Professional Documents
Culture Documents
LABORATORIO
LICENCIATURA EN CIENCIA
Y TECNOLOGIA DE ALIMENTOS
- 2007 -
CONTENIDO
PROGRAMA ANALITICO................................................................................................................................. 3
BIBLIOGRAFIA................................................................................................................................................... 6
INTERROGATORIOS INICIALES................................................................................................................... 8
LISTA DE MATERIALES PERSONALES NECESARIOS ............................................................................ 9
INTRODUCCION ................................................................................................................................................ 10
DETERMINACIN DE MACROCOMPONENTES ..................................................................................... 11
MODELO DE INFORME: DETERMINACIN DE MACROCOMPONENTES .................................................................. 12
HUMEDAD Y SLIDOS TOTALES.............................................................................................................. 13
Determinacin del contenido de agua........................................................................................................ 13
Mtodo indirecto por secado en estufa a 100 C (CAA; 13.21, 1989)................................................................. 13
Mtodo indirecto por secado a temperatura y tiempo normalizados. ................................................................ 14
Mtodo indirecto de secado en estufa de vaco..................................................................................................... 14
Mtodo de destilacin directa (o por arrastre con solvente inmiscible). ............................................................ 15
CENIZAS ........................................................................................................................................................ 19
NITROGENO TOTAL Y PROTEINA BRUTA .......................................................................................... 20
GRASA............................................................................................................................................................ 23
Mtodo directo por extraccin con solvente orgnico (grasa bruta) (AOAC, 960.39, 1990).................... 23
Mtodo de Gerber (CAA, Tomo II, 13-8, 1989) .......................................................................................... 25
Mtodo de Rose-Gottlieb (10) (A.O.A.C., 989.05, 1990)............................................................................... 26
Mtodo de Rose Gottlieb modificado.......................................................................................................... 27
FIBRA DIETARIA .......................................................................................................................................... 29
Mtodo de Fibra Insoluble en Detergente Neutro (NDF) (Journal of the A.O.A.C., 50(1): 50-55 (1967))
..................................................................................................................................................................... 29
Fibra insoluble en detergente neutro (modificacin: tratamiento con amilasa)..................................... 30
AZUCARES..................................................................................................................................................... 32
Mtodo de la reduccin del cobre (Munson y Walker)(A.O.A.C., 920.183,1990) ..................................... 33
DETERMINACIN DE LA PUREZA DE UNA MUESTRA DE AZCAR POR POLARIMETRA.......... 44
MODELO DE INFORME: POLARIMETRA.......................................................................................................... 45
ALTERACIONES DE LPIDOS....................................................................................................................... 46
INDICE DE CIDOS GRASOS LIBRES (IUPAC, II.D.1, MODIFICADO) .................................................................... 46
INDICE DE PERXIDO (A.O..A.C., 965.33, 1990; A.O.C.S., CD 8-53, 1963)................................................... 47
MODELO DE INFORME: ALTERACIONES DE LPIDOS ...................................................................................... 49
PROPIEDADES FUNCIONALES DEL ALMIDON ...................................................................................... 50
MODELO DE INFORME: PROPIEDADES FUNCIONALES DEL ALMIDN ............................................................ 51
PROPIEDADES EMULSIONANTES DE LAS PROTEINAS....................................................................... 52
PROGRAMA ANALITICO
Carga horaria: 120 horas
Horas semanales: tericas 3
prcticas 5
Contenidos
Unida 1:
Agua
La molcula de agua. Estructura y asociaciones intermoleculares. Interacciones agua-soluto.
Migracin de agua en los alimentos. Presin de vapor relativa, movilidad molecular y estabilidad
de alimentos.
Unidad 2:
Sistemas alimentarios
Dispersiones. Angulo de contacto, fenmenos de superficie, surfactantes. Interacciones
coloidales: aplicacin de los conceptos de doble capa elctrica y atracciones de van der Waals.
Dispersiones lquidas y fenmenos de agregacin. Geles. Emulsiones. Espumas. Formacin y
estabilidad de las distintas dispersiones.
Unidad 3:
Hidratos de carbono
Reacciones de azcares, dextrinas y polisacridos de importancia en los alimentos:
caramelizacin, reaccin de Maillard, hidrlisis cida y enzimtica. Gelatinizacin,
retrogradacin y dextrinizacin de almidones, almidones modificados. Sustancias pcticas.
