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PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar
las precauciones normales necesarias, que se requieren al
manejar reactivos de laboratorio.
Verde de Bromocresol
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
La determinacin cuantitativa in vitro de albmina en suero y
plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de forma
manual y en el analizador Rx Monza.
Cat. No.
AB 362
6 x 100 ml
R1.
CAL
BCG Concentrado
Patrn
6 x 13.5 ml
1 x 5.5 ml
Atencin: Patrn
El material de origen humano del que se deriva este producto ha
sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de
Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antgeno de
Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de
Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.
Los mtodos utilizadon estn aprobados por FDA.
Sin embargo, dado que ningn mtodo puede ofrecer una
seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este
material y todas las muestras de pacientes se debern manejar
como posibles transmisores de enfermedades infecciosas y
eliminar apropiadamente.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo
condiciones de laboratorio apropiadas.
ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Y
DEL PATRON
R1.
Concentrado BCG
Diluya el contenido de una botella con 87 ml de agua
destilada. Estable durante 3 meses si se conserva entre
+15 y +25C.
CAL. Estandard
Contenido listo para su uso. Etable hasta la fecha de
caducidad si se conserva entre +15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Concentrado BCG
Patron Albumina
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Pipetas para dispensar volumenes 10 l y 3,0 ml.
Cronmetro y bao de agua o bloque de calentamiento para
mantener la temperatura entre 20 - 25C.
Espectrfotmetro con una capacidad de longitud de onda de
600 a 650 nm
Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel
3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).
R1.
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MANUAL AB 362
PROCEDIMIENTO(2)
Utilice H2O de doble destilacin para realizar una nueva
calibracin de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione ALB en
la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco de
agua de la forma indicada.
Pipetee en una cubeta:
Blanco de reactivo S0
Patrn S1
Muestra
3 l
1000 l
3 l
1000 l
578 nm o 623 nm
630 nm (600 - 650 nm)
1 cm de espesor
20 - 25C
Frente al blanco de reactivo
H2O destilada
Patrn (CAL)
Suero o Plasma
Reactivo de BCG (R1)
Reactivo
Patrn
Muestra
0,01 ml
----3,00 ml
--0,01 ml
--3,00 ml
----0,01 ml
3,00 ml
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar dos
niveles de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
INTERFERENCIA
Se analizaron los siguientes analitos hasta los siguientes niveles y
se encontr que no interfieren:
Bilirrubina
Intralpido
Triglicridos
Hemoglobina
500 mol/l
1,2%
22,75 mmol/l
6 g/l
x
Apatrn
Concentracin
del patrn
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia DA470 de la albmina (IFCC).
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MANUAL AB 362
PRECISION (Suero)
Anlisis (Intra)
Nivel 1
Media (g/dl)
2,86
DE
0,036
CV (%)
1,28
n
20
Nivel 2
4,36
0,031
0,71
20
Anlisis (Inter)
Media (g/dl)
DE
CV (%)
n
Nivel 1
2,86
0,129
4,52
20
Nivel 2
4,36
0,174
3,99
20
CORRELACION
Se compar el mtodo Randox (Y) con un mtodo comercial
disponible (X). Se analizaron 51 muestras con valores
abarcando un rango de 22 a 46 g/l en un analizador Hitachi 747.
El anlisis de regresin lineal de los datos result en la siguiente
ecuacin:
Y = 1,073 X + 0,204
con un coeficiente de correlacin r = 0.9910
Se analizaron 40 muestras con valores de entre 1,66 y 4,51 g/dl.
REFERENCIAS
1. Grant G.H., et al Amino Acids and Proteins; Fundamentals of
Clinical Chemistry, Tietz N.W. Editor, Third Edition, WB
Saunders Company Philadelphia USA, 328-329, 1987
2. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H.G., Clin. Chim. Acta.
1971; 31: 87.
Revised 10 Sep 10 bm
Rev. 001
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FOSFATASA ACIDA
(ACP)
Mtodo Colorimtrico
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Fosfatasa Acida en el suero.
Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador
Rx Monza.
No. Cat.
AC 1011
20 x 3 ml
R1. Tampn
R2. Sustrato
R3. Tartrato
SAM STAB Estabilizador
1 x 70 ml
20 x 3 ml
10 frascos
1 frasco
METODO COLORIMETRICO
fosfatasa cida
fosfato + 1-naftol
1-naftol+sal de 4-cloro-2-metilfenildiazonio*
colorante azo
* = Sal TR Fast Rojo
PREPARACION DE LA MUESTRA
Suero. La muestra puede ser estabilizado mediante la adicin de
1 gota de cido actico estabilizador (STAB SAM) a 1 ml de
suero. Estable durante 3 das a +2 y +8C 24 horas a +15 y
+25C.
Suero. La muestra se estabiliza aadiendo una gota de cido
actico (estabilizador 4) a 1 ml de suero. Es estable durante 3
das entre +2 y +8C 24 horas entre +15 y +25C.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1 Tampn
Tampn citrato
R2. Sustrato
1-naftilfosfato
Sal TR Fast Rojo
R3. Tartrato
Tartrato sdico
SAM STAB Estabilizador
Acido actico
PRINCIPIO(1)
1-naftil-fosfato + H2O
0,05 ml
0,5 ml
Concentraciones en la prueba
75 mmol/l, pH 5,2
10 mmol/l
2,5 mmol/l
0,05 ml
0,5 ml
135 mmol/l
3 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
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Hg 405 nm
1 cm de espesor
30/37C
frente al aire
Muestra
Solucin de reactivo R2
Macro
Semi Micro
0,20 ml
2,00 ml
0,10 ml
1,00 ml
30C
37C
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador RX monza.
FOSFATASA CIDA TOTAL
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 159 U/I.
Si la concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe
diluir 1 + 4 con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse
a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de fosfatasa cida con un
nivel aceptable de precisin se determin en 2,53 U/l.
PRECISION
Intraensayo
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Interensayo
Media (U/l)
DE
CV(%)
N
Nivel 2
15.9
0.717
4.51
20
Nivel 3
43.6
1.90
4.35
20
Nivel 2
15.9
1.05
6.59
20
Nivel 3
43.6
3.04
6.98
20
CORRELACIN
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9723 X + 0.5527
y un coeficiente de correlacin de r = 0,9925
se analizaron 42 muestras de pacientes abarcando un rango de
2,5 a 93,9 U/l.
FOSFATASA CIDA NO PROSTTICA
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 80,8 U/I.
Si la concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe
diluir 1 + 4 con una solucin del 0,9% de NaCI y debe someterse
a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de fosfatasa cida con un
nivel aceptable de precisin se determin en 1,76 U/l.
PRECISION
Intraensayo
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Interensayo
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
6.65
0.289
4.34
20
Nivel 2
17.8
0.765
4.30
20
Nivel 1
6.65
0.295
4.43
20
Nivel 2
17.8
0.892
5.01
20
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CORRELATION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9653 X + 0.1849
y un coeficiente de correlacin de r = 0,9971.
se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de
2,1 a 80,2 U/l.
REFERENCIAS
1. Hillmann, G.J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1971; 9: 273.
2. Silver, D., et al., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21: 519.
Revisado 05 Sep 11 bm
Rev. 002
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ALDOLASA (ALS)
Fructosa-1,6-difosfato aldolasa
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Aldolasa en suero y plasma.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma Manual y
en el analizador RX monza.
No. Cat.
AD 189
5 x 20 ml
R1. Tampn/Sustrato
R2. NADH
R3. GDH/TIM/LDH
5 x 20 ml
2 x 1 ml
1 vial
PRINCIPIO
La aldolasa convierte la fructosa-1,6-difosfato (F-1,6-DP) en
gliceraldehdo-3-fosfato (GAP) y dihidroxiacetona fosfato (DAP).
La adicin de triosafosfato isomerasa (TIM), glicerolfosfato
deshidrogenada (GDH) y NADH convierte la dihidroxiacetona
fosfato en glicerol-1-fosfato. El grado de la reaccin de la aldolasa
se mide por la disminucin de la absorbancia a 340 nm como
consecuencia de la conversin de NADH en NAD+.
aldolasa
F-1,6-DP
DAP
GDH
2Glicerol-1-P + 2 NAD+
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1. Tampn/Sustrato
Tampn colidina
Monoyodoacetato
F-1,6-DP
R2. NADH
R3. GDH/TIM/LDH
GDH
TIM
LDH
Ammonium Sulphate
R3. GDH/TIM/LDH
Componentes listos para su uso. Es estable hasta la
fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8C.
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DEL REACTIVO EN
FUNCIONAMIENTO PARA RX MONZA
Prepare el reactivo en funcionamiento como se indica en la tabla
siguiente:Tampn/Sustrato
R1
2.5ml
5.0ml
10.0ml
NADH
R2
0.05ml
0.1ml
0.2ml
GDH/TIM/LDH
R3
0.01ml
0.02ml
0.04ml
GAP + DAP
TIM
GAP
R2. NADH
Reconstituir un vial de NADH 2 con 1 ml de agua
bidestilada. Es estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.
Concentracin en la prueba
51 mmol/l, pH 7,4
0,27 mmol/l
2,7 mmol/l
0,23 mmol/l
326 mU/ml
4,35 U/ml
616 mU/ml
> 35%
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y bajo
condiciones de laboratorio apropiadas.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn/Sustrato
NADH
GDH/TIM/LDH
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Calibrador de aldolasa de Randox (No. Cat. AD 5000)
Control de Aldolasa Randox Nivel 2 (Cat. No. AD 5001) y Nivel
3 (Cat. No. AD 5002)
0.9% Solucin NaCl.
PROCEDIMIENTO
Seleccione ALS en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a
cabo un blanco de agua de la forma indicada.
Pipetee en un tubo de ensayo:
SO*
Patrn
S1
Muestra
35l
----450 l
--35 l
--450 l
----35 l
450 l
PAGE 1 OF 2
0,2 ml
2,50 ml
-
Calibrador
Muestra
0,2 ml
2,50 ml
0,05 ml
0.01 ml
0,2 ml
2,50 ml
0,05 ml
0,01 ml
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 106 U/l. Si la
concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir
1+4 con una solucin de NaCl del 0,9% y debe someterse a
ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Aldolasa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 1,73 U/l.
PRECISION
Precisin intraensayo
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Precisin interensayo
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
6.36
0.295
4.64
20
Nivel 3
19.1
0.854
4.47
20
Nivel 2
6.36
0.402
6.32
20
Nivel 3
19.1
1.35
7.09
20
CORRELACIN
El mtodo de Randox (Y) se compar con otro mtodo
comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de
regresin lineal:
Y = 0,9815 X + 0,183
y un coeficiente de correlacin r = 0,9917.
Se analizaron 42 muestras con valores de entre 2,46 y 89,86 U/l.
REFERENCIA
1. Feissli, S., et al., (1966). Klin. Wschr. 44: 390.
INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere en la prueba.
VALORES DE REFERENCIA(1)
Suero:
Hasta 7,6 U/l (37C)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECFICAS
Se obtuvieron las siguientes caractersticas de rendimiento
mediante un analizador RX monza y un modo de clula de flujo
a 37C.
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ALT
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
de reactivos de laboratorio.
Alanina Aminotransferasa
IFCC
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Alanina
Aminotransferasa en el suero y plasma. Este producto es
adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza.
No. Cat.
AL 1200
20 x 2 ml
AL 1205
10 x 10 ml
AL 1268
5 x 20 ml
AL 2360
5 x 100 ml
R1a.
R1b.
R1a.
R1b.
R1a.
R1b.
R1a.
R1b.
Tampn/Substrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
1 x 70 ml
Tampn/Substrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
1 x105 ml
20 x 2 ml
10 x 10 ml
Tampn/Substrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
1 x 105 ml
Tampn/Substrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
5 x 100 ml
5 x 20 ml
5 x 100 ml
METODO UV
Este es un mtodo estandard optimizado de acuerdo con las
concentraciones recomendadas por la IFCC.
PRINCIPIO
ALT
-oxoglutarato + L-alanina
L-glutamato + piruvato
LD
piruvato + NADH + H+
L-lactato + NAD+
MUESTRA
Suero, plasma heparinizada o plasma EDTA.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
Concentracin en la Prueba
R1a. Tampn/Substrato
Tampn Tris
100 mmol/l, pH 7,5
L-alanina
0,6 mol/l
R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
-oxoglutarato
15 mmol/l
LD
1,2 U/ml
NADH
0,18 mmol/l
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MANUAL AL 1200
PROCEDIMIENTO
Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva
calibracin de la ganancia en el modo de clula de flujo.
Seleccione ALT en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
INTERFERENCIA
Evitar la hemlisis ya que interfiere con el anlisis.
VALORES DE NORMALIDAD EN SUERO(1)
25C
30C
hasta 22 U/l
hasta 17 U/l
hasta 29 U/l
hasta 22 U/l
Hombres
Mujeres
0,05 ml
0,5 ml
Pipetear en la Cubeta:
Muestra
R1. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
Macro
Micro
0,2 ml
2,0 ml
0,1 ml
1,0 ml
37C
hasta 40 U/l
hasta 31 U/l
Anlisis (Intra)
CLCULO MANUAL
Para calcular la actividad de la ALT utilizar la siguiente frmula:
Anlisis (Inter)
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
38.9
1.79
4.61
20
Nivel 3
134
1.59
1.19
20
Nivel 2
38.9
1.78
4.58
20
Nivel 3
134
5.22
3.90
20
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia JSCC TS01 de ALT.
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
Y = 0,99 X + 17,2
y un coeficiente de correlacin r = 0,9935
Se analizaron 47 muestras de pacientes con valores de entre
18 y 522 U/l.
REFERENCIAS
1. International Federation of Clinical Chemistry, Scientific
Committee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980; 18:
521-534.
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AMONIACO (NH3)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Mtodo Enzimtico - UV
MANUAL
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Amonaco en plasma.
Este producto es adecuado para su utilizacin en Manual.
No. Cat.
AM 1054
20 x 3 ml
R1a.
R1b.
R2.
CAL.
Reactivo
Tampn
GLDH
Patrn
20 x 3 ml
70 ml
1,0 ml
5,5 ml
RELEVANCIA CLNICA
La mayor fuente de amoniaco en circulacin es el tracto
gastrointestinal. En condiciones normales, el amoniaco se
metaboliza a la urea por las enzimas hepticas. Muchas
enfermedades, tanto heredadas como adquiridas, causan un
incremento en los niveles de amoniaco (hiperamonemia). Las
deficiencias heredadas de las enzimas del ciclo de la urea son la
mayor causa de hiperamonemia en nios. La hiperamonemia
adquirida est provocadas por una enfermedad heptica,
insuficiencia renal o el sndrome de Reye. Un nivel de amoniaco
elevado resulta txico para el sistema nervioso central.
PRINCIPIO(1)
GLDH
glutamato + NAD+
GLDH
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.
CAL. Patrn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.
R1 = Reactivo/Tampn
R2 = GLDH
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo
Tampn
GLDH
Patrn
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO
PROPORCIONADOS
Controles Randox de Amonio Etanol:
NIvel 1 (Cat. No. EA 1366)
Nivel 2 (Cat. No. EA 1367)
Nivel 3 (Cat. No. EA 1368)
PAGINA 2 DE 2
PROCEDIMIENTO
CLCULOS
Ablanco = Blanco A1 - Blanco A2
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
340 nm
1 cm de espesor
25/30/37C
Frente al aire
Utilizando un patrn:
Amuestra - Ablanco
Procedimiento Macro
Conc. de
Amonaco =
Pipetear en la cubeta:
Blanco de
Reactivo
Patrn
Muestra
--0,2 ml
--3,0 ml
----0,2 ml
3,0 ml
0,2 ml
----3,0 ml
Muestra
Agua destilada
Patrn
Reactivo (R1)
x Patrn de conc.
Apatrn
Ablanco
INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere con el anlisis.
En muestras normales se observa un pequeo cambio de
absorbancia. Esto puede ser aumentado aadiendo 0,3 ml de
muestra en vez de 0,2 ml. para el procedimiento macro y 0,15 ml
de muestra en vez de 0,1 ml para el procedimiento semi micro.
GLDH (R2)
0,02 ml
0,02 ml
0,02 ml
Muestra
Agua destilada
Patrn
Reactivo (R1)
Blanco de
Reactivo
Patrn
Muestra
--0,1 ml
--1,5 ml
----0,1 ml
1,5 ml
0,1 ml
----1,5 ml
10 - 47 mol/l
0,17 -0,80 g/ml
0,01 ml
0,01 ml
0,01 ml
ANTITROMBINA III
(AT III)
SEMIAUTOMTICO
INDICACIONES
Determinacin cuantitativa in vitro de la antitrombina III (AT
III) en plasma humano mediante el mtodo cromognico. El
producto es adecuado para uso con mtodos manuales o
semiautomticos.
Nm. cat.
ANT 2754 R1a. Reactivo de trombina
26 ml
R1b. Tampn
R2. Sustrato
4 x 2 ml
1 x 10 ml
4 x 2 ml
RELEVANCIA CLNICA
La antitrombina III es un inhibidor de las proteasas
plasmticas del tipo serina. Una funcin importante de la
antitrombina III es inhibir la actividad de la trombina. Por lo
general, la velocidad de inhibicin de la trombina causada por
la antitrombina III es lenta (actividad antitrombina
progresiva). Sin embargo, dicha velocidad puede aumentar
miles de veces en presencia de heparina (actividad cofactor
de la heparina).
Tolefsen y Blank(1) han descubierto otro inhibidor rpido de
la trombina que depende de la heparina, el cofactor II de la
heparina, en el plasma humano. Esta protena puede interferir
en las mediciones de antitrombina III, especialmente a
concentraciones de heparina elevadas (2 unidades/ml USP).
PRINCIPIO
En este mtodo de dos fases(2) se aade trombina a la
solucin diluida de plasma que contiene antitrombina III en
presencia de exceso de heparina. Tras un perodo de
incubacin inicial (fase 1) la actividad residual de la trombina
se determina con un sustrato cromognico especfico de la
trombina (fase 2). La actividad residual de la trombina es
inversamente proporcional a la concentracin de
antitrombina III.
Con el fin de conferir especificidad para la antitrombina III,
este sistema de ensayo utiliza un concentracin final de
heparina ms baja, en la cual la inactivacin de la trombina
aumentada por heparina, debida al cofactor II de la heparina,
es desdeable. Adems, el cofactor II de la heparina humana
reacciona ms fcilmente con la trombina humana que con la
bovina(3). As, este sistema de ensayo presenta mayor
especificidad para la antitrombina III al utilizar trombina
bovina.
MUESTRA
Plasma citrado.
Plasma diluido 1+40 en NaCl al 0,9%.
Concentracin inicial
de las soluciones
8 UI/ml
90 mmol/l, pH 8,2
2,5 mmol/l
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE
SEGURIDAD
Solo para uso diagnstico in vitro. No pipetee con la boca.
Aplique las precauciones habituales necesarias para la
manipulacin de reactivos de laboratorio.
El reactivo tampn de la antitrombina III (R1b) contiene acida
sdica. Evite la ingestin o el contacto con la piel o las
mucosas. En caso de contacto con la piel, lave el rea
afectada con abundante agua. En caso de contacto con los
ojos o ingestin, busque atencin mdica de inmediato.
La acida sdica reacciona con las tuberas de plomo y cobre,
con el consiguiente riesgo de generacin de acidas explosivas.
Al eliminar estos reactivos, hgalo con gran cantidad de agua
para evitar la acumulacin de acidas.
Las superficies
expuestas de metal deben limpiase con hidrxido sdico al
10%.
Estn disponibles, previa peticin, las fichas tcnicas de salud
y seguridad.
Los reactivos deben utilizarse solo para la finalidad
prevista
y
por
personal
de
laboratorio
adecuadamente cualificado, en unas condiciones de
laboratorio apropiadas.
PGINA 1 DE 3
R1b. Tampn
Contenido listo para su uso. Estable hasta la fecha de
caducidad cuando se almacena a una temperatura entre
+2 y +8C.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los controles de coagulacin Randox de nivel
1, 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse
tres niveles de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos deben situarse dentro de un intervalo
determinado. Si estos valores estn fuera del intervalo y la
repeticin excluye un posible error, debe procederse como
sigue:
1. Comprobar los parmetros del instrumento.
2. Comprobar que todo el equipo utilizado est limpio.
3. Comprobar los contaminantes, como un crecimiento
bacteriano, que pueden contribuir a la obtencin de
resultados imprecisos.
4. Comprobar la temperatura de la reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido.
6. Pngase en contacto con el servicio tcnico de atencin
al cliente de Randox Laboratories, llamando al telfono
+44 (0) 28 9442 2413 (Irlanda del Norte).
R2. Sustrato
Reconstituya un vial de sustrato (R2) con 2 ml
de agua desionizada.
Estable durante 8 das entre +15 y +25C; 14 das
entre +2 y +8C; 90 das a -20C.
Precaliente las partes alcuotas de reactivo de
trombina (R1a) y sustrato (R2) a +37C antes de
utilizarlas.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo de trombina
Tampn
Sustrato
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Calibrador de coagulacin Randox (N. cat. CG5037)
Controles de coagulacin Randox de nivel 1, 2 y 3 (N. cat.
CG5021, CG5022 y CG 5023)
Micropipetas
Micropuntas
Analizador de coagulacin foto-ptico
Temporizador
PROCEDIMIENTO
Pipetear en una cubeta
Muestra diluida/control/calibrador
Reactivo de trombina (R1)
100 l
100 l
100 l
VALORES PREVISTOS
Los valores normales con el reactivo Randox AT III estn
comprendidos dentro del 75 y 125%.
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
rango de referencia, ya que pueden existir diferencias entre
instrumentos, laboratorios y poblaciones locales.
INTERFERENCIA
Evite utilizar muestras fuertemente hemolizadas y lipmicas,
ya que pueden interferir con el ensayo.
Se comprobaron los siguientes analitos, hasta los niveles que
se indican, sin encontrar interferencias:
Bilirrubina conjugada
Bilirrubina libre
Intralpidos
Triglicridos
Hemoglobina
12 mg/dl
12 mg/dl
300 mg/dl
320 mg/dl
140 mg/dl
CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTO
Se han obtenido los siguientes datos de rendimiento
mediante un coagulmetro semiautomtico a +37C.
SENSIBILIDAD
La actividad mnima detectable de la antitrombina III se
determina como 30,0%.
LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta un 130% de actividad de la
antitrombina III. Si la muestra excede este valor, diluya las
muestras previamente diluidas (1+40) de plasma an ms 1+1
con salino al 0,9% y repita el anlisis. Multiplique el resultado
por 2.
PGINA 2 DE 3
PRECISIN
Intraensayo
Media (%)
DE
CV (%)
n
Normal
102
1.89
1.86
20
Patolgica
65,5
2,35
3,59
20
Normal
85.0
1.86
2.19
20
Patolgica
59.4
2.24
3.77
20
Interensayo
Media (%)
DE
CV (%)
n
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se ha comparado con otro mtodo
disponible en el mercado (X) y se ha obtenido la siguiente
ecuacin de regresin lineal:
Y = 1,00X + 0,22
y un coeficiente de correlacin de 1,00
Se analizaron 40 muestras de pacientes que abarcaron un
rango del 38,3 al 113,7%
REFERENCIAS
1. Tolefsen DM and Blank MK, J. Clin. Invest. 68: 589-596,
1981.
2. Odegard OR, Lie M and Abildgaard U: Thromb Res. 6:
287-294, 1975.
