Tesis 200

EVALUACIN DEL EFECTO DE DIFERENTES EXTRACTOS
VEGETALES SOBRE EL CRECIMIENTO DE Colletotrichum

gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. AGENTE CAUSAL DE LA
ANTRACNOSIS EN MANGO (mangifera indica l).
JAIME ESNEIDER AGUIRRE RODRIGUEZ.
TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial para optar el ttulo de
MICROBILOGO AGRICOLA Y VETERINARIO
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE MICROBIOLOGA AGRCOLA Y VETERINARIA
Bogot, D.C.
Noviembre, 2008.

Jairo Antonio Osorio

Ingeniero Agrnomo Ph.D.
DIRECTOR
Nancy Eunice Nio.

Bologa MSc. fitopatologa
Gerardo Moreno
Ingeniero agrnomo
JURADO
JURADO

APROBADO
_________________________
________________________
JANETH ARIAS PALACIOS M.Sc- .Ed
INGRID SCHULER, Ph.D.
Directora Carreras de Microbiologa
Decana Acadmica
NOTA DE ADVERTENCIA
Los conceptos y opiniones emitidos en este trabajo son responsabilidad del autor
y no comprometen en nada a la Pontificia Universidad Javeriana.
Artculo 23 de la Resolucin N 13 de Julio de 1946
DEDICADO
A mi familia por el apoyo, la confianza y entrega.

A mis padres por su amor, su apoyo, por confiar siempre en m, y
por ser las personas que ms admiro en la vida.
AGRADECIMIENTOS
A mi familia por creer en m.

A Clemencia de la Rotta por su colaboracin y especialmente por brindarme
su conocimiento y apoyo.
A Erika Martnez y Juan Clmaco por su colaboracin y apoyo a lo largo del
proyecto.
Al laboratorio de fitopatologa de la corporacin colombiana de investigacin
agropecuaria CORPOICA por permitirme realizar el proyecto.
A Alejandra Villegas, por su colaboracin y apoyo a lo largo del proyecto.
A Ivonn Gelvez y Sandra Usaquen, por su amistad y ayuda.
A Ingrid Sierra por su gran apoyo emocional.
A Nancy Nio y Ligia Espinosa del laboratorio de fitopatologa del CIAA por
su apoyo, colaboracin y enseanza.
A Sandra Ramrez por su amistad.
TABLA DE CONTENIDO
1.
INTRODUCCION
14
2.
MARCO TEORICO
16
2.1.
MANGO
17
2.1.1 Mango comn o hilacha.
19
2.1.2 Variedades resistentes a la antracnosis.
20
2.1.3 Botnica.
21
2.1.4 Fase reproductiva.
22
2.1.5 Clima y suelo.
22
2.2.
ANTRACNOSIS
23
2.2.1. Etiologa.
24
2.2.2. Sintomatologa causada.
25
2.2.3. Fuentes de inoculo.
27
2.2.4. Dispersin.
27
2.2.5. Condiciones favorables.
28
2.2.6. Germinacin.
28
2.2.7. Infeccin quiescente.
29
2.3.
ESTRACTOS VEGETALES
30
2.3.1. Extracto de swinglia.
32
2.3.2. Capsialil.
33
2.3.3. Desfan 100.
34
2.3.4. Ecoswing.
35
2.3.5. Xplode.
36
2.3.6. Extracto de cardn lefaria.
36
3. FORMULACIN DEL PROBLEMA
38
4. JUSTIFICACIN
39
5. OBJETIVOS
40
5.1.
OBJETIVO GENERAL
40
5.2.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
40
6. DISEO DE LA INVESTIGACION
41
6.1. SITIO DE ESTUDIO Y MUESTRA.
43
7. MATERIALES Y MTODOS
44
7.1. PRUEBA DE GERMINACIN DE CONIDIAS.
44
7.1.1. Cultivo monosprico despus de la exposicin a los extractos.
46
7.2. EVALUACIN DEL CRECIMIENTO MICELIAL.
46
7.3. EVALUACIN EN FRUTOS DE MANGO DESPRENDIDOS.
48
7.4. ANLISIS DE DATOS.
49
8. RESULTADOS Y DISCUSIN.
50
8.1. PRUEBA DE GERMINACIN DE CONIDIAS.
50
8.1.1. Cepa 1047 de C. gloeosporioides.
50
54
8.1.3. Cepa 845 de C. acutatum.
58
8.2. EVALUACIN DEL CRECIMIENTO MICELIAL.
62
62
64
8.2.3. Cepa 845 de C. acutatum.
68
8.3. EVALUACIN EN FRUTOS DE MANGO DESPRENDIDOS.
72
9. CONCLUSIONES.
81
10. RECOMENDACIONES.
82
11. BIBLIOGRAFIA.
83
12. ANEXOS.
89
LISTA DE FIGURAS
Figura 1: Antracnosis en frutos maduros.
26
Figura 2: Antracnosis por Colletotrichum gloeosporioides.
26
Figura 3: Montaje prueba frutos desprendidos, inoculacin de frutos.
49
Figura 4: Tubo germinal conidia de C. gloeosporioides
50
Figura 5: Crecimiento micelial cepa 1047 tratamiento con Desfan.
63
Figura 6: Formacin de apresorios tratamiento con Desfan cepa 1047.
64
Figura 7: Crecimiento micelial cepa 935 tratamiento con Desfan.
65
Figura 8: Conidias cepa 935 de C. gloeosporioides, tratamiento con Desfan. 66

Figura 9: Crecimiento micelial cepa 845, tratamiento con Desfan.
68
Figura 10: Aparicin de los primeros sntomas de antracnosis a los tres das.
73
Figura 11: Sntomas avanzados de antracnosis a los diez das.
73
Figura 12: Sntomas y signos de antracnosis en mango.
74
Figura 13: Sntomas de antracnosis en mango, tratamiento con Desfan.
77
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Extractos y dosificacin.
42
Tabla 2: Porcentaje de germinacin conidias cepa 1047 C. gloeosporioides.
52
Tabla 3: Porcentaje de germinacin conidias cepa 935 de C. gloeosporioides. 56

Tabla 4: Porcentaje de germinacin de conidias cepa 845 de C. acutatum.
60
Tabla 5: resultados prueba inhibicin del desarrollo de la antracnosis en frutos

desprendidos cepa 1047 de C. gloeosporioides.
74

75
Tabla 7: determinacin del efecto de los extractos (Desfan y Ecoswing) en la

aparicin de sntomas por infeccin quiescente en mango.
10
77
LISTA DE GRAFICAS
Grafica 1: Curva de germinacin de conidias cepa 1047.
51
Grafica 2: Porcentaje de germinacin conidias cepa 1047 C. gloeosporioides. 52

Grafica 3: Resultados monosporico cepa 1047 C. gloeosporioides.
53
55
Grafica 5: Porcentaje de germinacin de conidias

cepa 935 C. gloeosporioides.
57
Grafica 6: Resultados monosporico cepa 935 C. gloeosporioides.
58
59
Grafica 8: Porcentaje de germinacin de conidias cepa 845 de C. acutatum.
61
Grafica 9: Resultados monosporico cepa 845 C. acutatum.
61
Grafica 10: Porcentaje de inhibicion del crecimiento micelial

cepa 1047 C. gloeosporioides.
62

cepa 935 de C. gloeosporioides, a los 8 dias.
65
Grafica 12: Comparacin de medias, Porcentaje de inhibicin del

crecimiento micelial. Cepa C-917, y Cepa 1047.
67

cepa 845 de C. acutatum, a los 8 dias.
68
Grafica 14: Porcentaje de inhibicin del crecimiento, en las tres

cepas utilizadas.
69
Grafica 15: Efecto de los extractos vegetales y sus dosis en PIC en

las tres cepas.
71
Grafica 16: Porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial

en frutos desprendidos.
79
11
RESUMEN
El objetivo principal de este estudio fue evaluar el efecto de 6 extractos vegetales
sobre el desarrollo y crecimiento de C. gloeosporioides, agente causal de la
antracnosis en mango, Con el fin de encontrar un producto para el control de la
enfermedad, ms eficaz, menos costoso y que no afecte el ecosistema.
Los extractos comerciales seleccionados para este estudio fueron: Capsialil,
Ecoswing, Desfan, Xplode y Extracto de Swinglia, adicionalmente se trabaj con
un extracto obtenido de cactus (secciones medias del tallo de cardn lefaria
(Cereus deficiens Otto & Dietr.) Proveniente del Desierto de la Tatacoa (Huila).
El efecto de cada extracto se obtuvo evaluando el porcentaje de inhibicin de la
germinacin, porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial (PIC), y inhibicin
del desarrollo de los sntomas de antracnosis en frutos de mango desprendidos. Se
trabajo con dos cepas de C. gloeosporioides, (1047 y 935) obtenidas de frutos de
mango hilacha con antracnosis, provenientes de los departamentos de Magdalena
y Tolima respectivamente y una cepa de C. acutatum, obtenida de frutos de
tomate de rbol, en el departamento de Cundinamarca.
El extracto que presento mayor porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial
en las tres cepas fue Desfan, mostrando diferencias significativas entre
tratamientos, la dosis que presento los mejores resultados fue la dosis
recomendada por el producto (DR) con la media mas alta en las dosis utilizadas.
12
SUMMARY
The main objective of this study was to assess the effect of six plant extracts on
the development and growth of C. gloeosporioides, causal agent of the
anthracnose in mango, in order to find a product to the control of the illness, more
effective, lees expensive and that doesnt affect the ecosystem.
The commercial extracts chosen for this study were: Capsialil, Ecoswing, Desfan,
Xplode and Swinglias extract, additionally it was worked with an extract
obtained from the cactus (half sections of Cardon lefarias stem (Cereus deficiens
Otto & Dietr.) from Tatacoas desert (Huila). The effect of each extract was gotten
evaluating the percentage of inhibition of the germination, percentage of
inhibition of the mycelial growing (PIC), and inhibition of the development of the
signs of anthracnose in mangos fallen fruits. In the study was worked with two
strains of C. gloeosporioide, (1047 and 935) obtained of the hilacha mangos
fruits with anthracnose, in Magdalena and Tolimas departments respectively and
one strains of C. acutatum, obtained of the tree tomatos fruit in the
Cundinamarcas department.
The extract that submits greater percentage of inhibition of growing mycelial in
three strains was Desfan, showing significant differences between treatments, the
dose that submits the best results was the suitable dose for the product (DR) with
the highest averages in the used doses.
13
1. INTRODUCCION:
La antracnosis es una enfermedad causada por el hongo Colletotrichum sp. Esta
enfermedad se encuentra afectando frutales de gran importancia econmica en el
pas, entre ellos el mango, considerado como la segunda especie frutcola de
mayor importancia socioeconmica. La gran demanda de esta especie en los
mercados nacionales e internacionales ha llevado a una gran expansin de las
reas de siembra, Colombia cuenta con un rea de 12.000 hectreas, en
produccin de este producto y una produccin de 119.000 Toneladas/ao, de los
cuales los departamentos de mayor produccin son Tolima y Cundinamarca, con
mas del 60% por ciento, seguidos por Antioquia, Bolvar y Magdalena. Los
municipios de mayor produccin son el Guamo, Espinal en el Tolima, Anapoima
y La Mesa en Cundinamarca. (Ministerio de agricultura, 2007).
Las prdidas causadas por antracnosis se han cuantificado en un 40% para

cultivos de mango, en este mismo caso los daos causados por antracnosis en
poscosecha, son ocasionados principalmente como consecuencia de infecciones
latentes (Pez Redondo, 2003).
El control de la enfermedad se ha fundamentado en aplicaciones frecuentes de

fungicidas, especialmente en las etapas de floracin y fructificacin, con
resultados poco satisfactorios y contribuyendo a la contaminacin de los
ecosistemas. Debido a esto de un tiempo para ac, se han venido planteando
diferentes alternativas para el adecuado manejo de la enfermedad en mango y
sobre todo en poscosecha, donde se ha encontrado el problema principal ya que
esta enfermedad demerita la calidad de la fruta hacindole perder todo el valor
comercial. (Pez Redondo, 2003).
Con el objeto de reducir las prdidas causadas por la enfermedad y su efecto

adverso, se ha encontrado que es necesario afrontar el problema integrando
diferentes medidas de manejo y control de la enfermedad, logrando contribuir
tambin a la ampliacin del rea de siembra en el pas. Una de estas medidas de
control, es el de la implementacin de extractos vegetales capaces de inhibir el
14
desarrollo del hongo. (Pez Redondo, 2003). En Colombia se han realizado

algunos estudios relacionados con la evaluacin de la capacidad de algunos
extractos vegetales para inhibir el desarrollo de C. gloeosporioides, causante de
antracnosis en diferentes frutales entre ellos el mango. Gomez H. (2002) realizo
una evaluacin del extracto de fique sobre el desarrollo in vitro
de C.
Con formato: Fuente: Cursiva
gloeosporioides, con el fin de determinar la accin biocida de esta sustancia sobre

las estructuras micelial y conidial de este hongo fitopatogeno, en la cual demostr
que esta sustancia inhibe el desarrollo micelial de C. gloeosporioides, cuando la
concentracin del extracto de fique en medio de cultivo PDA es superior al 5%, y
afecta la germinacin conidial cuando la concentracin del extracto es superior al
1%.
En 1996, Loaiza y Rivera, realizaron un estudio preliminar del efecto fungicida

de extractos de diez plantas sobre el hongo C. gloeosporioides, mediante pruebas
in vitro, en el cual concluyeron que el extracto de raz de madero negro fue el mas
efectivo y mostro los mejores resultados. De esta manera se han venido realizando
muchos estudios sobre los efectos de diferentes extractos vegetales sobre el
desarrollo de C. gloeosporioides, en diferentes frutales de importancia econmica
en el pas, entre ellos el mango, de esta manera nos podemos dar cuenta como ha
aumentado el inters por la investigacin en cuanto a nuevos mtodos de manejo
eficientes y que no causan daos ni contaminacin de los ecosistemas, lo que esta
logrando que se reduzca la utilizacin de productos qumicos y aumente la
investigacin de nuevas alternativas biolgicas.
El presente estudio forma parte de un proyecto llamado Estudio de
epidemiologia y control no convencional de la Antracnosis (Colletotrichum
gloeosporioides) en mango comn (criollo, hilacha, Magdalena River) el cual se
llevo a cabo en la Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria
CORPOICA. En este proyecto se evalu la accin y el efecto de 6 extractos
vegetales sobre el desarrollo y crecimiento de C. gloeosporioides, agente causal
de la antracnosis en mango.
15
2. MARCO TEORICO:
Colombia a nivel mundial ocupa el lugar 24 como productor mundial de mango,
superado por pases latinoamericanos como Mxico y Brasil, con un crecimiento
dinmico de 5.2%, aunque con una participacin aun muy marginal que alcanza
tan slo 0.5%. La expansin en el rea de cultivo ha alcanzado un crecimiento
durante la dcada 1994-2003 de 7%. (Agrocadenas, 2005).
El mango es la segunda especie frutcola de mayor importancia econmica en la

regin Caribe Colombiana despus del banano, datos del Ministerio de
Agricultura reportan que durante el 2007, Colombia export ms de 200 toneladas
de mango fresco y seco a diferentes pases, por valor de 582 mil dlares, siendo
Estados Unidos el mayor receptor, seguido de Canad y Alemania. Esta cifra
revela un incremento, teniendo en cuenta que en el 2006 fue de 126 toneladas.
(Ministerio de Agricultura, 2007).
Su gran demanda en los mercados nacional e internacional ha llevado a la
expansin de las reas de siembra. No obstante, la presencia de la antracnosis se
ha constituido en el principal factor limitante de la productividad en la zona
bananera del Magdalena, y en cultivos de mango de todo el pas, en donde se han
tenido prdidas entre 40% de la cosecha tambin ha logrado grandes prdidas en
poscosecha. (Paez, 1995).
El rea dedicada al cultivo del mango, es mayor ao tras ao a nivel mundial y
nacional. Es as como en los pases productores, el incremento en superficie
plantada en la ltima dcada, aument a una tasa promedio anual del 3.52%,
mientras que la produccin lo hizo a un promedio de 5.95%, habindose
cosechado un total de 28.848.460 toneladas en el ao 2000. En Colombia, se ha
mantenido la misma tendencia, lo que permite registrar a finales del ao 2000, un
rea plantada de 11.908 hectreas y una produccin de 981.686 toneladas,
aportadas por los huertos existentes principalmente en Antioquia, Cundinamarca y
Tolima. Estas cifras sealan la importancia del cultivo, razn por la cual se
dedican esfuerzos en conocer su comportamiento y proponer maneras de manejo
16
Con formato: Fuente:

(Predeterminado) Times New Roman,
12 pto
que le permitan al agricultor, obtener la mayor produccin con una calidad que
sea reconocida por el consumidor. (Cartagena, 2000).
Desde el punto de vista fitopatolgico, son muchas las enfermedades que afectan
al mango, siendo una de las ms importantes la antracnosis, debido a las altas
prdidas que se producen gracias a esta enfermedad, tanto en calidad como en
cantidad y por los altos costos que requieren su manejo. (Prez, y Lpez, 1989).
2.1 MANGO:
El mango es originario de la India, de donde se distribuy por todo el suroeste de
Asia y el archipilago malayo. A Amrica lleg por dos vas: de Asia fue llevado
por los portugueses al sur de frica y luego a las costas brasileas, en el siglo
XVI. Los espaoles lo introdujeron a Mxico en los siglos XV y XVI, mediante el
comercio que se estableci con Filipinas. Esta es una de las frutas ms
importantes en el trpico, se cultiva en todos los pases que se encuentran en esta
rea. Se conoce hace mas de 4000 aos en la India, donde en la actualidad existen
mas de 800.000 hectreas cultivadas con este frutal. (Salazar, 1992).
Colombia posee grandes extensiones de tierra ecolgicamente aptas para su
cultivo, principalmente la costa Atlntica y regiones mas clidas del interior del
pas como los valles de los departamentos de de Tolima, Huila y los llanos
orientales. (Torres, 1976). En Colombia se cultiva sobre los 1200 m.s.n.m. pero
con reducida produccin y baja calidad, lo ptimo es por debajo de los 600
m.s.n.m. con una estacin definida de sequa de 3 meses. El mango soporta
humedades relativas bajas, la radiacin solar alta favorece la fructificacin, el
desarrollo y el color del fruto. (Agrocadenas, 2005).
Segn datos del Ministerio de Agricultura, durante el 2003 el cultivo de mango
particip con el 6,2% de la produccin total de frutas frescas en Colombia,
ocupando el tercer lugar con una produccin de 168 mil toneladas. El
departamento de Cundinamarca particip con el 31.3% de la produccin total
nacional de mango en el 2003 y le sigui de cerca Tolima aportando el 23.0% En
cifras, Tolima produjo durante el ao 2002, 38.817 Tm. de mango y
17
Cundinamarca por su parte 52.816 Tm. Para el perodo 1992-2003 Cundinamarca

present la mayor dinmica de crecimiento en la produccin con 5.58% mientras
que Tolima alcanz 5.12%. Antioquia es otro departamento que se destaca con el
14.6% de la produccin nacional de mango y ha tenido buenos niveles de
crecimiento durante 1993-2003 creciendo a una tasa del 7.9% promedio anual
hasta alcanzar 24.768 Tm. en el 2003. (Agrocadenas, 2005).
Cundinamarca es actualmente el departamento que ms tierra destina a la

explotacin de mango, con un 26.5% del rea cultivada en el pas, 3.687 Ha.,
mientras que Tolima participa con el 22.4% del rea. En general el crecimiento
del rea sembrada en mango ha sido de 7% por ao entre 1992-2003, por lo que si
se compara con el de la produccin (4,9%) se concluye que la productividad de la
tierra ha disminuido y esto se observa en la tasa de crecimiento de los
rendimientos durante la dcada, que fue de 1,6%. En 1992 se obtuvieron los
mayores rendimientos promedios del pas con 14 Tm./Ha., mientras que en el
2003 apenas alcanzaron apenas 11,0 Tm./Ha. (Agrocadenas, 2005).
Aunque el promedio nacional de productividad del mango en Colombia alcanza

un rendimiento de 11.0 Tm./Ha., las diferencias regionales son notorias. As por
ejemplo en Boyac el cultivo de mango alcanza un rendimiento de 16.5 Tm./Ha.,
seguido por Bolvar con 15.8 Tm./Ha. Cundinamarca, actualmente el principal
productor, alcanz en el 2003 un rendimiento de 14.3 Tm./Ha., mientras que
Tolima, el segundo productor, obtuvo un bajo nivel con 12.4 Tm./ Ha. Antioquia,
el tercer productor nacional de mango se coloc en un nivel intermedio con unos
rendimientos que alcanzaron 11.2 Tm./Ha.
Segn datos de la Encuesta Anual Manufacturera del DANE, el uso del mango
como materia prima por parte de la industria colombiana ha presentado un
crecimiento importante, en especial a partir de 1996, ao en que consumi 5.532
Tm. para pasar a 20.386 Tm. consumidas en 2000. El crecimiento de este
consumo en el perodo 1993- 2000 fue de 32.4% promedio anual lo que refleja un
gran dinamismo. Sin embargo, en el mismo perodo el incremento del valor de las
18
compras de mango por parte de la industria fue del 47.0%, tasa muy superior al
incremento del volumen demandado, lo cual preocupa en trminos de la
sostenibilidad del crecimiento de la demanda industrial del producto nacional, y
constituye una limitante competitiva para el desarrollo de dicha fruta.
(Agrocadenas, 2005).
En cuanto a las exportaciones de mango de Colombia se observa segn datos del

DANE, que el mango participa en el 2003 con el 3,8% del total del valor de
exportaciones de los seis frutales de exportacin y derivados del mango,
presentando gran dinamismo con una tasa de crecimiento anual promedio de
23.5% en el perodo 1994-2003. (Agrocadenas, 2005).
Colombia exporta actualmente slo el 0.5% de su produccin total de mango,

proporcin que aunque ha venido creciendo especialmente durante los ltimos
aos de la dcada de los noventas, pasando de 34 Tm. en 1994 a 12.712 Tm. en el
2001, pero con un fuerte descenso a partir de este ao alcanzando 301 Tm. en el
2002 y 874 Tm. en el 2003. En el ao 2002 se afectaron las variedades Kent y
Keitt de exportacin, por lo que se redujeron las colocaciones de estas variedades.
La oferta exportable de mango es relativamente escasa y gran parte de la
produccin nacional es absorbida por el mercado interno, en especial por las
cadenas de supermercados. (Agrocadenas, 2005).
2.1.1 Mango comn o hilacha:
Santa barbar Antioquia cuenta con ms de 1200 hectreas, y con una produccin
anual promedio de 15000 toneladas de mango hilacha, siendo la zona ms
productora de esta variedad de mango en el pas. Las plantaciones de la regin son
bosques nativos de mango que han crecido en forma espontanea y dispersa, hasta
constituirse en grandes huertos desuniformes y de distribucin caprichosa, con
una explotacin de tipo tradicional sin ningn manejo agronmico en cuanto a
propagacin, distancias entre arboles, podas, fertilizantes, sistemas de cosechas y
19
manejo poscosecha, entre otros, lo que desfavorece la explotacin comercial de

este frutal. En Colombia departamentos como el Tolima y zonas del la costa
atlntica son tambin productoras de mango comn o hilacha. (Londoo, M et al.
2007).
La investigacin y tecnologa generada para el cultivo de mango en Colombia, se

dirige en su mayora, hacia variedades mejoradas, pero para el mango tradicional
o comn se cuenta con poca informacin. Se presentan deficiencias tanto en la
etapa de produccin, como en la etapa de poscosecha. En la primera, para la
consecucin de una buena calidad de fruta; en la segunda, donde estn incluidas
todas las actividades que se realizan entre la cosecha y el consumo y que debido a
carencias o fallas en los procesos de recoleccin, seleccin, clasificacin,
empaque y embalaje, conlleva a perdidas poscosecha y a problemas de
comercializacin, por la mala calidad del producto ofrecido y el consecuente
desestimulo en la produccin. (Londoo, M et al. 2007).
2.1.2 Variedades resistentes a la antracnosis:
Un experimento realizado en 1991, en el C.I. Caribia de CORPOICA, permiti

conocer el comportamiento de siete cultivares frente a la antracnosis; en el se
destacaron los cultivares Keitt y Tommy Atkins debido a su baja suceptibilidad;
por el contrario los cultivares Rosa, Irwin y Azucar demostraron ser altamente
susceptibles (Pez, 1995).
En 1997, Pez R. realiz otro estudio para determinar variedades resistentes, en el

cual concluyo, que los cultivares Tommy Atkins, Keitt, James Saigon, Early Gold
y Vandyke son los de mejor comportamiento frente a la enfermedad puesto que
presentan una baja susceptibilidad a esta enfermedad fungosa, endmica en la
zona bananera del Magdalena, Colombia. Esta caracterstica se fundamenta en su
limitada produccin de frutos por pancula. Incluso en los periodos de lluvia,
mantienen su tolerancia a la antracnosis, lo que puede representar una ventaja
competitiva para el agricultor que use aquellas variedades. (Pez, 1997).
20
Se confirmo tambin que la incidencia y la severidad de la antracnosis se

correlacionan de forma directa con algunos factores climticos, y en especial, con
la humedad relativa y la precipitacin. En la medida que se incrementaron los
valores de esos factores climticos, aumentaron la incidencia y el nivel de
severidad de la enfermedad en los cultivares de mango. (Pez, 1997).
2.1.3 Botnica:
El mango pertenece a la familia de las anacardiceas en la que se clasifican 64
gneros, y 15 especies comestibles. La mas cultivada es Mangifera indica linn. Es
un rbol corpulento y de gran crecimiento; su forma depende del tipo de
propagacin, siendo los arboles por semilla erectos y altos,
mientras los
injertados son mas bajos, ramificados y abiertos. La planta siempre esta verde,
excepto en los periodos de crecimiento en los cuales las hojas de los nuevos brotes
presentan coloracin rojiza y luego se tornan verde brillante. Generalmente, los
brotes se presentan en ramas que estaban en reposo; all se empiezan a diferenciar
las yemas florales, las cuales se desarrollan para dar lugar a nuevos frutos. (Torres
1976).
Dependiendo del clima, los arboles de mango tienden a producir alternadamente

una cosecha abundante en un ao y poca o ninguna cosecha en el ao siguiente. Si
el rbol se esta desarrollando pobremente, debido a las temperaturas desfavorables
o a condiciones del suelo adversas, una cosecha abundante puede impedir la
fructificacin posterior durante dos aos o ms. La inflorescencia es una pancula
axilar o terminal. Las flores en cada pancula, son en su mayora machos,
presentndose hermafroditas en menor proporcin. En cada pancula se
encuentran hasta 7000 flores o ms segn la variedad. A pesar del gran nmero de
flores solo unas pocas llegan a formar fruto.
El fruto es una drupa cuyo tamao, forma y color, vara segn las variedades. Los
frutos de mango se desarrollan rpidamente despus de haber cuajado; tardan en
madurar de cuatro a cinco meses. Su tamao vara de tres a quince centmetros de
21
largo y puede pesar de unos pocos gramos hasta una o dos libras, segn la
variedad. El color de la fruta madura varia de verde a rojo; as mismo su sabor y
aroma, varan grandemente entre variedades o se adaptan a muy diferentes gustos.
La pulpa puede tener o no fibra. (Torres 1976).
2.1.4 Fase reproductiva:
La fase reproductiva depende de la diferenciacin de yemas vegetativas de un ao

de edad a yemas reproductivas, y de las condiciones ambientales. Requiriendo una
poca seca para inducir floracin; durante el principal periodo de floracin, las
lluvias reducen la polinizacin y el cuajado de frutos; sin embargo, el tiempo
hmedo nublado con frecuencia prolonga la produccin de flor lo suficientemente
como para producir oleadas de floracin a intervalos durante varios meses, dando
como resultado unas tres o cuatro cosechas parciales sucesivas en una sola
temporada de fructificacin. (Medina, et al, 1981).
El porcentaje de fructificacin en algunas variedades no pasa de 0.028%; en la

mayora de los casos una de cada 150 flores aparentemente
fertilizada se
desarrolla hasta frutos; esto se explica por la morfologa de las flores, ausencia de
agentes polinizadores, fertilidad inadecuada del suelo y factores de orden
patolgico, fisiolgico y climtico (Singh, 1978).
2.1.5 Clima y suelo:
El mango es una planta de climas clidos con periodos secos y hmedos

alternados y definidos. La sequa es importante antes y durante la floracin, en el
cuajado de los frutos y durante los primeros meses de crecimiento. Conviene esa
sequa para la abundante floracin del rbol y para proveer un medio ambiental
favorable por que evita que las flores y los frutos sean atacados por enfermedades
como antracnosis. El mango es poco resistente al fro; su crecimiento se ve
reducido cuando la temperatura se esta por debajo de los 18 grados centgrados y
es daado seriamente con temperaturas cercanas a cero grados centgrados. Por
22
esto climas como los presentados en el Tolima, los llanos orientales y la zona
bananera son excelentes para el cultivo de mango. (Torres. 1976).
Las exigencias de suelos del mango son mnimas; se le encuentran en gran

variedad de suelos, inclusive donde el aguacate y los ctricos fracasaran. De todas
maneras es preferible el uso de suelos sueltos y bien drenados. (Torres. 1976).
2.2 ANTRACNOSIS:
La Antracnosis es la enfermedad fungosa principal y ms comn en las regiones
donde se cultiva el mango. Su efecto es limitante en la produccin, debido a que
ocasiona gran prdida de frutos en campo, al momento de la cosecha y en
poscosecha (almacenamiento y transporte). Estudios adelantados por CORPOICA
indican que esta enfermedad causa entre 40 y 50% de prdidas en cosecha en
papaya y mango, respectivamente. (Pez, 2003).
La enfermedad aparece en tejidos de plantas en desarrollo y tambin cuando estn
en estado maduro. Las infecciones de hojas, tallos e inflorescencias jvenes,
resultan en lesiones oscuras y hundidas de forma subcircular o angular que se
unen y destruyen reas grandes; cuando las hojas se encuentran severamente
afectadas presentan sntomas de enrollamiento (Jeffries et al, 1990). Las prdidas
econmicas son ms significativas cuando Colletotrichum sp; ataca los frutos
ocasionando dos tipos de enfermedades, la primera durante su desarrollo en el
campo (precosecha) y se manifiesta como lesiones necrticas, hmedas y
hundidas donde se producen masas conidiales que infectan nuevos tejidos y
rganos de la planta, o que colonizan materia orgnica en proceso de
descomposicin y la segunda afecta los frutos maduros durante el almacenamiento
(poscosecha), que proviene de una infeccin quiescente, lo que permite ubicar a
Colletotrichum entre los patgenos ms importantes de poscosecha (Bailey et
al,1992).
En la floracin del mango Mangifera indica L., las lesiones primero aparecen en
las panculas florales como pequeas manchas de color caf o negras, las cuales se
23
agrandan, se unen y pueden causar ennegrecimiento total de la inflorescencia y

marchitamiento antes de que el fruto inicie su formacin. Posteriormente, las
infecciones producen lesiones hundidas en frutos jvenes, los cuales por lo
general se caen. Cuando la infeccin ocurre en frutos grandes (4-5 cm),
usualmente la lesin no se desarrolla, pero el microorganismo permanece en
estado de quiescencia hasta que los frutos maduran y aparecen tambin lesiones
hundidas de color oscuro. En todos los casos el desarrollo de la lesin est
acompaado de la salida de masas rosadas de esporas sobre la superficie de los
tejidos como consecuencia de la maduracin del acrvulo (Jeffries et al, .1990).
2.2.1 Etiologa
El Gnero Colletotrichum, contiene un nmero diverso de hongos que incluyen

los patgenos de plantas y los saprofticos (Adaskaveg, et al, 1997). Las especies
de este gnero son consideradas como las ms exitosas dentro de los hongos
patgenos de plantas, porque causan dao de importancia en un amplio nmero
que crecen tanto en zonas templadas como en zonas tropicales. Este patgeno
puede afectar a la mayora de las partes de las plantas incluyendo races, tallos,
hojas, flores y frutos, pero a menudo son altamente especficos sobre tejidos
individuales o algunas especies de plantas en particular (Bailey et al., 1992).
La Antracnosis en mango es causada por el hongo Colletotrichum gloeosporioides
(Penz.) Penz. & Sacc., que en su forma sexual corresponde a Glomerella
cingulata (Ston) Spauld & Scherenk. El hongo C. gloeosporioides pertenece a la
superdivisin Deuteromycotera, clase-forma Coelomycete, orden Melanconiales y
familia Melanconiaceae. Se caracteriza porque presenta las conidias hialinas,
unicelulares, ovoides u oblongas, ubicadas en una estructura llamada acrvulo.
Estos cuerpos son en forma de disco, cerosos, subepidermales y tpicamente
oscuros. Adems de los conidiforos y conidias, presentan setas en el borde del
acrvulo y entre los conidiforos. (Pez, 2003).
Arauz y Umaa (1986) encontraron que C. gloeosporioides esporula

abundantemente sobre el micelio, conteniendo las conidias en una matriz
24
gelatinosa color rosado salmn llamada acervulo; el mismo tipo de esporulacin

fue encontrado por SIMMONDS (1965).
2.2.2 Sintomatologa Causada
En mango, el patgeno afecta hojas, ramas, inflorescencias y frutos, ocasionando

sobre estos ltimos severos daos que demeritan su calidad, lo que repercute en la
prdida de valor comercial y disminucin de los rendimientos por unidad de
superficie. En las hojas viejas se presentan manchas pardo oscuras o marrn con
halo amarillo; las hojas jvenes muestran manchas pequeas de coloracin oscura
y de forma irregular que aparecen del pice y los bordes hacia el centro de la
lmina foliar y que pueden unirse para formar reas necrticas ms extensas que
provocan su cada o impiden el desarrollo de la fotosntesis, tambin es notoria la
presencia de puntos necrticos en las nervaduras y encurvamiento y necrosis de
los pices. (Pez, 2003).
Los sntomas se manifiestan en las ramas nuevas bajo la forma de manchas

necrticas y a medida que la enfermedad avanza las ramas infectadas se defolian,
se van secando desde la punta hacia la base y adquieren un color oscuro. Sobre las
panculas aparecen manchas o lesiones alargadas de coloracin oscura (marrn
oscuro), que ocasionan la cada de las flores y frutos recin cuajados. Los frutos
cuajados (estado de alfiler) al ser infectados toman una coloracin oscura y se
momifican con la posterior cada; en frutos inmaduros la enfermedad se expresa
por medio de manchas de color pardo claro y de aspecto aceitoso, presentndose
el mayor nmero de ellas en la zona cercana al punto de unin con el pednculo;
generalmente estas manchas no se agrandan debido a que el patgeno se encuentra
en estado latente. (Pez, 2003).
En frutos maduros, los sntomas son fcilmente distinguibles aprecindose

manchas de color marrn oscuro, ligeramente hundidas en la superficie y
acompaadas de cierta emisin de goma; en ocasiones aparece sobre la epidermis
del fruto un chorreado oscuro debido a la accin de las esporas del hongo al ser
25
arrastradas por el agua. Por efectos de las toxinas del hongo, la pulpa se deteriora
(pudricin) presentando reas negruzcas que en sus inicios son blandas, pero que
despus se endurecen; finalmente los frutos se pudren totalmente y se desprenden
de la planta con facilidad. (Pez, 2003).
Figura 1: Sntomas de antracnosis en frutos maduros, (Aguirre. 2008).
El patgeno infecta frutos en cualquier estado de maduracin; cuando el hongo

afecta frutos recin formados, estos se momifican y permanecen adheridos a la
planta. En tejidos ms maduros, el desarrollo del patgeno se ve limitado,
permaneciendo quiescente. Si el ataque ocurre en estado intermedio de desarrollo,
se observa una maduracin prematura con coloracin amarillenta normal y el fruto
cae al suelo. Cuando los frutos alcanzan a desarrollarse, se ven cubiertos de
manchas necrticas y la pulpa presenta una textura mas dura. (Behari, 1968).
Figura 2: Antracnosis por Colletotrichum gloeosporioides. Se manifiesta en

forma de manchas negras sobre la superficie del fruto. (Aguirre. 2008).
26
2.2.3. Fuentes de inculo

