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BIOQUMICA II
2010/2011
ndice
Digesto e absoro de protenas3
Digesto e absoro de lipdeos...........7
Sntese de cidos gordos e triacilglicerdeos.11
Oxidao de cidos gordos.....21
Metabolismo dos corpos cetnicos...........29
Lipoprotenas plasmticas......33
Liplise.......41
Metabolismo dos triacilglicerdeos........42
Metabolismo do etanol....45
Colesterol e sais biliares.......47
Balano azotado...........54
Biossntese de aminocidos.....55
Catabolismo dos aminocidos...63
Ciclo da ureia........75
Metabolismo das purinas e pirimidinas...80
Metabolismo do heme.........90
Esto includos nesta sebenta resumos relativos s aulas de metabolismo dos lipdeos e
aminocidos de Bioqumica II da Faculdade de Medicina da Universidade do Porto. Desde j
agradeo a quem me ajudou na elaborao da sebenta, atravs da correco de eventuais erros
inicialmente presentes, ou atravs de ideias e sugestes.
Bom trabalho e votos de sucesso nos exames,
Bernardo M. Sousa Pinto
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Digesto de protenas
A maior parte das protenas por ns ingerida (na carne, peixe, lacticnios, ovos e vegetais) j apresenta
poucas ligaes acessveis s enzimas que catalisam a hidrlise das ligaes peptdicas, visto que o
aquecimento dos alimentos (aquando da cozedura) e a aco do cido gstrico, na cavidade estomacal,
desnatura uma grande quantidade de protenas.
As proteases (enzimas digestivas proteolticas) so segregadas como zimognios inactivos (um
zimognio, tambm designado por proenzima, um precursor enzimtico, que se encontra sob a forma
inactiva e que, para se tornar numa enzima activa, requer uma mudana bioqumica), onde o centro
activo da enzima se encontra camuflado por uma pequena cadeia peptdica. Esta cadeia removida
pela hidrlise de uma ligao peptdica
especfica, levando formao de uma enzima
activa.
Existem duas grandes classes de proteases, que
diferem no tipo de ligaes peptdicas em que
actuam. As endopeptidases hidrolisam ligaes
entre aminocidos especficos, sendo as
primeiras enzimas a actuar. Nesta classe incluise a pepsina, presente nos sucos gstricos e
que catalisa a hidrlise de ligaes peptdicas
adjacentes a metionina, aminocidos de cadeia
ramificada e aminocidos de cadeia aromtica.
A pepsina, cuja sntese estimulada pela
gastrina, segregada sob a forma de
Absoro de peptdeos
O produto final da aco das endopeptidases e exopeptidases um conjunto de aminocidos livres,
dipeptdeos, tripeptdeos e oliogopeptdeos, sendo todos estes produtos absorvidos. Os aminocidos
livres so, na sua maioria, absorvidos ao nvel do plo apical dos entercitos (cujas microvilosidades
presentes na membrana so designadas por bordadura em escova), graas a um transportador activo
dependente de sdio (os aminocidos bsicos so excepo, sendo o seu transporte independente do
de sdio), sendo o transporte assegurado por uma grande diversidade de transportadores (classificados
como simporters), de acordo com a cadeia lateral do aminocido em causa (estes tm em conta as suas
dimenses e o facto de serem cidos, neutros ou bsicos). O transporte aqui diz-se secundrio, porque
est dependente de um gradiente de sdio criado pela bomba de sdio e potssio (transporte primrio).
De referir que os diversos aminocidos competem uns com os outros pela absoro e entrada nos
tecidos. A sada da maior parte dos aminocidos do plo basal dos entercitos feita por uniporters e
no depende do transporte de outros ies inorgnicos.
Relativamente aos dipeptdeos e tripeptdeos, estes entram pelo plo apical dos entercitos, atravs do
transportador PEPT1, um simporter inespecfico, que acopla passagem de di- e tripeptdeos, a
passagem de protes para o interior dos entercitos. De referir que os protes tm tendncia para
entrar para o meio intracelular, devido presena de um trocador, que permite a troca de um proto
que sai dos entercitos, por um io sdio, que entra. No interior dos entercitos, os dipeptdeos e
tripeptdeos so hidrolisados a aminocidos livres, por peptidases, como j foi referido, entrando depois
nas clulas hepticas atravs da veia porta.
Os peptdeos de maiores dimenses podem ser absorvidos intactos, por pinocitose, quer entrando para
as clulas do epitlio intestinal (absoro transcelular), quer passando por entre estas (absoro
paracelular).
Triacilglicerdeos
Os triacilglicerdeos (tambm designados, de forma menos correcta, por triglicerdeos) so molculas
compostas por um glicerol e trs cidos gordos (sendo os cidos gordos mais comuns, nos
triacilglicerdeos ingeridos, o cido oleico, o cido palmtico e o cido linoleico), ligados por ligaes
ster, sendo lipdeos particularmente importantes. Os monoacilglicerdeos e os diacilglicerdeos so
igualmente passveis de ser encontrados nos tecidos, contribuindo para a sntese de triacilglicerdeos.
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1. Metabolismo lipdico
Bernardo Manuel de Sousa Pinto Faculdade de Medicina da Universidade do Porto
Sebenta de Bioqumica II
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Na glndula mamria, existe uma tioesterase especfica para os resduos com oito, dez ou doze tomos
de carbono, que so encontrados nos lpidos do leite.
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Regulao da lipognese
Dado o excesso de glcidos ser convertido em gordura, que ser fonte de reserva para perodos de
deficincia calrica, ou fonte energtica para os perodos entre as refeies, no admira que o estado
nutricional do indivduo seja o principal factor regulador dos nveis de lipognese. Estes so elevados
num indivduo que ingira uma proporo elevada de glicdeos. Uma maior ingesto de sacarose ou
frutose contribui tambm para um aumento da lipognese, dado a frutose ser mais rapidamente
metabolizada que a glicose. Por outro lado, aquando de condies de restrio calrica, de uma
alimentao com excesso de lpidos, ou de resistncia/deficincia de insulina (como na diabetes
mellitus), a lipognese inibida.
A insulina estimula a lipognese, por vrios mecanismos, nomeadamente pelo aumento da actividade
da carboxlase da acetil-CoA. Por outro lado, esta hormona, ao contribuir para a absoro de glicose
para dentro das clulas, por exemplo do tecido adiposo, leva a que haja uma maior quantidade, quer de
piruvato (o que se traduz numa maior quantidade de acetil-CoA, que participa na sntese de cidos
gordos), quer de glicerol-3-fosfato, essencial para a sntese de triacilglicerol. No tecido adiposo, a
insulina tem ainda a capacidade de converter a forma inactiva da desidrognase do piruvato (forma
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Sntese de triacilglicerdeos
A maior parte dos lipdeos no corpo humano encontram-se sob a forma de acilglicerdeos, sendo que os
triacilglicerdeos so os principais lipdeos presentes na alimentao e no tecido adiposo (estima-se que
cerca de 95% dos lipdeos de um indivduo jovem normal se encontrem neste tipo de tecido).
Os triacilglicerdeos so produzidos a partir do glicerol 3-fosfato, que pode ser sintetizado a partir do
glicerol, ou a partir da dihidroxiacetona fosfato. O glicerol convertido em sn-glicerol 3-fosfato pela
cnase do glicerol, com consumo de ATP, no fgado, rim e glndula mamria activa. No msculo e no
tecido adiposo, a actividade desta enzima baixa, ou mesmo nula e, como tal, o glicerol 3-fosfato
produzido a partir da dihidroxiacetona fosfato, a partir da desidrognase do glicerol 3-fosfato.
Ao glicerol-3-fosfato, juntam-se duas molculas de acil-CoA (resultantes da activao de cidos gordos),
formando fosfatidato (1,2-diacilglicerol fosfato), o que implica duas etapas uma primeira catalisada
pela acetiltransferase do glicerol 3-fosfato (e que leva formao de lisofosfatidato 1-acilglicerol-3fosfato) e uma segunda catalisada pela acetiltransferase do 1-acilglicerol-3-fosfato.
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Oxidao em
No retculo endoplasmtico do fgado e rim, por seu turno, ocorre a oxidao em . Este um processo
que apresenta pouca relevncia para a oxidao de cidos gordos de cadeia mdia, adquirindo apenas
particular importncia, aquando de deficincias na -oxidao.
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Medicamentos como o gliburido e o tolbutamido, utilizados no tratamento de diabetes mellitus tipo II,
reduzem a oxidao de cidos gordos e, consequncia, a hipoglicemia, ao inibir a actividade da
palmitiltransferase-I da carnitina.
