DISCUSION DE GRUPO N 3

ENZIMAS
1. Explicar la naturaleza qumica de las enzimas, sus principales propiedades y la funcin que
desempean en los sistemas biolgicos.
Son catalizadores biolgicos de naturaleza proteica (excepto la ribozima que es una molcula de ARN con
capacidad cataltica) que aceleran la velocidad de las reacciones qumicas disminuyendo la energa de
activacin.
Regulan las reacciones del metabolismo. Actan en secuencias organizadas, catalizan cientos de reacciones
consecutivas en las que degradan molculas de nutrientes, se conserva y transforma la energa qumica y se
fabrican las macromolculas biolgicas a partir de precursores sencillos.
Principales Funciones
o
Eficiencia: Aceleran las reacciones multiplicando su velocidad por un milln de veces o ms. Ej:
Anhidrasa Carbnica
o
Especificidad: Son altamente especficas en la reaccin que catalizan como en la seleccin del
sustrato que transforman.
Tipos de especificidad:
Especificidad alta o absoluta: Si la enzima utiliza un solo sustrato: Glucocinasa
Especificidad de grupo: Las hexosas (monosacaridos de 6 C) pueden ser fosforiladas por
cinasas y ATP
Propiedades

Eficiencia

Especificidad

Aumentan la velocidad de las reacciones disminuyendo la energia de activacin

Se utilizan en pequeas cantidades

Se recuperan al final de la reaccin

No modifican la constante de equilibrio de la reaccin

Funcin que desempean en los sistemas biolgicos

Son muy estables a pH neutro, T suave y ambiente acuoso

Intervienen en las reacciones necesarias para digerir los alimentos, enviar seales nerviosa, contraer
el msculo, etc.

Proporcionan un ambiente especfico dentro del cual las reacciones transcurren a mayor velocidad
2. Describir como el pH y la concentracin de sales afectan el estado inico de una enzima.
Cuando se mide la actividad enzimtica a diversos pH, la activacin ptima generalmente se observa entre los
valores de 5.0 y 9.0. La forma de las curvas de pH ptimo est determinado por:
o
Desnaturalizacin de la enzima a valores de pH altos o bajos
o
Alteraciones en el estado de carga de la enzima y/o el sustrato. Para la enzima los cambios de
carga pueden afectar la actividad, ya sea cambiando la estructura o la carga en un residuo que funciona para
ligar el sustrato en la catlisis.
3. Explicar a travs del anlisis de sus respectivas grficas, los siguientes factores que afectan la
velocidad de reaccin enzimtica: concentracin de enzima, concentracin de sustrato, temperatura y
pH.

 Concentracin de Enzimas
La velocidad de la reaccin enzimtica es directamente proporcional a la concentracin de enzimas.
Concentracin de Sustrato
La velocidad de la reaccin va aumentando a medida que aumenta la concentracin de sustrato hasta que la
enzima se satura.
La velocidad de una reaccin es el nmero de molculas de sustrato que se convierten en molculas de producto
por unidad de tiempo, que suele expresarse por unidad micromol de producto formado por minuto. La velocidad
de la reaccin que cataliza la enzima aumenta con la concentracin del sustrato hasta que se llega a una
velocidad mxima (Vmax). La nivelacin de la velocidad de reaccin a concentraciones de sustrato elevadas
refleja la saturacin con el sustrato de todos los sitios de fijacin disponibles en las molculas existentes de la
enzima.
Temperatura
Al aumentar la temperatura aumenta la energa cintica de las reacciones qumica. Las reacciones enzimticas
son sensibles a los cambios de temperatura debido a la naturaleza proteica de las enzimas y puede causar la
desnaturalizacin trmica.

El intervalo de temperatura en el que una enzima mantiene una conformacin estable depende de
la temperatura normal de las celulas en que se encuentra

Las enzimas del hombre son estables por lo general a T hasta de 45- 55 C

Los microorganismos termfilos 100C o arriba de este valor

Temperatura Optima: Es a la cual la enzima ejerce su mxima accin cataltica

pH
La mayor parte de las enzimas intracelulares muestra actividad ptima a valores de pH entre 5 y 9.

Las enzimas son protenas que tienen grupos ionizables que se pueden cargar dependiendo del
pH en el que se encuentren.

