PRACTICA N2

DETERMINACIN DE CALCIO EN LECHE MEDIANTE GRAVIMETRA DE PRECIPITACIN

I.

INTRODUCCION.
El calcio es el quinto elemento en abundancia, en la corteza terrestre (3.6% en peso).
No se encuentra en forma metlica sino formando diversas sales minerales, alguna de
ellas bastante en solubles como el carbonato, el sulfato o el oxalato. El calcio es un
elemento esencial para la vida humana ; tal es as que en una persona adulta entre un
1.5 y un 2 % de su peso es calcio el calcio corporal se encuentra casi en un 90% en
huesos y dientes adems, en el organismo humano el calcio participa en nuestros
procesos como la coagulacin sangunea, la permeabilidad de las membranas, como
regulador nervioso y neuromuscular modulando la contraccin muscular (incluida la
frecuencia cardiaca), la adsorcin y secrecin intestinal y la liberacin de hormonas.
Se puede encontrar calcio en una gran variedad de alimentos. Los productos lcteos,
los frutos secos y semillas (almendras, semillas de ssamo), las sardinas y las
anchoas, los vegetales de hoja verde (espinaca, acelga, brcoli) son buenas fuentes
de calcio. La mayora de las harinas estn fortificadas con carbonato de calcio, de
modo que los productos de panadera pueden ser una buena fuente de calcio.
Finalmente, el agua dura tambin aporta calcio
La leche es la fuente principal de calcio en la dieta (un vaso aporta unos 250 mg)
siendo, adems, la materia principal para la elaboracin de diversos derivados lcteos
ricos en calcio como el queso o el yogur. Con un contenido aproximado de un 87% de
agua, la leche es una mezcla homognea de diferentes sustancias, unas en emulsin,
como las grasas, y, otras, en disolucin como la lactosa, las vitaminas hidrosolubles,
protenas, sales, etc.
Existen diferentes tcnicas para la determinacin de calcio en alimentos, tales como la
gravimetra, las volumetras redox y deformacin de complejos, la cromatografa inica
y la espectrofotometra de absorcin atmica, la potenciometra directa, etc.

II.

FUNDAMENTO TERICO
RESUMEN El Calcio es un mineral esencial para la vida humana y en una persona
adulta entre el 1.5 % y el 2% del peso corporal es calcio. El calcio corporal se
concentra casi en un 90% en huesos y dientes adems de participar en diversos
procesos fundamentales para la vida. La leche es la fuente principal de calcio en la
dieta siendo adems la materia prima principal en la elaboracin de diversos derivados
lcteos ricos en calcio. Debido a que en la Norma Salvadorea del CONACYT para
leche pasteurizada fluida NSO 67.01.02:96 y para leche en polvo NSO 67.01.05:95, no
existen especificaciones respecto a la cantidad de calcio, la presente investigacin tuvo