Defeitos hereditrios nas enzimas da -oxidao e de cetognese levam igualmente a hipoglicemia,
coma e acumulao de cidos gordos no fgado. Esto descritas deficincias de desidrognase de 3hidroxiacil-CoA, tiolase de 3-cetoacil-CoA e da lase do 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA. De referir que,
deficincias nas duas ltimas enzimas afectam igualmente a degradao de leucina, um aminocido
cetognico.
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Causa
Ausncia da desidrognase
da acil-CoA para cadeias
mdias, na mitocndria
Doena de Refsum
Desordem no metabolismo
do cido fitnico
Sndroma de
Zellweger
Ausncia hereditria de
peroxissomas em todos os
tecidos
Consequncia
Excreo de cidos -dicarboxlicos com seis e
dez carbonos. Sintomas de hipoglicemia
Doena neurolgica caracterizada pela
acumulao de cido fitnico Efeitos
patolgicos nas funes membranares e na
expresso gentica
Acumulao de cidos gordos com 26 e 38
carbonos e perda de funes peroxissomais.
Normalmente, ocorre a morte do indivduo,
no primeiro ano de vida.
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Lipoprotenas plasmticas
Os lipdeos absorvidos a partir da dieta e os lipdeos sintetizados no fgado e no tecido adiposo devem
ser transportados para os vrios rgos para sua utilizao e armazenamento. Uma vez que os lipdeos
so insolveis em gua, o seu transporte envolve a associao de lipdeos no-polares (tais como os
triacilgliceris e os steres de colesteril), com molculas anfipticas (tais como os fosfolipdeos e o
colesterol) e protenas, de modo a formar, assim, lipoprotenas solveis em gua.
Lipoprotenas
As lipoprotenas so constitudas por um ncleo
lipdico no-polar, constitudo sobretudo por
triacilglicerdeos e steres de colesterol, e por
uma camada simples de fosfolipdeos anfipticos
e molculas de colesterol, orientados de modo a
que os seus grupos polares (grupos fosfato e
hidorxilo, respectivamente) estejam voltados
para o meio exterior que de natureza aquosa. A
fraco proteica de uma lipoprotena designada
por apolipoprotena, ou por apoprotena, sendo
de cerca de 30% a 60% nas HDL e de cerca de 1-2% nos quilomicra. Algumas protenas so integrais, no
podendo ser removidas das lipoprotenas, enquanto outras so perifricas, sendo livremente
transferidas para outras lipoprotenas.
O contedo das lipoprotenas prende-se sobretudo com, quatro classes de lipdeos, nomeadamente
triacilglicerdeos (c. 16%), fosfolipdeos (c. 30%), colesterol (c. 14%) e steres de colesteril (c. 36%).
ainda transportada uma pequena percentagem de cidos gordos livres (c. 4%) cidos gordos de cadeia
longa que no se apresentam esterificados e que constituem o grupo de lipdeos plasmticos mais
activo, sob o ponto de vista metablico.
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Quilomicra
Os quilomicra so formados ao nvel dos entercitos, transportando triacilglicerdeos e acil-colesterol
(formado por aco da enzima acil-colesterol-acil-transferase, que transfere um grupo acilo do acil-CoA
para o colesterol). O acil-colesterol e os triacilglicerdeos so combinados com a apo B-48 e com a apo A,
atravs da protena microssomtica de transferncia, presente ao nvel do retculo endoplasmtico,
sendo os quilomicra nascentes expulsos dos entercitos por exocitose. Estes so depois transportados
pelo sistema linftico, desde o intestino, entrando na corrente sangunea pelo canal torcico.
Pequenas quantidades de VLDL encontram-se tambm no quilo, mas a maioria do VLDL plasmtico de
origem heptica. Os quilomicra e as VLDL nascentes (ou seja, na sua fase inicial, ps-secreo) contm
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Lipoprotenas e aterosclerose
A ateroscelerose uma
patologia que se caracteriza
pela deposio de colesterol
e respectivos steres nos
macrfagos na tnica ntima
das artrias, o que pode
levar a um menor dimetro
do lmen arterial (isquemia),
algo que pode levar a
anginas de peito.
J aqui foi referido, uma
maior
quantidade
de
colesterol associado a LDL
est associada ao desenvolvimento de aterosclerose, pois maiores quantidades de colesterol nas
clulas, impedem que o colesterol ligado a LDL seja captado por estas, o que propicia a que uma maior
quantidade de LDL sofra oxidao, sendo subsequentemente absorvido por macrfagos e clulas
endoteliais, cujos receptores de LDL no so regulados pelas suas concentraes de colesterol. Estes
macrfagos com grandes quantidades de colesterol no citosol so denominados de clulas espumosas
e formam aglomerados nas paredes das artrias. De referir que, aquando de dificuldades de captao
de IDL e quilomicra remanescentes, por parte do fgado, o risco de aterosclerose aumenta tambm, pois
os macrfagos presentes na tnica ntima das artrias tm tambm capacidade de captar estas
lipoprotenas em grande quantidade.
O processo patolgico agravado por uma consequente proliferao de fibras musculares lisas,
inflamao e deposio de colagnio, algo que leva formao de placas de ateroma, cuja ruptura pode
levar obstruo aguda da artria.
Uma maior concentrao plasmtica de colesterol ligado a HDL, por seu turno, apresenta um efeito
inverso, provavelmente, pelo facto de
existir um maior transporte reverso
de colesterol (ou seja, removida
uma maior quantidade de colesterol
de
tecidos
extra-hepticos,
nomeadamente dos macrfagos). Por
outro lado, pensa-se que as HDL
podem ter um efeito protector, no
que concerne aterosclerose, ao
inibir a migrao de moncitos
(clulas precursoras dos macrfagos)
para
os
locais
de
leses
aterosclerticas e ao inibir a oxidao
das LDL.
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Liplise
Os triacilglicerdeos so inicialmente hidrolisados por trs lipases, num processo designado por liplise,
que ocorre maioritariamente no tecido adiposo, levando libertao de cidos gordos livres para o
plasma, onde se ligam com a albumina srica, sendo estes depois captados pela maioria dos tecidos. J
o glicerol libertado pode ser convertido a glicerol-3-fosfato, caso os tecidos apresentem a cnase do
glicerol, algo que acontece no fgado, rim, intestino, tecido adiposo castanho e glndula mamria
lactante.
As trs lipases intervenientes so a lipase de triacilglicerdeos, a lipase hormono-sensvel e a lpase dos
monoacilglicerdeos, sendo a mais relevante a lipase hormono-sensvel. Esta activada por fosforilao
e inactivada por desfosforilao, dependendo essa activao de hormonas a insulina tem um efeito
inibidor, enquanto a adrenalina e a noradrenalina (conhecidas colectivamente como catecolaminas)
tm um efeito activador.
A aco da adrenalina e da noradrenalina ocorre por ligao destas aos receptores adrengicos -1, que
por sua vez, levam a uma maior actividade da cclase do adenilato, o que por sua vez se repercute numa
maior formao de cAMP. O cAMP activa a PKA, que por seu turno fosforila a perilipina, o que permite a
aco da lpase hormono-sensvel (a perilipina desfosforilada impede o acesso desta lipase aos
triacilgliecrdeos). Por outro lado, as catecolaminas, contribuem de forma indirecta para a estimulao
da liplise, ao inibir a libertao de insulina.
J o papel da insulina inibitrio, o que significa que num estado ps-prandial a liplise vai se encontrar
inibida, devido aos elevados nveis de insulina e que num estado de jejum, a liplise ser estimulada. A
insulina consegue inibir a liplise ao activar uma enzima que hidrolisa o cAMP a fosfodiesterase. Isso
impede a fosforilao da perilipina, algo que inibe a aco da lipase hormono-sensvel.
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Metabolismo do etanol
O etanol inicialmente oxidado, sendo convertido em etanal, tambm designado por acetaldedo. Esta
oxidao pode ocorrer ao nvel do citosol, do retculo endoplasmtico ou dos peroxissomas, mas o
sistema enzmico citoplasmtico que tem mais relevncia. De referir que o processo de metabolizao
do etanol ocorre sobretudo ao nvel do fgado, embora tambm possa ser levado a cabo no estmago.
No citosol, o etanol convertido em acetaldedo por aco da desidrognase do etanol, com
concomitante reduo do NAD+ em NADH. De referir que a regenerao do NAD+ feita conta das
shuttles do malato ou do glicerol-3-fosfato, com concomitante reduo do O2.
