S.E.P.

S.N.E.S.T

D.G.E.S.T.

INSTITUTO TECNOLGICO DE TOLUCA

ING. QUIMICA
ANALISIS INSTRUMENTAL

PRACTICA DE LABORATORIO
ESPECTROSCOPIA UV-VIS

PRESENTA EQUIPO 1:
ALONSO CRUZ ANA LAURA
CHIMAL RODRIGUEZ MARIA GUADALUPE
CONSUELO LOPEZ PAUL ALBERTO
GARCIA BRITO JOSE LUIS
LOPEZ GRANADOS GUSTAVO ADOLFO
QUEZADA GUERRERO JANET ARACELI
UBALDO TORRES MEZTLI GUADALUPE

DOCENTE:
ESTELA MEJIA ZARATE

METEPEC, ESTADO DE MXICO, 05 DE MARZO DE 2015

MARCO TEORICO
La luz es una forma de radiacin electromagntica, usualmente una mezcla de
ondas con diferentes longitudes de ondas. La longitud de onda () es definida
como la distancia entre dos crestas de una onda. Las unidades utilizadas son

nanmetros. Dependiendo de la longitud de onda nuestros ojos perciben un color

diferente, si es que sta se encuentra en el rango visible, o no lo perciben si
pertenece un espectro diferente

ABSORCIN DE LA LUZ
La luz de ciertas longitudes de onda puede ser selectivamente absorbida por una
substancia de acuerdo a su estructura molecular. La absorcin de la energa de la
luz ocurre cuando un fotn incidente promueve la transicin de un electrn de un
estado de menor a mayor energa. Los electrones excitados eventualmente
pierden esta energa ganada y por un proceso de radiacin regresan a su estado
inicial. Cuando un tomo absorbe un fotn, se produce un cambio de niveles
energticos; correspondientes a los diferentes estados electrnicos. Sin embargo
en una molcula la situacin es ms complicada, dado que la absorcin de
energa puede provocar no slo las transiciones electrnicas correspondientes a
los electrones de la molcula, sino tambin cambios en los estados de rotacin y
vibracin de la molcula, puesto que en una molcula, la energa de rotacin y de
vibracin se encuentran cuantizadas al igual que la electrnica.
Las tcnicas experimentales de espectroscopia molecular se denominan en
funcin de la regin del espectro electromagntico a la que corresponde la
radiacin absorbida por la muestra. Existen as tcnicas espectroscpicas de
ultravioleta (UV), visible, infrarrojo (IR) y microondas. Las transiciones entre
estados electrnicos moleculares, corresponden a una absorcin en las regiones
del ultravioleta (UV) y del visible. Las transiciones vibracionales corresponden a la
absorcin de energa en la regin del IR, mientras que las transiciones
rotacionales corresponden a la regin de microondas.

LAMBERT Y BEER
Todos los mtodos espectrofotomtricos se basan en dos leyes que combinadas
se conocen como la ley de Lambert y Beer. La ley de Lambert establece que la
fraccin de luz absorbida por un medio transparente es independiente de la
intensidad de luz incidente, y cada capa sucesiva del medio absorbe una fraccin
igual de la luz pasando a travs de l. Lo cual puede ser expresado como:
log (Io/I) = kl
Donde, Io es la intensidad de la luz incidente, I es la intensidad de la luz
transmitida, l es la longitud por donde pasa la luz en la celda del espectrofotmetro
y k es la constante del medio. La ley de Beer dice, la cantidad de luz absorbida es
proporcional al nmero de molculas del cromforo a travs del cual pasa la luz.
Lo cual indica que:

k = c
Donde c es la concentracin y es el coeficiente molar de absorcin, una
caracterstica propia del cromforo. es igual a la absorcin de una solucin molar
en una celda de 1 cm. Retomado la ecuacin de Lambert, obtenemos que:
log (Io/I) = cl
Si consideramos que el trmino log(Io/I) es conocido como absorbancia y en
algunas ocasiones en algunas ocasiones el paso de la luz a travs de la celda es
descrito en trminos de transmitancia (T = I/Io), tenemos que:
A= log(1/T) = cl
De acuerdo a la ley de Lambert y Beer, la absorbancia debe de ser linealmente
proporcional a la concentracin del cromforo.
El uso de estas mediciones yace en que no es un mtodo destructivo y no
requiere grandes cantidades de muestra.

ESPECTROFOTMETRO
El espectrofotmetro se usa en el laboratorio con el fin de determinar la
concentracin de una sustancia en una solucin, permitiendo as la realizacin de
anlisis cuantitativos.

