tiene menor afinidad por el enzima, y la reaccin
transcurre siempre a menor velocidad que con el
sustrato de menor Km, salvo a concentraciones
saturantes de sustrato, donde la v = Vmx.
Los valores de Km de muchos enzimas son
prximos a los de la concentracin fisiolgica
de

sus sustratos, de forma que pequeas variaciones

en
la [S] pueden suponer grandes cambios en la
velocidad
de toda una ruta metablica.