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PROFESOR
ASIGNATURA
: BIOQUIMICA
SEMESTRE
: 2015-V
CICLO
: IV
GRUPO HORARIO
MESA
Son macromolculas orgnicas, constituidas bsicamente por carbono (C), hidrgeno (H),
oxgeno (O) y nitrgeno (N); aunque pueden contener tambin azufre (S) y fsforo (P) y, en
menor proporcin, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (I), etc.
Estos elementos qumicos se agrupan para formar unidades estructurales llamados
aminocidos, a los cuales podramos considerar como los "ladrillos de los edificios
moleculares proteicos".
Se clasifican, de forma general, en Holoproteinas y Heteroproteinas segn estn formadas
respectivamente slo por aminocidos o bien por aminocidos ms otras molculas o
elementos adicionales no aminoaciditos.1
AMINOACIDOS
Son las unidades estructurales que constituyen las protenas. Todos los aminocidos que se
encuentran en las protenas, salvo la prolina.2
Un aminocido es una molcula orgnica con un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (COOH). Los aminocidos ms frecuentes y de mayor inters son aquellos que forman parte
de las protenas. Dos aminocidos se combinan en una reaccin de condensacin entre el
grupo amino de uno y el carboxilo del otro, liberndose una molcula de agua y formando un
enlace amida que se denomina enlace peptdico; estos dos "residuos" de aminocido forman
un dipptido. Si se une un tercer aminocido se forma un tripptido y as, sucesivamente,
hasta formar un polipptido. Esta reaccin tiene lugar de manera natural dentro de las
clulas, en los ribosomas.3
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CLASIFICACIN DE
LAS PROTENAS.
cuando es un grupo fosfato, etc. Otro criterio de clasificacin de las protenas es la forma
tridimensional de su molcula.
Las protenas fibrosas son de forma alargada, generalmente son insolubles en agua y suelen
tener una funcin estructural, mientras que las protenas globulares forman arrollamientos
compactos de forma globular y suelen tener funciones de naturaleza dinmica (catalticas,
de transporte, etc.)4
ESTRUCTURA PRIMARIA
ESTRUCTURA SECUNDARIA
ESTRUCTURA TERCIARIA
ESTRUCTURA CUATERNARIA
Esta estructura informa de la unin, mediante enlaces dbiles (no covalentes) de varias
cadenas polipeptdica con estructura terciaria, para formar un complejo proteico. Cada una
de estas cadenas polipeptdica recibe el nombre de protmero.
El nmero de protmeros vara desde dos como en la hexoquinasa, cuatro como en
la hemoglobina, o muchos como la cpsida del virus de la poliomielitis, que consta de 60
unidades protecas.5
PROPIEDADES
Especificidad
Las propiedades de las protenas dependen de la estructura tridimensional en el medio
acuoso, es decir, de los aminocidos que se disponen en su superficie, que son los que
constituyen el centro activo; tambin de los aminocidos que se disponen hacia el interior,
ya que son los que dan rigidez y forma a la protena.
Solubilidad
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Las protenas globulares son solubles en agua, debido a que sus radicales polares o hidrfilos
se sitan hacia el exterior, formando puentes de hidrgeno con el agua, constituyendo una
capa de solvatacin. Esta solubilidad vara dependiendo del tamao, de la forma, de la
disposicin de los radicales y del pH.
Desnaturalizacin
Prdida de la estructura tridimensional o conformacin, y por tanto tambin de la actividad
biolgica. Se produce al variar la temperatura, presin, pH, electronegatividad, etc. Esto
provoca la rotura de los puentes de hidrgeno que mantienen las estructuras secundaria y
terciaria, y las protenas se convierten en fibras insolubles en agua. Si las condiciones son
suaves, el proceso es reversible, y si el cambio es ms drstico, es irreversible. 6
REACTIVO DE BIURET
El reactivo de Biuret est hecho de hidrxido de potasio y sulfato de cobre hidratado, junto
con tartrato de sodio y potasio. Tartrato de sodio y potasio se aadi a lo complejo y
estabilizar el reactivo ion cprico cambia de azul a violeta en presencia de protenas, azul a
rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta.
No todas las pruebas de Biuret requieren el reactivo de Biuret. El reactivo se utiliza
comnmente en un ensayo de protenas de Biuret, un ensayo colorimtrico se utiliza para
determinar la concentracin de protenas-tales como UV-VIS a 540 nm de longitud de onda.
La prueba de Biuret es una prueba de producto qumico utilizado para la deteccin de la
presencia de enlaces peptdicos. En la presencia de pptidos, un ion de cobre forma
complejos de coordinacin de color violeta en una solucin alcalina. Varias variantes de la
prueba han sido desarrolladas, tales como el ensayo de BCA y el ensayo de Lowry
modificado.
La reaccin de Biuret se puede utilizar para evaluar la concentracin de protenas debido a
los enlaces peptdicos se producen con la misma frecuencia por cada aminocido en el
pptido. La intensidad del color, y por lo tanto la absorcin a 540 nm, es directamente
proporcional a la concentracin de protena, de acuerdo con la ley de Beer-Lambert.
A pesar de su nombre, el reactivo de hecho no contiene Biuret. La prueba se llama as
porque tambin da una reaccin positiva a los bonos de tipo pptido de la molcula de
Biuret.7
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II.-Parte Experimental
2.1.- Objetivo general:
Reconocer protenas mediante el reactivo de Biuret.
2.2.- Materiales y reactivos:
De vidrio:
2
4
4
1
De metal:
-
Rejilla
Otros:
-
Lapicero
Hojas bond
Cmara
Reactivos
Biuret
Muestra 1
Muestra 2
Experimento N1:
Objetivo especfico:
Reconocer si la muestra 1 es una protena a travs de su reaccin con el reactivo de Biuret.
1
Procedimiento
2
3
1
2
3
Observaciones
Experimento N2:
Objetivo especfico:
Reconocer si la muestra 2 es una protena a travs de su reaccin con el reactivo de Biuret.
Procedimiento
Observaciones
III.-RESULTADOS
REACCION EN LA MUESTRA 1
BIURET
MUESTRA 1
MUESTRA 2
BIURET
+
REACCION EN LA MUESTRA 2
3.1.- Conclusin
3.2.- Recomendaciones:
Cerciorarnos que los materiales estn limpios y secos, es especial los tubos de ensayo y pipeta que son con quienes ms
trabajamos.
Verificar que los materiales estn en perfecto estado.
Al querer identificar una sustancia por el olor, debemos de ventilar hacia nuestro olfato, mas no olerlo directamente del
tubo.
Cerciorarnos de que los reactivos que se utilizaran estn completos en el laboratorio.
3.3.-Referenciales:
1)http://www.aula21.net/nutricion/proteinas.htm
2)http://catedras.quimica.unlp.edu.ar/qo3/Apuntes/Biuret.pdf
3) http://www.buenastareas.com/ensayos/Desnaturalizaci%C3%B3n-e-Hidr%C3%B3lisis-DeProte%C3%ADnas/49489.html
4) http://es.slideshare.net/simargue/informe-de-quimica-desnaturalizacion-proteinas
5)http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2BCH/B1_BIOQUIMICA/t15_PROTEIN
AS/informacion.htm
6) http://ocw.unican.es/ciencias-de-la-salud/bioquimica-estructural-y-metabolica/materialesde-clase/Tema%203.%20Proteinas.%20Composicion%20y%20estructura.pdf
7) http://campodocs.com/articulos-utiles/article_104651.html