O acetaldedo produzido entra para as mitocndrias, onde oxidado a acetato, por aco da
desidrognase dos aldedos, mais uma vez com concomitante reduo do NAD+. O acetato pode seguir
vrias vias pode intervir na formao de acetil-CoA, por aco da sinttase da acetil-CoA, pode ser
oxidado no ciclo de Krebs, ou mesmo ser um substrato da lipognese. De referir que a maior parte do
acetato formado exportado para o plasma sanguneo, sendo depois convertido a acetil-CoA.
No retculo endoplasmtico, este processo similar, contudo, a enzima que converte o etanol em
acetaldedo o sistema microssmico de oxidao do etanol (MEOS), sendo o NADP+ o agente redutor.
Como forma de haver regenerao de NADP+ ocorre reduo de O2, por aco de um citocromo P450
o CYP2E1. A sntese deste citocromo induzida pela ingesto crnica de etanol e da que a oxidao de
etanol ao nvel do retculo adquira relevncia, aquando de situaes de alcoolismo crnico. Esta via
tambm se encontra mais activa, quando a concentrao plasmtica de etanol excede os 0,5 g/L. J nos
peroxissomas, o etanol metabolizado pela catalase, ocorrendo a sua converso a acetaldedo.
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Sntese de colesterol
A sntese de colesterol ocorre ao nvel do citosol e do retculo endoplasmtico, sendo que,
teoricamente, todos os tecidos que contm clulas nucleadas so capazes de levar a cabo este processo.
Contudo, a sntese de colesterol no fgado e no intestino representa cerca de 10% da sntese total de
nos seres humanos.
A biossntese de colesterol pode ser dividida em cinco etapas. A primeira envolve a sntese de
mevalonato a partir de acetil-CoA. A segunda etapa envolve a formao de unidades isoprenides, a
partir do mevalonato, com concomitante perda de dixido de carbono. O passo seguinte prende-se com
a condensao de seis unidades isoprenides para formar esqualeno. Este, por sua vez, origina
lanosterol, a partir do qual formado o colesterol.
Etapa 1 (sntese de mevalonato): O mevalonato formado a partir do 3-hidroxi-2-metilglutaril-CoA
(HMG-CoA), que por sua vez sintetizado atravs das reaces, que ocorrem na mitocndria para a
sntese de corpos cetnicos. Contudo, uma vez que a sntese de colesterol extra-mitocondrial, as duas
vias so distintas. Inicialmente, duas molculas de acetil-CoA condensam, formando acetoacetil-CoA,
numa reaco catalisada pela tiolase citoslica. O acetoacetil-CoA condensa com mais uma molcula de
acetil-CoA, numa reaco catalisada pela sntase do HMG-CoA, formando HMG-CoA, que reduzido a
mevalonato, pela redtase do HMG-CoA (uma enzima do retculo endoplasmtico), numa reaco que
ocorre com concomitante oxidao do NADPH. De referir que esta a principal etapa reguladora na via
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Transporte de colesterol
Ao nvel dos entercitos, ocorre a sntese de steres de colesterol a partir de colesterol, por aco da
transferase de acilo da acil-CoA e colesterol (ACAT). O colesterol transportado para os entercitos por
via do transportador Niemann-Pick C1-like 1, sendo que posteriormente, o colesterol esterificado e o
colesterol que no sofreu esterificao so ento incorporados em quilomicra, que so lanados na
corrente linftica, entrando para a corrente sangunea por via do canal torcico. Atravs dos quilomicra,
o colesterol entra para os tecidos extra-hepticos, sendo que a formao de quilomicra remanescentes
propicia a entrada de colesterol para o fgado, por via da ligao da apo-E aos receptores de LDL e LRP.
O fgado capta tambm colesterol dos tecidos extra-hepticos, a partir das HDL, atravs do transporte
reverso de colesterol. As ATP-binding cassete e o Scavenger Receptor-B1 contribuem para a captao de
colesterol por parte das HDL (onde ser esterificado), que sob a forma de HDL 2 vertem o seu contedo
para o fgado, aps interaco com o Scavenger Receptor-B1.
O fgado excreta colesterol para a blis ou para as VLDL (que depois originam LDL). A presena de
grandes quantidades colesterol (e steres de colesteril) associado s LDL no benfica, na medida em
que est associada a leses aterosclerticas. O colesterol e steres associados presentes ao nvel das
VLDL so ento captados pelos vrios tecidos extra-hepticos, sendo que a formao de e IDL e LDL
permite, que no fgado, possa tambm ocorrer a captao destas molculas.
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Para que ocorra sntese de cidos biliares primrios, ocorre inicialmente hidroxilao do colesterol em
7, sendo esta a primeira e principal etapa reguladora na biossntese dos cidos biliares. Esta reaco
catalisada pela 7-hidroxilase, uma enzima microssomal, que, sendo uma monoxigenase, requer a
presena de oxignio, NADPH e citocromo P450. As etapas de hidroxilao subsequentes so tambm
catalisadas por monoxigenases, e aps ocorrncia destas so sintetizados colil-CoA, ou
quenodesoxicolil-CoA, sendo que o colil-CoA (derivado do cido clico) apresenta um grupo hidroxilo
extra na posio 12, que o quenodesoxicolil-CoA (derivado do cido quenodesoxiclico) no apresenta.
De referir que, a partir desta srie de reaces, ocorre oxidao do NADPH e libertao de propionilCoA. Nas mitocndrias, existe ainda uma via alternativa que envolve a 27-hidroxilao do colesterol, por
aco da 27-hidroxilase do esterol.
Os cidos biliares primrios entram na blis, como conjugados de glicina, ou taurina (a taurina um
cido sulfnico orgnico derivado da cistena), sendo que essa conjugao tem lugar nos peroxissomas e
catalisada por uma sinttase. No caso da colil-CoA, os cidos formados so o cido tauroclico e
glicoclico (se o cido conjugado for a taurina ou a glicina, respectivamente), enquanto no caso da
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Ciclo entero-heptico
Apesar de os produtos da digesto de lipdeos, incluindo o colesterol, serem absorvidos nos primeiros
100 cm do intestino delgado, os cidos biliares primrios e secundrios, entretanto libertados, so
reabsorvidos, quase exclusivamente no lio (onde apenas so absorvidos sais biliares e vitamina B 12),
sendo que entre 98 e 99% regressam ao fgado atravs do sistema porta, sendo este processo designado
por ciclo enteroheptico (envolvendo transportadores activos em ambos os plos dos entercitos e
hepatcitos). Apenas uma pequena fraco de sais biliares escapa absoro e , dessa forma,
eliminada nas fezes. O cido litocilico, por exemplo, devido sua insolubilidade, no
significativamente reabsorvido (a insolubulidade deste cido leva a que possa precipitar e formar
clculos no intestino). Apesar disso, essa expulso representar uma via importante para a eliminao de
colesterol cada dia entre 3 a 5 gramas de cidos biliares passa pelo intestino, entre seis a dez vezes,
sendo que a quantidade de cidos biliares que eliminada nas fezes depois reposta, sendo sintetizada
a partir do colesterol, de forma a que a quantidade de cidos biliares possa ser mantida constante.
A blis no unicamente constituda por cidos biliares, apresentando tambm fosfolipdeos e
colesterol.
O
colesterol
reabsorvida,
enquanto uma pequena fraco
perdida nas fezes. A presena de
fosfolipdeos na blis, ajuda a
solubilizar
o
colesterol
(juntamente com os cidos
biliares)
e,
dessa
forma,
alteraes nas propores de
cada componente da blis pode
levar precipitao de colesterol
e formao de clculos na
vescula biliar. Na verdade, foi ao
nvel destes clculos que o
colesterol foi pela primeira vez
identificado pelo qumico francs
Franois Poulletier de la Salle. A
presena de clculos na vescula
biliar quase uma condio
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2. Metabolismo aminoacdico
Bernardo Manuel de Sousa Pinto Faculdade de Medicina da Universidade do Porto
Sebenta de Bioqumica II
Balano azotado
A quantidade de protenas sintetizadas diariamente num indivduo adulto saudvel em equilbrio
azotado igual quela que sofre hidrlise, sendo a velocidade de sntese tambm igual de hidrlise
(na verdade, ao longo do dia, existem pequenas variaes, mas estas acabam por no ser registadas,
quando considerado o dia como um todo). Na verdade, considerando um indivduo adulto com 70 kg,
assume-se que a sua massa proteica ronde os 10-12kg e que todos os dias, cerca de 300 g de protenas
sofra renovao (o que corresponde a uma taxa de renovao de cerca de 3%). O turn-over proteico
altamente varivel, dependendo do tipo de protena em questo. Protenas estruturais e de importncia
maior, tais como o colagnio, tm um perodo de semi-vida maior (ou, seja, uma taxa de renovao
menor), enquanto as protenas dos msculos esquelticos renovam-se a uma taxa de 2% por dia, uma
taxa mesmo assim menor que a das protenas viscerais (entre 7-15%) e das enzimas reguladas por
transcrio e traduo (estas ltimas renovam-se num perodo de horas).