Las mayores fuentes de inoculo se encuentran en las hojas conteniendo conidias
producidas en acrvulos y las ascosporas producidas y liberadas desde el
peritecio. En acrvulos y peritecios jvenes, las conidias y las ascosporas estn
encerradas en un material hmedo mucilaginoso, conocida como espora matriz, la
cual es una mezcla compleja, que est compuesta en su mayor parte por
polisacridos, glicoprotenas y varios componentes menores incluyendo enzimas
como la invertasa, poligalacturonasa, celulosa y la pectinliasa (Bailey et al.,
1992).
La espora matriz juega un papel muy importante porque: puede inhibir y prevenir
la germinacin prematura de las esporas para asegurar as la distribucin del
inculo, protege a las esporas de las temperaturas extremas, de los rayos ultra
violeta y de los efectos txicos de los metabolitos de las plantas y conserva la
viabilidad de las esporas bajo condiciones de baja humedad (Bailey et al., 1992).
2.2.4. Dispersin
Las conidias producidas en acrvulos se dispersan por el salpique de la lluvia, lo

cual indica que hay separacin del patgeno por impacto de las gotas y transporte
de esporas, siendo estos dos aspectos esenciales para los procesos fsicos en el
ciclo de la enfermedad Por lo tanto, la lluvia y la intensidad de ella, juegan un
papel muy importante en la dispersin de las esporas, y posiblemente tenga el
mismo efecto en todas las especies de Colletotrichum (Bailey et al., 1992). El
factor principal de dispersin del patgeno es la lluvia, pero tambin pueden
hacerlo los insectos de los rdenes Diptera, Coleoptera y Homoptera ya que
transportan las esporas a partir de los frutos esporulados que se encuentren en el
rbol o el suelo (Rondon, 1996).
27
2.2.5. Condiciones favorables
La infeccin durante los perodos hmedos est relacionada con la temperatura y

duracin del perodo hmedo. Estudios de laboratorio permitieron conocer que la
germinacin de las esporas es mayor con temperatura de 15C y humedad relativa por
debajo de 95%; el apresorio o estructura de penetracin del hongo se forma 18 horas
despus bajo estas condiciones. La formacin del apresorio en el tejido vegetal es ms
eficiente con temperaturas de 25C, observndose lesiones a los 5 das. El patgeno
penetra directamente o a travs de heridas causadas principalmente por insectos.

El hongo es favorecido por elevada humedad relativa (ms de 82%), alta
precipitacin y temperaturas oscilantes entre 22 y 32 grados centgrados. ( Pez,
2003).
En el campo est establecido que la temperatura ptima para la germinacin de las

esporas del hongo oscila entre 22 y 32C con ptima de 25C; las esporas
presentes en las ramillas o en el suelo, son viables despus de dos aos, en las
ramas superiores despus de 19 meses y en las hojas cadas en el suelo despus de
14 meses. Las condiciones de alta humedad (ms de 82%), lluvias frecuentes y la
prevalencia del roco y nubosidad durante los perodos crticos favorecen el
desarrollo de la enfermedad e intensidad de los ataques. En condiciones de la
Costa Atlntica, donde la temperatura es alta casi todo el ao, la humedad relativa
y las precipitaciones son los factores ms influyentes sobre el proceso infectivo
por C. gloeosporioides. (Pez, 2003).
2.2.6. Germinacin
Despus de la disposicin en la superficie de las plantas, las conidias y las

ascosporas germinan experimentando una diferenciacin compleja que requiere de
sntesis de protenas para formar los apresorios, los cuales son esenciales para la
infeccin. Durante la germinacin, una septa es producida por las conidias de la
mayora de las especies de Colletotrichum, seguida de una mitosis. Los apresorios
son ssiles, pero en el final pueden formar diferentes tubos germinativos y algunas
28
veces son producidos en la punta del micelio ramificado. Los apresorios pueden
formarse rpidamente en ausencia del hospedero, por ejemplo, cuando la conidia
germina en una superficie dura como un vaso de precipitado o una membrana de
nitrocelulosa (Bailey et al., 1992).
Los apresorios son caractersticas morfolgicas del gnero Colletotrichum,
pueden ser globosos o subglobosos, con o sin lbulos. Dentro de las especies se
diferencian por su tamao, por ejemplo, los apresorios de C. gloeosporioides
miden entre 6-20 m x 4-12 m y los apresorios de C. acutatum miden entre 8.510 m x 4.5-6 m; pero tienen muchas caractersticas en comn y entre ellas que
las paredes tienen dos tres capas compuestas de distintos carbohidratos y
melanina. La melanina requiere de sntesis de protenas y es la encargada de darle
al apresorio su tpica apariencia oscura; esta puede proteger al apresorio de la
irradiacin, pero especialmente est involucrada en los procesos de penetracin
(Bailey et al., 1992).
2.2.7. Infeccin quiescente
El hongo Colletotrichum es uno de los pocos microorganismos que tienen la

capacidad de sobrevivir en estado de latencia, de dormancia o quiescenia como
apresorio en la superficie hospedera, o como infeccin oportunista en los tejidos
del hospedero cuando las condiciones medio ambientales o fisiolgicas impiden
su completo desarrollo, siendo esta una caracterstica que le permite al hongo
escapar de los vacos epidemiolgicos que ocurren entre los diferentes estados de
susceptibilidad de los cultivos (Freeman et al., 1998).
Los sntomas de la enfermedad pueden manifestarse mucho tiempo despus de
haberse iniciado la infeccin. Por otra parte, el estado de latencia, dormancia o
quiescencia, como la situacin en la cual el patgeno permanece largos periodos
en estado inactivo en el hospedero y bajo circunstancias especficas se activa
(Prusky, 1996).
29
La ocurrencia y la permanencia de la latencia o quiescencia del patgeno en o

dentro del hospedero, indica que hay una dinmica de equilibrio entre el
hospedero, el patgeno y el ambiente; los cambios fenolgicos y fisiolgicos en el
hospedero, en el ambiente o en ambos, conllevan a la prdida del equilibrio
establecido y permiten que el patgeno contine su ataque (Jarvis, 1994).
2.3 EXTRACTOS VEGETALES:
En los ltimos aos, la sociedad mundial ha priorizado los aspectos ambientales,

conduciendo muchas investigaciones hacia el descubrimiento de nuevas materias
bioactivas que puedan ser empleadas en el manejo y control de enfermedades, con
menos efectos negativos al ambiente por tratarse de productos naturales (Bianchi,
Zambonelli, 1997).
Las plantas producen compuestos como cido ascrbico, compuestos fenlicos
(fundamentalmente cidos fenlicos y sus steres y algunos flavanoles, como la
catequina), con propiedades antimicrobianas que pueden ser empleadas para
controlar diferentes enfermedades como antracnosis, mildeo polvoso, royas, entre
otras. La obtencin de los extractos vegetales y el estudio de sus compuestos
activos propician su empleo contra diferentes fitopatogenos y plagas incluyendo
thrips, Colaspis sp, Collaria sp, caros, nematodos, hongos, y bacterias. En
condiciones in vitro, los extractos inhiben el crecimiento del patgeno, as como
Con formato: Fuente: Times New

Roman, Cursiva
la esporulacin y germinacin de esporas, de modo que ayudan a controlar

algunas enfermedades de frutos y hortalizas. In vivo, el efecto fungicida de los
extractos vegetales varia en funcin a la metodologa de preparacin (solvente,
seco, fresco, tiempo de almacenamiento, etc.), especie botnica, rgano de la
planta (races, hojas, semillas, etc.), fecha de cosecha, etc. Sin embargo, la
combinacin de extractos vegetales con algn otro compuesto natural puede
potenciar su actividad fungicida. (Hernndez et al. 2007)
La produccin de sustancias bioactivas o metabolitos secundarios por las plantas
ocurre a travs de diferentes vas metablicas, generando gran nmero de
30

Roman, Cursiva
compuestos, muchos de los cuales slo son detectados en un determinado grupo

de plantas y en concentraciones variables. La cantidad y composicin de esta clase
de compuestos es muy variable y depende del tipo de tejido, edad de la planta, su
habitat y el tipo de suelo (De Matos, 2000). Muchos de estos compuestos son
producidos y almacenados en tejidos jvenes, particularmente en hojas o tejidos
productivos como flores y semillas. (Costa et al. 2001). Numerosos estudios han
constatado que muchos de estos compuestos afectan importantes funciones en los
vegetales, ya que pueden actuar en la preservacin de la integridad de las plantas,
contra el ataque de enemigos, como nematodos, bacterias, hongos, insectos y
herbvoros o en la atraccin de polinizadores y dispersores de semillas (Bennett,
1994).
Diversos productos derivados de las plantas han mostrado un efecto
antimicrobiano. Entre estos compuestos se destacan los flavonoides, fenoles,
terpenos, aceites esenciales, alcaloides, lectinas y polipptidos. (Cowan, 1999).
Sus mecanismos de accin son variables; por ejemplo la toxicidad de los fenoles
en microorganismos se atribuye a la inhibicin enzimtica por oxidacin de
compuestos. El modo de accin de los terpenos y aceites esenciales no ha sido
dilucidado por completo, pero se postula que pueden causar rompimiento de la
membrana a travs de los compuestos lipofilicos. De los alcaloides se han
postulado que se intercalan con el DNA, y de las lectinas y poli pptidos se
conoce que pueden formar canales inicos en la membrana microbiana o causar la
inhibicin competitiva por adhesin de protenas microbianas a los polisacridos
receptores del hospedero. (Cowan, 1999).
Rao et al. (1992) separaron y evaluaron el efecto fungisttico de los aceites
esenciales de varias plantas, y encontraron la mayor efectividad contra
Colletotrichum gloeosporioides, Curvularia pallescens y Periconia atrovirens,
con aquellos extrados de C. cyminum Mill y flores de S. aromaticum L. Ambas
plantas mostraron un efecto fungisttico a 1000ppm y un efecto fungicida a 2000
y 3000ppm. Determinaron tambin que el efecto fungitxico del aceite mineral
resida en sus fracciones aldehdica y fenlica.
31

Roman, Cursiva
2.3.1 Extracto de swinglia:

La Swinglia glutinosa ha sido reportada con propiedades fungicidas al igual que el
aceite de Citrus Medica (Atehortua, 1994). Para enfermedades de frijol ha sido
usada con xito en la regin de Santander. (Moreno, A. 1995. Com. Pers.
CORPOICA provincia Guanentina). Tambin estudios pasados han evaluado este
extracto para el control de antracnosis en frijol, con buenos resultados. En mango,
no se han logrado muchas investigaciones para el control de antracnosis con este
extracto. El CIAT (1989), realizo varios experimentos con extracto de hojas de
swinglia para el control de antracnosis, asperjando el extracto un da despus de
su preparacin e inoculando una hora despus con una raza de C. lindemuthianum.
Este tratamiento logro reducir en un 74% la severidad respecto a un testigo donde
se inoculo el hongo sin aplicacin del extracto.
El Limn Ornamental o Tabog, Swinglea glutinosa (Blanco) Merr. (Rutaceae) es
una especie originaria de Filipinas. Fue introducido a Panam en la dcada del 30
al Jardn Botnico Summit, como parte de una coleccin de especies raras de
ctricos del Asia tropical. Su introduccin se hizo con la finalidad de disponer de
materiales genticos para el mejoramiento de ctricos y tambin para uso como
patrn resistente para injerto de ctricos de fruta. (Esquivel, 2007).
Esta planta es conocida en Asia desde hace siglos por sus propiedades acaricidas y
para el tratamiento de enfermedades de la piel. Recientemente, Weniger et al.
2001. descubrieron que los principios activos del S.glutinosa eran alcaloides
acridionicos. Posteriormente, en Colombia, donde esta planta introducida es una
ornamental bastante comn, se empez a utilizar el extracto de tallo y hojas de
esta planta como biofungicida para algunas enfermedades de plantas. El uso de
estos extractos como biofungicidas es discutible ya que los principales principios
activos son inhibidores de la fotosntesis, y si bien podra controlar ciertos hongos,
tambin podra causar retraso de crecimiento o daos a la planta husped.
(Esquivel, 2007).
32
El extracto de swinglia es un fungicida botnico obtenido a partir de extractos de

vegetales, rpidamente biodegradable e inocuo para el hombre y el medio
ambiente, desarrollado para prevenir y curar enfermedades en flores, frutales,
hortalizas, plantas ornamentales y frjol. Esta compuesto en un 80% de extractos
de plantas de swinglia, entre los que estn tambin Eugenol, Linalil, Citrolenol,
Geraniol, y terpinen. Posee un pH de 4.5, y acta como fungicida y protectante. El
extracto ha sido utilizado para el control de antracnosis en algunas especies, y
para Mildeo polvoso
Marchitamiento en frjol. (Abonos superior Ltda.
2005).
2.3.2 Capsialil:
Capsialil es un extracto concentrado de ajo (Allium sativum) y aj (Capsicum
spp.) que acta como repelente botnico de insectos y caros, efectivo contra un
amplio grupo de especies plagas. Puede ser utilizado en aplicaciones dirigidas al
follaje y al suelo en cultivos de flores, frutales, ornamentales, hortalizas y pastos.
Irrita las plagas hacindolas ms mviles y por ende vulnerables a los factores
externos, y protege las plantas de insectos comedores de follaje. (Ecoflora. 2005).
El ajo, es procedente del centro y sur de Asia desde donde se propag al rea
mediterrnea y de ah al resto del mundo, se cultiva desde hace miles de aos. A
finales del siglo XV los espaoles introdujeron el ajo en el continente americano.
El ajo es una planta perenne de la familia de la cebolla, las hojas son planas y
delgadas, de hasta 30 cm de longitud. Las races alcanzan fcilmente
profundidades de 50 cm o ms, el bulbo, de piel blanca, forma una cabeza
dividida en gajos comnmente llamados dientes. Cada cabeza puede contener de 6
a 12 dientes, cada uno de los cuales se encuentra envuelto en una delgada pelcula
de color blanco o rojizo. Cada uno de los dientes puede dar origen a una nueva
planta de ajo, ya que poseen en su base una yema terminal que es capaz de
germinar incluso sin necesidad de plantarse previamente. Este brote comienza a
aparecer luego de los tres meses de cosechado, dependiendo de la variedad y
condiciones de conservacin (Special Nutrients, 1996).
33

