EVALUACIN DE AGENTES BIOLGICOS

Ing. Vctor Bravo M.

Ing. Marcelo castillo
Ing. Cristian Len
Ing. Edwin Daz
Escuela Politcnica Nacional
Ladrn de Guevara E11-253
Facultad de Ingeniera Mecnica Maestra en Sistemas Automotrices
Quito Ecuador
OBJETIVO GENERAL:
Identificar los distintos mtodos de evaluar los agentes biolgicos en lugares de
trabajo
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
Estudiar los diferentes mtodos de evaluacin de los riesgos biolgicos
Hallar un valor mximo tolerable de accin biolgica y el lmite de exposicin
1.
IDENTIFICACIN Y EVALUACIN DE AGENTES BIOLGICOS EN
LOS LUGARES DE TRABAJO
La investigacin de la exposicin a agentes biolgicos en el lugar de trabajo puede ser
relativamente simple si se conoce la naturaleza de los mismos, o muy compleja en
especial para aquellas actividades en las que la exposicin a dichos agentes no se produce
de forma intencionada como sera el caso de la agricultura, trabajos en unidades de eliminacin
de residuos, tratamiento de aguas residuales,ya que pueden formarse mezclas complejas de
diferentes microorganismos. En estos casos el procedimiento a seguir para la identificacin de
los mismos podra efectuarse utilizando el estudio de indicadores que, de forma gradual (de
globales a individuales), pongan de manifiesto la exposicin a agentes biolgicos:
Indicadores globales (IGL), por ejemplo: recuento total de bacterias u
hongos/levaduras, viables o totales que, mediante determinaciones analticas sencillas y
poco costosas, dan idea de la carga microbiolgica total, permitiendo en su caso la
identificacin de agentes biolgicos.
Indicadores de grupo (IGR), por ejemplo: endotoxinas, enterobacterias,
actinomycetes como grupos homogneos de agentes biolgicos y/o productos derivados
de los mismos.
Indicadores especficos (IES), para lugares de trabajo o tareas concretas est
indicado el estudio de agentes biolgicos o familias especficas directamente
relacionadas con los ya citados lugares investigados.
Indicadores individuales (IIN), para problemas especficos que se hayan
encontrado en relacin con agentes biolgicos concretos puede establecerse, cuando

ello sea posible, una investigacin de especies individuales, por ejemplo Pseudomona
aeruginosa.
En la Tabla adjunta se recoge, a modo de ejemplo, un listado de las actividades laborales y los
parmetros de medicin a examinar.
ACTIVIDAD
LABORAL

POSIBLES INDICADORES ESTUDIADOS

IGL: Bacterias /hongos y levaduras Bacterias;

Plantas de clasificacin IGR: Gram (+), Gram (-), Endotoxinas;
de
residuos slidos/ formadoras de esporas; Actinomycetes;
compostaje
IIN: Aspergillus fumigatus;

Bacterias

IGL: Bacterias;
Plantas de tratamiento
de aguas residuales
IGR:
Eliminacin de residuos

Bacterias

Gram

(+),

IGL: Bacterias, Hongos;

IIN: Agentes biolgicos especficos del proceso, p. ej.:

Biotecnologa

Productos farmacuticos y biolgicos: E. coli k-12

Cephalosporium spp.; Streptornyces spp.; Cultivos
celulares de ovario de hamster;
Penicillium crysogenum
Bebidas alcohlicas: Saccharomyces cerevisae;
S. Ovarium
Enzimas industriales: Bacillus licheniformis; Bacillus
subtilus; A. oryzae; Mucor spp.
Rhizopus spp.; Clostridium spp.
Alimentos:
Streptococcus
termophilus;
Lactobacillus bulgaricus; Penicillium roqaeforti;

Mantenimiento sistemas IGL: Bacterias, Hongos;

de acondicionamiento de
aire / humidificadores / IGR: Actinomycetes, Pseudomonas, Endotoxinas;
IGL:
Bacterias;
Tratamiento de metales Levaduras;
(fluidos de corte)
Enterobacteriaceas;
Descontaminacin
suelos

I-tongos,
IGR:

De IGR: Bacterias Gram (+) y

Gram
(-);
IES:

Ventas
al
mayor/almacenes

por IGL: Hongos;

IIIN: Ag. Biolgicos origen de patologas especficas p. ej.:

Industria forestal

Produccin de alimentos

Manipuladores
Cuidado de la salud

Amebiasis (Entamoeba histolyticum)

Leptospirosis (Leptospyra spp.)