El grupo carboxilo de las protenas a pH alcalino puede ceder su protn quedando con carga
negativa

El grupo amino de las protenas a pH cido puede ganar un protn quedado con carga positiva

pH Optimo: Es aquel donde se transforma mayor numero de molculas por segundo

La ganancia o prdida de grupos importantes con carga afecta de manera adversa a la unin del
sustrato y por consiguiente retarda o anula la catlisis
4. Explicar por qu el pH del ambiente intracelular de las enzimas no es precisamente el pH ptimo de
las enzimas.
La mayor parte de las enzimas intracelulares muestra actividad ptima a valores de pH entre 5 y 9. Las enzimas
intracelulares tambin son los responsables de los procesos de degradacin celular. En estos procesos se
obtienen nutrientes elementales a partir de los materiales estructurales propios de las clulas cuando el aporte
mediante la dieta se interrumpe (por ejemplo, durante el ayuno), o cuando la clula no puede utilizar los
nutrientes de la sangre (por ejemplo, en la diabetes).
5. Describir la composicin de una holoenzima.
-

Holoenzima: apoenzima + cofactor

Apoenzima: Porcin proteca de la holoenzima

La mayora de los cofactores no se unen covalentemente a sus enzimas, pero s lo hacen fuertemente se les
conoce como grupo prosttico.
Cofactor: Iones inorgnicos: Mn, Fe, Mg; Complejos metalorgnico; coenzimas

6. Describir los mecanismos de catlisis enzimtica.

Catlisis covalente: Implica la formacin de un enlace covalente transitorio entre la enzima y el sustrato el
grupo R de loa aminocidos y los grupos funcionales de algunos cofactores enzimticos sirven para la
formacin de enlaces covalentes con los sustratos. Ej.: La enzima proteoltica quimiotripsina.
Catlisis acido base general: Los grupos R o cadenas laterales de aminocidos pueden actuar como
donadores o aceptores de protones el el sitio activo de la enzima permitiendo la transferencia d protones,
proporcionando incrementos de la velocidad. Ej. Las proteasas asparticas que comprenden la pepsina, la
catepsina lisosomal y la del VIH.
Catlisis por ion metlico: Interacciones inicas entre un metal fijado a la enzima y el sustrato, orientan al
sustrato para que reaccionen o se estabilicen los estados de transicin de la reaccin.
Catlisis por aproximacin: Para que las molculas reaccionen deben aproximarse entre si a la distancia de
formacin de enlace, cuando una enzima se une al sustrato se crea una alta S permitiendo una orientacin
ideal para que interacten.
7. Definir y ejemplificar.
a) Enzimas funcionales del plasma: son aquellas que cumplen una funcin en la sangre y su
concentracin plasmtica es equivalente o mayor que la del tejido donde se producen ,por lo general
son fabricadas en el hgado y en menor proporcin tambin en el tejido adiposo.
Ejemplos:
-Protrombina
-plasminogeno
-lipoproteinlipasa
-pseudocolinesterasa.
b) Enzimas no funcionales del plasma: no cumplen funciones en la sangre debido a que su sustrato no
est presente en ella ,estn en la sangre como producto de la muerte celular normal ,la cantidad de
clulas que desechamos es pequea y por eso es poca la cantidad de enzimas no funcionales presente
en la sangre ,su concentracin es hasta un milln de veces menor que en el rgano o tejido productor
y el aumento de la concentracin de estas enzimas esta en relacin con la velocidad de destruccin de
los tejidos productores .
Ejemplos:
-Aspartato amino transferasa
- creatin quinasa
c) Enzimas orientadoras de rganos: son las que se ubican en los distintos componentes celulares y cuya
salida se produce cuando una causa determinada altera la estructura de la clula. El incremento de la
actividad enzimtica srica indica que en determinados tejidos orgnicos se produjo una alteracin que
al afectar la estructura celular provoco el paso ala circulacin de dichas enzimas .
Ejemplos:
-(ALT) alanino transaminasa (elevacin con la hepatitis)
-troponina (elevacin al producirse un infarto de miocardio)
d) Enzimas de secrecin: son enzimas que se vierten desde la clula al medio exterior por un proceso de
secrecin, se producen en glndulas exocrinas como pncreas y prstata , as como en tejidos como
mucosa gstrica y hueso.
Ejemplos:
-amilasa (salivar y pancretica)
-lipasa
-fosfatasa acida prosttica
8. Explicar la ubicacin de la amilasa pancretica segn la clasificacin anterior.
La amilasa es una enzima que se produce, sobre todo, en las glndulas salivales y el pncreas (un rgano que se