Las flores son blancas, y en algunas especies el tallo tambin produce pequeos
bulbos o hijuelos. Una caracterstica particular del bulbo es el fuerte olor que
emana al ser cortado. El ajo (Allium sativum L.) posee productos azufrados como
alicina, alina, cicloide de alicina y disulfuro de dialil con propiedades repelentes,
esto le da caractersticas que hace que se pueda utilizar como repelente de afidos,
tambin previene el ataque de hongos y acta como bactericida y fungicida
(Special Nutrients, 1996)
El aj, pertenece al gnero Capsicum, incluye ms o menos 25 especies y tiene su

centro de origen en las regiones tropicales y subtropicales de Amrica,
correspondiendo a las reas de Bolivia y Per, El fruto de la mayora de las
especies de Capsicum contiene capsaicina, y otros compuestos similares (Special
Nutrients, 1996).
2.3.3. Desfan 100:
Desfan 100 es un compuesto orgnico complejo extrado de ctricos. Es un

desinfectante orgnico, ya que es extrado de las semillas de la naranja y toronja
conteniendo fracciones de glucosa, fructosa y cido ascrbico. Es un desinfectante
orgnico que se comporta como un poderoso bactericida, fungicida y algicida.
(ROSS, S. et al. 1990).
Los extractos ctricos son fundamentalmente aceites esenciales obtenidos de las

semillas de diferentes variedades de ctricos, en este caso el aceite esencial de
semillas de toronja (Citrus mxima). Los extractos ctricos, son sustancias
multicomponentes que dentro del fruto tienen funciones biolgicas especficas,
que al extraerse y contraerse se modifican para encontrar usos diversos en la
industria, siendo uno de los mas recientes, el de agente bactericida y fungicida.
Los mecanismos de accin de los extractos ctricos son: el rompimiento de la
pared celular en enlaces b 1-4, precipitacin de protenas, oxidacin de
protoplasma e inactivacin enzimtica, proporcionndoles un amplio espectro de
34
accin. Estos mecanismos se activan por contacto entre el producto a tratar y el

extracto ctrico, lo que los hace seguros ya que generan un mnimo de resistencia
bacteriana. (Solusan, 2002).
Particularmente, las semillas de naranja (Citrus sinensis), contienen altas

concentraciones de fenoles, incluyendo numerosas flavanonas y flavonas
polimetoxiladas, glicsidos de flavonas y otros glicsidos fenlicos y se ha
demostrado que estos metabolitos secundarios estn relacionados con la actividad
antioxidante de este gnero. (Manthey. 2004).
2.3.4 Ecoswing:
Ecoswing es un fungicida preventivo y curativo natural de amplio espectro
elaborado principalmente a partir de los ingredientes activos presentes en ctricos
no comestibles como la Swinglea glutinosa entre otros, de alta concentracin y
pureza, muy efectivo para el control de mildeos, cenicillas, Oidiums, royas y otras
enfermedades de tipo fungoso. Su eficacia ha sido probada en cultivos de flores
como rosas, grberas y hortensias, en frutales como uva, mora y durazno y en
hortalizas como tomate, entre otros cultivos. (Ecoflora, 2005). La diferencia que
hay entre Ecoswing y el Extracto de Swinglia, se centra en la composicin del
cada extracto, dependiendo de la casa comercial, en este caso la composicin de
Ecoswing segn su casa comercial se basa en varios ingredientes activos presentes
en ctricos no comestibles entre ellos la Swinglea glutinosa, mientras que el
extracto de Swinglia tiene como ingrediente activo, la Swinglea glutinosa
nicamente.
Es idneo para el manejo integrado de enfermedades, en rotaciones de programas
de agricultura ms limpia, en la implementacin de Buenas Prcticas Agrcolas y
en programas de agricultura ecolgica. La eficacia de Ecoswing ha sido
comprobada en cultivos de flores, hortalizas y frutales por el Departamento
Tcnico de Ecoflora, registrado ante el ICA para la realizacin de pruebas de
eficacia agrobiolgica de extractos vegetales de uso agrcola. Ecoswing acta
35
Aproximadamente 2 minutos despus de que entra en contacto con las esporas del
patgeno comienza un proceso de desecacin y prdida del contenido celular
haciendo la espora no viable, evitando su germinacin. (Ecoflora, 2005).
2.3.5. Xplode:
Xplode SL es el primer disruptor bioqumico de comportamiento, fabricado
industrialmente, a partir de concentrados grado alimenticio de capsaicina y
alicina; de alta actividad biolgica y con efecto repelente, insecticida y acaricida.
La mezcla de Capsaicina y Alicina de Xplode SL, acta produciendo una

disrupcin del proceso de alimentacin de los insectos, generando irritacin de las
mucosas del aparato digestivo. Xplode tiene una concentracin garantizada de
Capsaicina del (6%) y Alicina del (4%), el cual ha sido desarrollado con
concentrados grado alimenticio, Insumos que se usan para produccin de
alimentos de consumo humano y por lo tanto las concentraciones de
contaminantes son mnimas. Xplode est clasificado dentro de la Categora
Toxicolgica IV. (Flor Integral S.A., 2005).
Grainge y Sleem (1988) recomendaron el ajo (Allium sativum L). Y otras plantas
para el control de la antracnosis. El ajo se usa tambin como insecticida y
repelente para insectos de diferente orden taxonmico, y es efectivo tambin
contra mildeo y roya del frijol (Stoll, 1989) (Mejia, 1993). Los bulbos, hojas,
flores y ltex presentan actividad fungicida (Atehortua, 1994).
2.3.6. Extracto de cardn lefaria (Cereus deficiens Otto & Diert).

Una de las especies abundantes en las zonas xerofticas es el cardn lefaria
(Cereus deficiens Otto & Dietr.), de la familia Cactaceae. Los miembros de esta
familia son conocidos por su rusticidad y algunos de ellos han sido estudiados en
36
el rea de la alimentacin humana (Vlez y Chvez, 1980) y por su capacidad de

actuar como acondicionadores del suelo (Henrquez et al., 2000).
Renzo Zapata et al., (2003) hicieron extracciones etanlicas desgrasadas (EED),
etanlicas sin desgrasar (EESD) y acuosas (EA) de secciones medias del tallo de
Cereus deficiens (Cactaceae), en las que se evalu el efecto de los extractos sobre
el desarrollo in vitro de 10 hongos fitopatgenos entre ellos C. gloeosporioides.
La reaccin de los extractos frente a C. gloeoporioides, se pudo evidenciar en el
desarrollo micelial del hongo. Los valores de DE50 fueron menores con los
extractos etanlicos que con el acuoso, estando estos entre 22 y 44% de
concentracin; en el cual se concluy que el control de un hongo con el extracto
acuoso de la planta indicara la posibilidad de su uso inmediato por los
productores. Los resultados de esta investigacin muestran que ese potencial
podra ser para el control de S. rolfsii y C. gloeosporioides, ya que presentaron los
mejores resultados.
37
3. FORMULACIN DEL PROBLEMA

El rea bajo siembra con mango (Mangifera indica L.) en Colombia ha
aumentado en los ltimos aos debido a la posibilidad de colocar los frutos en
mercados internacionales.
El promedio nacional de productividad del mango en Colombia alcanza un

rendimiento de 11.0 Tm./Ha. Segn datos del Ministerio de Agricultura, durante
el 2003 el cultivo de mango particip con el 6,2% de la produccin total de frutas
frescas en Colombia, ocupando el tercer lugar con una produccin de 168 mil
toneladas. Entre 1992 y 2003 la produccin de mango creci a una tasa de 3,6%
promedio anual. Colombia exporta actualmente slo el 0.5% de su produccin
total de mango, proporcin que ha venido creciendo, especialmente durante los
ltimos aos de la dcada de los noventas, pasando de 34 Tm. en 1994 a 12.712
Tm. en el 2001. (Agrocadenas, 2005).
No obstante, aquellos mercados y potenciales compradores demandan frutos de

excelente
calidad. De esta manera el control de enfermedades
como la
antracnosis representa una accin prioritaria, con el fin de obtener un producto de

muy buena calidad.
La antracnosis, producida por el hongo Colletotrichum gloeosporioides, es

reconocida como una de las enfermedades mas importantes para el cultivo de
mango y otros frutales. Su presencia se caracteriza por la aparicin de manchas
oscuras en hojas, flores y pednculos. Adicionalmente, los frutos se ven
afectados, en atapas inciales, pudiendo sufrir daos tambin en la madurez. Esta
incidencia en los frutos maduros dificulta su comercializacin.
En la Costa Atlntica, las prdidas por Antracnosis (C. gloeosporioides) en
mango, alcanzan 40 a 50% en cosecha; stas, se incrementan en la postcosecha,
por infecciones latentes manifestadas durante el almacenamiento y transporte. Las
prdidas en Colombia se han cuantificado en cosecha en un 40% para cultivos de
mango, no obstante, los daos en postcosecha como consecuencia de infecciones
38
Con formato: Fuente: 12 pto, Cursiva
latentes, hacen de la enfermedad una verdadera amenaza para la comercializacin

de la fruta, debido a que se pierde la calidad de la fruta, y por tanto su valor
comercial. (Pez Redondo, 2003).
4. JUSTIFICACIN
El manejo de la antracnosis del mango en Colombia, se ha fundamentado en
aplicaciones frecuentes de fungicidas, especialmente en las etapas de floracin y
fructificacin, con resultados poco satisfactorios y contribuyendo a la
contaminacin del o los ecosistemas. (Pez, 2003). Adems, a esto se le suman
los altos costos que tienen estos tratamientos con fungicidas, debido a la cantidad
de aplicaciones que se realizan para el control de la antracnosis. Segn Pez 2003,
en Colombia se realizan entre 8 y 12 aspersiones con fungicidas por cosecha,
logrando aumentar los costos en cada cultivo. Esta ha sido durante aos la
tecnologa que se ha implementado para el control de antracnosis, por la mayora
de productores, lo que ha hecho que el costo de tratamiento sea bastante alto.
Debido a esto se han comenzado a realizar investigaciones con el fin de generar

nuevas alternativas de manejo y medidas complementarias con miras a reducir los
costos generados por controles qumicos, logrando tambin el aumento en las
investigaciones de nuevos mtodos de control que no generen un dao al
ecosistema, entre estos el uso de productos de origen biolgico y orgnico, con el
fin de entrar a mercados internacionales.
En este proyecto se evaluaron 6 productos a base de extractos vegetales con el fin

de encontrar el producto ms eficaz, menos costoso y que no afecte el ecosistema,
y que pueda servir alternativa al control qumico convencional empleado para el
control de la antracnosis en mango.
39
5. OBJETIVOS
5.1. OBJETIVO GENERAL
Evaluar el efecto inhibitorio de diferentes extractos vegetales sobre el desarrollo

de Colletotrichum gloeosporioides, agente causal de la antracnosis en mango, y
Colletotrichu acutatum agente causal de la antracnosis en tomate de rbol.
5.2. OBJETIVOS ESPECFICOS
Analizar
el
comportamiento
de
dos
cepas
de
Colletotrichum
gloeosporioides, y una cepa de Colletrotrichum acutatum, frente a seis

extractos vegetales.
-
Determinar la concentracin de cada extracto capaz de inhibir la

germinacin de conidios y el desarrollo del crecimiento micelial de los
patgenos en medio de cultivo solido.
Determinar el efecto de los extractos vegetales en el desarrollo de sntomas

en frutos desprendidos.
40
6. DISEO DE LA INVESTIGACIN
El presente trabajo se realizo bajo un diseo experimental completamente al azar,

con un arreglo factorial 6*4+1, en donde el factor A son los seis extractos
seleccionados, el factor B est compuesto por cuatro concentraciones y + 1 es un
control de la cepa creciendo en condiciones normales en medio PDA sin ningn
aditivo, que sirvi como punto de comparacin con los dems tratamientos. Cada
unidad experimental era una caja de Petri o un vial con el patgeno, para un total
de 24 tratamientos con cuatro repeticiones cada uno. Es decir se establece un
aislamiento de Colletotrichum gloeosporioides, con la evaluacin de seis
productos y un testigo absoluto, cuatro concentraciones para cada uno de los
productos y cuatro rplicas de cada uno. La eficacia de los productos se evalu
mediante bioensayos de inhibicin de germinacin de esporas, supresin de
crecimiento micelial y accin de los extractos sobre rganos desprendidos.
Para todos los ensayos se seleccionaron 4 concentraciones: 1) la concentracin

recomendada para el producto, 2) una concentracin superior a la recomendada
comercialmente, 3) y 4) dos concentraciones por debajo de la recomendada
comercialmente (Tabla 1). Para el extracto de cactus se realizaron diluciones del
extracto obtenido del licuado de la planta con agua de las que se escogieron: 10 -3,
10-4,10-5, y 10-6, para evaluar su efecto sobre los aislamientos de Colletotrichum.
41
Tabla 1. Extractos y dosificacin escogidos para las pruebas de inhibicin de

Colletotrichum gloesporioides y Colletrotrichum acutatum.
Extracto
Concentracin 1
(Dosis
comercial)
Dosis 2
Dosis 3
Dosis 4
mL/L
mL/L
mL/L
mL/L
Capsialil
0,7
0.95
0.45
0.2
Ecoswing
1.5
0,5
Desfan
0,2
0,25
0,15
0,10
Xplode
Extracto Swinglia
15
20
10
Extracto de cactus1
10-3
10-4
10-5
10-6
El extracto de cactus se evalu mediante diluciones del extracto obtenido de la planta

licuada con agua (Zapata et al. 2003).
Se realizaron 3 fases para la evaluacin de los extractos:

Fase 1: Evaluacin del porcentaje de germinacin de conidios frente a cada uno
de los extractos vegetales.
Fase 2: Evaluacin del crecimiento micelial en medio de cultivo PDA frente a
cada uno de los extractos vegetales.
Fase 3: Prueba de inhibicin del desarrollo de los sntomas de antracnosis en
frutos de mango desprendidos.
42
6.1 SITIO DE ESTUDIO Y MUESTRA:

El presente estudio se realizo en el laboratorio de Fitopatologa de la Corporacin
Colombiana de Investigacin Agropecuaria, CORPOICA, C.I. Tibaitat, ubicado
en el municipio de Mosquera (Cundinamarca), Km 14, latitud norte 4 0 4 y
longitud 74012, temperatura promedio 130C y humedad relativa de 82%.
Material biolgico: En el laboratorio de fitopatologa, se encuentra conservada la
coleccin Nacional de Colletrotrichum, conformada por 1155 aislamientos o
cepas obtenidas de distintos frutales en los que se incluye el mango, procedentes
de distintos sitios del pas, de esta coleccin se trabajo con dos cepas de C.
gloeosporioide, la cepa 1047 obtenida de frutos de mango azcar y 935 obtenidas
de frutos de mango hilacha con antracnosis, en los departamentos de Magdalena y
Tolima respectivamente, y una cepa de C. acutatum, (845) obtenida de frutos de
tomate de rbol, en el departamento de Cundinamarca, estos aislamientos se
escogieron al azar dentro de la coleccin, buscando que fueran de regiones
diferentes; estas cepas
han sido clasificada, segn estudios anteriores de
patogenicidad realizados en CORPOICA, como las cepas mas patognicas en

mango.
Extractos vegetales: Los extractos escogidos se seleccionaron por estar
reportados en el mercado con propiedades fungicidas, Ecoswing, Capsialil,
Desafan 100, Extracto de Swinglia, Xplode, Extracto de cardn lefaria.
El extracto de cardn lefaria (Cereus deficiens Otto & Diert), se obtuvo utilizando
la metodologa utilizada por Zapata et al., (2003), para la cual se colectaron
secciones medias del tallo (cladodio) de cardn lefaria, proveniente del Desierto
de la Tatacoa (Huila). Para el extracto acuoso se utilizaron 20g de material vegetal
seco y molido al cual se le practic un prelavado con solucin de hipoclorito de
sodio al 0,26% por 2min y luego 4 lavados con agua destilada estril; se agreg
400ml de agua destilada y esterilizada y se licu la preparacin por 5min.
Posteriormente se filtr utilizando cuatro capas de gasa esterilizada y la
suspensin acuosa se almacen en el refrigerador.
43
7. MATERIALES Y MTODOS:
7.1. PRUEBA DE INHIBICIN DE LA GERMINACIN DE CONIDIOS.
Para la prueba de inhibicin de la germinacin se utilizo un diseo experimental
al azar, con un arreglo factorial 6*4+1, en donde el factor A fueron los seis
extractos seleccionados, el factor B compuesto por cuatro concentraciones y + 1
es el testigo de cada una de las cepas utilizadas (C-935, C-1047 y 845) creciendo
en condiciones normales en solo agua destilada sin ningn aditivo, que servir
como punto de comparacin con los dems tratamientos para la discusin de
resultados. Cada unidad experimental fue un vial con la solucin de conidios del
patgeno, para un total de 24 tratamientos con cuatro repeticiones cada uno.
Para esta prueba, primero se realiz una curva de germinacin de cada una de las
cepas utilizadas (1047, 935, 845),
en dos sustratos, agua destilada y agua
destilada con sucrosa al 2%. El objetivo de la curva de germinacin fue observar

el comportamiento de la germinacin de conidias frente a estos 2 sustratos con el
fin de determinar cual de los dos era el mas adecuado, y as utilizarlo en la prueba
frente a los extractos, tambin se determin el tiempo adecuado para realizar la
lectura en la prueba con los extractos, lo cual fue muy importante para la prueba,
debido a que despus de cierto tiempo dependiendo de la cepa, el porcentaje de
germinacin comenz a reducirse de manera significativa, lo que podra
perjudicar o influir en los resultados con los extractos si no se tomara en cuenta
este tiempo.
Para la curva de germinacin se realiz un recuento en cmara de Neubauer con el
fin obtener una solucin de conidias
a una concentracin de 1x105 conidias/ml
en Tween 80 al 0.01%. El Tween se utiliz como dispersante de las conidias.

