Facultad de Farmacia

Departamento de Qumica Fsica

Universidad de Granada

PRCTICA 3
SEPARACIN
DE
ASPIRINA,
ACETOFENITIDINA Y CAFENA POR
CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

Introduccin
A menudo, la aspirina, acetofenitidina y
cafena se usan combinados en las
preparaciones analgsicas y antipirticas.
La deteccin e identificacin en tales
preparaciones puede hacerse por
cromatografa de capa fina.

Material

Recipiente para desarrollo.

Portaobjetos.
Gel de slice para cromatografa de capa fina.
Disolvente eluyente: mezcla de metanol absoluto, cido
actico glacial, ter dietlico y benceno en la proporcin
volumtrica 1:18:60:120.
Disoluciones de aspirina, acetofenitidina y cafena en
cloroformo con concentraciones de 5-10 mg/ml.
Reactivo revelador: permanganato potsico 0,1N en
cido sulfrico 0,05N.
Disolucin mezcla de composicin desconocida.

Recipientes para el desarrollo

Cubetas para cromatografa

Parte experimental

Preparacin de las placas

 Limpiar dos portaobjetos (25x75 mm) con

disolucin de mezcla crmica, o con disolucin
jabonosa, enjuagar minuciosamente con agua
destilada y secar

Preparar una pasta formada por 15 g de gel de slice G

y 37 ml de agua, agitando bien con una varilla.

Coger por sus extremos dos portaobjetos, juntos por

sus caras ms extensas, y sumergirlos en la pasta
separndolos a continuacin. Debe quedar una capa
fina y homognea sobre cada portaobjetos.

Dejar secar al aire

Una vez seco el gel al aire, colocar los portaobjetos en

una estufa a 100C durante una hora

Indicador de
temperatura
abrir la puerta

Colocar los portaobjetos sobre la bandeja

 Preparacin Micropipeta

Abrir el gas para encender el mechero

Abrir la puerta

Girar las llaves de la derecha

cerrado

abierto

Girar la llave a la derecha

abierto
cerrado

 Encender el mechero:
Girar el tornillo del mechero
para dejar salir el gas

Acercar la llama al mechero

Calentar el capilar de vidrio y estirar

Aplicacin de la muestra

 Aplicar en una de las placas la muestra de

composicin desconocida y una sustancia pura,

y en la otra las dos disoluciones restantes

de las sustancias puras,

Aplicar con una micropipeta una gotita de muestra a

unos 12 mm del extremo de la placa, repitiendo
pequeas aplicaciones de la disolucin en un punto y
dejando que cada incremento se seque antes de la
nueva aplicacin. La gota de muestra no debe tener
ms de 3 mm de dimetro.

Desarrollo cromatogrfico

Se vierte el suficiente lquido eluyente en el

recipiente de desarrollo cromatogrfico para
que entre en contacto con el extremo inferior
del portaobjetos, pero sin llegar a tocar las
manchas de la muestra.

Tapar y dejar unos minutos para crear una

atmsfera saturada de fase movil

Colocar los portaobjetos en la cubeta y tapar

Cuando el frente del disolvente haya avanzado

unos 50 mm, se saca de la cubeta y se rasga
cuidadosamente la superficie del portaobjetos
para indicar la posicin del frente del
disolvente. A continuacin se deja secar al aire
durante unos minutos para evaporar el
disolvente orgnico.
Frente de la fase movil

Lugar de colocacin
de las muestras

Revelado del cromatograma

Para ello colocar el portaobjetos seco en un papel

de filtro.

Pulverizar ese portaobjetos con la disolucin de

permanganato potsico mediante el frasco
pulverizador

Se calienta el portaobjetos en una estufa

durante unos minutos.

 Las muestras aparecen como manchas

amarillo-verdosas en un fondo violeta.

La mancha de la cafena es muy dbil y algunas

veces se distingue ms fcilmente observndola por
la parte posterior, es decir, a travs del vidrio.

Clculos

 Determinar el factor de retencin (Rf) para las tres

sustancias.
Distancia de la sustancia al origen
Rf = -------------------------------------------------Distancia del eluyente al origen
Dado que, en cromatografa de capa fina, los valores de
Rf son reproducibles para unas condiciones
experimentales fijas, se utilizan los valores de Rf para
localizar la posicin de cada componente en la placa
donde se ha separado la mezcla desconocida.

Clculos del factor de retencin ( Rf ) para

cada una de las sustancias separadas

Frente del disolvente

5,0 cm

Nueva posicin del compuesto

3.9 cm

Lugar de aplicacin de la muestra

Rf =

3, 9
5, 0

= 0,78