CAMINO A LA IDENTIFICACION DE LEVADURAS

Una de las tareas fundamentales de la microbiologa es la aplicacin de una

metodologa precisa que permita la identificacin de los microorganismos
implicados en procesos clnicos asociados a infecciones o de aquellos que tienen
relacin con el hombre como lo es en el campo de la industria; un claro ejemplo de
estos microorganismos son los hongos que cumplen diversas funciones
importante como lo es transformar la materia orgnica en materia inorgnica para
mantener el equilibrio en los ecosistemas; dentro de este gran grupo o reino se
encuentran las levaduras que son un tipo de hongos microscpicos unicelulares
importantes por su capacidad de realizar el proceso de fermentacin de diversos
compuestos orgnicos como lo son azcares o hidratos de carbono, produciendo
distintas sustancias que sean utilices para otros seres vivos y generando
asociaciones de benfico mutuo e individuales, estas al formar parte de la
microbiota de la piel y mucosas son las causantes de muchas infecciones que son
provocadas por una variedad de especies razn por la cual es indispensable
utilizar una tcnica capaz de identificar el agente causante para dar un diagnstico
preciso y eficaz. Segn Linares, y Col; 2007 existen una serie de mtodos para
llevar a cabo este proceso en los cuales se debe tener en cuenta cuatro criterios y
que son complementarios entre s: morfolgicos, inmunolgicos, genticos y
bioqumicos, este ltimo se basa en la utilizacin de medios cromognicos
teniendo en cuenta pruebas enzimticas y de asimilacin de nutrientes que se
caracterizan por ser mtodos rpidos y especficos, pues permiten
identificar el agente a partir del cultivo primario con la particularidad de no
requerir mucha experiencia tcnica.
Actualmente estas pruebas bioqumicas se emplean en diferentes reas, desde la
clnica hasta la industria, donde ofrecen mejora al momento de eliminar la
necesidad del subcultivo, evitando as; que un cultivo se contamine durante la
resiembra, puesto que la levadura puede sufrir cambios genticos y bioqumicos
as mismo economiza tiempo y dinero, debido a que se lograra omitir la
elaboracin de numerosas pruebas bioqumicas.

El fundamento de estas pruebas se basa en la localizacin de determinadas

actividades enzimticas por parte de las levaduras al realizar el proceso de
hidrlisis de un sustrato cromognico en presencia de un indicador de la enzima
que al actuar sobre estos sustratos genera en ellos un cambio en su estructura, la
cual se evidencia por un cambio de color en el medio producido por una variacin
de pH para facilitar el proceso de identificacin ya sea segn el tipo de azcar
capaz de fermentar.

En estos ltimos aos se ha promovido el uso de pruebas enzimticas y de

asimilacin de nutrientes, mtodos que resultan muy atractivos por la sencillez y
rapidez con la que, segn los fabricantes, se obtiene la identificacin a nivel de
especie (Cortes, et. Al. 2010), estos resultados pueden ser ledos en forma visual
o automtica a travs de un Software convirtindola en una herramienta de
identificacin fcil de usar gracias a la rapidez con que se manipulan las pruebas y
a la fiabilidad de los mismos. Adems las pruebas bioqumicas permiten
determinar las caractersticas metablicas de las levaduras que estn en objeto de
identificacin, algunas de estas pruebas son tcnicas rpidas, ya que evalan la
presencia de una enzima preformada y su lectura vara entre unos segundos hasta
unas pocas horas. No obstante, algunas de estas pruebas pueden realizarse de
forma rpida tras incubacin de unas 2-6h; en general, se trata de reacciones
enzimticas cromognicas o pruebas convencionales modificadas. Otras pruebas
requieren para su lectura el crecimiento del microorganismo con una incubacin
previa de 18h a 48h; a este grupo pertenecen la mayora de las pruebas que
detectan componentes metablicos o aquellas que determinan la sensibilidad de
un microorganismo a una sustancia dada tras cultivo en medios de identificacin
que contienen el sustrato a metabolizar.
Asimismo estas pruebas tienen la particularidad de ser fcilmente asequible por
profesionales y tcnico debido a la comodidad de sus costos y porque se
encuentran ampliamente distribuidas en el mercado generado en ellas un alto nivel
de confiabilidad y seguridad, adems no requieren de una infraestructura tan
especializada por lo que pueden ser utilizadas en laboratorios convecionales a
diferencia de otras pruebas que son ms complejas que requieren de aparatos
ms especializados y son ms utilizados en laboratorios de investigacin; entre
las desventajas que pueden generar se encuentran la interpretacin de los colores
por parte del operador. Sin embargo con respecto a esto ltimo se han
desarrollado equipos que facilitan la lectura de las placas como lo afirma Cuical,
2011.

Los laboratorios deben elaborar y realizar un proceso de identificacin en su

actividad diaria, que utilice de forma secuencial o simultanea un conjunto de
pruebas cuyo propsito final sea la identificacin del microorganismo a nivel de
gnero y especie y que incluya la mayora de las levaduras desde el punto de vista
infeccioso.
Por lo anteriormente sealado,
es importante destacar que
actualmente, se disponen una serie de pruebas bioqumicas que permiten la
identificacin presuntiva de levaduras provenientes de muestras clnicas e
industriales constituyendo una herramienta de ayuda en el diagnstico
microbiolgico, que permiten no slo diferenciar las especies , sino tambin,
establecer la implementacin de un tratamiento y procedimiento adecuado. Sin
embargo, cabe sealar que estas pruebas no requieren de una gran experiencia
tcnica para la interpretacin de las mismas siendo estas rpidas, especficas y
fcil de usar.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
Fernndez, A., Garca, C., Antonio, Valdezate, S. (2010). Procedimientos en
microbiologa clnica. Pruebas Bioqumicas. Cap. 2.4.4 PP 8.
Corts A., et al. Sensibilidad y especificidad entro dos medios cromogenicos
para la identificacin de candida spp. 2010; 30(3): 78-82

Linares, Sicilia, Sols, F, (2007). Gua Prctica de Identificacin y Diagnstico

en Micologa Clnica. Identificacin de levadura, fundamento. Revista
Iberoamericana de Micologa. Cap. 11- PP. 1, 5
Cuaical, (2011). Medios cromogenicos, herramientas para la identificacin
fenotpica y deteccin de mecanismos de resistencia. Captulo Metropolitano
de
la
Sociedad
Venezolana
de
Microbiologa.
Disponible
en
[http://gotasmicrobiologicas.blogspot.com/2011/02/medios-cromogenicos.html]