1.

INTRODUCCION
Haemophilus es un grupo de bacterias que pertenecen a la clase Gammaproteobaceria,
orden Pasteurellales y familia Pasteurellaceae.
Los miembros de esta familia son bacilos gramnegativos, pequeos (0,2 a 0,3 x 1 a 2 |
xm) no esporulados, inmviles y aerobios o anaerobios facultativos. La mayora tiene
unas necesidades de crecimiento exigentes y precisas de medios enriquecidos para su
aislamiento. Con forma de cocobacilos pero muy pleomrficas. Aunque la forma tpica
es la cocobacilar, se consideran pleomrficas porque realmente pueden variar
drsticamente su morfologa.

Tinciones de Gram de Haemophilus influenzae. A) Pequeos cocobacilos observados en el

esputo de un paciente aquejado de neumona. B) Formas pleomorfas delgadas observadas en un
nio de 1 ao no vacunado de frica con una meningitis abrumadora.

2. ESPECIES
Las especies pertenecientes al gnero Haemophilus constituyen el patgeno humano
ms frecuente y relevante.
Especies de Haemophilus que se asocian a enfermedades en el ser humano:
Especies
H. influenzae

Enfermedades primarias
Neumona, sinusitis,

Frecuencia
Frecuente

otitis, meningitis,
epiglotitis, celulitis,

H. aegyptius
H. ducreyi
H. aphrophilus

bacteriemia
Conjuntivitis
Chancroide
Endocarditis, infecciones

Infrecuente
Infrecuente (en EE.UU.)
Infrecuente

H. parainfluenzae

oportunistas
Bacteriemia,

Rara

endocarditis, infecciones

H. haemolyticus
H. parahaemolyticus
H. paraphrophilus
H. segnis

oportunistas
Infecciones oportunistas
Infecciones oportunistas
Infecciones oportunistas
Infecciones oportunistas

Rara
Rara
Rara
Rara

3. FISIOLOGIA Y ESTRUCTURA
La mayora de las especies de Haemophilus necesita medios complementados con los
siguientes factores de crecimiento:
1) Hemina (tambin conocido como factor X por factor desconocido)
2) nucletido de nicotinamida y adenina (NAD, tambin llamado factor V por
vitamina)
3) Ambos. Aunque estos dos factores estn presentes en los medios enriquecidos con
sangre, el agar sangre de carnero se debe calentar ligeramente con el fin de destruir
los inhibidores del factor V. Por este motivo, el agar sangre calentado (chocolate)
se usa in vitro para el aislamiento de H. influenzae.
La estructura de la pared celular de Haemophilus es la tpica de otros bacilos
gramnegativos. La pared celular posee un lipopolisacrido con actividad de endotoxina,
y la membrana externa presenta protenas especficas de cepa y especficas de
especie. El anlisis de estas protenas especficas de cepa resulta de utilidad en los
estudios epidemiolgicos. La superficie de muchas de las cepas de H. influenzae est
recubierta de una cpsula de polisacrido, y se han identificado seis serotipos
antignicos (de la a a la f). Con anterioridad a la introduccin de la vacuna HIB, el
serotipo b de H. influenzae era el responsable de ms del 95% de las infecciones
invasivas por Haemophilus. Casi todas las enfermedades causadas por este serotipo
han desaparecido tras la introduccin de esta vacuna. En la actualidad, los serotipos c
y f y los serotipos no encapsulados de H. influenzae producen la mayor parte de las
infecciones por H. influenzae.
Adems de la diferenciacin serolgica de H. influenzae, la especie se subdivide en
ocho biotipos (I hasta VIII) de acuerdo con las tres reacciones bioqumicas
siguientes: produccin de indol, actividad ureasa y actividad ornitina decarboxilasa. La
separacin de estos biotipos es til con fines epidemiolgicos.
Por ltimo, H. influenzae se ha subdividido en biogrupos con utilidad clnica. H.
influenzae biogrupo aegypticus es importante debido a que produce la fiebre
purprica brasilea.
Aunque el biogrupo aegyptius y H. influenzae biotipo III presentan unos perfiles
bioqumicos idnticos, se pueden distinguir por las siguientes caractersticas: 1) la
naturaleza de la enfermedad clnica; 2) sus propiedades de crecimiento in vitro, y 3)
los perfiles proteicos de la membrana externa.
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En resumen, H. influenzae se subdivide del siguiente modo:

