PRACTICA No.

Alumno: Correa Cortes

Francisco

ESCALA COLORIMETRICA DE pH.

APLICACIN DE LA ECUACION DE
HENDERSON-HASELBACH

Universidad Autnoma del Estado de

Morelos
Facultad de Medicina

LABORATORIO DE
BIOQUIMICA
Catedrtico: Leticia Garca Gmez
PRACTICA No. 4
ESCALA COLORIMETRICA DE pH.
HENDERSON-HASELBACH.

Alumno: Correa Cortes Francisco

Equipo 6
Grupo: 1 A

PRACTICA No. 4
ESCALA COLORIMETRICA DE pH.

Alumno: Correa Cortes

Francisco

APLICACIN DE LA ECUACION DE
HENDERSON-HASELBACH

OBJETIVOS
Al finalizar la prctica el alumno ser capaz de:
1. Comprender el concepto de pH y su importancia en el organismo, los
conceptos de pK, amortiguador y conocer los principales amortiguadores en el
organismo.
2. Definir Acido, Base y sus implicaciones clnicas
3. Resolucin de problemas acido-base a partir de la ecuacin de HendersonHasselbach. Conocer el concepto de titulacin y de indicador.
HIPTESIS
Las soluciones cidas tienen una mayor concentracin de iones H+, mientras que
las bases tienen una menor concentracin de iones H+. Cuando se utiliza un
indicador que hace el cambio de color cuando el pH cambia, se podr notar que
las soluciones ms bsicas estn teidas ms fuertemente que las poco bsicas, y
lo mismo sucede con las cidas.
FUNDAMENTO
Las soluciones buffer o amortiguadores son mezcla de cidos dbiles, poco
disociados y de sus sales que permiten la adiccin de hidrogeniones (protones) u
oxhidriliones sin cambio significativo de pH de solucin.
El efecto es muy importante para mantener la concentracin de protones (pH) del
medio celular y extracelular dentro de los lmites estrechos compatibles con la
vida.
El pH de la sangre se regula por los sistemas amortiguadoras bicarbonato/
carbonato. Hemoglobina
Reducida/ oxihemoglobina, protena bsica/protena acida, etc. de los cuales es
muy significativo el primero, por la facilidad con que se elimina el bixido de
carbono por los pulmones.
El pH de la sangre arterial normal es de 7.35 a 7.45; de la sangre venosa de
7.32 a 7.42 y los extremos compatibles con la vida son 6.80 a 7.80. La

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dosificacin de los gases de la sangre pCO 2 y Po2 y la lectura potenciomtrica en

aparatos con escala ensanchada y aproximacin de 0.01 de pH, proporcionan
informacin para manejo de los estados de alcalosis y acidosis.
Los indicadores son cidos o bases que se disuelven en forma de molculas
enteras o se disocian en iones de distinto color, segn su pK y el pH de la solucin
en que se encuentran, formndose un sistema amortiguador que abarca la zona
viraje.
Este cambio de color a otro no se lleva a cabo en lmites estrechos, sino que
existe una zona de viraje de ms o menos dos unidades de pH, en donde se
obtienen mezclas de color inicial y de color final.
En este experimento se utilizar un sistema de cido brico e hidrxido de sodio
para formar un gradiente de pH. Dependiendo de las circunstancias de estas dos
soluciones agregadas obtendremos la sal de borato de sodio y agua, en misma
concentracin mol/l del volumen aadiendo de lcali:
H3BO3 + NaOH

NaH2 BO3 + H2O

Este experimento es til para familiarizarse con la ecuacin de HendersonHasselbach en la obtencin del pH.

pH = pKac + log

sal = pK +
cido

log

ml NaOH
mL sol. cido dbil

Esta misma ecuacin es aplicable a los sistemas amortiguadores de la sangre.

MATERIAL
Material de vidriera
Solucin de cido brico o.1 mol/l pKac= 9.14 (1*)
Solucin de hidrxido de sodio 0.1 mol/L
(2*)
Solucin de agua destilada
(3*)
Solucin indicador azul de timol (timosulfonftalena) 0.04 %, zona reviraje 8 a 9.6
(4*)
Refresco de su preferencia 20 mL.
Leche de su preferencia 20 mL.

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Jugo de limn 20 mL
Jugo de naranja 20 mL
Caf soluble 20 mL
Orina de mujer y de hombre 20 mL
METODO
Se prepara una serie de tubos como sigue,
borato/cido brico = sal/ cido.

fin de obtener mezclas de

Rotular los tubos del 1 al 11 y aadir cada uno de las soluciones reactivo en el
orden y volumen exacto indicados en la siguiente serie.