Gomas. Aplicaciones en alimentos. Fibra dietaria y digestibilidad de carbohidratos. Propiedades
fsicas y funcionales de azcares y polisacridos.
Unidad 4:
Lpidos
Clasificacin. Acidos grasos esenciales. Propiedades fsicas y funcionales. Cristalizacin y
consistencia. Polimorfismo. Rol de los lpidos en la percepcin del flavor. Alteraciones.
Antioxidantes. Modificaciones durante la coccin y fritura de los alimentos.
Unidad 5:
Protenas
Estabilidad conformacional y adaptabilidad. Termodinmica de la desnaturalizacin.
Propiedades funcionales. Cambios fsicos, qumicos y nutricionales inducidos por el procesado.
Modificaciones qumicas y enzimticas. Aislados y concentrados proteicos.
Unidad 6:
Enzimas
Clasificacin de enzimas significativas en alimentos. Rol de los enzimas endgenos en la
calidad de los alimentos. Efectos beneficiosos y perjudiciales . Pardeo enzimtico. Utilizacin
de preparados enzimticos.
Unidad 7:
Vitaminas y minerales
Caractersticas generales. Vitaminas hidrosolubles y liposolubles. Causas de la variacin /
prdida de vitaminas. Minerales: distribucin en los alimentos. Variaciones por tratamientos
tecnolgicos. Biodisponibilidad.
Unidad 8:
Propiedades organolpticas
Pigmentos naturales: ejemplos y ocurrencia, caractersticas, solubilidad, estabilidad. Color:
definicin, medicin objetiva. Definicin de gusto, aroma y "flavor". Flavores naturales y
generados por reacciones qumicas. Concepto de textura, factores que influyen en la percepcin.
Alimentos con estructura celular y dispersiones. Atributos de textura vinculados con la estructura
qumica de los componentes.
rea Bromatologa Departamento Qumica Orgnica
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Universidad de Buenos Aires
Unidad 9:
Aditivos alimentarios
Definicin. Requisitos para su utilizacin en alimentos: inocuidad, justificacin de su uso,
aceptacin por la legislacin vigente. Niveles probablemente seguros para el ser humano: ingesta
diaria admisible. Clasificacin general y usos. Aditivos de conservacin: antimicrobianos y
antioxidantes. Aditivos mejoradores de las propiedades sensoriales: aromatizantes y
modificadores del flavor, edulcorantes, colorantes, emulsionantes, antiaglomerantes, espesantes
y gelificantes. Auxiliares tecnolgicos de fabricacin.
Unidad 10:
Mtodos analticos de uso general en Bromatologa.
Necesidad de normalizacin de las tcnicas. Preparacin y toma de muestra. Determinaciones
fsicas. Fundamento de los mtodos para determinar hidratos de carbono, sustancias
nitrogenadas, minerales, vitaminas y lpidos. Criterios de seleccin de mtodos, causas de error e
interferencia. Expresin de los resultados y su interpretacin.
Unidad 11:
Alteraciones fsicas, qumicas y biolgicas de materias primas y productos alimenticios
Cambios fsicos, qumicos y biolgicos. Ejemplos y discusin de cada uno. Factores que
influyen en las alteraciones. Alteraciones consecutivas.
BIBLIOGRAFIA
-Cdigo Alimentario Argentino, De La Canal & Asociados, SRL. Tomo I a y b.
1993. Actualizado.
-Cdigo Alimentario Argentino, De La Canal & Asociados, SRL. Tomo II. Metodologa
Analtica Oficial. 1989.
- Belitz, H.D. y Grosch, W., Qumica de los alimentos, 2 ed., Acribia, Zaragoza, 1997.
- Fennema, O., Food Chemistry, 3rd. ed., Marcel Dekker Inc., New York., 1996.
- Fennema, O., Qumica de los alimentos, Acribia, Zaragoza, 1993.
- Cheftel, J.C., Cheftel, H. y Besanon, P. Introduccin a la bioqumica y tecnologa de los
alimentos, Vol.I (1980) y II (1983), Acribia, Zaragoza.
- Potter, N.W. y Hotchkiss, J.H., Ciencia de los alimentos, Acribia, Zaragoza, 1998.