1) serotipos desde la a hasta la f (determinados por la presencia de antgenos
capsulares; el tipo b es el ms importante)
2) biotipos desde I hasta VIII (determinados por sus propiedades bioqumicas)
3) biogrupos (el biogrupo aegypticus es el ms relevante desde el punto de vista
clnico).

4. PATOGENIA E INMUNIDAD
Las especies pertenecientes al gnero Haemophilus, en especial Haemophilus
parainfluenzae y las cepas de H. influenzae no encapsulado, colonizan el tracto
respiratorio superior en prcticamente todos los individuos durante los primeros
meses de vida. Estos microorganismos se pueden diseminar localmente y producir
enfermedad en los odos (otitis media), los senos (sinusitis) y el tracto respiratorio
inferior (bronquitis, neumona). Sin embargo, la enfermedad diseminada es
relativamente infrecuente. Por el contrario, H. influenzae encapsulado
(principalmente el serotipo b [biotipo I]) aparece de forma infrecuente o en un
nmero muy bajo en el tracto respiratorio superior, si bien constituye una causa
frecuente de enfermedad respiratoria en nios no vacunados (p. ej., meningitis,
epiglotitis [laringitis obstructiva], celulitis). Los pili y las adhesinas no relacionadas
con los pili intervienen en la colonizacin de la orofaringe por H. influenzae. Los
componentes de la pared celular bacteriana (lipopolisacridos y glucopptidos de bajo
peso molecular) alteran la funcin ciliar y ocasionan daos en el epitelio respiratorio.
A continuacin, las bacterias se pueden traslocar a travs de clulas epiteliales y
endoteliales para ingresar en el torrente circulatorio. En ausencia de anticuerpos
opsonizantes especficos dirigidos contra la cpsula polisacardica, se puede producir

una bacteriemia con un gran nmero de bacterias y diseminacin a las meninges u

otros focos distales.
El principal factor de virulencia de H. influenzae tipo b es la cpsula antifagoctica
polisacardica, la cual contiene ribosa, ribitol y fosfato (conocido normalmente como
fosfato de polirribitol [PRP]). Los anticuerpos frente a la cpsula suponen un estmulo
importante de la fagocitosis bacteriana y la actividad bactericida mediada por el
complemento. Estos anticuerpos se desarrollan como consecuencia de una infeccin
natural, la vacunacin con PRP purificado, o la transferencia pasiva de anticuerpos
maternos. La gravedad de la enfermedad sistmica se relaciona de forma inversa con
la tasa de eliminacin de las bacterias del torrente sanguneo. El riesgo de meningitis
y epiglotitis es significativamente mayor en los pacientes carentes de anticuerpos
frente a PRP, aquellos con reduccin del complemento o los sometidos a una
esplenectoma.
El componente lipopolisacardico lpido A ha inducido esta respuesta en el ser
humano. H, influenzae (tanto las cepas encapsuladas como las no encapsuladas)
produce proteasas de inmunoglobulina (Ig) Al que pueden facilitar la colonizacin de
las superficies mucosas por parte de los microorganismos al interferir con la
inmunidad humoral.

