Universidad Autnoma del Carmen

Dependencia Acadmica de Ciencias Qumicas y Petrolera

Facultad de Qumica

LICENCIATURA EN INGENIERA QUMICA

PROTOCOLO DE TESIS

REUSO DE LAS AGUAS RESIDUALES URBANAS PARA EL CULTIVO DE

MICROALGAS EN CONDICIN AUTTROFA Y MIXOTRFICO PARA LA
ACUMULACIN DE LPIDOS

PRESENTA
Xxxx

Xxxxxx Xxxxx

DIRECTOR DE TESIS
Xxxx

Xxxxxx Xxxxx

CD. DEL CARMEN, CAMPECHE, MXICO. NOVIEMBRE 2011

1. INTRODUCCIN
Dada la disminucin de las reservas de petrleo y consecuentes problemas
ambientales por los gases liberados de los combustibles fsiles, la produccin de
materiales combustibles alternativos ha atrado la atencin de distintos grupos de
investigadores (Ma y Hanna, 1999). En este contexto, el biodiesel, es caracterizado
como un combustible renovable, biodegradable y ambientalmente amigable, llegando a
ser un rea de explotacin importante. De acuerdo a las Especificaciones Estndar de
US para biodiesel

[American Society Testing and Materials (ASTM) 6751], el

biodiesel es definido como un combustible constituido de mono-alkil esteres de cadenas

largas de cidos grasos de aceites vegetales y grasas animales.

El biodiesel es producido a partir de aceites vegetales (comestibles o no

comestibles) o grasas de origen animal. Se ha reportado una buena obtencin de
biodiesel a partir de diversas materias primas como: la canola, aceite de soya, palma,
girasol, entre otras; sin embargo, el uso de estas materias primas puede conducir al
incremento en los costos de produccin del biodiesel. Hoy en da, investigaciones
recientes han reportado que el uso de las microalgas como materia prima para la
produccin de este biocombustible es una buena opcin ya que presentan muchas
ventajas y beneficios en comparacin con otras materias primas, principalmente porque
no es usada como una fuente de alimento de consumo humano (Chisti, 2007) y que a
diferencia de otros cultivos terrestres, las microalgas crecen extremadamente rpido.

Las microaglas se definen como organismos unicelulares fotosintticos que

abundan en aguas dulces, salobres y ecosistemas marinos de toda la tierra (Richmond,
2004). Estos organismos al igual que las plantas, son capaces de utilizar el CO 2 y la luz
solar para generar complejas biomolculas necesarias para su supervivencia. Los lpidos
o triacilgliceroles (TAGs) son un tipo de molculas sintetizadas por algunas especies
que bajo ciertas condiciones pueden inducirse a la acumulacin substancial de
biomolculas contribuyendo as a una alta produccin de aceite (Sheehan et al., 1998).
As mismo, se pueden extraer diversos componentes de la biomasa de las
microalgas: lpidos (triglicridos y cidos grasos), carbohidratos y protenas. La

conversin de estos productos en alcoholes, metano, hidrgeno, cidos orgnicos, etc.,

hacen de la explotacin de las microalgas una fuente de ingresos econmicos.
Tradicionalmente las microalgas se han cultivado en sistemas cerrados o lagunas,
las cuales son aireadas o expuestas al aire permitiendo a las microalgas capturar dixido
de carbono desde la atmsfera para el mantenimiento y crecimiento celular. Sin
embargo, la atmsfera contiene bajas concentraciones de CO2 (0.03 a 0.06%) por lo
tanto, se considera que hay una limitada transferencia de masas en el medio de cultivo,
lo cual podra disminuir el crecimiento celular de las microalgas (Chelf et al., 1993).
Es conocido que en cultivos bajo condiciones auttrofas, es decir, en condiciones
de luz continua, donde el CO2 participa como la nica fuente de carbn e incorporando
dicho carbn en la formacin de cadenas proteicas

(Carvalho et al., 2006),

capacidad de asimilar CO2 por organismos fotosintticos los

la

propone como una

alternativa para la reduccin global de este gas contaminante. Otra ventaja es que las
microalgas pueden desarrollarse en lugares donde la salinidad del agua es alta, en zonas
donde se presenta una excesiva exposicin al sol y en sistemas con limitacin de de
nutrientes (Chisti, 2007, 2008). Sin embargo, es difcil que mediante este modo de
cultivo se obtenga una alta densidad de biomasa algal debido a que el continuo
incremento de biomasa en los cultivos o reactores

disminuye la capacidad de

penetracin de luz siendo un factor importante en el control de cultivos (Chen y Johns,

1991, 1995). El auto-sombreado puede causar una insuficiencia en la asimilacin de la
luz lo que conduce a bajo consumo de nutrientes y consecuentemente una menor
productividad de lpidos por unidad de biomasa algal (Martinez y Orus, 1991;
Borowitzka, 1994).