A hidrlise de protenas endgenas levada a cabo por proteases, que geram aminocidos livres. Estes
so, na sua maioria, utilizados para a sntese de novas protenas, sendo que uma pequena maioria no
reutilizada, dando-se aquilo que designado por perda obrigatria de aminocidos e que num
indivduo adulto saudvel ronda os 25 g/dia. Esta perda , em parte, devido presena de enzimas que
utilizam aminocidos como substratos, catalisando reaces irreversveis o azoto gerado
maioritariamente convertido em ureia, pois caso contrrio txico, enquanto o esqueleto carbonado
convertido em dixido de carbono, contribuindo para a sntese de ATP.
O azoto proteico no excretado unicamente sob a forma de ureia encontramos aminocidos nas
fezes (por exemplo, devido ao turn-over da mucosa da parede intestinal) e na urina (na urina esto
igualmente presentes, o io amnio, catabolitos de hormonas e neurotransmissores, tudo isto
resultante do metabolismo aminoacdico).
Como uma parte dos aminocidos e protenas ingeridos so perdidos, para repor os 25 g de perda
obrigatria de protenas, deve-se ingerir um mnimo de 50 g de protenas por dia. Dessa forma, e uma
vez que a quantidade aminocidos livres aproximadamente estacionria, quando o indivduo no
ingere essa quantidade mnima, no repondo a quantidade de azoto perdido, este encontra-se em
balano azotado negativo. Por seu turno, quando o indivduo ingere uma quantidade de azoto superior
quela que excreta, diz-se que se encontra em balano azotado positivo, ocorrendo um aumento da
massa proteica endgena do indivduo. Por fim, indivduos, cuja massa proteica no sofre variaes,
sendo a quantidade de azoto ingerida iguala excretada, encontram-se em balano azotado nulo.
Estes diferentes balanos tm diferentes repercusses ao nvel do metabolismo dos indivduos. Um
balano azotado negativo tem como consequncia a perda de massa proteica e caracterstico de
indivduos mais velhos (a partir dos 40-50 anos), podendo ocorrer tambm por diminuio da actividade
fsica (um aumento da actividade fsica, associado ao aumento de massa muscular , por oposio,
acompanhado por um aumento da massa proteica), em situaes de emagrecimento e/ou m nutrio,
ou por situaes patolgicas.
Apesar disso, o balano azotado positivo no est associado a um aumento de massa proteica. Em
situaes do gnero, os aminocidos excedentrios so catabolisados e regista-se um aumento da
sntese de ureia. Contudo, um aumento de ingesto de protenas na dieta de um organismo influencia
na sntese proteica endgena (sendo um factor limitante para esta) e tem relao com a formao de
tecidos de suporte (nomeadamente vasos sanguneos e adipcitos) de um indivduo que est a
engordar, de tal modo que os indivduos nessa situao se encontram em balano azotado positivo. O
balano azotado positivo est igualmente associado aos indivduos em crescimento, que esto a
aumentar a sua massa muscular, ou mesmo a recuperar de um perodo de balano azotado negativo.
54
Biossntese de aminocidos
Os aminocidos so frequentemente
Aminocidos
Aminocidos nutricionalmente
classificados como nutricionalmente nutricionalmente essenciais
no essenciais
essenciais e nutricionalmente no- Arginina
Alanina
essenciais, apesar de todos os 21 Fenilalanina
Aspargina
aminocidos
standard
serem Histidina
Aspartato
Cistena (semi-essencial)
essenciais sade humana. Aqueles Isoleucina
Leucina
Glutamato
que tm de estar presentes
Lisina
Glutamina
obrigatoriamente na dieta humana,
Metionina
Glicina
pois no ocorre a sua sntese
Treonina
Hidroxilisina
endgena, so designados por
Triptofano
Hidroxiprolina
nutricionalmente
essenciais, Valina
Prolina
enquanto
os
restantes
so
Serina
genericamente entendidos como
Tirosina (semi-essencial)
nutricionalmente no essenciais,
uma vez que ocorre a sua sntese no organismo, no sendo necessria a sua presena na dieta, caso
outros aminocidos se encontrem em quantidades suficientes para assegurar o seu dfice. Pode ser
ainda definido um grupo de aminocidos nutricionalmente semi-essenciais, cuja sntese endgena
ocorre no organismo, mas esta a partir de aminocidos essenciais.
Em termos evolutivos, a existncia de aminocidos essenciais, que um organismo no consiga sintetizar,
mas que tenha de forosamente obter da dieta parece trazer vantagens. O ATP que seria gasto para que
ocorresse sntese daqueles aminocidos poupado e, de facto, o nmero de enzimas que as clulas
procariticas necessitam para sintetizar aminocidos nutricionalmente essenciais maior que o nmero
de enzimas utilizado para sintetizar aminocidos no-essenciais. Isto sugere uma vantagem evolutiva na
sntese dos aminocidos fceis e perda de capacidade de manufacturar os difceis.
Glutamato
Para que ocorra a sntese de glutamato, ocorre uma amidao reductiva do
-cetoglutarato, numa reaco catalisada pela desidrognase do
glutamato, com concomitante oxidao do NADPH, constituindo esta a
primeira etapa na biossntese dos aminocidos da famlia do glutamato.
Esta amidao pode tambm ser catalisada por transaminases, ocorrendo
transferncia de um grupo amina de um dado aminocido, para o cetoglutarato, formando-se assim o -cetocido correspondente ao
aminocido dador e glutamato.
55
Glutamina
A amidao de um glutamato e, consequente converso em
glutamina, catalisada pela sinttase da glutamina, envolvendo a
formao intermdia de -glutamil-fosfato, numa reaco
fisiologicamente irreversvel que envolve gastos de ATP - O
glutamato ataca inicialmente o fsforo do ATP, formando glutamil-fosfato. Segue-se a ligao de NH4+, que sob a forma de
NH3 ataca o -glutamil-fosfato, formando um intermedirio
tetradrico. A subsequente libertao de fosfato e de um proto
permite ento a formao de glutamina.
Alanina e aspartato
A alanina formada pela transaminao do piruvato, enquanto o aspartato formado pela
transaminao do oxaloacetato. Estes dois aminocidos diferem dos seus precursores, na medida em
que apresentam um grupo amina no carbono 2, em vez de um grupo cetnicos. Aqui, o dador do grupo
amina o glutamato, sendo estas reaces reversveis. De referir que, todas as transaminases
necessitam de fosfato piridoxal (derivado da vitamina B6) como grupo prosttico.
Aspargina
A aspargina diferente do aspartato, na medida em que apresenta um grupo amida adicional, ao nvel
do quarto carbono (o aspartato apresenta a, um cido carboxlico). O aspartato pode ser convertido a
aspargina, numa reaco catalisada pela sinttase da aspargina, que se assemelha reaco catalisada
pela sinttase da glutamina. Contudo, neste caso o azoto cedido pela glutamina e no pelo io amnio
(embora as sinttases da aspargina bacterianas utilizem esse io). De referir que esta reaco envolve a
formao intermediria de aspartil fosfato. A sntese de aspargina est associada hidrlise de ATP em
AMP e pirofosfato, sendo que o facto de o pirofosfato gerado ser hidrolisado pela pirofosfatase permite
que esta reaco seja considerada fisiologicamente irreversvel.
56
Serina
A serina um aminocido que contm trs carbonos e um grupo
hidroxilo no terceiro carbono, sendo sintetizada a partir do 3fosfoglicerato, um intermdio da gliclise. A oxidao do grupo hidroxilo do 3-fosfoglicerato, por aco da desidrognase do 3fosfoglicerato permite a sua converso em 3-fosfohidroxipiruvato. A
transaminao e subsequente desfosforilao desta molcula leva
formao de serina (com a formao intermediria de fosfoserina).
