EL CITOESQUELETO BACTERIANO

Yu-Ling Shih y Lawrence Rothfield

RESUMEN
En los ltimos aos se ha demostrado que las bacterias contienen un nmero de estructuras del
citoesqueleto. Los elementos citoplasmticos bacterianas incluyen homlogos de los tres tipos
principales de protenas eucariotas citoesqueleto (actina, la tubulina y protenas de filamentos
intermedios) y un cuarto grupo, el grupo MinD-Par, que parece ser nica para las
bacterias. Las estructuras del citoesqueleto desempean un papel importante en la divisin
celular, la polaridad celular, la regulacin de la forma celular, la particin de plsmido, y otras
funciones. Las protenas se auto-ensamblan en estructuras filamentosas in vitro y forman
estructuras ordenadas intracelulares in vivo. Adems, hay una serie de elementos filamentosos
bacterianas que pueden resultan ser del citoesqueleto en la naturaleza. Esta revisin pretende
resumir e integrar la in vivo e in vitro aspectos de estos sistemas y para evaluar las probables
futuras orientaciones de este campo de investigacin activa.

INTRODUCCIN
Es realmente impresionante que en un plazo de 5 aos, una "verdad" de larga data acerca de una
de las principales formas de vida del planeta se ha volcado. Aunque haba habido indicaciones
anteriores de estructuras organizadas dentro de las clulas bacterianas ( 18 , 139 , 209 ),
incluyendo la demostracin por Bi y Lutkenhaus que el homlogo de la tubulina FtsZ forma una
estructura similar a un anillo en el sitio de divisin ( 15 ), el perodo de rpido antelacin
comenz con el descubrimiento por Jones et al. en 2001 que los homlogos de actina
bacterianas en Bacillus subtilisse organizan en estructuras helicoidales extendidos que juegan un
papel clave en la regulacin de la forma celular (95 ). Desde entonces, la sentencia de que las
bacterias no han de largo alcance estructura interna ha sido sustituida por la realizacin de que
el interior de la clula bacteriana contiene un gran nmero de elementos del citoesqueleto
organizados, probablemente con un grupo mucho mayor de los componentes del citoesqueleto
asociado todava sea descubierto. Especialmente impresionante es la gran cantidad de

informacin que se ha puesto de manifiesto durante este perodo de tiempo relativamente

corto. Ahora se sabe que existen homlogos del citoesqueleto bacterianas para todos los
principales grupos de protenas del citoesqueleto eucariotas, es decir, la actina, tubulina, y
grupos de filamentos intermedios (IF). Sin embargo, tambin han surgido diferencias
importantes entre los sistemas del citoesqueleto eucariotas y procariotas. Estos incluyen el
descubrimiento de que hay al menos un grupo importante de elementos del citoesqueleto
bacterianas, el / grupo para la mente, que no tiene contrapartida eucaritico conocido y el
hallazgo de que funciones anlogas se llevan a cabo frecuentemente por diferentes clases
citoesqueleto en eucariotas y procariotas, a menudo utilizando diferentes mecanismos.
La definicin del citoesqueleto eucariota ha evolucionado a lo largo del ltimo medio
siglo. Incluye tanto las estructuras filamentosas estables que se componen en gran parte de las
protenas de filamentos intermedios y las estructuras dinmicas, como las estructuras
microtubulares tubulina derivados y los filamentos de actina que puede montar, desmontar, y
redistribuir con rapidez dentro de la clula en respuesta a las seales que regulan las funciones
celulares, tales como clulas la progresin del ciclo, el transporte de orgnulos intracelulares, la
motilidad y la forma de la clula. Las caractersticas comunes de estos sistemas son su
naturaleza filamentosa polimrica y su orden de largo alcance dentro de la clula. Sobre la base
de estos antecedentes, definimos las estructuras del citoesqueleto bacterianas como estructuras
filamentosas que se basan principalmente en polmeros de una sola clase de protenas, que
muestran orden de largo alcance dentro de la clula y, cuando esto ha sido estudiado, que son
capaces de auto- ensamblar in vitro en filamentos polimricos extendidas. El citoesqueleto
bacteriana consta de los varios grupos de estructuras intracelulares que cumplen esta definicin.
En esta revisin intentamos sintetizar la amplia gama de informacin que est disponible sobre
el citoesqueleto bacteriano, concentrndose en los sistemas de los que se dispone para sacar
conclusiones significativas de informacin suficiente. Hacemos hincapi en los aspectos del
citoesqueleto de estos sistemas y la relacin de la organizacin del citoesqueleto de las
funciones celulares especficas. Nos ocupamos relativamente brevemente con algunos detalles
de la funcin biolgica que recientemente han sido revisados en otro lugar o que no podrn

implicar el citoesqueleto. En su caso, remitimos al lector a los ltimos comentarios sobre estos
temas.

BACTERIAL CITOESQUELETO ELEMENTOS

Actina Homlogos
Varios homlogos de actina del citoesqueleto que forman estructuras estn presentes en las
clulas bacterianas. Los tres homlogos de actina bacterianas cuyas estructuras en tres
dimensiones se conocen espectculo importante similitud estructural con la actina eucariota
(Fig. (figura 1A)1A ) ( 171, 214 , 216 ) a pesar de un grado variable de similitud de
secuencia. Ellos comparten un pliegue actina similar, que es caracterstico de la superfamilia de
la actina, con la regin ms conservada de ser el dominio ATPasa actina ( 16 ).Tambin existen
otras protenas bacterianas de la superfamilia de actina que no se sabe que son elementos
del citoesqueleto. Estos incluyen, por ejemplo, la protena de divisin celular FtsA (discutido
ms adelante), el DnaK protena chaperona (Hsp70), y hexoquinasas de azcar ( 16).

Higo. 1.
Comparacin estructural de las protenas del citoesqueleto eucariotas y procariotas.Estructuras de
protenas fueron descargados de la Protein Data Bank (PDB) (http://www.rcsb.org/pdb/ ) y alineados
utilizando el servidor EMBL-EBI Dal (http://www.epi.ac.uk/dali/ ). Protena ...

Comparacin estructural de las protenas del citoesqueleto eucariotas y

procariotas. Estructuras de protenas fueron descargados de la Protein Data
Bank (PDB) ( http://www.rcsb.org/pdb/ ) y alineados utilizando el servidor
EMBL-EBI Dal ( http://www.epi.ac.uk/dali/ ). Se analizaron a continuacin las
estructuras de protenas y se muestran usando el programa MolMol ( 103 ).
No se muestran nucletidos y molculas inorgnicas que cocrystalized con
las protenas. homlogos (A) de actina. De izquierda a derecha:
Saccharomyces cerevisiae actina (AP 1YAGA entrada), obligado ATP ( 218 );
Thermotoga maritima MreB (AP entrada 1JCG), AMPPNP obligado ( 214 );
ParM del plsmido R1 (AP entrada 1MWM), ADP unido ( 216 ). homlogos (B)
tubulina. De izquierda a derecha: Bos taurus -tubulina (entrada 1JFFB PDB),
GTP / PIB atado ( 124 ); Methanococcus jannaschii FtsZ (AP entrada 1FSZ), el
PIB atado ( 122 ); Prosthecobacter dejongeii BtubA (AP entrada 2BTOA), GTP
unido ( 183 ). (C) la mente (izquierda) y Soj (derecha) las protenas:
Archaeoglobus fulgidus MinD (AP entrada 1HYQ), libre de nucletidos ( 24 );
Thermus thermophilus Soj (AP entrada 2BEJ), ADP unido ( 116 ). La
especificidad de dominio topolgico del dmero MinE se muestra (residuos

31-88). Los dominios de unin-mente de cada monmero se extienden

desde lados opuestos (el lado derecho e izquierdo en este punto de vista) de
la especificidad de dominio topolgico dimrica ( 100 ).
En las clulas eucariotas, la actina se polimeriza en estructuras polarizadas, con la adicin de
actina-ATP siendo favorecido en un extremo y la hidrlisis de ATP y la liberacin de la
subunidad siendo favorecido en el otro. Esto puede resultar en un rpido desplazamiento del
filamento, debido a la extensin en un extremo y de contraccin a los otros, o en los rpidos
cambios en el tamao de filamento, nmero o distribucin topolgica en respuesta a las entradas
de regulacin. Los filamentos de actina se asocian generalmente con un nmero de otras
protenas que desempean un papel regulador en la dinmica de crecimiento de filamento, el
desmontaje, la escisin, agrupacin, etc (revisado en las referencias 4 y 164 ).Elementos
reguladores de incandescencia asociada similares an no se han identificado para la mayora de
los homlogos de actina bacterianas.
Aqu analizamos las protenas del citoesqueleto mejor estudiados bacterianas-actina similares,
es decir, MreB, ParM y MamK.

MreB y MreB homlogos.

MreB y MreB homlogos son protenas del citoesqueleto actina relacionadas que juegan un
papel importante en un nmero de funciones celulares en bacterias, incluyendo la regulacin de
la forma celular, la segregacin de cromosomas, la polaridad celular y la organizacin de
orgnulos membranosos. Algunas especies bacterianas, tales como Escherichia coli , contienen
una sola protena MreB. Otros contienen dos o ms protenas relacionadas MreB-, como
los Bacillus subtilis MreB, Mbl ( M re B - l ike), y MreBH ( MreB h omolog) protenas
( 1 ,117 , 217 ).
En muchos organismos, tales como E. coli y B. subtilis ,MreB es parte de un opern que
tambin contiene genes que codifican para las protenas mrec y mRed. MreB, mrec, y mRed se
requieren

para

la

viabilidad

celular

( 107 , 113 ,115 ). La

prdida

de

viabilidad

de E. coli MreB clulas pueden ser suprimidos por la modesta sobreexpresin del gen de la
divisin celular esencial FtsZ ( 107 , 188 ). Se sugiri que esto refleja la necesidad de ms FtsZ
debido al mayor volumen de las clulas MreB empobrecida esfricas ( 107 ). Es posible que los

viables MreB cepas mutantes que han sido aislados contienen elevados niveles de FtsZ celulares
debido a mutaciones supresoras secundarias.

(I) la organizacin del citoesqueleto de protenas MreB.

La organizacin celular de MreB y MreB homlogos enEscherichia coli , Bacillus
subtilis , Caulobacter

crescentus ,

y Rhodobacter

sphaeroides se

ha

descrito

( 53, 60 , 95 , 108 , 187 , 191 ). En todos los casos las protenas se organizan en estructuras
filamentosas helicoidales que se enrollan alrededor de la clula en forma de barra, como se
muestra por microscopa de inmunofluorescencia y microscopa de fluorescencia de clulas que
expresan fusiones de las protenas a la protena verde fluorescente (GFP) o uno de sus
derivados, tales como protena fluorescente amarilla (YFP) (. Fig 2A y B ). Las estructuras en
espiral extendidas se encuentran en la superficie inferior de la membrana citoplasmtica y se
extiende a lo largo de toda la longitud de la clula. En algunos casos, las estructuras se
componen de dos hlices entrelazadas (Fig. (Figura 2B2B ).

Higo. 2.
Localizacin y funciones de la protena MreB-actina como. (A a D) localizacin celular de
MreB marcado con GFP o YFP. (A a C) E.coli MreB localiza en bobinas extendidas (A),
dobles hlices entrelazadas (B), y las estructuras en forma de banda (C). (Reproducido ...
Localizacin y funciones de la protena MreB-actina como. (A a D)
localizacin celular de MreB marcado con GFP o YFP. (A a C) E. coli MreB
localiza en bobinas extendidas (A), dobles hlices entrelazadas (B), y las
estructuras en forma de banda (C). (Reproducido de la referencia 187 , con
autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia Nacional de Ciencias,
EE.UU.) (D) C. crescentus MreB localiza en una estructura similar a una
banda en el sitio de divisin en las clulas predivisional. (Reproducido de la
referencia 60 con permiso del editor. Copyright 2004 Academia Nacional de
Ciencias, EE.UU.) (E) la segregacin de cromosomas en E. coli MreB
supresin cepa (Y.-L. Shih, sin publicar). Los defectos incluyen mltiples
cromosomas desordenados y particin cromosoma desigual en las clulas
hijas (1 clula), la produccin de clulas anucleadas (celulares 2), y la
fragmentacin cromosmica presumiblemente debido a guillotinar del
nucleoide (3 celdas). El ADN bacteriano (rojo) est manchado con DAPI;
membrana (verde) se tie con FM4-64 [ N - (3-triethylammoniumpropyl) 4 (6
(4 (dietilamino) fenil) hexatrienilo) piridinio dibromuro]. (F) organizacin