- Coultate, T.P., Manual de qumica y bioqumica de los alimentos, Acribia, Zaragoza, 1998.
- Wong, D.W.S., Qumica de los alimentos: mecanismos y teora, Acribia, Zaragoza, 1995.
-Pomeranz, Y., Functional Properties of Food Components, Academic Press, Inc. , Orlando, 1985.
- Gmez, R.G., , Malec L.S. Vigo M.S. y Buera M. P. Fundamentos de Mtodos para el Anlisis
de Alimentos, Ed. CCC Educando, Buenos Aires, 2001.
- Hart, F.L. y Fisher, H.J., Anlisis moderno de los alimentos, 2 reimpresin, Acribia, Zaragoza,
1991.
- Pearson, D., Tcnicas de laboratorio para el anlisis de alimentos, 2 reimpresin, Acribia,
Zaragoza, 1986.
- Egan, H., Kirk, R.S. y Sawyer, R., Anlisis qumico de los alimentos de Pearson, Ed. Continental,
Mxico, 1987.
- Association of Official Analytical Chemists, Official Methods of Analysis of the Association of
Official Analytical Chemists, 16th ed., 1995.
- Pomeranz, Y y Meloan, C.E., Food Analysis: Theory and Practice, 3rd ed., Chapman & Hall, New
York., 1994.
- Willard, H.H., Merrit, L.L. y Dean, J.A., Mtodos instrumentales de anlisis, Compaa Editorial
Continental, 1985.
- Cheftel, J.C., Cuq, J.L. y Lorient, D., Protenas alimentarias: Bioqumica. Propiedades
funcionales. Valor nutritivo. Modificaciones qumicas., Acribia, Zaragoza, 1989.
- Damodaran, S. y Paraf, A., Food proteins and their applications. Marcel Dekker, New York,
1997.
- Pilosof, A.M.R. y Bartolomai, G.B., Caracterizacuin Funcional y Estructural de protenas,
Eudeba, Argentina, 2000.
- Eliasson, A.C., Carbohydrates in foods, Marcel Dekker, New York, 1996.
- Gunstone, F., Fatty acid and lipid chemistry, Chapman & Hall, London, 1996.
- Schwartzberg, H.G. & Hartel, R.W., Physical chemistry of foods, Marcel Dekker, New York,
1992.
- Leach, H.W.,MacCowen,L.D., Schoch,T.J., Structure of starch granule. Cereal Chem. 36:534544, 1959.
- Sanderson, G.R.. Polysaccharides in food. Food Tecnology. Julio 1981, pag.50.
- Sathe, S.K. y Salunke, D.K. Isolation, partial characterization and modification of Great Nother
Bean (Phaseolus vulgaris L.) starch. Journal of Food Science. 46:617-621, 1981.
- Wilson, L.A.; Birmingham, V.A.; Moon, D.P. y Snyder, H.E. Isolation and characterization of
starch from mature soybeans. Cereal Chem. 55(5):661-670,1978.
INTERROGATORIOS INICIALES
En los interrogatorios iniciales se deber conocer los siguientes temas:
-
Cenizas
Grasa
Fibra dietaria
Azcares
- Guardapolvo
- Libreta de laboratorio
- Anteojos de seguridad
- Esptula metlica
- Pera de goma
- Algodn
- Alcohol
- Marcador de vidrio
- Detergente
- Repasador o trapo rejilla
- Pauelos de papel
INTRODUCCION
Los trabajos prcticos comprenden la realizacin de algunos mtodos de uso general para la
determinacin del contenido de los componentes bsicos de los alimentos: agua, minerales, protena,
lpidos, hidratos de carbono y fibra.
Con la finalidad de poder determinar alteraciones que pueden sufrir los alimentos, se incluye
una prctica en la que se determinan ndices de alteracin en lpidos.
Es importante estudiar adems las caractersticas fisicoqumicas de los componentes de los
alimentos. Con este fin se presentan dos prcticas que abarcan el estudio de algunas propiedades
funcionales de almidn y protenas.
El nmero de anlisis que es necesario efectuar en cada determinacin para lograr resultados
confiables depende de la muestra que se somete al anlisis y de la precisin del mtodo aplicado.