IGL: Bacterias; Hongos;

Levaduras;
IES:
Staphylococcus
spp.;
Coliformes IGL: Bacterias;
Antrax; Brucelosis; Criptosporidosis; Ectima contagiosa;
de Erisipeloide; Hidatosis, Leptospirosis, Psitacosis; Rabia;
IGL: Bacterias; Hongos/ Levaduras;

Fuete: http://www.ehu.es/documents/2458096/2577739/apendice_03.pdf
El estudio de los posibles indicadores propuestos para la evaluacin de los riesgos asociados a
agentes biolgicos implicar, como paso previo, una toma de muestra de los mismos bien
para su determinacin directa como bioaerosoles, bien como contaminantes superficiales o
para la medida cuantitativa de productos, componentes o metabolitos de los agentes
biolgicos cuya concentracin sea representativa de la carga biolgica global a valorar.
Se pueden tomar por lo tanto tres opciones para la medida de agentes
biolgicos:

Mtodos que van a poner de manifiesto el nmero total de agentes y/o el

nmero de microorganismos cultivables, entendiendo como tales aquellos capaces de
formar colonias en un medio de cultivo adecuado.
Mtodos que ponen de manifiesto la presencia de elementos celulares provenientes
de los agentes biolgicos como pueden ser, por ejemplo, las endotoxinas y glucanos
Mtodos que cuantifican metabolitos tanto primarios (por ejemplo: ATP), como
secundarios (por ejemplo: micotoxinas), que pueden servir de marcadores de la
actividad vital de los agentes biolgicos, o encontrarse en los bioaerosoles muestreados.

La limitacin de la metodologa propuesta est en que, en la actualidad, no se disponen de datos

suficientes para establecer de forma fiable relaciones dosisefecto/respuesta para los
bioaerosoles, de modo similar al establecido para los agentes qumicos, por lo que no es
posible el establecimiento de valores lmite ambientales que sirvan como criterio de referencia
en la misma lnea que para los agentes qumicos (VLA, TLV). Para el caso de las endotoxinas s
hay valores de referencia orientativos

A pesar de estas limitaciones consideramos de gran utilidad este tipo de estudios ya que,
adems de dar informacin sobre la naturaleza de los agentes biolgicos (Anexo II), posibilitan
el estudio de situaciones especficas o la comparacin de stas, por ejemplo antes y despus de
la aparicin de quejas o patologas, comparacin de dos sistemas de limpieza, efectividad de un
desinfectante, repercusin de un cambio en el proceso productivo, repercusin de factores
fsicos, identificacin de focos de contaminacin, etc
2.
MTODOS PARA EL MUESTREO DE AGENTES BIOLGICOS
CULTIVABLES Y/O TOTALES
Estn proyectados para determinar la fuente, cantidad e identificacin de agentes biolgicos
transmitidos fundamentalmente por va area
Estn basados en la toma, recuperacin y subsiguiente cultivo de microorganismos. Estos
mtodos pueden ser clasificados de acuerdo con el procedimiento de toma de muestra o el
manejo de la muestra tomada, e incluyen: gravitacin, impactacin, centrifugacin, burbujeo y
filtracin.
2.1 Gravitacin o impactacin natural
Es la forma ms simple de toma de muestra de bioaerosoles, en la cual las partculas biolgicas
aerotransportadas son recogidas sobre una superficie adherente (agar en una placa Petri o
recubriendo un portaobjetos, placas RODAC,) por su capacidad de sedimentar por gravedad.
Es un mtodo econmico, que no necesita equipos auxiliares, si bien ha de tenerse especial
cuidado en donde se colocan dichas placas para evitar corrientes de aire. Las partculas de
mayor tamao pueden estar sobrerepresentadas. Este mtodo no es cuantitativo, es decir, la
muestra no se toma a partir de un volumen conocido de aire, por lo que las pruebas de
intercomparacin son dificultosas. Es un procedimiento til para estudios iniciales y para la
estimacin aproximada de la carga microbiolgica tanto desde el punto de vista cuantitativo
como cualitativo, si se eligen adecuadamente los medios de cultivo
2.2 Impactacin:
El aire, aspirado por una bomba de vaco que forma parte del muestreador, pasa a travs
de un orificio y es dirigido a la superficie del medio de cultivo contenido en una placa
adecuada. Las partculas con suficiente momento de inercia abandonan la corriente e impactan
sobre la superficie. El orificio de entrada puede consistir en una rendija o en un cabezal con un
elevado nmero de orificios de igual dimetro y el medio de recogida puede ser agar sobre una
placa Petri, RODAC o un portaobjetos El caudal de aspiracin vara en el rango de 10 a 180
L/min
Una vez tomada la muestra, y segn sea la naturaleza de los agentes biolgicos a
determinar, la placa se incuba a la temperatura adecuada, producindose el crecimiento
de dichos agentes mediante la formacin de una colonia en el punto de impacto.
Posteriormente se procede al recuento de dichas colonias y al clculo de su nmero referido a
3
un volumen fijo de aire de 1m , a partir de las colonias encontradas en el volumen de aire
3
muestreado, expresndose los resultados habitualmente como ufc/m (unidades formadoras de
colonias en un metro cbico de aire).