sugerida de protenas de la pared de clulas sintetizadoras citoesqueleto

asociado de E. coli . El citoesqueleto MreB citoplsmico se une mediante
mrec y mRed a la PBP murena enzimas biosintticas ( 107 ). Roda tambin
puede ser un miembro del complejo, y es posible que algunas protenas de
membrana externa son tambin parte de la estructura asociada a mrec
( 35 ). Mrec se muestra como una protena de transmembrana ( 107 , 113 ),
pero, al menos en C. crescentus , mrec parece ser una protena periplsmica
( 35 ). Ver texto para ms detalles y referencias. Esta estructura
multiproteico puede permitir el citoesqueleto MreB para regular el patrn de
la biosntesis de la pared celular, proporcionando la informacin espacial a
la maquinaria biosinttica murein. OM, membrana externa; PG,
peptidoglicano (murena); IM, membrana interna. (G) del patrn de montaje
murein en B. subtilis ( 27 ). Peptidoglicano nacientes estaba manchada con
la etiqueta fluorescente vancomicina (vase el texto). La micrografa
contiene clulas que representan diferentes etapas del ciclo celular.
Patrones helicoidales de vancomicina marcado se indican mediante bandas
transversales (lneas) y los puntos alrededor de la periferia de la clula
(puntas de flecha). Las bandas densamente teidos (flecha) en los dos ms
a la derecha las clulas se encuentran en los sitios de divisin celular.
(Reproducido de la referencia 27 con permiso de Elsevier.) (H) patrn de
insercin murein en el sacculus murein de E. coli , lo que sugiere un modo
helicoidal del conjunto de murena (las flechas indican dos de las bobinas
helicoidales). (Reproducido de la referencia 32 con permiso del editor.)
El citoesqueleto helicoidal MreB puede cambiar su patrn celular, como se deduce de la
observacin de que la densidad helicoidal y distribucin celular de la estructura en espiral MreB
vara en diferentes clulas dentro de las culturas que crecen normalmente (Fig. 2A a C )
( 53 , 60 ,95 , 187 , 191 , 194 ). Esto es probable, al menos en parte, para reflejar remodelacin
durante el ciclo celular. As, enC. crescentus las matrices helicoidales MreB a lo largo de la
longitud de la celda se convierten en una estructura de anillo en o cerca de midcell en clulas
predivisional (Fig. (Fig.2D)2D ) ( 53 ). En R. sphaeroides , una estructura similar aparece cerca
midcell antes de la citocinesis y se mueve a otra posicin antes de que se complete la tabicacin
( 191 ).El evento redistribucin en C. crescentus no ocurri cuando la protena esencial de la
divisin celular FtsZ se agot, lo que implica que la formacin del anillo MreB cerca midcell
est regulada por los acontecimientos de la divisin celular ( 53 ). La formacin de una
estructura similar a un anillo alrededor de midcell en C. crescentus y R. sphaeroides es una
reminiscencia de la formacin del anillo contrctil de actina que se encuentra en el sitio de
divisin en clulas eucariotas y desempea un papel contrctil a lo largo de la citocinesis en
cooperacin con la miosina ( 4 ). Sin embargo, aparte de su localizacin midcell transitoria en
varios estudios, no hay evidencia de que el anillo MreB juega un papel en la citocinesis
bacteriana. De banda o en forma de anillo estructuras similares estn presentes en

aproximadamente el 5% de E. coli clulas, sin una aparente preferencia para la localizacin

cerca de midcell ( 187 ), y el hecho de que MreB clulas pueden someterse a la divisin
celular muestra que el anillo MreB no es un elemento esencial del proceso de tabicacin
( 108 , 188 ).
MreB redistribucin en una estructura de anillo cerca midcell en clulas predivisional
de C. crescentus est daado, pero no se elimina, en una cepa que carece de TipN, una protena
que normalmente marca el nuevo polo celular y juega un papel en el establecimiento del eje de
la polaridad celular ( 83 , 111 ). TipN sobreproduccin conduce a su mislocalization a
posiciones ectpicas lo largo del cilindro celular, estableciendo as nuevos ejes de polaridad
como se muestra por barras como consecuencia de ramas de los sitios aberrantes ( 111 ). Es
posible que esto refleja una influencia directa de TipN en la direccionalidad del citoesqueleto
MreB.
Los elementos del citoesqueleto MreB y Mbl en B. subtilisson estructuras dinmicas. El
movimiento rpido se ha observado en las MreB y Mbl estructuras en espiral GFP-etiquetados,
apareciendo a veces para incluir el movimiento unidireccional segmentaria detectable en una
escala de tiempo de varios segundos ( 194 ). Estudios de fluorescencia photobleaching tambin
han demostrado que las molculas dentro de la estructura helicoidal Mbl intercambio con
molculas Mbl en la clula con una media de tiempo de aproximadamente 8 min (en otros
lugares 20 ).

(Ii) polimerizacin y despolimerizacin MreB.

La protena MreB de Thermotoga maritima auto-ensambla en filamentos polimricos largos in
vitro ( 51 , 214 ). Aunque la abundancia celular de MreB en T. maritima no se conoce, la
polimerizacin de T. maritima MreB es rpida a las concentraciones celulares normales
de E. coli MreB (~30,000 molculas por clula [ 108 ]) y B. subtilis MreB (~8,000 molculas
por clula [ 95 ]). Cada filamento se compone de dos polmeros lineales de lado a lado que
difieren en apariencia de los filamentos de doble cadena helicoidal de la actina F ( 214 ). Los
filamentos de doble cadena MreB son propensos a comprender las estructuras MreB
helicoidales de clulas intactas.

La polimerizacin se produce igualmente bien en presencia de ATP y GTP ( 50 , 214 ), de tal

modo que difiere de la polimerizacin de actina, que se produce slo en presencia de
ATP. Polimerizacin MreB estimula la actividad ATPasa, pero durante el transcurso de la
polimerizacin MreB hay un desfase entre la polimerizacin y la liberacin de fosfato
(50 ). Esto implica que la hidrlisis de ATP se produce despus de monmeros MreB se
incorporan en filamentos y que de unin a ATP, en lugar de la hidrlisis, se requiere para la
adicin de subunidades de polmero en crecimiento a la, asemejndose de ese modo la
polimerizacin de actina (164 ).
Los filamentos interactan para formar haces que se someten a un proceso de gelificacin,
conduce a la formacin de una estructura similar a un slido ( 51 ). La estructura MreB paquete
es ms rgida que la estructura de F-actina equivalente, con propiedades que son ms a menudo
asociados con los filamentos intermedios eucariotas que con la actina ( 51 ). Estos incluyen alta
elasticidad, concentraciones crticas bajas para la polimerizacin, y una alta propensin a la
agrupacin. Estas propiedades pueden ser tiles si el citoesqueleto MreB jug un papel
esqueltico cierto en el apoyo a la forma celular.Sin embargo, los cambios significativos en la
distribucin celular de la MreB citoesqueleto que tienen lugar dentro de las clulas con forma de
bastn (ver arriba) indican que la rigidez de los polmeros MreB organizados no juega un papel
esencial en el mantenimiento de la forma de barra de la clula. Esta conclusin est apoyada por
estudios con la A22 de drogas [ S - (3,4-diclorobencil) isotiourea] ( 88 ), que conduce a la
prdida de las estructuras en espiral MreB y la conversin de la clula de una varilla a una
esfera.Cuando se aadi A22, la forma similar a una barra de C.Crescentus no se alter hasta
mucho tiempo despus de la desaparicin de las estructuras helicoidales MreB ( 61 ),
argumentando en contra de la idea de que la rigidez de los protofilamentos paquetes es
necesario para el mantenimiento de la forma celular.
Toda la informacin actual sobre la estructura y las propiedades de polimerizacin de filamentos
MreB se basa en estudios de MreB del organismo termfilo T. maritima , donde an no se ha
estudiado la organizacin celular de la protena. Por lo tanto, ser importante confirmar que
MreB

partir

de

organismos

tales

como B. subtilis , E. coli ,Caulobacter

crescentus y Rhodobacter sphaeroides , donde se han realizado casi todos los estudios
biolgicos, se comporta de manera similar a la T. maritima protena.

(Iii) las funciones celulares de MreB y MreB homlogos.

(A) la determinacin de la forma de la clula . Desde el descubrimiento original de
la MreB ( m u re en el grupo B ) de genes en una bsqueda para los mutantes que son sensibles a
amdinocilina ( 220 ), genes que codifican para MreB y homlogos de actina relacionadas con
MreB se ha demostrado que estar presente en casi todos varilla en forma de especies y ausente
de las especies que crecen como cocos ( 27 ). Clulas MreB-agotado por lo general crecen como
esferas, lo que sugiere que MreB puede jugar un papel en el control de la forma celular en las
bacterias en forma de varilla.
Durante mucho tiempo se ha sabido que el principal determinante de la forma celular bacteriana
es el exoesqueleto murena (peptidoglicano), que se encuentra fuera de la membrana
plasmtica. El sculo de murena conserva la forma de las clulas bacterianas, incluso cuando se
purifica lejos de otros componentes celulares, y en ausencia de murena de la pared celular, las
clulas con forma de bastn se convierta esfrica. Esto deja claro que el sculo es la estructura
que determina la forma de la clula (184 ). El MreB opern es parte de un gran grupo de genes
implicados en la sntesis de murena, lo que implica una posible relacin entre MreB y la
biosntesis de la murena exoesqueleto rgido.
La forma de las clulas en forma de barra es dependiente de las enzimas responsables del
crecimiento murena longitudinal. La forma de varilla tambin es dependiente de la presencia de
MreB o MreB homlogos, ya que el agotamiento de estas protenas conduce a la prdida de la
forma normal de varilla, con la formacin de clulas esfricas, o, en el caso de prdida de Mbl,
a deformarse notablemente con clulas grandes protuberancias y aumenta irregulares en anchura
de la celda ( 95 ). Se ha sugerido que la MBL controla la sntesis de la pared celular cilndrico
(27 ). Varias otras protenas celulares tambin estn implicados en el establecimiento de la
forma de varilla, ya que la prdida de estas protenas tambin conduce una transicin de barra a
esfera. Entre otros, estos incluyen la protena de murena enzima biosinttica de unin a
penicilina-2 (PBP2) y la protena Roda de E. coli , que se describen a continuacin.

Es probable que MreB y sus homlogos regulan la forma de las clulas en forma de barra
mediante la organizacin de las enzimas biosintticas murena en un patrn helicoidal que est
orientado a lo largo del eje largo de la clula, lo que lleva al patrn de murena sntesis que es
responsable de la forma de barra . Esto fue sugerido inicialmente por estudios con vancomicina
marcado con fluorescena. Vancomicina bloques de la reticulacin de las cadenas recin
sintetizadas glicano-pentapptidos en el sculo de murena por la unin covalente al
terminal D alanina del pentapptido murena precursores biosintticos ( 12 , 17 , 27 ). Marcado
con fluorescena vancomicina por lo tanto, se ha utilizado como un marcador para el patrn
celular de murena biosntesis.Los estudios mostraron que la vancomicina los precursores
inmediatos de murein madura en B. subtilis ( 27 ) se organizan en un patrn en espiral que se
extiende a lo largo del eje largo de la celda y se asemeja a los patrones de distribucin de MreB
y Mbl (Fig. (Fig.2G).2G ). El patrn en espiral vancomicina era dependiente de la presencia de
la MreB homlogo Mbl ( 27 ). En las especies que carecen de unaMBL gen, es probable que
MreB u otro homlogo MreB lleva a cabo esta funcin. De acuerdo con estos resultados, los
estudios de la deposicin de murena en E. coli clulas (32 ) tambin sugieren un patrn en
espiral de nueva incorporacin en el sculo de murena (Fig. (Fig.2H2H ).
Los siguientes experimentos indican que el patrn helicoidal Mbl dependiente de la sntesis de
murena refleja una organizacin helicoidal de las enzimas de la biosntesis del peptidoglicano
necesarios para el crecimiento celular longitudinal. En primer lugar, la PBP2 transpeptidasa
murena biosinttica, que se requiere para la forma de varilla, se distribuye en un patrn en
espiral a lo largo del cilindro celular, similar a los patrones de distribucin de MreB y Mbl. Esto
se ha demostrado en C. Crescentus ( 35 ,38 , 53 ) y es probable que tambin lo es
en E. coli ( 30 ). En segundo lugar, el patrn de distribucin en espiral de PBP2 es dependiente
de la presencia de MreB y mrec ( 35 , 53 ), lo que implica que la MreB helicoidal y estructuras
del citoesqueleto mrec (discutidos ms adelante) juegan un papel esencial en la determinacin
de la organizacin celular de PBP2.
Mrec parece actuar como un puente entre el citoesqueleto MreB y la maquinaria biosinttica de
murena, como se muestra en los estudios de E. coli y B. subtilis ( 107 , 113 ).La protena mRed
es tambin probable que sea un componente del complejo de puente en los organismos que

contienen un mRed gen, tales como E. coli y B. subtilis .Por lo tanto, E. coli mrec interacta con
MreB y MrEd en dos ensayos de hbridos bacterianas, mientras que MreB no interacta con
MrEd ( 107 ). Esto sugiere que mrec puede intercalarse entre MreB y MrEd en un complejo
multiproteico putativo. Adems, varias lneas de evidencia sugieren que MreB, mrec, mRed,
PBP2, y tal vez otras enzimas biosintticas murena son componentes de una estructura que
media los efectos del citoesqueleto MreB de la topologa de la sntesis de murena
(Fig. (Fig.2F ).2F ). En primer lugar, la formacin de MreB normal de las estructuras del
citoesqueleto

helicoidales

requiere

la

presencia

de mrec ymRed en E. coli y B. subtilis ( 29 , 107 ). En segundo lugar, varias PBP que codifican
para enzimas biosintticas de murena se recuperaron mediante cromatografa de afinidad de
un C. crescentus extracto de clulas en una columna de mrec, lo que sugiere una relacin entre
mrec y mltiples elementos de la maquinaria biosinttica de murena en este organismo
( 35 ). En tercer lugar, C. Crescentus mrec y PBP2 ( 35 , 38 ) y B. subtilis mrec y MrEd ( 113 )
estn presentes en los patrones helicoidales que se asemejan a las de los elementos en espiral
MreB y Mbl. Se ha sugerido que roda, que se requiere para el mantenimiento de la forma de
varilla y para la actividad enzimtica de PBP2 ( 87 , 196 ), puede ser otro componente del
complejo MreBC ( 107 ).Mrec ha sido pensado para ser el enlace transmembrana en este
complejo ( 107 ), porque el anlisis de secuencia predice una organizacin transmembrana. Sin
embargo, recientemente se ha informado de que los estudios de fraccionamiento celular indican
una ubicacin para la periplsmico C. Crescentus protena mrec ( 35 ). Se necesitan ms
estudios para aclarar la localizacin celular de mrec en los diversos organismos en estudio.
La interaccin entre MreB y la estructura basada en mrec in vivo parece ser transitoria, ya que,
en contraste con MreB, la distribucin del patrn helicoidal mrec no cambia significativamente
durante el ciclo celular ( 35 ). La observacin de que la interrupcin de las estructuras
helicoidales MreB por A22 no tuvo efectos inmediatos en la localizacin de mrec y PBP2
tambin apoya la idea de que MreB no es una parte esencial del complejo mrec-PBP bsico
( 35 , 38 ).
Cromatografa de afinidad mrec identific aproximadamente 19 candidatos para ser protenas
asociadas mrec ( 35 ).Estos incluyeron ocho presuntas protenas de membrana externa, nueve