Por otra parte, en cultivos hetertrofos en donde la asimilacin de la luz es nula los
azucares y los cidos orgnicos funcionan como fuente de carbn a diferencia del CO2
obtenido de la atmsfera en condiciones autotrficas. Este tipo de cultivo elimina la
necesidad de la luz y por lo tanto ofrece la posibilidad de aumentar considerablemente
la densidad y productividad celular para algunas especies de microalgas (Chen, 1996).
Existen algunas microalgas que pueden crecer tanto en condiciones auttrofas como en
condiciones hetertrofas mediante el uso de fotoperodos (periodos de luz/obscuridad),
de tal forma que el sistema de cultivo es de tipo mixotrfico. Esto quiere decir, que en
condiciones heterotrficas las microalgas asimilan los compuestos orgnicos como

fuente de carbono liberando CO2 cuando estas llevan a cabo el proceso de respiracin,
as mismo, el CO2 liberado es nuevamente asimilado por las microaglas como fuente de
carbono durante las condiciones auttrofas. Cabe mencionar que los cultivos
mixotrficos rara vez se utilizan en la produccin de aceite de microalgas y es un rea
poco explorada en la tecnologa algal (Chen et al., 2011).
Esta capacidad de las microalgas tambin ofrece una oportunidad para los cultivos
en aguas residuales, obtenindose un doble beneficio: tratamiento del agua y produccin
de biomasa que podra ser evaluada en cuanto a su composicin bioqumica, la cual
puede estar sujeta debido a las variaciones en el contenido de nitrgeno en los efluentes.

El cultivo de microalgas se utiliza algunas veces como un tratamiento terciario de

aguas residuales urbanas para eliminar nutrientes inorgnicos residuales provenientes
del tratamiento secundario dado que las microalgas presentan la habilidad para usar
nitrgeno y fsforo inorgnico para su crecimiento, adems de tener la capacidad de
remover metales, tales como: Cu, Ni, Pb, Fe, Zn, CH3-Hg, que pueden ser encontrados
en sistemas marinos contaminados y aguas residuales (De la Noe et al., 1992;
Pickhardt et al., 2002), as como su eficiencia para reducir la demanda bioqumica de
oxgeno (Caldwell, 1946). La ventaja de este aprovechamiento es que no se genera una
contaminacin adicional cuando la biomasa es cosechada, haciendo ms atractivo los
sistemas de tratamiento algal que los sistemas terciarios convencionales de tratamiento
biolgico. Los nutrientes presentes en

el agua residual o medios de cultivos

convencionales son asimilados por las microalgas e incorporados para la formacin o

produccin de protenas, carbohidratos y lpidos, estos ltimos son de gran inters desde
el punto de vista de produccin de bioenergticos. Por lo tanto, las clulas con alto
contenido de lpidos y baja concentracin de carbohidratos y protenas tiene un elevado
valor para la produccin de bioenerga (Scragg et al., 2002).

Existe un gran reto cuando tratamos de maximizar la produccin de aceite en las

algas y es un hecho que una alta concentracin de aceite es alcanzado nicamente
cuando las algas estn sometidas en condiciones de estrs, principalmente como las
restricciones de nitrgeno y fsforo (Li et al., 2008a; Reitan et al., 1994) as como
condiciones donde existen altas concentraciones de salinidad y hierro (Liu et al., 2008;
Rao et al., 2007). Sin embargo, se ha observado que mientras la concentracin de
lpidos puede llegar a incrementar significativamente en condiciones de limitacin de

estos nutrientes, la tasa de crecimiento o produccin de biomasa es reducida lo cual no

es redituable cuando se pretende tener una alta productividad de aceite.
Es evidente que el aprovechamiento de las microalgas para la mitigacin de CO2 y
tratamiento de aguas residuales, as como el aprovechamiento de la biomasa tendra una
oportunidad en un anlisis integral del proceso de produccin de biocombustibles, es
por esta razn, que el presente proyecto de tesis tiene como principal inters el
aprovechamiento de la biomasa algal generada de cultivos en agua residual urbana
como una alternativa bioenergtica.