Luego se incub a 25C en oscuridad y se realizaron lecturas de las conidias
germinadas cada 2 horas, durante 24 horas.
Despus de tener establecida la curva de germinacin de conidias para las 2 cepas
de C. gloeosporioides, y de C. acutatum, se procedi a realizar la prueba de
germinacin con los extractos vegetales, para esto se realizaron repiques de los
aislamientos de cada cepa en medio Marthurs (Anexo 2), con el fin de estimular
44
la esporulacin del hongo y as obtener un mximo de conidios despus de

incubar a 27C por 10 das en oscuridad.
Despus en un erlenmeyer de 125mL que contena 120mL de agua destilada

estril (sustrato escogido por favorecer el mayor porcentaje de germinacin de
conidios de los dos aislamientos) se hizo la solucin de conidias realizando un
raspado con el asa redonda en cada una de las cajas, principalmente donde se
presentaban formacin de acrvulos, y se procedi a realizar recuentos en cmara
de Neubauer, hasta obtener la solucin en concentracin 1x105 conidios mL, una
vez obtenida esta concentracin se agreg 1 mL de la solucin de conidias a un
vial y 1 mL de cada extracto preparado a diferentes concentraciones.
Para la evaluacin se seleccionaron 4 concentraciones: 1) la concentracin

recomendada para el producto, 2) una concentracin superior a la recomendada
comercialmente, 3) y 4) dos concentraciones por debajo de la recomendada
comercialmente (Tabla 1). Para el extracto de cactus se realizaron diluciones del
extracto obtenido del licuado de la planta con agua de las que se escogieron: 10 -3,
10-4,10-5, y 10-6, y se agreg 1 ml de de estas diluciones a los viales que contenan
1 ml de la solucin de esporas, para evaluar su efecto sobre los aislamientos de
Colletotrichum.
Cada vial se incub en oscuridad por 18 horas a 27 oC, y se procedi a realizar las
lecturas del porcentaje de germinacin de conidios a las 24 horas. La lectura se
realiz colocando 50ul de cada uno de los viales en una lmina de pozos, y se
procedi a contar el nmero de conidias germinadas, de 100 conidias contadas.
Cada resultado obtenido con los extractos evaluados se compar con el porcentaje
de germinacin de esporas del control del hongo en agua.
45
7.1.1. MONTAJE DE CULTIVOS MONOSPRICOS DE LAS CEPAS

DESPUS DE LA EXPOSICIN A LOS EXTRACTOS.
Una vez se realizaron las lecturas de la prueba de germinacin, se tom una de las
suspensiones de los viales con cada concentracin de extracto y solucin de
conidias, y se diluy con agua destilada estril para obtener una suspensin de 1
espora en 2L, a partir de sta se tomaron varas alcuotas de 2 L y se colocaron
sobre una placa de agar agua (Anexo 3), a la cual previamente se le haban
marcado varios crculos gua al respaldo de la caja de Petri para identificar donde
se haba puesto cada gota. Cada caja se incub por 24 horas a 27oC en oscuridad,
con el fin de proporcionar las condiciones adecuadas para que las conidias
emitieran tubo germinal, despus de esto se escogieron mediante observacin
microscpica las conidias germinadas y se pasaron a cajas de Petri que contenan
medio PDA, con el fin de observar si las esporas que lograron germinar despus
de estar en contacto con los extractos tenan la capacidad formar micelio en el
medio. Con esta prueba se pretendi corroborar los resultados obtenidos en el
ensayo anterior.
7.2. EVALUACIN DEL CRECIMIENTO MICELIAL DEL PATOGENO

EN MEDIO DE CULTIVO SLIDO.
Para esta prueba se utiliz el mismo diseo experimental usado para la prueba de
germinacin, el cual consisti en un diseo experimental al azar, con un arreglo
factorial 6*4+1, en donde el factor A fueron los seis extractos seleccionados, el
factor B compuesto por cuatro concentraciones y + 1 es el testigo de cada una de
las cepas utilizadas (C-935, C-1047 y 845) creciendo en condiciones normales en
medio PDA sin ningn aditivo, que sirvi como punto de comparacin con los
dems tratamientos para la discusin de resultados. En este caso cada unidad
experimental fue un una caja de Petri con el patgeno, para un total de 24
tratamientos con cuatro repeticiones cada uno.
Para la evaluacin del crecimiento micelial frente los diferentes extractos, primero
se debi tener en cuenta las dosis sugeridas por la casa comercial, para realizar los
46
clculos correspondientes y llevarlos hasta el volumen requerido, en este caso

para cada uno de los productos se evaluaron 4 concentraciones, una por encima de
la sugerida por la etiqueta comercial y dos por debajo, cada concentracin con 4
replicas, debido a esto se realizaron los clculos para un volumen de 100ml de
PDA con el fin de agregar 25 ml a cada caja de petri y as completar las 4 rplicas.
Se prepar PDA liquido y se reparti en 24 fiolas, 100 ml en cada fiola,
previamente se calcul la cantidad necesaria de cada extracto para un volumen de
100ml. Cada concentracin de extracto se agreg a cada fiola, teniendo en cuenta
que la temperatura del medio no sobrepasara los 450C (para que no se
desnaturalizaran los componentes del extracto). Se homogeniz hasta que el
componente se disolviera en el medio, para cada producto se prepararon 4 fiolas
cada una con una concentracin distinta de extracto, despus de disolver bien el
producto en el medio lquido, se procedi a servir sobre las cajas de Petri estriles,
cuando el medio solidific por completo, se inocul un disco de agar de 5 mm
con el hongo evaluar que en este caso fueron las 3 cepas (1047, 935, y 845); dos
de C. gloeosporioides, y una de C. acutatum. Para cada tratamiento se realizo un
control el cual no contena extracto. Se incubaron a 27oC. Las lecturas del radio
de la colonia se realizaron cada 48 horas durante 7 das.
El resultado de la medicin del crecimiento de la colonia fungosa se obtuvo
midiendo el radio de crecimiento del hongo, a partir de este resultado se obtuvo el
porcentaje de inhibicin del crecimiento (PIC), con la siguiente frmula:
PIC = crecimiento testigo - crecimiento tratamiento x 100

crecimiento testigo
(Rondn, et al, 2006).
47
7.3. PRUEBA DE INHIBICIN DEL DESARROLLO DE LOS SNTOMAS

DE ANTRACNOSIS EN FRUTOS DE MANGO DESPRENDIDOS.
Para prueba de inhibicin en frutos se utilizo un diseo experimental al azar, con
un arreglo factorial
2*2+2, en donde el factor A fueron los dos extractos
seleccionados en los ensayos in vitro, el factor B compuesto por las dos

concentraciones que mejor resultados mostraron y + 2 son los dos aislamientos
(C-935 y C-1047) inoculados sobre los frutos que no se trataron, que sirvieron
como punto de referencia de la infeccin. Cada unidad experimental consisti en
una cmara hmeda con dos frutos para un total de 8 tratamientos con cuatro
repeticiones cada uno. La variable medida fue presencia o ausencia de lesiones de
antracnosis.
Con esta prueba de inhibicin del desarrollo de la antracnosis en frutos
desprendidos, se pretendi evaluar la proteccin que puedan ofrecer los extractos
vegetales evaluados contra el desarrollo de los sntomas ocasionados por C.
gloeosporioides, aislado de frutos de mango enfermos.
Para esta prueba se utilizaron los extractos vegetales Desfan y Ecoswing
seleccionados en las pruebas de inhibicin de la germinacin e inhibicin del
crecimiento micelial, debido a que stos fueron los extractos vegetales que
presentaron mejores resultados en las pruebas in Vitro. Tambin se utilizaron las
dos concentraciones de los productos que mostraron los mejores resultados
(Desfan: 0,25 ml/L y 0,2 mL/L; y Ecoswing: 2,0 ml/L y 1,5 ml/L), ms dos
controles de infeccin con las cepas C-935 y C-1047, adicionalmente se mont un
control negativo que consisti en frutos con dos discos de agar papa dextrosa
estril. Para esta prueba se utiliz mango de variedad hilacha, debido a su
susceptibilidad frente a las cepas utilizadas.
Los frutos recolectados se desinfectaron por un minuto con hipoclorito de sodio

(NaOCl) al 2.6%, lavados dos veces con agua destilada estril, asperjados una vez
con alcohol antisptico al 70% y lavados nuevamente con agua destilada estril y
se dejaron secar al aire libre. Una vez secos, los frutos de cada tratamiento
48
seleccionado se sumergieron en una solucin de cada uno de los extractos

vegetales por 5 minutos y se dejaron nuevamente al ambiente.
Los aislamientos evaluados fueron el C-935 y el C-1047, que fueron reactivados
en PDA por 10 das a 27C en oscuridad. Para el experimento, se tomaron 88
frutos y se inocularon con 2 discos de agar cubierto por la colonia del hongo, en
dos puntos sobre el fruto. Se realizaron evaluaciones diarias de los frutos para
detectar las lesiones de antracnosis. Los controles de infeccin consistieron en
frutos desinfectados e inoculados con las dos cepas del patgeno evaluadas.
Las condiciones ptimas para el desarrollo de la enfermedad se proporcionaron
colocando los frutos en cmaras hmedas (HR> 90%) a temperatura de 24 C 2.
Para cada uno de los ensayos, se estn realizando evaluaciones diarias de los
frutos para detectar la presencia de lesiones. Cabe resaltar que para esta prueba no
se realizaron heridas en los frutos para facilitar la penetracin del hongo, ya que se
ha demostrado que este tiene la capacidad de penetrar por si mismo, ocasionando
daos al tejido del fruto.
Figura 3: Montaje prueba frutos desprendidos, inoculacin de frutos.

(Foto: Aguirre. 2008)
7.4. ANLISIS DE DATOS.

Efecto de los extractos vegetales se determin a travs de un anlisis de varianza
ANOVA, y posteriormente se realiz la comparacin de medias (0,05). Para
identificar si exista diferencias significativas entre los tratamientos, y para
determinar cual fue el mejor tratamiento.
49
8. RESULTADOS Y DISCUSIN.
8.1. PRUEBA DE INHIBICIN DE LA GERMINACIN DE CONIDIOS
Los resultados de la prueba del porcentaje de inhibicin de la germinacin se
obtuvieron, realizando recuentos de conidias germinadas en 100 conidias contadas
(figura 4).
Figura 4: Tubo germinal conidia de C. gloeosporioides.

(Foto: Aguirre. 2008)
8.1.1. Cepa 1047 de C. gloeosporioides:

En la prueba de porcentaje de germinacin de conidias de la cepa 1047 de C.
gloeosporioides, la lectura se realiz a las 16 horas, debido a que en la curva de
germinacin (grfica 1), el mayor nmero de conidias germinadas se di en este
tiempo, a partir de este tiempo, el porcentaje de germinacin comenz a reducirse
de manera significativa. Para las pruebas de germinacin de conidias, se utilizo
agua destilada como sustrato, debido a que este sustrato present mejores
resultados y permiti mayor germinacion de conidias que en agua destilada con
sucrosa.
50
Grfica 1: Curva de germinacin de conidias cepa 1047, en agua destilada y agua

destilada con sucrosa.
En la prueba de inhibicin de la germinacin de conidias de la cepa 1047 de C.

gloeosporioides, se encontr que el extracto de cardn lefaria (Cereus deficiens),
present la mayor efectividad, con porcentajes de germinacin de 0% en todas las
dosis utilizadas. Desfan y el extracto de swinglia,
presentaron los mismos
porcentajes de germinacin en todas las dosis utilizadas; siendo tambin efectivos

en el control de la germinacin de conidias; en la dosis ms concentrada se
observ que el porcentaje de germinacin fue de 0.25% para los dos extractos
(desfan, extracto de swinglia) y en el resto de las dosis utilizadas, el porcentaje de
germinacin fue de 0%, como se muestra en la grfica 2, donde se puede observar
que los extractos ms efectivos fueron estos 3 (extracto de cardn lefaria, desfan,
y extracto de swinglia) Todos los extractos produjeron un efecto de inhibicin
sobre la germinacin de las conidias, si se compara con el resultado de los
controles, los cuales tuvieron porcentajes de germinacin 2%. El extracto menos
efectivo en el control del porcentaje de germinacin fue Capsialil, que en su dosis
mas concentrada present un porcentaje de germinacin de 0%, en la dosis
indicada por el producto el porcentaje de germinacin fue de 1.75%, indicando
que no hubo mucho efecto por parte del extracto, si comparamos los resultados
obtenidos en las dosis ms diluidas y los resultados que presentaron los controles
51
nos damos cuenta que el extracto no tubo mayor efecto inhibitorio y solo present
inhibicin de la germinacin en su dosis mas concentrada.
Tabla 2: Resultados porcentaje de germinacin de conidias cepa 1047 de C.
gloeosporioides:
Dosis +
Dosis comercial
Dosis -1
Dosis -2
Ex de swinglia
0.25%
0%
0%
0%
Capsialil
0%
1.75%
1.5%
2.25%
Desfan
0.25%
0%
0%
0%
Ecoswing
1%
0.5%
0.75%
1%
Xplode
0.25%
0.25%
0.5%
0.25%
10-3
10-4
10-5
10-6
Ex de cactus
0%
0%
0%
0%
Control
2%
2%
2%
2%
Grafica 2: porcentaje de germinacin de conidias cepa 1047 de C. gloeosporioides.
52
El montaje del cultivo monosprico que se realiz despus de las pruebas de

germinacin, con el fin de corroborar o confirmar los resultados obtenidos en esta
prueba, y nos confirm que los extractos que presentaron el mayor efecto fueron
los extractos de cardn lefaria (Cereus deficiens) y desfan, en los cuales no se
present crecimiento micelial en las cajas, en ninguna de las concentraciones,
indicndonos que despus de someter las conidias al tratamiento con estos dos
extractos se causa un efecto de inhibicin sobre la germinacin de las conidias,
logrando que estas al ser expuestas en medio PDA no puedan emitir tubo germinal
ni formar micelio, inhibiendo totalmente su desarrollo en medio de cultivo
(grfica 3).
Grfica 3: resultados monosporico cepa 1047 C. gloeosporioides.
Estudios preliminares realizados en CORPOICA, en el proyecto llamado:

evaluacin de alternativas de control para la antracnosis en ctricos, tomate de
rbol y guanabana, se evalu el efecto de varios extractos vegetales comerciales,
para controlar antracnosis causada por Colletotrichum acutatum, indicando que de
53
los extractos utilizados, Desfan fue el ms efectivo, Ecoswing y Capsialil variaron

en su comportamiento pero no de forma significativa.
Zapata et al, en el 2003 estudiaron la reduccin del desarrollo de hongos
fitopatgenos con extracto de cardn lefaria (cereus deficiens otto & diert), donde
los resultados de esta investigacin muestran que el potencial inhibitorio podra
ser en el caso del control de S. rolfsii y C. gloeosporioides, debido a que se
obtuvieron reducciones significativas en el crecimiento micelial. Aunque en el
estudio no se evalu el efecto del extracto sobre la germinacin de las conidias,
con estos resultados se puede confirmar la efectividad del extracto Desfan sobre el
control de C. gloeosporioides, el cual logra inhibir la germinacin de esporas a un
0% y el crecimiento micelial del hongo en medio PDA.
Para la prueba de porcentaje de germinacin de conidias en la cepa 935 se utiliz

como sustrato agua destilada, debido a que present el mayor porcentaje de
germinacin en la curva, mostrando mejores resultados que el agua con sucrosa,
esto nos indic que para realizar la prueba de germinacin de conidias en esta
cepa el sustrato adecuado era el agua sola. En este caso la lectura de los resultados
se realiz a las 20 horas, debido a que este fue el tiempo donde se present mayor
porcentaje de conidias germinadas segn la curva (grfica 4).
54

En la cepa 935 de C. gloeosporioides, los resultados fueron un poco diferentes en

comparacin con la cepa 1047, aunque para este caso el extracto que present
mayor efecto para inhibir la germinacin de las conidias fue Desfan, con un
porcentaje de germinacin de 0% en todas las dosis, exceptuando la primer dosis
por debajo de la recomendada en la que se present un porcentaje de 0.25% (tabla
3). Este resultado fue similar al de la cepa 1047, indicando que Desfan present la
misma efectividad para inhibir la germinacin de las conidias en las dos cepas de
C. gloeosporioides evaluadas. El extracto de swinglia tambin present efecto
inhibitorio, pero solo en su dosis mas concentrada (20ml/L), en la cual se obtuvo
un porcentaje de germinacin de 0%, indicando que la dosis sugerida por el
producto (300c.c. en 20L de agua) no es efectiva para inhibicin de la
germinacin de conidias de C. gloeosporioides. Los extractos Capsialil, Xplode,
Ecoswing, y estracto de cardn lefaria, presentaron un efecto inhibitorio sobre la
germinacin de las conidias del hongo, pero si se comparan con los resultados
obtenidos en los controles que en este caso fue de 2.62%, se puede observar que
no fueron muy efectivos (grafica 5).
El extracto de cardn lefaria (Cereus deficiens) que present el mayor efecto de
inhibicin en la cepa 1047, en este caso al evaluar su efecto en la cepa 935 de C.

gloeosporioides, se puede observar que no fue tan efectivo, su mayor efecto se
55
present en la dosis ms concentrada, logrando un porcentaje de germinacin de

0.75%, en el resto de las dosis utilizadas los resultados fueron similares al control,
esto nos indica que no fue muy efectivo inhibiendo la germinacin de las conidias
en la cepa 935. El extracto que present menor efectividad fue Xplode con un
porcentaje de germinacin muy cercano al control, incluso en su dosis ms diluida
su porcentaje de germinacin fue de 2.75%, porcentaje mayor al que se presento
en el control.
Estos resultados demuestran que a pesar de estar evaluando el mismo hongo C.

gloeosporioides, pero cepas diferentes, obtenidas de frutos de mango de diferentes
sitios, no se presentan resultados afines, a excepcin de Desfan, el cual present
resultados efectivos en las dos cepas evaluadas, aunque fue mas efectivo en la
inhibicion de la germinacin de conidias en la cepa 935.
Tabla 3: Resultados Porcentaje de germinacin de conidias cepa 935 de C.

gloeosporioides:
Dosis +
Dosis comercial
Dosis -1
Dosis -2
Ex de swinglia
0%
0.75%
0.75%
1%
Capsialil
1.5%
1.25%
1.5%
1.5%
Desfan
0%
0%
0.25%
0%
Ecoswing
1.75%
1%
1%
1%
Xplode
2%
2.25%
1.75%
2.75%
10-3
10-4
10-5
10-6
Ex de cactus
0.75%
2.5%
1.75%
1.75%
Control
2.62%
2.62%
2.62%
2.62%
56
Grafica 5: porcentaje de germinacin de conidias cepa 935 de C. gloeosporioides.
Los resultados obtenidos en los cultivos monospricos de la prueba de

germinacin de la cepa 935 de C. gloeosporioides, indicaron que el extracto mas
efectivo fue Desfan, debido a que no se present crecimiento micelial en los
cultivos monospricos en ninguna de las concentraciones utilizadas, demostrando
que al someter las conidias del hongo al tratamiento con Desfan, stas no logran
germinar y mucho menos formar micelio en medio PDA.
En el extracto de Swinglia los resultados del cultivo monosprico, demostraron
que este present un efecto de disminucin del desarrollo micelial, ya que en la
dosis indicada y en la dosis ms concentrada, el hongo creci en el medio de
cultivo, pero en menor tamao comparndolo con los controles, tambin se pudo
observar que en estas dos dosis su crecimiento micelial fue de 1 cm para la dosis
mas concentrada y 1,8 cm para la dosis indicada por el producto, presentando
tambin disminucin en el micelio areo y en la esporulacin en estas dos dosis,
mientras que en las dosis diluidas su crecimiento fue similar al de los controles
presentando un crecimiento de 2,3cm y 2,6cm de radio (grfica 6). Para los dems
extractos evaluados los resultados no demostraron efectividad en la inhibicin del
desarrollo del hongo puesto que todos crecieron en medio PDA.
57
Grfica 6: radio de crecimiento micelial de los cultivos monosporico cepa 935 C.

gloeosporioides.
8.1.3. Cepa 845 de C. acutatum:
Los resultados obtenidos en la curva de germinacin de la cepa 845 de C.

acutatum (grfica 7), permitieron confirmar que el sustrato ms efectivo en las 3
cepas fue el agua destilada sola, logrando obtener los porcentajes de germinacin
mas altos. El mximo de conidias germinadas se present a la hora 16, debido a
esto se tom esta hora para realizar las lecturas en la prueba con los extractos. El
efecto del agua ms importante se centra en la germinacin de las esporas de los
hongos y sobre la penetracin del tubo germinativo en el hospedero (Agrios
1998). Esto explica por que el agua destilada present los mejores resultados de
germinacin. En el caso del agua destilada con sucrosa, es posible que la sucrosa
se adhiera a las molculas de agua, imposibilitando el acceso a estas por parte del
microorganismo, dificultando la hidratacin necesaria para la germinacin de las
conidias del hongo, segn Harris, 1981, es posible que al haber un incremento en
la concentracin de solutos se reduzca el potencial hdrico y se disminuya la
disponibilidad de agua libre para el crecimiento de los hongos. Esto se debe
principalmente a que las sustancias disueltas tienen una cierta afinidad por el
58
agua, que hace que el agua asociada a los solutos no est disponible para los
organismos (Madigan et al, 2004).