protenas citoplasmticas, y pequeas cantidades de varios PBP. Estudios de derivados de GFP

de cinco de las protenas de membrana externa mostraron racimos de protena marcada que
fueron interpretados para indicar una espiral, puntiforme, o patrn de distribucin de bandas
similar a la observada con mrec PBP2 y ( 35 ).Basndose en estos resultados, se sugiri que los
PBP y protenas de membrana externa pueden ser parte de un complejo a base de mrec anclado
en la membrana interna que podra proporcionar un vnculo entre el citoesqueleto MreB interna
y las capas externas de la envoltura celular. Si esto es correcto, el fracaso para recuperar MreB
de la columna de afinidad mrec puede atribuirse a problemas en la solubilizacin de las
estructuras del citoesqueleto MreB o a la presencia de protenas que unen intermedias entre
MreB y mrec. Ser necesario seguir trabajando para interpretar plenamente estas observaciones.
Curiosamente, la prdida de cualquiera MreB o mrec causa PBP2 a perder su organizacin
helicoidal y en su lugar para localizar cerca midcell en C. crescentus ( 38 ). Esto requiere la
protena FtsZ divisin esencial, lo que sugiere que la localizacin celular de PBP2, y
presumiblemente tambin su sitio de accin, pueden ser reguladas por una interaccin entre la
maquinaria de divisin celular y el citoesqueleto MreB / mrec. Esto es consistente con la
observacin de que PBP2 localiza a midcell en el momento de la tabicacin en E. coli ( 30 ). El
PBP2 sin relacin de Staphylococcus aureus tambin se localiza en midcell (161 ).
Una comprensin completa de la funcin del citoesqueleto en la organizacin de la maquinaria
biosinttica murein se complica por observaciones como la siguiente. (I) Los estudios de
localizacin de los 11 PBP vegetativas de B.subtilis no se present una distribucin helicoidal
( 182 ). A menos que estos resultados reflejan las limitaciones tcnicas, esto implica que la
asociacin de enzimas biosintticas del peptidoglicano con el citoesqueleto puede variar de
especie a especie o puede ser limitado a un pequeo subconjunto de las enzimas. (Ii)
Crecimiento de B.subtilis en presencia de 25 mM Mg 2 + restauran una morfologa normal y
varilla helicoidal distribucin normal de murena naciente a mreB clulas ( 54 ). Por lo tanto,
aunque hay pruebas de que el citoesqueleto inferencial MreB puede participar en la
determinacin de la forma de la clula, proporcionando un andamio para la distribucin
helicoidal de las enzimas biosintticas del peptidoglicano lo largo de la longitud de la clula,
este efecto es ya sea indirecta o opera a travs de otro andamio de protenas, tal vez mrec. Altas

Mg 2 + niveles podran estabilizar el socio andamios para permitir que funcione en ausencia de
MreB.Estas observaciones muestran que el citoesqueleto MreB no es esencial para la
determinacin de la forma celular en B.subtilis pesar del hecho de que el agotamiento de MreB
resulta en un cambio de la forma celular.
(B) La polaridad celular . Los polos de las clulas en forma de varilla difieren en varios
aspectos del resto del cuerpo celular. Estas diferencias incluyen la localizacin polar especfico
de un nmero de protenas asociadas a la membrana ( 90 ), la presencia de flagelos polares o pili
en ciertas especies ( 185 ), la falta de volumen de negocios de murena y de protenas de
superficie etiquetados externamente en los polos celulares ( 31 , 33 ), la ausencia de zonas de
adhesin entre la membrana interna y la capa externa de la membrana-murena en los polos
( 23 , 131 ), y los cambios anatmicos (la cicatriz nacimiento bacteriana) en el polo celular
recin formada ( 130 ). MreB ha sido implicado en uno de estos aspectos de la polaridad de la
clula, la localizacin de protenas especficas a uno o ambos polos celulares.
Las protenas que juegan un papel en la regulacin de la C.Crescentus ciclo de diferenciacin
estn

dirigidos

diferencialmente

uno

ambos

polos

celulares

(revisado

en

referencia 59 ). Estos incluyen las quinasas histidina membrana, Plec, DivJ y CCKA. MreB se
requiere para la orientacin polar de estas protenas ( 60 ). Tras el agotamiento de MreB,
localizacin polar de las protenas se pierde y se convierten en difusa distribuida dentro de la
clula.
MreB

tambin

se

requiere

para

la

localizacin

polar

de

protenas

en

otros

organismos. En E. coli y las bacterias gram-negativas relacionadas, las protenas asociadas a la

membrana implicados en la quimiotaxis, la motilidad, la secrecin, y la virulencia estn
normalmente dirigidos a uno o ambos polos celulares ( 185 ). Cuando varias de estas protenas
se expresaron en E. coli , el agotamiento de MreB llev a un cambio de orientacin polar. Las
protenas incluyen la E. coli quimiorreceptores aspartato ( 188 ), laShigella flexneri protena de
virulencia ICSA ( 151 , 188 ), y el Vibrio cholerae protena de tipo II secrecin EPSM (151 ). Es
probable que MreB se le aparecen tambin desempear un papel en la orientacin polar de otras
protenas.

Sin embargo, no todas las protenas polares requieren MreB para su localizacin. Por lo tanto, la
asamblea de los E. coliprotenas Min en zonas asociadas a la membrana polares (188 , 205 ) y la
localizacin polar de la C. crescentusprotena TipN ( 111 ) parece ser independiente de
MreB.Estos pueden ser excepciones a la regla general de que MreB participa en la localizacin
de las protenas polares, lo que refleja el papel especial que desempean las protenas Min en el
establecimiento de la posicin del sitio celular divisin ( 175 ) y el papel especial de TipN en
marcar el polo celular y en la determinacin de la polaridad celular ( 83 , 111 ). No se sabe
cmo MreB lleva a cabo la orientacin polar de las protenas. Los filamentos helicoidales MreB
podran participar directamente en el movimiento de las protenas a los polos proporcionando
pistas para la translocacin activa de protenas de carga especficos, probablemente en
colaboracin con el portador especfico del sustrato y / o protenas motoras. Los segmentos de
los filamentos MreB pueden ser movidas hacia los polos ( 194 ) como parte del proceso de
translocacin. Alternativamente, MreB podra actuar indirectamente mediante la colocacin de
objetivos polares para la localizacin de la protena. Por ejemplo, el extremo polar del
citoesqueleto MreB podra iniciar la localizacin o la organizacin de otros componentes
polares que actan entonces como sitios de unin polares para una familia de protenas
sustrato. Los objetivos no necesitan ser protenas, ya que tanto la composicin lipdica de la
membrana especializado de los polos ( 141 ) y la presencia de un compartimento segregado
murena polar ( 33 ) podra contribuir a los sitios diana.
(C) la segregacin de cromosomas . Durante el ciclo celular normal, nucleoides hijas se mueven
rpidamente a los extremos opuestos de la clula, conduciendo a su equiparticin en las dos
clulas

hijas

( 74 ). Este

proceso

es

perturbado

cuando

MreB

est

agotado

en E. coli y C.crescentus ( 60 , 108 ). Esto se manifiesta por la produccin de clulas en las que
mltiples nucleoides se distribuyen irregularmente dentro del citoplasma (Fig. (Fig.2E,2E ,
clula 1) ( 108 ) y de clulas anucleadas (Fig. (Fig.2E,2E , clula 2) o clulas en las que un
nucleoide incompletamente se reparti guillotinado por el tabique (2E, clula 3). La posibilidad
de que los defectos de segregacin nucleoide son causadas por la forma esfrica de las clulas
agotadas-MreB ha sido excluidos por la observacin de que la expresin de determinados alelos
mutantes de MreB que no interfieren con la forma de varilla de la clula todava se asocia con
defectos de segregacin nucleoide ( 106 , 108 ).

Otra prueba de que se necesita para MreB particin normal cromosoma proviene de estudios de
la segregacin del origen y la terminal de regiones de los cromosomas recin replicados
de E. coli y C. Crescentus ( 61 , 108 ). En

las

clulas

de

tipo

salvaje,

los

recin

replicados Oric regiones se mueven rpidamente a los extremos opuestos de la clula. La

separacin de las regiones Terminus tiene lugar ms tarde. En contraste, en las clulas MreBagotado, el movimiento normal de los recin replicados Oric regiones a los extremos opuestos
de la clula no se produce, y las regiones Terminus aparece a adherirse entre s ( 106 , 108 ).
La evidencia bioqumica que el Oric regin cromosmica es el objetivo de MreB vino de
estudios de C. crescentusextractos de clulas por Gitai y compaeros de trabajo que muestran
que MreB y el ADN de la regin de origen proximal podran ser qumicamente reticulado y se
coimmunoprecipitated con antisuero contra-MreB ( 61 ).Esto implica firmemente que MreB se
asocia con la regin de origen proximal del cromosoma, ya sea directamente o a travs de otras
protenas que corresponden a las protenas de unin a kinetochore-centrmero de las clulas
eucariotas.Estos resultados implican que la asociacin del citoesqueleto MreB con
el Oric regin desempea un papel importante en el movimiento de los cromosomas hijos hacia
los polos celulares opuestos.
El mecanismo responsable del movimiento cromosmico no se conoce. Sobre la base de la
evidencia actual, parece probable que el Oric regin interacta directamente o indirectamente
con el citoesqueleto MreB y se transloca luego a lo largo de las estructuras helicoidales MreB de
midcell a los polos de la clula, tal vez acompaado por el movimiento de los segmentos de los
filamentos MreB ( 194) . La energa necesaria para la translocacin podra responder a una
protena motor separado, mediante el acoplamiento de la actividad ATPasa de MreB al
movimiento del ADN, o por los cambios en el cromosoma plegado. No se sabe si el movimiento
activo de otras regiones cromosmicas por un mecanismo de translocacin similar tambin est
implicado en el proceso de segregacin. Esto puede no ser necesario, ya que la compactacin
del ADN cromosmico activo despus deOric se mueve a los polos podra completar el proceso
de separacin nucleoide ( 147 , 181 ). Tampoco se sabe si la redistribucin de MreB que se
produce durante el ciclo celular est relacionada con los Oric eventos de translocacin
( 53 , 191 ).

La sugerencia anterior de que la RNA polimerasa (RNAP) contribuye a la fuerza motriz para la
separacin de cromosomas ( 37 ) se apoya en el reciente descubrimiento de que la inactivacin
de RNAP en E. coli conduce a un defecto en la separacin nucleoide en DAPI (4 ', 6'-diamino2-fenilindol) clulas teidas, similar al efecto de agotamiento o inactivacin MreB ( 106 ). Esto
parece estar asociado principalmente con un fracaso de las regiones terminal a segregar, aunque
tambin puede haber algn efecto en el origen segregacin. De especial inters, los
experimentos de inmunoprecipitacin utilizando anticuerpo anti-MreB indicaron que MreB y
RNAP se asocian fsicamente en extractos de clulas in vitro y en experimentos de
reconstitucin ( 106 ). Estos resultados sugieren que RNAP se asocia con el citoesqueleto MreB
y trabaja junto con MreB en el proceso de segregacin cromosmica. Se ha sealado que una
fuerza significativa puede ser generada por una molcula de RNAP estacionaria durante la
transcripcin, y esto podra contribuir a ADN en movimiento durante el proceso de segregacin
( 37 , 56 ).
Un mecanismo tambin debe existir para explicar la naturaleza vectorial del proceso de
translocacin, en el que los dos recin replicados Oric regiones se mueven a extremos opuestos
de la clula. La direccionalidad podra ser proporcionado por una estructura de doble hlice del
citoesqueleto MreB (Fig. (Figura 2B)2B ) si los filamentos helicoidales eran de polaridad
opuesta. Esto proporcionara dos pistas que apuntan en direcciones opuestas, cada uno
proporcionando una carretera de un solo sentido para elOric carga. En otro modelo de la
direccionalidad sera impartida por la orientacin de los recin replicados Oricregiones como el
que sale del aparato de replicacin ( 37 ).Los dos modelos no son mutuamente excluyentes, y
otros mecanismos tambin son posibles. Una comprensin ms completa de la funcin del
citoesqueleto MreB en la segregacin cromosmica requerir una comprensin ms detallada de
la organizacin macromolecular de las matrices helicoidales MreB, la polaridad del conjunto de
filamentos y desmontaje, y la base de la MreB- Oric interaccin. En contraste con los resultados
para E. coli y C. crescentus , no est claro si MreB o uno de los otros homlogos de actina, Mbl
o MreBH, se requiere para la segregacin cromosmica en B. subtilis ( 54 , 193 ). Por lo tanto,
el agotamiento de MreB en B. subtilis en la ausencia de efectos polares de genes ro abajo no
dieron lugar a defectos significativos en la segregacin de cromosomas (54 ), y el agotamiento
de MreB o Mbl llevaron a defectos de segregacin slo leves ( 194 ). Ya sea la

tercera B. subtilisactina homlogo, MreBH, influencias segregacin cromosmica queda por

determinar. Tambin ser interesante ver qu mecanismo se utiliza para la segregacin de los
cromosomas en las especies por cocos, que carecen de homlogos MreB.

El plsmido de particin por un homlogo de la actina: el sistema ParM.

