ENZIMAS

Enzimas so protenas especializadas que funcionam na

acelerao de reaes qumicas.
Funo: catalisadores biolgicos.

exceo:

grupo de RNA cataltico

(ribozimas)

Importncia da catlise:
Sem a catlise, a maioria das reaes qumicas nos
sistemas biolgicos seria muito lenta para fornecer produtos
na proporo adequada para sustentar a vida.
* Uma enzima pode ficar, temporariamente, ligada
covalentemente molcula que est sendo transformada
durante estgios intermedirios da reao, mas no final da
reao a enzima estar na sua forma original, quando o
produto liberado.

ENZIMAS
* As enzimas podem aumentar a velocidade de uma
reao por um fator de at 1017 vezes mais do que
a reao no catalisada.

Propriedades das Enzimas

So catalisadores biolgicos extremamente eficientes e aceleram a
velocidade da reao, transformando de 100 a 1000 molculas de
substrato em produto por minuto de reao.
Atuam em concentraes muito baixas
Atuam em condies especficas de temperatura e pH
Possuem todas as caractersticas das protenas
Podem ter sua concentrao e atividade reguladas
Esto quase sempre dentro da clula, e compartimentalizadas.

ENZIMAS
As enzimas apresentam um alto grau de
especificidade:
cada
enzima
possui
uma
organizao estrutural especfica, permitindo a
ligao apenas do(s) seu(s) substrato(s).
*h enzimas que aceitam como substrato qualquer
acar de seis carbonos, enquanto outras s
reconhecem a glicose.
As enzimas so fundamentais para processos
bioqumicos celulares tais como:
- degradao das molculas nutrientes;
- transformao e conservao da energia qumica;
- sntese de macromolculas biolgicas a partir de
molculas precursoras simples;

ENZIMAS
Importncia prtica do estudo das enzimas:
- em algumas doenas, especialmente nas desordens genticas
herdadas, pode ocorrer uma deficincia ou mesmo a ausncia
total de uma ou mais enzimas. Ex: fenilcetonria (fenilalanina
hidroxilase); doena de von Gierke (glicose-6-fosfatase heptica)

- condies anormais podem ser causadas pela

atividade excessiva de uma enzima;
- medidas da atividade de enzimas no plasma
sangneo, eritrcitos ou amostras de tecido so
importantes no diagnstico de vrias doenas; VER
- muitos frmacos exercem seu efeito biolgico por
meio de interaes com as enzimas.

Enzimas na Clnica
As enzimas podem ser utilizadas nas Anlises Clnicas de 2 formas
principais:
Como reagentes altamente especficos e sensveis em reaes
colorimtricas quantitativas
Como indicadoras de leso celular e tecidual: o extravasamento de
enzimas do meio intra para o meio extracelular leva a um aumento da
atividade destas no sangue; esta atividade pode ser medida e fornece
importante informao diagnstica e de evoluo de um quadro clnico. A
distribuio rgo-especfica de algumas destas enzimas permite a
localizao da leso com bastante preciso.
Exemplos de doenas que podem
acompanhadas enzimaticamente so:

ser

diagnosticadas

Infarto Agudo do Miocrdio (Creatina quinase, Lactato desidrogenase)

Hepatite (Transaminases: ALT, AST)
Pancreatite (Amilase, Lipase)
VOLTAR
Cncer de prstata (Fosfatase cida prosttica)

Nomenclatura das enzimas

Existem 3 mtodos para nomenclatura enzimtica:
Nome Oficial: Mais complexo, nos d informaes
precisas sobre a funo metablica da enzima. Ex:
ATP:Glicose:Fosfo-Transferase
EC X.X.X.X (Enzyme Commission)
Nome Clssico: Mais curto e utilizado no dia a dia de
quem trabalha com enzimas; utiliza o sufixo "ase" para
caracterizar a enzima. Ex: Urease, Hexoquinase,
Peptidase, etc.
Nome Trivial: Consagrados pelo uso. Ex: Tripsina,
Pepsina, Ptialina.

ENZIMAS

Muitas enzimas so nomeadas pela adio do

sufixo ase ao nome do seu substrato, ou palavra
ou frase que descreve sua atividade:
- urease = catalisa a hidrlise da uria
- DNA polimerase = catalisa a polimerizao dos
nucleotdeos para formar o DNA

ENZIMAS
Classificao das Enzimas
As enzimas so divididas em seis grandes classes,
cada uma com subclasses, de acordo com o tipo de
reao que catalisam:

Classe 1: xido-redutases transferncia de eltrons (ons

hidreto ou tomos de H). Ex: desidrogenases, redutases, oxidases e
peroxidases.

* Oxidao do etanol pela lcool desidrogenase.

Classe 2: Transferases reaes de transferncia de grupos.