TUBOS
RACTIVO
S

10

11

1*
mL
cidio
brico
2*
mL
NaOH
3*
mL
Agua
4*
Indicado
r

5 .0

5 .0

5 .0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

4.0

4.5

5.0

5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

5.0

3 gotas a cada tubo

mezclar por inversin

RESULTADOS
Los tubos del 1 al 11 constituyen una curva de titulacin de una solucin
amortiguadora, en donde los tubos del 2 al 10 constituyen la zona til, es decir
cerca de su pK donde mantiene mnima variacin. En estos tubos reacciona un
volumen igual de la solucin de NaOH con cido brico formando borato de sodio
y siguen la ecuacin de Henderson-Hasselbalch, mientras que los tubos 1 al 11 no
la siguen, siendo los extremos de la curva y cuyo pH se obtiene por medicin
directa o por clculo, el pH obtenido para el tubo No.1 es de 5.22

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Para calcular pH que corresponde a los tubos del 2 al 10 se aplica la ecuacin de

Henderson-Hasselblach en la siguiente forma:
TUBO No.2
pH = pK + log = [sal ]
[cido]
pH = pK ac + log 0.5
4.5

ml sol NaOH
mL cido - mL NaOH

0.5
5 - 0.5

=0.5
4.5

pH = 9.14 + log 0.5

4.5
pH = 9.14 + (-0.95) = 8.19

y, as sucesivamente con los siguientes tubos.

UN ALUMNO POR EQUIPO:
a). Recolectar una orina al entrar al laboratorio.
b). Tomar agua.
c). Hacer ejercicio intenso.
d). Recolectar una muestra de orina cada hora durante 2 horas.
e). Determinar el pH en las orinas. Calcular concentraciones Hidrgenos y
analizar el porque de los cambios de pH y comprender en equipo acido/base.
REPORTE
1. Calcular el pH para los tubos del 2 al 10.
pH = pKac + log
Tubo

sal = pK +
cido
3
4
5

log
6

ml NaOH
mL sol. cido dbil
7
8
9

10

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pH

8.19

8.54

8.77

.
8.96

9.14

9.32

9.51

9.74

10.09

2. Medir con el potencimetro el pH de los tubos 1 y 11. Nota: el pH se midi

con tiras.

Tubo #1= 6.0

Tubo #11= 13.0

3. Una vez obtenido el pH de cada tubo, graficar en las ordenadas el valor de

pH y en las abscisas los mL. De NaOH adicionados a los tubos.
12
10
8

PH

6
4
2
0
0

0.5

1.5

2.5

3.5

4.5

NaOH agregado (mL)

4. Representar la serie colorimtrica de tubos con la reaccin final, as como

la interpretacin de cada uno en lo particular y de la serie como sistema
amortiguador.

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Se puede observar como el primer tubo, al tener una mayor concentracin

de cido, es mucho ms amarillo que sus consecuentes. Tambin se
observa el vir entre el tubo 4 y 5. A partir del tubo 5 empieza a hacerse
ms intenso el color azul hasta llegar a la mxima intensidad en el tubo 11.
Es importante destacar que el nico tubo cido es el 1, y los dems tubos
son bsicos a pesar de que los tubos 2 a 4 tienen una coloracin amarilla.
En la teora se menciona que el indicador utilizado tiene una zona de vir
entre 8 y 9.6.
5. Anotar los resultados los elementos solicitados.

Refresco: 3.0
Limn= 1.0
Orina= 5.0
Leche= 6.0
Caf= 5.0

6. Sacar los hidrogeniones de los productos solicitados.

Refresco.
pH=3.0, [H]=0.001 M
Limn
pH= 1.0, [H]= 0.1M
Orina
pH= 5.0, [H]= 0.00001M
Leche

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pH= 6.0m [H]= 0.000001M

Caf
pH= 5.0, [H]= 0.00001M

DISCUSIN
En la grfica se puede observar cmo el pH iba aumentando conforme la cantidad
de NaOH agregado aument, sin embargo, el cambio de pH no fue tan drstico.
De igual forma, es notable que en todos los tubos se utiliz la misma cantidad de
cido brico fungi como solucin buffer.
Durante la obtencin de pH de las muestras solicitadas se observ que la muestra
con pH menor fue el jugo de limn con un pH de 1, mientras que la muestra con
un pH ms alto fue la leche con un pH de 6.
Tambin debe notarse que se realizaron las mediciones con el uso de tiras
reactivas, puesto que la cantidad de potencimetros era deficiente y stos
tardaban mucho para poder realizar una medicin.
El indicador usado tena una zona de viraje en la parte bsica de la escala de pH,
por lo que aproximadamente en el tubo 5 se observ el cambio de color de
amarillo a azul. La nica solucin verdaderamente cida es el tubo 1, a partir del
tubo 2, dnde se empieza a agregar NaOH, las soluciones son bsicas.

