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2. MATERIAL Y METODOS
2.1. Seleccin de las piscinas De entre las piscinas existentes en Santa
Cruz de PERU, hemos escogido las que registran mayor afluencia de baistas
durante todo el ao. En la tabla 1 se resumen las caractersticas ms
importantes de cada uno de los vasos, del agua de llenado, tratamiento de la
misma y uso al que se destinan. El agua de llenado de la piscina A, procedente
de la red de abastecimiento pblico, es sometida a una desinfeccin por
cloracin y filtracin por arena con una duracin por ciclo de 9 horas; sin
embargo, en la piscina B el agua, captada del mar, no se somete a tratamiento
alguno, simplemente se realiza el vaciado y llenado cada 3 das,
respectivamente.
TABLA1
Caractersticas del vaso, agua de llenado, tratamiento y uso de las piscinas
estudiadas
Piscina
A
B
Forma
del Vas0
Olmpic
o
Irregular
s* (mZ)
600
3
.
10^4
Fuente
de agua
Pblica
Mar
Tratamient
o del agua
Cloracin
Filtracion
--------------
C**
uso
900
P***
(m)
2,60
1. 10^3
1,70
Recreativ
o
Deportivo
2.2 MUESTREO
Se procesaron un total de 60 muestras, recogidas en botes estriles de boca ancha de
1000 ml de capacidad. Previamente a la esterilizacin y a aquellos destinados a la
toma de muestras de agua clorada, se les aadi una cantidad de tiosulfato sdico
(Na,S,OJ de tal manera que la concentracin final fuera de 100 mg/l 4
Para la determinacin de aerobios totales se emple el recuento en placa, utilizando
dos medios de cultivo (tabla 2): PCA (Oxoid CM 463) y el R2A4, Al medio utilizado
para el estudio de los coliformes totales y fecales, Tergitol-7 agar (Scott 4900-4510), se
le aadi 1 ml de cloruro 2,3,5-trifeniltetrazlico al 1% (Difco 3112-67-9) por litro.
El aislamiento y recuento de estreptococos fecales se realiz sobre KF-Streptococtus
agar (Oxoid CM 701).
o
a) Tubos mltiples (tabla del N&JP 3-3- 3), usando como medio presuntivo el
mStaphylococcus broth (Difco 0649-01-6) adicionado de 0,049 mg de azida sodica y,
como medio de confirmacin, el Lipovitellin Salt Mannitol agar 4.
b) Filtracin por membrana, con incubacin sobre Baird-Parker medium (Oxoid CM
275) para el recuento de Staphylococtus spp.
a) Filtracin por membrana con incubacin sobre Pseudomonas Isolation agar (Difco
0927-01-9) y Cetrimide Agar Base (Difco 0854-02-5).
b) Tubos mltiples (Tabla del NMP 5- 5-5) con caldo de asparragina como medio
presuntivo y medio de acetamida inclinado como confirmativo 4.
o
La membrana filtrante se lav con lo-15 ml de agua destilada estril. El agua de lavado
se someti a descontaminacin, segn la tcnica de Tacquet-Tison 6. El sedimento
resultante se transfiri, mediante pipeta Pasteur estril, al medio de cultivo Lowenstein
Jensen (Difco 0444-01-3). Las colonias desarrolladas en este medio que manifestaron
cido alcohol resistencia (Tincin de ZielhNielsen) 7, se incubaron durante 7 das en el
medio Dubos Broth Base (Difco 0385-17-6) y durante el tiempo necesario para
crecimiento positivo en Dubos Oleic Agar Base (Difco 0373-17). Este ltimo medio nos
permite visualizar la morfologa y pigmentacin de las colonias.
A continuacin al crecimiento en Lowenstein Jensen y en Dubos Broth Base, se le
realizaron las pruebas bioqumicas especficas para la determinacin de la especie
micobacteriana 8.
Para el anlisis estadstico de los resultados se utiliz un programa estadstico que
permitiera el clculo de los coeficientes de correlacin, el valor de la t-student y la
significacin.
3. RESULTADOS
3.1. Determinaciones fisicoquimicas
En la Tabla 3 se representan las medias aritmticas y el rango de los parametros
fisicoqumicos determinados para las dos piscinas estudiadas.
3.2. Determinaciones microbiolgicas
Se han encontrado diferencias significativas entre los recuentos de Aerobios mesfilos
totales realizados sobre P.C.A. y R2A en ambas piscinas (Tabla 4). Basndonos en
estos resultados los recuentos de Aerobios mesofilos totales estarn referidos a los
realizados sobre el medio R2A.
TABLA3
Media e intervalo de variacin de los parmetros fisicoqumicos determinados
TABLA4
Comparacin de los resultados obtenidos para recuento de Aerobios mesfilos
totales sobre P.C.A. y R2A
INTERPRETACION DE RESULTADOS
FIGURA 1
Distribucin de los recuentos de Aerobios mesfilos totales en tas 60 muestras
de agua procedentes de las dos piscinas A Y B
En la figura 1 se representa
el nmero de muestras que
se
encuentran
en
los
distintos intervalos indicados
para ambas piscinas. Como
puede observarse la mayor
parte de las muestras se
encuentran por encima de las
200 UFC/ml para las dos
piscinas,
destacando
la
piscina B por un mayor
nmero de muestras, con
recuentos superiores a las
300 UFC/ml.
FIGURA 2
Distribucin de los recuentos de Coliiormes totales y fecales en Ias 30 muestras
de agua procedentes de ia piscina B
Ninguna de las muestras
procedentes de la piscina A
ofreci recuentos positivos
de Coliformes totales o
fecales. La distribucin de los
recuentos encontrados en las
muestras correspondientes a
la piscina B se presenta en la
figura 2.