encuentra detrs del estmago), y que ayuda a descomponer los carbohidratos y los almidones en azcar. es un
enzima hidrolasa que tiene la funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del componente Amilasa al digerir el glucgeno y el almidn para formar azcares simples. Esto es importante porque, con el
tiempo, el azcar se convierte en glucosa, la cual estimula todos los procesos del organismo. Un anlisis de
amilasa mide la cantidad de amilasa presente en la sangre.
De acuerdo a la clasificacion anterior la amilasa se clasifica como una enzima de secrecion debio a que es
secretada en las glandulas salivales y el pancreas y son trasportadas hacia el duodeno atraves de conductos. La
sangre suele contener pequeas cantidades de amilasa. Sin embargo, cuando la cantidad es elevada, significa
que el pncreas tiene una lesin, est inflamado o bloqueado. Tiene actividad enzimtica a un pH de 7. Cuando
una de estas glndulas se inflama, como en la pancreatitis, aumenta la produccin de amilasa y aparece elevado
su nivel en sangre (amilasemia).
La amilasa pancretica se ubica, en el intestino delgado. Siendo as, parte de las enzimas de secrecin, pues el
pncreas es en parte, una glndula excrina. Segn Schmidt, las enzimas se pueden clasificar como Enzimas
de Secrecin cuando estas obran en el tracto digestivo, siendo Enzimas o fermentos digestivos.
La funcin exocrina del pncreas consiste en la secrecin de enzimas al duodeno. El jugo pancretico contiene
precursores de enzima que en principio estn inactivos pero que posteriormente sern activados en el tubo
digestivo por el jugo gstrico y formarn las enzimas llamadas hidrolasas. Entre las enzimas secretadas por el
pncreas estn las que degradan protenas (tripsina, quimotripsina y carboxipeptidasa), y tambin las que
degradan cidos nuclicos (ribonucleasas). Las secreciones pancreticas tienen un pH alcalino comprendido
entre 7,5 y 8,2.
9. Analizar cules son las muestras biolgicas adecuadas para efectuar las determinaciones enzimticas.
Suero El pH ptimo de la mayora de las enzimas se localiza entre los valores de 5 y 9. Sin embargo, algunas
enzimas, por ejemplo, la pepsina o la arginasa son activas a valores de pH alejados de este ptimo. El efecto
nocivo de las radiaciones, sales y metales pesados (Ag, Pb, Hg) sobre la actividad enzimtica se debe a la
accin desnaturalizante sobre las protenas en general. Esta propiedad es til en el laboratorio clnico; las
muestras de sangre son primero tratadas con cidos como el tncloroactico, fosfotngstico y otros para
desnaturalizar y precipitar protenas, la labilidad de la mayora de las enzimas a estos agentes desnaturalizantes
permite determinar si una reaccin es catalizada por una enzima.
10. Explicar la relacin que existe entre dao celular y actividad de las enzimas en el plasma.
Una elevacin de las enzimas celulares en el plasma es equiparable a una lesin celular. Su presencia en
plasma en niveles ms altos de lo normal sugiere un aumento en la velocidad de destruccin celular y tisular. La
determinacin de estos niveles de enzimas plasmticas puede proveer informacin valiosa para diagnstico y
pronstico. Sin embargo, niveles elevados de enzimas en plasma no slo pueden ser interpretados como
evidencia de necrosis celular ya que tambin la realizacin de ejercicio vigoroso libera cantidades significativas
de enzimas musculares.
11. Explicar cmo puede medirse la actividad enzimtica en las muestras biolgicas y la razn por la que
en los anlisis biolgicos se investiga su actividad cataltica, en el tejido o fluido corporal y no su
concentracin.
La velocidad se puede medir mediante ensayos enzimticos. Se calcula la velocidad de reacciones catalticas
enzimticas a travs de diferentes vas.

1.

Medida de la velocidad inicial. Cuando una enzima se mezcla con un gran exceso de sustrato
(a concentracin saturante), el complejo intermedio enzima-sustrato se genera en una rpida fase inicial
transitoria. Despus, la reaccin llega a una cintica constante durante la cual el complejo enzima-sustrato
se mantiene prcticamente en cantidades invariables en el tiempo y la velocidad de reaccin es constante.
La velocidad se mide en un corto periodo despus de lograr un estado cuasi-constante, que se detecta
tpicamente monitorizando la acumulacin de producto durante el tiempo. Como las mediciones se efectan
en un periodo muy corto y por la concentracin saturante de sustrato, puede considerarse que el sustrato
libre es igual al sustrato inicial y que la velocidad medida es la mxima que la enzima puede alcanzar en las
condiciones de reaccin dadas, porque no se estn dando reacciones inversas o degradacin enzimtica.
Estas mediciones son las ms simples de realizar y analizar al estar relativamente libres de complicaciones,
y por tanto ste el tipo de ensayo ms usado en cintica enzimtica.

2.

Medida del progreso de la curva. En estos experimentos los parmetros cinticos se determinan a
partir de expresiones de las concentraciones de las diferentes especies como funciones del tiempo. La
concentracin del sustrato o del producto se mide en momentos posteriores a la rpida fase inicial y durante
un tiempo lo suficientemente largo que permita a la reaccin acercarse al equilibrio. Este tipo de ensayos se
intenta evitar por el error matemtico que se puede introducir y es cada vez menos practicado, pero fue muy
ampliamente utilizado en los primeros periodos del estudio de la cintica enzimtica.

3.

Medida de la fase transitoria. En estos experimentos se observa el comportamiento de la reaccin

durante la rpida fase inicial transitoria en la que el complejo molecular intermedio llega a un periodo
cintico constante. stos son los ensayos ms difciles de realizar porque requieren el uso de tcnicas de
mezclado y medicin realmente rpidas.

4.

Experimentos en la fase de equilibrio. En estos experimentos se perturba una mezcla de enzima,

sustrato y producto que ha alcanzado el equilibrio qumico, por ejemplo cambiando la temperatura,
la presin o el pH, y se estudia cmo regresa la mezcla al equilibrio. El anlisis de estos experimentos
requiere que la reaccin sea reversible. Adems, estos experimentos son relativamente insensibles a detalles
mecansticos y por lo tanto no suelen usarse para la identificacin de mecanismos de reaccin.