La identificacin especfica del agente biolgico supone habitualmente que se proceda a

su resiembra, en medio idneo, y la posterior aplicacin de reacciones de identificacin o
estudios por morfologa directa o tinciones especficas

2.3. Centrifugacin:
Estos muestreadores de impactacin utilizan la fuerza centrfuga para ayudar a la separacin de
las partculas de la corriente de aire de aspiracin. Operan creando un remolino en el cual las
partculas con suficiente inercia dejan la corriente de aire para impactar sobre la superficie
(medio de cultivo) de recogida.
En el RCS Biotest se recoge el aire contra una tira de plstico que soporta una fina capa del
medio agar en el cual impactan las partculas aerotransportadas.
Opera a un flujo de 40 L/min.
Todos los mtodos descritos hasta ahora slo dan informacin de los agentes biolgicos
cultivables, es decir, con capacidad de reproducirse.
En un entorno laboral se est potencialmente sujeto a la exposicin a microorganismos
(cultivables, viables, no viables, que pueden producir tambin riesgos txicos o alergnicos;
formas de supervivencia, como esporas), sus componentes biolgicamente activos o productos
derivados de dichos microorganismos. Interesa por lo tanto la posibilidad de utilizar mtodos
de muestreo ms generales que permitan obtener una informacin ms amplia.
Entre estos mtodos que permiten la medida de agentes biolgicos totales destacan los de
burbujeo o impinger y de filtracin.
2.4 Burbujeo o impinger:
El aire a muestrear pasa a travs de un volumen conocido de lquido (suero salino, agua de
peptona con agentes humectantes, medios lquidos). Las partculas abandonan la corriente de
aire por impactacin en el lquido, quedando retenidas en el mismo. Posteriormente, y en el
medio de cultivo adecuado, se transfiere una alcuota del lquido de captacin, procedindose a
su cultivo, recuento y en su caso a su identificacin (viables o cultivables) (1).
A otra alcuota se adiciona naranja de acridina y se filtra, procedindose al recuento total
(viable y no viable) por microscopa de epifluorescencia directamente sobre el filtro.
La mayora de los muestreadores estn construidos en vidrio, con una cmara simple de
coleccin; por ejemplo, el AGI-30 opera a 12.5L/min. Y el Mini-impinger a 1L/min.
2.5 Filtracin:
El aire es aspirado a travs de un medio de filtracin en el cual las partculas se
depositan.
Su flujo es funcin del tipo de filtro, su tamao y de la bomba de aspiracin, oscilando
habitualmente entre 1-500L/min. El tipo de filtro ms utilizado es el de membrana de

policarbonato ya que las partculas pueden ser removidas fcilmente de su superficie por
agitacin en lquidos adecuados, procedindose a la posterior inoculacin de la suspensin
formada en los medios de cultivos especficos (2).
Un procedimiento similar es aplicable a la cuantificacin e identificacin de agentes biolgicos
presentes en muestras de polvo. Un peso conocido del mismo se extrae adecuadamente
por agitacin vigorosa con suero salino conteniendo 0.01% de Tween 80. Posteriormente se
inocula un volumen conocido en medios de cultivos especficos, procedindose a su posterior
recuento, expresado como ufc/g, y, en su caso, identificacin.
3.

MUESTREO DE SUPERFICIES

Adems del muestreo areo, puede tambin determinarse el nmero de agentes biolgicos
depositados en una superficie. Este tipo de muestreo es utilizado fundamentalmente en estudios
de higiene alimentaria, pero tiene otras aplicaciones como, por ejemplo, comprobar la eficacia
de los productos de desinfeccin o evaluar la presencia de agentes biolgicos en el interior de
los conductos de aire de un sistema de ventilacin/climatizacin, industria de la piel y cuero.
La toma de muestras se hace fundamentalmente mediante el empleo de torundas o por contacto
directo de la superficie a muestrear con una placa RODAC preparada con el medio de cultivo
adecuado y su posterior incubacin e identificacin, en su caso.
4.
MTODOS QUE PONEN DE MANIFIESTO LA PRESENCIA DE
ELEMENTOS CELULARES
Estos mtodos dan cuenta de elementos celulares de microorganismos tanto viables como no
viables o desintegrados, constituyentes de su estructura celular que pueden menoscabar
la salud del personal expuesto.
Entre estos elementos celulares cabe destacar las endotoxinas, glucanos y ergosterol.
4.1 Endotoxinas:
Son polisacridos termoestables de alto peso molecular (LPS), formados por un componente
lipdico caracterstico, lpido A, unido covalentemente a un polisacrido. Las endotoxinas son
componentes integrales de la membrana exterior de las bacterias Gramnegativas. La presencia
de endotoxinas se relaciona con la posibilidad de reacciones txicas, procesos inflamatorios
muy intensos, fiebre, bronquitis. Desde el punto de vista de enfermedades relacionadas con el
trabajo slo las endotoxinas aerotransportadas son relevantes. Se producen en el manejo de
material orgnico. Los materiales contaminados por bacterias y las heces de animales son las
fuentes principales de polvo que contribuir a la liberacin de endotoxinas.
La agricultura y las industrias relacionadas proporcionan las fuentes de exposicin profesional
ms habituales: granjas de cerdos, pollos, vacas y caballos; industrias del algodn;
procesado de la patata, caa azucarera, cerveza; mataderos de aves; tratamiento de aguas
residuales, basuras y compostaje; sistema de humidificacin de aire de edificios y procesos
industriales con reciclaje de agua; emulsiones formadas en los fluidos de corte en metalurgia,