La idea de usar microalgas como una fuente de combustible no es nada nuevo pero
ahora est tomando ms seriedad por el precio en aumento del petrleo, y ms
significativamente, por la preocupacin del calentamiento global asociado con la quema
de combustibles.

2. ANTECEDENTES
Varios estudios han reportado que muchas microalgas autotrficas, tales como
Chlorella vulgaris, Botryococcus braunii, Navicula pelliculosa, Scenedesmus acutus,
Crypthecodiium cohnii, Dunaliella primolecta, Monallanthus salina, Neochloris
oleabundans, Phaeodactylum tricornutum, y Tetraselmis suecica pueden acumular
lpidos (Chisti, 2007; Liang et al., 2006). Estas y otras especies de microalgas presentan
diferentes habilidades para producir aceite y dependen de las condiciones de cultivo,
tales como temperatura, intensidad, calidad de luz, pH, salinidad, minerales, fuentes de
nitrgeno y edad del cultivo.

Illman et al. (2000) reportaron que la limitacin de nitrgeno puede incrementar el

contenido de lpidos en las cepas de Chlorella. Por su parte, Reitan et al. (1994),
observaron que la limitacin de nitrgeno favorece el incremento del contenido de
lpidos en algunas cepas como Chlorella emersonii (63%), C. miutissima (56%), C.
vulgaris (59.7%), C. luteoviridis (28.8%), C. capsulata (11.4%), y C. pyrenoidosa
(29.2%). Sin embargo, Liu et al. (2008) sugieren que la concentracin de otros
nutrientes como la del Fe+3 afecta en la acumulacin de lpidos, por lo que sera
favorable estudiar ms a detalle este ltimo en las aguas residuales.

Elvira-Antonio et al. (2010) reportaron que bajo condiciones auttrofas el contenido

de lpidos para Chlorella vulgaris no mostr diferencias significativas a diferentes
concentraciones de nitrgeno (30, 15 y 10 mg N-NH4 l-1), alcanzndose el 69.31, 63.35
y 67.70 % de lpidos de la biomasa peso seco, respectivamente. De tal forma que una
densidad celular mxima de 21.80 x106 cel ml-1 obtenida con 30 mg N l-1 (similar
concentracin al obtenido en efluentes de aguas residuales urbanas) y comparado con
cultivos de 15 y 10 mg N l-1, sugiere que una previa aclimatacin de los cultivos a una
concentracin limitada de dicho nutriente se puede alcanzar un alto contenido de lpidos
y densidad celular.

Estos efectos limitantes se pueden encontrar en las aguas residuales debido a sus
caractersticas complejas. Experiencias obtenidas han mostrado que Chorella vulgaris y
Scenedesmus obliquus pueden desarrollarse adecuadamente en aguas residuales urbanas
(Ruiz-Marin et al., 2010). Sin embargo, un factor que no es controlable es el contenido

de nitrgeno y carbn orgnico, dado que esto est en funcin de las condiciones de
operacin de la planta de tratamiento, configuracin del reactor biolgico y actividad
bacteriana. Como resultado de la naturaleza de las aguas residuales la concentracin de
nutrientes puede variar en funcin a la eficiencia de operacin de la planta. Por lo tanto,
en trminos de disposicin de amonio, las aguas residuales urbanas presentan una
mayor concentracin promedio a diferencia de las aguas residuales artificiales en las
cuales las microalgas han sido capaces de adaptarse a la variacin de nutrientes.

Como se ha mencionado, la disposicin de la luz en los cultivos auttrofos es una de

las variables fundamentales para el crecimiento de las microalgas, sin embargo, en
ausencia de esta, las microalgas pueden llevar a cabo una actividad celular que
proporciona no solo una productividad de biomasa sino tambin un alto contenido de
aceite celular (Miao y Wu, 2006; Xu et al., 2006; Li et al., 2007)