Los resultados del porcentaje de germinacin de conidias en la cepa 845 de C.

acutatum, confirmaron que Desfan fue el extracto ms efectivo inhibiendo la
germinacin de conidias de C. acutatum. Este extracto ya haba sido evaluado en
estudios anteriores realizados en CORPOICA donde present resultados similares
en el porcentaje de germinacin de conidias de C. acutatum, de tomate de rbol,
lo cual nos confirma la eficacia de este extracto para inhibir la germinacin de las
conidias en las 3 cepas evaluadas (1047, 935 y 845).
El extracto de Swinglia presento resultados similares a Desfan, excepto en su
dosis mas diluida en la cual su porcentaje de germinacin fue de 1.5% (grfica 8),
siendo menos efectivo; Ecoswing presento resultados similares a Desfan, en la
dosis mas concentrada y la dosis indicada por el producto. En este caso los tres
productos en las dosis ms concentradas y la dosis indicada por el producto
tuvieron el mismo efecto de inhibicin de la germinacin de conidias en C.
acutatum, comportndose de la misma manera. El extracto que present menos
efecto para este patogeno fue el extracto de cardn lefaria, puesto que present
59
porcentajes de germinacin superiores a los controles, lo que indico que este

extract no tuvo ningn efecto sobre la germinacin de conidias en la cepa 845 C.
acutatum.
Tabla 4: Resultados Porcentaje de germinacin de conidias cepa 845 de C.

acutatum:
Dosis +
Dosis comercial
Dosis -1
Dosis -2
Ex de swinglia
0.25%
0.5%
0.5%
1.5%
Capsialil
1.25%
1%
1%
1.25%
Desfan
0.25%
0.5%
0.5%
0.25%
Ecoswing
0.25%
0.5%
1%
2%
Xplode
1%
1.75%
1.25%
1.75%
10-3
10-4
10-5
10-6
Ex de cactus
3.25%
3.5%
3%
3.75%
Control
2.58%
2.58%
2.58%
2.58%
60
Grfica 8: porcentaje de germinacin de conidias cepa 845 de C. acutatum.
En el cultivo monosprico realizado despus de la prueba de germinacin se pudo

observar que el extracto ms efectivo fue Desfan, el cual no present crecimiento
micelial en ninguna de sus dosis utilizadas, indicando que al someter las conidias
al tratamiento con el extracto, este no permite su germinacion y que formen
micelio en medio de cultivo PDA, En los dems extractos se present crecimiento
micelial en todas las dosis utilizadas, indicando que presentaron poco o ningn
efecto sobre la germinacin y desarrollo del hongo (grfica 9).
Grafica 9: resultados monosporico cepa 845 C. acutatum.
61
8.2. EVALUACIN DEL CRECIMIENTO MICELIAL DEL PATOGENO

EN MEDIO DE CULTIVO SLIDO.
8.2.1. Cepa 1047 de C. gloeosporioides
En esta evaluacin se obtuvo el radio de crecimiento del hongo en cm, y el
porcentaje de inhibicin del crecimiento (PIC). Los resultados del PIC indicaron
que el extracto ms efectivo, en la inhibicin del crecimiento de C.
gloeosporioides, fue Desfan, cuya efectividad se pudo evidenciar en su dosis ms
alta, donde se observ que el extracto inhibi el crecimiento del hongo en un 79.8
%, en las otras dosis utilizadas el porcentaje de inhibicin del crecimiento fue
ms bajo presentando porcentajes de 75.1% para la dosis recomendada por el
producto, 63.1% y 53.7% para las dosis siguientes. Ecoswing y Capsialil en sus
dosis ms concentradas lograron inhibir el crecimiento del hongo en un 19% y
18% respectivamente, (grfica 10). El resto de los extractos presentaron inhibicin
del crecimiento del hongo pero los resultados no fueron significativos.
Los resultados obtenidos para esta prueba indicaron que los extractos que
presentaron los porcentajes de inhibicin del crecimiento (PIC) ms altos fueron,
Desfan y Ecoswing en sus dosis ms concentradas, siendo ms efectivo Desfan el
cual present el porcentaje de inhibicin del cremiento ms alto de los extractos
evaluados.
Grafica 10: porcentaje de inhibicion del crecimiento micelial de la cepa 1047 de C.

gloeosporioides.
62
Figura 5: Crecimiento micelial cepa 1047 tratamiento con Desfan. A) Dosis +1 ms

concentrada (0.25 ml/L). B) Dosis comercial (0.2 ml/L). C) Dosis -1diluida (0.15 ml/l).
D) Dosis -2 ms diluida (0.10 ml/L). E) Control cepa 1047 de C. gloeosporioides.
(Foto: Aguirre. 2008).
En las observaciones macroscpicas realizadas a los tratamientos con Desfan no

se observaron anormalidades en el micelio del hongo, este fu igual al control, y
todos los tratamientos presentaron una coloracin salmn en el centro de la
colonia, pero en menor cantidad que la que present el control, lo cual indic que
no se afect la produccin de acrvulos, pero hubo una reduccin de estos en los
tratamientos con Desfan, demostrando as un posible efecto fungisttico por parte
del extracto hacia el hongo. En las observaciones microscpicas se observaron
apresorios caractersticos de este gnero (Figura 6), micelio normal, las conidias
se encontraban sin anormalidades morfolgicas, pero se vi que la esporulacin
fue escasa en los tratamientos con Desfan. Esto indic que el nico efecto se
present en cuanto a crecimiento radial y reduccin de la esporulacin, el cual
present una gran diferencia en la dosis ms concentrada con respecto al control
(figura 5.A).
63
Figura 6: Formacin de apresorios tratamiento con Desfan cepa 1047.

El efecto de Desfan sobre el crecimiento micelial del hongo, se debe en primer

lugar a sus componentes, Desfan es un desinfectante orgnico extrado de las
semillas de la naranja y toronja conteniendo fracciones de glucosa, fructosa, cido
ascrbico. El cido ascrbico funciona como coenzima de varias enzimas
hidrolticas potenciando la accin de estas. Estas enzimas hidroliticas son
responsables de romper los polisacridos, componente estructural de la pared
celular de la mayora de los hongos. De esta forma consigue decodificar e
interferir en los mensajes qumicos de las enzimas y de las protenas
desdobladoras de los nutrientes esenciales para los microorganismos patgenos
(Prez R. 2008).
Los porcentajes de inhibicin del crecimiento micelial (PIC) en la cepa 935 fueron
muy similares a los obtenidos en la cepa 1047; en este caso el extracto que
present el PIC ms alto fue Desfan, demostrando su efectividad inhibiendo el
crecimiento en la cepa 935 y 1047, con porcentajes de inhibicin de 80.1% para
la dosis mas concentrada Dosis + (0.25 ml/L), en la dosis comercial (0.2 ml/L) se
present un porcentaje de inhibicin de 74.6% y en las dosis diluidas (0.15 ml/l y
0.10 ml/L), se obtuvieron porcentajes de 63.8% y 53.0% respectivamente,
64
indicando que su mayor efecto se present en la dosis mas concentrada (grafica

11).
Grafica 11: porcentaje de inhibicion del crecimiento micelial cepa 935 de C.

gloeosporioides, a los 8 dias.
Figura 7: Crecimiento micelial cepa 935 tratamiento con Desfan. A) Dosis +1 ms

concentrada (0.25 ml/L). B) Dosis comercial (0.2 ml/L). C) Dosis -1diluida (0.15 ml/l).
D) Dosis -2 ms diluida (0.10 ml/L). E) Control cepa 935 de C. gloeosporioides.
65
Los resultados obtenidos con Desfan en la cepa 935 de C.
gloeosporioides,
demostraron un efecto inhibitorio por parte del extracto, en el cual se observ

mayor inhibicin en la dosis mas concentrada, las observaciones macroscpicas
demostraron que el extracto present efecto fungisttico, inhibiendo su
crecimiento radial, igual que en la cepa 1047 (figura 7). El hongo desarroll
estructuras reproductivas, las cuales se evidenciaron por las coloraciones color
salmn en el centro de las colonias, indicando la presencia y formacin de
acervulos que contenan las conidias del hongo, en todos los tratamientos con
Desfan se presentaron las mismas coloraciones. En las observaciones al
microscopio se observaron las conidias normales sin ninguna alteracin (figura 8),
lo que indic que el extracto no tuvo efecto sobre estas, y que el extracto solo
inhibi el crecimiento radial del hongo. Es posible que el extracto est implicado
en la nutricin del hongo, interfiriendo las protenas que desdoblan los nutrientes,
logrando que el hongo no se nutra ni se desarrolle de manera adecuada.
Figura 8: Conidias cepa 935 de C. gloeosporioides, tratamiento con Desfan dosis 1+

(mas concentrada). (Foto: Aguirre. 2008).
Los datos obtenidos del crecimiento radial (cm) de las colonias fueron analizados
mediante un anlisis de varianza ANOVA, el cual mostr que existen diferencias
significativas (=0.05) entre los diferentes extractos vegetales. Entre las dosis
evaluadas de cada producto no se encontraron diferencias. Con la prueba de
66
Tukey de comparacin de medias se determin que los extractos que mejores

resultados presentaron sobre la cepa C-935 fueron los aislamientos: Desfan,
Ecoswing y Extracto de swinglia (grfica 12a); sobre la cepa C-1047 fueron:
Desfan (Figura 11), Ecoswing y Xplode (grfica 12b).
Grafica 12: Comparacin de medias, Porcentaje de inhibicin del crecimiento

micelial. A) Cepa C-935. B) Cepa 1047 C. gloeosporioides.
8.2.3. Cepa 845 de C. acutatum:
Los resultados obtenidos en la prueba de inhibicin del crecimiento micelial en la
cepa 845 de C. acutatum (Grfica 13), indicaron que el extracto que presento
mayor efecto de inhibicin fue Desfan, con porcentajes de inhibicin inferiores a
los que se obtuvieron en las cepas anteriores (1047 y 935), la diferencia que se
present es que para C. acutatum, el mayor efecto por parte del extracto no se
present en la dosis ms concentrada (Dosis +1), como se vi en las cepas 1074 y
935 de C. gloeosporioides, sino en la primera dosis diluida (Dosis -1), donde se
observ un porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial (PIC), de 51.1%,
seguido por la dosis comercial en donde se obtuvo un porcentaje de inhibicin de
44.7%; el porcentaje ms bajo se vi en la dosis ms concentrada con 26.7%
seguido por la dosis ms diluida (Dosis-2) que present 38.3%. Demostrando as
diferencias en cuanto a la efectividad por parte de las diluciones en comparacin
con las otras cepas evaluadas.
67
Grafica 13: porcentaje de inhibicion del crecimiento micelial cepa 845 de C. acutatum, a
los 8 dias.
Figura 9: Crecimiento micelial cepa 845 de C. acutatum, tratamiento con

Desfan. A) Dosis +1 ms concentrada (0.25 ml/L). B) Dosis comercial (0.2
ml/L). C) Dosis -1diluida (0.15 ml/l). D) Dosis -2 ms diluida (0.10 ml/L). E)
Control cepa 845 de C. acutatum (Foto: Aguirre. 2008).
68
Los resultados que se obtuvieron del porcentaje de inhibicin del crecimiento

micelial en la cepa 845 de C. acutatum, demostraron una gran diferencia con los
resultados obtenidos en las cepas de C. gloeosporioides, principalmente su
porcentaje de inhibicin fue mas bajo, adems las dosis utilizadas tambin
mostraron diferencias con las cepas de C. gloeosporioides. No se observaron
anormalidades en los tratamientos con Desfan, al ser comparados con los
controles el crecimiento micelial fue muy similar exceptuando en el crecimiento la
disminucin del crecimiento micelial en los tratamientos es notable, vale destacar
que en la primer dosis diluida (dosis-1), el hongo creci muy compacto con
micelio totalmente blanco, mientras que en los otros tratamientos y en el control
se presentaron ciertas coloraciones rosadas indicando la presencia de estructuras
reproductivas del hongo, al realizar las observaciones microscpicas se pudo
observar mucho micelio sin anormalidades pero se vio escasa la esporulacin, ya
que no se encontraban tantas conidias como en los controles, esto indica que
posiblemente el extracto caus una disminucin en la produccin de conidias del
hongo, presentando un efecto fungisttico, el cual tambin inhibi su crecimiento
micelial.
Grafica 14: porcentaje de inhibicin del crecimiento (PIC), en las tres cepas utilizadas,
1047 y 935 de C. gloeosporioides. Y 845 de C. acutatum.
69
Con los resultados obtenidos se pudo observar que los extractos que presentaron
porcentajes de inhibicin del crecimiento micelial ms altos fueron Desfan y
Ecoswing en todas las cepas evaluadas (grfica 14). El extracto que present el
mayor efecto fue Desfan, ya que en las cepas de C. gloeosporioides (1047 y 935),
su efecto fue mayor que en la cepa de C. acutatum (845), donde Desfan tambin
present el mayor efecto, diferencindose de las cepas 1047 y 935 por que el
porcentaje de inhibicin mas alto se vi en la primera dosis diluida Dosis -1 (0.15
ml/L), y no en la dosis ms concentrada Dosis +1 (0.25ml/L), como se present
en las otras cepas evaluadas; mostrando que la dosis mas concentrada fue la
menos efectiva en esta cepa. En cuanto al extracto Ecoswing, su mayor efecto se
vi en la cepa 935 de C. gloeosporioides, presentando su mayor efecto en la dosis
ms concentrada Dosis +1 (2ml/L), estos resultados indicaron claramente que el
los dos extractos Desfan y Ecoswing fueron mas efectivos en la cepa 935 de C.
gloeosporioides, aislada de frutos de mango hilacha obtenidos en el municipio de
espinal en departamento del Tolima.
Los resultados obtenidos con el extracto de cardn lefaria difieren un poco a los
hallazgos de Zapata et al, 2003, quienes estudiaron la reduccin del desarrollo de
hongos fitopatgenos con extracto de cardn lefaria (cereus deficiens otto &
diert), donde los resultados de la investigacin mostraron un potencial inhibitorio
para el control de S. rolfsii y C. gloeosporioides, debido a que se obtuvieron
reducciones significativas en el crecimiento micelial. En este caso los resultados
en las cepas utilizadas (1047 y 935 de C.
gloeosporioides,
y 845 de C.
acutatum), no se vi un efecto significativo de este extracto, lo cual podra ser

atribuido a muchos factores implicados en el efecto causado por el extracto, como
el tipo de cepa utilizada, las condiciones utilizadas en los ensayos y
principalmente la composicin del extracto, ya que en la investigacin realizada
por
Zapata et al, en el 2003, se hicieron extracciones etanlicas desgrasadas
(EED), etanlicas sin desgrasar (EESD) y acuosas (EA) de secciones medias del
tallo de Cereus deficiens (Cactaceae), en donde el mayor efecto lo mostraron
EED y EESD. El efecto reductor del crecimiento micelial de los extractos fue
directamente proporcional a la concentracin utilizada. Con los resultados que se
obtuvieron se confirm que la extraccin acuosa no es la ms efectiva para la
70
inhibicin del crecimiento micelial, aunque se vi efecto sobre el crecimiento del

hongo, los resultados no resultan muy significativos. En cuanto a las dosis
utilizadas es posible que estas tambin no sean las ms efectivas, por tanto se
recomienda su uso en dosis ms concentradas para nuevas investigaciones.
B
B
A
A
Grafica 15: efecto de los extractos vegetales y sus dosis en PIC en las tres cepas
1047 y 935 de C. gloeosporioides. Y 845 de C. acutatum. De acuerdo a la
comparacin de medias (0.05). Letras iguales indican que no hay diferencia
significativa entre tratamientos.
Segn el anlisis de varianza y la prueba de comparacin de medias, el extracto

que present mayor porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial en las tres
cepas fue Desfan, mostrando diferencias significativas entre tratamientos, as
mismo, la dosis que present los mejores resultados fue la recomendada por el
producto (DR) con la media ms alta de las dosis utilizadas, seguida por la dosis
71
ms concentrada y por la primer dosis diluida (Dosis -1). La segunda dosis diluida
(Dosis -2) present la media mas baja de todas las dosis, mostrando diferencias
significativas con las dems dosis utilizadas, pero comportndose de la misma
manera en las tres cepas utilizadas, indicando que no existe diferencias
significativas en las dosis utilizadas para estas cepas (Grfica 15). Un ejemplo de
esto lo podemos ver con Desfan, en la dosis recomendada, donde present los
mejores resultados en las tres cepas evaluadas. En los resultados obtenidos con
Ecoswing se obtuvo el porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial ms alto
en la dosis ms concentrada (Dosis +1), y en la dosis recomendada por el
producto (DR), mostrando diferencias significativas con las dosis diluidas (Dosis 1, y Dosis-2).
8.3. PRUEBA DE INHIBICIN DEL DESARROLLO DE LOS SNTOMAS