FIGURA 3
Distribucin de los recuentos de Estreptococos fecacales en las 30 muestras de
agua procedentes de la piscinas B.
En la figura 3 se puede
observar
el
nmero
de
muestras que presentaron
contaminacin
por
Estreptococos fecales para la
piscina B. En el caso de la
piscina Ano se encontr
presencia de Estreptococos
fecales en ninguna muestra de
las analizadas
FIGURA 4
Distribucin de los recuentos de Staphylococcus ssp p. en Ias 30 muestras de
agua procedentes de la piscina A.
FIGURA 5
Distribucin de los recuentos de
Sthaphylococcus spp. y St. uureus
en las 30 muestras de agua
procedentes de la piscina B.
Los
recuentos
de
Staphylococcus spp. fueron
mayores de 1 UFC/lOO ml
para 26 de las 30 muestras
tomadas de la piscina B. De
estas en un 88,5 % se aisl
la especie St. aureus.
La distribucin de los
recuentos
para
ambas
determinaciones
se
representa en la figura 5.
INTERPRETACION GENERAL:
No se aisl la especie Pseudomonas aeruginosa en ninguna de las muestras
analizadas y por ninguno de los mtodos analticos empleados. En 4 de las muestras
procedentes de la piscina Ase aisl el gnero Mycobacterium, identificndose la
especie M. chelonae subsp chelonae en dos de las muestras. Las otras dos especies
identificadas fueron M. vaccae y M. aurum. No se demostr la presencia de este gnero en las muestras provenientes de la piscina B.
MATERIALES Y MTODOS
El estudio se realiz en el municipio de Guaimaca en el departamento de Francisco
Morazn. Guaimaca colinda al norte con los municipios de Orica, San Ignacio y
Guayape, al Sur con los municipios de Teupasenti y San Juan de Flores, al este con
los municipios de campamento y concordia y al Oeste con los municipios de Talanga y
Cedros. Tiene una extensin territorial de 7,461 Km2 y una poblacin de 29,004
habitantes segn el Sistema Nacional de Informacin Municipal (SINIMUN).
RESULTADOS
PARAMETROS BACTERIOLOGICOS
En los resultados obtenidos se observa que todos los valores estn por encima del
valor mximo permisible de 3 UFC/100 ml de agua que ser sometida a procesos de
tratamiento. El valor ms alto encontrado fue en la fuente de agua de la microcuenca
la Marmajosa 380 UFC Totales y 360 UFC fecales.
Temperatura
RESULTADOS
PARMETROS FISICOQUMICOS
o Turbidez
Los resultados de los anlisis mostraron que 4 de las muestras analizadas estaban
fuera de norma, el valor ms alto encontrado fue de 250 UNT en la quebrada la
Marmajosa debido al arrastre de sedimentos de las laderas ya que por los niveles altos
de precipitacin hay prdida de suelos por escorrenta. El ms bajo de 0.58 UNT en la
quebrada el Destino. Se observa, como es de esperarse, valores de turbiedad
relacionados con las condiciones hidroclimticas durante el periodo de estudio y las
condiciones de manejo de las microcuencas.
Turbidez en UNT obtenida en los anlisis realizados en el perodo de muestreo
Conductividad Elctrica
Los resultados obtenidos estaban por debajo del mximo permisible siendo el valor
ms alto de 198.4 S/cm en la quebrada el Destino debido a las actividades agrcolas
de la zona que demanda el uso de sales minerales en los fertilizantes sintticos y al
arrastre de sedimentos y otros materiales en suspensin. El nivel ms bajo encontrado
fue de 59.2 S/cm. Cuadro 4.
Datos de conductividad elctrica en S/cm obtenidos en anlisis realizado en el
perodo de muestreo
1. PROCEDIMIENTO
FSICOQUMICO.
DE
TOMA
DE
MUESTRA
PARA
ANLISIS
1.1.6
TIPO DE
FRASCO
CANTIDAD PRESERVACIN
MINIMA
DE
MUESTRA
(ml)
TIEMPO
MXIMO DE
ALMACENAJE
P, V
P, V
P, V
P, V
V
V
P, V
P, V
P, V
P, V
200
250
100
200
250
250
50
50
1000
100
48 horas
24 horas
30 min.
28 das
24 horas
24 horas
48 horas
28 das
24-30 horas
7 das
Dureza
Escherichia
Fluoruros
Metales
P, V
V
P
P
200
250
100
1000
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
No requiere
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C,
pH<2
Agregar
ac.
Sulfrico 1ml/l
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C,
pH<2
Agregar
ac.
Ntrico c1ml/l
28 das
24 horas
28 das
30 das