Universidad Nacional San Luis Gonzaga De Ica

Facultad De Obstetricia

PRCTICA DE LABORATORIO N 04: ACCION DE LA

LIPASA PANCREATICA EN LA HIDROLISIS DE LAS
GRASAS

ASIGNATURA:
BIOQUMICA

DOCENTE:
CHACALTANA RAMOS, LUZ
PARI OLARTE, BERTHA

CICLO:
III

SECCIN:
B

ALUMNAS:
AYBAR HUAMN, MARA
BAUTISTA HUAMANI DEYBI
BERNEDO BERNEDO, ELENY
CARRASCO HUAMN, ANGELICA
CARTOLN IPARRAGUIRRE, LUZ VICTORIA
PAREDES QUISPE, MIRELLA
SNCHEZ RAMOS, ANIE
YANCE LA ROSA, STEPHANY

ICA - PERU
2015
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ACCIN DE LA LIPASA PANCREATICA EN LA HIDROLISIS DE

LAS GRASAS

I.

OBJETIVOS:

Demostrar experimentalmente la hidrolisis enzimtica de los triglicridos.

Realizaremos reacciones qumicas y pruebas caractersticas para identificar
la presencia de una o varias biomolculas en una mezcla para cuantificar

alguna de ellas.
Observar cmo es que acta y que efectos trae las sales biliares sobre el

aceite.
Determinar los cidos grasos liberados por accin de la pancreatina.
Aplicacin y manejo adecuado de tcnicas de laboratorio para la
identificacin, aislamiento de enzimas y determinacin de la actividad
enzimtica.
Entender de forma prctica una parte importante del proceso digestivo que

tiene lugar en el intestino delgado en el cual la lipasa pancretica consigue

la hidrolisis de triacilgliceros a cidos grasos.

II.

MARCO TEORICO

Emulsin de aceite de pepita

Es una mezcla de dos lquidos inmiscibles de manera ms o menos homognea.
Un lquido (la fase dispersa) es dispersado en otro (la fase continua o fase
dispersante). Muchas emulsiones son de aceite/agua, con grasas alimenticias. El
proceso en el que se preparan las emulsiones se llama emulsificacin.
Las emulsiones son parte de una clase ms genrica de sistemas de dos fases de
materia llamada coloides.
A pesar que el trmino coloide y emulsin son usados a veces de manera
intercambiable, las emulsiones tienden a implicar que tanto la fase dispersa como
la continua son lquidos.
Buffer:
Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es la mezcla en
concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base conjugada, es
decir, sales hidrolticamente activas.
Tienen la propiedad de mantener estable el pH de una disolucin frente a la
adicin de cantidades relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Este
hecho es de vital importancia, ya que meramente con un leve cambio en la
concentracin de hidrogeniones en la clula se puede producir un paro en la
actividad de las enzimas.

Sales biliares:
Son las sales de los cidos biliares, pueden ser sales sdicas o potsicas.
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Las sales biliares son la forma en que el cuerpo guarda los cidos biliares en la
vescula biliar y son secretados al intestino para la digestin de lpidos.
Los lpidos son apolares y necesitan de las sales biliares para estabilizar la
emulsin y para facilitar el contacto entre enzima y sustrato, lo que permite la
metabolizacin de los lpidos y su absorcin en la pared intestinal.
Sales biliares emulsionan las grasas y vitaminas liposolubles (A, E y D), facilitando
su absorcin intestinal.
Pancreatina
La pancreatina es una mezcla de varias enzimas digestivas producidas por las
clulas exocrinas del pncreas. Esta mezcla se utiliza para tratar condiciones en
las que secreciones pancreticas son deficientes, tales como pancreatectoma
quirrgica, pancreatitis y fibrosis qustica. La pancreatina es a veces llamado
"cido pancretico", a pesar de que no es ni una sola sustancia qumica ni un
cido.
La pancreatina contiene el pncreas enzimas de tripsina, amilasa y lipasa. La
tripsina se encuentra en pancreatina funciona para hidrolizar las protenas en
oligopptidos; amilasa hidroliza almidones en oligosacridos y el disacrido
maltosa; y lipasa hidroliza los triglicridos en cidos grasos y gliceroles.
La pancreatina es un suplemento de la enzima eficaz para la sustitucin de
enzimas pancreticas que faltan, y ayuda en la digestin de los alimentos en los
casos de insuficiencia pancretica.

III.

INSTRUMENTOS

TUBOS DE ENSAYO
Utilizamos para contener y combinar todos los reactivos y luego
ser llevados a bao maria

PIPETAS
Mediante la absorcin mediremos 2ml de aceite de pepita en
cada tubo, agregar buffer con ph8 en cada tubo de ensayo, las
sales biliares con sus respectivas medida para cada tubo; y
tambin para agregar la pancreatina

REJILLAS
Para colocar los tubos de ensayo, y para sostener los tubos
de ensayo cuando son llevados a bao maria

MATRAZ
Recipiente donde colocamos el Aceite de pepita, las sales
biliares y la pancreatina

BAO MARIA
Se lleva los 4 tubos de ensayo a bao maria a 37 por 20 a 30
min

IV.

PROCEDIMIENTO:
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1. Rotular cuatro tubos de ensayo.