DE ANTRACNOSIS EN FRUTOS DE MANGO DESPRENDIDOS.
El objetivo de esta prueba fue determinar si los extractos lograban inhibir el
desarrollo de los sntomas en frutos desprendidos de mango hilacha, para esta
prueba se seleccionaron los extractos Desfan y Ecoswing, debido a que estos
fueron los que presentaron los mejores resultados en las pruebas de inhibicin del
crecimiento micelial y de inhibicin de la germinacin de conidias.
Se determinaron y monitorearon los sntomas de la enfermedad en los mangos
durante 10 das, debido a que en el da 10 la mayora de los frutos presentaban
infeccin muy avanzada. A partir del tercer da tras la inoculacin, se observaron
los primeros sntomas de la enfermedad, los cuales se evidenciaron por medio de
un halo color caf alrededor del disco de Agar que se coloco en cada fruto (figura
10).
72
Figura 10: Fruto de mango con los primeros sntomas de antracnosis a los tres das. Halo
caf alrededor del disco de Agar. Testigo cepa 1047. (Foto: Aguirre. 2008).
Figura 11: frutos de mango con sntomas avanzados de antracnosis a los diez das. Halo
caf alrededor del disco de Agar. Testigo cepa 1047 (Foto: Aguirre. 2008).
Los resultados en esta prueba se determinaron realizando observaciones de

sntomas y signos causados por la enfermedad, para esto se midi el radio del halo
alrededor del disco de Agar con el patgeno, y se realizaron observaciones de
algunos signos caractersticos de la enfermedad como la presencia de acrvulos
formados por el hongo, esto con el fin de determinar cual de los extractos causaba
algn efecto en la manifestacin de los sntomas y signos de la enfermedad.
Durante los 10 das de monitoreo de las cmaras hmedas se pudo observar que
en la cepa 1047 de C. gloeosporioides, los extractos no presentaron algn efecto
inhibitorio de los sntomas, al comparar los resultados con los controles (Tabla 5),
se pudo ver que la diferencia entre los tratamientos con los extractos y los
controles es mnima, indicando que ninguno de los extractos en condiciones
73
controladas present algn efecto de inhibicin de los sntomas de la enfermedad

en frutos de mango. Se realizaron observaciones del desarrollo de la enfermedad
en los frutos donde se observ la formacin de acrvulos de color salmn sobre el
disco de Agar que se puso en los frutos (figura 12), los acrvulos se presentaron
tanto en los tratamientos con los extractos como en los controles, esto explica que
ninguno de los extractos influy en el desarrollo de la enfermedad.
Figura 12: fruto de mango con formacin de acrvulos color salmn de

Colletrotrichum gloesporioides, sobre el disco de Agar. Tratamiento con Desfan
dosis +1 (0.25ml/L), Cepa 1047 (Foto: Aguirre. 2008).

RADIO DEL HALO DE INFECCIN
EXTRACTO
EN CM.
DOSIS
DIA
DIA 6
DIA 8
DIA 10
0.25 mL/L
0.1
0.5
0.75
1.2
0.2 ml/L
0.1
0.5
0.7
1.25
2 mL/L
0.2
0.34
0.6
1.5mL/L
0.1
0.43
0.7
1.3
0.1
0.25
0.7
1.12
DESFAN
ECOSWING
CONTROL
74
En la cepa 935 de C. gloeosporioides, los resultados que se presentaron en la

prueba en frutos desprendidos, indicaron que ninguno de los extractos present
inhibicin del desarrollo de los signos y sntomas de la enfermedad en mango, ya
que el hongo en los tratamientos con los extractos (Desafan y Ecoswing) se
comportaron de manera similar a los controles (Tabla 6), demostrando que
ninguno de los extractos fue efectivo. Tambin se present la formacin de
acrvulos color salmn, sobre el disco de Agar, lo mismo que en los controles,
confirmando as que no hubo ningn efecto de los extractos, sobre la inhibicin
del crecimiento micelial del hongo ni sobre el desarrollo y formacin de sus
estructuras reproductivas este.

RADIO DEL HALO DE
EXTRACTO
INFECCIN EN CM.
DOSIS
DA 3
DIA 6
DIA 8
DIA 10
0.25 mL/L
0.1
0.46
0.9
1.32
0.2 ml/L
0.15
0.61
0.82
1.41
2 mL/L
0.1
1.5mL/L
0.15
0.47
0.86
1.3
0.1
0.55
0.7
1.3
DESFAN
0.46
0.86
1.17
ECOSWING
CONTROL
Los resultados obtenidos en la prueba para la determinacin del efecto de los

extractos (Desfan y Ecoswing) en la aparicin de sntomas por infeccin
quiescente en mango, se determinaron por medio de presencia o ausencia de
75
sntomas, donde se pudo observar que los primeros sntomas de la enfermedad

empezaron a presentarse a partir del octavo da de observaciones, estos sntomas
se vieron en los tratamientos con los extractos excepto en el tratamiento con la
dosis comercial de Desfan, en los dems se presentaron manchas cafs,
caractersticas de antracnosis en mango en los controles los cuales tambin se
presentaron los sntomas a partir del octavo da. A medida que el fruto se
desarrolla los valores de pH disminuyen dificultando la penetracin del patgeno
durante la maduracin del fruto; por lo tanto los sntomas que se observan en los
estados fenolgicos E3 y E4 son el resultado de infecciones quiescentes que se
forman cuando el fruto se encuentra en los estados fenolgicos E1 y E2. (Parra,
L.2008).
El pH de frutos enfermos es superior a 6.0, y el valor mnimo para que se active la
secrecin de pectinasas y por ende la degradacin de la cutcula, es de mnimo 5.1
(Yakoby et al 1999) esta situacin puede influir en la actividad del
microorganismo. Debido a esto se pudo presentar un retraso en la aparicin de
sntomas de antracnosis en el tratamiento con Desfan en la dosis comercial
0.2ml/L (Tabla 7), teniendo en cuenta que el pH de 2 que posee Desfan no es el
adecuado para que el microorganismo se desarrolle, lo cual pudo retrasar la
aparicin de sntomas de la enfermedad.
Tambin se pudo observar que los valores de pH del exocarpio en reas sanas de
frutos enfermos, se ve alterada por la presencia de C. gloeosporioides aumentando
el valor de pH con respecto al de un fruto completamente sano. (Parra, L.2008).
En el dcimo da de seguimiento todos los tratamientos presentaban sntomas
similares a los controles (Tabla 7); esto indica que en esta prueba ninguno de los
extractos utilizados fue eficiente, ni logr controlar ni prevenir la aparicin de los
sntomas de la enfermedad en los frutos desprendidos.
76
Figura 13: Sntomas y signos de antracnosis en mango, tratamiento con Desfan A) estado
inicial, da 6 B) estado avanzado, da 8 (Foto: Aguirre. 2008).
Tabla 7: determinacin del efecto de los extractos (Desfan y Ecoswing) en la

aparicin de sntomas por infeccin quiescente en mango.
Ausencia/presencia
EXTRACTO
DOSIS
DA
10
+1
DC
+1
DC
DESFAN
ECOSWING
CONTROL
En los resultados obtenidos en las pruebas de inhibicin de la germinacin y

porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial, es posible que el efecto
inhibitorio presentado por Desfan, se deba principalmente a su composicin,
como ya se haba mencionado anteriormente, Desfan es un desinfectante orgnico
extrado de las semillas de la naranja y toronja, el cual contiene fracciones de
glucosa, fructosa, cido ascrbico. Este ltimo aparte de intervenir en la accin
77
enzimtica del hongo e intervenir en su nutricin, tambin es responsable del bajo

pH del extracto.
Desfan presenta un pH de 2, siendo este el extracto con el pH mas bajo de todos
los utilizados (Anexo 1). Cada organismo tiene un rango de pH dentro del cual es
posible su crecimiento y normalmente posee un pH ptimo bien definido, la
acidez o alcalinidad de un medio tiene una gran influencia sobre el crecimiento
microbiano. Algunos microorganismos crecen mejor a pH bajo o alto, aunque la
mayora lo hacen a pH entre 6 y 8 cercano a la neutralidad. (Madigan et al, 2004).
Colletotrichum sp, se desarrolla mejor en el rango de pH 5-8 siendo su ptimo pH
5. (Guanipa, 1989).
El crecimiento micelial in vitro de Colletotrichum sp, presenta algunas similitudes
con el desarrollo necrtrofo, en lo que se refiere a la expresin enzimtica (Shih et
al., 2000), la rpida colonizacin y utilizacin de la fuente de alimento y la
produccin de amonio en respuesta a pH cido in vitro, incrementando de esta
forma el pH hasta obtener el nivel ptimo para su actividad enzimtica (Mendgen
y Hahn, 2000). Estos factores son
muy importantes en el desarrollo de la
patogenicidad de hongos y bacterias. (Benito et al., 2000). Esto podra indicar que
el pH del medio en este caso, no estuvo implicado en la inhibicin del crecimiento
micelial en cuanto a la prueba in vitro, debido a que si se presento inhibicin por
parte del extracto, aunque pudo ser ms por el efecto del acido ascrbico el cual
puede intervenir directamente en la accin enzimtica del hongo, afectando su
nutricin, como ya se haba mencionado.
Para la prueba in vivo sobre frutos desprendidos, donde no se presentaron
resultados importantes por parte del extracto, si es posible que el hongo este
produciendo amonio en respuesta a pH cido, incrementando de esta forma el pH
hasta obtener el nivel ptimo para su actividad enzimtica, logrando que este se
desarrolle e inicie una fase bitrofa. La fase bitrofa es de corta duracin, asegura
el establecimiento del patgeno al hospedero, seguido de una fase necrtrofa
asociada a la aparicin de los sntomas de la antracnosis, en donde hay un
incremento en la expresin enzimtica para degradar la pared celular vegetal
aumentar la virulencia del patgeno. (Cern, 2005).
78
Grfica 16: porcentaje de inhibicin del crecimiento micelial en frutos

desprendidos.
En la grfica 16 se presenta el seguimiento realizado en la prueba de frutos
desprendidos donde se obtuvo el porcentaje de inhibicin del crecimiento (PIC),
midiendo el radio del halo que se presentaba alrededor del disco de Agar. Los
79
datos negativos se deben a que el halo del tratamiento fue ms grande que el halo
del testigo, lo cual quiere decir que el extracto no presento ningn efecto en
absoluto.
Como podemos observar en la grfica 16, ninguno de los 2 extractos (Desfan y
Ecoswing) present inhibicin en la cepa 1047 de C. gloesporioides, ya que todos
los resultados dieron por debajo de cero. En cuanto a la cepa 935 de C.
gloesporioides, en las primeras lecturas (3 y 6), se observ cierta inhibicin por
parte de los dos extractos aunque un poco mayor con Ecoswing en la dosis ms
concentrada, pero si observamos las siguientes lecturas, se presenta una
disminucin en el PIC a medida que pasa el tiempo, en la lectura 8 y 10, los datos
estn por debajo de cero, menos en Ecoswing con la dosis ms concentrada, con
un porcentaje de inhibicin menor a 5%, el cual no es muy significativo. Se podra
pensar que este resultado se debe a que la cepa 1047 es mas patognica en frutos,
que la cepa 935, la cual present sntomas de manera ms lenta, ms no que hubo
algn efecto de inhibicin.
80
9. CONCLUSIONES.
El extracto vegetal que present los mejores resultados en el control de C.

gloeosporioides, de mango en condiciones in vitro, fue el producto comercial
Desfan en la dosis recomendada (0.2ml/L) por la casa comercial.
De los seis extractos vegetales evaluados, el extracto de extracto de cardn lefaria
(cereus deficiens otto & diert), fue el que present mayor efectividad en la
inhibicin de la germinacin de conidias de la cepa 1047 de C. gloeosporioides.
La cepa 1047 de C.
gloeosporioides, provenientes de fruto de mango del
departamento de Magdalena, fue la cepa que mostr mayor virulencia en las

evaluaciones sobre frutos desprendidos; lo que mostr que posiblemente existe
variabilidad gentica entre las cepas evaluadas, cuyos orgenes geogrficos son
distintos.
Las evaluaciones exploratorias de inhibicin del desarrollo de C. gloeosporioides,
de mango realizadas en el laboratorio, brindaron la informacin necesaria para
seleccionar un extracto para estudios posteriores en campo.
El agua destilada mostro ser un sustrato adecuado para la germinacin de conidias
de C. gloeosporioides, y C. acutatum.
81
10. RECOMENDACIONES.
Realizar evaluaciones de control de la antracnosis en mango con otros extractos

vegetales disponibles en el mercado.
Realizar evaluaciones del extracto Desfan , directamente sobre rboles de mango

en diferentes etapas fonolgicas, para estudiar su eficacia en la disminucin de la
antracnosis en los diferentes rganos vegetales.
Realizar evaluaciones in vitro teniendo en cuenta las condiciones en campo, y los

componentes de los productos evaluados, debido a que muchos extractos tienen
componente que se pueden alterar debido a las condiciones ambientales, esto
influye mucho en los resultados en campo.
82
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88
12. ANEXO 1.
PH EXTRACTOS.
EXTRACTOS.
PH.
DESFAN.
XPLODE.
ECOSWING.
EX. CACTUS.
CAPSIALIL.
EX. SWINGLIA.
ANEXO 2.
Medio Marthurs.
Dextrosa: 11.2g
MgSO4. 7 H2O: 2.5g
KH2PO4: 2.7g
Bactopeptona: 1g
Extracto de levadura: 0.8g
Agar: 12g
ANEXO 3.
Agar agua.
Gelatina sin sabor: 7g
Agar: 10g
89
ANEXO 4.
Anlisis estadstico.
Evaluacin del crecimiento micelial.
CEPA 1047
------------------------------------ DIA=8 ------------------------------------The GLM Procedure
Class Level Information
Class
Levels
Values
EXTRACTO
CAPSIALIL CONTROL DESFAN E. CACTUS E. SWINGLIA ECOSWING

XPLODE
DOSIS
1+ CERO DR
Number of Observations Read
Number of Observations Used
100
49
The GLM Procedure

Dependent Variable: CRECIMIENTO
CRECIMIENTO
Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
12
52.58608844
4.38217404
125.04
<.0001
Error
36
1.26166667
0.03504630
Corrected Total
48
53.84775510
R-Square
Coeff Var
Root MSE
CRECIMIENTO Mean
0.976570
6.103208
0.187207
3.067347
Source
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
Source
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
6
1
5
49.53700510
0.31222321
2.73686012
8.25616752
0.31222321
0.54737202
235.58
8.91
15.62
<.0001
0.0051
<.0001
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
5
1
5
47.25900298
0.26602083
2.73686012
9.45180060
0.26602083
0.54737202
269.69
7.59
15.62
<.0001
0.0091
<.0001
Tukey's Studentized Range (HSD) Test for CRECIMIENTO
90
NOTE: This test controls the Type I experimentwise error rate, but it generally
has a higher Type II error rate than REGWQ.
Alpha
0.05
Error Degrees of Freedom
36
Error Mean Square
0.035046
Critical Value of Studentized Range 4.41355
Minimum Significant Difference
0.3238
Harmonic Mean of Cell Sizes
6.511628
NOTE: Cell sizes are not equal.
Means with the same letter are not significantly different.
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
A
A
A
A
A
A
A
A
A
3.7750
CONTROL
3.6875
E. CACTUS
3.6600
E. SWINGLIA
3.5125
CAPSIALIL
3.4750
XPLODE
3.1000
ECOSWING
0.8375
DESFAN
CEPA 1047
Alpha
0.05
36
Error Mean Square
0.035046
0.2175
8.851312
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
3.77500
CERO
3.10000
23
91
DR
B
B
2.90455
22
1+
CEPA 1047
Level of
EXTRACTO
Level of
DOSIS
CAPSIALIL
CAPSIALIL
CONTROL
DESFAN
DESFAN
E. CACTUS
E. CACTUS
E. SWINGLIA
E. SWINGLIA
ECOSWING
ECOSWING
XPLODE
XPLODE
1+
DR
CERO
1+
DR
1+
DR
1+
DR
1+
DR
1+
DR
4
4
4
4
4
4
4
2
3
4
4
4
4
---------CRECIMIENTO--------Mean
Std Dev
2.97500000
4.05000000
3.77500000
0.75000000
0.92500000
3.92500000
3.45000000
3.65000000
3.66666667
2.95000000
3.25000000
3.55000000
3.40000000
0.12583057
0.17320508
0.33040379
0.05773503
0.05000000
0.15000000
0.33166248
0.21213203
0.05773503
0.12909944
0.12909944
0.05773503
0.27080128
CEPA 1047
Least Squares Means
EXTRACTO
CRECIMIENTO
LSMEAN
LSMEAN
Number
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
1
2
3
4
5
6
7
CAPSIALIL
CONTROL
DESFAN
E. CACTUS
E. SWINGLIA
ECOSWING
XPLODE
CEPA 935
Class
Levels
Values
EXTRACTO