Estepen y Hoering (1981) reportaron que Chlorella vulgaris puede crecer en

condiciones de luz y obscuridad, hacindola una microalga del tipo mixotrfica. Por su
parte, Liang et al. (2009) reportaron una tasa de crecimiento menor o mayor, mas
adelante dices que su densidad celular fue mayor de esta microalga en condiciones
hetertrofas que en condiciones auttrofas. Reportaron que la presencia de glucosa
(peptona) en obscuridad como fuente de carbn produce un efecto significante en la tasa
de crecimiento celular alcanzando una densidad mxima de biomasa de 2g l-1 y un 21%
en el contenido de lpidos con el 1%w/v de glucosa. Sin embargo, en modo autotrfico,
la densidad de biomasa fue ms baja (0.25g l-1) comparada con el modo heterotrfico y
con una cantidad de lpidos mayor (38%) cuando se someti a limitacin de NO3.
Demostraron que una dosis baja de glucosa (1 y 2%) mejora significativamente la
produccin de biomasa comparada con dosis altas (5 y 10

No obstante, existen algunas microalgas como la Nannochloropsis sp. (Hu y Gao,

2003) que pueden crecer bajo condiciones mixotrficas pero que no que son capaces de
consumir la glucosa como fuente de carbono.

Por otra parte, Ho et al. (2010) reportaron que bajo condiciones autotrficas
Scenedesmus obliquus alcanz una densidad celular mxima de 3.51 g l-1 en un medio
enriquecido con 10% de CO2 alcanzando el 38.9% de lpidos despus de someter a la

microalga bajo condiciones limitantes. Mientras que bajo diferentes periodos de luz y
obscuridad simulando diversas pocas del ao (verano 14/10 e invierno 10/14)
obtuvieron una densidad celular mxima de 2.033 g l-1 y 1.296 g l-1, respectivamente, lo
cual sugiere que un mayor tiempo de iluminacin favorece al crecimiento celular y
contenido de lpidos.

Bajo todo este contexto, la biomasa algal puede ser producida a travs de cultivos
autotrficos en tanques abiertos,

o en fotobioreactores, ambos mediante una

asimilacin de luz como fuente de energa. Alternativamente, tambin puede ser

producida mediante cultivos heterotrficos o mixotrficos usando compuestos
orgnicos como fuente de carbono. A pesar de esto, no existe un mtodo efectivo de
cultivo para alcanzar una mxima densidad celular debido a todos los factores que
intervienen durante el crecimiento. Sin embargo, es un hecho que la incorporacin de
las aguas residuales como medio de cultivo resulta econmicamente atractiva dado a los
bajos costos de produccin que esta implica.

Por tal motivo, dada a la experiencia obtenida y la gran versatilidad que han
demostrado Chlorella vulgaris y Scenedemus obliquus como materia prima, sera
conveniente evaluar ambas microalgas bajo condiciones autotrficas y mixotrficas
usando como medio de crecimiento aguas residuales urbanas para determinar las
condiciones idneas para el incremento de lpidos de la biomasa algal y proponer
dicho proceso como alternativa de biocombustible.

2.1 Objetivos

2.1.1 Objetivo general

Evaluar la acumulacin de lpidos de Chorella vulgaris y Scenesdemus obliquus
en cultivos libres bajo condicin auttrofa y mixotrofica en cultivo por lote en agua
residual Urbana con limitacin de nitrgeno.

2.1.2 Objetivos especficos

1. Evaluar la produccin de biomasa y acumulacin de lpidos por Chorella
vulgaris y Scenesdemus obliquus cultivadas por lotes en agua residual
artificial y agua residual urbana con limitacin de nitrgeno en condiciones
auttrofas y hetertrofas.

2. Evaluar la composicin del aceite acumulado por Chorella vulgaris y

Scenedesmus obliquus por cromatografa de gases.

2.2. Hiptesis

Mediante el cultivo de microalgas en agua residual con limitacin de nitrgeno

en reactores bajo condiciones mixotrficas se puede alcanzar un mayor contenido de
lpidos comparado con cultivos auttrofos, ya que durante periodos de luz y obscuridad
la microalga entra en un estado de estrs logrando un aumento en la acumulacin de
lpidos.

3. MATERIALES Y MTODOS
Para el desarrollo de la parte experimental se seleccionaron las microalgas
Chorella vulgaris y Scenedesmus obliquus por ser microalgas con gran versatilidad en
el estudio de obtencin del biodiesel. Las dos microalgas se cultivaran bajo las mismas
condiciones evaluando diversos tratamientos los cuales sern sujetos a comparacin y
anlisis

mediante la extraccin y caracterizacin de

lpidos soportados con la

informacin experimental de las rutinas de cultivo (densidad celular, remocin de

nutrientes, carbono orgnico y demanda qumica de oxigeno). La finalidad de evaluar a
las microalgas con diversos tratamientos es de estandarizar una rutina de cultivo
apropiada para alcanzar el mximo contenido de lpidos, ya que como se ha
mencionado, estos son de gran de gran inters para la produccin de energticos.