5. EPIDEMIOLOGA
Las especies de Haemophilus se encuentran presentes en casi todas las personas, en
las que colonizan principalmente las membranas mucosas del tracto respiratorio. H
parainfluenzae constituye el 10% de la flora bacteriana de la saliva, y Haemophilus
aphrophilus, Haemophilus paraphrophilus y Haemophilus segnis se localizan
predominantemente en la superficie de los dientes. La mayora de las cepas
corresponde a H. influenzae no encapsulado; las cepas encapsuladas se detectan en un
nmero muy pequeo y tan slo cuando se emplean medios de cultivo muy selectivos.
H. influenzae tipo b es el serotipo que produce enfermedad sistmica con mayor
frecuencia, aunque rara vez se asla en nios sanos (un hecho que destaca la virulencia
de esta bacteria). Las especies pertenecientes al gnero Haemophilus se pueden
aislar tambin en los tractos digestivo y genitourinario, pero generalmente en un
nmero relativamente bajo.
La epidemiologa de la enfermedad causada por H. influenzae no encapsulado y otras
especies del gnero Haemophilus es diferente. La enfermedad invasiva es rara debido
a la frecuente colonizacin por estas especies en el ser humano. Las infecciones de
odo y los senos nasales producidas por estos microorganismos son fundamentalmente
enfermedades peditricas, si bien pueden afectar tambin a adultos.
La enfermedad pulmonar afecta ms a menudo a los ancianos, en especial a aquellos
con antecedentes de una enfermedad pulmonar obstructiva crnica o situaciones que
predispongan a la aspiracin (p. ej., alcoholismo, enfermedades mentales). H. ducreyi
es una causa importante de lceras genitales (chancroide) en frica y Asia, pero es
menos frecuente en Europa y Norteamrica.
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6. ENFERMEDADES CLNICAS
Las enfermedades clnicas observadas en pacientes con infecciones por H. influenzae
son:

Haemophilus influenzae
Meningitis: enfermedad que afecta principalmente a nios no vacunados; se
caracteriza por fiebre, cefalea intensa y signos sistmicos.
Epiglotitis: proceso que afecta fundamentalmente a nios no vacunados; se
caracteriza por una fase inicial con faringitis, fiebre y dificultades respiratorias que
evoluciona a celulitis e inflamacin de los tejidos supraglticos, siendo posible la
obstruccin del tracto respiratorio.
Neumona: inflamacin y consolidacin de los pulmones observada principalmente en
ancianos con un trastorno pulmonar crnico de base; suele deberse a cepas no
tipables.

Haemophilus aegyptlus
Conjuntivitis: una conjuntivitis purulenta aguda (ojo rosa)

Haemophilus ducreyi
Chancroide: enfermedad de transmisin sexual caracterizada por una ppula dolorosa
a la palpacin con una base eritematosa que se transforma en una ulceracin dolorosa
con linfadenopata asociada.

Haemophilus aphrophilus
Endocarditis: responsable de una forma subaguda de endocarditis en sujetos con
lesiones subyacentes en vlvula cardaca.

7. DIAGNSTICO DE LABORATORIO
Recogida y transporte de muestras
El diagnstico de la meningitis por Haemophilus exige la obtencin de muestras de
lquido cefalorraqudeo (LCR) y sangre. Se deben realizar hemocultivos para el
diagnstico de epiglotitis, celulitis, artritis o neumona. Estos cultivos tienen una
utilidad menor en el diagnstico de las infecciones localizadas del tracto respiratorio
superior (p. ej., sinusitis, otitis). Es preciso cultivar el material obtenido por
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aspiracin directa para elaborar el diagnstico microbiolgico de ambas entidades.