3. Friberger P, Egberg N, Holmer E, Hellgren M and
Blomback M, Thromb. Res. 25: 433-436, 1982.
4. Rosemary
Biggs,
Human
blood
Coagulation,
Haemostasis and Thrombosis, Blackwell Scientific
Publications, Oxford, England, 1972.
Revisado 25 may 12 rw
Rev. 002
PGINA 3 DE 3
ALP
Fosfatasa Alcalina
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Fosfatasa Alcalina
(ALP) en suero yl plasma. Este producto es adecuado para un
uso manual o en el analizador Rx Monza.
No. Cat.
AP 542
20 x 3 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrato
1 x 70 ml
20 x 3 ml
AP 307
10 x 10 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrato
1 x 105 ml
10 x 10 ml
R1b. Substrato
Reconstituir un frasco de Substrato R1b con el
volumen apropiado de Tampn R1a:3 ml para el kit de 20 x 3 ml (AP 542)
10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AP 307)
Estable durante 30 das entre +2 y +8C 3 das entre
+15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
Substrato
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Srum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).
Salino (Cat. No. SA 3854)
ALP
p-nitrofenilfosfato + H2O
fosfato + p-nitrofenol
MUESTRA(2)
Suero o plasma heparinizado.
Las muestras son estables durante 5 das cuando se conservan
entre +2 y +8C.
Tampn
Tampn Dietanolamina
MgCl2
Substrato
p-nitrofenilfosfato
PROCEDIMIENTO
Aspire H2O de doble destilacin y realice una nueva
calibracin de la ganancia en el modo de clula de flujo.
Seleccione ALP en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
Concentraciones en la Prueba
1 mol/l, pH 9,8
0,5 mmol/l
10 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
de reactivos de laboratorio.
La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
atencin mdica inmediatamente.
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las
caeras, formando cidos potencialmente explosivos. Cuando
se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes
de agua para evitar la formacin de cidos. Las superficies
metlicas expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio
al 10%.
La Solucin R1a contiene dietanolamina que puede daar
seriamente los ojos y que es daino si se traga. Evitar la
ingestin y llevar proteccin adecuada para los ojos.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propsito por personal de laboratorio cualificado, y
bajo condiciones de laboratorio apropiadas.
Muestra
Reactivo
0,01 ml
0,5 ml
Hg 405 nm
1 cm de espesor
25C, 30C, 37C
frente al aire
Macro
SemiMicro
Micro
0,05 ml
3,00 ml
0,02 ml
1,00 ml
0,01 ml
0,50 ml
PRECISION
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte (028) 94422413.
Anlisis Inter
Anlisis Intra
INTERFERENCIA
Evitar la hemlisis ya que interfiere con el anlisis. Los
siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y
se encontr que no interfieren:
Bilirrubina
Intralpidos
Triglicridos
Hemoglobina
PAGINA 2 OF 2
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
262
8.11
3.10
20
Nivel 3
486
9.49
1.95
20
Nivel 2
262
11.59
4.43
20
Nivel 3
486
17.01
3.50
20
CORRELATION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en
el mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.076X - 14.5
y un coeficiente de correlacin de r = 0.9975
se hicieron anlisis a 43 pacientes abarcando un rango
de 52 a 965 U/l.
REFERENCIAS
1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1972;
10: 182.
2. Englehardt A., et al, Aerztl Labor 1970 16 42.
30C
37C
73-207 U/l
98-279 U/l
AST
Aspartato Aminotransferasa
IFCC
MANUAL
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de aspartato aminotransferasa
(AST) en suero y plasma. Este producto es adecuado para su
utilizacin de forma manual y en el analizador Rx Monza.
Cat. No.
AS 1202
20 x 2 ml
R1a.
R1b.
Tampn/Sustrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
1 x 70 ml
20 x 2 ml
AS 1204
10 x 10 ml
R1a
R1b
Tampn/Sustrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
1 x 105 ml
10 x 10 ml
AS 1267
5 x 20 ml
R1a
R1b
Tampn/Sustrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
1 x 105 ml
5 x 20 ml
AS 2359
5 x 100 ml
R1a
R1b
Tampn/Sustrato
Enzima/Coenzima/
-oxoglutarato
5 x 100 ml
5 x 100 ml
METODO UV
Este es un mtodo estndar optimizado segn las
concentraciones recomendadas por la IFCC.
SIGNIFICADO CLINICO(1,2,3,4)
Las aminotransferasas son un grupo de enzimas que catalizan las
inter conversiones de aminocidos y -oxocidos por medio de la
transferencia de grupos amino. La GOT (aspartato
aminotransferasa o transaminasa de oxaloacetato glutamato) se ha
encontrado en el citoplasma y mitocondrias de las clulas
estudiadas. En caso de un ligero dao del tejido como por ej. el
hgado, la forma predominante de la GOT en suero es la del
citoplasma, con una cantidad ms pequea proviniente de las
mitocondrias. Un dao ms severo del tejido dar como resultado
una mayor liberacin de enzima mitocondrial. Los niveles elevados
de AST pueden ser una seal de infarto de miocardio, enfermedad
heptica, distrofia muscular y dao de rganos.
Los msculos del corazn son los que muestran ms actividad de
sta enzima, sin embargo tambin se ha encontrado en el cerebro,
hgado, mucosa gstrica, tejido adiposo y riones humanos.
La IFCC recomienda actualmente (1980) procedimientos
estandarizados para los anlisis de GOT incluyendo:1. optimizacin de las concentraciones de substrato.
2. Empleo de tampones Tris (en lugar de fosfato, el cual se ha
demostrado que inhibe la recombinacin de la apoenzima con
el fosfato piridoxal).
3. Preincubacin de suero y tampn combinado para permitir que
tengan lugar posibles reacciones con NADH.
4. Substrato de inicio (-oxoglutarato)
5. Activacin de fosfato piridoxal opcional.
Este es un mtodo estndar optimizado de acuerdo a las
recomendaciones de la IFCC.
PRINCIPIO
El -oxoglutarato reacciona con la L-aspartato en presencia de
GOT para formar L-glutamato mas oxaloacetato. La reaccin
indicadora utiliza el oxaloacetato para la determinacin cintica
del consumo de NADH.
-oxoglutarato + L-aspartato
oxaloacetato + NADH + H+
AST
MDH
L-glutamato + oxaloacetato
L-malato + NAD+
Concentraciones en la prueba
Tampn/Sustrato
Tampn Tris
80 mmol/l, pH 7,5
L-aspartato
240 mmol/l
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato
-oxoglutarato
12 mmol/l
MDH
420 U/l
LD
600 U/l
NADH
0,18 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
La Azida Sdica reacciona con el cobre y el plomo de las
tuberas, lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se
deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para
evitar la formacin de estas azidas explosivas. Las superficies
metlicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sdica
deben ser lavadas con hidrxido sdico al 10%.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si
se desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
PAGE 2 OF 3
MANUAL CALCULOS
Para calcular la actividad de la GOT utilizar las frmulas
siguientes:
U/l = 1746 x A 340 nm/min
U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min
U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia JSCC TS01 de AST.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
ESPECIFICIDAD/INTERFERENCIA(6,7)
La hemlisis bruta producir falsos resultados elevados.
Se deber tomar en consideracin los efectos de varios frmacos
en la actividad de La GOT en los casos de pacientes que estn
recibiendo grandes dosis de frmacos.
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y
se encontr que no interfieren:
Hemoglobina
Bilirrubina libre
Bilirrubina conjugada
Triglicridos
Intralipid
0.05 ml
0.5 ml
250 mg/dl
25 mg/dl)
25 mg/dl)
1000 mg/dl)
200 mg/dl
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
Pipetear en cubeta:
Macro
Micro
Muestra
Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2
0,2 ml
2,0 ml
0,1 ml
1,0 ml
25C
Hombre:
Mujer :
Hasta 18 U/l
Hasta 15 U/l
30C
37C
Hasta 25 U/l
Hasta 21 U/l
Hasta 37 U/l
Hasta 31 U/l
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LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta una concentracin de 562 U/l. Si la
concentracin sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 +
9 con una solucin de NaCl del 0,9% y debe someterse a ensayo
de nuevo. Multiplicar el resultado por 10.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de AST con un nivel
aceptable de precisin se determin en 9,3 U/l.
PRECISION
Anlisis (Intra)
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
35.6
1.66
4.65
20
Nivel 3
153
1.47
4.63
20
Nivel 2
35.6
1.77
4.86
20
Nivel 3
153
7.10
4.63
20
Anlisis (Inter)
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
CORRELATION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en el
mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.07X + 4.9
y un coeficiente de correlacin de r = 0.9975
se hicieron anlisis a 43 pacientes abarcando un rango de 28 a
559 U/l.
REFERENCIAS
1. Wroblewski F, La Due J.S: Ann Intern Med. 1956; 45: 801.
2. Wroblewski F, La Due J.S: Proc Soc Exp Biol Med 1956;
91: 569.
3. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: Clin Chem 1977; 23:
887.
4. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: J.Clin Chem Clin
Biochem 1980; 18: 521-534.
5. Tietz N W: Fundamentals of Clinical Chemistry ed 3.
Philadelphia, WB Saunders Co. 1987, pg 372.
6. Young D S, et al: Clin Chem 1975, 21; No5.
7. Friedman RB, et al: Clin Chem 1980, 26; No4.
8. Wallnofer H, Schmidt.E, Schmidt FW, eds: Synopsis der
Leberkrankheiten Stuttgart, Georg Thieme Verlag, 1974.
9. Thefeld W, et al: Dtsch Med Wschr 1974; 99: 343.
Revisado 10 Sep 10 bm
Rev. 001
AMILASA (AMY)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
de reactivos de laboratorio.
Etilideno Bloqueado-pNPG7
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de la Amilasa en el
suero y orina. Este producto es adecuado para su utilizacin
de forma manual y en el analizador Rx Monza.
No. Cat.
AY 2751
20 x 2 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrato
1 x 50 ml
20 x 2 ml
AY 1580
20 x 5 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrato
1 x 105 ml
20 x 5 ml
AY 1582
9 x 20 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrato
2 x 105 ml
9 x 20 ml
METODO COLORIMETRICO(1,2)
El mtodo utiliza etilideno bloqueado
p-nitrofenil-maltoeptaosida como substrato. Tambin se utiliza
en este mtodo el indicador enzima glucosidasa, utilizado para
liberar el p-nitrofenol. La glucosa terminal del sustrato se
bloquea qumicamente, previniendo la divisin por el enzima
indicador.
-amilasa
etilideno-G7 pNP
-glucosidase
Gx-pNP
glucosa + pNP-glucosido
- glucosidasa
pNP-glucosido
G
pNP
x
glucosa + pNP
= glucosa
= paranitrofenol
= 2 to 5
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado u orina.
Diluir la orina 1+2 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado
por 3.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
R1a. Tampn
Tampn Pipes
Cloruro de Calcio
Cloruro Sdico
R1b. Substrato
Tampn Pipes
etilideno-G7 pNP
-glucosidasa
50 mmol/l, pH 7.0
5.0 mmol/l
50 mmol/l
12.5 mmol/l, pH 7.0
1.0 mmol/l
12 U/ml
0.01 ml
0.5 ml
PAGE 1 OF 2
0.02 ml
1.0 ml
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de la amilasa con un nivel
aceptable de precisin ha sido determinada en 17.9 U/l.
PRECISION
Intraensayo
Media (U/l)
DE
CV (%)
n
Nivel 2
72.1
3.17
4.39
20
Nivel 3
251
7.35
2.93
20
Nivel 2
72.1
3.97
5.50
20
Nivel 3
251
8.81
3.51
20
Interensayo
Media (U/l)
DE
CV (%)
n
CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.077 X - 8.548
con un coeficiente de correlacin r = 0.9963
se analizaron 49 muestras de pacientes abarcando un rango de
28 - 838 U/l.
REFERENCIAS
1. Ranscher, E. et al (1986) Fresenius Z. Analyt. Chem. 324:
304.
2. Kruse - Jarres, J.D. et al (1989). J. Clin. Chem. Clin.
Biochem. 27: 103.
VALORES NORMALES
Suero:
hasta 95 U / l (37C)
Orina:
Aleatorias hasta 490 U / l (37C)
24 horas de orina hasta 450 U/24 horas (37C)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
rango de referencia para considerar las diferencias en edad,
sexo, dieta y localizacin geogrfica.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de Rx
Monza en el modo de flujo de clulas a 37C.
LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 880 U / l.
Diluir las muestras con mayor concentracin en 1 + 9 con
0,9% de Solucin NaCl y repetir el test. Multiplique el
resultado por 10.
Revised 14 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 2 OF 2
CALCIO (Ca)
Mtodo Colorimtrico
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Calcio en el suero, plasma y
orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el
analizador RX monza.
No. Cat.
CA 590
200 ml
CAL.
R1.
R2.
R3.
Patrn
Tampn
Cromgeno
EDTA
5.5 ml
1 x 100 ml
1 x 100 ml
10 ml
METODO COLORIMETRICO(1)
O-cresolftalena complexona sin desproteinizacin.
PRINCIPIO
Los iones calcio forman un complejo violeta con la
o-cresolftalena complexona en medio alcalino.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina
1 + 1 en NaCl 0,9%. Multiplicar el resultado por 2.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
MATERIALES SUMINISTRADOS
Patrn
Tampn
Cromgeno
EDTA
Concentraciones iniciales
de las soluciones
PROCEDIMIENTO
Seleccione Calcio CPC en la pantalla de Ejecucin de prueba y
llevar a cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
Pipetear en la cubeta:
CAL. Patrn
Calcio
R1.
Tampn
2-amino-2-metilpropan-1-ol
R2.
Cromgeno
o-Cresolftalena
complexona
8-hidroxiquinolina
Acido clorhdrico
R3.
EDTA
ddH20
Muestra
Patrn
Reactivo
Blanco de reactivo S0
Patrn S1
Muestra
12.5 l
500 l
12.5 l
500 l
12.5 l
500 l
6,89 mmol/l
60 mmol/l
150 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
PGINA 1 DE 3
Temperatura:
1. Para ensayos individuales
Pipetear en tubos de ensayo:
Muestra
Agua destilada
CAL
Solucin R1
Solucin R2
Blanco de
Reactivo
Patrn
Muestra
--25 l
--0,5 ml
0,5 ml
----25 l
0,5 ml
0,5 ml
25 l
----0,5 ml
0,5 ml
Blanco de
Reactivo
Patrn
Muestra
--25 l
--1,0 ml
----25 l
1,0 ml
25 l
----1,0 ml
INTERFERENCIA/LIMITACIONES
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y
se encontr que no interfieren:
Bilirrubina
Intralipid
Triglicrido
Hemoglobina
Amuestra
Apatrn
Amuestra
Apatrn
VALORES NORMALES(2)
Suero:
2,02 -2,60 mmol/l (8,10-10,4 mg/dl)
Orina:
2,5 -6,2 mmol/24hrs (100 - 249 mg/24 hrs)
Muestra
Agua destilada
Patrn
Reactivo de trabajo
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
Mean (mg/dl)
SD
CV(%)
n
Inter Assay
STANDARDISATION
Randox Calibration Serum Level 3 is traceable to Calcium
reference material NIST 909b and NIST 956b.
Mean (mg/dl)
SD
CV(%)
n
Nivel 1
9.02
0.220
2.44
20
Nivel 2
12.4
0.249
2.01
20
Nivel 1
9.02
0.352
3.91
20
Nivel 2
12.4
0.317
2.56
20
PGINA 2 DE 3
CORRELACION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo disponible en el
mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y=0.9914 X -0.089
con un coeficiente de correlacin r = 0.9931
Se analizaron 42 muestras con valores de entre 4,1 y 16,5 mg/dl.
ORINA
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta 7,13 mmol / l (28,6 mg / dl). Las
muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1
con el 0,9% de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado
por 2.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de calcio con un nivel
aceptable de precisin se determin como 1,29 mg/dl
(0,321 mmol/l).
REFERENCIAS
1. Ray Sarkar,B.C., and U.P.S. Chauhan., Anal Biochem. 1967;
20: 155.
2. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59: 836.
3. Prince et al, Radiology 2003; 227: 639-646
Revisado 17 nov 11 rw
Rev. 002
PGINA 3 DE 3
CALCIO (Ca)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
ARSENAZO III
Mtodo Colorimtrico
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Calcio en suero,
plasma u orina. Este producto es adecuado para su utilizacin de
forma manual y en el analizador RX monza.
No. Cat.
CA 2390
6 x 100 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
El calcio es el quinto elemento ms abundante en el cuerpo. La
mayor parte del calcio en el adulto humano es extracelular y el
99% existe como hidroxiapatita cristalina en los huesos y los
dientes donde confiere rigidez. El calcio en el suero existe en
tres formas: unido a protenas (45%); ionizado (45%) y un 10%
forma un complejo con pequeos ligantes difusibles tales como
citrato, lactato, fosfato y bicarbonato. El calcio juega un papel
importante en los mecanismos de transmisin del impulso
nervioso, la contraccin muscular y la coagulacin sangunea. El
calcio tambin participa en la regulacin de la actividad de la
adenilato ciclasa y fosfodiesterasa a travs de la combinacin
reversible con la calmodulina. La secrecin de las glndulas
paratiroides, clulas tiroideas C y las clulas pancreticas B est
controlada por la concentracin de calcio ionizado extracelular
en la superficie celular.
Los niveles elevados de calcio en suero se encuentran en los
casos de hiperparatiroidismo, los carcinomas, sobredosis de
vitamina D y son de valor diagnstico en la deteccin de la
enfermedad renal crnica y enfermedad pancretica aguda. Los
bajos niveles de calcio srico se asocian con hipoparatiroidismo,
deficiencia de vitamina D y la insuficiencia renal.
PRINCIPIO
Arsenazo III se une especficamente al calcio formando un
complejo coloreado que puede medirse a 650 nm.
Ca++ + Arsenazo III
Complejo Coloreado
Orina:
Patrn S1
Muestra
7.5 l
500 l
7.5 l
500 l
7.5 l
500 l
ddH2O
Muestra
Calibrador
Reactivo
15 l
1.0 ml
Calibrador
Muestra
15 l
1.0 ml
15 l
1.0 ml
PAGE 1 OF 2
CLCULO MANUAL
Concentracin =
Amuestra
Acalibrador
PRECISION
x calibrador de valor
CALIBRACIN
Se recomienda el uso de solucin salina y Suero de Calibracin
Randox Nivel 3 para la calibracin. La calibracin se recomienda
en los cambios de lote del reactivo o como se indica en los
procedimientos de control de calidad.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deber de analizar dos
niveles de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error,
se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
INTERFERENCIAS / LIMITACIONES (5)
Gadodiamida (OMNISCAN: usado en el RM imagin) interfiere
con el calcio srico causando niveles bajos.
VALORES NORMALES(3)
Suero:
2.02 - 2.60 mmol/l ( 8.10 - 10.4 mg/dl )
Orina:
2.5 - 6.2 mmol/24 hrs (100 - 249 mg/24 hrs)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta
y localizacin geogrfica.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador Rx
Monza funcionando a una temperatura de 37C.
Nivel 3
12.8
0.392
3.07
20
Precisin Total
Muestra
Media (mg/dl)
DE
CV (%)
n
Nivel 3
12.8
0.371
2.90
20
Nivel 2
10.1
0.424
4.20
20
METHOD COMPARISON
El mtodo Randox (Y) se compar con un mtodo alternativo
disponible comercialmente (X). Cuarenta muestras de los
pacientes con valores que abarca el rango de 1,7 a 12.1mg/dl se
pusieron a prueba. El anlisis de regresin lineal result en la
siguiente ecuacin:
Y = 0.961 X + 0.4
con un coeficiente de correlacin r = 0.9929
ORINA
LINEARIDAD
Este mtodo es lineal hasta 14,5 mg / dl. Diluir las muestras por
encima de esta concentracin a 1+1 con el 0,9% de NaCl y
repetir el test. Multiplique el resultado por 2.
SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable de calcio con un nivel aceptable de
precisin ha sido determinada como 0,78 mg / dl.
REFERENCIAS
1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry 2nd Edition
W.B. Saunders Co., Philadelphia (1976)
2. Michaylova, V., and IIIkova, P., Anal Chem Acta, 53: 194
(1971).
3. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59: 836.
4. Young, D. Pestaner L., Clin Chem. 21: 5 (1975).
5. Prince et al, Radiology 2003; 227: 639-646.
SUERO
LINEALIDAD
Este mtodo es lineal hasta 14,4 mg / dl. Diluir las muestras por
encima de esta concentracin a 1 +1 con el 0,9% de NaCl y
repetir el test. Multiplique el resultado por 2.
SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable de calcio con un nivel aceptable de
precisin ha sido determinada como 0,54 mg / dl.
Revised 17 Nov 11 bm
Rev. 002
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PARA SU USO
Determinacin cuantitativa in vitro de dixido de carbono en
suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin en
Manual.
340 nm
Manual
No. Cat.
CD 127
10 x 10 ml
CD 129
10 x 50 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo CO2
CAL. Standard
1 x 105 ml
10 x 10 ml
1 x 5.5 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo CO2
CAL. Standard
10 x 50 ml
10 x 50 ml
1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLNICO(1)
El incremento de CO2 sanguneo (hipercapnia) provoca una
acidosis respiratoria. El CO2 aumenta cuando la ventilacin
alveolar est disminuida en patologas pulmonares o bronquiales,
o tambin al respirar aire con niveles elevados de CO2. La
depresin de la capacidad pulmonar total provocada por algunos
medicamentos puede conllevar una retencin de CO2.
PRINCIPIO(2,3)
PEPC
Fosfoenolpiruvato + HCO3-
oxaloacetato + H2P04-
R1b.
MDH
oxaloacetato + NADH + H+
malato + NAD+
R1a. Tampn
Tampn Tris
25 mmol/l, pH 6.5
R1b. Reactivo CO2
Fosfoenolpiruvato (PEP)
6.3 mmol/l
NADH
0.45 mmol/l
Fosfoenolpiruvato Carboxilasa (PEPC)
200 U/l
Malato Deshidrogenasa (MDH)
600 U/l
Mg2+
8.0 mmol/l
CAL. Patrn
Vedi inserto lotto-specifico
Reactivo CO2
CD 127
Reconstituir 1 vial de CO2 R1b con 10 ml de tampn
R1a. Estable durante 15 das entre +2 y +8C, en su
frasco original sellado, 70 horas entre +2 y +8C o 25
horas entre +15 y +25C expuesto a la atmsfera
cuando se almacena en el recipiente original o en un
recipiente con un cuello estrecho. Vase la nota 4.
CD 129
Reconstituir el contenido de un vial de CO2 R1b con
una parte de tampn R1a. Transferir todo el
contenido de la botella de tampn 1, enjuagando el
vial 2 varias veces. Estable durante 15 das entre +2 y
+8C, en su frasco original sellado, 70 horas entre +2
y +8C o 25 horas entre +15 y +25C expuesto a la
atmsfera cuando est en su envase original o en en
un recipiente con un cuello estrecho. Vase la nota 4.
CAL.
Patrn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8oC.
MATERIAL SUMINISTRADO
Tampn
Reactivo CO2
Patrn
MATERIAL NECESARIO PERO NO SUMINISTRADO
Randox Assayed Multisera, Nivel 2, No. Cat. HN1530 y Nivel 3,
No. Cat. HE1532.