El grupo CEN/TC/WG 5 est en fase de normalizacin del mtodo analtico para la

cuantificacin de endotoxinas. Se basa en la activacin que las endotoxinas producen en una
enzima de la coagulacin presente en el lisado del amebocito del cangrejo Limulus
polyphemus (mtodo LAL).
Dicha enzima se hace actuar sobre un sustrato coloreado, midindose
espectrofotomtricamente la liberacin de los productos formados.
En la actualidad se admite un lmite mximo de exposicin profesional a endotoxinas de 200
3
ng/m .
Se han desarrollado mtodos qumicos alternativos para la medida de endotoxinas, basados en
la determinacin de LPS por cromatografa en fase gaseosaespectrometra de masas (3).
Anlogamente se ha descrito la posibilidad de determinar el cido murmico como marcador
qumico de pptidoglicanos, presentes fundamentalmente en la pared celular de bacterias
Grampositivas (4).
4.2 Glucanos [(1-> 3)-D Glucano]
Es otro biomarcador de la contaminacin fngica en aire. Es un componente de la pared celular
de todos los hongos filamentosos y se le considera como la posible causa de
enfermedades respiratorias, especialmente enfermedades crnicas relacionadas con la
exposicin a polvos orgnicos.
El mtodo analtico implica la toma de muestras de aire sobre filtros de acetato de celulosa (5)
posterior anlisis utilizando el mtodo del LAL (6) (Lisado del Amebocito del Limulus)
4.3 Ergosterol:
Es utilizado como un marcador qumico en aire de la contaminacin por hongos, al ser uno de
los componentes qumicos fundamentales de la membrana de los principales hongos saprofitos.
Su determinacin se lleva a cabo por mtodos cromatogrficos, previa extraccin de los filtros
de policarbonato en donde se toman las muestras ambientales (7).
5.

MTODOS DE CUANTIFICACIN DE METABOLITOS

Otra alternativa para la medida de agentes biolgicos es la cuantificacin de sustancias

procedentes de los mismos. Esto puede ser aplicable cuando haya un mtodo fiable de toma de
muestra y anlisis y cuando la concentracin de analito sea proporcional a la carga
microbiolgica. Entre estas opciones de medida se pueden contemplar los metabolitos pri
marios, como por ejemplo el anlisis del Adenosin trifosfato (ATP) que puede servir de
marcador para los microorganismos o su actividad vital, y metabolitos secundarios como, por
ejemplo, las micotoxinas que pueden encontrarse en los bioaerosoles.
5.1 Anlisis de ATP:

El anlisis de los niveles de ATP en las muestras es rpido e indicativo del metabolismo
de la actividad microbiana. Existe una relacin entre los niveles de ATP y el nmero de
agentes microbianos, por lo que este mtodo (8) es a menudo utilizado junto con el muestreo
de superficies en la investigacin de todos los problemas de higiene relacionados con la
industria alimentaria.
5.6 Micotoxinas:
Son metabolitos secundarios de bajo peso molecular de origen fngico, producidos en
condiciones especiales de crecimiento en cosechas almacenadas y alimentos. Algunas
micotoxinas pueden causar efectos sistmicos en especial en el hgado y el sistema nervioso.
Entre las micotoxinas ms importantes destacan:
Aflatoxinas, producidas por Aspergillus flavus y A. parasiticus
Ocratoxina A, producida por Penicillium verrucosum y Aspergillus alutaceus (A.
ochraceus).
Tricoticenos y Fuminosinas, producidas por Fusarium spp
Se ha demostrado que las aflatoxinas y otras micotoxinas, por ejemplo, el cido Dsecalnico,
pueden aerotransportarse en elevadas concentraciones en determinadas tareas como en el
procesamiento de cacahuetes, pistacho y maz causando efectos txicos y carcinognicos.
Los mtodos analticos para su determinacin utilizan bien tcnicas cromatogrficas (9) o bien
lneas celulares para ensayar su citotoxicidad (10).
En las tablas adjuntas se propone un esquema para la eleccin de mtodo de muestreo as como
un estudio comparativo de caractersticas, ventajas e inconvenientes de los mtodos de
muestreo ambiental ms comunes.
1: Frotis
8: Filtracin alto caudal (5500 L/min)
2: Placas de contacto
9: Impinger multietapas (55 L/min)
3: Colocacin de placas abiertas
10: Impactador en cascada, 6 etapas, Andersen
4: Filtracin a bajo caudal (1-2 11: RCS, muestreador centrfugo (40 L/min)
5: Mini-impinger (1 L/m)
12: SAS, impactacin directa (90 L/min)
6: Impactador en cascada MAY (10 13: Muestreador Casella de rendija (30-700
7: Impinger (12.5 L/min)
14: Impactador Andersen monoetapa (28.5
Algunos muestreadores se denominan por sus nombres comerciales slo para ayudar a su
identificacin, sin que esto suponga su recomendacin, o que no existan otros de anlogas
prestaciones.
TABLA: MUESTREO AMBIENTAL PARA AGENTES BIOLGICOS

MTOD
O
DE
MUEST
*IMPACTACIN
SOBRE
LQUIDO (AGI)