por objeto verificar la cantidad de calcio que el fabricante declara en la etiqueta del
producto de las diferentes marcas de leche fluida y en polvo y comparar esta cantidad
con el valor que el Instituto de Nutricin de Centroamrica y Panam (INCAP), estima
por cada 100 g de leche fluida y en polvo. La investigacin se realiz con seis marcas
de leches de mayor demanda que se comercializan en el supermercado Wallmart,
municipio de Antiguo Cuscatln, Departamento de La Libertad, El Salvador,
seleccionadas mediante una entrevista dirigida al Gerente de Mercadeo. La
determinacin de calcio se llev a cabo mediante un anlisis gravimtrico de
precipitacin realizado por triplicado en cada muestra, donde previamente se separ el
calcio del resto de los componentes, posteriormente, se procedi a la precipitacin del
calcio en forma de oxalato de calcio por reaccin con cido oxlico. Este producto se
pes, despus de su filtracin, lavado, secado y calcinado, de manera que a partir del
peso obtenido, y conociendo la estequiometria de la reaccin, fue posible estimar el
contenido de calcio en las muestras de leche, el cual fue comparado segn lo rotulado
en la etiqueta del producto por el fabricante y con las tablas que el INCAP reporta por
cada 100 gramos. La parte experimental se realiz en el laboratorio de la Facultad de
Qumica y Farmacia de la Universidad de El Salvador, durante el ao 2011, y dentro de
ella se controlaron diferentes variables como la temperatura, la velocidad de agitacin,
el pH, la velocidad de incorporacin del agente precipitante etc., pues el mtodo es
sensible a estos tipos de variables. Para todas las muestras de leche se obtuvo una
cantidad de calcio menor a la etiquetada en el empaque primario y a los valores de
referencia que reporta el INCAP para 100 gramos de leche; siendo la leche Anchor y
foremost en las que se obtuvieron valores mas cercanos y las marcas Salud y
Australian en las que se obtuvieron valores mas alejados, al compararlos con la
etiqueta del empaque y con los valores de referencia que reporta el INCAP para cada
100 gramos. Las variables a las que el mtodo es sensible tales como la velocidad y
tiempo de agitacin en el tratamiento de las muestras, variacin de temperatura,
cantidad de agente precipitante agregado, tiempo de calcinacin, el pH y el equipo de
filtracin no adecuado pueden ser el origen de las diferencias entre los valores
obtenidos, al compararlos con los valores etiquetados y los reportados en la tabla del
INCAP, pues son estas variables las que determinan el tamao, forma y cantidad del
precipitado. Por lo tanto se recomienda verificar los valores de calcio presentes en
leches fluidas pasteurizadas y en polvo para posteriormente incluirlos dentro de las
Normativas NSO 67.01.02:96 (para leches fluidas pasteurizadas) y NSO 67.01.05:95
(para leches en polvo) por las autoridades competentes y adems validar este mtodo
analtico utilizando un mayor nmero de muestras y de repeticiones.
SONIA LARIOS (TESIS DE LICENCIATURA 2011)

Los mtodos gravimtricos de anlisis son aquellas que se basan en la medida de la

masa de algn componente de la muestra o sustancia derivada. Los mas utilizados son
utilizados los mtodos gravimtricos de precipitacin, en los cuales el analito se
convierte en un precipitado muy poco soluble que se filtra, se lava y se convierte,
mediante un tratamiento trmico adecuado, en un producto de composicin conocido
que se pesa utilizando una balanza analtica.
Idealmente, un agente precipitante gravimtrico debe reaccionar selectivamente con el
analito para dar un precipitado cristalino, fcilmente filtrable y lavable, de solubilidad
baja, que no reaccione con los componentes atmosfricos y que tenga una
composicin conocida. Entre los factores que favorece la formacin de precipitados
cristalinos cabe destacar:
El empleo de disoluciones diluidas.
La adicion lenta y con agitacin del reactivo precipitante.
La precipitacin en caliente
El ajuste de pH del medio de precipitacin cuando las solubilidad del precipitado
dependa de este.
Sin embargo en las condiciones normales de un laboratorio, un lugar de precipitados cristalinos
muchas veces se forman solidos coloidales que no se pueden utilizar para el anlisis gravimtrico
porque sus partculas son demasiados pequeas para poder ser filtradas fcilmente. Para poder
conseguir precipitados ms puros y fcilmente filtrables se puede calentar el precipitado durante
una o ms horas, en la misma disolucin en la que se form, proceso denominado pectizacin.
Despus de la filtracin, el precipitado se lava, preferentemente con una disolucin que contenga
un electrolito, que se elimine fcilmente al calentar el precipitado, y se calienta hasta peso
constante. Algunos precipitados deben calcinarse para descomponer en slido y formar un
compuesto de composicin conocida, que ser la especie pesada. La temperatura elegida, en cada
caso depende del precipitado formado. En esta prctica la determinacin de calcio en una muestra
de leche se llevara a cabo mediante un anlisis gravimtrico de precipitacin. Previamente, se
separara el calcio contenido en la leche del resto de los componentes para evitar posibles
interferencias. Posteriormente se proceder a la precipitacin del calcio en forma de oxalato de
calcio monohidratado por reaccin de oxalato de sodio. Este producto se pesa, despus de su
filtracin, lavado y secado,

de manera que a partir del peso obtenido, y, conociendo la

estequiometria de la reaccin, ser posible estimar el contenido en calcio de la leche.