La herencia estable de plsmidos bajo nmero de copias se lleva a cabo mediante sistemas de
separacin de activos que incluyen una protena de particin con la actividad ATPasa. En el tipo
I sistemas estas protenas pertenecen a la superfamilia de la ATPasa de tipo Walker particionar, y
estos se discutir ms adelante en esta revisin. En los sistemas de tipo II la protena de
particin es una ATPasa que pertenece a la superfamilia de la protena actina, ejemplificada por
la protena ParM de E. coliplsmido R1.
El par locus del plsmido R1 es el ejemplo mejor entendida de un sistema bacteriano que
cumple la funcin del aparato mittico de las clulas eucariotas. El locus incluye tres
genes: PARM codifica la protena ParM-actina como ( M dem otor); parC es el cis -actuando
sitio de ADN centromrico ( C de c entromere); y Parr ( R para repressor) codifica para la
protena Parr, que se une a parCsecuencias y acta tanto para autorregular la transcripcin de
los par genes y vincular la protena motora ParM al ADN plsmido. El parC sitio contiene 10
iterones de 11 pares de bases repeticiones que actan como sitios de unin Parr (93 ).
En las clulas que contienen el plsmido, formas lineales Parm estructuras filamentosas que se
extienden a lo largo del eje largo de la clula, donde se pueden visualizar por microscopa de
inmunofluorescencia (Fig. (figura 3A,3A , panel 1) (145 , 146 ). La alta abundancia celular de
ParM (~18,000 molculas por clula) sugiere que cada filamento intracelular se compone de un
nmero de protofilamentos (145 , 146 ). Crecimiento de los filamentos Parm empuja los
plsmidos de la progenie a extremos opuestos de la clula (Fig. (Fig 3B),3B ), como se explica a
continuacin.

Higo. 3.
Particin del plsmido R1 ParM mediada.Micrografas (A) de fluorescencia que muestra el
filamento ParM (verde) y ADN plsmido (rojo). Panel 1 muestra un filamento ParM que se
extiende entre dos plsmidos que se encuentran en los extremos de la celda. Panel 2 muestra
un plsmido ...

Particin del plsmido R1 ParM mediada. Micrografas (A) de fluorescencia que muestra el
filamento ParM (verde) y ADN plsmido (rojo). Panel 1 muestra un filamento ParM que se
extiende entre dos plsmidos que se encuentran en los extremos de la celda. Panel 2 muestra
un plsmido en cada polo celular, unido a un filamento ParM corto que se extiende hacia
midcell; esto probablemente representa una etapa intermedia de desmontaje filamento despus
de los plsmidos han sido entregados a los confines de la clula. (Reproducido de la referencia
145 con permiso de Elsevier.) (B) Despus de la replicacin del plsmido, el crecimiento de un
filamento polimrico ParM (amarillo) empuja aparte los dos plsmidos R1 progenie,
movindolas de midcell a los dos polos. (C) de la historieta que representa la regin en caja en
el panel B, que muestra detalles de la adicin de nuevas subunidades en los dos extremos del
filamento ParM. El filamento-ParM ADP se coron por subunidades ParM-ATP. El extremo
tapado se une a la parC regin centromrica del plsmido a travs de la protena Parr. El
crecimiento de filamentos ParM se produce mediante la insercin de subunidades ParM-ATP
en la interfaz entre el extremo del filamento y la ParM Parr / parC complejo. Esto se asocia con
la hidrlisis de la fraccin de ATP de la anterior subunidad ParM-ATP, convirtiendo de este
modo el penltimo subunidad a ParM-ADP.

(I) el montaje y desmontaje de polmero ParM.

ParM polimeriza in vitro para formar filamentos que presumiblemente corresponden a los
filamentos intracelulares Parm. Cada filamento in vitro es una estructura helicoidal de doble
cadena en la que cada hebra helicoidal es presumiblemente un polmero ParM sola. A diferencia
de actina y MreB filamentos, filamentos PARM no forman bultos u hojas in vitro
( 55 , 214 , 216 ).
Conjunto de filamentos ParM y desmontaje estn regulados por la unin y la hidrlisis
(ATP 55 , 145 , 146 ). Conjunto de filamentos requiere ATP o un anlogo de ATP no
hidrolizable, lo que indica que la forma unida a ATP de ParM es competente para polimerizar
( 55 , 93 , 146 ). A diferencia de los filamentos de actina, en el que se aaden subunidades slo
en un extremo del filamento, los filamentos Parm crecen por adicin de subunidades en ambos
extremos del polmero en crecimiento ( 55 ).
El crecimiento del polmero ocurre por adicin de una subunidad ParM-ATP al final de la
cadena de parmetros. Esto se asocia con la hidrlisis de la fraccin de ATP de la ParM-terminal
de ATP previamente incorporada, explicando la actividad de ATPasa dependiente de la
polimerizacin del sistema. Esto genera ParM-ADP como el nuevo penltimo residuo del
polmero (Fig. (figura 3c).3C ). Por lo tanto, los filamentos PARM consisten en cadenas de
ParM-ADP, coronadas por las subunidades-PARM ATP aadidas ms recientemente. Polmeros
PARM ADP son muy inestables y tienen una alta probabilidad de que el desmontaje no ser
coronada por ParM-ATP ( 55 ).

Una caracterstica espectacular del sistema de polimerizacin ParM in vitro en ausencia de

ParR- parC es el cambio repentino despus de un perodo variable de elongacin bidireccional a
una etapa de rpido desmontaje catastrfica de un extremo del filamento, presumiblemente
provocada por un aumento en la tasa de hidrlisis del ATP terminal del polmero ( 55 ). Esto
refleja el hecho de que aunque la velocidad de adicin de la subunidad en los extremos del
filamento ParM es similar a la tasa de crecimiento de los filamentos de actina, la tasa de
desmontaje es 100 veces mayor que la de F-actina ( 55 ). Un patrn similar de inestabilidad
dinmica de los microtbulos es caracterstico eucariotas. La inestabilidad dinmica se piensa
que es necesario para evitar filamentos PARM intracelulares desde el cultivo hasta longitudes
significativas antes de que interactan con sus objetivos de plsmidos ( 55 ).

(Ii) Mecanismo de la funcin ParM.

Un importante cuerpo de evidencia indica que Parr acta como un puente entre los extremos del
filamento ParM y el ADN plsmido que se movern hasta los confines de la clula (Fig. 3B y
C ) ( 92 ,94 , 145 , 146 ). Plsmido R1, al igual que otros plsmidos unidad de copia, se replica
cerca midcell. Dmeros de protenas Parr luego interactan con los 10 iterones en
losparC dominios de los dos plsmidos hija, lo que lleva a la formacin de pares de plsmidos
se mantienen unidos por mltiples copias de Parr ( 94 ). Los extremos de un oligmero o
polmero ParM corto ( 55 ), entonces interactuar con el ParR- parC complejo, que separa el par
de plsmido y dejando a cada extremo del filamento unido a travs de Parr a una molcula de
plsmido de ADN (Fig. (figura 3B) .3B). El polmero crece entonces bidireccionalmente
mediante la adicin de nuevas subunidades Parm que se insertan entre el extremo del filamento
ParM y su ParR- parC tapa, empujando de este modo los dos plsmidos unidos hacia extremos
opuestos de la clula (Fig. 3B y C ). La adicin de cada nueva subunidad se cree que est
acompaada por la hidrlisis del ATP de la tapa-ParM ATP terminal (Fig. ,3C ), como se
discuti anteriormente.
La presencia de los ParR- parC complejos en los dos extremos del filamento ParM inhibe la
disociacin de subunidades durante el perodo de crecimiento del polmero, evitando que el
desmontaje catastrfica que de otro modo se producira despus de un perodo relativamente
limitado de crecimiento del polmero ( 55 ).El crecimiento del polmero se detiene cuando los

extremos del filamento se acercan a los extremos de la clula. La estructura intermedia era de
esperar, un filamento que se extiende a lo largo del eje largo de la clula con ADN de plsmido
unido en ambos extremos, se ha visualizado en estudios elegantes de doble etiqueta por MllerJensen et al. (Fig. (figura 3A,3A , panel 1) ( 145 ). Los polmeros PARM luego desmonte,
proporcionando subunidades PARM para iniciar el ciclo de conjunto de filamentos que se
producir despus de la replicacin del plsmido en el sitio de replicacin midcell en la clula
hija.

(Iii) el desmontaje del filamento y la migracin plsmido.

El mecanismo responsable de desencadenar el desmontaje del filamento ParM todava no se
entiende. Se consideran dos posibles modos de desmontaje filamento. (I) Desmontaje procede
bidireccionalmente a partir de los dos extremos del filamento intacto en respuesta a una seal
relacionada con la llegada de los plsmidos en los polos celulares. Para lograr esto, el balance
de montaje / desmontaje debe ser cambiado para favorecer el desmontaje de los extremos del
filamento. El interruptor de crecimiento del polmero para el desmontaje de polmero puede
reflejar una disminucin en la velocidad de adicin de la subunidad como consecuencia de la
baja concentracin citoplasmtica ParM resultante de su incorporacin en el polmero en
crecimiento, as como una disminucin en la sntesis de ParM debido a la autorregulacin de la
transcripcin del opern ( 41 ). Esto es probable que est asociado con la liberacin del
complejo de Parr-plsmido, que normalmente inhibe la prdida de subunidad. Se debe generar
clulas que contienen un solo filamento ParM con dos extremos libres. El filamento se har
progresivamente ms corto como subunidades son liberados de los dos extremos. Aunque las
estructuras intermedias previstas no se han detectado, esto podra explicarse si el desmontaje era
demasiado rpida para la deteccin fcil o si el desmontaje estocstica de protofilamentos dej
algunas protofilamentos individuales de polo a polo intacta a travs de gran parte del perodo de
desmontaje. (Ii) En un segundo modelo, el producto de desmontaje de midcell a cada uno de los
polos de la clula, iniciadas por escisin interna del filamento. Esto generara dos filamentos,
cada uno con un extremo libre situado en algn lugar cerca de midcell y un complejo de
plsmido-Parr en su extremo polar. Debido a que los extremos libres carecen de un
ParR- parC tapa, los dos filamentos se desmonte rpidamente de los extremos libres hacia los

polos de la clula. La escisin puede ser llevada a cabo por las protenas similares a factores
eucariotas que cortan los microtbulos y los filamentos de actina, tales como katanins y cofilins,
respectivamente ( 132 , 137 ). De acuerdo con este modelo, las estructuras intermedias
predichos, filamentos cortos Parm cada uno se extiende hacia midcell partir de un plsmido
situado en un polo celular, se han visualizado en experimentos de doble etiqueta (Fig. (figura
3A,3A , panel 2). En este punto no es posible hacer una eleccin definitiva entre estos dos
mecanismos de desmontaje alternativos, cada uno de lo que presumiblemente dejar los
plsmidos en los extremos opuestos de la clula.
El mecanismo de movimiento de los plsmidos separados de los extremos de la clula para sus
nuevos sitios de replicacin no se ha definido. Despus de haber desmontado el filamento ParM,
cada plsmido liberado debe moverse desde el extremo de la clula para el nuevo sitio de
replicacin, que se encuentra en midcell en la clula postdivision. Durante este proceso el
plsmido liberado se debe evitar que la difusin de nuevo en la otra mitad de la clula antes del
cierre septal. Aunque no se sabe cmo se logra esto, hay varias posibilidades. (I) El inicio del
desmontaje de polmero podra acoplarse a un evento en el ciclo celular para asegurarse de que
los filamentos PARM no comenzaran a desmontar antes de que ocurriera la tabicacin. (Ii) Una
trampa de la segregacin podra estar presente en los cuartos de clulas a plsmidos trampa
liberados en el polo proximal celular. La trampa podra, por ejemplo, ser proporcionado por la
maquinaria de replicacin del plsmido recin montado. Esto requerira que el aparato de
replicacin de montar en los cuartos de clulas antes de tabique formacin en midcell, tal vez en
las mismas posiciones en las que la maquinaria de divisin celular ensambla en las clulas de
rpido crecimiento ( 176 ). Un plsmido difusin del polo proximal encontrara y
comprometerse con este sitio antes de cruzar midcell. (Iii) Escisin del filamento ParM y
posterior desmontaje del filamento (de acuerdo con el segundo modelo en el prrafo anterior)
podra ser directa o indirectamente dependientes de la tabicacin, consistente con la observacin
de que los filamentos Parm no desmontan cuando es bloqueada por la tabicacin cefalexina
tratamiento (Fig. 2AR en referencia146 ). Esto garantizara que la liberacin del plsmido y la
difusin del polo no se producira hasta despus de que ocurri la tabicacin. En un modelo
simple, la escisin de filamentos podra ser un resultado directo de la formacin de
tabique. Protenas Escote incluso podran estar presentes en el borde delantero del tabique

ingrowing, donde se encuentran otras protenas funcionales ( 48 ). (Iv) Los plsmidos podran
asociarse con sitios de unin polares especficos hasta que se recibe una seal de su liberacin.
Todos los mecanismos anteriores, excepto por disrupcin mecnica del filamento ParM por el
tabique ingrowing, requerira factores de la clula husped.

MamK.
MamK es un homlogo de la actina que juega un papel en la organizacin subcelular de las
membranas magnetosomal. Esto define una nueva funcin de las protenas-actina como, el
posicionamiento de los orgnulos celulares en clulas bacterianas ( 101 ).
Magnetosomas

son

organelos

de

membrana-acotada

deMagnetospirillum

magneticum sp. AMB01 cepa que contiene cristales de hierro dentro de las estructuras de la
membrana-delimitada. Electron

cryotomography

ha

demostrado

que

las

membranas

magnetosomal representan invaginaciones de membrana de la membrana citoplasmtica que

estn organizados en matrices lineales que estn orientados generalmente a lo largo del eje largo
de la clula ( 101 ). Los magnetosomas estn bordeadas por estructuras filamentosas MamK que
se extienden a lo largo de la longitud de las estructuras organellar cerca de la curvatura interna
de la clula (Fig. 4A y B ) ( 101 ). Ellos se han visualizado por cryotomography de electrones y
etiquetando las clulas con MamK fusionado a GFP. Supresin demamK conduce a la
desaparicin tanto de los filamentos y la desaparicin de las matrices de membrana
magnetosome ordenados, lo que confirma que se requieren las estructuras del citoesqueletoMamK como para la organizacin magnetosoma dentro de la clula.