Espectrofotomtricos
En los ensayos espectrofotomtricos puede seguirse el curso de una reaccin observando cmo cambia
la luz absorbida por la solucin en la que se est dando la reaccin. Para poder utilizar un ensayo de este tipo
debe haber entre los sustratos o los productos alguno que absorba luz a una longitud de onda determinada, y que
sea la nica molcula de la mezcla de reaccin que lo hace a la misma; de esta forma, se puede observar el
aumento o la disminucin de la absorbancia a dicha longitud de onda. Cuando la luz absorbida se encuentra en
el espectro visible es posible observar un cambio en el color de la muestra, y entonces hablamos
de mtodo colorimtrico.
Tambin es usual el uso de la luz ultravioleta (luz UV), especialmente porque sirve para monitorizar reacciones
en las que participan NADH y NADPH, coenzimas que participan en infinidad de reacciones bioqumicas y que
absorben luz UV en forma reducida (NADH y NADPH) pero no en forma oxidada (NAD+ y NADP+). As, la
actividad de una oxidorreductasa que use NADH como coenzima puede ser monitorizada siguiendo el descenso
de la absorbancia a 340 nm a medida que se consume el NADH.
La concentracin de las enzimas no se utiliza en pruebas de laboratorio ya que la cantidad es demasiado
pequea para poder cuantificarse, y resulta muy complicado. Ms la velocidad de reaccin cataltica de una
enzima resulta mucho ms benfica para los resultados de laboratorio, ya que son los que determinan muchas
anormalidades o diferentes problemas en el organismo, dependiendo de la muestra biolgica.
12. Definir las unidades en las que se expresa la actividad de las enzimas.

 Unidad de Actividad Enzimatica (U):

Es la cantidad de enzima que cataliza la transformacion de 1micromol de sustrato por minuto en condiciones
estandar (mol / min).
Actividad Enzimatica Especifica:
Es la unidad de enzima por miligramo de proteina.
KATAL:
Es una unidad derivada del Sistema Internacional de Unidades para medir la actividad catalitica, que
corresponde a la cantida de enzima que es capas de catalizar la transformacion de 1 mol de sustrato por
segundo.
*1 katal equivale a 60 x 106 Unidades de actividad Enzimatica
Como es una unidad de muy grande se suele utilizar microkatal (kat) y nanokatal (nkat).
Nmero de Recambio:
Es equivalente al numero de moleculas de sustrato convertidas en producto por unidad de tiempo por una sola
molecula de enzima (se utiliza cuando la enzima esta saturada por el sustrato).
13. Explicar que son los zimgenos, proceso de activacin y su importancia mdica ejemplificando su
hidrlisis selectiva o parcial.
Los zimgenos son los precursores inactivos de las enzimas; se activan fuera de la clula y es un proceso
que no necesita ATP. Para activarse, necesita de un cambio bioqumico en su estructura que le lleve a
conformar un centro activo donde poder realizar la catlisis.
En ese momento, el zimgeno pasa a ser un enzima activo.
Los zimgenos son utilizados en muchas reacciones biolgicas, como en la digestin o en
la coagulacin sangunea. Las modificaciones que sufren los zimgenos son irreversibles, por lo que para
poder detener las reacciones que llevan a cabo es necesario un inhibidor del enzima al que dan lugar.
(Ejemplo: el tripsingeno (zimgeno) da lugar a la tripsina (enzima), que a su vez activa otros zimgenos.
Para poder detener la activacin de los zimgenos, la tripsina no se puede volver a convertir en
tripsingeno, sino que debe excretarse un inhibidor de tripsina para detener su tarea).
+ PROCESO DE ACTIVACIN
El proceso de activacin se da de la siguiente manera:
El proceso implica una protelisis selectiva, que en algunos casos se requieren de solo un proteoltico.
En la protena madura los polipptidos formados pueden separarse o mantenerse asociados.
El proceso puede conllevar un cambio importante en el peso molecular.
Una consecuencia importante de la protelisis selectiva es la adquisicin de una nueva conformacin.
Este cambio de conformacin mencionado genera el sitio cataltico de la enzima.
Ejemplos:
Zimogeno

enzima activa

Pepsinogeno

(pepsina )