Glicina
A glicina o aminocido mais simples, sendo a sua sntese altamente favorecida nos mamferos e
existindo vrias vias para a sua produo. As aminotransferases de glicina podem catalisar a sntese de
glicina, a partir de glioxilato (um composto com dois carbonos, que
contm um grupo aldedo em vez de um grupo amina, no carbono ),
glutamato, ou alanina. Nesta reaco de transaminao, a alanina o
dador do grupo amina. De referir que o glixoliato pode resultar da
oxidao do glicolato (um composto presente em muitas plantas
comestveis), por aco da oxdase do glicolato. O glioxilato pode ainda
resultar
do
metabolismo
da
prolina, embora esse
processo seja muito
menos relevante.
Outras vias incluem a
sntese a partir de
colina (sendo que esta
reaco envolve a
perda
de
dois
carbonos), ou
de
serina. Esta ltima via
reversvel e permite
57
Prolina
A prolina apresenta como caracterstica, o facto de ser o nico
aminocido, cujo grupo amina uma amina secundria. A
biossntese de prolina feita a partir do glutamato, ocorrendo
a formao inicial de glutamato -fosfato, a partir da aco da
5-cnase do glutamato. O glutamato -fosfato convertido em
-semialdedo do glutamato, por aco da desidrognase do
glutamato semialdedo, numa reaco que envolve a oxidao
do NADPH e a perda de um grupo fosfato. O anel do semialdedo do glutamato fecha-se, ocorrendo a formao de 1-pirolina-5-carboxilato, atravs de uma
reaco no-enzimtica. Por fim, a 1-pirollina-5-carboxilato convertida em prolina, por aco da
redtase da pirolina 5-carboxilato, numa reaco que envolve a concomitante oxidao do NADPH.
Arginina
A sntese de arginina ocorre de modo similar da prolina, sendo
que este aminocido apresenta seis carbonos. Na verdade, o semialdedo do glutamato originado a partir do glutamato,
origina ornitina, por uma reaco catalisada por uma
transaminase, sendo a partir da ornitina, originada arginina.
A partir da arginina sintetizada a ureia, ao nvel do fgado, onde
existe a hidrolase necessria para a ocorrncia do processo, a
argnase. Contudo, a arginina tambm pode ser sintetizada pelas
enzimas do ciclo da ureia nos entercitos ocorre formao de
ornitina, a partir do glutamato, sendo esta convertida em
citrulina. A citrulina ento vertida para o plasma sanguneo, entrando para o fgado e rim, onde
convertida a arginino-succinato e, posteriormente, em arginina (atravs de reaces catalisadas pela
sinttase do arginino-succinato e arginino-succnase, respectivamente). Como a quantidade da arginina
sintetizada por estas enzimas muito reduzida, no se adequando s necessidades de um indivduo em
crescimento ou que perdeu protenas endgenas, a arginina classificada como condicionalmente
dispensvel.
Cistena
A cistena um aminocido que, no sendo nutricionalmente essencial, formado a partir de um
aminocido nutricionalmente essencial, a metionina (e da poder ser considerada como semiindispensvel). Na verdade, uma ingesto suficiente de metionina permite colmatar eventuais dfices
58
Tirosina
A tirosina sintetizada a partir da fenilalanina, atravs da hidroxilase da fenilalanina. Se a alimentao
contiver as quantidades adequadas de fenilalanina, a tirosina considerada nutricionalmente noessencial. Contudo, a reaco catalisada pela hidrolase da fenilalanina irreversvel e da, que a tirosina
da alimentao no suprima eventuais dfices de fenilalanina, mas que um consumo adequado de
fenilalanina consiga suprimir dfices de tirosina. A hidroxlase da fenilalanina uma oxigenase de funo
mista, que incorpora um tomo de oxignio ao nvel do anel benznico da molcula de fenilalanina e
reduz o outro a gua, sendo que esse poder redutor est associado tetrahidrobiopterina, um derivado
do NADPH.
Hidroxiprolina e hidroxilisina
A hidroxiprolina e a hidroxilisina esto presentes sobretudo ao nvel do colagnio. Uma vez que no
existe tRNA para nenhum destes aminocidos hidroxilados, nem a hidroxiprolina, nem a hidroxilisina so
59
Carboxiglutamato
O carboxiglutamato um
aminocido
com
algumas
parecenas com a hidroxiprolina
e hidroxilisina, pois a sua
formao resulta da converso
ps-sntese
proteica
do
glutamato. Esta transformao
envolve a actividade sequencial
de uma oxignase, algo que
necessita da presena de
vitamina K, e uma reaco no
enzmica (que envolve a
incorporao de um carbono).
De
referir
que,
o
carboxiglutamato encontra-se ao
nvel de vrias protenas,
envolvidas
na
coagulao
sangunea,
tais
como
a
protrombina.
Selenocistena
A selenocistena, o 21 aminocido similar serina e cistena
e, embora no apresente uma ocorrncia comum em protenas,
encontra-se presente ao nvel do centro activo de vrias enzimas
humanas, que catalisam reaces de oxidao-reduo,
nomeadamente a redtase da tioredoxina, a peroxidase do
glutatio e a deiodinase. A substituio da selenocistena por
cistena leva a um decrscimo significativo da actividade dessas
enzimas.
60
hidroxilisina,
ou
hidroxiprolina,
a
selenocistena originada,
aquando da traduo,
durante
a
sua
incorporao
em
peptdeos. O tRNA da selenocistena anti-codo especfico e pouco comum, tendo a sequncia ACU e
designando-se por tRNASec. O codo correspondente normalmente um codo STOP, mas a insero de
um elemento selenocistena permite reconhecer a peculiaridade daquele mRNA. A selenocistenatRNASec ento, inicialmente, ligada a serina, por uma ligase, sendo o oxignio da serina depois
substitudo por selnio, numa reaco que envolve a presena do selenofosfato (sintetizado por aco
da sntase do selenofosfato). Sucessivas reaces enzmicas convertem ento o cistel-tRNASec em
aminoacril-tRNASec e, finalmente em selenocistel-tRNASec. Na presena de um factor de elongao
especfico para o selenocistel-tRNASec, a selenocistena pode ser incorporada nas protenas.
N de carbonos
4
4
3
4
4
3
2
Prolina
Arginina
Cistena
5
6
3
Tirosina
Selenocistena
9
3
Precursor
-cetoglutarato
Glutamato
Piruvato
Oxaloacetato
Aspartato
3-fosfoglicerato
Glixolitato, glutamato ou
alanina; colina; serina
Glutamato
Glutamato
Metionina (contribuio
da serina)
Fenilalanina
Cistena
61
62
que,
considerando o indivduo como um
todo, se diz que nessa situao o
crebro est a consumir msculo).
63
Asparagina e aspartato
Os quatro carbonos da
asparagina e aspartato
formam
oxaloacetato,
sendo que a converso
da
asparagina
em
aspartato catabolisada
pela asparaginase, numa
reaco que envolve a remoo de amonaco (desamidao). O aspartato entretanto formado
convertido em oxaloacetato, por aco de uma transaminase, com concomitante converso do cetoglutarato em glutamato.
O aspartato pode ainda reagir com a citrulina no ciclo da ureia, levando gnese de arginino-succinato
e, posteriormente, fumarato (o fumarato proveniente do esqueleto carbonado do aspartato, sendo
que o grupo amina do aspartato incorporado na ureia).
Glutamina e glutamato
Um mecanismo similar est
envolvido na converso da
glutamina e glutamato em
-cetoglutarato. A glutamina
inicialmente convertida
por aco da glutaminase,
em
glutamato
(com
concomitante desamidao).
Por sua vez, o glutamato convertido em -cetoglutarato, por aco de uma transaminase, com
simultnea converso do piruvato em alanina. O glutamato pode ainda ser convertido em cetoglutarato, atravs da aco da desidrognase do glutamato, ocorrendo concomitante reduo do
NAD+. Admite-se in vivo que a
desidrognase do glutamato reduza
o NAD+ para a converso de
glutamato em -cetoglutarato e
oxide NADPH para catalisar a
reaco inversa.