PAGE 1 OF 2
MANUAL CD 127
NOTAS DE PROCEDIMIENTO
1. Para permitir que el reactivo para alcanzar el equilibrio, se
recomienda que se reconstituye preferiblemente la noche
antes, pero por lo menos 4 horas antes de su uso. El reactivo
es entonces estable durante 15 das entre +2 y +8C en su
vial original sellado o 70 horas entre +2 y +8C expuesto a la
atmsfera.
2. No exponer el reactivo al aire ms de lo necesario y
almacenarlo cerrado hermticamente.
3. No pipetear con la boca.
4. No agitar el reactivo vigorosamente ya que se podra
producir una absorcin excesiva de CO2 .
PROCEDIMIENTO
Longitud de onda:
Cuveta:
Temperatura:
Medicin:
340 nm
1 cm de espesor
37C
frente a agua destilada
Pipetear en la cubeta:
Muestra
Agua bidestilada
Patrn
Reactivo
Test
Blanco
Patrn
5 l
--1000 l
-5 l
-1000 l
--5 l
1000 l
Recin nacidos
Nios pequeos
21 - 28 mmol/l
22 -29 mmol/l
17,2 -23,6 mmol/l
19,0 -23,9 mmol/l
CALIBRACIN
Se recomienda para la calibracin el patrn CO2 Randox
suministrado con el kit. El patrn est preparado
gravimtricamente utilizando bicarbonato sdico grado A.C.S. Se
recomienda recalibrar para cada serie de muestras analizadas.
CONTROL DE CALIDAD
Se aconseja Randox Assayed Multisera, Nivel 2 y Nivel 3 para un
control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de control
como mnimo una vez al da. Los valores obtenidos deben
encontrarse dentro de un rango especfico. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye el error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar los parmetros del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo el material est limpio.
3. Comprobar el agua y la contaminacin (el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados).
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y de sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442
2413.
Revised 01 Feb 11 bm
Rev. 002
PAGE 2 OF 2
COLESTEROL (CHOL)
Cat. No.
CH 200
6 x 30 ml
R1.
CAL.
Reactivo
Patrn
6 x 30 ml
1 x 5.5 ml
CH 201
6 x 100 ml
R1.
CAL.
Reactivo
Patrn
6 x 100 ml
1 x 5.5 ml
CH 202
8 x 250 ml
R1.
CAL.
Reactivo
Patrn
8 x 250 ml
1 x 5.5 ml
UTILIDAD CLNICA(1,2,3)
El anlisis de Colesterol s utilizado para el diagnstico y
tratamiento de dislipemias y desrdenes metablicos.
Los lpidos representan un importante papel en el cuerpo
humano: ya sea cmo homonas o precursores hormonales,
ayuda a la digestin, fuente o almacn de recursos energticos,
componentes estructurales y funcionales de membranas
biolgicas, o funcionando como aislantes para prevenir prdidas
de calor y permitir la conduccin nerviosa
En Qumica Clnica, los lpidos han sido asociado durante la
ltima dcada con el metabolismo de las lipoprotenas y la
ateriosclerosis
El mtodo descrito por Abell y cols (1952) se refiere a la
extraccin del colesterol con disolventes orgnicos y una
posterior hidrlisis alcalina de los steres de colesterol.
La reaccin s altamente especfica, pero la metodologa es
laboriosa y requiere reactivos corrosivos, siendo por tanto
impracticable en la rutina diaria del laboratorio
Richmond (1973) describi el mtodo de la colesterol oxidasa,
trs la saponificacin de la muestra. Este mtodo fu el primer
paso hacia un procedimiento totalmente enzimtico. Allain y cols
junto con Roeschaw y cols publicaron en 1974 el primer
procedimiento completamente enzimtico para determinar
colesterol, reemplazando as la saponificacin qumica por la
saponificacin enzimtica.
PRINCIPIO(4)
El colesterol se determina tras una hidrlisis enzimtica y una
oxidacin. El indicador quinoneimina se forma a partir de
perxido de hidrgeno y 4-aminoantipirina en presencia de fenol
y peroxidasa.
colesterol
esterasa
colesterol
Colesterol + O2
Colesten-3-ona + H2O2
CAL.
Reactivo
4-aminoantipirina
Fenol
Peroxidasa
Colesterol esterasa
Colesterol oxidasa
Tampn Pipes
Patrn
0,30 mmol/l
6 mmol/l
0,5ml
0,15 U/ml
0,1 U/ml
80 mmol/l;pH 6,8
Vedi inserto lotto-specifico
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
La solucin R1 contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
segn las pautas locales.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
(R1) Reactivo
Listo para su uso. Es estable hasta la fecha de caducidad cuando
se conserva entre +2 y +8C en ausencia de contaminacin y
protegido de la luz.
(CAL.) Patrn
Listo para su uso. Es estable hasta la fecha de caducidad cuando
se conserva entre +2 y +8C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo
Patrn
oxidasa
peroxidasa
2H2O2+fenol+4-aminoantipirina
quinoneimina + H2O
PAGE 1 OF 3
PROCEDIMIENTO
Utilice H2O de doble destilacin para realizar una nueva
calibracin de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione CHOL
en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y lleve a cabo un blanco
de agua de la forma indicada.
Pipetear en tubos de ensayo:
Blanco de reactivo S0
Patrn S1
Muestra
5 l
500 l
5 l
500 l
5 l
0.5 ml
ddH2O
Patrn
Muestra
Reactivo
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIA
Valores de hemoglobina hasta 200 mg/dl y de bilirrubina hasta 5
mg/dl y de triglicrido hasta 4,64 mmol/l, no interfieren en la
prueba.
Pipetear en la cubeta:
Reactivo Blanco (l)
Agua Destilada
Patrn
Muestra
Reactivo
Valor
Patrn (l)
Muestra (l)
--10
--1000
----10
1000
10
----1000
x Conc. de patrn
2. Utilizando un factor:
Longitud de onda
mmol/l
Hg 546 nm
500 nm
21,7 x A
14,3 x A
mg/dl
840 x A
553 x A
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia NIST 909b and NIST 1952a de la
Colesterol.
Nivel 2
3.65
0.100
2.74
20
Nivel 3
7.18
0.088
1.23
20
Nivel 2
3.65
0.143
3.92
20
Nivel 3
7.18
0.333
4.64
20
PAGE 2 OF 3
CORRELACION
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.963 X - 0.157
y un coeficiente de correlacin r = 0,9943
Se analizaron 44 muestras de pacientes con valores de entre 0,42
y 15,85 mmol/l.
REFERENCIAS
1. Abell, L.L, Levey, B.B., Brodie B.B., et al, J. Biol Chem 195 :
357, 1952
2. Richmond, N., Clin Chem 19 : 1350 - 1356, 1973
3. Roeschlau, P., Bernt, E. and Gruber, J.W., Clin Chem Clin
Biochem. 12 : 403, 1974
4. Trinder, P., Ann clin Biochem 6 : 24, 1969.
5. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st Edition (1998) p169;
Lothar Thomas ed. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH,
Frankfurt/Main, Germany
6. Third Report of the National Cholesterol Education
Programme (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation
and treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult
Treatment Panel III). JAMA Publication, Vol 285, No. 19,
P2486 - 2497; 2001.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 3 OF 3
CK-NAC-activada
METODO UV(1)
Este es un mtodo estndar optimizado segn las
recomendaciones de la Deutschen Gesellschaft fr Klinische
Chemie.
Creatina Quinasa
MANUAL
RX MONZA
PRINCIPIO
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Creatina Quinasa en
suero y plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o
en el analizador RX monza.
CK
Creatina + ATP
HK
Glucosa + ATP
Glucosa-6-P + ADP
G-6-PDH
No. Cat.
CK 110
20 x 2,5 ml
Glucosa-6-P + NADP+
R1a. Tampn/Glucosa
R1b. Enzimas/Coenzimas/
Sustrato
1 x 70 ml
20 x 2,5 ml
R1a. Tampn/Glucosa
R1b. Enzimas/Coenzimas/
Sustrato
1 x 70 ml
20 x 3,0 ml
CK 522
10 x 10 ml
R1a. Tampn/Glucosa
R1b. Enzimas/Coenzimas/
Sustrato
1 x 105 ml
10 x 10 ml
CK 113
6 x 30 ml
R1a. Tampn/Glucosa
R1b. Enzimas/Coenzimas/
Sustrato
2 x 100 ml
6 x 30 ml
CK 335
20 x 3,0 ml
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
SIGNIFICADO CLINICO(3)
La Creatina Quinasa (CK) se encuentra principalmente en el
msculo estriado, el cerebro y los tejidos musculares. El anlisis
de la actividad de la CK en plasma o suero, provee un marcardor
sensible para la deteccin de enfermedades del tejido muscular
esesqueltico. Por ej. En la distrofia muscular del tipo Duchenne
se pueden encontrar niveles de CK hasta 50 veces superior al
lmite de normalidad establecido. En el caso de la distrofia
muscular progresiva la actividad mxima de sta enzima se
observa en nios y lactantes
La actividad de la CK es tambin til en el diagnstico del infarto
de miocardio y acidentes cerebrovasculares.
La determinacin de la CK utilizando creatina fosfato y adenosin5-difosfato (ADP) como substratos en lugar de creatina y
adenosin-5-trifosfato (ATP), tiene varias ventajas en el
funcionamiento del test ya que permite un valor de reaccin ms
rpido resultando en una sensibilidad mayor. Se utilizan
cantidades de muestra pequeas y no se necesitan los blancos de
muestra.
Debido a la oxidacin de los grupos sulfidril en la zona activa de
la creatina quinasa, la enzima es muy inestable. Sin embargo, el
enzima se reactiva aadiendo compuestos tiol.
Por este motivo se incluye N-acetil-L-cisteina (NAC) en el test.
Tambin se incluyen en el sistema del test adenosin-5'monofosfato (AMP) y diadenosin pentafosfato, para inhibir la
actividad mioquinasa la cual interfiere. En este sistema de test no
existen sulfatos ya que alteran la reaccin ,
Gluconato-6-P + NADPH + H+
Concentraciones en la prueba
R1a. Tampn/Glucosa
Tampn Imidazol
Glucosa
Mg-Acetato
EDTA
R1b. Enzimas/Coenzimas/Sustrato
ADP
AMP
Pentafosfato de diadenosina
NADP
HK
G-6-PDH
N-Acetilcisteina
Fosfato de creatina
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
La solucin R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
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CALCULOS
Para calcular la actividad de la CK utilizar las frmulas siguientes:
R1b. Enzimas/Coenzimas/Sustrato
Reconstituir un vial de Enzimas/Coenzimas/Sustrato R1b
con el volumen adecuado de Tampn/Glucosa R1a:
2,5 ml para el kit de 20 x 2,5 ml (CK 110)
3,0 ml para el kit de 20 x 3,0 ml (CK 335)
10 ml para el kit de 10 x 10 ml (CK 522)
30 ml para el kit de 6 x 30 ml (CK 113)
Estables durante 3 semanas entre +2 y +8C 3 das
entre +15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn/Glucosa
Enzimas/Coenzimas/Sustrato
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Randox Calibration Serum Level 3 (Cat. No. CAL 2351).
PROCEDIMIENTO PARA RX MONZA
Aspirar ddH2O fresco y realizar una nueva calibracin de
ganancia en el modo de flujo de clulas. Seleccione la NAC en la
pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a cabo un blanco de agua
segn las instrucciones
25/30C
Muestra
Reactivo
10 l
500 l
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia AD455 (IFCC) de la CK-NAC.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
25/30C
Hombre
Mujer
25C
30C
37C
10 - 80 U/l
10 - 70 U/l
15 - 130 U/l
15 - 110 U/l
24 - 195 U/l
24 - 170 U/l
Pipetear en la cubeta:
Macro
Enzimas/Coenzimas/
Sustrato
2,5 ml
Muestra
0,1 ml
INTERFERENCIA
Evitar la hemlisis ya que interfiere con el ensayo.
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
37C
37C
Semi Micro
Macro
Semi Micro
1,0 ml
0,04 ml
2,5 ml
0,05 ml
1,0 ml
0,02 ml
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de la Creatina Quinasa con
un nivel aceptable de precisin se determin como 21,7 U/l.
3 min a 25C
2 min a 30C
1 min a 37C
Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo
simultneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.
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PRECISION
Anlisis (Intra)
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Anlisis (Inter)
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
215
4.97
2.31
20
Nivel 2
549
8.51
1.55
20
Nivel 1
215
8.41
3.91
20
Nivel 2
549
18.4
3.35
20
CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9538 X + 7.5746
con un coeficiente de correlacin r = 0.9988
Se analizaron 47 muestras con valores de entre 37 y 2755 U/l.
REFERENCIAS
1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem 1977; 15:
255.
2. Stein, W. (1985), Med. Welt 36: 572.
3. Szasz, G., et al. Clin. Chem 1976; 22: 650.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
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CK-MB (NAC-act.)
Mtodo UV
MANUAL
RX MONZA
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de CK-MB en suero y plasma.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma manual y
en el analizador RX monza.
No. Cat.
CK 1296
R1a. CK NAC/CK-MB Tampn/Glucosa 1 x 70 ml
19 x 2.5 ml R1b. Enzima/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo
19 x 2.5 ml
CONTROL
1 x 2 ml
CK 1553
5 x 20 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
La Creatina Kinasa (CK) est aceptada internacionalmente como
un indicador sensitivo y especfico del infarto de miocardio agudo
(AMI). Existen 3 tipos de iso-enzimas CK, CK-MM, CK-MB y
CK-BB. El CK-BB lo produce el cerebro a partir del tejido del
esqueleto y el corazn y el CK-MB se produce a partir del
msculo del corazn. En la mayora de los casos la actividad de
CK aumenta durante las 6 horas posteriores a un infarto agudo.
Los valores mximos se observan al cabo de unas 20 horas. La
actividad de CK normalmente vuelve a su normalidad durante el
cuarto o quinto da posterior al infarto.
PRINCIPIO(3)
Anlisis de Inmunoinhibicin: Se incorpora un anticuerpo en el
reactivo CK. Este anticuerpo se unir e inhibir la actividad de la
subunidad M de CK-MB. Esto significa que slo se mide la
actividad de la subunidad B en el suero. Si la actividad se
multiplica por el factor 2, nos dar la actividad de la CK-MB en
suero.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
Concentraciones en la Prueba
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MATERIAL SUMINISTRADO
CK NAC/CK-MB Buffer/Glucose
Enzimas/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo
Suero de control
CLCULO MANUAL
Patrn
S1
Muestra
50 l
500 l
50 l
500 l
50 l
500 l
Salino
Patrn
Muestra
Reactivo
Long. de onda
CK-B (U/l)
CK-MB (U/l)
340 nm
Hg 334 nm
Hg 365 nm
825 x A
841 x A
1486 x A
1651 x A
1683 x A
2972 x A
CK-B (U/l)
CK-MB (U/l)
4127
4207
7429
8254
8414
14858
A 340 nm/min
A Hg 334 nm/min
A Hg 365 nm/min
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda para el control de calidad diario el Control de
CKMB Randox o el Control Cardaco de Tres Niveles Randox.
Se debern analizar dos niveles de controles al menos una vez al
da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del rango
especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su
repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
INTERFERENCIAS
La hemlisis interfiere con el anlisis.
RANGO DE REFERENCIA
Infarto de Miocardio(MI)
La probabilidad de dao del miocardio es elevado cuando se
presentan los siguientes 3 factores:-
30C
37C
Semi-micro
Macro
1 CKhombres
>80 U/l1
>130 U/l2
>195 U/l*
CKmujeres
>70 U/l1
>110 U/l2
>170 U/l*
2 CK-MB
>10 U/l1
> 16 U/l2
> 25 U/l*
3 una actividad de CK-MB entre 6 y 25% de la actividad CK
total
0,04 ml
0,1 ml
*Valores calculados
1,0 ml
2,5 ml
Pipetear en la cubeta:
Muestra
Enzimas/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo
25C
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CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
el analizador RX monza.
LINEARIDAD
El Anticuerpo inhibe hasta 2000 U/l de CK-MM.
Este ensayo es linear hasta 2044 U/l de actividad CKMB.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de CKMB con un nivel de
precisin aceptable se determin como 23,5 U/l.
PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Nivel 1
Nivel 1
Mean (U/l)
136
161
SD
4.89
7.03
CV(%)
3.61
4.37
n
20
20
Precisin Total
Nivel 1
Mean (U/l)
136
SD
6.83
CV(%)
5.04
n
20
Nivel 2
161
6.56
4.08
20
CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.0756 X - 18.799
con un coeficiente de correlacin r = 0.9903
Se analizaron 43 muestras con valores de entre 34,4 y 1733 U/l.
REFERENCIAS
1. Stein, W., Med. Weit 1985; 36: 572.
2. Szasz, G., and E. W. Busch. Paper presented at 3rd Eur. Congr.
Clin. Chem., Brighton/England, June 1979; 3 - 8 (abstract).
3. Wurburg, U., et al., Clin. Chem. 1976; 54: 357.
4. Jacobs et al, The Laboratory Test Handbook, 2nd edition
Revisado 29 July 11 bm
Rev. 001
PAGE 3 OF 3
CREATININA (CREA)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Creatinina en suero
plasma u orina. Este producto es adecuado para su utilizacin de
forma manual y en el analizador Rx Monza.
Cat. No.
CR 510
200 ml
CR 524
6 x 500 ml
CAL. Patrn
R1a. Acido pcrico
R1b. Hidrxido sdico
1 x 5.5 ml
1 x 100 ml
1 x 100 ml
CAL. Patrn
R1a. Acido pcrico
R1b. Hidrxido sdico
1 x 30 ml
3 x 500 ml
3 x 500 ml
SIGNIFICADO CLINICO
La creatinina se deriva de la creatina y la creatina fosfato en
tejido muscular y puede ser definida como un producto de
desecho del nitrgeno.La creatinina no es reutilizada pero es
excretada por el cuerpo en la orina via renal. La creatinina es
producida y excretada con un ratio constante ,el cual es
proporcional a la masa muscular del cuerpo.Como consecuencia
de la forma en que la creatinina es excretada por el rion, la
determinacin de creatinina se utiliza principalmente para
diagnosticar el funcionamiento del rion.La creatinina es
considerada como el marcador endgeno ms til en el
diagnostico y tratamiento de enfermedades renales.
La creatinina se mide principalmente para valorar el
funcionamiento del rion y tiene ciertas ventajas sobre la
determinacin de urea.Los niveles de creatinina en plasma son
relativamente independientes de la ingesta proteica, de agua
,ratio de produccin de orina y del ejercicio.Siendo su ratio de
produccin constante,una elevacin de creatinina en plasma es
un indicativo de infraexcrecin sugiriendo un mal funcionamiento
de rion.Los niveles bajos de creatinina en plasma son raros y
no son clinicamente significativos.
METODO COLORIMETRICO(1)
PRINCIPIO
La creatinina en solucin alcalina reacciona con cido pcrico para
formar un complejo coloreado. La cantidad del complejo
formado es directamente proporcional a la concentracin de
creatinina.
EXTRACCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA-plasma. Estable durante 7
das cuando se conserva entre +2 y +8C.
Orina: extraer la orina sin aditivos. Diluir 1+49 con agua
bidestilada. Estable durante 4 das cuando se conserva entre +2 y
+8C.
Concentraciones iniciales
de las soluciones
Vedi inserto lotto-specifico
35 mmol/l
0,32 mol/l
PAGE 1 OF 4
PROCEDIMIENTO
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia nueva
en el modo de cubeta. Seleccione CREA en la pantalla de
Ejecucin de prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las
instrucciones.
Pipetee en una cubeta:
Blanco de reactivo S0
ddH2O
Patrn
Muestra
Reactivo de Trabajo
Patrn S1
Muestra
50 l
500 l
50 l
500 l
50 l
500 l
Pipetear en la cubeta:
Reactivo de trabajo
Solucin Patrn
Muestra
Patrn
Macro
Semi
Micro
Muestra
Macro
Semi
Micro
2.0 ml
0.2 ml
-
2.0 ml
0.2 ml
1.0 ml
0.1 ml
-
1.0 ml
0.1 ml
x 2
= mg/dl
Apatrn
x 100
Aclaramiento
de creatinina =
INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere en la prueba. No usar sueros lipmicos. El
mtodo es susceptible a interferencias por altos niveles de
sustancias reductoras. Hervir la orina antes de la prueba puede
ayudar a reducir estas interferencias.
VALORES NORMALES(2)
Suero:
Hombre
Mujer
Orina:
CARACTERSTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
el analizador Rx Monza a una temperatura de 37oC.
SUERO
LINEALIDAD
Si la concentracin excede 2168 mol/l (24.5 mg/dl) en suero,
diluir suero, plasma u orina diluida 1+4 con NaCl al 0,9% y
repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Creatinina con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 14.0 mol/l (0.158
mg/dl).
Anlisis (Inter)
[ml/min]
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
= mg/dl
mg creatinina/dl orina
x ml orina 24 hrs.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
PRECISION
Anlisis (Intra)
NORMALIZACIN
Randox Nivel de calibracin Suero 3 es atribuible a la creatinina
materiales de referencia NIST y 909b del NIST 967.
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
1.46
0.040
2.75
20
Nivel 3
4.19
0.068
1.63
20
Nivel 2
1.46
0.042
2.86
20
Nivel 3
4.19
0.122
2.91
20
PAGE 2 OF 4
CORRELACION
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.098 X - 0.27
con un coeficiente de correlacin r = 0.9995
Se analizaron 47 muestras con valores de entre 0,24 y 15,3 mg/dl.
ORINA
LINEALIDAD
Si la concentracin excede 85309 mol / l (963 mg / dl) en la
orina, diluir la orina 1 +4 con agua destilada y repetir el ensayo.
Multiplicar el resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Creatinina con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 2221 mol/l
(25.1 mg/dl).
REFERENCIAS
1. Bartels, H., Bohmer, M., (1972) Clin. Chem. Acta 37: 193.
2. Schirmeister, J., H. Willmann, and H. Kiefer. (1964). Dtsch.
Med. Wschr. 89: 1018.
Revised 15 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 3 OF 4
PAGE 4 OF 4
NEFA
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro, no pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se
requieren al manejar reactivos de laboratorio.
R1a.
R1b.
R2a.
R2b.
R2c.
CAL
Tampn
Enzima/Coenzimas
Diluyente de la Enzima
Maleimida
Reactivo Enzima
Patrn
1 x 70 ml
3 x 10 ml
3 x 20 ml
3 x 20 ml
3 x 20 ml
1 x 5.5 ml
METODO COLORIMETRICO
PRINCIPIO(3,5,6)
Enzima/Coenzimas
Reconstituir un vial de Enzima/Coenzimas R1b con
10 ml de Tampn R1a. Estable durante 5 das entre
+2 y +8C. No congelar. Proteger de la luz.
R2a.
R2b.
Maleimida
Reconstituir el contenido de una botella de
Maleimida R2b con el contenido entero de una
botella de diluyente del Enzima R2a. Asegurarse de
que la Maleimida est completamente disuelta. Usar
inmediatamente para reconstituir la botella R2c.
R2c.
Reactivo Enzima
Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo
Enzima R2c con una botella de Solucin R2b
reconstituida. Estable durante 5 das entre +2 y
+8C. No congelar. Proteger de la luz.
CAL
Patrn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C.
NEFA+ATP+CoA
Acil CoA+AMP+PPi
Acil CoA + O2
= 4-Aminoantipirina
= N-etil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-m-toluidina
MUESTRA(1)
Suero, plasma.