Tripsinogeno

(enterocinasa-)

pepsina + peptido
tripsina + hexapeptido

Quimiotripsinogeno (tripsina-)

quimiotripsina+ 2 dipeptidos

+ PROTEOLISIS SELECTIVA O PARCIAL

Convierte a pro protena en protena madura.
Las pro protenas de enzimas se llaman zimogenos o pro enzimas.
La proteolisis produce cambios conformacionales que crean por ejemplo el sitio cataltico de la quimo tripsina
alineando los residuos de His Asp y Ser del sistema de relevo de cargas.
Ejemplos de zimgenos:
Enzimas Digestivas
Tripsingeno
Quimotripsingeno
Pepsingeno
La mayor parte de las protenas del sistema de coagulacin
Algunas de las protenas de los sistemas complementos:
Procaspasas
Proelastasa
Prolipasa
14. Explicar la funcin de cada uno de los reactivos y analizar los resultados obtenidos en la
determinacin de amilasa.
Los reactivos utilizados fueron:
- Reactivo de almidn pH 7.0
- Reactivo de yodo N/100 = Reactivo de I2/K = Reactivo de Lugol.
Adems de estos reactivos se utilizo una muestra biolgica de amilasa srica proporcionada por uno de los
estudiantes.
El almidn se divide en dos fracciones que se diferencia por su solibilidad en agua: la amilosa insoluble y la
amilopectina soluble.

La amilosa es un polmero de aproximadamente 250 unidades de -D-Glucosa unida por enlaces 1,4
glucosdicos, es lineal y al formar largas cadenas se enrolla formando una hlice. Es esta hlice la que al
reaccionar con el reactivo de Lugol forma un complejo de inclusin color azul oscuro que permite reconocer al
almidn.
Al entrar en contacto esta solucin con la amilasa srica comenz a realizarse la actividad enzimtica
hidrolizando los enlaces de unin de la amilasa desproporcionando al yodo de la estructura helicoidal base para
la formacin del complejo de inclusin y desencadenarse la decoloracin de la preparacin. Para constatar con
total certeza la actividad de la amilasa srica se procedi a analizar la muestra problema y de la muestra control
(carente de amilasa srica) en un espectrofotmetro para determinar la absorbancia de la solucin.
15. Describir la clasificacin de las enzimas de acuerdo a la reaccin que catalizan y ubicar a la amilasa
dentro de ella.
CLASE

SUB-CLASE
Catalizar, reacciones de oxidacin-reduccin, es
decir, transferencia de hidrgeno o electrones de un
sustrato a otro.

DESHIDROGENASAS
REDUCTASAS
OXIDASAS
HIDROXILASAS
PEROXIDASAS.

Catalizan la transferencia de grupo qumico (distinto

de hidrgeno) de un sustrato a otro.

TRANSAMINASAS
TRANSFOSFORILASA
S
TRANSMETILASAS
LIPASAS
PEPTIDASAS
FOSFODIESTERASAS
PEPTIDASAS
GLICOSIDASAS
DESCARBOXILASAS
ALDOLASAS
DESHIDRATASAS
DESAMINASAS
EPIMERASAS
MUTASAS

OXIDORREDUCTASA

TRANSFERASAS

HIDROLASAS

LIASAS

ISOMERASAS

LIGASAS

Reacciones de hidrolisis (transferencia de grupos

funcionales de agua). Catalizan reacciones en la que
producen la ruptura de enlaces por la adiccin de
agua.
Adiccin de grupos a dobles enlaces o formacin de
dobles enlaces por la eliminacin de grupos

Transferencia de grupos dentro de molculas dando

formas isomericas. Se trata de un grupo heterogneo
de enzimas que catalizan varios tipos de
ordenamientos intramoleculares.
Catalizan la formacin de un enlace entre 2
molculas de sustrato. La energa para estas
reacciones la aporta siempre la hidrolisis del ATP.

SINTETASAS
CARBOXILASAS

La amilasa una enzima hidrolasa.

Las amilasas hidrolizan molculas de almidn dando como producto dextrinas y polmeros compuestos
progresivamente por unidades de glucosa. Esta familia de enzimas hidrolticas est compuesta por protenas
catalticas: alfa-amilasa, beta-amilasa, glucoamilasa e isoamilasa.