2. Colocar 2 ml de aceite de pepita en cada tubo.

3. Agregar buffer con pH 8:

1er tubo: 8 ml
2do tubo: 6 ml
3er tubo: 3 ml
4to tubo: 1 ml

4. Agregar sales biliares:

2do tubo: 2 ml
3er tubo: 1 ml
4to tubo: 2 ml

5. Agitar vigorosamente en un lapso de 2 a 3 minutos.

6. Agregar la pancreatina:
3er tubo: 5 ml
4to tubo: 5 ml

7. Agitar los 4 tubos de 2 a 3 minutos.

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8. Llevar al bao Mara 37C por 20 o 30 minutos.

9. Titulamos con NaOH 1N, gota a gota hasta que aparezca un color rosa
plido.
1er tubo: 4 gotas
2do tubo: 7 gotas
3er tubo: 6 gotas
4to tubo: 6 gotas

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10. Agitar cada tubo y controlar el tiempo que tarda en formar la capa de aceite.
1er tubo: 5 s
2do tubo: 20 s
3er tubo: 33 s
4to tubo: 58 s

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RESULTADOS:

1. Interpretar la solubilidad de los tubos 1 y 2 comparando el grosor de la

capa de aceite y el tiempo en que demora en forma dicha capa.

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El color de la capa del tubo 1 es rosado, a comparacin del tubo 2 que es un

rosa plido, esto se debe a que en el tubo 1 solo contiene aceite de pepita
neutralizado que es una mezcla de dos lquidos en diferentes fases; y El buffer
mantiene estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades
relativamente pequeas de cidos o bases fuertes; en cambio en el tubo 2
contiene aceite de pepita, buffer, sales biliares, lo que hace su diferencia es
que, las Sales biliares emulsionan las grasas.
Producto de la diferencia de reactivos hace que la capa de aceite demore:
1er tubo: 5 s
2do tubo: 20 s

2. Los tubos 1,2,3,4 titular con NaOH 1N, hasta que aparezca un color
rosa plido (indique cuantas gotas gasto en cada tubo Por qu?)

3. Interprete los resultados de cada tubo.

4. Explique el fundamento del mtodo, importancia.

Son el mtodo de emulsin y de titulacin
Es importante porque la con la Titulacin hemos podido determinar la cantidad de
pancreatina que se encuentra en el tubo 3 y 4
La titulacin o valoracin de soluciones tiene como principal objetivo determinar la
concentracin de una solucin cida o bsica desconocida. Denominada solucin

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analizada. Esto se logra a travs de la adicin de pequeos volmenes de una

solucin cida o bsica de concentracin conocida - la solucin valorada
La emulsin la hemos utilizado para mezclar el aceite de pepita con el buffer con
las sales y la pancreatina al mezclarlo todo para luego llevarlo a bao mara
La emulsin es un proceso que consiste en la mezcla de dos lquidos diferentes
que no se puedan mezclar, es decir, que sean inmiscibles entre s. Uno de los
lquidos se encontrar formando la fase, conocida con el nombre de dispersa, que
se encontrar constituida por el lquido que ser dispersado dentro del otro lquido
que conforma la mezcla, el cual ser el formador de la fase conocida como,
continua, o tambin, dispersante.

5. Qu funcin cumple las sales biliares?

Las sales biliares actan hasta cierto punto como un detergente, ayudando a
emulsionar las grasas y participan as en su absorcin en el intestino delgado, por
lo que tienen un papel importante en la absorcin de vitaminas D, E, K y A que se
encuentra en la grasa.
Adems de la funcin digestiva sirven para la eliminacin de bilirrubina, un
producto de degradacin de la hemoglobina, que da el color tpico, tambin
neutralizan el exceso de acidez en el estmago antes de alcanzar el leon, la
seccin final del intestino delgado.
Importante para la salud es tambin el efecto bactericida de microbios nocivos,
otra funcin de las sales biliares.

6. Qu papel desempea la lipasa pancretica?

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L a lipasa pancretica es una enzima que se produce en el pncreas y se secreta

en el intestino delgado.
Ayuda a descomponer las grasas (lpidos) que comemos para convertirlas
en cidos grasos y glicerol.
Fracciona las grasas (triglicridos) a componentes ms simples ( cidos
grasos)que pueden absorberse en el intestino delgado
El metabolizar las grasas proporciona energa durante las horas de ayuno.
La lipasa se libera en el torrente sanguneo cuando las clulas
pancreticas estn daadas.

V.

DATOS Y OBSERVACIONES

Que el buffer es una sustancia de sales hidroliticamente activas que se

disuelven en el agua
Que en el tubo dos a comparacin de los dems tubos el aceite de pepita
neutralizado se visualiz abajo a comparacin de los dems q

se

presentaba arriba
Cuando realizamos la titulacin era necesario agitar las soluciones para as
poder notar la diferencia en la formacin de la capa de aceite y tambin
analizbamos el tiempo.

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VI. CONCLUSIONES

Se pudo comprobar la accin de la pancreatina y las sales biliares que en

conjunto son capaces de hidrolizar a los cidos grasos.
Que las sales biliares participan en la digestin y absorcin de los lpidos
Los lpidos son compuestos de gran importancia energtica ya que
constituyen la reserva calrica, que se acumulan en el tejido adiposo.

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VII.

ANEXOS

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