XPLODE
DOSIS
1+ CERO DR
92
100
52
CEPA 935
CRECIMIENTO
Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
12
28.61923077
2.38493590
93.01
<.0001
Error
39
1.00000000
0.02564103
Corrected Total
51
29.61923077
R-Square
Coeff Var
Root MSE
CRECIMIENTO Mean
0.966238
7.639141
0.160128
2.096154
Source
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
Source
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
6
1
5
27.89423077
0.16333333
0.56166667
4.64903846
0.16333333
0.11233333
181.31
6.37
4.38
<.0001
0.0158
0.0029
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
5
1
5
25.74750000
0.16333333
0.56166667
5.14950000
0.16333333
0.11233333
200.83
6.37
4.38
<.0001
0.0158
0.0029

Alpha
0.05
39
Error Mean Square
0.025641
0.266
7
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
A
A
A
A
2.80000
CONTROL
2.72500
CAPSIALIL
93
B
B
B
2.58750
E. CACTUS
C
C
C
2.43750
XPLODE
2.28750
E. SWINGLIA
1.56250
ECOSWING
0.62500
DESFAN
CEPA 935
Alpha
0.05
39
Error Mean Square
0.025641
0.1839
9
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
2.80000
CERO
B
B
B
2.09583
24
DR
1.97917
24
1+
CEPA 935
Level of
EXTRACTO
Level of
DOSIS
CAPSIALIL
CAPSIALIL
CONTROL
DESFAN
DESFAN
E. CACTUS
E. CACTUS
E. SWINGLIA
E. SWINGLIA
ECOSWING
1+
DR
CERO
1+
DR
1+
DR
1+
DR
1+
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
94
Std Dev
2.70000000
2.75000000
2.80000000
0.55000000
0.70000000
2.75000000
2.42500000
2.15000000
2.42500000
1.40000000
0.08164966
0.10000000
0.08164966
0.05773503
0.08164966
0.10000000
0.05000000
0.50000000
0.05000000
0.08164966
ECOSWING
XPLODE
XPLODE
DR
1+
DR
4
4
4
1.72500000
2.32500000
2.55000000
0.09574271
0.12583057
0.05773503
CEPA 935
Least Squares Means
EXTRACTO
CRECIMIENTO
LSMEAN
LSMEAN
Number
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
1
2
3
4
5
6
7
CAPSIALIL
CONTROL
DESFAN
E. CACTUS
E. SWINGLIA
ECOSWING
XPLODE
CEPA 845
Class
Levels
Values
EXTRACTO

XPLODE
DOSIS
1+ CERO DR
100
52
CEPA 845
CRECIMIENTO
Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
12
2.63923077
0.21993590
20.06
<.0001
Error
39
0.42750000
0.01096154
Corrected Total
51
3.06673077
R-Square
Coeff Var
Root MSE
CRECIMIENTO Mean
0.860601
6.236269
0.104697
1.678846
95
Source
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
Source
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
6
1
5
2.23548077
0.06020833
0.34354167
0.37258013
0.06020833
0.06870833
33.99
5.49
6.27
<.0001
0.0243
0.0002
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
5
1
5
1.91687500
0.06020833
0.34354167
0.38337500
0.06020833
0.06870833
34.97
5.49
6.27
<.0001
0.0243
0.0002

Alpha
0.05
39
Error Mean Square
0.010962
0.1739
7
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
A
A
A
A
A
A
A
1.95000
CONTROL
1.81250
XPLODE
1.81250
E. CACTUS
1.80000
E. SWINGLIA
C
C
C
1.67500
CAPSIALIL
1.58750
ECOSWING
1.25000
DESFAN
B
B
B
B
B
B
B
CEPA 845
Alpha
96
0.05
39
Error Mean Square

0.010962
0.1202
9
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
1.95000
CERO
B
B
B
1.69167
24
1+
1.62083
24
DR
CEPA 845
Level of
EXTRACTO
Level of
DOSIS
CAPSIALIL
CAPSIALIL
CONTROL
DESFAN
DESFAN
E. CACTUS
E. CACTUS
E. SWINGLIA
E. SWINGLIA
ECOSWING
ECOSWING
XPLODE
XPLODE
1+
DR
CERO
1+
DR
1+
DR
1+
DR
1+
DR
1+
DR
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
Std Dev
1.62500000
1.72500000
1.95000000
1.42500000
1.07500000
1.82500000
1.80000000
1.72500000
1.87500000
1.67500000
1.50000000
1.87500000
1.75000000
0.05000000
0.12583057
0.12909944
0.05000000
0.12583057
0.09574271
0.14142136
0.05000000
0.09574271
0.12583057
0.11547005
0.12583057
0.05773503
CEPA 845
Least Squares Means
EXTRACTO
CRECIMIENTO
LSMEAN
LSMEAN
Number
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
Non-est
1
2
3
4
5
6
7
CAPSIALIL
CONTROL
DESFAN
E. CACTUS
E. SWINGLIA
ECOSWING
XPLODE
97
Prueba de germinacin de conidias.

CEPA 1047
The GLM Procedure
Class
Levels
Values
EXTRACTO

XPLODE
DOSIS
1+ 1- 2- CERO DR
100
100
CEPA 1047
The GLM Procedure
Dependent Variable: PORC_GERMINACION
PORC_GERMINACION
Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
24
57.16000000
2.38166667
6.44
<.0001
Error
75
27.75000000
0.37000000
Corrected Total
99
84.91000000
R-Square
Coeff Var
Root MSE
PORC_GERMINACION Mean
0.673183
114.7691
0.608276
0.530000
Source
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
6
3
15
44.66000000
1.04166667
11.45833333
7.44333333
0.34722222
0.76388889
20.12
0.94
2.06
<.0001
0.4265
0.0212
Source
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
5
3
15
24.12500000
1.04166667
11.45833333
4.82500000
0.34722222
0.76388889
13.04
0.94
2.06
<.0001
0.4265
0.0212
CEPA 1047
The GLM Procedure
Dependent Variable: PORC_GERMINACIONT
Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
24
821.539484
34.230812
6.56
<.0001
98
Error
75
391.375076
Corrected Total
99
1212.914560
5.218334
R-Square
Coeff Var
Root MSE
PORC_GERMINACIONT Mean
0.677327
98.34827
2.284367
2.322733
Source
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
6
3
15
627.7244893
13.7468137
180.0681810
104.6207482
4.5822712
12.0045454
20.05
0.88
2.30
<.0001
0.4564
0.0096
Source
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
5
3
15
416.4928337
13.7468137
180.0681810
83.2985667
4.5822712
12.0045454
15.96
0.88
2.30
<.0001
0.4564
0.0096
Tukey's Studentized Range (HSD) Test for PORC_GERMINACION

Alpha
Error Mean Square
Critical Value of Studentized Range
0.05
75
0.37
4.28480
0.7788
11.2
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
2.7500
CONTROL
B
B
B
1.3750
16
CAPSIALIL
0.8125
16
ECOSWING
0.3125
16
XPLODE
0.0625
16
E. SWINGLIA
0.0625
16
DESFAN
0.0000
16
E. CACTUS
C
C
C
C
C
C
C
D
D
D
D
D
D
D
CEPA 1047
The GLM Procedure
Tukey's Studentized Range (HSD) Test for PORC_GERMINACIONT
99

Alpha
0.05
75
Error Mean Square
5.218334
2.9247
11.2
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
9.4428
CONTROL
B
B
B
5.4010
16
CAPSIALIL
4.2445
16
ECOSWING
1.7935
16
XPLODE
0.3587
16
E. SWINGLIA
0.3587
16
DESFAN
0.0000
16
E. CACTUS
C
C
C
D
D
D
D
D
D
D
CEPA 1047
The GLM Procedure
Alpha
Error Mean Square
Critical Value of Studentized Range
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
2.7500
CERO
B
B
B
B
B
B
B
0.5833
24
2-
0.4583
24
1-
0.4167
24
DR
0.2917
24
1+
CEPA 1047
The GLM Procedure
100
0.05
75
0.37
3.95308
0.6941
12

Alpha
0.05
75
Error Mean Square
5.218334
2.6068
12
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
9.4428
CERO
B
B
B
B
B
B
B
2.4535
24
2-
2.3286
24
1-
1.7877
24
DR
1.5344
24
1+
CEPA 845
The GLM Procedure
Class
Levels
Values
EXTRACTO

XPLODE
DOSIS
1+ 1- 2- CERO DR
100
100
PORC_GERMINACION
Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
24
116.5400000
4.8558333
7.39
<.0001
Error
75
49.2500000
0.6566667
Corrected Total
99
165.7900000
R-Square
Coeff Var
Root MSE
0.702937
58.29854
0.810350
1.390000
101
Source
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
6
3
15
102.2275000
6.6145833
7.6979167
17.0379167
2.2048611
0.5131944
25.95
3.36
0.78
<.0001
0.0232
0.6935
Source
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
5
3
15
91.42708333
6.61458333
7.69791667
18.28541667
2.20486111
0.51319444
27.85
3.36
0.78
<.0001
0.0232
0.6935
Dependent Variable: PORC_GERMINACIONT

Source
DF
Sum of
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
24
946.554304
39.439763
4.72
<.0001
Error
75
626.119684
8.348262
Corrected Total
99
1572.673988
R-Square
Coeff Var
Root MSE
PORC_GERMINACIONT Mean
0.601876
52.48690
2.889336
5.504871
Source
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
6
3
15
765.3032673
61.2822473
119.9687898
127.5505445
20.4274158
7.9979193
15.28
2.45
0.96
<.0001
0.0703
0.5066
Source
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
5
3
15
684.6742054
61.2822473
119.9687898
136.9348411
20.4274158
7.9979193
16.40
2.45
0.96
<.0001
0.0703
0.5066

Alpha
0.05
75
Error Mean Square
0.656667
1.0375
11.2
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
3.3750
16
E. CACTUS
102
A
A
C
C
C
C
C
C
C
B
B
B
B
B
B
B
3.0000
CONTROL
1.4375
16
XPLODE
1.1250
16
CAPSIALIL
0.9375
16
ECOSWING
0.6875
16
E. SWINGLIA
0.3750
16
DESFAN

Alpha
0.05
75
Error Mean Square
8.348262
3.6993
11.2
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
A
A
A
10.485
16
E. CACTUS
9.904
CONTROL
C
C
C
C
C
C
C
6.298
16
XPLODE
5.376
16
CAPSIALIL
4.334
16
ECOSWING
3.284
16
E. SWINGLIA
2.152
16
DESFAN
B
B
B
D
D
D
D
D
D
D

Alpha
0.05
75
Error Mean Square
0.656667
0.9247
12
103
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
3.0000
CERO
B
B
B
B
B
B
B
1.7500
24
2-
1.2917
24
DR
1.2083
24
1-
1.0417
24
1+

Alpha
0.05
75
Error Mean Square
8.348262
3.2972
12
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
9.904
CERO
B
B
B
B
B
B
B
6.553
24
2-
5.258
24
DR
5.158
24
1-
4.318
24
1+
CEPA 935
The GLM Procedure
Class
Levels
Values
EXTRACTO

XPLODE
DOSIS
1+ 1- 2- CERO DR
The GLM Procedure
PORC_GERMINACION
Sum of
104
100
99
Source
DF
Squares
Mean Square
F Value
Pr > F
Model
24
63.5151515
2.6464646
4.02
<.0001
Error
74
48.6666667
0.6576577
Corrected Total
98
112.1818182
R-Square
Coeff Var
Root MSE
0.566180
65.27247
0.810961
1.242424
Source
DF
Type I SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
6
3
15
50.69848485
1.47375479
11.34291188
8.44974747
0.49125160
0.75619413
12.85
0.75
1.15
<.0001
0.5275
0.3299
Source
DF
Type III SS
Mean Square
F Value
Pr > F
EXTRACTO
DOSIS
EXTRACTO*DOSIS
5
3
15
46.55086580
1.32444444
11.34291188
9.31017316
0.44148148
0.75619413
14.16
0.67
1.15
<.0001
0.5723
0.3299

Alpha
0.05
74
Error Mean Square
0.657658
1.0421
11.12583
Tukey Grouping
B
B
B
B
B
B
B
A
A
A
A
A
A
A
C
C
C
C
C
Mean
EXTRACTO
2.2500
CONTROL
2.1875
16
XPLODE
1.6875
16
E. CACTUS
1.4667
15
CAPSIALIL
1.1875
16
ECOSWING
D
0.6250
16
E. SWINGLIA
D
D
0.0625
16
DESFAN
CORPORACION COLOMBIANA DE INVESTIGACION AGROPECUARIA (CORPOICA)
EXTRACTOS GERMINACION
ERIKA MARTINEZ
105
1622
PROCES: PROGRAMA DE BIOMETRIA

18 DE NOVIEMBRE DE 2008
CEPA 935
The GLM Procedure
Alpha
0.05
74
Error Mean Square
6.609846
3.3039
11.12583
Tukey Grouping
Mean
EXTRACTO
A
A
A
A
A
A
A
A
A
8.454
CONTROL
8.322
16
XPLODE
6.985
16
E. CACTUS
6.336
15
CAPSIALIL
5.560
16
ECOSWING
B
B
B
B
B
C
3.168
16
E. SWINGLIA
C
C
0.359
16
DESFAN
ERIKA MARTINEZ
1623
CEPA 935
The GLM Procedure
Alpha
0.05
74
Error Mean Square
0.657658
0.9278
11.94805
106

Tukey Grouping
Mean
DOSIS
A
A
A
2.2500
CERO
B
1.3333
24
2B
B
1.2917
24
DR
B
B
1.1667
24
1B
B
1.0000
23
1+
ERIKA MARTINEZ
1624
CEPA 935
The GLM Procedure
Alpha
0.05
74
Error Mean Square
6.609846
2.9412
11.94805
Tukey Grouping
Mean
DOSIS
8.454
CERO
B
B
B
B
B
B
B
5.411
24
2-
5.312
24
DR
5.278
24
1-
4.405
23
1+
107

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EVALUACIN DEL EFECTO DE DIFERENTES EXTRACTOS

VEGETALES SOBRE EL CRECIMIENTO DE Colletotrichum

JAIME ESNEIDER AGUIRRE RODRIGUEZ.

MICROBILOGO AGRICOLA Y VETERINARIO

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

EVALUACIN DEL EFECTO DE DIFERENTES EXTRACTOS

JAIME ESNEIDER AGUIRRE RODRIGUEZ.

Jairo Antonio Osorio

Nancy Eunice Nio.

EVALUACIN DEL EFECTO DE DIFERENTES EXTRACTOS

JAIME ESNEIDER AGUIRRE RODRIGUEZ.

JANETH ARIAS PALACIOS M.Sc- .Ed

INGRID SCHULER, Ph.D.

Directora Carreras de Microbiologa

A mi familia por el apoyo, la confianza y entrega.

A mi familia por creer en m.

2.1.1 Mango comn o hilacha.

2.1.2 Variedades resistentes a la antracnosis.

2.1.4 Fase reproductiva.

2.1.5 Clima y suelo.

2.2.2. Sintomatologa causada.

2.2.3. Fuentes de inoculo.

2.2.5. Condiciones favorables.

2.2.7. Infeccin quiescente.

2.3.1. Extracto de swinglia.

2.3.3. Desfan 100.

2.3.6. Extracto de cardn lefaria.

3. FORMULACIN DEL PROBLEMA

6.1. SITIO DE ESTUDIO Y MUESTRA.

7.1. PRUEBA DE GERMINACIN DE CONIDIAS.

7.1.1. Cultivo monosprico despus de la exposicin a los extractos.

7.2. EVALUACIN DEL CRECIMIENTO MICELIAL.

7.3. EVALUACIN EN FRUTOS DE MANGO DESPRENDIDOS.

7.4. ANLISIS DE DATOS.

8.1. PRUEBA DE GERMINACIN DE CONIDIAS.

8.1.1. Cepa 1047 de C. gloeosporioides.

8.1.2. Cepa 935 de C. gloeosporioides.

8.1.3. Cepa 845 de C. acutatum.

8.2. EVALUACIN DEL CRECIMIENTO MICELIAL.

8.2.1. Cepa 1047 de C. gloeosporioides.

8.2.2. Cepa 935 de C. gloeosporioides.

8.2.3. Cepa 845 de C. acutatum.

8.3. EVALUACIN EN FRUTOS DE MANGO DESPRENDIDOS.

Figura 2: Antracnosis por Colletotrichum gloeosporioides.

Figura 3: Montaje prueba frutos desprendidos, inoculacin de frutos.

Figura 4: Tubo germinal conidia de C. gloeosporioides

Figura 5: Crecimiento micelial cepa 1047 tratamiento con Desfan.

Figura 6: Formacin de apresorios tratamiento con Desfan cepa 1047.

Figura 7: Crecimiento micelial cepa 935 tratamiento con Desfan.

Figura 8: Conidias cepa 935 de C. gloeosporioides, tratamiento con Desfan. 66

Figura 11: Sntomas avanzados de antracnosis a los diez das.

Figura 12: Sntomas y signos de antracnosis en mango.

Figura 13: Sntomas de antracnosis en mango, tratamiento con Desfan.

Tabla 1. Extractos y dosificacin.

Tabla 2: Porcentaje de germinacin conidias cepa 1047 C. gloeosporioides.

Tabla 3: Porcentaje de germinacin conidias cepa 935 de C. gloeosporioides. 56

Tabla 5: resultados prueba inhibicin del desarrollo de la antracnosis en frutos

Tabla 6: resultados prueba inhibicin del desarrollo de la antracnosis en frutos

Tabla 7: determinacin del efecto de los extractos (Desfan y Ecoswing) en la

Grafica 1: Curva de germinacin de conidias cepa 1047.

Grafica 2: Porcentaje de germinacin conidias cepa 1047 C. gloeosporioides. 52

Grafica 4: Curva de germinacin de conidias cepa 935.

Grafica 5: Porcentaje de germinacin de conidias