El espectrofotmetro, construido mediante procesos avanzados de fabricacin, es

uno de los principales instrumentos diagnsticos y de investigacin desarrollados
por el ser humano. Utiliza las propiedades de la luz y su interaccin con otras
sustancias, para determinar la naturaleza de las mismas. En general, la luz de una
lmpara de caractersticas especiales es guiada a travs de un dispositivo que
selecciona y separa luz de una determinada longitud de onda y la hace pasar por
una muestra. La intensidad de la luz que sale de la muestra es captada y
comparada con la intensidad de la luz que incidi en la muestra y a partir de esto
se calcula la transmitancia de la muestra, que depende de factores como la
concentracin de la sustancia.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Partes del espectrofotmetro:

Chasis
Porta cubeta
Selector de filtro
Selector de modo
.Ajuste grueso
Selector de longitud de onda
Indicador de longitud de onda
Pantalla

Fuente de luz: ilumina la muestra, generalmente son lmparas de tungsteno o de

xenn.
Monocromador: asla las radiaciones de longitud de onda deseada. Se usa para
obtener luz monocromtica.

Foto detectores: percibe la seal de mltiples longitudes de onda (hasta 16)

simultneamente.
El equipo del que se dispone en el laboratorio, es un espectrofotmetro de VIS-UV
cercano que nos permite variar la longitud de onda de la radiacin incidente en el
intervalo 325 nm < 8< 1000 nm.

OBJETIVO GENERAL:

Adquirir destreza en la realizacin de medidas experimentales de

absorbancia y su aplicacin a la determinacin de la concentracin de
dicromato de potasio.

OBJETIVOS PARTICULARES:

Determinacin de las absorbancias del dicromato de potasio.

El anlisis cuantitativo de una mezcla problema de dicromato.
Aplicar conocimientos previos para el anlisis de una muestra.
Interpretacin y obtencin de datos para la realizacin de una curva de
calibrado.
Familiarizarse con los conceptos, datos y cantidades del experimento dado.

MATERIALES Y METODOS
REACTIVOS
Disolucin patrn de K2Cr2O7 0.015 M
Disolucin de H2SO4 3.75 M
MATERIALES Y APARATOS

6 Matraces aforados de 25 mL
1 pipeta volumtrica de 1mL
1 pipeta volumtrica de 2mL
1 pipeta volumtrica de 5mL
Bureta de 25 mL
Espectrofotmetro provisto de cubetas de 1 cm de paso ptico.

METODO
a) Determinacin de las absortividades molares del dicromato potasio.
Preparacin el blanco reactivo y la solucin estndar.

 Colocar en matraces aforados de 25 mL diferentes volmenes de la

disolucin patrn, segn la curva que desean trabajar.
Aadir a cada matraz 10 mL de la disolucin de cido sulfrico y aforar con
agua destilada.
Realizar un barrido de 400 a 460 nm y 500 a 560 nm, cada 5 nm. (El
propsito del barrido, por lo tanto, es elegir la longitud de onda ptima para
realizar la medicin.)
Medir las absorbancias de las disoluciones preparadas anteriormente a
440 nm y a 545 nm,
b) Anlisis cuantitativo de una mezcla problema de dicromato
Transferir 5.0 mL de la disolucin problema a un matraz de 25 mL, aadir
10 mL de cido sulfrico 3.75 M y aforar con agua destilada.
Medir las absorbancias a 440nm y a 545 nm frente al mismo blanco que en
el caso anterior. 5.6. Calcular la concentracin de dicromato en la disolucin
problema.

Preparar 5 disoluciones con

diferentes volumenes de
dicromato, 10ml de acido y aforar
con agua destilada a 25 mL

Mdicion de absorvancias
de las disoluciones

Realizacion de barrido

Prepacion del blanco,

solucion de dicromato de
potasio y acido sulfurico.

CUESTIONARIO
a) K2Cr2O7
Concentracin
K2Cr2O7 (M)
BLANCO
1
2
3
4
5
M1
M2

Volumen
(mL)
0
1
2
5
10
15

Absorbancia
440 nm

Absorbancia
545 nm

Calcular:
1. Ecuaciones de las rectas de regresin:
A 440 nm:
A 545 nm:

2. Absortividades del K2Cr2O7:

a 440 nm: ...................................... L mol-1 cm-1
a 545 nm: ....................................... L mol-1 cm-1

3. Mezcla problema
Clculos concentracin de muestra problema en las dos longitudes de onda.

REFERENCIAS
Jos Mara Garca Palanco. (2010). Espectroscopia de absorcin visibleultravioleta. 04/03/2015, de Universidad Politcnica de Madrid Sitio web:
http://ocw.upm.es/fisica-aplicada/tecnicasexperimentales/contenidos/PLQui/6espectroscopia1.pdf
IB. Julio Cesar Soria A.,Dr Manuel Fernandez Guasti.. (2008). Espectrofotometria.
04/03/2015, de mediawiki Sitio web:
http://luz.izt.uam.mx/mediawiki/index.php/Espectrofotometria

MARA TERESA MARTNEZ ESTRADA CLAUDIA L. MOCTEZUMA GONZLEZ.

(2006). MTODOS FSICO-QUMICOS EN BIOTECNOLOGA. 04/03/2015, de
Universidad Autnoma de Mxico Sitio web:
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/espectrofluorimetria.pdf