La muestra debe ser representativa del alimento analizado. Dado que en general los
alimentos son heterogneos, es difcil obtener una sola muestra absolutamente representativa para el
anlisis de laboratorio. La muestra de laboratorio debe ser tan homognea como sea posible. El
mtodo de homogeneizacin depender del tipo de alimento que se est analizando. Por lo tanto es de
fundamental importancia la toma de muestra, el manipuleo, la preparacin y la forma de conservacin
a fin de evitar alteraciones, antes de someterla al anlisis.
La eleccin del mtodo de anlisis depende de su finalidad; a veces interesa ms la rapidez
en obtener un resultado que la exactitud.
10
DETERMINACIN DE MACROCOMPONENTES
Esquema de trabajo:
Leche en polvo
Dulce de Leche
Galletitas Integrales
Grasas (Soxhlet)
Protenas
Azcares
Fibra
Alimento entregado
por la ctedra
Agua
Cenizas
11
12
Notas:
1. En algunos casos puede aadirse arena calcinada, para conseguir una mayor
superficie de secado, de manera que quede una capa delgada en el fondo del
cristalizador, y tarar el conjunto. En el caso de muestras slidas o semislidas se
aconseja colocar una varilla corta para poder mezclar bien la muestra con la arena.
13
(2) Leche en polvo: pesar exactamente, en un pesafiltro con tapa, 3-4 g de muestra.
Dulce de Leche: colocar una varilla de vidrio corta y arena calcinada en un cristalizador de dimetro o
menor de 5 cm. Pesar exactamente, en el cristalizador tarado, 2-3 g de muestra. Mezclar bien la muestra con la
arena.
14
Nota:
1. El primer da de trabajo conviene dejar en la estufa el mayor tiempo posible, sin
necesidad
2. de hacer pesadas. El segundo da dejar el tiempo necesario como para completar
aproximadamente 7 hs. de secado; sacar de la estufa, dejar enfriar 10-15 min. En
desecador y pesar. Secar una hora ms y pesar. Repetir hasta constancia de peso.
Nota:
- Esta destilacin requiere al menos 4 hs. de funcionamiento, deber comenzarse a primera
hora. Realizar la lectura del volumen recogido a las 24 hs.
(3) La capa acuosa de tolueno saturado estar bien decantada y se cuidar no trasvasarla al baln.
(4) Observar que el tubo refrigerante y la trapa estn bien desengrasados.
15
16
17
Cuando se trate de vinos que tengan ms de 60 g de extracto por litro, deber dejarse en la
estufa 60 minutos.
Determinacin de slidos por refractometra. (A.O.A.C., 969.38 B,1990).
Abrir el doble prisma del refractmetro y esparcir la muestra con ayuda de una varilla
sobre la cara inferior, cerrar los prismas firmemente y dejar un minuto para que la temperatura
de la muestra y el aparato se equilibren. Buscar en el campo del visor la franja que indica
reflexin total; ajustar dicha franja en el punto de interseccin de la cruz del visor, rotando el
tornillo compensador si la lnea no fuera ntida y presentara coloracin.
Leer el ndice de refraccin directamente sobre la escala, hacer 2 o 3 lecturas y
promediarlas. Calcular el % de agua a partir de la tabla correspondiente (A.O.A.C., 940.39,
1990).
Nota
1. Como el refractmetro a utilizar no cuenta con camisa termostatizada, se har circular
agua durante las observaciones, se leer la temperatura en el termmetro del aparato y se
corregir la lectura para obtener la equivalencia a 20C, como se indica la nota al pie de la
tabla del A.O.A.C.
2.
18
CENIZAS
Se consideran como tal el residuo inorgnico que queda despus de incinerar la materia
orgnica, generalmente a 500-550C. Su composicin rara vez corresponde a la de las
materias minerales del producto debido a prdidas por volatilizacin, descomposicin e
interaccin entre constituyentes.
El valor principal de la determinacin de cenizas es que supone un mtodo sencillo para
determinar la calidad de ciertos alimentos, determinar su pureza y detectar adulterantes
inorgnicos.
Determinacin de cenizas totales Mtodo directo ( A.O.A.C., 923.03, 1990).
Pesar la cantidad de alimento adecuado(5) en una cpsula de porcelana de unos 6 cm de
dimetro, previamente tarada(6). Incinerar con mechero sobre tela de amianto hasta
carbonizacin y luego en mufla a 500-550C hasta obtener cenizas gris claro o cuando se
llega a peso constante. Enfriar en desecador y pesar tan pronto alcance la temperatura
ambiente (aproximadamente 45 minutos).
