INTRODUCCION

Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseado

diversos mtodos que permiten cultivarlos bajo condiciones artificiales,
en los que es posible cultivarlos bajo condiciones experimentales y
manejar un solo tipo de microorganismo. Una de las tcnicas ms
usadas en el laboratorio de microbiologa consiste en transferir una
muestra microbiolgica de un ambiente determinado a un medio de
cultivo, lo que permite obtener cultivos microbianos. A l efectuar este
procedimiento, es necesario considerar que en el rea de trabajo,
existen muchos otros microorganismos; debido a esto, es necesario
tomar precauciones para impedir que stos penetren y contaminen los
cultivos en estudio. Por otra parte, para considerar no slo el aspecto
nutricional, sino tambin las condiciones ambientales de su hbitat
natural, por lo que en el medio de cultivo se debe ajustar el pH y
concentracin de sales y durante la incubacin condiciones tales como
la temperatura, aireacin la luminosidad.
La aplicacin de estos procedimientos ha permitido propagar a los
microorganismos en cultivos mixtos, as como su aislamiento y la
obtencin de cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio,
caracterizacin, aplicacin y control de los mismos. La forma de
sembrarlos y cultivarlos depende del tipo de microorganismo y propsito
especfico del estudio

OBJETIVOS
Aplicar la tcnica adecuada para preparar el rea de trabajo y
evitar contaminaciones.
Manipular adecuadamente los cultivos puros.
Reconocer la importancia del plaqueado y flameado.
Aprender a sembrar en tubos con Agar inclinado de adentro hacia
fuera.
Dominar y practicar la siembra de placas por estras

MARCO TEORICO
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porcin de muestra
(inculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo
microbiano, para su desarrollo y multiplicacin. Una vez sembrado, el
medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el
crecimiento.
Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:

 Que se efecten aspticamente

Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estn
esterilizados
Que se realicen solo los manipuleos indispensables
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible
utilizando un
mechero o bien Flujo laminar.
Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los
requerimientos del microorganismo a estudiar.

MEDIOS SLIDOS
Siembra por inmersin: se coloca el inculo en una placa o caja de
Petri y sobre el mismo se vierte el medio de cultivo previamente
fundido. Este mtodo se utiliza para microorganismos aerobios
Siembra en doble capa: se
procede de la misma manera
que por inmersin. Una vez
solidificado el medio se vierte
una cantidad extra de medio
necesaria para cubrir la capa
anterior (generalmente 10 ml.
aprox.). Este mtodo se utiliza
para
microorganismos
anaerobios
facultativos
y
microaeroflicos
Siembra en superficie: se vierte sobre una placa de Petri el medio
de cultivo fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie
el inculo. Con ayuda de una esptula de Drigalsky se extiende el
inculo hasta su absorcin total por el medio de cultivo. Este tipo
de siembra se recomienda para microorganismos aerobios
estrictos
Siembra en estra: se vierte sobre una placa de Petri el medio de
cultivo fundido y se deja solidificar

MATERIALES Y METODOS
DILUCIONES SUCESIVAS
Materiales

 100ml de muestra
3 tubos de solucin peptonada (9ml)

Metodologa

Agregar 1ml de muestra (10ml)

Mesclar
Luego se utilizan 3 placas
Agregamos 0.1 solucin
Mediante una esptula se comienza a distribuir 0.1ml
Durante 24 h observar colonias
Recopilamos la ltima muestra para ser analizada

TECNICA POR ESTRIAS

Placa con agar agar

Agar inclinado solido
Caldo (agar nutritivo) liquido
Agar uniforme solido

Materiales
Mechero
Azas

Metodologa

Tomar muestra solida o liquida

Ingresar el aza a un lado, por agotamiento, ir rotando la placa
Retirar el aza
Flamear hasta color rojo
Cerrar la placa y flamear los bordes

Coger muestra
Sacar algodn
No alejarse del mechero
AGAR UNIFORME
Introducir hasta la mitad}
Evitar chocar con paredes

 Flamear

Coger muestra agar

Sacar algodn
No alejarse del mechero
Agitar el caldo nutritivo (liquido)
CALDO NUTRITIVO
Retirar
Flamear

DISCUCION
Por medio de esta prctica se logr utilizar las tcnicas aprendidas
durante el transcurso del curso, adems aprender a realizar algunos de
los mtodos que existen para cultivar bacterias y de esta manera
observar sus caractersticas tanto macroscpicas como microscpicas e
interpretacin de las mismas, con lo que se observ que para cada
bacteria existen caractersticas diferentes que son las que las identifican
y diferencian de otras bacterias, por lo que de esta manera se le puede
llegar a identificar con su correcta siembra y observacin para anlisis
posteriores o simplemente para la identificacin de una bacteria en
algn medio u organismo.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Tortora, G, 2014, Introduccin a la microbiologa, 9
Mdicos
Panamericanos Madrid-Espaa
Edicin, Editorial

 Roger Y , John L, Mark L, Page R, 2014, Microbiologa, 2

Edicin,
Editorial Revert Barcelona-Espaa