No usar plasma heparinizado, ya que la heparina interfiere en
el anlisis. Los anticoagulantes adecuados son los siguientes:
EDTA
Citrato de Sodio
Fluoruro de Sodio
Oxalato de Amonaco
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
R1a. Tampn
Tampn fosfato
0,04 mol/l, pH 6,9
Cloruro de magnesio
3 mmol/l
Surfactante
R1b. Enzima/Coenzimas
Acil Coenzima A Sintetasa
0,3 U/ml
Ascorbato oxidasa
1,5 U/ml
Coenzima A
0,9 mmol/l
ATP
5,0 mmol/l
4-amino antipirina
1,5 mmol/l
R2a. Diluyente del Enzima
Fenoxietanol
0,3% (w/v)
Surfactante
R2b. Maleimida
10,6 mmol/l
R2c. Enzima reactivo
Acil coenzima A oxidasa
10 U/ml
Peroxidasa
7,5 U/ml
TOOS
1,2 mmol/l
CAL Patrn
Vedi inserto lotto specifico
PGINA 1 DE 3
MANUEL FA 115
NOTAS(1,7)
1. Muestras visiblemente lipmicas requieren una muestra
blanco.
RX MONZA PROCEDURE
Seleccione NEFA en la pantalla Run Test (Realizar anlisis) y
lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
2.
Efecto sobre
el resultado
10 mg/dl
100 mg/dl
Disminuido
Aumentado
Bilirrubina
Hemoglobina
x Conc. de patrn
Apatrn
dd H2O
Patrn
Muestra
Reactivo 1
Patrn
Blanc S0
10 l
200 l
S1
Muestra
10 l
200 l
10 l
200 l
Blank
200 l
400 l
-
400 l
-
400 l
-
400 l
10 l
Reactivo
Muestra
MANUAL PROCEDIMIENTO(6)
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
550 nm
1 cm de espesor
+37C
Frente al reactivo blanco
Pipetear en la cubeta:
Agua destilada
Patrn
Muestra
Solucin R1
React.
blanco
Patrn
50 l
----1,0 ml
--50 l
--1,0 ml
Muestra *Muestra
blanco
----50 l
1,0 ml
------1,0 ml
2,0 ml
---
2,0 ml
---
2,0 ml
---
2,0 ml
50 l
PGINA 2 DE 3
MANUEL FA 115
CALCULOS
1. Utilizando una curva de calibracin
La curva de calibracin debe ser confirmada para cada
nuevo lote de reactivos de la forma siguiente:
No. de Tubo
Nombre
1
Blanco
2
Patrn
bajo
3
Patrn
normal
4
Patrn
elevado
NEFA Patrn
Agua
Solucin R1
--50 l
1,0 ml
25 l
25 l
1,0 ml
50 l
--1,0 ml
100 l
--1,0 ml
2,0 ml
2,0 ml
2,0 ml
2,0 ml
0,000
(leer)
(leer)
(leer)
valores estandares
x 0,250 x 0,500 x 1,000
Amuestra
Apatrn
x Concentracin de patrn
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte + 44 (0) 28
9442 2413.
RANGO NORMAL(2,8)
En ayunas: 0,1 - 0,9 mmol/l.
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de
la poblacin.
INTERFERENCIA
Si se realiza la tcnica de los NEFA de forma automtica, el
reactivo no debera colocarse en el instrumento tras los
triglicridos
CARACTERSTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron
mediante el analizador RX monza a una temperatura de
+37C.
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta 2,24 mmol/l. Para muestras con
concentraciones superiores, diluir 1+3 con agua bidestilada y
repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 4.
SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable con una precisin aceptable se ha
determinado en 0,072 mmol/l
PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Nivel 1
Media (mmol/l)
1.73
DE
0.082
CV(%)
4.74
n
20
Nivel 2
1.20
0.058
4.81
20
Ensayo total
Media (mmol/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
1.73
0.078
4.51
20
Nivel 2
1.20
0.052
4.32
20
CORRELATION
This method (Y) was compared with another commercially
available method (X) and the following linear regression
equation obtained:
Y = 1.0372 X + 0.0457
and a correlation coefficient of r = 0.9855
49 patient samples were analysed spanning the range
0.09 to 2.08 mmol/l.
REFERENCIAS
1. DeVries, G.H., Mamunes, P., Miller, C.D. and Hayward,
D.M., Analytical Biochem. 1976; 70: 156-166.
2. Henry, R. J., Clinical Chemistry, Principles and Techniques,
2nd Edition, Harper and Row, 1974;
p. 1451.
3. Matsubara, C., Neshikawa, Y., Yoshida, Y., and Tateamura,
K. Analytical Biochem. 1983; 130: 128-133.
4. Mulder. C. J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21:
823-827.
5. Hosaka, K., Kiteucki, T., Mitsukida, N., and Kawagucki, A.
J., Biochem. 1981;89: 1799-1803.
6. Shimizu, S., Tani, Y., Yamada, H., Tabata, M., and Murachi,
T., Analytical Biochem. 1980; 107: 193-198.
7. Okabe, H., Uji, Y., Nagaehima, K. and Noma, A. Clin,
Chem. 1980; 26111: 1540-1543.
8. Duncombe, W.G., Biochem. J. 1963; 88: 7.
Revisado 31 oct 12 rw
Rev. 005
PGINA 3 DE 3
GLUCOSA (GLUC-PAP)
GOD/PAP
MANUAL
RX MONZA
Componentes
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Glucosa en suero,
plasma y orina. Este producto es adecuado para un uso manual o
en el analizador Rx Monza.
Cat. No.
GL 364
10 x 100 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo GOD-PAP
CAL. Patrn
10 x 100 ml
10 x 100 ml
1 x 5.5 ml
GL 1021
2 x 500 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo GOD-PAP
CAL. Patrn
2 x 500 ml
2 x 500 ml
1 x 5.5 ml
GL 366
6 x 500 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo GOD-PAP
CAL. Patrn
6 x 500 ml
6 x 500 ml
1 x 5.5 ml
PRINCIPIO
La glucosa se determina despus de una oxidacin enzimtica en
presencia de glucosa oxidasa. El perxido de hidrgeno formado
reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y
4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina
rojo-violeta.
PRINCIPIO DE LA REACCION(1)
R1a. Tampn
Tampn fosfato
Fenol
R1b. Reactivo GOD-PAP
4-Aminofenazona
Glucosa oxidasa
Peroxidasa
CAL. Patrn
Glucosa
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
R1a contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el contacto con la
piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar
inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En caso de
ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un
mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
GOD
Glucosa + O2 + H2O
POD
quinoneimina + 4H2O
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MANUAL GL 364
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
Reactivo GOD-PAP
Patrn
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y
Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
PROCEDIMIENTO
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia en el
modo de cubeta. Seleccione GLU en la pantalla de Ejecucin de
prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
Pipetear en la Cubeta:
Patrn S1 or Muestra
Muestra/Patrn
Reactivo 1
Reactivo Blanco S0
5 l
500 l
0 l
500 l
INTERFERENCIAS
Esta prueba no se ve afectada por el cido rico, cido ascrbico,
glutatin, anticoagulantes, bilirrubina y creatinina a
concentraciones fisiolgicas.
VALORES NORMALES(2)
Suero,plasma (en ayuno)
4,2-6,4 mmol/l 75-115 mg/dl
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
poblacin.
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Glucosa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 0,343 mmol/l (6.18
mg/dl).
Semi-Micro
Patrn o
Muestra
Reactivo
Blanco
Patrn o
Muestra
Reactivo
Blanco
Patrn o muestra
20 l
Reactivo
2000 l
--2000 l
10 l
1000 l
--1000 l
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de glucosa de 32,1
mmol/l (578 mg/dl). Para muestras con valores superiores a
dichas concentraciones diluir 1+2 con NaCl al 0,9% y multiplicar
el resultado por 3.
PRECISION
Anlisis (Intra)
Patrn conc.
(mmol/l)
APatrn
Amuestra
(mg/dl) =
Patrn conc.
(mg/dl)
APatrn
Media (mmol/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
6.53
0.203
3.11
20
Nivel 3
15.0
0.640
4.26
20
Nivel 2
6.53
0.269
4.11
20
Nivel 3
15.0
0.774
5.15
20
Anlisis (Inter)
Media (mmol/l)
DE
CV(%)
n
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia NIST 917b y NIST 965a de Glucosa.
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MANUAL GL 364
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9091 X + 0.5645
y un coeficiente de correlacin r = 0,9898
Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 0.39
y 21.3 mmol/l.
ORINA
LINEALIDAD
El ensayo es lineal hasta una concentracin de glucosa de
30,6 mmol/l (551 mg/dl). Para muestras con valores superiores a
dichas concentraciones diluir 1+2 con NaCl al 0,9% y multiplicar
el resultado por 3.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Glucosa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 0,295 mmol/l (5,32
mg/dl).
PRECISION
Anlisis (Intra)
Media (mmol/l)
DE
CV%
n
Nivel 2
2.68
0.073
2.71
20
Nivel 3
15.8
0.723
4.59
20
Nivel 2
2.68
0.068
2.53
20
Nivel 3
15.8
0.738
4.68
20
Anlisis (Inter)
Media (mmol/l)
DE
CV%
n
REFERENCIAS
1. Barham, D, and Trinder, P. Analyst 1972; 97: 142.
2. Teuscher, A. and Richterich, P. Schweiz Med. Wschr. 1971;
101: 345 and 390.
3. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.
Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 246-250
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 3 OF 3
GLUTAMATO
DESHIDROGENASA
(GLDH)
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Glutamato Deshidrogenasa
(GLDH) en el suero. Este producto es adecuado para su
utilizacin de forma manual y en el analizador RX monza.
No. Cat.
GL 441
8 x 6 ml
GL 442
5 x 100 ml
R1a.
R1b.
R2.
Tampn/Substrato
Enzima/Coenzima
-oxoglutarato
1 x 70 ml
8 x 6 ml
2 x 10 ml
R1a.
R1b.
R2.
Tampn/Substrato
Enzima/Coenzima
-oxoglutarato
5 x 100 ml
5 x 100 ml
2 x 20 ml
GLDH
glutamato+NAD++H2O
MUESTRA
Suero.
Los sueros hemolticos y lipmicos interfieren con el anlisis.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1a. Tampn/Substrato
Tampn Trietanolamina
Acetato de Amoniaco
EDTA
R1b. Enzima/Coenzima
ADP
NADH
LD
R2.
-oxoglutarato
Concentraciones en la Prueba
50 mmol/l, pH 8,0
100 mmol/l
2,5 mmol/l
1,0 mmol/l
0,2 mmol/l
2 U/ml
7 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
Las soluciones R1a y R2 contienen Azida Sdica. Evitar su
ingestin o el contacto con la piel o las membranes mucosas. En
caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
atencin mdica inmediatamente.
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
R1b. Enzima/Coenzimas
No. Cat. GL 441
Reconstituir el contenido de una botella de Enzima/
Coenzima 2 con 6 ml de Tampn/Substrato 1. Estable
durante 1 semana entre +2 y +8C.
No. Cat. GL 442
Reconstituir el contenido de un frasco de Enzima/
Coenzima 2 con una parte de Tampn/Substrato 1 y
transferir todo el contenido a la botella 1 enjuagando el
frasco 2 varias veces. Estable durante 1 semana entre +2
y +8C.
R2.
-oxoglutarato
Reconstituir el contenido de un frasco de
-oxoglutarato 3 con el volumen apropiado de agua
doblemente destilada:10 ml para el kit de
8 x 6 ml
(GL 441)
20 ml para el kit de
5 x 100 ml (GL 442)
Estable durante 8 semanas entre +2 y +8C 7 das entre
+15 y +25C.
0.10 ml
0.50 ml
0.02 ml
PAGE 1 OF 2
Macro
Semi Micro
2.5 ml
0.5 ml
1.0 ml
0.2 ml
0.1 ml
0.04 ml
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 77,3 U/l. Si la
concentracin de la muestra supera este valor, diluir la muestra
1 +4 con el 0,9% de NaCl y repetir el test. Multiplique el
resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Glutamato
Deshidrogenasa con un nivel aceptable de precisin se
determin en 2,90 U/l.
PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
13.5
0.562
4.16
20
Nivel 2
28.3
0.985
3.48
20
Nivel 1
13.5
0.764
5.66
20
Nivel 2
28.3
1.56
5.53
20
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9585 X +0.1913
y un coeficiente de correlacin r = 0,9944.
se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de
3,13 a 58,06 g/l.
REFERENCIAS
1. Schmidt, E. and Schmidt, F.W. In: Method of Enzymatic
Analysis, 3rd ed. H.K. Bergmeyer, J. Bergmeyer, and M.
Grosse, Eds. Weirheim, Verlag Chemie, 1983, 3: 216-227.
2. In: Clinical Guide to Laboratory Tests 2nd ed. N. W. Tietz,
Eds. W.B. Saunders Company. Philadelphia 1990 p.260.
3. Schmidt, E. et al (1992) Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 30
pp 493-502.
<7,0 U/l
<5,0 U/l
PAGE 2 OF 2
GLUCOSE
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
GOD/PAP
(LIQUIDO)
MANUAL
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Glucosa en el sangre, suero,
plasma y orina. Este producto es adecuado para uso Manual.
Cat. No.
GL 2623
GL 2614
R1.
CAL.
Glucosa Reactivo
Patrn
6 x 100 ml
1 x 5.5 ml
R1.
CAL.
Glucosa Reactivo
Patrn
2 x 500 ml
1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLINICO
La medicin exacta de la glucosa en suero o plasma es
importante en el diagnstico y el tratamiento de trastornos del
metabolismo de hidratos de carbono tales como diabetes
mellitus, hipoglucemia neonatal, hipoglucemia idioptica y de
carcinoma de clulas de islotes pancreticos. La glucosa se mide a
menudo en colaboracin con diversas pruebas de tolerancia tras
la administracin de dosis de la leucina, la insulina, el glucagn o
glucosa.
PRINCIPIO
La glucosa se determina despus de una oxidacin enzimtica en
presencia de glucosa oxidasa. El perxido de hidrgeno formado
reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y
4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina
rojo-violeta.
PRINCIPIO DE LA REACCION(1)
GOD
Glucosa + O2 + H2O
quinoneimina + 4H2O
R1.
Glucosa Reactivo
Tampn fosfato
Tampn MOPS
Fenol
4-Aminofenazona
Glucosa oxidasa
Peroxidasa
CAL. Patrn
Glucosa
50 mmol/l, pH 7,0
50 mmol/l, pH 7,0
mmol/l
0,77 mmol/l
1,5 kU/l
1,5 kU/l
Vedi inserto lotto-specifico
PAGE 1 OF 2
MANUAL GL 2623
VALORES NORMALES(3,4)
Suero,plasma
Orina al azar
Orina de 24 horas
Semi-Micro
Patrn o
Muestra
Reactivo
Blanco
Patrn o
Muestra
Reactivo
Blanco
Patrn o muestra 20 l
Reactivo
2000 l
--2000 l
10 l
1000 l
--1000 l
(mg/dl) =
AMuestra
APatrn
Amuestra
APatrn
x Patrn conc.
(mmol/l)
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de glucosa de 22,2
mmol/l (400 mg/dl). Para muestras con valores superiores a
dichas concentraciones diluir 1+2 con agua destilada y multiplicar
el resultado por 3.
SENSIBILIDAD
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio
intervalo de sensibilidad ya que esto est limitado por la
sensibilidad del espectrofotmetro utilizado. Bajo las condiciones
del ensayo un cambio de 0,01 unidades de absorbancia es
equivalente a 0,013 mmol/l (0,23 mg/dl).
REFERENCIAS
1. Barham, D, and Trinder, P. Analyst 1972; 97: 142.
2. Clinical Chemistry Principles and Techniques, Second Edition,
R.J. Henry, D.C. Cannon and J.W. Winkelman Editors, Harper
and Row, Maryland, USA, 1288, 1974.
3. Teuscher, A. and Richterich, P. Schweiz Med. Wschr. 1971;
101: 345 and 390.
4. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.
Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 246-250.
x Patrn conc.
(mmol/l)
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
INTERFERENCIAS
Se analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y
se encontr que no interfieren:
Haemoglobin
Free Bilirubin
Conjugate Bilirubin
Triglycerides
Intralipid
1000 mg/dl
25 mg/dl
25 mg/dl
1000 mg/dl
400 mg/dl
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GLUTATION
REDUCTASA (GLUT RED)
MANUAL
RX MONZA
Componentes
R1a.
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Glutation Reductasa en el
suero, el plasma y los eritrocitos. Este producto es adecuado
para su utilizacin de forma manual y en el analizador Rx Monza.
No. Cat.
GR 2368
5 x 5 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrato
R2. NADPH
1 x 70 ml
5 x 5 ml
5 x 3 ml
SIGNIFICADO CLINICO
El anlisis de Glutation Reductasa se ha utilizado en la deteccin
de enfermedades hepticas y malignas, en la valoracin de la
nutricin (estado de la riboflavina) y la deteccin de estados de
deficiencia determinados genticamente.
Nota: Asegurarse de que los estados aparentes de deficiencia
enzimtica no son debidos a la reduccin de la riboflavina.
Principio del Anlisis (1)
El Glutation reductasa cataliza la reduccin de glutation (GSSG)
en presencia de NADPH, el cual se oxida a NADP+. La
disminucin en la absorbancia se mide a
340 nm.
GR
NADPH + H+ + GSSG
R1b.
R2.
Substrato
Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato 2
con 5 ml de Tampn 1. Estable durante 2 das cuando
se conserva entre +2 y +8C.
R2.
NADPH
Reconstituir un frasco de NADPH 3 con 3 ml de H20
bidestilada. Estable durante 2 das cuando se conserva
entre +2 y +8C.
Tampn
Fosfato Potsico
EDTA
Substrato
GSSG
NADPH
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
NADP+ + 2 GSH
PREPARACION DE LA MUESTRA
Suero, Plasma o Eritrocitos.
Preparacin del Eritrocito.
Centrifugar 0,5 ml de sangre entera durante 5 min a
2000 rpm. Eliminar el plasma y la capa de color de ante,
asegurandose de que no se quiten demasiados eritrocitos,
arriesgando as un muestreo de clulas no representativo. Lavar
los eritrocitos tres veces volviendo a suspenderlo en NaCl al
0,9%, y centrifugando durante 5 min a 2000 rpm despus de cada
lavado.
Concentraciones en la Prueba
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
Substrato
NADPH
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
Suero de Control de Glutation Reductasa Randox GR 2608
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PROCEDIMENTO
Seleccione GR en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a
cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
Pipetear en tubos de ensayo:
ddH2O
Patrn
Muestra
R1
Mezclar bien
R2
Reagent Blank
S0
20 l
500 l
100 l
Patrn
S1
20 l
500 l
Muestra
20 l
500 l
100 l
100 l
340 nm
1 cm de espesor
37C.
frente al aire
Pipetear en la cubeta
Lisado Diluido
Substrato (R1)
40 l
1000 l
Mezclar bien
NADPH (R2)
200 l
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Sueros de Control de Glutation Reductasa
para el control de calidad diario. Analizar el control al menos una
vez al da. Los valores obtenidos debern encontrarse dentro del
rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y
su repeticin excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
ESPECIFICIDAD
El Glutation Reductasa es altamente especfico para
Glutation(GSSG).
RANGO DE REFERENCIA(2)
Plasma/Suero
33 - 73 U/l
Eritrocitos
4,7 13,2 U/gHb
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de normalidad, ya que pueden darse variaciones regionales.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
el analizador RX monza a una temperatura de 37oC, con el
volumen de aspiracin fijado en 500 l.
LINEARIDAD
El ensayo es lineal hasta 387 U/. Las muestras mayores que este
debe ser diluido con 1 +9 0,9% de solucin de NaCl y re-ensay.
Multiplicar el resultado por 10.
SENSIBILIDAD
Se deber de considerar como el lmite de deteccin un valor de
9.69 U/l.
CLCULO MANUAL
La actividad del Glutation Reductasa se puede calcular a partir de
la siguiente frmula:
PRECISION
a)
Mean (U/l)
SD
CV (%)
n
b)
ejemplo
Una muestra contiene un nivel de hemoglobina de
16 g/dl 160 g/l.
Valor de Glutation Reductasa: 1488 U/l.
Por lo tanto el valor de la muestra =
1488
160
Level 3
86.9
2.24
2.58
20
Level 2
42.0
2.75
6.55
20
Level 3
86.9
3.75
4.32
20
Total precision
9,3 u/gHb
Mean (U/l)
SD
CV (%)
n
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CORRELACION
El mtodo de Randox (Y) se compar con otro mtodo
comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de
regresin lineal:
Y = 1.017 X + 1.54
con un coeficiente de correlacin r = 0.9888.
Se analizaron 42 muestras con valores de entre 14 y 309 U/l.
REFERENCIAS
1. Goldberg D.M. & Spooner RJ (1983) in Methods of
Enzymatic Analysis (Bergmeyen, H.V. Ed.) 3rd edn.
vol 3, pp 258-265, Verlog Chemie, Deerfield Beach,
Fl.
2. Melissinos, K.G.,Delidov, A.Z., Varsov, A.G., Begietti,
Drivas, G.J., Nephron, 28: 76-79, (1981).
S.S.,
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev 001
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IgA
1 x 60 ml
1 x 5 ml
PRINCIPIO
La muestra que contiene IgA humano se diluye adecuadamente y
despus se reacciona con antisuero especfico para formar un
precipitante que se mide turbidimtricamente a 340 nm. Se
puede determinar la concentracin de IgA en la muestra
construyendo una curva estndar a partir de las absorbancias de
los patrones.
EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA
Se puede utilizar el suero, plasma heparinizado o plasma EDTA.
El IgA es estable durante 3 das entre +15 y +25C, 7 das entre
+2 y +8C, o 6 meses a -20C.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1. Tampn de Ensayo
Glicol de Polietileno
Tampn Tris/HCl
Cloruro Sdico
R2. Reactivo Anticuerpo
Anti IgA (humano)
Concentraciones Iniciales
en la Prueba
mximo 6%
20 mmol/l, pH 7,4
150 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
Los Reactivos R1 y R2 contienen Azida Sdica. Evitar su ingestin
o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
mdica inmediatamente.
El Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
SO*
S1
S1
Blanco
ddH2O
50 l
50 l
---
Diluido CAL
Patrn
---
---
---
---
500 l
---
Muestra Muestra
Blanco
---
---
50 l 50 l
---
---
---
50 l
Diluido
Muestra
Tampn
Ensayo (R1)
---
50l
500 l 500 l
50 l ---
50 l
---
50 l
PAGE 1 OF 3
340 nm
1 cm de espesor
25C
frente al aire
Patrones Diluidos
Muestra Diluida
Tampn de Ensayo R1
Patrones
Muestra
100 l de cada
1,0 ml
100 l
1,0 ml
FACTORES DE CONVERSIN
100 l
IU/ml x 1,68
mg/dl x 0,595
= mg/dl
= IU/ml
ESPECIFICIDAD
No existe una reaccin cruzada con IgG y IgM bajo las
condiciones del anlisis.
Las muestras extremadamente lipmicas o hemolticas y los
niveles elevados de detergentes inicos pueden interferir en el
anlisis.