Higo. 4.
Estructuras citoesquelticas intracelulares formados por la protena-actina como MamK (A
y B) y el crescentin homlogo de filamentos intermedios (C). (A y B) cryotomography
Electron (A) y la ilustracin de dibujos animados (B) de magnetosomas situadas bajo la
superficie de ...
Estructuras citoesquelticas intracelulares formados por la protena-actina como MamK (A y B)
y el crescentin homlogo de filamentos intermedios (C). (A y B) cryotomography Electron (A) y
la ilustracin de dibujos animados (B) de magnetosomas situadas bajo la superficie de la
membrana citoplasmtica de Magnetospirillum magneticum . MamK filamentos se extienden a
lo largo de la superficie de la matriz lineal de las estructuras de membrana-magnetosome
limitada (flechas blancas en el panel A). (La micrografa electrnica fue reimpreso de referencia
101 con el permiso de la AAAS.) (C) El tipo filamento intermedio protena crescentin (verde),
visualizado por expresar crescentin GFP-etiquetados en las clulas de tipo salvaje, forma
estructuras filamentosas (flechas blancas) a lo largo de el borde cncavo de C. Crescentus .
Membranas (en rojo) se tieron con colorante FM 4-64. (Reproducido de la referencia 8 con
permiso de Elsevier.)

Tubulina homlogos
Dos tipos de homlogo de la tubulina, ejemplificados por FtsZ y las protenas BtubA y BtubB
de Prosthecobacter dejongeii , se han identificado en procariotas. FtsZ, BtubA / B, y tubulins
eucariotas

forman

una

familia

distinta

de

GTPasas

( 152 , 183 ). Las

estructuras

tridimensionales de los homlogos bacterianos de tubulina son similares a la estructura de

tubulinas eucariticas (Fig. (figura 1B),1B ), aunque homologa de secuencia entre las protenas
bacterianas y tubulins vara considerablemente (identidades de secuencia de 17% para FtsZ y
35% para BtubA / B con respecto a la tubulina eucariota [ 123 , 183 ]).
El anlisis filogentico sugiere que FtsZ y tubulina es probable que hayan evolucionado a partir
de un ancestro comn y que se han ido en una etapa temprana de la evolucin, mientras que
BtubA y BtubB han evolucionado ms recientemente, despus de la transferencia horizontal de
genes de un gen de tubulina o-tubulina como de un eucariota matriz ( 91 , 183 , 192 , 195 ). De
acuerdo con esta sugerencia, BtubA y BtubB son ms similares a la tubulina que a FtsZ en la
secuencia de aminocidos y la estructura de la protena, mientras que otros P. dejongeiigenes se
consideran filogenticamente ms cerca de sus homlogos procariotas ( 91 , 195 ). BtubA
contiene un dominio carboxilo-terminal que se parece al extremo carboxilo de la tubulina y FtsZ
en falta. Este dominio es importante para la interaccin de tubulina con protenas motoras y
protenas de tubulina asociada.

FtsZ.
FtsZ es esencial para la citocinesis bacteriana, y homlogos FtsZ altamente conservadas estn
presentes en casi todas las bacterias y arqueas. Homlogos FtsZ tambin estn presentes en
orgnulos eucariotas tales como plstidos, que se cree que se derivan de endosimbiontes
bacterianos (para una revisin, vase la referencia 5 ). Una variante FtsZ plsmido transmitidas
que juega un papel en la replicacin del plsmido tambin se encuentra en la virulencia
plsmido pXO1 de Bacillus anthracis ( 155 , 156) y en otros megaplasmids ( 207 ). El papel de
FtsZ en la divisin celular y orgnulos se ha revisado recientemente (47 , 133 , 172 ).

(I) El anillo de FtsZ.

FtsZ es una protena de divisin celular esencial en la mayora de las bacterias. Es el

componente ms antiguo conocido de la maquinaria de divisin a ser dirigido al sitio de la
divisin celular, en el que se ensambla en un anillo circunferencial, el anillo Z, que se encuentra
en la superficie interna de la membrana citoplasmtica (Fig. (Fig.5D) .5D). El anillo Z se ha
visualizado por microscopa inmunoelectrnica ( 15 ) y por microscopa de fluorescencia
utilizando el anticuerpo anti-FtsZ o FtsZ vinculado a GFP o uno de sus derivados (Fig. (figura
5A)5A ) ( 3 , 129). Se cree que el anillo Z a consistir en una serie de FtsZ protofilamentos
polimricos, pero no se sabe si protofilamentos individuales se extienden completamente
alrededor de la circunferencia de la celda o si hay un mayor nmero de polmeros ms cortos
que se extienden alrededor de la clula en algn tipo de configuracin escalonada.

Higo. 5.
Organizacin celular de FtsZ. (A a C) micrografas de inmunofluorescencia que muestran la
localizacin celular de FtsZ en B.subtilis clulas. (Reproducido de la referencia13 con
permiso de Elsevier.) (A) del anillo FtsZ en midcell durante el crecimiento vegetativo; (B)
que se extiende ...
Organizacin celular de FtsZ. (A a C) micrografas de inmunofluorescencia que muestran la
localizacin celular de FtsZ en B. subtilis clulas. (Reproducido de la referencia 13 con permiso
de Elsevier.) (A) del anillo FtsZ en midcell durante el crecimiento vegetativo; (B) que se
extiende estructuras helicoidales FtsZ durante la transicin del crecimiento vegetativo a la
esporulacin; (C) FtsZ anillos bipolares en una etapa posterior de la transicin. (D)
Representacin esquemtica de una porcin del anillo de cytokinetic (septasome) de E. coli .
FtsZ est anclado a la membrana celular por FtsA y ZipA, y las otras protenas septasomal
continuacin se aaden al complejo ( 63 ). Los smbolos que representan las protenas se

disponen para mayor claridad, y los dibujos animados no representa con precisin los detalles
de sus interacciones. OM, membrana externa; PG, peptidoglicano (murena); IM, membrana
interna.

La E. coli Z-anillo acta como un andamio para el montaje de por lo menos 10 protenas
adicionales en un anillo cytokinetic (tambin llamado el septasome o divisome)
(Fig. (Fig.5D)5D ) ( 63 ). La formacin del anillo cytokinetic es seguido por el crecimiento
hacia dentro del tabique despus de un retardo variable. Aunque FtsZ permanece asociado con
el borde interior del tabique ingrowing como invaginacin septal progresa, no se sabe si el
anillo Z juega un papel directo en el proceso de la constriccin. Adems de su papel en el
montaje de la maquinaria cytokinetic, FtsZ tambin puede desempear un papel en el
interruptor dependiente del ciclo celular de la sntesis de murena longitudinal a la sntesis de
murena preseptal en el sitio de divisin de futuro ( 34 , 174 ). El Z-anillo intacto y anillo
cytokinetic an no han sido aislados, y los detalles de sus estructuras no se conocen.
FtsZ es una protena de alta abundancia (reportado a estar presente en 3400 a 20.000 copias
por E. coli celular) ( 26 ,125 , 149 , 162 , 178 , 197 ). De los otros componentes del anillo
cytokinetic, FtsA y ZipA estn presentes en aproximadamente 740 y 1250 copias por
clula, respectivamente ( 66 , 178 ), mientras que los otros componentes del anillo son mucho
menos abundante, en 30 a 50 molculas por clula ( 176 ) . Los componentes de la septasome
llevan a cabo una variedad de funciones en el proceso de tabicacin, la mayora de las cuales no
se entienden bien.
Curiosamente, los estudios que utilizan la recuperacin despus de fluorescencia
photobleaching han demostrado que el anillo Z es una estructura altamente dinmico, con
molculas de FtsZ intercambio con las molculas de FtsZ en otra parte de la clula con una
media de tiempo de 30 segundos, dependiendo de las condiciones experimentales
(6 , 197 ) . No se sabe si el intercambio de molculas de FtsZ se produce a lo largo de la
longitud del polmero o slo en los extremos de los polmeros de FtsZ.Microscopa de fuerza
atmica ha indicado que los polmeros de FtsZ se someten a la fragmentacin y la reasociacin
en lugares internos ( 143 ). Por lo tanto, es posible que el intercambio se produce en sitios
internos dentro de polmeros de FtsZ, acompaados por la ruptura repetida y resellado en sitios
internos dentro de hebras de polmero. El potencial de rotura y el resellado del polmero

tambin podra proporcionar un mecanismo para la extrusin de las molculas de FtsZ durante
la contraccin del anillo Z que se produce durante la constriccin septal.

(Ii) fijar membranas del anillo Z.

Asamblea del anillo Z de E.coli requiere la protena FtsA o ZipA para anclar el anillo Z a la
membrana y, posiblemente, tambin para promover la estabilidad de montaje o
anillo. Cualquiera de protena es suficiente para soportar la membrana de asociacin de FtsZ y
la formacin del anillo Z-. Curiosamente, aunque sea FtsA o ZipA es capaz de soportar la
formacin de anillo Z, se requieren ambas protenas para la posterior entrada de las otras
protenas de la divisin en el anillo ( 63 ), y FtsZ, FtsA, y ZipA todo permanecen como
componentes permanentes de la anillo cytokinetic. FtsA homlogos se encuentran en muchas
especies bacterianas, mientras que ZipA se limita a un pequeo nmero de organismos. No se
sabe si las diferentes protenas en otras especies cumplen el papel de la E. coli protena ZipA.
ZipA contiene un dominio transmembrana hidrfobo nica que ancla el anillo Z a la membrana
( 160 ). En contraste, FtsA ancla el anillo Z a la membrana a travs de una hlice anfiptica en el
extremo carboxi de la protena FtsA, con las cadenas laterales de aminocidos hidrofbicos en
la cara no polar de la hlice insertar en el interior de la bicapa de la membrana ( 159 ) . Una
hlice anfiptica similar est presente en los extremos carboxilo de las protenas FtsA de otras
especies. El dominio de unin a la membrana helicoidal anfiptica de FtsA es similar en
estructura a la y es intercambiable con el dominio de unin a la membrana de la mente ( 159 )
(vase ms adelante), lo que demuestra la naturaleza relativamente no especfica del anclaje a la
membrana. No se sabe si el anillo Z-formado en ausencia de una de las dos protenas de anclaje
es estructuralmente idntico al anillo Z formado cuando ambas protenas de unin a membrana
estn presentes o si FtsA y ZipA realizan funciones en el proceso de divisin que no sea su
papel en la fijacin de anillo Z y septasome montaje.
FtsA es un homlogo de la actina, como se muestra por secuencia y similitudes estructurales
( 16 , 215 ). ElStreptococcus pneumoniae protena FtsA polimeriza in vitro en presencia de ATP
( 112 ), y la eliminacin de la E.coli secuencia de metas de membrana se asocia con la
formacin de filamentos FtsA dentro del citoplasma ( 159 ).La capacidad de los citoplsmica

FtsA para formar filamentos polimricos in vitro y la formacin de filamentos FtsA

en E. coli sugieren que FtsA puede jugar un papel-citoesqueleto como en la estructura del anillo
cytokinetic o en el proceso de tabicacin s mismo, adems de su papel en el anclaje de FtsZ a la
membrana.

(Iii) estructuras espirales FtsZ.

Adems de constituir la junta Z en los sitios de divisin, FtsZ tambin forma arrays helicoidales
transitorios que se enrollan alrededor del eje longitudinal de la clula, se asemeja a las
estructuras helicoidales formados por protenas del citoesqueleto MreB, Mbl, MreBH, y la
mente.
Evidencia que sugiere que las estructuras en espiral FtsZ pueden ser intermedios en la
formacin

del

anillo

de

FtsZ

ha

venido

de

los

estudios

de

esporulacin

vegetativo B.subtilis clulas ( 13 ). Durante esporognesis el sitio tabicacin cambia de midcell

a un sitio cerca de uno de los polos, lo que requiere reposicionamiento de la Z-anillo de su
ubicacin normal midcell. Durante este proceso, la desaparicin del anillo midcell es seguida
por la aparicin de nuevos Z-anillos en ambos polos celulares (Fig. (Fig.5C).5C ). Un anillo
luego desaparece, y la otra avanza para montar la maquinaria de divisin para la formacin del
septo de esporas polar ( 119 ). Ben Yehuda y Losick han demostrado que las estructuras en
espiral FtsZ se extienden a lo largo del eje largo de la celda durante el cambio de medial a
polares Z-anillos (Fig. (figura 5B),5B ), lo que sugiere que estos representan compuestos
intermedios en la redistribucin FtsZ proceso durante esporognesis ( 13 ).
Estudios de un mutante termosensible FtsZ sugirieron que las estructuras en espiral FtsZ pueden
ser intermedios en la formacin del anillo de FtsZ en vegetativamente crecimiento, as como
esporulacin B. subtilis clulas (140 ). Cuando se cultiva a la temperatura no permisiva, los
anillos de FtsZ no se formaron y fueron reemplazados por estructuras espirales cortas FtsZ
situadas en regiones internucleoid a lo largo de la clula. El cambio de nuevo a temperatura
permisiva, time-lapse microscopa de FtsZ-YFP mostr una rpida conversin de las espirales a
Z tricas.Sobre la base de estas observaciones, se sugiri que la mutacin provoca un bloque en

la conversin de FtsZ espirales a los anillos de FtsZ, lo que implica que las estructuras espirales
son precursores de la junta Z.
La relacin estructural entre espirales FtsZ y Z tricas no ha sido establecida. Las dos
estructuras pueden ser independientes, con las molculas de FtsZ dejando la espiral para formar
una estructura de anillo en el sitio de divisin.Por otro lado, es muy posible que el anillo Z no es
un verdadero anillo sino ms bien una estructura en espiral fuertemente comprimido derivado de
las estructuras helicoidales ms prolongados FtsZ discutidos anteriormente. Una eleccin entre
estas alternativas se requerirn estudios de mayor resolucin de Z-anillos dentro de las clulas
y / o el aislamiento y caracterizacin del propio anillo Z-.
Tambin se ha demostrado que las estructuras helicoidales FtsZ estn presentes
en E. coli clulas que sobreproducen FtsZ o FtsZ-GFP, una protena que no es completamente
funcional, pero que se utiliza como un marcador para Z-anillos y otras estructuras FtsZ en las
clulas vivas ( 129 ,199 ). Las matrices de FtsZ en espiral muestran ondas peridicas de
oscilacin con una periodicidad de 30 a 60 s (205 ). Este comportamiento oscilatorio no fue
afectado por la prdida del citoesqueleto helicoidal MreB, pero la periodicidad se interrumpi
en un minCDE mutante de delecin, en el que se perturba la colocacin sitio de divisin
( 205 ). La relacin de estas observaciones con el comportamiento de las protenas Min, que son
necesarios para la identificacin del sitio de divisin y que tambin estn organizados en
estructuras helicoidales oscilantes (discutido abajo), queda por definir.