16. Describir la reaccin catalizada por la amilasa sealando: sustrato, producto y enlace que rompe.
Las amilasas son enzimas las cuales hidrolizan molculas de almidn dando como productos dextrinas y
polmeros compuestos progresivamente por unidades de glucosa. Esta familia de enzimas hidrolticas est
compuesta por a protenas catalticas que se encuentran ampliamente distribuidas en tejidos, cumpliendo una
misin digestiva: 1- Alfa-amilasa.
3- Glucoamilasa.
2- Beta-amilasa.
4- Isoamilasa.
1- La enzima alfa-amilasa en su accionar degrada la amilosa en maltosa y pequeos compuestos de glucosa.
Estas se caracterizan en llevar a cabo la reaccin de endohidrlisis que se sita de los enlaces 1,4-alfaD-glucosidicos en polisacridos que contienen 3 o ms enlaces 1,4-alfa-D-glucosidicos. Los grupos
reducidos son liberados en una configuracin alfa.
2- La enzima Beta-amilasa. Su funcin es actuar en la reaccin de hidrlisis de los enlaces alfa-1,4glucosidicos del almidn con inversin en la configuracin del carbono 1 pasndolo de la configuracin alfa
a la beta; Su producto es beta-maltosa.
3- la Glucoamilasa. Su funcin es actuar en la reaccin de hidrlisis en cadenas de polisacridos operando en
los enlaces 1,4-alfa-D-glucosa que estn de manera residual despus de haberse expuesto la cadena a la
accin de alfa y beta amilasa. El principal producto final de la accin de la glucoamilasa sobre el
almidn es glucosa, lo que la diferencia claramente de la alfa y beta amilasas. La enzima tambin produce
pequeas cantidades de oligosacridos.
4- enzima isoamilasa o pululasa, Participa en la reaccin de hidrlisis de polisacridos especficamente en los
enlaces 1,6-alfa-D-glucosidicos; Su misin en participar en la reaccin de hidrlisis de ramificacin que
contengan enlaces 1,6-alfa-glucosidicos. El nico producto de reaccin es maltosa.
517. Explicar la razn por la que en el diagnstico diferencial, en la evolucin y el pronstico de muchos
estados patolgicos son importantes los anlisis enzimticos.
Muchas enfermedades se deben a anormalidades en la sntesis de enzimas, determinadas por los genes. Cuando
las clulas son lesionadas (por ejemplo, por trastornos de la circulacin sangunea o inflamacin), ciertas
enzimas pasan al plasma. La medicin de su actividad es parte integral del diagnstico de cierto nmero de
trastornos mdicos importantes (infarto al miocardio). La enzimologa diagnstica es el rea de la medicina que
emplea enzimas como auxiliares del diagnstico y el tratamiento.
El estudio de las enzimas en medicina es cada vez ms importante. Son mltiples las implicaciones que tienen
las enzimas en el origen, diagnstico, tratamiento y prevencin de enfermedades. Muchas enfermedades se
deben a la carencia o anormalidad en la sntesis de una determinada enzima (galactosemia, fenilcetonuria,
albinismo, pentosuria esencial y muchas otras que se revisarn ms adelante). Estos errores estn codificados en
el genoma y se denominan: "errores innatos del metabolismo", "enfermedades moleculares", "enfermedades
hereditarias" o "enfermedades bioqumicas". El diagnstico de muchas enfermedades se puede realizar con
bastante precisin determinando la actividad de ciertas enzimas o isoenzimas que son indicadores de la
destruccin tisular de rganos especficos.
Otras enfermedades se deben a la carencia de cofactores enzimticos y la administracin de ellos produce la
rpida curacin de estas enfermedades carenciales, como sucede con las vitaminas (procoenzimas) y algunos
oligoelementos. En ocasiones son las propias enzimas las que se usan para el tratamiento de enfermedades, esta
prctica se conoce como enzimoterapia.
Enzimas como agentes teraputicos

Algunas enzimas se han utilizado como medicamentos en la terapia de problemas mdicos especficos. La
estreptocinasa, preparada a partir de estreptococos, es til para disolver cogulos de sangre formados en las
extremidades inferiores. Esta enzima activa el plasmingeno el cual se transforma en plasmina que es una
proteasa que ataca la fibrina y la degrada.
Utilizando fibrinolisina y estreptodornasa (una DNAsa) por va oral o tpico se puede eliminar el material
fibrinoso y purulento de heridas infectadas o necrosadas. Varias enzimas proteolticas como tripsina y
quimotripsina al igual que la estreptocinasa, se utilizan en el tratamiento de la trombosis. Algunas enzimas
digestivas (peptidasas, lipasas, amilasa, nucleasa y celulasas), se usan en la deficiencia enzimtica por
pancreatitis crnica, pancreatectoma y trastornos gastrointestinales.
La terapia con asparaginasa se usa en algunos tipos de leucemia adulta. En virtud de que las clulas tumorales
tienen un requerimiento nutricional de asparagina, con asparaginasa los niveles de asparagina disminuyen
sensiblemente lo que lleva a disminuir la viabilidad del tumor.
18. Enunciar los valores normales de amilasa en suero y explicar las posibles alteraciones sricas en
algunos procesos patolgicos: apendicitis, pancreatitis, insuficiencia renal.
Valores normales: 60-160 U/dL de suero.
Apendicitis: En pacientes con diagnostico relaciona a la apendicitis aguda se presenta un leve aumento en
los niveles de amilasa en plasma aunque no se consideran significativos. Para el diagnostico en pacientes con
dicha patologa se utiliza como parmetros esenciales el contaje de leucocitos ya se presenta elevacin de
estos entre 13,000 a 15,000 /mm3.
Pancreatitis: El diagnstico clnico de la pancreatitis aguda puede ser sustentado por el incremento en los
valores sricos de amilasa y de lipasa. Valores sricos de amilasa o lipasa por encima de tres veces el lmite
superior de lo normal son caractersticos de pancreatitis aguda y muy raramente se presentan en otras
entidades clnicas. A menudo los niveles de amilasa se elevan por la propia inflamacin del pncreas
originando la pancreatitis y todas sus consecuencias subsecuentes.
Insuficiencia renal: sin coexistencia de pancreatitis, hay elevacin de los niveles sricos de amilasa, al estar
reducida la eliminacin renal. Si coexisten insuficiencia renal y pancreatitis, los niveles sern an ms elevados.
19. Definir y explicar la importancia de las isoenzimas en el diagnostico clnico, ejemplificando con la
creatincinasa (CK) y LHD (Lactato deshidrogenasa) en el diagnostico de paciente del caso.
Son diferentes enzimas que catalizan la misma reaccin por lo que son diferentes en parmetros cinticos,
diferentes KM , diferentes propiedades reguladoras, diferentes propiedades bioqumicas tales como
DIFERENTE MOVILIDAD ELECTROFORTICA
En laboratorio clnico se determina con frecuencia las isoenzimas con el objetivo de diagnostico. La definicin
de isoenzima es a menudo operacional, es decir, se basa en unos mtodos de anlisis simples y reproducibles
que en ocasiones no requiere hacer un anlisis preciso de la estructura de la enzima. El termino isoenzima se
utiliza a menudo para referirse a:
a) Variantes genticas de una enzima
b) Protenas genticamente dependientes y con escasa homologa
c) Heteropolimeros de dos o mas cadenas polipetidicas no unidas con enlaces covalentes