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Nivel 2
291
5.62
1.93
20
Precisin Total
Media (mg/dl)
DE
CV (%)
n
Nivel 1
192
13.2
6.86
20
Nivel 2
291
17.8
6.12
20
CORRELACIN
El mtodo Randox (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9955 X + 0.4802
y un coeficiente de correlacin r = 0,9975
Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre 49 y
669 U/l.
REFERENCIAS
1. Becker, W.: Laboratoriumbltter 1980; 30: 25.
2. Geiger, H. & Hoffman, P.: Z. Kinderheilk 1970; 109: 22.
3. Whicher, J.J., Price, C.P., Spencer, K., Critical Reviews in
Clinical Laboratory Sciences, 1983; 18: 213-216.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
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IgG
ENSAYO INMUNOTURBIDIMETRICO PARA IgG
Anlisis Manual
RX MONZA
PARA SU USO.
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la IgG en suero y plasma.
Este producto es adecuado para su utilizacin de forma manual y
en el analizador Rx Monza.
Cat. Nos.
IG 2448
1 x 60 ml
1 x 5 ml
PRINCIPI
La muestra que contiene IgG humana se diluye adecuadamente y
despus se hace reaccionar con antisuero especfico para formar
un precipitante que se mide turbidimtricamente a 340 nm. Se
puede determinar la concentracin de IgG en la muestra
construyendo una curva estandar a partir de las absorbancias de
los patrones.
EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA
Se puede utilizar suero, plasma heparinizado o plasma EDTA.La
IgG es estable durante 3 das entre +15 y +25C, 7 das entre +2
y +8C, o 6 meses a -20C.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
mximo 6%
20 mmol/l, pH 7,4
150 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
Los Reactivos R1 y R2 contienen Azida Sdica. Evitar su ingestin
o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
mdica inmediatamente.
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido sdico al 10%.
Hojas de Salud y Seguridad estn disponibles si se desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
SO*
S1
S1
Blanco
10 l
10 l
---
---
---
---
---
---
10 l
10 l
---
---
---
---
---
---
10 l
500 l
500 l
500 l 500 l
Muestra Muestra
Blanco
500 l
10l
500 l
50 l
---
50 l
---
50 l
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340 nm
1 cm de espesor
25C
frente al aire
Patrones diluidos
Muestra diluida
Tampn ensayo (R1)
Patrones
Muestra
20 l de cada
1,0 ml
20 l
1,0 ml
ESPECIFICIDAD
No existe ninguna reaccin con IgA e IgM bajo las condiciones
del anlisis.
Las muestras extremadamente lipmicas o hemolticas y altos
niveles de detergentes inicos pueden interferir con la prueba.
RANGOS DE NORMALIDAD (1,2)
Adultos:
92 - 207 IU/ml
(8 - 18 g/l)
(800 - 1800 mg/dl)
Nios:*
(8-10 aos)
Neonatos:*
(2-8 das)
100 l
100 l
* valor medio desviacin estandar
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Nivel 2
1043
10.3
0.99
20
Nivel 3
1648
19.6
1.19
20
Nivel 2
1043
43.2
4.14
20
Nivel 3
1648
26.4
1.60
20
Anlisis (Inter)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
CORRELACIN
El mtodo Randox (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9780 X + 18.137
y un coeficiente de correlacin r = 0,9980
Se analizaron 49 muestras de pacientes con valores de entre 399
y 4859 mg/dl.
REFERENCIAS
1. Becker, W.: Laboratoriumbltter 1980; 30: 25.
2. Geiger, H. & Hoffman, P.: Z. Kinderheilk 1970; 109: 22.
3. Whicher, J.J., Price, C.P., Spencer, K., Critical Reviews in
Clinical Laboratory Sciences, 1983; 18: 213-216.
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Rev. 001
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L-LACTATO (LAC)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo
de reactivos de laboratorio.
PAP
Determinacin Enzimtica de L-Lactato
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de L-Lactato en plasma
y CSF. Este ensayo s especfico para la determinacin de LLactato. Este producto es adecuado para un uso manual o en
el analizador Rx Monza.
Cat No.
LC 2389
16 x 6 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo Enzima
CAL Patrn
1 x 100 ml
16 x 6 ml
1 x 5.5 ml
METODO COLORIMETRICO
La concentracin de L-Lactato en la muestra se determina de
acuerdo a la siguiente reaccin.
L-Lactato + O2
Lactato Oxidasa
piruvato + H2O2
TOOS =
Concentraciones Iniciales
100 mmol/l, pH 7,20
2,1 mmol/l
1 g/l
0,4 mmol/l
1000 U/l
600 U/l
10000 U/l
Especifico para cada lote
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PROCEDIMIENTO
Seleccione LAC en la pantalla de Monza ejecutar prueba y
llevar a cabo un blanco de agua con agua dulce doble destilada
(ddH2O) como se indica en las instrucciones.
VALORES DE NORMALIDAD(5)
mmol/l
Plasma
0,5 2,22
Pipetear en la Cubeta:
dd H2O
Patrn
Muestra
Reactivo
Reactivo Blanco S0
5 l
500 l
Patrn S1
5 l 500 l
Muestra
5 l
500 l
550 nm
1 cm de espesor
20-25C, 37C
frente al blanco de reactivo
Muestra
Patrn
Reactivo
Patrn
(l)
-10
1000
Muestra
(l)
10
-1000
Concentracin de L-Lactato =
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Las siguientes caractersticas de rendimiento se obtuvieron
utilizando un Rx Monza en modo cubeta funcionando a 37C y
calibrado en el estndar proporcionado por el Kit.
LINEALIDAD
El test es lineal hasta una concentracin de L-Lactato de 19,7
mmol/l (178 mg/dl). Diluir las muestras superiores a esta
concentracin 1+1 con NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado
por 2.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de L-lactato con un nivel
aceptable de precisin se determin en 0,165 mmol/l (1,49
mg/dl).
PRECISION
mg/dl
4,5 - 20
Amuestra
Apatrn
Amuestra
Apatrn
x Concentracin
del patrn (mg/dl)
x Concentracin
NORMALIZACIN
El L-Lactato Randox Estndar incluido en este Kit es trazable a
L-Lactato mtodo de referencia Gravimtrico.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si
los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar la programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
Nivel 3
53.3
0.458
0.86
20
Precisin Total
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
13.1
0.749
5.72
20
Nivel 3
53.3
1.93
3.62
20
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9382 X + 0.2605
y un coeficiente de correlacin r = 0,9980
Se analizaron 49 muestras de pacientes con valores de entre
6.5 y 123 mg/dl.
REFERENCIAS
1. Shimojo N et al, CLIN CHEM 1989; 35(9): 1992 - 1994.
2. Shimojo N, Fujino K et al, CLIN CHEM 1991; 37(11) 1978
- 1980.
3. Lehninger Al: Principles of Biochemistry, Worth Publishers,
New York, 1993, p 416.
4. Mascini M et al, CLIN CHEM. 1987; 34(4) 591 - 593.
5. Jacobs DS, Kasten BL, Demott WR and Wolfson WL:
Laboratory Test Handbook, LEXI COMP INC, OHIO,
1990, p. 245.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
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LIPASA (LPS)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Triacilglicerol Lipasa
Mtodo UV
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Lipasa en el suero y plasma.
Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador
Rx Monza.
No. Cat.
LI 188
20 x 2.5 ml
LI 194
4 x 30 ml
R1a. Tampn
R1b. Sustrato
CAL. Patrn
1 x 70 ml
20 x 2.5 ml
4 x 3.0 ml
R1a. Tampn
R1b. Substrate
CAL. Patrn
2 x 70 ml
4 x 30 ml
4 x 3.0 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
El sistema de test de la lipasa es un medio para medir la actividad
del enzima lipasa en el suero y el plasma. La medicin de la lipasa
se utiliza en el diagnstico y tratamiento de enfermedades del
pncreas tales como pancreatitis aguda y obstruccin del
conducto pancretico.
METODO TURBIDIMETRICO(3)
PRINCIPIO
Lipasa
Triolena + 2H2O
Concentracin en la prueba
26 mmol/l, pH 8,9
16,7 mmol/l
0,04 mmol/l
0,3 mmol/l
4 mg/l
Ver valor asignado
en el inserto del lote especfico
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PROCEDIMIENTO
Seleccione LIP en la pantalla ejecutar prueba y lleve a cabo un
blanco de agua segn las instrucciones.
Pipetear en la Cubeta:
Reactivo Blanco S0
ddH20
Muestra
CAL Patrn
Reactivo
Patrn S1
20uL
500uL
20uL
500uL
Muestra
20uL
500uL
Pipetear en la cubeta:
Reactivo
Muestra
Patrn
Patrn
Macro
Semi Micro
Muestra
Macro Semi Micro
2,5 ml
--0.1 ml
2,5 ml
0,1 ml
---
1,0 ml
--0,04 ml
1,0 ml
0,04 ml
---
Actividad(patrn)
Apatrn
INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere en la prueba.
VALORES NORMALES(4)
Suero: Hasta 190 U/l (37C)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de
referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geogrfica de la
poblacin.
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.
LINEALIDAD
Si la actividad de la lipasa excede 940 U/l, diluir la muestra 1+1
con NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por
2.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de lipasa con un nivel
aceptable de precisin se determin en 24,5 U/l.
PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Nivel 1
Media (U/l)
129
DE
6.05
CV(%)
4.69
n
20
Precisin Total
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
129
6.57
5.09
20
Nivel 2
403
16.2
4.02
20
Nivel 2
403
17.8
4.41
20
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.0495 x -10.67
y un coeficiente de correlacin r = 0,9832
Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre
43-918U/l.
REFERENCIAS
1. Tietz NW et al. Lipase in serum-the elusive enzyme: An
overview. Clin Chem 1993; 39:746-756.
2. Lott, J. A., et al. Clin. Chem. 1986; 32: 1920.
3. Ziegenhorn J., et al. Clin. Chem. 1979; 25: 1067.
4. Weisshaar, H.D., et al. (1981). Dtsch. Med. Wschr.
106: 239.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
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MAGNESIO
(AZUL DE XILIDIL)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
Mtodo Colorimtrico
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Magnesio en el suero, el
plasma y la orina. Este producto es adecuado para un uso manual
o en el analizador RX monza.
No. Cat.
MG 531
3 x 100 ml
R1.
Reactivo de color
CAL. Patrn
3 x 100 ml
1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLINICO
El Magnesio es uno de los principales cationes intracelulares en el
cuerpo. Su accin est relacionada con la del calcio. La deficiencia
de magnesio, hipomagnesemia, puede resultar en varias
enfermedades neuromusculares, debilidad, temblores, tetania y
convulsiones. Se asocia con hipocalcemia, terapia intravenosa,
diabetes mellitus, alcoholismo, dilisis y embarazo.
Los niveles elevados de magnesio en suero se asocian con
deshidratacin, acidez diabtica grave y Enfermedad de Addison.
Las condiciones que interfieren con la filtracin glomerular como
en el caso de fallo renal resultan en retencin de magnesio y por
ello aumento de sus niveles en suero.
PRINCIPIO(1-5)
Los iones de magnesio reaccionan con azul de xilidilo en un
medio alcalino para formar un quelato soluble en agua de color
morado-rojizo. La intensidad del color es proporcional a la
concentracin de magnesio en la muestra. El Calcio se excluye
de la reaccin por medio de su conjugacin con el EGTA.
EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA
Suero, Plasma (no plasma tratado con EDTA) u orina. La
muestra de orina de 24 horas puede contener sedimentos que
absorben el magnesio. Aadir unas gotas de cido clorhdrico
concentrado (pH 3-4) para disolver el sedimento y diluir con
DDH2O 1+4 (resultado x 5).
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1.
Reactivo de Color
Azul de Xilidilo
Tampn Tris
Carbonato Potsico
EGTA
CAL. Patrn
0,1 mmol/l
0,2 mmol/l
77 mmol/l
0,04 mmol/l
Ver inserto lote especfico
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520 nm
1 cm de espesor
20 - 25C
frente al blanco de reactivo
Procedimiento Macro
ADULTOS
Suero
Orina
Patrn
Muestra
Reactivo de Color
Agua Destilada
Patrn
Muestra
2,0 ml
20 l
-
2,0 ml
20 l
-
2,0 ml
20 l
Patrn
Muestra
Reactivo de Color
Agua Destilada
Patrn
Muestra
1,0 ml
10 l
-
1,0 ml
10 l
-
1,0 ml
10 l
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de
RX monza, en el modo de cubeta, calibrado en Calibracin de
nivel Randox Suero 3.
SUERO
LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta 2,34 mmol/l (5,69 mg/dl). Las muestras
con concentraciones ms elevadas se debern diluir 1+1 con
agua doblemente destilada y repetir el anlisis. Multiplicar el
resultado por 2.
SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable se ha determinado como
0,036 mmol/l (0,088 mgl/dl).
PRECISION
Intra assay
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Inter assay
x Conc.
x Conc.
NORMALIZACIN
Standard Randox magnesio incluido en el kit se puede rastrear al
magnesio de materiales de referencia NIST 909b.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIA
Se analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y
se encontr que no producen interferencias:
Hemoglobina
<1000 mg/dl (10 g/l)
Bilirrubina
<25 mg/dl (427 mol/l)
Triglicridos
<1000 mg/dl (11 mmol/l)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
2.43
0.017
0.70
20
Nivel 3
4.50
0.020
0.44
20
Nivel 2
2.43
0.066
2.71
20
Nivel 3
4.50
0.081
1.79
20
MTODO DE COMPARACIN
El mtodo Randox (Y) se compar con otro equipo de prueba
disponible en el mercado (X). Cuarenta muestras de pacientes
con valores que abarca el intervalo 1,75 a 5,58 mg / dl se
ensayaron. El anlisis de regresin lineal de los datos como
resultado la siguiente ecuacin.
Y = 0.997 X - 0.0004
con un coeficiente de correlacin, r = 0,9989
ORINA
LINEARIDAD
Este mtodo es lineal to12.6 mmol/l (30,6 mg/dl).
SENSIBILIDAD
El nivel mnimo detectable se ha determinado como
0,618 mmol/l (1,50 mg/dl).
REFERENCIAS
1. Mann, C.K., Yoe, J.H., Anal. Chem. (1956), 28: 202-205.
2. Mann, C.K., Yoe, J.H., Anal. Chim. Acta (1957), 16: 155-160.
3. Ogata, H., Hiroi, L., Anal. Chem. (1959), 8: 21.
4. Bohuon, C., Clin. Chim. Acta. (1962), 7: 811-817.
5. Rice E.N., Lapara, C.Z., Clin. Chim. Acta. (1964) 10: 369.
6. Teitz N.W. Clinical Guide to Laboratory Tests. W.B.
Saunders Co (1983).
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
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SODIO (Na)
Prueba Colorimtrica Enzimtica
RX Series
1
R1a.
R1b.
R2a.
R2b.
4 x 45 ml
4 x 45 ml
2 x 39 ml
2 x 39 ml
Solucin Tampn
Enzima
Diluyente
Sustrato
MUESTRA
Suero, plasma tratada con heparina o litio.
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1.Solucin Tampn/Enzimas
Transferir el contenido de un frasco de solucin
tampn R1 al frasco de Enzima R1b y disolver
agitando suavemente, asegurando que el contenido
R2.
PROCEDIMIENTO
Seleccionar NA en la pantalla "Run Test" y realice un blanco de
agua.
Pipetear en la cubeta:
Blanco de Reactivo S0 Estndar S1 Muestra
ddH2O
20 l
Estndar
20 l
Muestra
20 l
R1
500 l
500l
500 l
Mezclar e incubar por 5 minutos a 37C. Posteriormente adicionar:
200 l
PRECISIN
200 l
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el Multi-suero de ensayo Randox Nivel 2 y
Nivel 3 para realizar el control de calidad diario. Deben evaluarse
al menos dos niveles de calidad una vez al da. Los valores
obtenidos del control de calidad deben caer dentro del rango
de valores especficos. Si los valores caen fuera del rango,
deber repetir y excluir los errores siguiendo los siguientes
pasos:
SENSITIVITY
La concentracin mnima detectable para Sodio con un nivel
de precisin adecuado se determin como 57.8 mmol/l.
MATERIALES PROPORCIONADOS
Solucin Tampn
Enzima
Diluyente
Sustrato
R2
CALIBRACIN
Se recomienda el uso de la Calibracin Randox Nivel 3 (CAL
2351), utiliza el blanco como S2 y lo diluye 4+1 como S1 (4 partes
Cal Nivel 3 + 1 parte de agua) con agua doblemente destilada. Se
recomienda realizar una calibracin diaria de 2 puntos como se
indica en el procedimiento de control de calidad.
200 l
Level 2
139
3.82
2.75
20
Level 3
159
4.94
3.11
20
Level 2
139
3.78
2.72
20
Level 3
159
5.66
3.56
20
CORRELACIN
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de
regresin lineal:
Y = 0.9955 X + 1.2358
y un coeficiente de correlacin de r = 0.9813
Se analizaron 41 muestras de pacientes abarcando
un rango de 87.85 hasta 188.51 mmol/l.
Revisado 08 Mar 11 lm
ESTADO DE LOS
ANTIOXIDANTES
TOTALES (TAS)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
MANUAL
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro del Estado de los
Antioxidantes Totales en suero, plasma, vino, cerveza o zumos de
fruta. Este producto es adecuado para su utilizacin en Manual.
Cat No.
NX 2332
5 x 10 ml
5 x 10 t
R1.
R2.
R3.
CAL
Tampn
Cromgeno
Sustrato
Patrn
1 x 100 ml
5 x 10 ml
2 x 5 ml
5 x 1 ml
.X
- [FeIV = 0] + H2O
ABTS*+ + HX - FeIII
Cromgeno
Reconstituir un vial de cromgeno R2 con 10 ml de
Tampn R1. Estable 2 das cuando se conserva entre +2
y +8C u 8 horas entre +15 y +25C.
R3.
Sustrato
Diluir 1 ml de sustrato R3 con 1.5 ml de Tampn R1.
Estable 24 horas cuando se conserva entre +2 y 8C. En
la forma no diluida es estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C
HX-FeIII = Metamioglobina
.X - [FeIV = 0] = Ferrilmioglobina
ABTS= 2,2'-Azino-di-[3-etilbenzotiazoln sulfonato]
ABTS es marca registrada de Boehringer Mannheim.
CAL Patrn
Reconstituir un vial de Patrn con 1 ml de agua
doblemente desionizada. Estable durante 2 das cuando se
conserva entre +2 y +8C 1 mes a -20C.
MUESTRA(2)
Suero fresco o plasma heparinizado. Evitar muestras hemolizadas.
La muestra puede ser conservada hasta 36 Hs entre +2 y +8C.
El plasma/suero puede ser congelado durante un mximo de 14
das. Evitar ciclos repetidos de congelacin-descongelacin. Para
el vino tinto diluya 1 + 3. Los zumos de frutas pueden ser
analizados tambin, pero deben filtrarse con un filtro de 0.45 l.
Concentraciones en la prueba
Tampn
Tampn Fosfato Salino
R2.
Cromgeno
Metamioglobina
ABTS
R3.
Sustrato
Perxido de hidrgeno
(forma estabilizada)
CAL Patrn
6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcromn
-2-cido carboxlico
80 mmol/l, pH 7,4
6,1 Hmol/l
610 Hmol/l
250 Hmol/l
Especfico por lotes
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
Cromgeno
Sustrato
Patrn
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Control Randox de Antioxidantes Totales Cat.No. NX 2331
0,9% de NaCl de la solucin (Na Sin azida)
NOTAS
1. Es muy importante controlar exactamente el tiempo de
reaccin. Los resultados se vern afectados si se
cambian los volmenes, los tiempos de incubacin y las
temperaturas. El kit del Estado Antioxidante Total slo
se puede utilizar con un espectrofotmetro atemperado.
2. Azida de sodio interfiere en el ensayo y no debe ser aadi a
la solucin 0,9% de NaCl que puede ser utilizado para diluir las
muestras que exceden la linealidad del ensayo.
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MANUAL NX 2332
PROCEDIMIENTO
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medida:
600 nm
1 cm de espesor
37C
frente al aire
Pipetear en cubeta:
Agua Bidestilada
Patrn
Muestra
Cromgeno (R2)
Reactivo
Blanco
Patrn
Muestra
20 Hl
1 ml
20 Hl
1 ml
20 Hl
1 ml
200 Hl
200 Hl
LINEALIDAD
Muestras que presentan concentraciones superiores a
2,5 mmol/l deberan ser diluidas con NaCl al 0,9% y analizadas
otra vez. Se recomienda diluir las muestras nicamente cuando
sea necesario ya que una dilucin lleva consigo un aumento de
hasta 20% en los valores. La mayor parte de las muestras no
necesitarn ser diluidas porque los resultados sern ms bajos de
2,5 mmol/l.
PATENTES
Este producto est sujeto a Patente UK 2250819 y Patentes y
Aplicaciones derivadas de PCT Aplicacin de Patente
PCT/GB91/02228.
REFERENCIAS
1. Miller, N.J., Rice-Evans, C., Davies,
M.J., Gopinathan, V. and Milner, A., Clinical Science (1993)
84, 407-412.
2. Data on file at Randox.
200 Hl
Revisado 13 Nov 09 ck
Rev. 001
PAGE 2 OF 2
GLUCOSA-6-FOSFATO
DESHIDROGENASA
(G-6-PDH)
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de
Glucosa-6-Fosfato Deshidrogenasa en eritrocitos. Este producto
es adecuado para un uso manual o en el analizador RX monza.
Cat. No.
PD 410
100 ml
R1. Tampn
R2. NADP
R3. Sustrato
R4. Digitonina
1 x 100 ml
1 x 2 ml
1 x 2 ml
1 x 20 ml
METODO UV
PRINCIPIO(1)
La actividad del enzima se determina midiendo la variacin de la
absorbancia a 340 nm que se produce por la reduccin del
NADP+.
G-6-PDH
G-6-P + NADP+
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
gluconato-6-P + NADPH + H+
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1. Tampn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
se conserva entre +2 y +8C.
MUESTRA
Eritrocitos.
PREPARACION DE LA MUESTRA
Lavar 0,2 ml de sangre con 2 ml alcuotos de solucin de NaCl al
0,9%. Centrifugar despus de cada lavado a 3000 rpm durante 10
minutos. Repetir 3 veces. Repetir 3 veces. Suspender el
centrifugado de eritrocitos en 0,5 ml de solucin 4, dejar durante
15 min a +4C y centrifugar de nuevo. Use el sobrenadante en
el ensayo en un plazo de 2 horas.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
R1. Tampn
Tampn trietanolamina
EDTA
R2. NADP
R3. Sustrato
R4. Digitonina
Concentraciones en la prueba
31,7 mmol/l, pH 7,6
3,2 mmol/l
0,34 mmol/l
0,58 mmol/l
R2. NADP
Reconstituir el contenido de la botella 2 con 2 ml de agua
bidestilada. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.
R3. Sustrato
Reconstituir el contenido de la botella 3 con 2 ml de agua
bidestilada. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.
R4. Digitonina
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando
se conserva entre +2 y +8C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
NADP
Sustrato
Digitonina
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Control para G-6-PDH Randox
Deficiente
No. Cat. PD 2617
Normal
No. Cat. PD 2618
Agua bi destilada
PAGE 1 OF 3
PROCEDIMIENTO
Determinar el nmero de eritrocitos/ml de sangre.
1. RX MONZA
Seleccione G6PD en la pantalla de Ejecucin de prueba y llevar a
cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
= 5.3 x 109
mU/eritrocitos per ml
= 695
mU/109 eritrocitos
Mestra
Haemolysate
Reagent R1
Reagent R2
7.5 l
500 l
15 l
7.5 l
R1
R2
Haemolysate
Semi Micro
1.00 ml
0.03 ml
0.015 ml
0.05 ml
0.015 ml
Semi Micro
= 131
G-6-PDH mU/gHb
100
Hb(g/dl)
Concentracin de hemoglobina
determin para cada muestra
5.3
695
eg.