(Iv) la polimerizacin y despolimerizacin FtsZ.

La estructura tridimensional de FtsZ de Methanococcus jannaschii se asemeja a las estructuras
de - y -tubulinas (Fig. (Figura 1B).1B ).Tambin hay similitudes en las caractersticas de
polimerizacin de FtsZ y tubulins. En ambos casos, las protenas se polimerizan
unidireccionalmente en protofilamentos lineales en una manera dependiente de GTP. Bajo las
condiciones adecuadas, la FtsZ y tubulina filamentos ambos haces de forma y lminas
( 45 , 123 ).Mediciones reomtricas han indicado que haces de polmeros de FtsZ forman
estructuras muy elsticas, y se sugiri que esto podra ser til en el mantenimiento de la junta Z
bajo las presiones generadas durante la constriccin septal ( 52 ).

Sin embargo, no hay evidencia de que FtsZ forma estructuras microtubulares in vitro o in vivo,
y hay diferencias significativas en la cintica de intercambio de nucletidos entre FtsZ y los
filamentos de tubulina.Tambin hay evidencia convincente de que los filamentos de FtsZ se
componen de polmeros de FtsZ-PIB tapados con una subunidad FtsZ-GTP cuya hidrlisis
conduce a un rpido desmontaje de polmero, como es el caso de los polmeros de tubulina. En
lugar de ello, el polmero parece consistir en subunidades FtsZ-GTP, y FtsZ desmontaje de
polmero in vitro parece estar regulada por un equilibrio entre las velocidades de hidrlisis de
GTP

GTP

reconsolidacin

FtsZ

lo

largo

de

la

longitud

del

filamento

( 82 , 133 , 142 ,157 , 172 ). Esta conclusin se basa en la observacin de que la hidrlisis del
GTP unido conduce a desensamblaje de los filamentos de FtsZ menos suficiente GTP est
disponible para intercambiar con el producto PIB (revisado en referencia 172 ). Aunque los
cambios en relacin GTP / GDP afectan a la tasa de desmontaje de polmero, es poco probable
que esto podra explicar la prdida de subunidades de FtsZ el anillo Z durante la constriccin
del tabique, porque la alta relacin GTP / GDP en el citosol debera proporcionar suficiente a
GTP evitar el desmontaje de filamentos espontnea. La cuestin importante del mecanismo por
el que el anillo Z se hace ms pequeo durante el crecimiento hacia dentro septal permanece
abierta.
Hay una barrera de energa para la iniciacin y primeros pasos de la polimerizacin de tubulina,
proporcionando una barrera para la nucleacin de nuevos filamentos ( 172 ). Si esto era cierto
para la polimerizacin de FtsZ, podra proporcionar un punto de regulacin de la formacin
protofilament durante el montaje de la Z-ring o las estructuras espirales FtsZ. Tampoco se sabe
si el montaje o el desmontaje de polmeros de FtsZ dentro de las clulas intactas se modifica por
las protenas auxiliares, como es cierto para los microtbulos en las clulas eucariotas.

(V) El Reglamento de la asamblea y la estabilidad del anillo Z.

El montaje, la estabilidad, y la funcin de la junta y el anillo Z cytokinetic deben ser regulados
tanto espacial como temporalmente durante el ciclo de divisin normal.Regulacin espacial
restringe la formacin de anillo Z-en el sitio deseado para la formacin de tabique posterior
(revisado en la referencia 175 ). Esto se logra principalmente por las protenas de seleccin de
sitios Min, que se organizan en un sistema de citoesqueleto que se discute ms adelante en esta

revisin. Se requiere regulacin temporal para asegurar que la formacin de tabique se produce
en el momento correcto en el ciclo celular, despus de que se completaron la replicacin
cromosmica y la segregacin. El control de la concentracin de protena FtsZ celular mediante
la regulacin de la transcripcin, traduccin, y / o degradacin puede jugar un papel en la
regulacin de la formacin de anillo Z en algunos casos, como, por ejemplo, durante el ciclo
celular de C. Crescentus ( 97 , 165 , 179 ). Sin embargo, en la mayora de los casos la regulacin
se lleva a cabo mediante el uso de protenas efectoras positivos o negativos que regulan el
montaje o la estabilidad de anillo Z.Una serie de protenas efectoras han sido identificados
(Tabla (Tabla 1)1 ) (revisado en las referencias 133 y 172 ), y otros probablemente an no se
han descubierto. Hasta ahora no se sabe cmo estos u otros factores reguladores de determinar
el momento de la tabicacin en la clula.

TABLA 1.
Reguladores positivos y negativos de la formacin del anillo de FtsZ

Regulacin de la formacin de anillo Z tambin se utiliza como un mecanismo de control de

daos en los casos de segregacin cromosmica retrasado o de daos en el ADN
(212 , 221 ). En estos casos, dara como resultado el dao del ADN irreparable si tabicacin
tuvo lugar en los cromosomas no segregados o antes del ADN daado es
reparado y segregada por la clula. Para evitar esto, la formacin de anillo Z
est bloqueado como parte de la respuesta SOS a las perturbaciones del
ADN hasta que el defecto se corrige ( 221 ).

BtubA / B.
Un segundo grupo de tubulina homlogos bacterianos se ejemplifica por el BtubA y BtubB
( b acterialbaera Ulin) protenas. A diferencia de FtsZ, que est presente en casi todas las especies de
bacterias, BtubA BtubB y hasta el momento slo han sido identificados en el gnero Prosthecobacter en
la divisin Verrucomicrobia .Las protenas de Prosthecobacter dejongeii se han estudiado con cierto
detalle. BtubA y BtubB son los nicos homlogos de tubulina en este organismo, y los estudios
cristalogrficos de electrones indican que las estructuras tridimensionales de monmero BtubA y BtubA /
B heterodmero se asemejan a los de la tubulina (Fig. (Figura 1B)1B ) (183 ) . Varias lneas de evidencia,
incluyendo las similitudes en las propiedades de polimerizacin, sugieren que el sistema BtubA / B puede
proporcionar un buen sistema modelo para el estudio de ciertos aspectos de la conducta de la tubulina y
ensamblaje de los microtbulos.

Polimerizacin (i) BtubA / B.

BtubA y BtubB copolimerizan en presencia de GTP en protofilamentos doble helicoidal y
pequeos anillos ( 183 , 192 ). Formacin de filamentos requiere ambas protenas, aunque
BtubB puede auto-ensamblarse en ~ 35 nm de ancho anillos en la ausencia de BtubA, mientras
que BtubA no puede polimerizar por s mismo. El BtubA / B protofilamentos autoasociarse en
haces que son a veces organizados alrededor de una cavidad central, generando una estructura
de microtbulos similares.La distancia entre las vueltas helicoidales de la protofilament BtubA /
B es similar a la de la tubulina y FtsZ protofilamentos ( 183 ). El modo cooperativo de
polimerizacin y el auto-ensamblaje de los polmeros en estructuras tubulares ( 192 ) son una
reminiscencia del montaje de estructuras microtubulares de tubulina eucariota, que tambin se
compone de subunidades heterodmero (-tubulinas). Polimerizacin BtubA / B tambin se
asocia con un aumento en la actividad GTPasa, similar a la activacin GTPasa de
polimerizacin dependiente que se produce con la tubulina y FtsZ polimerizacin. Las
estructuras BtubA / B tubulares son ms gruesos que los microtbulos eucariotas (~ 40 nm
frente a 25 nm de dimetro exterior) y se componen de dos capas de protofilamentos en lugar de
una sola capa. Polmeros estables tambin se formaron cuando BtubA y BtubB se coexpresan
en E. coli clulas, como se muestra por la formacin de filamentos largos, rectos que
reaccionaron con el anticuerpo contra-BtubB ( 192 ).Estudios de localizacin similares an no

se han hecho en P.dejongeii para confirmar la suposicin probable que las estructuras tubulares
intracelulares se componen de BtubA / B. Desde P. dejongeii no contiene un equivalente de la
tubulina homlogo FtsZ en el 95% del genoma que se ha completado, es concebible que
BtubA / B tambin podra desempear un papel en la citocinesis.

Estructuras de microtbulos como en Verrucomicrobia.

Ectosymbionts de ciliados hypotrich marinos (Euplotidium especies) se han caracterizado como
Verrucomicrobia , la divisin que tambin incluye P.dejongeii (vase ms arriba), a pesar de que
son distintos deP. dejongeii ( 158 ). Durante una etapa de su ciclo de vida complejo, el
ectosymbiont desarrolla un aparato extrusive diseadas para proteger contra depredadores. El
aparato est rodeado por una cesta compuesta de haces de estructuras tubulares que permanecen
dentro de la clula despus de que se extruye el aparato. El dimetro exterior de los tbulos es $
~ $ 22 nm, y el dimetro del lumen es ~13 nm (citada en la referencia 158 ), similar a las
dimensiones de los microtbulos eucariotas ( 206 ). Los tbulos reaccionan con varios
anticuerpos monoclonal antitubulina y desmontar en presencia del inhibidor de microtbulos
nocodazol, apoyando la idea de que son homlogos de los microtbulos eucariotas
( 158 , 173 ). Los componentes de estas estructuras tubulares an no han sido identificados, y
an no se sabe si los organismos contienen homlogos BTub.
El hecho de que las estructuras microtubulares estn presentes en estos organismos y la
demostracin de que las protenas BtubA / B de P. dejongeii parecerse -tubulinas en su
capacidad para polimerizar en estructuras tubulares sugieren que los sistemas verrucomicrobial
pueden resultar tiles para el estudio de los aspectos de la tubulina de los microtbulos y el
comportamiento, especialmente si los sistemas genticos apropiados se pueden desarrollar.

Los homlogos de protenas de filamentos intermedios

Protenas de filamentos intermedios comprenden la tercera clase importante de protenas del
citoesqueleto eucariota.Hasta que la identificacin de la protena bacteriana crescentin-IF
gustara, si se crea que las protenas a ser nico para las clulas animales ( 25 ). El papel
principal de los filamentos intermedios es la de actuar como un andamio esqueltico que ayuda

a mantener la forma celular y la integridad celular y nuclear mediante la proteccin contra las
agresiones mecnicas (revisado en las referencias 71 ,72 , y 104 ). Hay un nmero de subclases
de protenas eucariotas SI, basadas en anlisis de la secuencia y la distribucin celular. Estos
incluyen citoplasmtica SI protenas (queratinas, vimentina y desmina, y las protenas de los
neurofilamentos triplete) y laminas nucleares ( 71 ,72 , 104 ). Se requiere que la asociacin de
filamentos intermedios con los microtbulos para el mantenimiento de la red si (revisado en
referencia 22 ).

Crescentin.
Crescentin es la nica citoesqueleto SI homlogo hasta el momento identificado en clulas
procariotas. Es responsable de la forma de la forma de coma organismo C. crescentus ( 8 ) y fue
identificado en una pantalla para C. crescentus mutaciones de insercin de transposn que
afectaron la forma celular. La prdida del gen estructural para crescentin, Cres , conduce a un
cambio en la forma celular de coma para varilla. La asignacin de crescentin como una protena
homlogo SI se basa principalmente en su organizacin del dominio de protena
predicha. Crescentin tiene aproximadamente 25% de identidad de secuencia y 40% de similitud
con protenas eucariotas SI. Sin embargo, se seal que hay grados de similitud de secuencias
similares a la no-IF protenas que contienen extensos motivos en espiral-bobina ( 8 ). Ms
especficamente, crescentin y SI protenas comparten una organizacin de dominio predicho de
cuatro estructuras centrales espiral de la bobina con una discontinuidad en la estructura
caracterstica de repeticin heptad dentro del ltimo segmento espiral de la bobina ( 72 ).
Evidencia de que crescentin forma una estructura del citoesqueleto dentro de la clula vino de
estudios de inmunofluorescencia que muestran que crescentin est presente como una estructura
filamentosa extendida a lo largo del lado cncavo de la C. crescentus de clulas (Fig. (figura
4c)4C ) ( 8 ). Esto se confirm en clulas vivas por estudio de no funcionales fusiones
crescentin-GFP que se coexpresan con crescentin sin etiquetar y por la observacin de que la
forma curvada de la clula se pierde cuando crescentin est ausente ( 8 ). Estos resultados
sugieren que la estructura filamentosa lo largo de la curva interior de la clula es un elemento
del citoesqueleto basado en crescentin que establece o mantiene la forma de coma de la clula.

La presuncin de que las estructuras filamentosas celulares curvas se componen de crescentin se

apoya en estudios in vitro que muestran que crescentin purificada rpidamente auto-ensambla
en largos filamentos. El proceso de auto-ensamblaje no requiere nucletidos u otros cofactores,
asemejndose de ese modo SI polimerizacin de protenas y que difiere de la polimerizacin de
la tubulina bacteriana o eucariota o actina homlogos ( 8 ). Los filamentos crescentin tambin se
parecen a las FI eucariotas en sus propiedades viscoelsticas de montaje y rpidas, lo que indica
que la red crescentin es similar a un slido y resistente a las tensiones mecnicas (Osigwe Esue
y Denis Wirtz, comunicacin personal). Sin embargo, los filamentos crescentin difieren de las
FI eucariotas en su pobre capacidad de resistencia mecnica y ausencia de rigidez cepa despus
de cizallamiento mecnico.
Curiosamente, las estructuras del citoesqueleto MreB crescentin y ambos son necesarios para la
produccin de una clula en forma de coma. En ausencia de MreB, C.crescentus clulas se
vuelven esfrica a pesar de la presencia de crescentin, mientras que la prdida de crescentin en
la continua presencia de MreB conduce a una transicin de comas a la varilla ( 8 ). Esto implica
que MreB se requiere para el modo longitudinal del crecimiento celular que conduce a una
forma de varilla, mientras que el papel de crescentin es impartir una curvatura a la clula en
forma de barra. La forma curvada no es intrnseca a la estructura polimrica crescentin, ya
crescentin polimeriza in vitro en filamentos lineales. El hecho de que aislados sacculi murein
de C. Crescentus conservan su forma curvada general ( 163 ) tambin argumenta en contra de la
idea de que una estructura esqueltica crescentin rgida juega un papel mecnico en la
determinacin de la forma.Por lo tanto, parece que crescentin acta indirectamente en
establecimiento de la forma de coma al afectar directa o indirectamente la organizacin celular
de la murena maquinaria biosinttica forma determinante. MreB normalmente se requiere para
la organizacin de los componentes de biosntesis del peptidoglicano en una disposicin
helicoidal longitudinal (discutido anteriormente). Debido crescentin altera la forma celular slo
en clulas que tambin contienen MreB, crescentin puede actuar por impartir una forma curvada
a la organizacin helicoidal de otro modo longitudinal del citoesqueleto MreB, con lo que
secundariamente alterar la distribucin celular de la maquinaria biosinttica de murena.