Os entercitos assumem particular
relevncia no catabolismo da
glutamina, pois ao nvel destas
clulas, uma parte da glutamina
convertida a -cetoglutarato, que
por sua vez convertido em
piruvato, que gera alanina, por
reaces de transaminao. A
alanina ento transformada em
glicose (e ureia) no fgado, aps
nova converso em piruvato e
ocorrncia
das
reaces
da
gliconeognese. Ao nvel dos
64
Alanina
A transaminao da alanina (por
aco da transaminase da alanina,
tambm designada na prtica
clnica por transaminase glutmicopirvica) forma piruvato, no sendo
conhecido
nenhum
defeito
metablico, no que concerne ao
catabolismo da alanina. O piruvato
entretanto formado um substrato
gliconeognico e da que, no ciclo
da alanina, ocorra formao de
alanina a partir do piruvato
produzido
na
gliclise,
nomeadamente ao nvel das clulas
musculares. A alanina ento
direccionada para o fgado, onde
de novo convertida em piruvato,
que por sua vez origina glicose,
atravs da gliconeognese. O ciclo
da alanina permite tambm o
transporte de azoto das clulas musculares, para as hepticas, onde ocorre a sntese de ureia. De referir
que o ciclo da alanina consome ATP (ocorrendo a hidrlise de seis molculas de ATP), mas permite a
poupana de glicose, essencial para os processos oxidativos no crebro. De facto, num indivduo em
jejum prolongado, a glicose que oxidada no crebro provm da converso dos aminocidos endognos
em glicose.
Glicina e serina
No que concerne ao catabolismo da glicina, o complexo de clivagem da glicina, presente ao nvel das
mitocndrias hepticas, leva formao de CO2 e amonaco, a partir de glicina, com concomitante
formao de N5,N10-metileno tetrahidrofolato (a partir de H4-folato, que aceita um grupo metilo). De
referir que o complexo de clivagem consiste em trs enzimas e uma protena-H.
A hiperglicinemia no-cetnica uma doena rara, que ocorre somente na Finlndia e que se prende
com a acumulao de glicina em todos os tecidos, incluindo os do sistema nervoso central, devido a uma
deficincia na degradao de glicina. A hiperoxalria primria, por sua vez, uma doena associada a
uma deficincia no catabolismo do glioxilato, formado por desaminao da glicina.
J a serina inicialmente convertida em glicina, por aco da hidroximetiltransferase da serina, com
concomitante formao de N5,N10-metileno tetrahidrofolato, a partir de H4-folato, ocorrendo,
posteriormente, as reaces do catabolismo da glicina, j referidas.
65
Cistena
Relativamente cistena, este aminocido pode ser originado a partir da cistina, por aco da redtase
da cistina (sendo originadas duas molculas de cistena por molcula de cistina). Posteriormente, duas
vias diferentes convertem a cistena em piruvato - uma envolve a aco de uma desidrognase, uma
transaminase e uma desulfinase (enzima que participa na remoo do enxofre); enquanto na outra
actua apenas uma transaminase, sendo gerado 3-mercaptolactato a par do piruvato. De qualquer das
formas, o grupo tiol da cistena acaba sendo oxidado, gerando sulfato, que excretado na urina.
Um processo alternativo, menos relevante, envolve a formao de taurina, um dos cidos biliares,
ocorrendo oxidao do grupo tiol, embora o enxofre e o grupo amina permaneam ligados ao esqueleto
carbonado.
Metionina
A metionina, um aminocido com cinco carbonos e com um grupo metilo ligado com uma ligao
sulfureto, reage com o ATP formando S-adenosilmetionina (ou seja, metionina activa). Esta, por sua
vez, perde o grupo metilo ligado ao enxofre, que transferido para um aceitador (atravs da aco de
metil-transferases), sendo a metionina convertida em S-adenosil-homocistena.
66
Tirosina
No catabolismo da tirosina, a primeira reaco uma transaminao, em que o grupo amina
transferido para o -cetoglutarato, formando-se para-hidroxifenilpiruvato e glutamato. O parahidroxifenilpiruvato sofre ento uma descarboxilao, sendo convertido em homogentisato, por aco
da hidroxilase do para-hidroxifenilpiruvato, sendo necessrio Cu2+ e ascorbato.
O homogentisato origina, por sua vez, maleilo-acetoacetato, numa reaco catalisada pela oxdase do
homogentisato, uma enzima que necessita da presena de ferro. Por sua vez, o maleilacetoacetato leva
formao de fumarilacetoacetato, por aco uma isomerase cis-trans. O fumarilacetoacetato ,
seguidamente, clivado, originando fumarato e acetoacetato, por aco da hidrolase do
fumarilacetoacetato. De referir que, o acetoacetato, por aco da -cetotiolase, pode ser clivado em
acetil-CoA e acetato, sendo incorporada uma molcula de CoASH na molcula que origina acetil-CoA.
A necessidade de ascorbato para o catabolismo da tirosina explica porque que os indivduos com
escorbuto excretam produtos do catabolismo de tirosina, oxidados de forma incompleta. A tirosinemia
tipo I (tirosinose) uma deficincia no metabolismo da tirosina, que provavelmente estar relacionada
com defeitos na hidrolase do fumarilacetoacetato. Uma vez que a tirosina sintetizada no organismo a
partir da fenilalanina, a terapia para esta patologia, envolve no s uma dieta pobre em tirosina, mas
tambm em fenilalanina. J a tirosinemia tipo II envolve um defeito na aminotransferase de tirosina,
enquanto na tiosinemia neonatal, ocorrem deficincias na actividade da hidoxilase do parahidroxifenilpiruvato.
A alcaptonria uma deficincia que se caracteriza pela ausncia de oxdase de homogentisato. Nesta
patologia regista-se um escurecimento da urina, aquando da exposio ao ar, devido oxidao do
homogentisato excretado. Numa fase mais avanada da doena, registam-se casos de artrite e
pigmentao do tecido conjuntivo (ocronose), devido oxidao do homogentisato a acetato de
benzoquinona, que polimeriza e se liga ao tecido conjuntivo. A alcaptonria uma doena rara e a sua
importncia prende-se unicamente com o facto de ter sido uma das primeiras doenas metablicas
descritas.
67
Fenilalanina
A fenilalanina inicialmente
convertida a tirosina, por aco de
uma
enzima
heptica,
a
hidroxilase da fenilalanina, numa
reaco que envolve a oxidao
da
tetrahidrobiopterina
e
converso em dihidrobiopterina.
Como bvio, as reaces
subsequentes
so
as
do
catabolismo da tirosina.
As hiperfenilalaninemias so
doenas originadas a partir de
deficincias da hidroxilase da
fenilalanina (nomeadamente, a PKU/fenilcetonria clssica/hiperfenilalaninemia tipo I), na redtase da
dihidrobiopterina (nomeadamente, a hiperfenilalaninemia tipo II e III), ou da biossntese de
dihidrobiopterina (nomeadamente, a hiperfenilalaninemia tipo IV e V), sendo excretados na urina
catabolitos alternativos, nomeadamente fenilacetato. O fenilacetato produzido a partir do
fenilpiruvato, uma molcula formada por transaminao da fenilalanina, que entretanto se acumula. O
facto de as hiperfenilalaninemias serem doenas com uma incidincia relativamente elevadas, e que
provocam leses graves no crebro e consequente atraso mental, leva a que o diagnstico deva ser feito
percocemente e a que aos indivduos com fenilalaninemias deva ser administrada uma dieta sem
fenilalanina, mas suplementada em tirosina.
68
O catabolismo dos aminocidos ramificados tem particular expresso ao nvel do msculo esqueltico e
do msculo cardaco (contrariamente aos outros aminocidos, que sofrem o seu catabolismo ao nvel do
fgado, intestino e rim), nomeadamente ao nvel da primeira reaco ocorrida. Como esta reaco de
transaminao est associada a uma maior exportao de alanina e glutamina.
69
Arginina
A arginina convertida a ornitina, por aco da argnase, o que permite a formao de ureia. A ornitina
ento convertida em glutamato--semialdedo, por aco da ornitina -aminotransferase, com
concomitante sntese de glutamato, a partir -cetoglutarato. O glutamato--semialdedo ento
oxidado a glutamato, com concomitante reduo do NAD +, por aco de uma desidrognase. O
glutamato subsequentemente convertido a -cetoglutarato, pelos processos j referidos.
Mutaes na ornitina -aminotransferase esto implicadas num aumento dos nveis plasmticos e
urinrios de ornitina e causam atrofia girata da retina. J na sndrome de hiperornitinemiahiperamonmia, um defeito no antiporter mitocondrial de ornitina-citrulina impede o transporte de
ornitina para as mitocndrias, para uso na sntese de ureia.