CONCLUSIN
Las soluciones buffer ayudan a que el pH del organismo se mantenga constante,
mediante diversas reacciones.
Los indicadores de vir indican un cambio de pH en una solucin; stos son
ampliamente utilizados en titulaciones cido-base.
En el experimento se observ que las soluciones con pH extremos tenan una
mayor concentracin de la coloracin.
CUESTIONARIO
PH

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1.- Cul es el pH en la sangre venosa y arterial en los seres vivos y qu

importancia
tiene?
Sangre venosa: 7.35 - 7.45
Sangre arteriosa: 7.32 7.42
El pH permite que la actividad enzimtica se lleve a cabo con normalidad, adems
de que ciertos microorganismos no pueden crecer a pH determinados.
2.- Y cul sea incompatible?
La sangre venosa y arteriosa no pueden mezclarse dentro del organismo pues
esto traera graves consecuencias como la mala oxigenacin de los tejidos y un
aumento en la concentracin de dixido de carbono, considerado como acidosis.
3.- Menciona que sistema, protege al organismo?
El sistema inmunitario
4.- Qu sustancias son degradas en el organismo? Y qu forma al final de
cada ciclo?
Carbohidratos: ATP + CO2
Protenas: Aminocidos, posteriormente en urea.
cidos nucleicos, purinas: se degradan a nucletidos, y stos forman como
desecho cido rico.
Lpidos: cidos grasos.
5.- El acido carbnico es eliminado en la forma de?
Dixido de carbono
6.- Qu se produce en el metabolismo?
El metabolismo se divide en anabolismo (reacciones que llevan a la construccin
de macromolculas) y catabolismo (degradacin de macromolculas)7.-Qu es un sistema amortiguadora?
Son sistemas acuosos que consisten en un cido dbil y su sal o base conjugada.
Una caracterstica propia de los cidos dbiles es que tienen bajos valores de pK,
por lo que su disociacin en iones H+ cuando se encuentran en un sistema
acuoso es muy bajo, y resiste ms a los cambios de pH.

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8.-En la regulacin de PH que aniones y cationes intervienen y cul es el

proceso?
Interviene principalmente el sistema buffer del cido carbnico-Bicarbonato
(H2CO3-HCO3) , y el de cido fosfrico-fosfato cido(H2PO4-, HPO4-). Cuando
un cido entra en el organismo, el bicarbonato es quien acta, y con una reaccin
de doble desplazamiento se produce una sal y cido carbnico. Cuando es una
base la que entra, el cido carbnico es quien acta produciendo agua ms
bicarbonato.
9.-Cmo se puede simplificar las caractersticas por el intercambio de
aniones entre las clulas rojas y el plasma?
El intercambio que llevan a cabo los eritrocitos es el transporte de O2 a las clulas
y el transporte de CO2 hacia los pulmones. Este transporte se lleva a cabo gracias
a la hemoglobina.
10.-En qu rgano de cuerpo humano son reguladores efectivos del
equilibrio acido- base?
Los riones y los pulmones.
11.- Explique la diferencia entre el sistema amortiguador y el de una
sustancia con propiedad anti-acida?
Un sistema amortiguador acta unindose con los tomos del cido o la base,
para producir una sal y cido carbnico, o agua ms bicarbonato cuando es una
base la que se tiene que neutralizar.
12.-En qu forma secreta el rin?
El rin controla el pH por medio del mecanismo de secrecin tubular, que es el
tercero de los procesos que intervienen a nivel renal para la formacin de la orina.
Un bajo pH estimula a las clulas a secretar ion H+, y gracias a l se produce
bicarbonato.
13.- Qu es una acidosis respiratoria?
Es una disminucin del pH por causa de una deficiencia en la excrecin de dixido
de carbono por el aparato respiratorio, es decir, por un incremento en la
concentracin de dixido de carbono.
14.-Qu es una alcalosis respiratoria?

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Es una afeccin marcada por la baja concentracin de dixido de carbono en

sangre.
15.-Qu es una acidosis metablica y alcalosis metablica?
ACIDOSIS METABLICA: ocurre cuando el cuerpo produce demasiado cido o
cuando los riones no estn eliminando suficiente cido del cuerpo.
ALCALOSIS METABLICA: es ocasionada por un exceso de bicarbonato en la
sangre.
BIBLIOGRAFA
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000111.htm
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000335.htm
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001183.htm

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