La Clase mente / para del bacterianas Citoesquelticas Protenas

Adems de los homlogos de las protenas del citoesqueleto eucariotas, clulas bacterianas
contienen otro grupo de protenas del citoesqueleto que no tienen homologa con elementos del
citoesqueleto eucariotas.Estos pertenecen a la gran superfamilia mente / Par. Se caracterizan
por la presencia de motivos ATPasa Walker-tipo A desviadas ( 102 , 222 ) y se clasifican como
protenas del citoesqueleto en funcin de su presencia en estructuras filamentosas organizados
dentro de las clulas y, cuando examin, su capacidad de auto-ensamblan para formar a largo
filamentos polimricos in vitro. El uso de protenas de ATPasa de tipo Walker como
componentes del citoesqueleto parece ser exclusivo de las clulas bacterianas. Se distinguen de
los grandes grupos de noncytoskeletal ATPasas tipo Walker por la presencia de un Walker
desviada Un motivo (GXGGXHK [TS]) dentro de la P-loop nucletidos vinculante que se
encuentra cerca de los extremos N de las protenas ( 102 ), aunque unas pocas protenas
bacterianas noncytoskeletal tambin contienen el desviado Walker Un motivo, incluyendo NifA,
ARSA, y otros ( 102 , 222 ).
Dividimos las protenas MinD / para en dos subgrupos.Protenas del subgrupo mente estn
involucrados en la colocacin de los sitios de divisin bacteriana y plastidios, mientras que las
protenas del subgrupo ParA se dedican principalmente a la particin de ADN. Homlogos
Mente en eubacterias y plastidios tienen una secuencia de seis aminocidos altamente
conservada llamada la caja de la mente (GLRNLD) que no est presente en las protenas del
subgrupo Par ( 224 ).

Subgrupo 1: mente. (I) El sistema minCDE.

La mente es una protena del citoesqueleto que juega un papel clave en la determinacin del
lugar de colocacin del tabique en E. coli, en cooperacin con los otros dos productos de los
genes de la min opern, MinC y el mo (revisado en referencia175 ). Protenas Min tambin
regulan la colocacin sitio de divisin en otras especies y la colocacin de los sitios de divisin
organellar de plastidios de plantas y bacterias fotosintticas (procariotas 5 ). Las protenas Min
restringen la tabicacin al sitio midcell deseada mediante la prevencin de montaje de la
maquinaria de divisin en los sitios ms cerca de los extremos de la clula. En E. coli se trata de
un ciclo de oscilacin nico en el que las protenas se concentran dentro de una zona polar
asociada a la membrana que oscila de polo a polo. Como se discute ms adelante, la oscilacin

de polo a polo de las protenas Min implica la redistribucin cclica de las protenas dentro de
un marco citoesqueleto cuenta que se extiende a lo largo de la longitud de la clula
( 187 ). En B. subtilis , que carece de un homlogo de minas, nonoscillating MinCD zonas
polares estn presentes en ambos extremos de la clula ( 135 , 136). Formacin de
la B. subtilis zonas polares est regulada por la protena divIVA, que no est relacionado con la
ma y parece utilizar un mecanismo de localizacin diferente ( 42, 43 ). Algunas bacterias,
como C. crescentus , carecen de homlogos de protenas min, y no se sabe cmo se lleva a cabo
la seleccin del sitio de divisin en estos organismos.La organizacin del citoesqueleto de las
protenas Min hasta el momento se ha informado de la E. coli ( 187 ) yNeisseria
gonorrhoeae ( 201 ) las protenas.

(Ii) El citoesqueleto mente.

De alta resolucin de microscopa de fluorescencia utilizando tcnicas de seccionamiento y de
deconvolucin pticos han demostrado que las molculas de la mente, junto con MinC y el mo,
se organiza en estructuras helicoidales que se enrollan alrededor de la E. coli cilindro celular
justo dentro de la membrana citoplasmtica (Fig. 6A a D ) ( 187 ). En algunos casos las
estructuras parecen estar compuestas de un par de hebras helicoidales entrelazados. Aunque las
estructuras helicoidales MinD asemejan a las estructuras en espiral que componen el
citoesqueleto MreB (comparar la figura. Figura 2A2A y and6B),6B ), el MreB y mente
helicoidal matrices son estructuras independientes, como se muestra por sus diferentes
densidades helicoidales ( 188 ) y por las diferencias entre la localizacin de las estructuras en
espiral MreB y la mente durante el ciclo celular. Aunque es probable que cada filamento
helicoidal se compone de varios polmeros mente, no se sabe si cada hebra consiste en
polmeros cuenta que se extienden desde el polo celular al final de las estructuras helicoidales,
como se indica en la figura. Fig.6H,6H , o si cada filamento helicoidal se compone de una
matriz de polmeros ms cortos.

Higo. 6.
Organizacin helicoidal de las protenas MinD / para citoesqueleto. (A a D) MinD marcado
con fluorescencia (A y B), la ma (C), y MinC (D).(Reproducido de la referencia 187 , con
autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia Nacional de Ciencias, EE.UU.) (A ...
Organizacin helicoidal de las protenas MinD / para citoesqueleto. (A a D) MinD
marcado con fluorescencia (A y B), la ma (C), y MinC (D). (Reproducido de la
referencia 187 , con autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia Nacional
de Ciencias, EE.UU.) (A y B) la distribucin helicoidal de la mente cuando
coexpressed con la ma. (A) una estructura helicoidal brillante mente est presente
en un extremo de la clula, lo que representa una zona polar Mind (flecha blanca).

Una estructura enrollada menos intensa se extiende hasta el otro extremo de la

clula, presumiblemente representando la estructura helicoidal subyacente de polo
a polo mente. (B) MinD corto zonas polares son visibles en ambos extremos de la
clula (flechas blancas), presumiblemente uno que representa una zona creciente y
la otra que representa una zona polar en el extremo opuesto de la clula, en la
ltima etapa de desmontaje, como se ilustra en el panel H. (C) distribucin
helicoidal de la ma cuando coexpressed con la mente. La mayora de las molculas
de la ma estn presentes en un bucle sin fin (el anillo MinE, flecha roja) de la matriz
helicoidal mina que representa la zona polar. La flecha blanca indica bobinas zona
polar. Micrografas en los grupos A a C son imgenes deconvolved. (D) la
distribucin helicoidal de MinC cuando coexpressed con la mente y la ma (la
reconstruccin tridimensional de una clula seccionado pticamente). La flecha
indica las bobinas MinC de la zona polar. (E) la distribucin helicoidal de Par
marcado con fluorescencia a partir del plsmido pB171. 1, imagen Nomarski; 2, de
imgenes en bruto; 3, imagen deconvolved. (Reproducido de la referencia 39 con
permiso de Blackwell Publishing.) (F) Mecanismo de crecimiento del polmero mente
en la cara citoplasmtica de la membrana interna de la adicin de subunidades
mente ATP. (G) La estimulacin de desmontaje de polmero MinD-ATP por un anillo
mo. Molculas de Minas en el anillo E estimulan la actividad ATPasa de la terminal
de la subunidad MinD-ATP en el polmero. La hidrlisis convierte MinD-ATP-ADP a la
mente, que se libera a partir del final del polmero. (H) de montaje y desmontaje
cclica de la mente zonas helicoidales polares (PZ) y el anillo de la ma, que conduce
a oscilaciones de polo a polo. Subunidades MinD-ATP son de color amarillo,
subunidades mente ADP son de color naranja, y las subunidades Los mos son de
color verde. Ver texto para ms detalles. Las estructuras helicoidales slidos
amarillos representan la estructura helicoidal MinD subyacente que se extiende
entre los dos extremos de la clula. Mente estructuras helicoidales tambin
contienen MinE y Minc, que no se muestran para la simplificacin.

En los estudios originales que describen la organizacin helicoidal del sistema Min, las
estructuras de la mente en espiral se ven claramente slo en las clulas que expresan la mente y
MinE o expresar las tres protenas Min. Esto sugiri que MinE podran ser necesarios para la
organizacin o la estabilidad de los arrays helicoidales.Desde entonces, sin embargo, las
estructuras helicoidales MinD que se extienden entre los dos extremos de la clula se han
visualizado en ausencia de mina o MinC (L. Ma y L. Rothfield, observaciones no
publicadas). De acuerdo con la conclusin de que la mente es el elemento estructural bsico de
las estructuras del citoesqueleto Min, MinC y el mo estn presentes en estas estructuras slo
cuando la mente tambin est presente ( 187 ).
En ausencia de la ma, la mente enrollada ni MinD estructura / MinC parece extenderse entre los
dos extremos de la clula. Sin embargo, la ma provoca la drstica redistribucin de la mayor
parte de la mente, la ma, y MinC molculas a las bobinas helicoidales en un extremo de la
clula (la zona polar) (Fig. 6A a D ) ( 187 ). Adems de su presencia en la zona polar, en
muchas clulas mina tambin est presente en una segunda estructura, el anillo de minas.El

anillo MinE representa una extensin de la estructura helicoidal minCDE polar, en el que una
alta concentracin de MinE da la apariencia de un anillo (Fig. (Fig.6C).6C ). Las zonas polares
y E-anillos experimentan oscilaciones repetitivas de polo a polo en el que las estructuras se
repetitivamente montarse y desmontarse en polos alternativos con un perodo de ~ 90 s por ciclo
( 78 , 167 , 168 , 177 ), como se explica ms adelante .

(Iii) la estructura de la mente.

Las estructuras cristalinas de la mente de tres organismos termfilos se han determinado, es
decir, la mente-1 de Archaeoglobus fulgidus ( 24 ) (Fig. (Fig.1C),1C), la mente de Pyrococcus
furiosus ( 68 ), y la mente-2 dePyrococcus horikoshii ( 180 ). Las tres protenas son similares en
la secuencia primaria y la estructura tridimensional. Las protenas se cristaliz como la forma
unida-ADP ( 68 , 180 ), como la mente unida a la ATP analgica AMPPCP ( 68 ), y que la
protena de nucletido libre ( 24 ). En todos los casos mente estaba presente como un
monmero. Estudios de filtracin en gel han sugerido que la mente en concentraciones
relativamente altas puede dimerize en presencia de ATP ( 76 ), y se ha propuesto que la
dimerizacin inducida por ATP desempea un papel en la asociacin a la membrana de la mente
( 76 , 77 ). La inobservancia de dmeros en los estudios de rayos X puede reflejar el hecho de no
cristalizar hasta ahora la forma nativa con destino a ATP de la protena.
Las estructuras de la mente de las especies termfilas se han utilizado ampliamente para guiar
los estudios de estructura-funcin de E. coli y otros organismos ( 77 , 128 ,201 ). Sin embargo,
todava no ha habido ningn estudio de la funcin biolgica o la organizacin celular de la
mente en los organismos termfilos. Adems, las cepas termfilas carecen aparentes homlogos
MinC y el mo. Por lo tanto, no se sabe cmo funcionalmente similar las protenas MinD
termfilos son las protenas mente del E. coli , B. subtilis , y N. gonorrhoeae , para lo cual se
han realizado estudios biolgicos ms clulas, pero cuyas estructuras en tres dimensiones an
no han sido determinadas.

(Iv) la polimerizacin mente.

MinD polimeriza en filamentos cortos de doble cadena cuando se incuba con ATP, con una
anchura de filamento suficiente para acomodar un polmero MinD lineal en cada hebra

( 198 ). Sorprendentemente, la adicin de vesculas de fosfolpidos bicapa limitada hace que los
filamentos de la mente para aumentar en gran medida en el nmero y la longitud y a la libre
asociado en haces de filamentos, en consonancia con la idea de que los protofilamentos de la
mente citoesqueleto helicoidal se auto-ensamblan en la superficie de la membrana
citoplasmtica.
La adicin de MinE aumenta significativamente el alcance de la agrupacin (Fig. (figura
7A)7A ) ( 198 ). Esto implica aumento de las interacciones de lado a lado de los protofilamentos
importa, ya sea debido a la ma reticulacin oa los cambios conformacionales inducidos por la
ma. MinE existe como un dmero antiparalelo, con el dominio N-terminal de cada una de las
dos subunidades que se extienden desde lados opuestos de la estructura dmero ( 100 ). Desde el
dominio N-terminal contiene los sitios de minas que interactan con la mente ( 127 ), lo que
proporciona un mecanismo plausible por el que dmeros mina puede reticular filamentos MinD
adyacentes para formar los haces Mind (198 ). La capacidad de las minas con objeto de inducir
la agrupacin de filamentos mente pudiera explicar el aumento en el nmero protofilament que
est implcito en la alta concentracin de la mente y la ma dentro de las bobinas helicoidales de
las zonas polares (Fig. 6A y C ).