Hb (g/dl)
= 695
Hb(g/dl)
= 15.0
G-6-PDH mU/gHb
695 x 100
15.0
= 4633
Correccin de la Temperature
Tenga en cuenta que la correccin de la temperatura por
debajo solo puede ser utilizada para las muestras de pacientes.
Cuando la temperatura es de 37 C, no se requiere ningn
factor de correccin de temperatura (TCF). Si los resultados de
muestras de los pacientes se presentan a una temperatura que
no sea 37 C, se debe utilizar un TCF.
Cubeta de
Temperatura (C)
TCF
25
30
2.076
1.515
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Control para G-6-PDH Randox , Deficiente y
Normal para el control de calidad diario. Analizar dos niveles
distintos de controles al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error,
se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
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INTERFERENCIAS
Los reticulocitos tienen un nivel de G6-PDH ms elevado que el
de los hematies maduros. No se recomienda por tanto que se
realice este anlisis trs una crisis hemolitica severa, ya que esto
puede ofrecer resultados falsaments elevados. El anlisis puede
resultar util una vez que los hematies hayan vuelto a su nivel
normal.
VALORES NORMALES(3)
En eritrocitos: 245 - 299 mU/109 eritrocitos (37C)
6.97 - 20.5
REFERENCIAS
1. Kornberg, A. et al., Methods in Enzymology 1,
Academic Press, New York, 1955; p.323.
2. Makarem, A., Clinical Chemistry-Principles and
Techniques. 2nd Ed. R.F. Henry, D. C. Cannon, J.W.
Winkelman, Editors. Harper and Row, Hagerstown
[MD], 1974; 1128-1135.
3. Lohr GW, Waller HD: Glucose-6-Phosphate
Dehydrogenase. Methods of Enzymatic Analysis,
3rd Edition - Varlag Chemie, Wehnheim: 1974; p. 636.
U/g Hb (37C)
Hemoglobina en sangre (g/dl)
Hombres Adultos
Mujeres Adultos
Recin nacidos
13 - 18
11 - 16
14 - 23
Nivel 1
784
33.2
4.24
20
Nivel 2
1533
71.3
4.65
20
Nivel 1
784
50.5
6.45
20
Nivel 2
1533
78.3
5.11
20
Anlisis (Inter)
Media (U/l)
DE
CV (%)
n
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 1.0069 x + 47.644
y un coeficiente de correlacin r = 0,9903
Se analizaron 50 muestras de pacientes con valores de entre 162
y 1200U/l.
Revised 17 Nov 11 ml
Rev.002
PAGE 3 OF 3
FOSFORO INORGNICO
(PHOS)
Mtodo UV
MANUAL
RX MONZA
USO PREVISTO
Para la determinacin cuantitativa in vitro del fsforo inorgnico
en suero y orina. Este producto es adecuado para uso manual y
para el analizador Rx Monza.
N. de cat.
PH 1016
300 ml
RELEVANCIA CLNICA
El cuerpo humano contiene aproximadamente 1 kg de fsforo.
Las sales calcificadas del fosfato que constituye la sustancia
inorgnica del hueso suponen aproximadamente el 80% del total
de fsforo. El resto est distribuido por las restantes clulas del
cuerpo, principalmente como fsforo orgnico en fosfolpidos y
fosfoprotenas. En el suero, la mayor parte del fsforo
inorgnico se encuentra en forma libre, estando ligado el 15%
aproximadamente a protenas. Cuando aparecen niveles
anmalos de fosfato srico, suelen acompaar a enfermedades
del rin, seas y paratiroideas. El fosfato se suele medir junto
con el calcio srico, ya que cada una de las mediciones resulta de
utilidad para interpretar la otra.
PRINCIPIO DEL ENSAYO (1)
El fsforo inorgnico reacciona con el molibdato armnico en
presencia de cido sulfrico para formar un complejo de
fsfomolibdato que se mide a 340 nm.
RECOGIDA DE LA MUESTRA Y PREPARACIN (2)
El suero es la muestra recomendada.
El suero es estable durante 5 das si se almacena a +2-8 C. Es
estable durante 3 meses si se almacena congelado a -20C. Evite
las muestras hemolticas ya que la hemolisis interfiere en la
prueba.
Orina: La orina de 24 horas se debe recolectar en una botella
lavada con cido y libre de detergentes. Tras la recoleccin de la
muestra, acidifquela hasta alcanzar un pH <3,0.
Diluir la orina 1+19 con solucin de 0,9% NaCl. Multiplicar el
resultado por 20.
3,0 ml
6,0 ml
12,0 ml
Contenido
MATERIALES SUMINISTRADOS
Blanco de reactivo
Reactivo de molibdato
Patrn
PGINA 1 DE 4
PROCEDIMIENTO
Realice una nueva calibracin de ganancia [Gain Calibration] con
una cubeta que contenga ddH2O recin preparada. Seleccione el
programa PHOS en la pantalla Run Test [ejecucin de prueba] y
realice un blanco de agua la ley como se indica.
Pipetee en la cubeta:
Blanco de reactivo
S0
Agua destilada
Muestra
Patrn
Reactivo de trabajo
5 l
----0,5 ml
Patrn
S1
Muestra
----5 l
0,5 ml
--5 l
--0,5 ml
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar los Multisueros analizados de Randox de
nivel 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse dos
niveles de controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos
deben situarse dentro de un rango determinado. Si estos valores
estn fuera del rango y la repeticin excluye un posible error,
deben realizarse los pasos siguientes:
1. Comprobar los ajustes del instrumento y la fuente de luz.
2. Comprobar que todo el equipo utilizado est limpio.
3. Comprobar el agua; los contaminantes, como un crecimiento
bacteriano, pueden contribuir a la obtencin de resultados
imprecisos.
4. Comprobar la temperatura de la reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido.
6. Contactar con el servicio tcnico de atencin al cliente de
Randox Laboratories llamando al telfono +44 (0) 28 9442
2413 (Irlanda del Norte).
INTERFERENCIA
Los analitos indicados ms abajo se sometieron a prueba hasta
CALIBRACIN PARA RX MONZA
alcanzar los niveles siguientes y se determin que no interferan:
Se recomienda utilizar el patrn de calibrado CAL se proporciona en
Bilirrubina
500 mol/l
el kit o bien el Suero de calibracin de nivel 3 de Randox para
Intralipid
0,4%
muestras de suero.
Triglicridos
4,05 mmol/l
Se recomienda utilizar el patrn de calibracin CAL proporciona
Hemoglobina
7 g/l
en el kit para muestras de orina. Calibre cuando cambie de lote
VALORES NORMALES (2, 3)
de reactivo o bien cuando indiquen los procedimientos de
control de calidad.
Suero:
0,87 - 1,45 mmol/l (2,7 - 4,5 mg/dl)
PARA USO MANUAL
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
Orina de 24 horas:
340 nm
Recorrido luminoso de 1 cm
+20- +25C/+37C
frente a blanco de reactivo
Pipetee en la cubeta:
Agua destilada
Muestra
Patrn
Reactivo de trabajo
Blanco
Patrn
Muestra
10 l
----1 ml
----10 l
1 ml
--10 l
--1 ml
Nivel 2
4,60
0,040
0,88
20
Nivel 3
6,77
0,141
2,08
20
Nivel 2
4,60
0,199
4,32
20
Nivel 3
6,77
0,197
2,91
20
PGINA 2 DE 4
Nivel 2
29,5
1,06
3,60
20
Nivel 3
89,2
4,16
4,66
20
Nivel 2
29,5
1,08
3,68
20
Nivel 3
89,2
3,86
4,33
20
REFERENCIAS
1. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Techniques,
2nd Edition, Harper and Row, p. 525, 1974.
2. Tietz, N., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B.
Saunders Company, Philadelphia 1983; 5: 384.
3. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.
Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 444-446.
Revisado: 02 May 12 bm
Rev. 002
PGINA 3 DE 4
PAGE 4 OF 4
POTASIO (K)
MANUAL
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Potasio en el suero y
plasma. Este producto es adecuado para uso Manual.
Cat. No.
PT 1600
100 ml
R1.
R2a.
R2b.
CAL
Reactivo Precipitante
Na-Tetrafenilboron
NaOH
Patrn
1 x 100 ml
1 x 50 ml
1 x 50 ml
1 x 5.5 ml
PRINCIPIO
El tetrafenilboron sdico reacciona con los iones de potasio en
un medio alcalino libre de protenas para producir una
suspensin trbida de tetrafenilboron potsico. La cantidad de
turbidez producida es proporcional a la concentracin de
potasio.
MUESTRA
Suero o plasma litio-heparin.
R1.
R2a.
R2b.
CAL
Reactivo Precipitante
Acido Tricloro Actico
Tetrafenilboron Sdico
Hidrxido Sdico
Patrn
Muestra
Reactivo Precipitante (R1)
Componentes
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo Precipitante
Na-Tetrafenilboron
NaOH
Patrn
0,3 mol/l
0,2 mol/l
2,0 mol/l
Vedi inserto lotto-specifico
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD
Utilizar todas las soluciones sin diluir. Estable hasta la fecha de
caducidad cuando se conserva entre +15 y +25C.
Macro
Micro
100 l
1000 l
50 l
500 l
2000 l
-200 l
Micro
Patrn
Muestra
1000 l
100 l
--
1000 l
-100 l
x Patrn conc.
Apatrn
PAGE 1 OF 2
MANUAL PT 1600
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar dos niveles
distintos de controles cada da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIA
La hemlisis interfiere con el anlisis debido al alto contenido de
potasio en las clulas sanguneas rojas, por lo tanto las muestras
se debern separar del cogulo lo antes posible.
VALORES NORMALES(4)
3,5 5,1 mmol/l (13,7 19,9 mg/dl)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de Potasio de 10
mmol/l. Para muestras con concentraciones superiores diluir 1+2
con NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado por 3.
REFERENCIAS
1. Hillmann, G., Beyer, G., J. Clin. Chem. and Clin. Biochem.,
1967; 5: 93.
2. Henry, R. J., Clin. Chem., Harper and Row, New York, Sec.
Edit., 1974; 646.
3. Teitz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistry, Saunders,
Philadelphia, Sec. Edit., 1976; 876.
4. Teitz, N.W., Textbook of Clinical Chemistry. W.B. Saunders
Company, Philadelphia, 1986; 1842.
Revisado 25 Jan 10 ck
Rev. 001
PAGE 2 OF 2
RANSEL
Glutation Peroxidasa
SOLO PARA INVESTIGACION
MANUAL
RX MONZA
Componentes
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Glutation Peroxidasa
en sangre entera. Este producto es adecuado para un uso
manual o en el analizador Rx Monza.
Cat. No.
RS 504
8 x 6,5 ml
8 x 6 t Semi micro
8 x 2 t Macro
RS 505
8 x 10 ml
8 x 10 t Semi micro
8 x 4 t Macro
R1a. Reactivo
R1b. Tampn
R2. Hidroperxido
de cumeno
R3. Diluyente
8 x 6,5 ml
1 x 70 ml
1 x 1 ml
2 x 200 ml
R1a. Reactivo
R1b. Tampn
R2. Hidroperxido
de cumeno
R3. Diluyente
8 x 10 ml
1 x 100 ml
1 x 1 ml
2 x 200 ml
5 x 100 ml
METODO UV(1)
Este mtodo est basado en el trabajo de Plagia and Valentine. La
Glutation Peroxidasa (GPX) cataliza la oxidacin del Glutation
(GSH) por el hidroperxido de cumeno. El Glutation oxidado
(GSSG) en presencia de Glutation Reductasa (GR) Y NADPH es
inmediatamente convertido en su forma reducida con una
oxidacin concomitante de NADPH en NADP+. Se mide la
disminucin de la absorbancia a
340 nm.
PRINCIPIO DE LA REACCION
GPX
2GSH + ROOH
Fosfato Potsico
Ferricianida Potsica
Cianida Potsica
Surfactante
10,3 mmol/l
6.08 mmol/l
7,68 mmol/l
0.1% v/v
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
La solucin R1b contiene azida sdica. Evitar su ingestin o
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberas,
lo que podra producir azidas explosivas. Cuando se deseche este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
La solucin R2 es nociva, si se traga o inhala, causa irritacin y es
combustible.
La solucin R2 es Hidroperxido de cumeno que es custico.
La solucin de Drabkin contiene cianuro por lo que puede ser
fatal si se ingiere.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio
GSSG + NADPH + H+
NADP+ + 2GSH
MUESTRA
Utilizar sangre entera heparinizada. Si la muestra proviene de
oveja o cabra, diluir 0,05 ml con 3 ml de diluyente. Para ganado
vacuno, caballos y otras especies diluir 0,05 ml de muestra con 2
ml de diluyente. Para muestras humanas ver NOTA.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
Concentraciones en la prueba
R1a. Reactivo
Glutation
Glutation Reductasa
NADPH
R1b. Tampn
Tampn fosfato
EDTA
R2.
Hidroperxido de cumeno
R3.
Diluyente
4 mmol/l
0,5 U/l
0,34 mmol/l
0,05 mol/l, pH 7,2
4,3 mmol/l
0,18 mmol/l
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R3.
Hidroperxido de cumeno
Diluir 10 Hl R2 con 10 ml de agua bidestilada y mezclar
bien, agitando vigorosamente, ya que el cumeno es difcil
de disolver. Debe utilizarse solucin fresca preparada en
el da. Concentrado es estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C. Para medir el
volumen de hidroperxido de cumeno se deber utilizar
una pipeta con accin de desplazamiento positiva, y
capilares de cristal.
Diluyente
Reconstituir el contenido de un vial de Diluyente R3 con
200 ml de agua bidestilada. Estable durante
4 semanas cuando se conserva entre +2 y +8C
3 das entre +15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo
Tampn
Hidroperxido de cumeno
Reactivo para diluir
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Control de Ransel (Cat. No. SC 692)
Agua bidestilada
Reactivo Hemoglobina (Cat. No. HG 1539)
Diluyente Ransel (RS 2318)
NOTAS(2,3)
Cuando se utiliza sangre entera heparinizada humana, se
recomienda el uso de reactivo de Hemoglobina para la dilucin.
Esto es debido a que la presencia de peroxidasas en sangre
humana puede conducir a falsos resultados (ms elevados). La
adicin de cianuro, sirve para inhibir esta interferencia positiva.
De todas formas, antes de aadir el reactivo de Hemoglobina, es
necesaria la dilucin de la sangre con la solucin de diluyente 4,
para convertir la glutation en su forma reducida. La forma
oxidada sera rpidamente inhibida por el cianuro. Se
recomienda el siguiente mtodo utilizando reactivo de
Hemoglobina.
Preparacin: Diluir el contenido de un vial de reactivo de
Drabkin con 480 ml de agua bidestilada. Conservar protegido de
la luz. Estable durante 6 meses o hasta la fecha de caducidad,
segn sea ms corto, cuando se conserva entre +15 y +25C.
Diluir 0,05 ml de sangre entera heparinizada en 1 ml de solucin
de diluyente (R3); incubar durante 5 min. y aadir
1 ml de reactivo de Hemoglobina. Mezclar bien y ensayar en la
forma normal. Se recomienda que las muestras sean analizadas en
los 20 min despus de la adicin del reactivo de Hemoglobina.
PROCEDIMIENTO
Seleccione GPx en la pantalla de Ejecucin de Prueba y llevar a
cabo un blanco de agua segn las instrucciones.
Pipetear en tubos de ensayo:
Muestra
Reactivo R1
Cumeno R2
10 l
500 l
40 l
340 nm
1 cm de espesor
37C
frente al aire
Semi-Micro
Muestra Blanco de
diluida Reactivo
Muestra diluida
H2O destilada
Reactivo R1
Cumeno R2
0.05 ml
--2.50 ml
0.10 ml
--0.05 ml
2.50 ml
0.10 ml
Muestra
diluida
Blanco de
Reactivo
0.02 ml
--1.00 ml
0.04 ml
--0.02 ml
1.00 ml
0.04 ml
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VALORES NORMALES
27,5 - 73,6 U/g Hb
4171 - 10881 U/l
Este rango se tom de una poblacin trabajadora Europea. Se
recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
normal.
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador RX
Monza en el modo de flujo de clulas a 37C con un volumen de
aspiracin de 450 l.
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 925 U/l. Diluir las
muestras con una concentration mayor con el agente diluyendo y
multiplicar el resultado por el factor de dilucin
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de la peroxidasa de
glutacin con un nivel aceptable de precisin ha sido
determinado como 75 U/l
PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Nivel 1
Media (U/l)
240
DE
11.7
CV(%)
4.86
n
20
Precisin Total
Media (U/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
240
17.5
7.30
20
Nivel 2
456
14.6
3.20
20
Nivel 2
456
19.9
4.37
20
CORRELACION
Este mtodo Randox (Y) se compar con otro mtodo
disponible en el mercado (X). Se analizaron 40 muestras de
pacientes con valores de entre 102 y 650 U/l. Se obtuvo la
siguiente ecuacin de regresin lineal:
Y= 1.0155 X +8.637
con un coeficiente de correlacin r = 0,9829
REFERENCIAS
1. Paglia, D.E. and Valentine, W.N., J. Lab. Clin. Med., 1967; 70:
158.
2. Kraus, R.J. & Ganther, H. E. Biochem. & Biophys. Res. Comm
1980; 96: 1116.
3. Prohaska, J.R., Oh, S.H., Hoekstra, W.G. & Ganther, H.E.
Biochem. & Biophys. Res. Comm. 1977; 74: 64.
Revisado 20 Sep 10 bm
Rev. 001
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RANSOD
Superoxido Dismutasa
MANUAL
RX MONZA
Componentes
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Superoxido Dismutasa
en sangre entera. Este producto es adecuado para un uso manual
o en el analizador Rx Monza.
No. Cat.
SD 125
5 x 20 ml
R1a.
R1b.
R2.
CAL
Sustrato Mixto
Tampn
Xantin Oxidasa
Patrn
5 x 20 ml
1 x 105 ml
3 x 10 ml
5 x 10 ml
PRINCIPIO
La funcin de la superxido dismutasa (SOD) es acelerar la
dismutacin de un radical txico, el radical superxido (O2.),
producido durante un proceso oxidativo enrgico, en perxido
de hidrgeno y oxgeno molecular.
Este mtodo emplea Xantina y Xantin oxidasa (XOD) para
formar radicales superxido, los cuales reaccionan con cloruro
de 2-(4-yodofenil)-3-(4-nitrofenol)-5-fenil tetrazolio (I.N.T) para
formar un colorante formazn rojo. Se mide la actividad de la
superxido dismutasa por el grado de inhibicin de esta
reaccin. Una unidad de SOD es la que causa un 50% de
inhibicin del valor de reduccin de INT bajo las condiciones del
anlisis.
XOD
Xantina
0,05 mmol/l
0,025 mmol/l
40 mmol/l, pH 10,2
0,94 mmol/l
80 U/l
Vedi inserto lotto specifico
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
R1a. Sustrato Mixto
Reconstituir un vial de Sustrato Mixto R1a con
20 ml de Tampn R1b. Es estable durante 10 das
cuando se conserva entre +2 y +8C.
Tampn
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C.
R2.
Xantn Oxidasa
Reconstituir el contenido de un vial de Xantn Oxidasa
R2 con 10 ml de agua bidestilada. Estable durante 2
semanas cuando se conserva entre +2 y +8C.
CAL
Patrones
Reconstituir el contenido de un vial de Patrn (CAL)
con 10 ml de agua bidestilada. Posteriormente las
diluciones de este patrn deben ser preparadas con
muestra diluyente Ransod. Se recomienda hacer las
siguientes diluciones del patrn CAL (o S6) para
construir la curva patrn:
O2.
I.N.T
colorante formazn
O
SOD
O2. + O2 + 2H+
O2 + H2O2
PREPARACION DE LA MUESTRA
Utilizar muestras de sangre entera heparinizada o con EDTA. Se
recomienda lavar los eritrocitos 4 veces con una solucin de
NaCl al 0,9%.
Centrifugar 0,5 ml de sangre entera durante 10 min a 3000 rpm.
Despus aspirar el plasma.
Despus lavar los eritrocitos 4 veces con 3 ml de solucin de
NaCl al 0,9 %, centrifugando durante 10 min a 3000 rpm despus
de cada lavado.
El centrifugado lavado de eritrocitos deber completarse con
2,0 ml de agua bidestilada fra. Mezclar y dejar reposar durante
15 min a 4C. El lisado se diluye con 0,01 mol/l de Tampn
Fosfato pH 7,0, de forma que el porcentaje de inhibicin caiga
entre el 30 y el 60%.
Para muestras humanas se recomienda 25 partes de dilucin de
lisado (Factor de dilucin final = 100) y para muestras de bovinos
50 partes (Factor de dilucin final = 200).
R1 = Sustrato Mixto
R2 = Xantin Oxidasa
Es recomendable que todos los reactivos y muestras
estn equilibrados a temperatura ambiente antes de su
uso.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Sustrato mixto
Tampn
Xantn Oxidasa
Patrones
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Diluyente Ransod (No. Cat. SD 124) (0,01 mol/l Tampn Fosfato,
pH 7,0).
Control de RANSOD No. Cat. SD 126.
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MANUAL SD 125
PROCEDIMIENTO
Seleccionar SOD en la pantalla Run Test (Realizar anlisis), y
llevar a cabo un blanco de agua de la forma indicada.
CALCULOS
A2 - A1
= A/min de patrn o de muestra
3
Pipetear en la Cubeta:
Patrn
S1
Patrn
S2 TO S6
15 l
500 l
Pruebas Control
15 l
500 l
15 l
500 l
= % inhibicin
(AS1/min)
75 l
75 l
75 l
75 l
(Amuestra/min x 100)
100 -
CALIBRACIN
Calibrar esta prueba usando el patrn proporcionado con el Kit.
Se recomienda que las siguientes diluciones estn realizadas con
el patrn Cal ( S6) para producir una curva estndar:-
Patrn
S6
S5
S4
S3
S2
Volumen de
solucin patrn
Diluente Prueba
Patrn no diluido
5 ml of S6
5 ml of S5
5 ml of S4
3 ml of S3
5 ml
5 ml
5 ml
6 ml
ILUSTRACION
(a) Una muestra de bovino diluida 1 en 300 veces con diluyente
de muestra Ransod produjo una inhibicin del 33%.
Desde la curva patrn:
No de unidades SOD en la muestra = 0,575
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
505 nm
1 cm de espesor
37C
frente al aire
Pipetear en la cubeta:
Muestra diluida
Patrn
Diluyente de Muestra
Ransod
Sustrato Mixto (R1)
= % inhibicin
(AS1/min)
Muestra
Diluyente
Patrones
S2 - S6
Muestra
diluida
-----
--0,05 ml
0,05 ml
---
0,05 ml
1,7 ml
--1,7 ml
--1,7 ml
0,25 ml
0,25 ml
0,25 ml
= 1461,9
0,118
Mezclar bien
Xantina Oxidasa (R2)
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MANUAL SD 125
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan un control Ransod, para el control de calidad
diario. Analizar el control al menos una vez al da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error,
se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin.
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
REFERENCIAS
1. Woolliams JA, Wiener G, Anderson PH, McMurray
CH Research in Veterinary Science 1983, 34: 253-256.
