Medio de cultivo BHI

CALDO BHI (INFUSION CEREBRO CORAZON)

El caldo BHI medio de cultivo lquido ha sido preparado principalmente para el cultivo de
microorganismos de difcil crecimiento y microorganismos de crecimiento rpido entre
los que se incluyen bacterias aerobias y/o microaerofilos presentes en una amplia
variedad de muestras clnicas.
Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollo
microbiano. La infusin de cerebro de ternera, la infusin de corazn vacuno y la
peptona, son la fuente de carbono, nitrgeno, y vitaminas. La glucosa es el hidrato de
carbono fermentable, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico y el fosfato
disdico otorga capacidad buffer. El agar es el agente solidificante. Se utiliza fosfato
disdico como tampn en el medio.
El agar cerebro corazn mantiene los mismos principios que el caldo para el cultivo de
estreptococos y otras bacterias exigentes. Por tratarse de un medio que contiene
glucosa, no es un agar sangre apropiado para la observacin de reacciones de hemlisis.
Caractersticas del medio
Medio preparado: mbar claro, claro sin precipitado.

La jarra de anaerobiosis, es un recipiente ideal para realizar incubaciones en

anaerobiosis ya que en su soporte de acero inoxidable se pueden instalar bolsas de
generacin de atmsfera libre de oxgeno. Estas jarras constan de un
soporte para placas incluido en una cubeta transparente con tapa
hermtica. Las placas y los tubos sembrados se colocan dentro del soporte
en el interior de la jarra junto al sobre comercial abierto. Para crear la
atmsfera anaerobia se utiliza el sobre comercial que contiene una tableta
de borohidrato sdico, otra de bicarbonato sdico y cido ctrico y un
catalizador de paladio. Cuando se aade agua al sobre, el borohidrato
sdico, bicarbonato sdico y cido ctrico reaccionan para formar hidrgeno y
dixido de carbono. El catalizador de paladio cataliza la reaccin entre el hidrgeno y el
oxgeno presente dentro de la jarra. Esta reaccin produce agua, que se condensa en las
paredes de la jarra. Para confirmar que la atmsfera es anaerobia se coloca
dentro de la jarra un papel indicador que contiene azul de metileno. ste es
azul en presencia de oxgeno y vira a blanco en un ambiente anaerobio.
Mtodo de jarra y vela.- Se necesita un frasco con tapn de rosca y una
vela. Una vez sembradas las placas y los tubos, se colocan en el interior del
frasco junto con la vela encendida y se cierra el frasco hermticamente.
Cuando la vela consume todo el O2 del frasco, se apaga consiguiendo una
atmsfera de 5-7% O2 (microaeroflico).

Streptococcus mutans
Es una bacteria Gram positiva, anaerobia facultativa que se encuentra
normalmente en la cavidad bucal humana, formando parte de la placa
bacteriana o biofilm dental. Es acidfilo porque vive en medio
con pH bajo, acidognico por metabolizar los azcares a cidos y
acidrico por sintetizar cidos a pesar de encontrarse en un medio de
tales condiciones. Metaboliza la sacarosa para
producir polisacridos extracelulares (sustancia laxa que facilita su adhesin a las caras
libres de las piezas dentarias) e intracelulares (metabolismo energtico).

Resultados
JARRA DE ANAEROBIOSIS

MEDIO OXIGENADO

Interpretacin.- en el medio de cultivo de la izquierda se muestran resultados positivos

debido a que esta estuvo dentro de la jarra de anaerobiosis y como la cepa sembrada
tiene dichas caractersticas de ser anaerobia facultativa por lo tanto el crecimiento se da
de manera adecuada. A diferencia que en la imagen de la derecha no hay crecimiento
alguno debido a que esta placa con la cepa estuvo en condiciones de oxgeno y esto
hace que no haya un crecimiento por las mismas caractersticas mencionadas
anteriormente sobre la cepa de Streptococcus mutans.

Medios de tioglicolato
Medio de cultivo preparado de acuerdo con la Farmacopea Norteamericana para el
control de esterilidad de productos biolgicos y farmacuticos. Adems es utilizado para
cultivar microorganismos anaerobios, microaerfilos y aerobios, y tambin para detectar
la presencia bacteriana en materiales normalmente estriles.
Fundamento
Este medio de cultivo tiene una composicin bastante similar a la del medio Tioglicolato
sin indicador. Permite el desarrollo de una amplia variedad de microorganismos,
incluidos los nutricionalmente exigentes y se observa que las bacterias estrictamente
aerobias, crecen en la parte superior, mientras que las anaerobias facultativas o
anaerobias estrictas crecen en las profundidades del medio. La presencia de grupos -SH(aportados por cistena, tioglicolato, glutatin, etc.) en medios de cultivos con digestos
proteicos facilita el aislamiento de diversas bacterias anaerobias. El tioglicolato de sodio

disminuye el potencial redox del medio de cultivo y neutraliza el efecto antibacteriano

de conservadores mercuriales. La resazurina acta como un indicador de la xidoreduccin, que es de color rosado fucsia en presencia de oxgeno y la glucosa facilita el
desarrollo microbiano al brindar una buena fuente de energa. La presencia de una baja
cantidad de agar, retarda la dispersin de CO2 y O2.

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar claro ligeramente opalescente.

Resultados
MEDIO DE TIGLICOLATO

+
Interpretacin.- los resultados salieron con un crecimiento en toda la lnea donde fue
sembrado pero no se expandi por todo el tubo debido a que la cepa sembrada no
presenta movilidad; aunque hubo un mejor crecimiento en la parte superior que
inicialmente se indic como microaerofila pero por las caractersticas del
microorganismo sembrado que es el Streptococcus mutans esta interpretacin seria que
por ser anaerobia facultativa tambin crece en la parte superior como en todo el medio
pero de manera lineal.

Referencias Bibliogrficas
Microbiologa de alimentos, industrias agrarias y alimentarias (curso 20052006). Disponible en: http://www.unavarra.es/genmic/micalm/manual
%20practicas%20micalimentos.pdf
Rodrguez Valera Francisco. Practica de microbiologa. Universidad Miguel
Hernndez. Disponible en:
http://es.scribd.com/doc/23735297/4/ESTERILIDAD-Y-CONTAMINACION
Medio de cultivo. Bacteriologa general. Catalogo 1056. Disponible en:

http://www.dibico.com/fichast/1056.pdf