d) Enzimas no relacionadas que catalizan reacciones similares(por ejemplo: protenas conjugadascon

diferentes grupos prostticos o que requieren coenzimas o cofactores distintos)
e) Formas diferentes de una cadena polipeptidica.
LDH. Es un tetrmero que consta de dos tipos de monmeros, H(heart (corazn)) y M (de musculo)
LDH-1 (H4)
LDH-2 (H3M)
LDH-3 (H2M2)
LDH-4(HM3)
L;DH-5(M4)
Donde la LDH-1 es la predominate en el tejido cardiaco.
La creatina cinasa (CK) tiene tres isoenzimas CK-MM, CK-BB Y CK-MB. La CK-MB es laque tiene una
ventana diagnostica til, aparece en el tranascurso de 4 a 6 horas luego de un MI, alcanza su mximo en 24
horas, hoy en dia la CK se ha complementado con troponina .
20. Analizar como la determinacin de las troponinas complementa el diagnostico de infarto de
miocardio.
La medicin de las concentraciones plasmticas de troponinas I y T proporciona indicadores sensibles y
especficos de dao de musculo cardiaco. Las concentraciones de troponina aumentan 2 a 6 h despus de un
infarto de miocardio y permanecen elevadas durante 4 a 10 das. Adems del infarto de miocardio, otro tipo
de dao del musculo cardiaco tambin aumenta las concentraciones sricas de troponina. As que las
troponinas cardiacas sirven como un marcador de todo el dao del musculo cardiaco.
La troponina I es muy especfica de una lesin miocrdica y puede detectarse antes que el dmero CK-MB y
sus concentraciones sricas permanecen elevadas mas tiempo que las de la LDH.
Adems, la medicin de troponina T ha reemplazado al CK-MB en muchos hospitales.
21. Explicar en qu consiste inhibir una enzima y sealar los diferentes tipos de inhibidores enzimticos,
diferenciando con el proceso de desnaturalizacin.
Inhibidor enzimtico: es todo agente molecular que interfiere en la catlisis enzimtica, haciendo ms lenta o
deteniendo la reaccin. Estos pueden ser iones, tomos, molculas, compuestos que se fijan y unen a la enzima.
Inhibir a una enzima: es el proceso mediante el cual se reduce la velocidad de reaccin catalizada o se detiene
por completo la catlisis enzimtica.
Desnaturalizacin: es el proceso mediante el cual una protena, en este caso una enzima, pierde su
conformacin estructural cuaternaria, terciaria y hasta secundaria con la consecuente prdida de sus funciones,
debido a factores extrnsecos como cambios bruscos de temperatura, pH, etc.
La diferencia entre la inhibicin y la desnaturalizacin radica en que en la primera la enzima mantiene su
conformacin estructural intacta y son otras sustancias las que llegan a provocar un decaimiento en su funcin,
mientras que en la segunda, es la enzima misma la que pierde su estructura y por ende su funcin sin la
complicidad de ninguna otra sustancia, ms bien de factores del medio.
Los inhibidores enzimticos se clasifican en:
- Reversibles
Competitivos
Caractersticas:

El inhibidor se parece estructuralmente al sustrato

El inhibidor compite con el sustrato por el sitio activo de la enzima
Para superar el efecto del inhibidor, se eleva la concentracin de sustrato
La Km aumenta
La Vmax no cambia
Se forma el complejo E I
La accin de un inhibidor competitivo es disminuir el nmero de molculas de enzima libre
disponibles para enlazarse con el sustrato.