2. Suttle NF, The Veterinary Record 1986, 119: 519-522.
3. Suttle NF, McMurray CH Research in Veterinary Science
1983; 35: 47-52.
4. Arthur JR, Boyne R Life Sciences 1985 36: 1569-1575.
VALORES NORMALES
1102 - 1601 U/g Hb
164 - 240 U/ml
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.
LINEALIDAD
Las muestras deben ser diluidas para conseguir una inhibicin
entre el 30% y el 60% del porcentaje del diluyente de la muestra
(por ej. la reaccin no inhibida).
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de SOD inferior a la
estndar debe ser relatada como <S1 valor estndar.
PRECISION
Precisin Dentro del Anlisis
Media
DE
CV(%)
n
Nivel 1
101.0
4.88
4.64
20
Nivel 2
131.5
4.30
3.58
20
Nivel 1
101.0
6.27
5.96
20
Nivel 2
131.5
8.50
7.07
20
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9417 X + 0.1004
y un coeficiente de correlacin r = 0,965
Se analizaron 41 muestras de pacientes con valores de entre 23318U/ml.
Revisado 15 Sep 10 bm
Rev. 001
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Mtodo colorimtrico
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
La determinacin cuantitativa in vitro de hierro en suero. Este
producto es adecuado para un uso manual o en el analizador Rx
Monza.
No. Cat.
SI 257
2 x 100 ml
R1.
R2.
R3.
CAL
Cromgeno
Reductor
Tampn
Patrn
1 x 10 ml
1 x 15 ml
2 x 100 ml
1 x 10 ml
SIGNIFICADO CLINICO
Medidas de hierro (no hemo) se utilizan en el diagnstico y
tratamiento de enfermedades como la anemia por deficiencia de
hierro, hemocromatosis (una enfermedad asociada con el
depsito generalizado en los tejidos de dos pigmentos que
contienen hierro, de hemosiderina y de hemofuscin, y se
caracteriza por la pigmentacin de la piel), y la enfermedad renal
crnica.
PRINCIPIO(1,2,3)
El ion frrico se disocia de su protena transportadora,
transferrina, en medio cido y se reduce simult-neamente a su
forma ferrosa. Este ion ferroso forma un complejo con el
cromgeno, el cual es un indicador sensible al hierro, para
formar un cromforo azul con un mximo de absorcin a 595
nm.
MUESTRA
Suero.
No utilizar plasma en este ensayo.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
R1.
Cromgeno
Ferene
R2. Reductor
Acido ascrbico
R3. Tampn
Tampn acetato
Dimetil sulfxido
Surfactante
CAL Patrn
22.2 mmol/l
1.3 mol/l
0.087 mol/l, pH 4.65
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar
las precauciones normales necesarias, que se requieren al
manejar reactivos de laboratorio.
El Tampn R3 contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
mdica inmediatamente.
La Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas
expuestas, debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
El Tampn contiene tambin dimetil sulfxido que es nocivo.
Evitar el contacto con la piel y los ojos.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Puffer
Reductor
Agua libre de hierro
Patrn
Muestra
500 l
25 l
125 l
-
Patrn S1
Muestra
500 l
25 l
125 l
-
500 l
25 l
125 l
25 l
25 l
25 l
PAGE 1 OF 2
MANUAL SI 257
PARA USO MANUAL
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
PROCEDIMIENTO MACRO
Pipetear en la cubeta:
Tampn
Reductor
Agua libre de hierro
Patrn
Muestra
Reactivo
Blanco
Muestra
Patrn
2,0 ml
0,1 ml
0,5 ml
-
2,0 ml
0,1 ml
0,5 ml
2,0 ml
0,1 ml
0,5 ml
-
0,1 ml
0,1 ml
0,1 ml
Reactivo
Blanco
Muestra
Patrn
1,00 ml
0,05 ml
0,25 ml
-
1,00 ml
0,05 ml
0,25 ml
1,00 ml
0,05 ml
0,25 ml
-
0,05 ml
0,05 ml
0,05 ml
Amuestra
A patrn
Pipetear en la cubeta:
Tampn
Reductor
Agua libre de hierro
Patrn
Muestra
x Conc. de patrn
NORMALIZACIN
Suero de Calibracin Randox Nivel 3 es trazable al material de
de referencia NIST 937 Suero Hierro.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
Media (g/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
104
1.77
1.70
20
Nivel 3
196
3.96
2.02
20
Nivel 2
104
3.49
3.35
20
Nivel 3
196
6.26
3.20
20
Anlisis (Inter)
Media (g/dl)
DE
CV(%)
n
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.902 X + 1.92
y un coeficiente de correlacin r = 0,9995
Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre
10.23 y 599.01 g/dl.
REFERENCIAS
1. Ceriotti, F., and Ceriotti, G., Improved Direct Specific
Determination of Serum Iron. Clin. Chem. 26/2, 327-331
(1980).
2. Henry, R.J.: Clinical Chemistry Principles and Techniques,
New York, Harper and Row (1968) pg. 386.
3. Young, D.S., Hicks, J.M., Method for automatic
determination of serum iron, J. Clin. Pathol. 18: 98 - 102
(1965).
4. Weippl, G. et al. (1973). Blut 27:261.
Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 2 OF 2
MANUAL
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Sfilis en suero y
plasma. Este producto es adecuado para uso Manual.
No. Cat.
SY 1478
1. Suspensin de Antgeno
100 pruebas
de Carbono RPR
1 x 2 ml
1 x 0.5 ml
2. Control Positivo
3. Control Negativo
1 x 0.5 ml
4. Botella dispensadora de plstico
1
5. Aguja Dispensadora
calibrada para suministrar 16 l
1
6. Tarjetas de Pruebas Desechables
10
7. Pipeta Desechable
100
SY 1479
1. Suspensin de Antgeno
de Carbono RPR
2 x 5 ml
500 pruebas
2. Control Positivo
1 x 1 ml
3. Control Negativo
1 x 1 ml
4. Botella dispensadora de plstico
1
5. Aguja Dispensadora
calibrada para suministrar 16 l
1
50
6. Tarjetas de Pruebas Desechables
7. Pipeta Desechable
500
Se pueden solicitar otras variaciones de los formatos arriba
indicados.
INTRODUCCIN
La Sfilis es una enfermedad crnica, contagiosa y a
menudo venrea congnita producida por el Treponema
pallidum. Este organismo pertenece a un grupo de
bacterias gram-negativas llamadas Espiroquetas, las
cuales se definen por su estructura molecular nica. La
infeccin resulta del contacto con superficies hmedas,
resultantes de lesiones del tejido epitelial de la piel o las
membranas mucosas. Si no se trata, esta enfermedad
puede resultar en cambios irreversibles del sistema
nervioso y cardiovascular. La sfilis continua siendo una
enfermedad de alta incidencia, a pesar de los avances en
la terapia antibitica moderna.
PRINCIPIO
La prueba de Sfilis RPR es una prueba macroscpica de
floculacin no treponmica para la deteccin y titracin de
reaginas (anticuerpos en circulacin producidos como
resultado de la lesin del tejido causada por la enfermedad)
en el suero o el plasma. El antgeno utilizado en el kit es
una modificacin del antgeno de VDRL. Consiste en una
suspensin coloidal de cardiolipina equilibrada con licitina
y colesterol, y mezclada con carbono microparticulado. La
aglutinacin ocurre en presencia de las reaginas, la cual es
visiblemente intensificada por la presencia del carbono
microparticulado.
MUESTRAS
Se puede utilizar plasma, suero calentado o sin calentar.
Las muestras hemolizadas o contaminadas no son
adecuadas para el test. Las muestras de suero fresco se
pueden conservar entre +2 y +8C durante varios das
antes del anlisis o a -20C si se conservan durante ms
tiempo.
MATERIAL SUMINISTRADO
Suspensin de Antgeno de Carbono RPR
Control Positivo
Control Negativo
Botella Dispensadora de Plstico
Aguja Dispensadora Calibrada para suministrar 16 Hl
Tarjetas de Test Desechables
Pipeta Desechable
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
1. Rotor mecnico con etapa horizontal, operando a
100 r.p.m.
2. Pipeta automtica calibrada para suministrar 50 l. Es
necesaria para la prueba cuantitativa.
PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Todos los reactivos estn listos para su uso despus de
alcanzar una temperatura ambiente (NOTA 1). Agitar la
suspensin de antgeno para obtener una suspensin
homognea y transferir el contenido a la botella
dispensadora de plstico suministrada. Para ello, quitar la
tapa de la botella de plstico y colocar la aguja
dispensadora en el tapn de cierre-luer. Con cuidado
apretar la botella de plstico e insertar la punta de la aguja
en la suspensin de antgeno. Dejar que la botella se
expanda lentamente para que la suspensin de antgeno
entre en la botella (NOTA 2).
PROCEDIMIENTO
A. PRUEBA CUALITATIVA
1. Utilizando una pipeta desechable, dispensar una gota
( 50 l) de suero o plasma en el crculo de la tarjeta
de la prueba.
2. Con la parte plana de una pipeta desechable, extender
la muestra por toda el rea del crculo de la prueba.
3. Repetir los pasos 1 y 2 para cada muestra utilizando
una pipeta nueva.
4. Agitar el ensamblaje de la botella dispensadora, invertir
y golpear suavemente la aguja para sacar las burbujas.
5. Poner la aguja en posicin perpendicular a la tarjeta de
test y dejar que caiga una gota de antgeno en cada
muestra de la prueba.
6. Rotar la tarjeta de test a 100 r.p.m. durante 8 minutos
en un rotor mecnico. Tras la rotacin mecnica es
necesario rotar e inclinar la tarjeta brevemente a mano
(de un lado para otro), para ayudar a diferenciar entre
los resultados reactivos y los no reactivos.
7. Despus leer inmediatamente los resultados en el
macroscopio con buena luz.
LECTURA E INTERPRETACIN
Las lecturas se puntuan segn el criterio siguiente:
PATRN OBSERVADO
Agregados grandes en el centro
periferia del area del test
Agregados ms pequeos en
los ejes del area del test
o
Sin agregados, apariencia gris
suave
INTERPRETACIN
REACTIVO
REACTIVO DEBIL
B. PRUEBA CUANTITATIVA
1. Utilizando una pipeta automtica dispensar 50 l de
salino fisiolgico en los crculos del 1 al 5 de la tarjeta
de la prueba. No extender.
2. Utilizando una pipeta dispensar 50 l de la muestra
(suero o plasma) que se va a valorar en el salino del
primer crculo. (Ver Figura. 1)
3. Utilizando el mismo final de la pipeta mezclar el salino y
la muestra moviendo la mezcla hacia arriba y abajo 5 o
6 veces y transferir 50 l al salino en el segundo
crculo.
4. Realizar de la misma manera diluciones en serie hasta
el ultimo crculo. Quitar 50 l del crculo final. (Ver
Figura 2)
5. Utilizando el extremo plano de una pipeta desechable
limpia para cada muestra, extender las muestras
diludas por toda el area de cada crculo de la prueba
empezando por la dilucin ms alta. (No. de Crculo 5).
6. Proceder como en la prueba cualitativa a partir del
paso 4 en adelante.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
El ltimo paso de dilucin que contiene agregados
macroscpicos indica el titre de la muestra. Si la ltima
dilucin da un resultado positivo, entonces las series de
dilucin se debern extender.
Cada grupo de resultados se deber realizar con los
controles positivos y negativos suministrados para validar
de la prueba.
LIMITACIONES DE LA PRUEBA
Al igual que todos los test no treponmicos, el test de sfilis
RPR puede dar resultados positivos falsos. Tales
reacciones han sido producidas por enfermedades tales
como lepra, mononucleosis infecciosa y enfermedades
autoinmunes. Por lo tanto, es importante que todas las
muestras reactivas sean confirmadas por otro test
serolgico, preferiblemente un test especfico del
treponema tal como FTA-ABS o TPHA. El diagnstico final
se deber basar en una correlacin de los resultados del
test con el historial clnico del paciente.
La prueba se puede utilizar tambin para observar la terapia.
NOTAS
1. La sensibilidad puede verse reducida a temperaturas
bajas. Los mejores resultados se obtienen entre
23-29C.
2. La estabilidad a largo plazo del producto se ve reducida
cuando el antgeno se conserva en la botella
dispensadora de plstico. Por lo tanto, se recomienda
que el antgeno restante se devuelva a la botella de
cristal original despus del anlisis del da. La botella
de plstico y el ensamblaje de la aguja se debern
aclarar muy bien con agua destilada y secar al aire
antes de usar.
3. No volver a utilizar las tarjetas de test. Las tarjetas se
pueden secar al aire y archivar como documentos de
los resultados permanentes.
NO REACTIVO
PAG 2 DE 3
REFERENCIAS
1. McGrew, B.E. et al., Amer. J. Clin. Path., 1968; 50: 52.
2. Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 1962; 77:
645.
3. Stevens, R.W. & Stroebel, E., Amer. J. Clin. Path.,
1970; 53: 32.
4. Manual of Tests for Syphilis PHS Publications, No. 411,
U.S. Govt. Printing Office.
Figura. 1
Diluciones
Revisado 31 Julio 06 ne
Rev. 001
PAG 3 DE 3
PROTEINAS TOTALES
(TP)
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Proteinas Totales en
suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilizacin de
forma manual y en el analizador RX monza.
R2.
Mtodo Biuret
MANUAL
RX MONZA
No. Cat.
TP 245
2 x 500 ml
2 x 100 ml
1 x 100 ml
1 x 5.5 ml
PRINCIPIO
En medio alcalino, los iones cpricos, interaccionan con los
enlaces peptdicos de las proteinas formando un complejo
coloreado.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado, EDTA plasma.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
R1.
Reactivo Biuret
Hidrxido sdico
Tartrato Na-K
Yoduro potsico
Sulfato cprico
R2. Reactivo blanco
Hidrxido sdico
Tartrato Na-K
CAL. Patrn
Protena
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Las soluciones R1 y R2 contienen hidrxido sdico que es
castico. En caso de contacto accidental, lavar inmediatamente el
area afectada con agua abundante y buscar inmediatamente
atencin mdica.
CAL contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el contacto con
la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar
inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En caso de
ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un
mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
Reactivo Blanco
Diluir el contenido de una botella R2 con 400 ml de agua
bidestilada, enjuagando la botella a fondo. Es estable un
ao cuando se conserva hermticamente cerrado entre +2
y +25C.
CAL. Patrn
Listo para usar. Es estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo Biuret
Reactivo Blanco
Patrn
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel
3 (No. Cat. HE 1532)
Sueros de Calibracin Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
NOTAS
Si la lectura no puede llevarse a cabo a Hg 546 nm, debe
utilizarse un patrn para calcular la concentracin de proteinas
totales en la muestra. La muestra blanco para sueros claros o
incoloros corresponde aproximadamente a 0,2 g de proteinas
totales/dl, y puede ser ignorada.
Cuando se analicen sueros ictricos (5 mg bilirrubina/dl),
hemolticos o lipmicos debe analizarse una muestra blanco
hecha con 0,02 ml de suero o plasma y 1,0 ml de la Reactivo
blanco R2. Esta debe medirse frente al agua y la absorbancia
obtenida debe restarse de la absorbancia de la muestra.
PROCEDIMIENTO
Realice una calibracin de ganancia nuevo con una cubeta que
contiene ddH2O fresco. Seleccione el programa de TP en la
pantalla de ejecucin de la prueba y llevar a cabo un blanco de
agua segn las instrucciones.
Pipetear en la cubeta:
Reactivo blanco
S0
Agua destilada
Patrn (CAL)
Suero
R1
R2
0.01 ml
--0.5 ml
--
Patrn
S1
Muestra
Muestra
en blanco
-0.01 ml
-0.5 ml
--
--0.01 ml
0.5 ml
--
--0.01 ml
-0.5 ml
PAGE 1 OF 2
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
Pipetear en la cubeta:
Agua destilada
Patrn (CAL)
Suero o plasma
R1
Reactivo
Blanco
Patrn
Muestra
0,02 ml
----1,0 ml
--0,02 ml
--1,0 ml
----0,02 ml
1,0 ml
Adultos
g/dl
g/l
6,4 - 8,3
64 - 83
LINEALIDAD
El mtodo es lineal hasta una concentracin de 13,0 g/dl
(130 g/l). Si la absorbancia de la muestra excede 0,7, diluir 1+1
con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado por 2.
CLCULO MANUAL
1. Cuando la medicin se lleva a cabo a Hg 546 nm, la
concentracin de protenas totales puede ser calculada de la
siguiente manera:
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Proteinas Totales con un
nivel aceptable de precisin se determin en 0,476 g/dl (4,76
g/l).
190 x Amuestra
19 x Amuestra
Anlisis (Intra)
2. Utilizando un patrn:
Amuestra
Conc. de Prot. Tot. =
PRECISION
Apatrn
x Conc. Patrn
NORMALIZACIN
El suero de calibracin de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en
el material de referencia NIST 927d de Proteinas Totales.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
Media (g/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
6.04
0.034
0.57
20
Nivel 2
4.48
0.024
0.53
20
Nivel 1
6.04
0.251
4.15
20
Nivel 2
4.48
0.135
3.01
20
Anlisis (Inter)
Media (g/dl)
DE
CV(%)
n
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.9665 X - 0.0589
y un coeficiente de correlacin r = 0,9850
Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 4,29
y 10,40 g/dl.
REFERENCIAS
1. Weichselbaum, T.E., Amer. J. Clin. Path., 16: 40.
2. Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd Edition. WB
Saunders Company. Philadelphia. PA pp 518-519 (1995)
INTERFERENCIA
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y se
encontr que no interfieren:
Bilirrubina
Intralipid
Triglicrido
Hemoglobina
Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001
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TRIGLICERIDOS
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
Mtodo GPO-PAP
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Trigliceridos en suero y
plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o en el
analizador RX monza.
Cat. No.
TR 210
6 x 15 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo enzima
CAL. Patrn
1 x 100 ml
6 x 15 ml
1 x 5.5 ml
TR 213
10 x 50 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo enzima
CAL. Patrn
10 x 50 ml
10 x 50 ml
1 x 5.5 ml
TR 212
5 x 100 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo enzima
CAL. Patrn
5 x 100 ml
5 x 100 ml
1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLINICO
Las medidas de Triglicridos se utilizan en el diagnstico y
tratamiento de enfermedades relacionadas con el metabolismo
lipdico (Hiperlipoproteinemias), diversos desordenes endocrinos
(neprosis diabetes mellitus) y obstruccin heptica (obstruccin
biliar extraheptica).
METODO COLORIMETRICO(1)
Los triglicridos se determinan tras hidrlisis enzimtica con
lipasas. El indicador es una quinoneimina formada a partir de
perxido de hidrgeno, 4-amino-fenazona y
4-clorofenol bajo la influencia cataltica de la peroxidasa.
PRINCIPIO(2,3,4)
Triglicridos + H2O
Glicerol + ATP
GK
Glicerol-3-fosfato + O2
lipasas
glicerol-3-fosfato + ADP
GPO
quinoneimina
+ HCl + 4H2O
PREPARACION DE LA MUESTRA(1)
Se puede utilizar el suero, plasma heparinizado o con EDTA.
Tomar la muestras despus de 12 a 14 horas en ayunas. Tras la
separacin las muestras son estables hasta 7 das cuando se
conservan entre +2 y +8C o 3 meses a -20C. Se debern evitar
los tubos recubiertos con Glicerol cerrado al vaco, as como el
proceso repetido de congelacin y descongelacin.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1a. Tampn
Tampn Pipes
4-clorofenol
Magnesio-iones
R1b. Reactivo enzima
4-aminofenazona
ATP
Lipasas
Glicerol-kinasa
Glicerol-3-fosfato oxidasa
Peroxidasa
CAL. Patrn
Concentraciones en la prueba
40 mmol/l, pH 7,6
5,5 mmol/l
17,5 mmol/l
0,5 mmol/l
1,0 mmol/l
150 U/ml
0,4 U/ml
1,5 U/ml
0,5 U/ml
Vedi inserto lotto-specifico
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PROCEDIMIENTO
Usando ddH2O realizar una nueva calibracin de ganancia nueva
en el modo de cubeta. Seleccione el TRI en la pantalla de
Ejecucin de prueba y llevar a cabo un blanco de agua segn las
instrucciones.
Pipetear en la Cubeta:
Reactivo Blanco S0
Patrn S1
Muestra
500 l
5 l
500 l
5 l
0.50 ml
ddH2O
Patrn
Muestra
Reagent R1
Patrn
l
Muestra
l
1000
10
1000
10
1000
Muestra
Patrn (CAL)
Reactivo (R1)
x 2,29 = mmol/l
Apatrn
Amuestra
NORMALIZACIN
Calibracin Randox suero Nivel 3 es atribuible a hacer referencia
a ID-GC/MS mtodo.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.
INTERFERENCIAS
El mtodo no se ve influenciado por concentraciones de
hemoglobina de hasta 6 g/l (600 mg/dl) o por concentraciones de
bilirrubina de hasta 500 mol/l (29 mg/dl).
VALORES DE REFERENCIA(5)
Se recomiendan los siguientes lmites superiores para la
determinacin del factor de riesgo de hipertrigliceridemia:
Sospecha de hipertrigliceridemia a partir de:
1,71 mmol/l (150 mg/dl)
Hipertrigliceridemia incrementada a partir de:
2,29 mmol/l (200 mg/dl)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
CARACTERSITCAS ESPECFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TCNICA
Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un
analizador RX monza en funcionamiento a 25C.
LINEALIDAD
El anlisis es lineal hasta una concentracin de triglicridos de
1172 mg/dl. Las muestras que presenten una concentracin
superior, deben ser diluidas 1 + 4 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el
resultado por 5.
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Trigliceridos con un nivel
aceptable de precisin se determin en 22.9 mg/dl.
x 200 = mg/dl
Apatrn
2. Utilizando factor:
Longitud de onda
Hg 546 nm
500 nm
Concentracin Triglicridos
mmol/l
mg/dl
11,95
8,47
1048
743
PAGE 2 OF 3
PRECISION
Anlisis (Intra)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Anlisis (Inter)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
110
3.19
2.90
20
Nivel 3
259
6.42
2.48
20
Nivel 2
110
5.85
5.32
20
Nivel 3
259
9.89
3.82
20
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.902 X + 16.1
y un coeficiente de correlacin r = 0,9965
Se analizaron 42 muestras de pacientes con valores de entre 45 y
417 mg/dl.
REFERENCIAS
1. Tietz N.W., Clinical Guide to Laboratory Tests, Second
Edition W.B. Saunders Company, Philadelphia, USA 554-556,
1990.
2. Jacobs N J, VanDemark, P.J., Arch Biochem Biophys 1960;
88: 250-255.
3. Koditschek L K, Umbreit, W W., J Bacteriol 1969; 98:
1063-1068.
4. Trinder P., Ann Clin Biochem 1969; 6: 24-27.
5. Study Group, European Atherosclerosis Society. Strategies
for the prevention of coronary heart disease: A policy
statement of the European Athersclerosis Society. (1987).
Eur. Heart. J. 8 : 77.
Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 3 OF 3
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la
boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se
requieren al manejar reactivos de laboratorio.
UA 233
10 x 50 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo Enzima
CAL. Patrn
1 x 100 ml
6 x 15 ml
1 x 5.5 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo Enzima
CAL Patrn
10 x 50 ml
10 x 50 ml
1 x 5.5 ml
METODO COLORIMETRICO(1)
El cido rico se convierte, catalizado por la uricasa, en
alantoina y perxido de hidrgeno. El perxido de hidrgeno
formado, catalizado por la peroxidasa, oxida el cido
3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfnico y la
4-aminofenazona para dar un compuesto de quinoneimina
rojo-violeta.