Ex: quinases, transcarboxilases e aminotransferases.

* Reao catalisada por uma aminotransferase.

Classe 3: Hidrolases reaes de hidrlise. Ex: amilase, urease,

pepsina, tripsina, quimotripsina e vrias peptidases e esterases.

Classe 4: Liases adio de grupos s duplas ligaes ou

formao de duplas ligaes por meio de remoo de grupos.

* A reao da fumarase.

Classe 5: Isomerases transferncia de grupos dentro da mesma

molcula para formar ismeros.

Classe 6: Ligases reaes de sntese, onde duas molculas so

unidas, s custas de uma ligao fosfato de alta energia do ATP.

* Reao da piruvato carboxilase.

ENZIMAS
Como as enzimas funcionam?

- as enzimas aceleram a velocidade das reaes

por diminuir sua energia de ativao: vdeo

A combinao do substrato com a enzima cria uma nova via de

reao que tem um estado de transio de menor energia do
que na ausncia do substrato. vdeo

ENZIMAS
Interao enzima-substrato:
- a ligao com o substrato d-se em uma regio
pequena e bem definida da enzima, chamada centro
ativo (ou stio ativo);
- o centro ativo formado por resduos de aminocidos e
constitui uma cavidade com forma definida, que permite
enzima reconhecer seu substrato; vdeo
- uma molcula, para ser aceita como substrato, deve ter
a forma espacial adequada para alojar-se no centro ativo
e grupos qumicos capazes de estabelecer ligaes com
os radicais do centro ativo;

vdeo

ENZIMAS
Interao enzima-substrato:
* a relao substrato-enzima no deve ser entendida
como um modelo rgido de chave-fechadura (este modelo
exemplifica a especificidade de uma enzima pelo seu
substrato, mas no explica toda a complexidade da
relao estabelecida entre eles durante a catlise);
- na verdade, a aproximao e a ligao do substrato
induz na enzima uma mudana conformacional,
tornando-a ideal para a catlise (modelo do ajuste
induzido)

Modelo da chave-fechadura.

Modelo do ajuste induzido e tenso do substrato:

a) Aproximao entre substrato e enzima induz a formao do stio
ativo.
b) Tenso no substrato induzida pela ligao do substrato
enzima, contorce os ngulos normais de ligao e ativa o
substrato.

ENZIMAS
Fatores que interferem na atividade enzimtica:
- a estrutura e a forma do centro ativo so uma
decorrncia da estrutura tridimensional da enzima e
podem ser afetadas por quaisquer agentes capazes de
provocar mudanas conformacionais na protena;
- portanto, a atividade enzimtica dependente das
caractersticas do meio, principalmente do pH e da
temperatura;

Velocidade de formao do produto

As enzimas tm um pH timo (ou um intervalo de pH) no qual a sua

atividade mxima: em um pH maior ou menor, a atividade diminui.

Velocidade de formao do produto

Fosfatase alcalina:
pH timo = 10

Como ocorre com a maioria das reaes qumicas, a velocidade da reao

enzimtica, que a 0C apresenta valores prximos de zero, favorecida pela
elevao da temperatura.
* O gradativo aumento da velocidade s se verifica enquanto a enzima
conservar a sua estrutura nativa.

ENZIMAS
Inibidores Enzimticos:
- a atividade enzimtica pode ser diminuda por vrias
substncias (constituintes normais ou estranhas s
clulas) provocando alteraes significativas no
organismo;
- os inibidores normalmente encontrados nas clulas
constituem um mecanismo importante de controle da
atividade enzimtica;
- o uso in vitro de inibidores tem trazido um grande
conhecimento sobre a estrutura das enzimas, a
organizao do centro ativo e o mecanismo de catlise.

ENZIMAS
Inibidores Enzimticos:
- muitos medicamentos de uso na prtica teraputica
baseiam suas propriedades na inibio especfica de
certas enzimas;
- as propriedades txicas de muitos inibidores possibilita
tambm o seu emprego no combate contra insetos
(inseticidas);
*os inibidores enzimticos podem ser agrupados em
duas categorias, de acordo com a estabilidade de sua
ligao com a molcula de enzima, em inibidores
reversveis e irreversveis.

ENZIMAS
Inibidores Enzimticos:
-os inibidores reversveis so divididos em dois grupos:
os competitivos e os no-competitivos, baseando-se na
competio (ou no) entre o inibidor e o substrato pelo
centro ativo da enzima;
* Os inibidores competitivos competem com o substrato pelo centro
ativo da enzima por apresentarem configurao espacial semelhante
do substrato:

ENZIMAS
Inibidores Enzimticos:
* Um exemplo clssico de inibio competitiva a ao do malonato
sobre a reao catalisada pela succinato desidrogenase:

ENZIMAS
Inibidores Enzimticos:
* Os inibidores no-competitivos no possuem qualquer semelhana
estrutural com o substrato da reao que inibem e seu efeito
provocado pela ligao a radicais no pertencentes ao centro ativo.