PROCES
O

VELOCI
DAD Y
TIEMPO
DE

BURBUJEO
DEL AIRE A 12,5/30
TRAVS
DE
UN
MEDIO

VENTAJAS

INCONVENIE
NTES

*
ADECUADO *
PARA
GRAN DISPERSIN
VARIEDAD DE
DE ESPORAS
MICROORGAN
IMOS

*IMPACTACIN
SOBRE
AGAR
(ANDERSEN)
*IMPACTA
CIN EN
*IMPACT
ADOR
CENTRF
UGO
*FILTRACIN
EN MEMBRANA

RECOGIDA
DEL AIRE A
TRAVS
28/1-5
DE ORIFICIOS
DE
RECOGIDA
DEL AIRE A 90/0,5-3
TRAVS
DE

RECOGIDA
40/0,5
DEL AIRE EN
TIRAS
DE

RECOGIDA
1-2/15-60
DEL AIRE EN
FILTROS
PLACAS DE
*SEDIMENTACI AGAR
?
N
EN PLACAS ABIERTAS
COLOCADAS

*
SEPARACIN
POR TAMAO

*
POCA
MANEJABILIDA
D

*
*
ESCASA
MANEJABILIDAD EFICIENCIA

-------------------

MICROORGANI
SMOS TOTALES

*
EFICIENCIA
DESCONOCIDA

*
DESECACIN
DE
MICROORGANI

*
FCIL
DE *
DATOS
UTILIZAR
NO
ECONMICO
COMPARABLES

6.

CUANTIFICACIN DE LAS VARIABLES DETERMINANTES DEL RIESGO

6.1 CLASIFICACIN DEL DAO: Para la clasificacin del dao que puede causar cada
agente biolgico, se ha considerado el nmero de das de baja que supondra padecer la
enfermedad, as como la posibilidad o no de que sta deje secuelas, siguiendo un tratamiento
adecuado.

SECUELAS
DAO
PUNTUACIN

I.T. menor de 30 das

1
Sin secuelas

I.T. mayor de 30 das

2

I.T. menor de 30 das

3

Con secuelas
I.T. mayor de 30 das
4

Fallecimiento
5

(I.T.: incapacidad temporal)

A efectos de valorar el tiempo de duracin de la enfermedad, se ha tenido en cuenta la gua

prctica de estndares de duracin de procesos de incapacidad temporal, publicada por la
Secretaria de Estado para la Seguridad Social titulada tiempos estndar de Incapacidad
Temporal
6.2. VA DE TRANSMISIN: Entendemos por va de transmisin cualquier mecanismo en
virtud del cual un agente infeccioso se propaga de una fuente o reservorio a una persona.
Para la calificacin de la va de transmisin utilizaremos la siguiente tabla.
VIA DE TRANSMISIN
PUNTUACIN
Indirecta

1
Directa
1
Area
3
La puntuacin final se obtiene sumando las cifras correspondientes a las diferentes vas de
transmisin que presenta cada agente biolgico, en el supuesto de que tenga ms de una va. A
la va de transmisin area se le ha asignado una puntuacin mayor, por resultar mucho ms
fcil el contagio.
A continuacin se definen las tres posibles vas de transmisin, segn el manual para el
control de las enfermedades transmisibles de la OMS:
Transmisin directa. Transferencia directa e inmediata de agentes infecciosos a una puerta de
entrada receptiva por donde se producir la infeccin del ser humano o del animal. Ello puede
ocurrir por contacto directo como al tocar, morder, besar o tener relaciones sexuales, o por
proyeccin directa, por diseminacin de gotitas en las conjuntivas o en las membranas mucosas
de los ojos, la nariz o la boca, al estornudar, toser, escupir, cantar o hablar. Generalmente la
diseminacin de las gotas se circunscribe a un radio de un metro o menos.
Transmisin indirecta. Puede efectuarse de las siguientes formas:
Mediante vehculos de transmisin (fmites): Objetos o materiales contaminadoscomo
juguetes, ropa sucia, utensilios de cocina, instrumentos quirrgicos o apsitos, agua, alimentos,
productos biolgicos inclusive sangre, tejidos u rganos. El agente puede o no haberse
multiplicado o desarrollado en el vehculo antes de ser transmitido.
Pormedio de un vector: De modo mecnico (traslado simple de un microorganismo por medio
de un insecto por contaminacin de sus patas o trompa) o biolgico (cuando se efecta en el
artrpodo la multiplicacin o desarrollo cclico del microorganismo antes de que se pueda
transmitir la forma infectante al ser humano).
Transmisin area: Es la diseminacin de aerosoles microbianos transportados hacia una va
de entrada adecuada, por lo regular la inhalatoria. Estos aerosoles microbianos estn
constituidos por partculas que pueden permanecer en el aire suspendido largos periodos de
tiempo. Las partculas, de 1 a 5 micras, penetran fcilmente en los alvolos pulmonares. No se
considera transmisin area el conjunto de gotitas y otras partculas que se depositan
rpidamente.
6.3 TASA DE INCIDENCIA DEL AO ANTERIOR: La tasa de incidencia de una
enfermedad es un dato de gran relevancia para decidir qu microorganismo debe o no incluirse
en el listado propuesto en el presente manual, as como para poder valorar correctamente el
riesgo de sufrir contagio la poblacin laboral a estudio, en el desarrollo de su actividad.
Por tales motivos es conveniente conocer la tasa de incidencia de las distintas enfermedades en
un periodo de tiempo determinado. En el presente caso se toma siempre el ao anterior,
calculndose segn la siguiente expresin