PRINCIPIO
uricasa
N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina.
Diluir la orina 1+10 con agua destilada.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1a. Tampn
Tampn HEPES
3,5 DCHBS
R1b. Reactivo Enzima
4-Aminofenazona
Peroxidasa
Uricasa
CAL Patrn
Concentraciones en la prueba
50 mmol/l, pH 7,0
4 mmol/l
0,25 mmol/l
1000 U/l
200 U/l
Especifico para cada lote
Reactivo Enzima
UA 230
Reconstituir un vial de R1b Reactivo enzimtico con
15 ml de Buffer R1a. Estable 21 das entre +2 y +8C
o 5 das entre +15 y +25C si se almacena protegido
de la luz
UA 233
Reconstituir el contenido de un vial de R1b Reactivo
enzimtico con una porcin de Buffer R1a y luego
transferir todo el contenido a la botella R1a,
enjuagando el frasco R1b varias veces.
Estable por 21 das entre +2 y +8C o 5 das entre
+15 y +25C si se almacena protegido de la luz.
CAL. Patrn
Listo para su uso. Etable hasta la fecha de caducidad si
se conserva entre +2 to +8C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
Reactivo Enzima
Patrn
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El uso de un patrn
Suero o plama
Amuestra
Conc. Acido Urico =
Reactivo Blanco S0
Patrn S1
Muestra
500 l
10 l
500 l
10 l
500 l
ddH2O
Patrn
Muestra
Reactivo
Muestra (l)
Patrn (l)
1000
20
1000
20
1000
patrn
conc.
(mol/l)
Apatrn
Amuestra
Pipetear en la cubeta:
Muestra
Patrn (CAL)
Reactivo (R1)
CALCULO MANUAL
patrn
conc.
(mg/dl)
Apatrn
Orina
Amuestra
Conc. Acido Urico =
patrn
conc.
patrn
conc.
(mol/l)
Apatrn
Amuestra
(mg/dl)
Apatrn
Utilizacin de un factor:
Conc. Acido Urico
Longitud de
onda:
520 nm
Hg 546 nm
(mol/l)
Suero/
Plasma
2029
3112
Orina
22306
34202
Suero/
Plasma
34.1
52.3
(mg/dl)
Orina
375
575
NORMALIZACIN
El suero de Calibracin nivel 3 tiene trazabilidad con el
material de referencia ID-GC/MS.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar
dos niveles distintos de controles cada da. Los valores
obtenidos debern encontrarse dentro del rango especificado.
Si los valores se encuentran fuera del rango y su repeticin
excluye error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de
luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
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VALORES NORMALES
Suero2:
Hombre
Mujer
Orina3:
202 - 416
3.4 - 7.0
mol/l
mg/dl
142 - 339
2.4 - 5.7
mol/l
mg/dl
1.5 - 4.5
250 - 750
mmol/24 horas
mg/24 horas
Nivel 2
5.81
0.022
0.38
20
Nivel 3
8.97
0.049
0.55
20
Nivel 2
5.81
0.328
5.64
20
Nivel 3
8.97
0.371
4.14
20
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0.933 X + 0.16
y un coeficiente de correlacin r = 0,9808
Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre
1.05 y 15.16 mg/dl.
ORINA
SENSIBILIDAD
La concentracin detectable mnima de Acido Urico con un
nivel aceptable de precisin se determin en 2.06 mg/dl.
LINEALIDAD
El mtodo es lineal para una concentracin de 26,7 mg/dl.
Para la muestras con concentraciones superiores diluir 1+1
con agua destilada y repetir la prueba. Multiplicar el resultado
por 2.
PRECISION
Anlisis (Intra)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
Nivel 2
14.1
0.250
1.77
20
Nivel 3
23.8
0.362
1.52
20
Nivel 2
14.1
0.557
3.95
20
Nivel 3
23.8
0.912
3.83
20
Anlisis (Inter)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
CORRELACIN
Este mtodo (Y) se compar con otro mtodo comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin
lineal:
Y = 0,9853 X + 0,669
y un coeficiente de correlacin r = 0,9879
Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre
3,28 y 21,58 mg/dl.
Anlisis (Inter)
Media (mg/dl)
DE
CV(%)
n
REFERENCIAS
1. Fossati, P., Prencipe, L., and Berti, G., Clin. Chem. (1980)
26/2, 227-231 .
2. Thefeld, W. et al. Dtsch. Med. Wschr. (1973) 98, 380.
3. Krieg, M. et al. J. Clin. Chem. Clin. Biochem.(1986) 24,
863.
Revisado 16 Sep 10 ck
Rev. 001
PAGE 3 OF 3
PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de Acido Urico en el suero,
plasma y orina. Este producto es adecuado para su utilizacin en
Manual.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo Enzima
Patrn
Reactivo Lquido
Mtodo Colorimtrico Enzimtico
MANUAL
No. Cat.
UA 1613
4 x 100 ml
4 x 100 ml
1 x 5.5 ml
METODO COLORIMETRICO
El cido rico se convierte, catalizado por la uricasa, en alantoina
y perxido de hidrgeno. El perxido de hidrgeno formado,
catalizado por la peroxidasa, oxida el cido
3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfnico y la
4-aminofenazona para dar un compuesto de quinoneimina
rojo-violeta.
PRINCIPIO(1,2)
Ac. rico + O2 + 2H2O
uricasa
N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina.
Diluir la orina 1+10 con agua destilada.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
R1.
Reactivo Enzima
Tampn HEPES
4-Aminofenazona
3,5 DCHBS
Uricasa
Peroxidasa
CAL Patrn
Concentraciones en la prueba
200 mmol/l, pH 7,55
0,25 mmol/l
4,0 mmol/l
200 U/l
1000 U/l
Especifico para cada lote
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
El R1 reactivo contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
Muestra l
Patrn l
1000
20
1000
20
1000
Muestra
Patrn (CAL)
Reactivo 1
Orina
Amuestra
Conc. Acido Urico =
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MANUAL UA 1613
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y
Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deber de analizar
dos niveles distintos de controles cada da. Los valores obtenidos
debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores
se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de
luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de
bacterias puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28
94422413.
INTERFERENCIA
Haemoglobin up to 100 mg/dl and Bilirubin up to 20 mg/dl do not
affect the determination.
VALORES NORMALES(3,4)
Suero:
Hombre
Mujer
Orina:
Revisado 28 June 10 lm
Rev. 001
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PROTEINAS TOTALES
(UP)
(ORINA)
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO
Para la determinacin cuantitativa in vitro de Proteinas Totales en
orina y C.S.F. Este producto es adecuado para un uso manual o
en el analizador RX monza.
No. Cat.
UP 1570
3 x 100 ml
3 x 100 ml
1 x 5.5 ml
UP 1571
6 x 100 ml
6 x 100 ml
1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
El anlisis de la Protena Total en la orina y el lquido cerebro
espinal es de gran valor en el diagnstico de enfermedades
renales y del sistema nervioso central. Las elevaciones en la
protena urinaria son muy comunes en las siguientes condiciones:
ejercicio enrgico, fiebre e hipotermia, nefrosis y nefropata
diabtica e infecciones de las vias urinarias. El anlisis de la
protena total en el lquido cerebro espinal ayuda en el
diagnstico de condiciones tales como meningitis, tumores CNS
y hemorragia cerebral.
PRINCIPIO(2)
El rojo de pirogalol se acompleja con proteinas en un medio
cido que contiene iones molibdato. El complejo azul resultante
presenta una absorcin mxima a 600nm. La densidad ptica a
600 nm es directamente proporcional a la concentracin de
proteinas totales de las muestras.
EXTRACCION Y PREPARACION DE LA
MUESTRA(3,4,10)
Orina : extraccin de 24 horas, las muestras de orina se pueden
conservan entre +2 y +8C hasta 24 horas o congeladas hasta 3
meses hasta que se analizen.
C.S.F.(Lquido cerebro espinal): Se debern de analizar durante la
hora siguiente a su extraccin
OBSERVACIONES
1. Aditivos: No es necesario el uso de conservantes.
2. La heparina puede causar interferencias si se utiliza en
muestras de LCR.
COMPOSICIN DEL REACTIVO
Componentes
R1.
Reactivo colorante
Rojo de pirogalol
Molibdato disdico
Acido succnico
Oxalato sdico
Benzoato sdico
CAL. Patrn
Protena (seroalbmina humana)
60 mol/l
40 mol/l
50 mmol/l
1 mmol/l
3 mmol/l
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar
las precauciones normales necesarias, que se requieren al
manejar reactivos de laboratorio.
El Patrn (CAL) contiene azida sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el rea afectada con agua abundante. En
caso de ingestin o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un mdico.
La azida sdica reacciona con el cobre y plomo de las tuberas, lo
que podra producir azidas explosivas. Cuando se tire este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formacin de estas azidas. Las superficies metlicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sdica deben ser lavadas
con hidrxido sdico al 10%.
Precaucin: Estndar
El material humano del que se deriva este producto ha sido
evaluado a nivel de donante para buscar anticuerpos del virus de
inmunodeficiencia humana (VIH 1, VIH 2), antgenos de superficie
de hepatitis B (HbsAg) y anticuerpos del virus de hepatitis C
(HCV), y result ser NO REACTIVO. Se han llevado a cabo los
mtodos aprobados por la FDA estadounidense para realizar
dichas pruebas.
No obstante, puesto que ningn mtodo puede garantizar
plenamente que est exento de agentes infecciosos, este material
y todas las muestras de pacientes deben manipularse teniendo en
cuenta su posibilidad de transmisin de enfermedades infecciosas
y deben tratarse en consecuencia.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad estn disponibles si se
desean.
Por favor, desechar todos los materiales Biolgicos y Qumicos
segn las pautes locales.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
ESTABILIDAD Y PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se
conservan entre +15 y +25C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo a color de la protena urinaria
Urinary Protein Standard
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
1. Material de pipetaje adecuado para suministrar 10 l,
50 l, 1 ml y 3 mls.
2. Cronmetro y bloque de calentamiento o bao de agua para
mantener +25C +37C.
3. Un espectrofotmetro con una capacidad de longitud de
onda de 600 nm.
4. NaCl al 0,9% para la dilucin de la muestra (si es necesario).
5. Controles de orina ensayados de Randox de nivel 2,
(N. cat. AU 2352) y nivel 3 (N. cat. AU 2353) o controles
de LCR de Randox de nivel 2 (CF 1500) y nivel 3 (CF 1501).
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600 nm
25/37C
Frente al blanco de reactivo
Patrn
Muestra
50 l
----3000 l
--50 l
--3000 l
----50 l
3000 l
Agua bidestilada
Patrn
Orina o C.S.F
Reactivo
Mtro Semi-micro
Reactivo blanco
Patrn
Muestra
20 l
----1000 l
--20 l
--1000 l
----20 l
1000 l
Agua bidestilada
Patrn
Orina o C.S.F
Reactivo
x Patrn
conc.
TV
1000
CALIBRACION
Se recomienda el patrn de Protena Urinaria Randox
(1 g/l) suministrado con este kit para la calibracin cuando se
analizen muestras de orina o CSF. La dilucin del patrn antes de
su uso no es necesaria. El patrn se prepara gravimtricamente
utilizando un grado de reactivo de albmina de suero humano. Se
recomienda la recalibracin para cada serie de muestras
analizadas.
CONTROL DE CALIDAD
Controles de orina ensayados de nivel 2 y nivel 3 o controles de
LCR de Randox de nivel 2 y nivel 3. Analice dos niveles distintos
de controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos
debern encontrarse dentro del rango especificado. Si los
valores se encuentran fuera del rango y su repeticin excluye
error, se debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y el origen de
luz.
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento de bacterias
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
(9)
INTERFERENCIA
Como en todos los mtodos de tincin, la subestimacin de
protena puede ocurrir en muestras de orina que contengan
cadenas ligeras de inmunoglobulina (p. ej. protena de Bence
Jones). Cuando se sospeche de dichas muestras, se deberan
analizar tambin mediante electroforesis.
VALORES NORMALES
Normalmente se recomienda que, siempre que sea possible, cada
laboratorio establezca su propio rango de valores esperados, o
intervalo de referencia para anlisis que se lleven a cabo
normalmente. Dado que tales valores pueden variar con la edad,
sexo, dieta, localidad geogrfica o instrumento.
Orina
C.S.F.
0.028
0.01
0.15
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PRECISIN
Precisin intraensayo
Media (g/dl)
DE
CV (%)
n
Nivel 1
0.065
0.002
2.93
20
Nivel 2
0.275
0.002
0.67
20
Nivel 1
0.065
0.003
5.34
20
Nivel 2
0.275
0.013
4.74
20
Interensayo
Media (g/dl)
DE
CV (%)
n
CORRELACIN
Se compar este mtodo (Y) con otro mtodo comercial
disponible y se obtuvo la siguiente ecuacin de regresin lineal:
Y = 0.9911 X + 0.0029
con un coeficiente de correlacin r = 0,9998
Se analizaron 46 muestras de pacientes con valores de entre
0,04 y 1,36 g/l.
REFERENCIAS
1. Pesce, A.J., Kaplan, L.A.: Methods in Clinical Chemistry
(1987).
2. Watanabe, N., Kamei, S., Ohkubo, A., Yamanaka, M.,
Ohsawa, S., Makino, K., and Tokuda, K., Clin. Chem., 1986;
32/8: 1551.
3. Laboratory Test Handbook, Jacobs et al. ed 2.
4. Orsonneau, J., Dowet, P., Massoubre, C., Lustenberger, P.,
and Bernard, S., Clin. Chem., 1989; 35/11: 2233.
5. Henry R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W., "Clinical
Chemistry, Principles & Techniques," Harper & Row, 2nd Ed.
1974.
6. Teitz, N.W., "Fundamentals of Clinical Chemistry", W.B.
Saunders Company, 1970 Philadelphia.
7. Young, D.S., et al. Clin. Chem., 21: 5. ID, 1975.
8. Friedman, R.B., et al. Clin. Chem., 26: 4. ID, 1980.
9. Tietz N.W., Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. W.B.
Saunders Co., 717-723, 1994.
10. Yang J.Y., Chien T.I., Lu J.Y. and Kao J.T.
Heparin Interference in the cerebrospinal fluid Protein Assay
Measured in the Pyrogallol Red Molybdate Complex. Clin.
Chim Acta 2009 Oct; 408 (1-2): 75-78.
Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001
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PARA SU USO
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Urea en suero, plasma y
orina. Este producto es adecuado para uso Manual.
No. Cat.
UR 107
5 x 100 ml
R1a.
R1b.
R2.
CAL.
Ureasa
Tampn Fosfato
Hipoclorito
Patrn
5 x 1 ml
5 x 100 ml
1 x 100 ml
1 x 5.5 ml
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
La solucin R1a contiene Azida Sdica. Evitar su ingestin o el
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar atencin
mdica inmediatamente.
METODO COLORIMETRICO(1,2)
PRINCIPIO
El mtodo se basa en la siguiente reaccin:ureasa
Urea + H2O
2NH3 + CO2
Concentraciones Iniciales
de las soluciones
5000 U/l
120 mmol/l, pH 7,0
63,4 mmol/l
5,00 mmol/l
1,5 mmol/l
18 mmol/l
750 mmol/l
Vedi inserto lotto-specifico
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MANUAL UR 107
PROCEDIMIENTO
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medicin:
REFERENCIAS
1. Fawcett, J.K., Scott, J.E., J. Clin. Path., 1960; 13: 156-159.
2. Patton, C.J., Crouch, S.R., Anal. Chem., 1977; 49: 464-469
Patrn
Muestra
Reactivo de
trabajo (R1)
LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta 33,3 mmol/l (200 mg/dl) en el suero o
plasma, y 700 mmol/l (4195 mg/dl) en la orina. Las muestras con
concentraciones ms elevadas se diluirn 1 + 1 con NaCl al 0,9%
y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.
Blanco de
Reactivo
Patrn
Muestrea
10 l
-
10 l
1000 l
1000 l
1000 l
200 l
200 l
200 l
Conc. de
patrn
(mmol/l)
Conc. de
patrn
(mg/dl)
Apatrn
Amuestra
Conc. de urea =
Apatrn
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
VALORES DE NORMALIDAD
Suero o plasma:
2,5 7,5 mmol/l (0,15 0,45 g/l)
Orina:
338 - 583 mmol/24h (20 - 35 g/24h)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geogrfica de la poblacin.
Revisado 30 Jan 09 bm
Rev. 001
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UREA
Mtodo Enzimtico Cintico
MANUAL
RX MONZA
PARA SU USO.
Para el anlisis cuantitativo in vitro de la Urea en suero, plasma y
orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el
analizador Rx Monza.
No. Cat.
UR 220
6 x 15 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo Enzima
CAL. Patrn
1 x 100 ml
6 x 15 ml
1 x 5.5 ml
UR 221
10 x 50 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo Enzima
CAL. Patrn
10 x 50 ml
10 x 50 ml
1 x 5.5 ml
UR 2364
6 x 500 ml
R1a. Tampn
R1b. Reactivo Enzima
CAL. Patrn
6 x 500 ml
6 x 500 ml
1 x 5.5 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1,2)
La urea se sintetiza en el hgado a partir del amonaco, como
resultado de la desaminacin de amino cidos. Esta biosntesis es
el mecanismo principal de eliminacin del exceso de nitrgeno
en el organismo. Las mediciones obtenidas en este anlisis se
utilizan en el diagnstico de anomalas metablicas y sobre todo
renales. Se debe destruir ms del 60% del rin antes de que los
niveles de urea en plasma aumenten significativamente. Este test
se utiliza ms frecuentemente junto con el de la creatinina srica
para niveles de protenas elevados (descompensacin cardaca,
reduccin de agua).
En 1913, Marshall1 introdujo un anlisis utilizando ureasa para la
determinacin de urea en la sangre. Se realizaba la valoracin del
amonaco liberado a partir de la urea por medicin de la ureasa.
Desde entonces se han utilizado muchas otras tcnicas para
medir el amonaco producido.
En 1965 Talke y Schubert2 crearon un procedimiento enzimtico
para la determinacin de urea, utilizando el sistema enzimtico
asociado de ureasa - GLDH (Glutamato deshidrogenasa).
METODO UV(1,2)
La urea se hidroliza en presencia de agua y ureasa para producir
amonaco y dixido de carbono. El amonaco producido en la
primera reaccin se combina con -oxoglutarato y NADH en
presencia de glutamato deshidrogenasa para producir glutamato
y NAD+.
Componentes
R1a. Tampn
Tampn Tris
R1b. Reactivo Enzima
Ureasa
GLDH
NADH
Adenosina-5-difosfato
-oxoglutarato
CAL. Patrn
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Slo para diagnstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
La solucin R1a y el Patrn contienen azida sdica. Evitar su
ingestin o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En
caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante
agua. En caso de contacto con los ojos o ingestin, buscar
atencin mdica inmediatamente.
El Azida Sdica reacciona con el plomo y cobre de las caeras,
formando cidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen
dichos reactivos, limpiar con grandes volmenes de agua para
evitar la formacin de cidos. Las superficies metlicas expuestas,
debern limpiarse con hidrxido de sodio al 10%.
Hojas Sanitarias y de Seguridad estn disponibles si se desean.
Los reactivos deben ser utilizados slo para los
propsitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
PRINCIPIO
ureasa
Urea + H2O
2 NH3 +
CO2
GLDH
2 L- glutamato +
2 NAD+ + 2 H2O
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MANUAL UR 220
Pipetear en la cubeta:
Reactivo
Blanco (l)
Patrn
Muestra
Reactivo
Patrn
--1000
Muestra (l)
10
-1000
-10
1000
CAL. Patrn
Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampn
Reactivo Enzima
Patrn
ddH2O
Patrn
Muestra
Reactivo
Reactivo Blanco S0
Patrn S1
Muestra
5 l
500 l
5 l
500 l
5 l
500 l
CLCULO MANUAL
Para calcular la concentracion de urea utilizar la siguiente
frmula:
AMuestra
Conc de Urea
=
x Concentracin del patrn
(mmol/l or mg/dl)
APatrn
Para convertir las unidades convencionales de SI4 unidades de
multiplicar las unidades convencionales por 0.166.
mg/dl urea x 0.166 = mmol/l urea
eg. 20 mg/dl Urea = 20 x 0.166 = 3.32 mmol/l
NORMALIZACIN
Suero Calibracin Randox Nivel 3 es atribuible a la urea material
de referencia NIST 909b.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel
3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de
controles al menos una vez al da. Los valores obtenidos debern
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repeticin excluye error, se
debern seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programacin del instrumento y la lmpara
2. Comprobar que todo material est limpio.
3. Comprobar el agua, contaminacin ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reaccin
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Tcnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
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MANUAL UR 220
ESPECIFICIDAD/LIMITACIONES(5,6)
Se analiz la posible interferencia de la Bilirrubina hasta 20 mg/dl
y se encontr que no interfiere. Las muestras altamente
lipmicas pueden causar errores de absorbancia, por lo que la
muestra se debe de diluir. Se analiz la posible interferencia de la
hemlisis hasta 500 mg/dl y se encontr que no interfiere.
Se debe tomar especial cuidado para prevenir la contaminacin
con amonaco de las muestras que se vayan a analizar para urea.
El amonaco existente en la atmsfera, en la habitacin, en el
agua o en el reactivo podra elevar los resultados del anlisis.
CORRELATION
This method (Y) was compared with another commercially
available method (X) and the following linear regression equation
obtained:
Y = 1.089 X - 0.446
and a correlation coefficient of r = 0.9935
43 patient samples were analyzed spanning the range 4.1 to 49
mmol/l.
ORINA
LINEARIDAD
El mtodo es lineal hasta 958 mmol / l (5757mg/dl). Diluir las
muestras con una concentracin ms alta a 1 +1 con 0,9% de
solucin de NaCl y repetir prueba. Multiplique el resultado por
2.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Urea con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 43.2 mmol/l.
REFERENCIAS
1. Marshall EK Jr: J Biol Chem 1913; 15:487.
2. Talke H; Schubert GE: Klin Wschr 1965; 43:174.
3. Tietz N. W., Textbook of Clinical Chemistry.
W.B. Saunders Co, 1987, 1254-1316.
4. Tietz N.N: Clinical Guide to Laboratory Tests Philadelphia.
W.B. Saunders Co, 1983 pg 494.
5. Young D.S., Pestaner, L.C., Gibbermann, V. Clin. Chem,
1975; 21: No.5.
6. Friedmann R.B, et al: Clin Chem 1980; 26 No.4.
7. Kerscher,L; Tieqenhorn,J; Methods of enzymatic Analysis,
H.U. Bergmeyer Ed., VCH
Verlagsgesellschaft, Weinheim, 1985 3rd Ed; Vd VII, p.453.
SENSIBILIDAD
La concentracin mnima detectable de Urea con un nivel
aceptable de precisin se ha determinado en 2,13 mmol/l.
PRECISION
Anlisis (Intra)
Media (mmol/l)
DE
CV(%)
n
Nivel 1
6.87
0.312
4.55
20
Nivel 2
19.5
0.515
2.64
20
Nivel 1
6.87
0.37
5.41
20
Nivel 2
19.5
1.18
6.02
20
Anlisis (Inter)
Media (mmol/l)
DE
CV(%)
n
Revisado 16 Sep 10 bm
Rev. 001
PAGE 3 OF 3