Prolina
O catabolismo da prolina tem lugar nas mitocndrias. Uma vez que este aminocido no participa em
reaces de transaminao, o azoto deste aminocido retido, aquando da sua oxidao da 1-pirolina5-carboxilato. A esta reaco, catalisada pela desidrognase da prolina, segue-se a abertura da
estrutura em anel e formao de glutamato--semialdedo, cujo catabolismo similar ao do glutamato-semialdedo, gerado a partir da arginina.
Existem duas deficincias metablicas associadas ao catabolismo da prolina, sendo ambas hereditrias
autossmicas recessivas. A hiperprolinemia de tipo I est associada a um bloqueio na aco da
70
Histidina
O catabolismo da histidina envolve a sua converso inicial em urocanato, por aco da histidase (uma
lase), com concomitante remoo de um io amnio. O urocanato origina N-formiminoglutamato, por
via de uma hidrolase. O grupo formimino do N-formiminoglutamato ento transferido para o H4 folato
(que se converte em N5-formimino-H4 folato), ocorrendo concomitante formao de glutamato, que
posteriormente convertido a -ceto-glutarato. O azoto do grupo formimino do N5-formimino-H4 folato
perde-se sob a forma de amonaco, o que leva formao de N5,N10-metenil-H4 folato, um
interveniente na sntese de bases pricas.
Deficincias de cido flico impedem a transferncia do grupo formimino, sendo excretado Nformiminoglutamato.
Treonina
A treonina catalisada por vrias vias. Uma das vias envolve a converso directa da treonina em acetilCoA e glicina, por via de um complexo multienzmico, designado por complexo de clivagem da treonina.
Outra via inclui a clivagem da treonina em acetaldedo e glicina, por aco da aldolase. O acetaldedo
convertido em acetato pela desidrognase dos aldedos, com concomitante reduo do NAD+.
Seguidamente forma-se acetil-CoA, algo que ocorre conta da hidrlise de ATP e da incorporao de
uma molcula de CoASH. J a glicina catabolisada pelos processos descritos anteriormente.
Outra via alternativa para o catabolismo da treonina envolve a sua desaminao, por aco da
desidrtase da serina, sendo originado amonaco e -cetobutirato, que por sua vez convertido a
succinil-CoA.
Lisina
A lisina forma inicialmente uma base de Schiff, com o -cetoglutarato, sendo esta reduzida e clivada,
originando glutamato e -semialdedo do -amidoadipato, ocorrendo assim, transferncia do grupo
amina da lisina para o -cetoglutarato. O -semialdedo do -amidoadipato oxidado (com
71
Triptofano
O triptofano degradado a intermedirios anfiblicos, atravs da via da cinurenina-antranilato, que se
inicia pela abertura de um anel do triptofano e incorporao de oxignio molecular, por aco da
oxignase do triptofano, sendo formada N-formilcinurenina. A oxignase do triptofano uma enzima
dependente de ferro, que estimulada, no fgado, pela presena de corticosterides adrenais e pelo
triptofano. Por outro lado, a oxignase do triptofano inibida por derivados do cido nicotnico,
incluindo o NADPH.
A N-formilcinurenina v ento ser removido o seu grupo formil, numa reaco catalisada pela formilase
da cinurenina, que produz cinurenina. Esta molcula pode ser convertida em vrias reaces, gerando
produtos diferentes. Um destes processos inclui a formao de 3-hidroxiantranilato e alanina, enquanto
outro permite a gnese de cido cinurnico, um composto excretado na urina. Por seu turno, o 3hidroxiantranilato origina acetoacetil-CoA e da que o triptofano seja classificado como cetognico e
simultaneamente glicognico. Este processo envolve a formao de um intermedirio, que pode sofrer
reaces alternativas e eventualmente gerar o ribonucleotdeo do cido nicotnico (o precursor do NAD +
e do NADP+).
A doena de Hartnup est relacionada com o impedimento de transporte intestinal e renal do
triptofano e outros aminocidos neutrais (nomeadamente a cistena, a glicina e a alanina), ocorrendo
perda excessiva destes na urina. Este defeito limita a quantidade de triptofano disponvel para a
biossntese de niacina (vitamina B3), contribuindo para sintomas similares aos da pelagra.
72
J o N formimino-H4 folato formado aquando do catabolismo da histidina pode, por sua vez, originar,
por uma reaco de desaminao, N5,N10-metenilo-H4 folato, que funciona como um dador de
unidades monocarbonadas para a sntese de nucleotdeos pricos. Por outro lado, o N5,N10-metenilo-H4
folato pode ser formado por oxidao do N5,N10-metileno-H4 folato.
O N5,N10-metileno-H4 folato pode tambm ser convertido por aco da redtase do N5,N10-metileno-H4
folato em N5-metil-H4 folato, que por sua vez pode transferir o seu grupo metilo para a homocistena,
formando assim metionina (numa reaco catalisada pela sntase da metionina) e H4 folato. A
ocorrncia desta reaco revela-se fundamental no metabolismo dos folatos, na medida em que os
folatos so transportados para a clula sob a forma de N5-metil-H4 folato, mas na clula, as enzimas tm
mais afinidade para o H4 folato. A sntase de metionina, que est implicada na converso de N5-metil-H4
73
74
Ciclo da ureia
Nos indivduos adultos normais, a quantidade de azoto consumido igual quantidade de azoto
excretado. Um balano azotado positivo est associado, ou seja, a ocorrncia de uma ingesto de azoto
superior sua excreo, est associado a situaes como o crescimento, ou a gravidez; enquanto
situaes de balano azotado negativo, onde a excreo excede o consumo, podem-se seguir a casos de
cirurgia, cancro avanado ou outras condies patolgicas.
Uma vez que o amnio altamente txico, quando este composto libertado em reaces de
desaminao (por exemplo da glutamina), este convertido, no fgado, em ureia. Desta forma, as
concentraes de amnio so muito baixas nos indivduos saudveis (cerca de 20 mol/L no sangue e de
260 mol/L na veia porta). Caso a funo do fgado se encontre comprometida, tal como acontece em
casos de cirrose, ou de hepatite, registam-se elevados nveis de amnio, o que se traduz em alteraes
neurolgicas que podem estar associadas ao coma ou morte. Doenas congnitas associadas a
enzimas do ciclo da ureia esto tambm associadas a situaes de hiperamonmia.
Biossntese de ureia
A sntese de 1 mol de ureia requer 3 mol de ATP, 1 mol de cada io amnio do azoto -amina do
aspartato. Dos seis aminocidos intervenientes neste processo, o N-acetilglutamato funciona somente
como um activador enzimtico. Os restantes servem como transportadores de tomos, que em ltima
anlise originam ureia. Dessa forma, o principal papel da ornitina, citrulina e argininosuccinato, nos
mamferos, a sntese de ureia, que um processo cclico. Uma vez que a ornitina inicialmente
consumida , posteriormente, regenerada, no existe um ganho ou perda de ornitina, citrulina,
argininosuccinato ou arginina, no cmputo geral. Existe, contudo, um consumo de amnio, dixido de
carbono, ATP e aspartato. Relativamente ao consumo de ATP, embora sejam quebradas quatro ligaes
fosfato, a reconverso do fumarato em aspartato que subsequentemente decorre est associada
formao de 2,5 mol de ATP (admitindo um rcio P:O de 2,5 para o NADH), o que leva a que no cmputo
geral se gastem apenas 1,5 mol de ATP.
De referir que algumas reaces da sntese de ureia ocorrem na matriz mitocondrial, enquanto outras
decorrem no citosol.
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Ciclo da ureia
A primeira etapa do ciclo da ureia catalisada pela transcarbamilase da ornitina, ocorrendo a
transferncia do grupo carbamilo do carbamil fosfato, para a ornitina, o que leva formao de
citrulina e ortofosfato. Embora esta reaco decorra na matriz mitocondrial, quer a sntese de ornitina,
quer o metabolismo subsequente da citrulina tm lugar no citosol. A entrada de ornitina para a
mitocndria e a sada de citrulina da mitocndria depende ento da existncia de um sistema de
transporte catalisado pelo mesmo transportador, que se encontra ao nvel da membrana interna
mitocondrial.
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A clivagem hidroltica do grupo guanidino da arginina catalisada pela argnase heptica, o que leva
sntese de ureia e ornitina. A ornitina, por sua vez, volta a entrar nas mitocndrias hepticas, para sofrer
novas reaces da sntese de ureia. A ornitina e a lisina so potentes inibidores da argnase, na medida
em que competem com a arginina.
Para alm da sntese de ureia, a arginina tambm funciona como um precursor de xido ntrico, um
potente relaxador muscular. A sntase do xido ntrico a enzima que catalisa a formao deste
composto, numa reaco dependente de clcio.