En la Figura 1, se esquematiza un diagrama general para el desarrollo

experimental del proyecto, el cual se explica mejor con la informacin detallada
brindada

Obtencin de las microalgas

Rutina de Cultivo:
Aclimatacin y mantenimiento
Cultivo de clulas libres en
fotobioreactores
Cultivo por lotes con
limitacin de Nitrgeno
Agua residual artificial
(control)
Luz
continua

Luz /
obscuridad

Agua residual
urbana
Luz continua

Luz /
obscuridad

Evaluacin de: densidad celular, remocin de nutrientes,

carbn orgnico y demanda qumica de oxigeno
Extraccin y caracterizacin de lpidos
Figura 1. Diagrama de flujo experimental

3.1. Obtencin de microalgas

Las cepas de Chlorella vulgaris y Scenesdemus obliquus se obtendrn de
ceparios de microalgas de Centros de Investigacin Cientfica Nacional; cabe
mencionar que ya se cuenta con la cepa de Chlorella vulgaris y Scenesdemus
obliquus obtenida del cepario de microalgas del Centro de InvestigacinCICESE. Se seleccionaron dichas cepas por presentar una mayor tasa de
crecimiento en agua residual artificial y medios comerciales. Estas microalgas
parecen ser buenas opciones para la produccin de biodiesel y aunque otras
especies son tan eficientes y productivas como estas microalgas, se necesita
tener la seleccin de las especies ms adecuadas para tomar en cuenta otros
factores como: la habilidad para desarrollarse usando nutrientes disponibles en
las aguas residuales o bajo condiciones ambientales especificas.

3.2 Rutina de cultivo

Las dos especies de microalgas sern cultivadas en un medio de agua

residual artificial preparado con las siguientes concentraciones: 7 mg l-1 NaCl; 4
mg l-1 CaCl2; 2 mg l-1 MgSO4.7H2O; 15 mg l-1 KH2PO4; 230 mg l-1 NH4Cl; 15
mg l-1 K2PO4. As mismo, se agregaran metales traza y vitaminas en referencia a
las concentraciones descritas del medio f/2 por Guillard y Ryther (1962). Cada
especie de microalga se mantendr en un medio de agua residual artificial estril
para su aclimatacin en laboratorio en matraces de 250 ml Pyrex a 251 oC con
iluminacin continua con lmparas de luz fra blanca fluorescente. La finalidad
de cultivar ambas cepas en matraces con medio artificial es el de crear un banco
de cepas del cual se tomaran inoculos para el cultivo de clulas libres. Se
realizarn rutinas de transferencia con medio artificial fresco cada 6 das en
matraces de 250 ml. Esta rutina se mantendr durante todo el desarrollo de la
tesis.

3.3 Cultivo de clulas libres

Una vez aclimatadas, se transferirn a reactores con un medio de agua

residual artificial preparado con las concentraciones previamente mencionadas

10

para la produccin y cosecha de biomasa (reactor inculo) que se emplearn en

posteriores

experimentos.

Los

reactores

son

recipientes

cerrados

de

polietilentereftalato (PET) de 3 litros (L) con volumen de operacin de 2.5 L. El

aire de agitacin ser proporcionado por un compresor. El dispositivo difusor de
aire se colocar a 1 cm de la base de la del reactor.

3.4 Cultivo por lote con limitacin de nitrgeno

Del reactor inculo se cosechar un volumen de cultivo de

aproximadamente 2 x 106 clulas ml-1 determinado por conteo en cmara
Neubauer Hematocitmetro de 0.1 mm de profundidad. Las clulas cosechadas
de Chlorella vulgaris y Scenedesmus obliquus se transferirn cada una a cuatro
reactores por triplicado con agua residual artificial con una concentracin inicial
de N de 90 mg l-1 y un volumen de operacin de 1 lt, posteriormente, al final del
periodo