Las muestras para la deteccin de H. ducreyi se deben recoger con una torunda
hmeda desde la base o el margen de la lcera.
Pueden realizarse cultivos de pus obtenido por aspiracin de un ndulo linftico
ampliado, pero normalmente tienen peores resultados que los cultivos de la lcera.
Microscopa
Si el examen microscpico se realiza de manera cuidadosa, la deteccin del gnero
Haemophilus en las muestras clnicas dispone de sensibilidad y especificidad. En una
proporcin superior al 80% de las muestras de LCR procedentes de pacientes con
meningitis por Haemophilus que no han recibido tratamiento se detecta la presencia
de bacilos gramnegativos de morfologa comprendida entre cocobacilos y largos
filamentos pleomorfos. El examen microscpico de muestras teidas mediante la
tincin de Gram tambin es til para el diagnstico rpido de este microorganismo en
la artritis y las infecciones del tracto respiratorio inferior.

Cultivo
Resulta relativamente sencillo aislar H. influenzae de las muestras clnicas inoculadas
en medio complementado con factores de crecimiento adecuados. El agar chocolate o
agar de Levinthal se emplea en un gran nmero de laboratorios.
Sin embargo, el factor V se destruye cuando el agar chocolate se calienta en exceso
durante la preparacin, lo que impide el crecimiento de las especies de Haemophilus
que precisan del mismo para su desarrollo (p. ej., H. influenzae, H. aegyptius, H.
parainfluenzae); por consiguiente, se debe probar cada preparacin de medio antes de
utilizarlo. Las bacterias aparecen como colonias opacas y lisas de L a 2 mm despus de
24 horas de incubacin. Tambin pueden crecer alrededor de colonias de
Staphylococcus aureus en agar sangre no calentado (satelitismo; figura 35-3). Los
estafilococos aportan los factores de crecimiento necesarios al lisar los eritrocitos
presentes en el medio, liberar la hematina intracelular (factor X) y excretar NAD
(factor V).
Las colonias de H. influenzae de estos cultivos presentan un tamao notablemente
menor que en el agar chocolate, ya que no se han inactivado los inhibidores del factor
V. H. aegyptius y H. ducreyi son especies exigentes que requieren unas condiciones de
crecimiento especiales.

Satelitismo. Staphylococcus aureus excreta dinucletido de nicotinamida y adenina (NAD o

factor V) al medio de cultivo, de modo que aporta un factor de crecimiento necesario para el
desarrollo de H. influenzae (pequeas colonias que crecen alrededor de las colonias de S.
aureus).

Deteccin de antgenos
La deteccin inmunolgica del antgeno de H. influenzae, en especial del antgeno
capsular PRP, es una forma rpida y sensible de diagnosticar la enfermedad por H.
influenzae tipo b.
Se puede detectar PRP mediante la prueba de aglutinacin de partculas, la cual es
capaz de detectar una cantidad inferior a 1 ng/ml de esta molcula en una muestra
clnica. En esta prueba se mezclan partculas de ltex recubiertas de anticuerpos con
la muestra clnica; la aglutinacin se produce cuando dicha muestra contiene PRP.
Caractersticas diferenciales de los miembros ms frecuentes de la familia
Pastereullaceae:

+, Reaccin positiva; -, reaccin negativa; +/-, reaccin variable

8. TRATAMIENTO, PREVENCIN Y CONTROL

Los pacientes con infecciones sistmicas por H. influenzae precisan de un tratamiento
antimicrobiano precoz, dado que la tasa de mortalidad de los sujetos con meningitis o
epiglotitis no tratada se acerca al 100%. Las infecciones graves se tratan con
cefalosporinas de amplio espectro. Las infecciones menos graves, como las sinusitis y
las otitis, se pueden tratar con ampicilina (si son sensibles a este antibitico, ya que
alrededor del 30% de las cepas es resistente), una cefalosporina activa, acitromicina
o una fluoroquinolona. La mayora de las cepas de H. ducreyi es sensible a
eritromicina, el frmaco recomendado como tratamiento.
El principal abordaje de prevencin de la enfermedad por H. influenzae tipo b
consiste en la vacunacin activa con el antgeno PRP capsular purificado.

9. BIBLIOGRAFA
Ken S. Rosenthal, Patrick R. Murray, Michael A. Pfaller; Microbiologa mdica