Al alcalinizar con amonaco, por encima de pH 4, una solucin cida que contenga calcio y cido
oxlico (o algn oxalato soluble como el de sodio o de amonio), se produce la precipitacin del
calcio en forma de oxalato clcico monohidratado, que es un polvo blanco, fino y poco soluble en
agua fra, pero algo soluble en agua caliente, segn la reaccin:
Ca2+(aq) + C2O42-(aq) CaC2O4H2O

En el caso de la determinacin de calcio en leche, en primer lugar debemos de separar el calcio

presente del resto de componentes de la muestra. Para ello se trata una muestra de la misma con
cido tricloroactico y se agita la disolucin. Se observa la aparicin de 2 fases, una fase lquida, el
suero, que contiene el calcio, y otra fase, con aspecto de slido pastoso, que contiene el resto de
los constituyentes de la leche (bsicamente protenas y grasas).
Se separan ambas fases empleando un embudo de vidrio y filtro de pliegues. El precipitado
obtenido se lava con agua destilada, recogindose las aguas de lavado junto con el filtrado, que
contendr el calcio originalmente presente.
El lquido procedente del filtrado anterior se diluye con agua destilada en un vaso de precipitados.
Se introduce el vaso en un bao termostatizado (60-80 C) y se deja que alcance la temperatura
del mismo. Se adiciona disolucin de Na2C2O4 y, a continuacin, se adiciona lentamente una
disolucin diluida de amonaco, observndose la aparicin de un precipitado de color blanco. La
adicin de amonaco debe continuar hasta alcanzar un pH entre 8-9. Se comprueba que ya no
precipita ms calcio mediante la adicin de un poco ms de oxalato de sodio.
Se agita y a continuacin se mantiene la disolucin durante unos 30 minutos en el bao
termostatizado, aadiendo, de vez en cuando, unos mililitros de la disolucin de amonaco con
objeto de reponer las prdidas como consecuencia de la evaporacin. Transcurridos unos 30
minutos de digestin del precipitado, se enfra la suspensin en un bao de hielo durante unos 15
minutos y se procede al filtrado por succin a vaco muy suave, utilizando placas filtrantes
previamente pesadas. Se recoge todo el precipitado, y se lava con abundante agua destilada para
eliminar posibles impurezas que acompaen al precipitado.
Una vez lavado el precipitado, se lleva la placa filtrante (con la ayuda de unas pinzas) a una estufa
a 110-120 C, y se seca el precipitado obtenido de CaC2O4.H2O durante una hora. A continuacin
se introduce la placa filtrante en el desecador hasta que alcance la temperatura ambiente y se
pesa. Repetir el proceso hasta peso constante.
El filtrado tambin puede realizarse sobre papel sin cenizas, y con la ayuda de un crisol de
porcelana previamente tarado, puede calentarse a la llama y calcinarlo a una temperatura de 500
C durante 1 h. Se enfra el crisol y su contenido en un desecador y se pesa. En este caso el
precipitado pesado es carbonato clcico. SONIA LARIOS (TESIS DE LICENCIATURA 2011)

III.