En trabajos que impliquen manejo de animales, deber consultarse informacin referente a la

posibilidad de que las enfermedades transmitidas por stos pueden padecerlas los trabajadores
expuestos. Entre las pginas Web existentes, una de las ms importantes es la de la
Organizacin Internacional de Epizootias (OIE): http://www.oie.int. Adems, consideramos
conveniente que los tcnicos conozcan la existencia del Real Decreto 2459/1996 del Ministerio
de Agricultura, Pesca y Alimentacin, por el que se establece la lista de enfermedades de
animales de declaracin obligatoria. En esta pgina pueden encontrarse las enfermedades de
tipo zoontico transmitidas al ser humano, entre otras cuestiones de inters.
Para calcular la puntuacin aplicable segn el mtodo propuesto, en funcin del ndice de
incidencia debe utilizarse la siguiente tabla

INCIDENCIA / 100.000 HABITANTES

PUNTUACIN
<1
1

1
-9
2

10
- 99
3

100
- 999
4
1000
5

De acuerdo con esta puntuacin, en el ejemplo considerado anteriormente asignaramos a la

gripe una valoracin de 5 puntos
6.4. VACUNACIN: En este apartado se trata de estimar el nmero de trabajadores expuestos
que se encuentran vacunados, siempre que exista vacuna para el agente biolgico en cuestin.
Las vacunas disponibles en la actualidad pueden consultarse en el anexo II del presente manual.
Para ms informacin actualizada se puede acudir a: www.vacunas.org
VACUNACIN
PUNTUACIN
Vacunados ms del 90%
1
Vacunados entre el 70 y el 90%
2
Vacunados entre el 50 y el 69%
3
Vacunados menos del 50%
4
No existe vacunacin
5
Caso de que no exista vacuna completamente eficaz, deber calcularse el porcentaje de
trabajadores que se encontraran protegidos y se aplicara la tabla anterior.
As por ejemplo, en el caso de la gripe, el coeficiente a aplicar depender del nivel de
vacunacin existente en la empresa, mientras que para el caso de un microorganismo del que no
se disponga de vacunacin efectiva, se aplicar siempre una puntuacin de 5
6.5. FRECUENCIA DE REALIZACIN DE TAREAS DE RIESGO: Este factor evala el
contacto en el tiempo y el espacio entre el trabajador y los diferentes agentes biolgicos objeto
de la evaluacin. Para ello, deber calcularse el porcentaje de tiempo de trabajo en que stos se
encuentran en contacto con los distintos agentes biolgicos objeto de anlisis, descontando del
total de la jornada laboral, el tiempo empleado en descansos, tareas administrativas, tiempo para
el aseo, procedimientos que no impliquen riesgo de exposicin, etc.
Una vez realizado este clculo deber llevarse a la tabla siguiente para conocer el nivel de
riesgo

PORCENTAJE
PUNTUACIN
Raramente: < 20 % del tiempo
1
Ocasionalmente: 20 - 40 % del tiempo
2
Frecuentemente: 41 - 60 % del tiempo
3
Muy frecuentemente: 61 - 80 % del tiempo
4
Habitualmente > 80 % del tiempo
5
7.
MEDIDAS HIGINICAS ADOPTADAS
Para evaluar la influencia de las medidas higinicas se ha elaborado un formulario especfico
que recoge 40 apartados. Para cumplimentarlo, deber realizarse previamente un trabajo de
campo, investigando los aspectos recogidos en l por el mtodo observacional directo y
recabando informacin de los trabajadores evaluados, as como de sus supervisores. Igualmente
la persona que evale debe decidir qu apartados no son aplicables al puesto o seccin
estudiada.
Al formulario de las ediciones anteriores se han aadido 3 cuestiones referentes a la
disponibilidad y uso de equipos de bioseguridad para ser utilizados ante la exposicin a agentes
biolgicos de transmisin parenteral.
Para la comprobacin de la eficacia de estas cuestiones se tomaron los resultados obtenidos en
la evaluacin del puesto de AUXILIAR DE QUIRFANO, dentro del SECTOR
HOSPITALARIO, uno de los ms implicados y sensibles en lo que concierne a medidas de
bioseguridad.
Una vez realizada la evaluacin, primeramente sin tener en cuenta las tres nuevas variables de
bioseguridad en el listado de medidas higinicas y en segundo lugar, considerando las tres
variables en cuestin, el test t de Student para datos apareados, con un nivel de significacin de
0,05 y 17 grados de libertad, revel que las diferencias observadas son estadsticamente
significativas (t = 2.65; p = 0.0185):