Higo. 7.
En la polimerizacin in vitro de las protenas del citoesqueleto de la superfamilia de mente /
Par.(A) La formacin de haces de filamentos MinD en presencia ma, ATP, y vesculas de
fosfolpidos. Un extremo del haz es notablemente desgastado debido a la presencia de la
ma. (Reproducido ...
En la polimerizacin in vitro de las protenas del citoesqueleto de la superfamilia de mente /
Par. (A) La formacin de haces de filamentos MinD en presencia ma, ATP, y vesculas de
fosfolpidos. Un extremo del haz es notablemente desgastado debido a la presencia de la ma.
(Reproducido de la referencia 198 , con autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia
Nacional de Ciencias, EE.UU.) (B) Formacin de un para pTP228 (PARF) haz de filamentos en
presencia de parB pTP228 (PARG) y ATP. ParB pTP228 (PARG) estimula la formacin del
extremo deshilachado (s) del para pTP228 (PARF) paquete. (Reimpreso de referencia 11 con
permiso de Macmillan Publishers Ltd.) (C) Formacin de filamentos Soj en presencia de ADN y
ATP. (Reproducido de la referencia 116 con permiso de Macmillan Publishers Ltd.)

Paradjicamente, la ma tambin hace que el desmontaje de los filamentos de la mente en un

proceso que implica la activacin de la actividad de la mente ATPasa ( 79 , 198 ).Esto puede
estar relacionado con la observacin de que los haces MinD gruesas que se forman en presencia
ma y mostrar fosfolpidos marcados deshilachado, predominantemente en un extremo del haz
de filamentos (198 ) (Fig. (figura 7A).7A ). Esto implica que, adems de la interaccin a lo

largo de la longitud de los filamentos para promover la agrupacin, mina tambin se puede unir
a un extremo del haz de filamentos. Esto puede explicar el hecho de que el anillo MinE se forma
solamente en un extremo (el extremo medial) de la estructura helicoidal que comprende la zona
polar MINDE (Fig. 6C y H ). El deshilachado podra representar una etapa en la reaccin
desmontaje filamento que es inducida por MinE in vitro ( 198 ) y por el anillo de minas en vivo
( 186 ). Deshilachado similar se produce en un extremo (el extremo ms) de los haces de
microtbulos durante el desmontaje de los microtbulos ( 7 ). No se sabe si la mente la
paquetizacin y efectos deshilachado puede ser disociado de la variacin de la concentracin de
la ma.

(V) La membrana focalizacin de la mente.

La asociacin a la membrana de la mente est mediada por una secuencia de membrana de
metas de C-terminal (MTS) que vara entre 8 y 12 aminocidos en diferentes especies
( 77 , 202 ). El MTS aislado es estructurado en un entorno acuoso, pero se convierte en una hlice anfiptica cuando interacta con bicapas de fosfolpidos ( 203 ). La regin C-terminal que
comprende el sistema multilateral de comercio de la A.fulgidus MinD (determinado en ausencia
de fosfolpidos) tambin es estructurado ( 24 ). Las cadenas laterales hidrfobas de los
aminocidos en la cara no polar de la hlice anfiptica se intercalan en la bicapa, de ese modo la
protena de anclaje a la membrana ( 203 , 226 ). La asociacin a la membrana se estabiliza
mediante la polimerizacin de la mente unida a la membrana ( 203 ).
Molculas mente de muchas especies contienen una MTS similar y un MTS similar tambin
media la unin a la membrana de la E. coli protena de divisin celular FtsA (159 ). Las
secuencias de MTS FtsA y la mente se pueden intercambiar sin efecto significativo sobre la
funcin de unin o protena de la membrana ( 159 ). Aunque toda la mente MTS se predice que
tienen una alta propensin a formar hlices anfipticas, hay diferencias en la secuencia y en la
longitud de las hlices que pueden conducir a diferencias en la afinidad para diferentes lpidos y
en la fuerza de unin a la membrana ( 203 ). Esto puede proporcionar un mecanismo para
optimizar la protena para uso en organismos con diferentes composiciones de fosfolpidos de la
membrana ( 203 ).

La mente MTS puede ser sustituido por el totalmente ajeno hidrofbico de anclaje de membrana
43-amino-cido de citocromo b 5 sin interferir con su orientacin a la E. colimembrana y la
formacin de las estructuras del citoesqueleto helicoidal asociadas a la membrana ( 204 ).Sin
embargo, la mente que contiene el citocromo b 5 de anclaje de membrana pierde la capacidad
para formar zonas polares en E. coli clulas en la presencia de minas ( 204 ).Esto puede indicar
que la gran hidrofbica citocromo b 5dominio de unin a la membrana puede impedir la
redistribucin de la mente asociada a la membrana mediante el aumento de la fuerza de su
asociacin a la membrana.
Algunos homlogos putativos MinD no contienen un MTS reconocible. El significado de esto
es desconocida, puesto que los estudios biolgicos o bioqumicos de la funcin de la mente se
han llevado a cabo slo con unas pocas especies.

(Vi) las interacciones mente-bicapa.

La mente es el primer ejemplo bien estudiado de un elemento del citoesqueleto bacteriano que
se une directamente a las membranas. MinD se une a las vesculas de fosfolpidos en presencia
de ATP o un anlogo de ATP no hidrolizable adecuado, pero no en su ausencia ( 76 , 110 ). Por
lo tanto, la unin de nucletidos es suficiente para soportar la membrana de unin de la
mente. Se ha sugerido que la funcin de unin de ATP es promover la formacin de dmeros de
la mente en el citoplasma, que conduce a un cambio conformacional que expone las secuencias
(unin a la membrana 126 ). De acuerdo con este modelo, ATP induce la formacin de dmeros
de la Mente en la ausencia de fosfolpidos, aunque en concentraciones relativamente altas de la
mente ( 77 ).Como alternativa, en lugar de actuar mediante la promocin de la dimerizacin
MinD, ATP vinculante puede inducir un cambio conformacional que expone o se activa la
membrana de dominio de metas, con oligomerizacin se producen despus de la asociacin de
membrana ( 202 , 204 ). En consonancia con esta idea, la prdida de unin a la membrana
debido a la eliminacin de la mente MTS conduce a una reduccin de 25 veces en la interaccin
mente-Mente en la levadura de dos ensayos de hbridos (204 ).
Sorprendentemente, la interaccin dependiente de ATP de la mente con vesculas de fosfolpidos
conduce tanto a la polimerizacin mente y vescula deformacin, con la formacin de tubos de

lpidos largos de aproximadamente 50 a 100 nm de dimetro, que se extienden desde la

superficie de la vescula ( 76 ). Tubulacin no se inform en otro estudio de las interacciones
mente-vescula, donde se observaron los filamentos mente para envolver a menudo alrededor y
deformar las vesculas de lpidos ( 198 ). Esta diferencia refleja probablemente diferencias en
preparaciones de protenas o condiciones experimentales.La ATP analgica ATPS no indujo
tubulacin, aunque s promueven MinD unin a vesculas. La razn de esto no se ha aclarado
( 76 ).
La adicin de MinE invierte la reaccin tubulacin, presumiblemente a causa de su capacidad
para estimular el desmontaje polmero MinD (vase ms adelante).Tubulacin de vesculas de
fosfolpidos tambin es inducida por varias protenas eucariotas que participan en la formacin
de vesculas y por dynamin ( 85 , 200 ). Sera de gran inters si una deformacin tubular similar
de la membrana citoplasmtica se asocia con la polimerizacin MinD in vivo. Sin embargo, no
existe todava ninguna evidencia de que el fenmeno tubulacin tiene ningn significado
biolgico, y puede ser restringido al sistema in vitro. Sin embargo, sugiere que algn tipo de
perturbacin de la bicapa de la membrana podra desempear un papel en la funcin de la mente
dentro de la clula.
(Vii) reordenamientos dinmicas del citoesqueleto mente.
Oscilacin de polo a polo de las protenas Min es esencial para su papel en la seleccin del sitio
de divisin ( 175 ).Las oscilaciones son el resultado de una secuencia ordenada de
reordenamientos del citoesqueleto en el que las molculas MinC, la mente y la ma se
redistribuyen a partir de bobinas polares en un extremo de la clula en las bobinas polares en el
otro extremo de la clula. Durante estos eventos, la estructura helicoidal subyacente que se
extiende entre los dos extremos de la clula parece permanecer en su lugar. Los
reordenamientos del citoesqueleto que conducen al comportamiento oscilatorio de polo a polo
se cree que se producen de la siguiente manera (Fig. 6F a H ).
(A) el montaje zona polar . Asociada a la membrana-mente ATP polimeriza en un patrn
helicoidal desde el polo celular hacia midcell, posiblemente usando un citoesqueleto helicoidal
MinD preexistente que se extiende la longitud de la clula como un andamio o plantilla (.
Fig 6A, F y H ). No se sabe si la polimerizacin se inicia en preexistente sitios de nucleacin

cerca de los polos o estocsticamente se produce sin sitios de nucleacin especficos. Un

modelo matemtico que incluye sitios de nucleacin polares reproduce todas las caractersticas
pertinentes del sistema oscilatorio, incluyendo el anillo E y zonas polares ( 36 ).Sin embargo,
los sistemas oscilatorios autoperpetan estables tambin se pueden generar en la ausencia de
sitios de nucleacin polares, como se muestra por otros tratamientos matemticos que incluyen
ni los polmeros ni sitios de nucleacin, pero se basan slo en las caractersticas de difusin y
asumieron

afinidades

de

las

protenas

por

los

dems

para

la

membrana

( 81 , 98 , 105 ,138 ). Durante el montaje de la zona polar, MinD recluta MinC y el mo, la
conversin de la mente zona polar helicoidal para una zona polar MinDCE. La unin de MinC y
el mo puede tener lugar despus de mente ha polimerizado en la superficie de la membrana,
aunque las interacciones primarias con la mente tambin podran ocurrir en el citosol ( 204 ),
con la mente-MinC y / o complejos mente-mina de pasar a la concurrente membrana con mente
asamblea polmero.
Conjunto de anillo (b) MinE . Cuando los extremos de crecimiento de los polmeros MinD
acercan midcell, adems de la mente-ATP disminuye y la ma se rene en los extremos de los
los protofilamentos helicoidales para crear una extensin MinE enriquecida de las estructuras en
espiral (el anillo E) (Fig. 6C y H ). La capacidad de la mina para outcompete MinD
probablemente refleja el agotamiento de la piscina frente al citoplasma de la mente que se
produce durante el crecimiento de la zona polar ( 36 ). Se cree que el anillo E de jugar dos
papeles. En primer lugar, se bloquea la extensin de la zona polar pasado midcell actuando
como un tapn para evitar una mayor adicin de subunidades mente.Este fue sugerida por la
observacin de que la mina mutaciones que previenen la formacin del plomo anillo E al
crecimiento de las zonas polares ms all de su lmite normal cerca de midcell ( 186 ). En
segundo lugar, el anillo E se activa la actividad de la mente ATPasa en la vanguardia de los
polmeros-Mind ATP ( 79 ).
(C) desmontaje zona polar . La activacin de la mente ATPasa conduce a la conversin de la
mente-ATP-ADP a la mente, que se libera a partir de finales del polmero MinD debido a su
baja afinidad por la membrana (Fig. (Fig.6G).6G ). Esto resulta en un acortamiento progresivo
de la estructura polar MinDCE enrollado hasta que desaparece junto con el anillo E

(Fig. (Fig.6H).6H ). Los estudios in vitro muestran que la mente-ADP es liberado de vesculas
de fosfolpidos en el medio acuoso cuando la mente ATPasa es activado por las minas
(76 , 110 ). Si esto imita con exactitud el desmontaje de las estructuras en espiral polares en
vivo, implicara que el desarmado est acompaada por la liberacin de las protenas en el
citoplasma, como se sugiere por microscopa de fluorescencia de la mente marcada en las
clulas intactas ( 168 ).

Me quede en la pagina 18

CONCLUSIONES Y RESUMEN
Los avances de los ltimos 5 aos han sido extraordinarios.Quizs el hallazgo ms inesperado
ha sido el gran nmero de protenas que se organizan en estructuras ordenadas de largo alcance
dentro de la clula. Sin embargo, con slo unas pocas excepciones, como el / PARF sistema de
segregacin plasmdica ParM y el sistema de seleccin del sitio divisin minCDE, no sabemos
prcticamente nada sobre cmo los elementos del citoesqueleto llevan a cabo tales funciones
celulares fundamentales como la segregacin de los cromosomas de la clula y ms plsmidos,
la constriccin del anillo de FtsZ, la diferenciacin de los polos de la clula, o el
establecimiento de la polaridad celular, y sabemos que slo un poco ms acerca de los detalles
de la determinacin de la forma celular. Adems, los mecanismos subyacentes a la sorprendente
plasticidad de algunas de las estructuras del citoesqueleto son todava del todo entendidas mal o
no. Esto incluye la remodelacin del citoesqueleto de MreB durante el ciclo celular, el
comportamiento oscilatorio y otros reordenamientos intracelulares de las protenas de Par, y la
reorganizacin general de elementos del citoesqueleto que deben ocurrir durante y despus de la
divisin celular. La comprensin de estos problemas importantes e intrigantes en biologa
celular bacteriana probablemente requerir, en muchos casos, una identificacin ms completa
de la que las protenas y complejos de protenas estn asociadas con cada una de las estructuras
del citoesqueleto primarios.Informacin adicional de este tipo ya est surgiendo para los
sistemas MreB / mrec / PBP, MinC / mente / el mo, y FtsZ / septasome. Es probable, como en
los sistemas eucariotas, que la integracin de esta informacin revelar las estructuras del
citoesqueleto ms complejas que estn actualmente previsto. Basndose en los progresos hasta

la fecha, podemos ser muy optimistas sobre los avances que se esperan durante los prximos
aos.
.....

AGRADECIMIENTOS
Reconocemos la ayuda de Vitaliy Gorbatyuk en la construccin de protenas figuras
tridimensionales, y reconocemos Luyan Ma y Denis Wirtz permiso para citar informacin no
publicada. Damos las gracias a Mara Osborn en busca de ayuda y consejo importante y Stuart
Austin, Miguel de Pedro, Jeff Errington, Kenn Gerdes, Giovanna Rosati, Christine JacobsWagner, Dyche Mullins, Denis Wirtz, Andrew Wright, y otros colegas til para los debates.
El trabajo del laboratorio de LR fue apoyado por el NIH subvencin GM R37-06032.