MATERIALES Y METODOS
Aparatos y materiales
Embudo de vidrio
Quitaste de 500mL
Matraces aforados de 100mL
Papel indicador de pH

Papel de filtro
Pinzas termo gravimtricas
Pipetas de 50mL
Placas filtrantes de n4
Probeta de 50mL
Vasos de precipitados de 250 y 500mL
Vidrio de reloj o pesa sustancias
Bao termostato
Bao de hielo
Desecador
Estufa
Sistema de succin al vaco
Reactivos utilizados
cido tricloroacetico
Amoniaco
Oxalato de sodio
Determinacin experimental
1. PESADA DE LA PLACA FILTRANTE.
Se toma 3 placas filtrantes de vidrio de n4, asegurndose que estn bien limpias, se etiquetan y
se guardan dentro de una estufa a 110C durante unos 30 min. Transcurrido este tiempo, se sacan
las placas cogindolas con una pinza termogravimetrica y se coloca dentro de un desecador
durante unos 20 min. A continuacin, se proceder a la pesada de las 3 placas filtrantes en balanza
analtica. Una vez obtenido el peso de estas, se mantendr en el desecador hasta su empleo.

2. EXTRACCION DEL CALCIO EN LA MUESTRA DE LECHE

Se toma alcuotas (3 veces) de la muestra de leche, de 50mL y se transfiere a vasos precipitados
de 500mL. Se adiciona 50mL de cido tricloro actico al 24% (p/v) y se agita la disolucin para
separar el calcio del resto de los componentes de la leche. Se observa la aparicin de 2 fases, una
fase liquida, y el suero, que contiene el calcio y la otra fase con aspecto ha solido pastoso que
contiene el resto de los constituyentes de la leche, fundamentalmente protenas y grasas. La
separacin de ambas fases se realiza empleando un embudo de vidrio y filtro de pliegues, para
aumentar la velocidad del filtrado. Se lava el precipitado con agua destilada, recogindose las
aguas del lavado, junto con el filtrado en un vaso de precipitados de 500mL.
3. PRECIPITACION DEL CALCIO EN EL SUERO
Sobre el lquido proceden del filtrado anterior se adiciona agua destilada hasta completar,
aproximadamente, la mitad del vaso del precipitados. Se introduce el vaso en un bao termostato
con una temperatura comprendida entre 60-80C. Se deja durante unos 15 min para que alcance la
temperatura del bao y se adicionan 30mL de disolucin de exalato de sodio Na2C2O4 0.1M y, a
continuacin, se adiciona lentamente una disolucin de amoniaco 2 M, observndose la aparicin

de un precipitado de color blanco. La adisin de la disolucin de amoniaco debe continuar hasta

alcanzar un pH entre 8-9 (realice la comprobacin con el papel indicador de pH). Compruebe que
ya no precipite ms calcio, mediante la adisin de 1 mL ms de oxalato de sodio.
4. DIGESTION, FILTRADO Y LAVADO DEL PRECIPITADO
Se agita y se mantiene la disolucin durante unos 30 min en el bao termosttico, aadiendo,
debes en cuando, unos mililitros de la disolucin de amoniaco 2 M (con el objeto de reponer las
prdidas de NH3 como consecuencia de la evaporacin, de esta manera mantenemos el pH entre
8-9). Transcurridos los 30 min de digestin del precipitado, se enfra la suspensin en un bao de
hielo durante unos 15 min y se procede al filtrado mediante un sistema de succin a vaco muy
suave, utilizando las placas filtrantes previamente pesadas. Se recoge todo el precipitado
ayudndose con una varilla de vidrio. Se debe lavar con abundante agua destilada para eliminar
posibles impurezas que acompaen al precipitado.
5. SECADO Y PESADO DEL PRECIPITADO
Una vez lavado el precipitado, se llevara la placa filtrante a una estufa a 110-120C, con la ayuda
de pinzas termo gravimtricas y se secara el precipitado de CaC2O4 H20 obtenido durante,
aproximadamente, 1 hora. Trancurrido dicho tiempo, se introducir la placa filtrante en el desecador
hasta que llegue a temperatura ambiente y se pesa