Ej.:
o Enzima Succinato Deshidrogenasa inhibida por el Malonato. Reaccin Succinato Fumarato.
o Enzima Dihidrofolato Reductasa inhibida por el Metotrexate.
o Enzima HMG CoA Reductasa inhibido por las Estatinas (Lovastatina)

No competitivos
Caractersticas:
El inhibidor no se parece estructuralmente al sustrato.
El inhibidor no compite con el sustrato por el sitio activo.
La Vmax disminuye
La Km no se altera
No afecta la fijacin de sustrato
Se pueden formar complejos E I, o E I S.
Se une a un sitio diferente al sitio activo de la enzima.

Irreversibles: Son los venenos enzimticos que se unen fuertemente a la enzima por enlace covalente muy
estable. Son una herramienta til para estudiar los mecanismos de reaccin enzimtica.
Ej.: Aspirina inhibe a la ciclooxigenasa

22. Explicar la clasificacin de las enzimas reguladoras y sealar las principales caractersticas de las
enzimas alostericas y la moduladas covalentemente.
Enzimas reguladoras: Son metabolitos intermediarios de peso molecular bajo que reducen o incrementan
la actividad cataltica de las enzimas, en respuesta a ciertas seales.
Existen dos clases principales de enzimas reguladoras:
- Enzimas alostricas
- Enzimas moduladas covalentemente
Enzimas alostricas
Funcionan a travs de la unin reversible, no covalente
, de compuestos reguladores denominados
moduladores alostricos o efectores alostricos, los cuales son generalmente pequeos metabolitos o cofactores.
Ej. Inhibicin por retroalimentacin: se refiere a la inhibicin de la actividad de una enzima inicial en una va
biosinttica, por medio de un producto final de esa va.
Algunas de las caractersticas de las enzimas alostricas son:
Las enzimas alostricas son reguladas por molculas llamadas efectoras.
La regulacin es mediante pequeas molculas seal que desencadenan cambios conformacionales en
las enzimas, como respuesta a la unin del modulador.
Los efectores alostricos alteran la afinidad de la enzima por el sustrato y modifican la actividad ataltica
mxima.
Los moduladores alostricos pueden ser inhibidores o estimuladores.
Las enzimas reguladoras cuando el sustrato y el modulador son idnticos se llaman HOMOTRPICAS.
Las enzimas moduladoras cuando el modulador es diferente del sustrato se llaman HETEROTRPICAS.

Poseen uno o ms sitios reguladores y cada sitio modulador es especfico.

No siguen la cintica de Michaeis Menten
Presentan una curva sigmoidea
Presentan cooperativismo (fijacin de una molcula de sustrato a un sitio de fijacin altera la
conformacin)
Son oligomricas
Catalizan la primera reaccin.
Enlace dbil y reversible entre la enzima y los moduladores.

Enzimas por modulacin covalente

Son enzimas moduladas mediante la modificacin covalente de un grupo funcional especfico necesario para la
actividad.
Puede ser de dos tipos:
- Irreversible (Protelisis parcial)
- Reversible
Modulacin covalente irreversible por protelisis especfica
Ciertas enzimas se sintetizan y secretan como enzimas inactivas llamadas ZIMGENOS.
Ej.: Enzimas digestivas, coagulacin sangunea, hormonas proticas. (Estmago: pepsingeno pepsina;
pncreas: tripsingeno tripsina)
Caractersticas:
La protelisis selectiva convierte una pro enzima mediante segmentaciones proteolticas en una enzima
activa.
Slo tiene lugar una vez en la vida de la molcula enzimtica.
No necesita ATP para la ruptura.
Los zimgenos se activan fuera de la clula.
Modulacin covalente reversible
Consiste en la unin covalente de otra enzima que modifica la actividad de la enzima reguladora.
Entre los principales reguladores de este tipo estn:
- Fosforilacin
- Adenilacin
- Uridililacin
- Difosforibosilacin
- Metilacin
Ej.: Enzimas reguladas por fosforilacin desfosforilacin:
- Acetil CoA Carboxilasa
- Glucgeno Sintasa
- Piruvato deshidrogenasa
- HMG CoA Reductasa
- Glucgeno Fosforilasa
- Citrato Liasa
- GLUCGENO FOSFORILASA
Caractersticas:
La regulacin es llevada a cabo por otras enzimas.
La mayora son reversibles.
Las ms comunes son la fosforilacin y la desfosforilacin.
Las enzimas que catalizan la fosforilacin son las CINASAS; transfieren el fosforilo terminal del ATP;
estas reacciones se dan dentro de la clula.
En la desfosforilacin intervienen las FOSFATASAS.

 Son oligomricas.
OTRAS FORMAS DE REGULACIN
- Compartimentalizacin: asegura la eficiencia y simplifica la regulacin.
- Controlar una enzima que cataliza una reaccin que limita la velocidad: regula toda la va metablica
- Regulacin de la cantidad de enzima
o Sntesis de enzima
Enzimas constitutivas: Concentraciones constantes. Ej.: glucolisis, ciclo de krebs
Enzimas inducibles: concentracin depende de inductores. Ej.: enzimas del ciclo de la urea,
citocromo P450.
Enzimas reprimibles
o Degradacin de enzima
- Alteracin en la capacidad cataltica