Estas diferencias las aportan principalmente, aquellos microorganismos que se transmiten por
va parenteral, es decir, virus de la Hepatitis B, virus de la Hepatitis C y otros virus hepticos, y
virus VIH, sobre los que las tres nuevas variables de bioseguridad incluidas en la tabla de
medidas higinicas tienen una influencia favorable en la reduccin del riesgo biolgico (RB).
Cabe sealar tambin que, segn la informacin aportada, tendran una influencia del mismo
orden de magnitud que los anteriores, las diferencias aportadas por el Mycobacterium
tuberculosis y la Neisseria meningtidis, aunque su va de transmisin preferente es la area
El formulario en cuestin es el siguiente

MEDIDA
S
NO
NO APLICABLE

Dispone de ropa de trabajo

1
0

Uso de ropa de trabajo

1
0

Dispone de Epis
1
0

Uso de Epis
1
0

Se quitan las ropas y Epis al finalizar el trabajo

1
0

Se limpian los Epis

1
0

Se dispone de lugar para almacenar Epis

1
0

Se controla el correcto funcionamiento de Epis

1
0

Limpieza de ropa de trabajo por el empresario

1
0

Se dispone de doble taquilla

1
0

Se dispone de aseos
1
0

Se dispone de duchas
1
0

Se dispone de sistema para lavado de manos

1
0

Se dispone de sistema para lavado de ojos

1
0

Se prohbe comer o beber

1
0

Se prohbe fumar
1
0

Se dispone de tiempo para el aseo antes de abandonar la

1
0

zona de riesgo dentro de la jornada

Suelos y paredes fciles de limpiar

1
0

Los suelos y paredes estn suficientemente limpios

1

Hay mtodos de limpieza de equipos de trabajo

1
0

Se aplican procedimientos de desinfeccin

1
0

Se aplican procedimientos de desinsectacin

1
0

Se aplican procedimientos de desratizacin

1
0

Hay ventilacin general con renovacin de aire

1
0

Hay mantenimiento del sistema de ventilacin

1
0

Existe material de primeros auxilios en cantidad suficiente

1
0

(Anexo VI Real Decreto 486/97)

Se dispone de local para atender primeros auxilios

1
0

Existe seal de peligro biolgico

1
0

Hay procedimientos de trabajo que minimicen o eviten la

1
0

diseminacin area de los agentes biolgicos en el lugar de

trabajo

MEDIDA
S
NO
NO APLICABLE

Hay procedimientos de trabajo que minimicen o eviten la diseminacin

1
0
de los agentes biolgicos en el lugar de trabajo a travs de fmites

Hay procedimientos de gestin de residuos

1
0

Hay procedimientos para el transporte interno de muestras

1
0

Hay procedimientos para el transporte externo de muestras

1
0

Hay procedimientos escritos internos para la comunicacin de los

1
0
incidentes donde se puedan liberar agentes biolgicos

Hay procedimientos escritos internos para la comunicacin de los

1
0
accidentes donde se puedan liberar agentes biolgicos

Han recibido los trabajadores la formacin requerida por el Real

1
0
Decreto 664/97

Han sido informados los trabajadores sobre los aspectos regulados

1
0
en el Real Decreto 664/97

Se realiza vigilancia de la salud previa a la exposicin de los

1
0
trabajadores a agentes biolgicos

Se realiza peridicamente vigilancia de la salud

1
0

Hay un registro y control de mujeres embarazadas

1
0

Se toman medidas especficas para el personal especialmente

1
0
sensible

Se dispone de dispositivos de bioseguridad?*

1
0

Se utilizan dispositivos adecuados de bioseguridad?**

1
0

Existen y se utilizan en la empresa procedimientos para el uso

1
0
adecuado de los dispositivos de bioseguridad?

* La Directiva 201/32/UE del Consejo de 10 de mayo, que aplica el acuerdo marco para la
prevencin de las lesiones causadas por instrumentos cortantes y punzantes en el sector
hospitalario y sanitario, obliga al empresario a que los equipos de trabajo cortopunzantes estn
equipados con dispositivos de bioseguridad.
Tcnica de Prevencin 875 y que son los siguientes:
a) Fase 1: Define tres criterios indispensables que deben reunir los dispositivos de bioseguridad:
Criterio 1: El mecanismo de seguridad debe estar integrado en el equipo cortopunzante, no
siendo nunca un accesorio aadido.
Criterio 2: El mecanismo de seguridad ha de ser irreversible, no se podr desactivar.
Criterio 3: El mecanismo de seguridad debe manifestar su correcta activacin al usuario
mediante una seal sonora o visual.
Si incumple uno de estos tres criterios, ser considerado NO ACEPTABLE

b) Fase 2: Establece un gradiente de seguridad adaptado a los principios generales de la Norma