*Ex: metais pesados como Hg2+, Pb2+ e Ag2+, que reagem com os
grupos -SH das protenas.

ENZIMAS
Inibidores Enzimticos:
-os inibidores irreversveis reagem quimicamente com as
enzimas, levando a uma inativao praticamente
definitiva;
Ex: compostos organofosforados formam ligaes covalentes com
o grupo -OH de resduos de serina
Aspirina transfere seu grupo acetil para o grupo -OH de um
resduo de serina na molcula da ciclooxigenase, inativando-a
Penicilina liga-se especificamente as enzimas da via de sntese
da parede bacteriana, tornando-as susceptveis lise

ENZIMAS
Regulao da atividade enzimtica:
* Basicamente, existem dois mecanismos para a regulao da
atividade enzimtica:
1. Controle da disponibilidade de enzimas exercido sobre as
velocidades de sntese e de degradao das enzimas que
determinam sua concentrao celular;
2. Controle da atividade da enzima, efetuado por mudanas
estruturais da molcula enzimtica e que redundam em alteraes
da velocidade de catlise.
*Este efeito pode ser exercido mediante unio no-covalente de
moduladores (enzimas alostricas), ou por modificao covalente da
enzima.

ENZIMAS
Regulao da atividade enzimtica:
* As enzimas alostricas funcionam por meio de ligao nocovalente de compostos reguladores chamados moduladores
alostricos.
* As enzimas alostricas sofrem mudanas conformacionais em
resposta ligao do modulador:

ENZIMAS
Regulao da atividade enzimtica:
* A etapa reguladora em muitas vias metablicas catalisada por
uma enzima alostrica.
* Em alguns sistemas multienzimticos, a enzima reguladora
inibida pelo produto final da via sempre que a sua concentrao
exceder as necessidades celulares:

*Inibio por feedback.

ENZIMAS
Regulao da atividade enzimtica:
* Algumas enzimas reguladoras sofrem modificao covalente
reversvel.
* Entre os grupos modificadores esto: fosfato, adenosina
monofosfato, uridila monofosfato, adenosina difosfato ribose e
grupos metila:

ENZIMAS
Regulao da atividade enzimtica:
* Algumas enzimas so sintetizadas em uma forma inativa, o
zimognio.
* Para que o zimognio adquira as propriedades de enzima,
necessrio que haja hidrlise de determinadas ligaes peptdicas e
conseqente remoo da cadeia de aminocidos.

ENZIMAS
Cofatores so imprescindveis para a atividade de algumas enzimas:
* Muitas enzimas necessitam da associao com outras molculas
ou ons para exercer seu papel cataltico.
* Esses componentes da reao enzimtica so genericamente
chamados cofatores, os quais podem ser ons metlicos (Ca, Mg,
Mn, Fe, Cu, Ni, Co, Zn, Se e outros) ou molculas orgnicas, noproticas (coenzimas).
Estes cofatores no esto ligados permanentemente molcula da
enzima mas, na ausncia deles, a enzima inativa;
A frao protica de uma enzima, na ausncia do seu cofator,
chamada de APOENZIMA;
Enzima + Cofator, chamamos de HOLOENZIMA.

ENZIMAS
Cofatores so imprescindveis para a atividade de algumas enzimas:
* As enzimas que precisam de ons so chamadas metaloenzimas.
*Exemplos de metaloenzimas e seus correspondentes ons:
-Anidrase carbnica (Zn2+)
-Piruvato quinase (K+ , Mg2+)
-ATPase (Na+ , Mg2+)
-Urease (Ni2+)

* Papel do Mg na atividade da hexoquinase: o Mg

fica coordenado com o ATP, enfraquecendo a
ligao fosfato terminal do ATP, facilitando a
transferncia do fosfato glicose.

*Funes do Zn na
anidrase carbnica: o
Zn ligado enzima
gera um prton e uma
hidroxila a partir da
gua, que so ento
adicionados ao CO2.

Zn2+ no mecanismo de reao da carboxipeptidase A. Zn2+ ligado a enzima gera uma hidroxila
nucleoflica a partir de gua ligada, que ataca a carbonila da ligao peptdica, como indicado
pela seta. Glu 270 ajuda por puxar o prton da gua ligada ao zinco. (Redesenhado de Lipscomb,
W. N. Robert A. Welch Found. Conf. Chem. Res. 15:140, 1971)

As coenzimas so geralmente derivadas de alguma vitamina hidrossolvel:

* Nicotinamida adenina dinucleotdeo

(NAD+)