Em suma, o carbono da ureia tem origem no dixido de carbono e um dos seus azotos tem origem
directa no amnio, enquanto o outro tem origem no aspartato. De facto, indirectamente, o azoto que
tem origem no aspartato pode ter origem em todos os aminocidos os aminocidos podem gerar
glutamato (nomeadamente por aco de transaminases), que por aco da transaminase do aspartato,
gera aspartato, a partir do oxaloacetato. Por outro lado, nas reaces que envolvem a perda de azoto
sob a forma de molculas de amnio, este poder, por aco da desidrognase do glutamato, originar o
grupo amina do glutamato que, novamente por aco da transaminase do aspartato, pode participar na
sntese de aspartato a partir de oxaloacetato.
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Excreo de azoto
Na urina liberta-se no s ureia, mas tambm io amnio. A maior parte do amnio excretado na urina
forma-se nas clulas renais por aco da glutaminase e da desidrognase do glutamato o azoto
presente na glutamina captada do plasma utilizado pelas clulas tubulares renais para a sntese de
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Na maioria dos mamferos, o cido rico convertido (por aco da uricase) em alantona, uma
molcula solvel em gua. Contudo, os seres humanos no exprimem uricase e, dessa forma, o produto
final do catabolismo das purinas o cido rico, que excretado na urina.
Biossntese de desoxirribonucleotdeos
Os desoxirribonucleotdeos so as molculas presentes ao nvel do DNA. Contrariamente aos
ribonucleotdeos (que contm ribose, como pentose), os desoxirribonucleotdeos contm desoxirribose,
que no tem um grupo hidroxilo no segundo carbono, como a ribose, o que confere estabilidade
molcula de DNA. A sntese de DNA utiliza 2-desoxirribonucleosdeos trifosfato (2-dNTP), sendo que
de cada vez que incorporado um nucleotdeo, perdem-se dois grupos fosfato.
A reduo do hidroxilo 2 dos ribonucleotdeos da purina e pirimidina catalisada pelo complexo de
redtase dos ribonucleosdeos difosfato e forma desoxirribonucleosdeos difosfato (dNDPs). Os
ribonucleosdeos difosfato que sofrem reduo so o ADP, o GDP, o UDP e o CDP, sendo que os
nucletidos de timina formam-se a partir do 2-dUDP.
Os agentes redutores desta reaco so tioredoxina e a glutaredoxina que, como tal, se oxidam. Dessa
forma, a tioredoxina e a glutaredoxina so mantidas na sua forma reduzida conta da oxidao do
NADPH (no caso da tioredoxina, a converso da conta da redtase da tioredoxina e o NADPH o
agente redutor directo, enquanto no caso da glutaredoxina, a converso levada a cabo pela redtase
da glutaredoxina e o glutatio o redutor directo, enquanto o NADPH um agente redutor
secundrio).
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PRPP
ATP
UTP
CTP
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Aplicaes farmacolgicas
Vrios frmacos (tal como o metotrexato, j referido) actuam inibindo as enzimas que participam no
metabolismo das purinas e pirimidinas. A 6-mercaptopurina um pr-frmaco, cujo nucleosdeo
monofosfato (que formado a partir da 6-mercaptopurina por aco da fosforibosil-transferase da
hipoxantina e guanina) um potente inibidor da amido-fosforibosil-transferase da glutamina, da
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3. Metabolismo do heme
Bernardo Manuel de Sousa Pinto Faculdade de Medicina da Universidade do Porto
Sebenta de Bioqumica II
Metabolismo do heme
O metabolismo das porfirinas e dos pigmentos biliares encontramse intimamente relacionados, na medida em que o heme
sintetizado a partir de porfirinas e ferro e que os produtos da
degradao do heme so os pigmentos biliares e o ferro. Anomalias
na biossntese de vrias porfirinas levam ocorrncia de porfirias,
patologias que no so muito frequentes, no que concerne sua
prevalncia. Uma condio muito mais frequente a ictercia, que
se deve a maiores nveis de bilirrubina no plasma. Essa elevao
deve-se sobre-produo da bilirrubina ou a falhas na sua
excreo, estando associada a vrias doenas, que englobam desde
anemias hemolticas, at hepatites virais e cancro no pncreas.
As porfirinas so ento definidas como molculas aromticas
heterocclicas, compostas por quatro subunidades pirrol,
interconectadas, nos seus carbonos , por pontes metenilo. O heme
um exemplo de um composto que apresenta uma porfirina na sua
constituio. De facto, o heme definido como sendo constitudo
por protoporfirina III e Fe2+.
A protoporfirina III um composto corado e fluorescente, que une
quatro anis pirrlicos (cada um com quatro tomos de carbono e um de azoto), por via de pontes
metenilo. A protoporfirina III apresenta ainda cadeias laterais na seguinte sequncia (de 1 a 8): metil,
vinil, metil, vinil, metil, propinico, propinico e metil.
Os hemeprotdeos so heteroprotdeos que apresentam o heme como grupo prosttico, sendo
exemplos de hemeprotdeos, a hemoglobina, a mioglobina, os citocromos da cadeia respiratria, a
catalase, a peroxidade e a pirrolase do triptofano.
Sntese de heme
A sntese do heme ocorre na maior parte das clulas do organismo humano, com destaque para as
clulas precursoras dos ertircitos e para os hepatcitos. Para ocorrer a sntese do heme, tem de
ocorrer primeiro a sntese de -amino--cetoadpico. O -amino--cetoadpico formado na presena
de succinil-CoA e glicina, sendo necessrio fosfato piridoxal nesta reaco, para activar a glicina.
Este cido rapidamente descarboxilado, para formar -aminolevulinato (ALA), esta reaco ocorre nas
mitocndrias e catalisada pela sntase do ALA, sendo esta a etapa limitante na biossntese das
porfirinas. Subsequentemente, no citosol, duas molculas de ALA so condensadas pela desidrtase da
ALA, para formar duas molculas de gua e uma de porfobilinognio (PBG), que contm um anel pirrol,
com duas cadeias laterais distintas (uma de cido actico e outra de cido propinico). De referir que a
desidrtase da ALA uma enzima que contm zinco e que sensvel inibio com chumbo.
Quatro molculas de PBG condensam-se e, por aco sequencial de duas enzimas (a sntase do
uroporfirinognio I e a cosntase do uroporfirinognio III) forma-se uroporfirinognio III, que contm
quatro anis pirrlicos ligados por pontes metileno e que apresenta apenas quatro dos oito tomos de
azoto que provinham da glicina (os restantes perderam-se sob a forma de amnio). De referir que a
sequncia de cadeias laterais do uroporfirinognio III (da primeira oitava): actico, propinico,
actico, propinico, actico, propinico, propinico, actico.
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Catabolismo do heme
O catabolismo do heme ocorre, sobretudo, ao nvel dos macrfagos do bao, fgado e medula ssea,
sendo a primeira reaco catalisada pelo sistema microssomtico da oxignase do heme, que catalisa a
rotura por entre os anis pirrlicos I e II do heme, o que leva formao de biliverdina. A biliverdina,
por sua vez, reduzida a bilirrubina, numa reaco catalisada pela redtase da biliverdina e que
dependente de NADPH. A bilirrubina formada encontra-se sob a forma no-conjugada (bilirrubina
indirecta), sendo por isso lipossolvel. Como tal, esta molcula viaja no sangue ligada albumina, no
sendo excretada na urina.
A bilirrubina no-conjugada entra ento para os hepatcitos, por difuso facilitada, reagindo com o
cido glicurnico (que doado pelo UDP-glicuronato) para se formar diglicuronil-bilirrubina (por aco
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Ictercia
Um aumento da quantidade de bilirrubina no organismo est associado ao desenvolvimento de uma
colorao amarelada da pele, mucosas e esclertica do olho. Esta condio designa-se por ictercia e
pode ter, ou no, causas patolgicas.
De facto, no recm-nascido, muito frequente o desenvolvimento de ictercia, algo que ocorre por
aumento da sntese de bilirrubina (devido a um maior catabolismo do heme). Neste caso, verifica-se um
aumento da bilirrubina no-conjugada. Um aumento de bilirrubina no-conjugada tambm se pode
dever diminuio da velocidade de conjugao. Contudo, pode-se tambm registar um aumento da
bilirrubina conjugada, algo que tem sempre origem patolgica (podendo ser causada por uma obstruo
no canal biliar comum).
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