UNE-EN 1050:1997.
Primer principio: Equipo con dispositivo de bioseguridad seguro durante el uso previsto y el
mal uso razonablemente previsible.
Segundo principio: Equipo con dispositivo de bioseguridad seguro en caso de errores humanos
previsibles durante el uso del equipo completo.
c) Fase 3: Se elegirn en funcin de la activacin del dispositivo de bioseguridad siendo
preferente los de activacin pasiva sobre aquellos de activacin activa.
Adems, dada la trascendencia para la seguridad del trabajador y la implicacin econmica de la
eleccin de los equipos, el Servicio de Prevencin deber hacer un estudio completo de los
mismos. Para ello, se recomienda encarecidamente la consulta de la Nota Tcnica de Prevencin
875: Riesgo biolgico: metodologa para la evaluacin de equipos cortopunzantes con
dispositivo de bioseguridad (INSHT). En esta NTP, adems de los criterios antes mencionados,
se detallan una serie de recomendaciones que permiten valorar el material como aceptable,
bueno, muy bueno y excelente, siendo de gran utilidad para la toma de decisiones.
Para su cuantificacin se han tenido en cuenta los siguientes criterios:
Considerar solamente las respuestas aplicables
Determinar la puntuacin de las respuestas afirmativas resultantes
Calcular el porcentaje entre puntuacin de respuestas afirmativas resultantes y el nmero
mximo de posibles respuestas

a) En funcin del porcentaje obtenido, se aplican los siguientes coeficientes de

disminucin del riesgo a cada agente biolgico, segn los valores asignados en la tabla
siguiente:

Resultado de las medidas higinicas adoptadas

RESPUESTAS AFIRMATIVAS
PUNTUACIN
< 50 %
0
50 - 79 %
-1
80 - 95 %
-2
> 95 %
-3

Una vez obtenida esta puntuacin, se restar al valor estimado de los parmetros sobre los que
influira la adopcin de estas medidas, que son: dao y va de transmisin de cada agente
biolgico, con lo cual estaremos reduciendo el riesgo en funcin de las medidas higinicas
aplicadas en cada caso. No obstante, por definicin metodolgica, el valor mnimo de esta
diferencia ha de ser 1 mayor que 1 en todos los casos determinados, no admitindose nunca
valores de 0 o negativos.

7.1 CLCULO DEL NIVEL DE RIESGO BIOLGICO (R)

Con los valores hallados se aplicar la frmula siguiente:

Puesto que las variables DAO y VACUNACIN se encuentran ntimamente relacionadas, ya

que si se aumenta la tasa de vacunacin disminuir el dao e inversamente, estos factores se
presentan en la expresin en forma de producto, apareciendo el resto como una suma.
En el anexo III de este documento se encuentra un caso prctico, en el que se aplica todo el
mtodo indicado.
7.2. INTERPRETACIN DE LOS NIVELES DE RIESGO BIOLGICO
Una vez obtenido el nivel de riesgo (R) mediante la expresin anterior es preciso interpretar su
significado:
Este grupo de trabajo valid el presente mtodo aplicndolo a las distintas actividades incluidas
en el anexo I del Real Decreto 664/1997 y concluyendo que el mtodo en cuestin dispone de
suficiente sensibilidad para evaluar la exposicin a riesgo biolgico.
Tras la validacin se consideraron dos niveles:
Nivel de accin biolgica (NAB)
Lmite de exposicin biolgica (LEB)
Entendemos como nivel de accin biolgica (NAB) aquel valor a partir del cual debern
tomarse medidas de tipo preventivo para intentar disminuir la exposicin, aunque la situacin
no llegue a plantear un riesgo manifiesto. No obstante, a pesar de que no se considere peligrosa
esta exposicin para los trabajadores, constituye una situacin manifiestamente mejorable, de la
que se derivarn recomendaciones apropiadas. Los aspectos fundamentales sobre los que se
deber actuar son las medidas higinicas y el tiempo de exposicin
El lmite de exposicin biolgica (LEB) es aquel que en ningn caso y bajo ninguna
circunstancia debe superarse, ya que supone un peligro para la salud de los trabajadores y
representa un riesgo intolerable que requiere acciones correctoras inmediatas.
Es evidente que, dependiendo del agente biolgico al que se encuentren expuestos los
trabajadores, el nivel de riesgo ser ms o menos elevado. Sin embargo, este grupo de trabajo ha
puesto de relieve que al aplicar todas las medidas preventivas en ningn caso se llega a superar
el valor lmite de exposicin, debiendo ser, en los casos en los que el nivel de riesgo se
aproxime a este lmite, ms riguroso en su aplicacin
Los citados niveles han sido situados en:
Nivel de accin biolgica (NAB) =12. Valores superiores requieren la adopcin de medidas
preventivas para reducir la exposicin.

Lmite de exposicin biolgica (LEB) =17. Valores superiores representan situaciones de

riesgo intolerable que requieren acciones correctoras inmediatas.
8.

CONCLUSIONES
Se ha estudiado los diferentes mtodos de evaluacin de riesgos biolgicos en los
distintos lugares de trabajo
Se hall un nivel de accin biolgica (12) y un lmite de exposicin biolgico (17) para
personas que estn sujetas a este tipo de ambiente laboral

9.

RECOMENDACIONES
Incrementar el tiempo de dedicacin para esta catedra, ya que esta materia es de gran
ayuda para la vida profesional de y personal de los estudiantes

LINKOGRAFIA:
[1]

http://www.ehu.es/documents/2458096/2577739/apendice_03.pdf

[2]

http://www.revista.ingenieria.uady.mx/volumen10/emision.pdf

[3]

http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/Fichas
Tecnicas/NTP/Ficheros/401a500/ntp_409.pdf
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/Fichas
Tecnicas/NTP/Ficheros/601a700/ntp_609.pdf

[4]