de

cultivo

cuando

la

concentracin

de

nitrgeno

presente

aproximadamente el 95% de remocin (5 a 6 das, aproximadamente), se

transferir el cultivo a reactores con concentraciones de N de 30, 20 y 10 mg l-1
con dilucin e incorporacin de medio fresco manteniendo el volumen de
operacin de 2 Lt.
Para los tratamientos de luz continua se adicionar CO2 del 10% v/v a
cada uno de los reactores. As mismo, para los tratamientos de luz/obscuridad
(12/12 h) se preparar un medio de agua residual artificial con adicin de
glucosa y peptona con una concentracin de 100 y 150 mg l-1, respectivamente.
Se realizar el mismo procedimiento en un medio de agua residual
urbana obtenida de la planta de tratamiento secundario de la Villa Universitaria
de la Universidad Autnoma del Carmen. Se le harn anlisis fisicoqumicos al
agua colectada de la planta para determinar si cumple con las caractersticas
necesarias para el desarrollo de los cultivos. Cabe mencionar que al agua
residual urbana obtenida no se le agregaran ninguno de los reactivos
previamente mencionados para los tratamientos de luz continua y fotoperiodos.
Para todos los tratamientos se colectarn muestras de agua cada 12 hrs
para determinar la tasa de remocin, as como el incremento de la densidad
celular, carbn orgnico, demanda qumica de oxigeno y biomasa producida.

11

3.5 Produccin de biomasa y densidad celular

Para la determinacin de biomasa, evaluada como peso seco, 25 ml de

cultivo del reactor control sern filtrados a travs de filtros de fibra de vidrio
GF-C (47 mm dimetro) previamente incinerados a 450C en mufla (Istotemp
Fisher Scientific) durante 3 horas. Posterior a la filtracin, los filtros con la
muestra de microalgas sern colocados en una estufa (Fisher Scientific Isotemp)
hasta obtener peso seco constante a 120C durante 2 horas y colocados en un
desecador por 2 horas. La diferencia de peso determinar la biomasa peso seco
(g l-1).
La densidad celular se determinar por conteo en cmara Neubauer
Hematocitmetro de 0.1 mm de profundidad cada 12 horas de cultivo para todos
los tratamientos.

3.6 Remocin de nutrientes; carbn orgnico y demanda qumica de

oxigeno (DQO).

La remocin de nutrientes se determinar mediante la tcnica NMX-AA026-SCFI-2001 para anlisis de nitrgeno total Kjendahl evaluando nicamente
al N en su forma amoniacal (NH4-N). Para la determinacin de la DQO se
analizar usando el mtodo Hach nmero 8000, determinacin de alto rango
(TNT822, 20-1500 mg/L COD). De igual forma el carbn orgnico se
determinar por Hach usando el mtodo 10173, MR (15 a 150 mg/L C) de
Carbn Orgnico Total.

3.7 Extraccin y Caracterizacin de Lpidos.

Para el anlisis de lpidos, las microalgas se cosecharn despus de

finalizar el periodo de cultivo de los tratamientos previamente seleccionados
(auttrofo y hetertrofo). El volumen del cultivo se centrifugar a 10,000 rpm,
20C minutos en tubos falcn y el concentrado se colectar para ser liofilizado,
esta muestra representar biomasa seca para su posterior extraccin. La
extraccin de lpidos se realizar por el mtodo Blight y Dyer (1959) que

12

consiste en una extraccin de mezcla de cloroformo-metanol-agua, seguida de

una evaporacin a 45C y una segunda extraccin con una solucin de
dicromato acido al 2% sometida a calentamiento a 100C durante 15 min.

Para la caracterizacin, se realizar una modificacin de la tcnica de

extraccin Blight y Dyer (1959) usando hexano. La muestra obtenida se llevar
al cromatgrafo Agilent Technology 7890 A con detector de ionizacin de flama
(FID), inyector capilar split/splitless y columna capilar de 60 m SE-54 (320 m
d.i.)

13

4. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
Meses

Actividad

II

III

IV

VI

VII

VIII

IX

XI

XII

Aclimatacin de cepas a concentraciones

bajas. Monitoreo de la cintica de
crecimiento algal.
Aclimatacin de cepas con aumento de
nitrgeno. Monitoreo de la cintica de
crecimiento.
Cultivo

de

clulas

escalamiento

de

libres

con

Nitrgeno

en

Fotobioreactores
Evaluar la produccin de biomasa y
acumulacin de lpidos por Chorella
vulgaris

Scenesdemus

obliquus

cultivadas por lotes en agua residual

artificial y urbana con limitacin de
nitrgeno en condiciones auttrofas y
hetertrofas.
Extraer y evaluar la cantidad de lpidos
para Chorella vulgaris y Scenesdemus
obliquus.
Redaccin de Tesis.

14

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