El resultado se expresa en % de muestra.
Notas:
1. Esta determinacin debe realizarse por duplicado.
2. Si las cenizas quedan con trazas de carbn, humedecerlas con un poco de agua,
romper las partculas de carbn con una varilla de punta chata, enjuagarla y evaporar
cuidadosamente a sequedad sobre un tringulo colocado sobre la tela metlica, antes
de volver a calcinar. Repetir el tratamiento tantas veces como sea necesario.
3. Los productos que contienen mucha agua se secan primero sobre una plancha elctrica
caliente, a bao Mara o en un bao de arena.
4. Cuando se determinan cenizas en harina de trigo (para su tipificacin), se calcina a
900 20C, como la concentracin de cloruros es baja, las prdidas por volatilizacin
no son significativas.
(5) Galletitas Integrales: 3-5 g
(6) Calcinar la cpsula vaca en mufla a 500 - 550C, enfriada en desecador y pesar hasta constancia de
peso.
19
20
Etapa de destilacin.
Colocar 50 ml de solucin saturada de cido brico en un erlemeyer de 500 ml y agregar unas
gotitas de indicador combinado (aprox. 0,15 ml).
Realizar la destilacin de acuerdo a las indicaciones del equipo.
El destilado se titula con HCl 0,1 N valorado.
Expresar el resultado como % protena segn las siguientes expresiones:
% protena = % N . fP
1000 . mM
Donde:
V: volumen
N: normalidad
f: factor de correccin
21
22
GRASA
La grasa se determina normalmente o bien por extraccin directa con un solvente, o luego
de un tratamiento previo para separar lpidos emulsionados o combinados con otros
componentes del alimento.
La grasa libre se puede determinar por extraccin del material seco y reducido a polvo con
un solvente orgnico, generalmente ter etlico, hexano o cloruro de metileno en un aparato de
extraccin continua. En la prctica se utilizar el tipo Soxhlet en el que se realiza una
extraccin intermitente con un exceso de solvente recientemente condensado.
En aquellos alimentos en los que los lpidos formen emulsiones muy estables, el contenido
graso se determinar por el mtodo de Gerber o el de Rose-Gottlieb.
Mtodo directo por extraccin con solvente orgnico (grasa bruta) (AOAC, 960.39, 1990)
Reactivos:
-
ter etlico
Na2SO4 anhidro
Pesar una cantidad adecuada de muestra en un cristalizador y secarla, preferiblemente en
una estufa de vaco a 70C (o utilizar el residuo de la determinacin del contenido de agua si
se realiz por el mtodo de secado en estufa). Transferir cuantitativamente el material
deshidratado a un cartucho de celulosa. Pesar exactamente una cantidad adecuada de la
muestra deshidratada(8) en un cartucho de celulosa. Cubrir con un poco de algodn y colocar
en el cuerpo del extractor Soxhlet.
En el baln de extraccin colocar 2 o 3 piedras pmez chicas y cargar el cuerpo del
extractor una vez y media con ter etlico anhidro (ver esquema adjunto). Extraer durante 4
hs. como mnimo, calentando con una intensidad tal que se logre una velocidad de
condensacin de 5 6 gotas por segundo.
Una vez finalizada la extraccin destilar la mayor parte del ter a bao Mara,
recuperndolo. Pasar luego el extracto a un Erlenmeyer chico tarado, con la ayuda de un poco
de ter anhidro. Evaporar a bao Mara y secar a 100 durante 30 min. Enfriar y pesar.
(8) Galletitas Integrales: 2 g. NO SER NECESARIO SECAR ESTA MUESTRA (consultar con los docentes)
23
Extractor Soxhlet
24
Reactivos :
- H2SO4 para Gerber (dens. 1,813-1,817 a 20 - aprox. 90 %)
- Alcohol amlico puro (dens. 0,809-0,813 a 20), libre de grasa, comprobado por un ensayo
en blanco.
Medir con pipeta 11 ml de H2SO4 para Gerber e introducirlos en el butirmetro (ver
grfico adjunto) evitando mojar las paredes internas del cuello. Luego, agregar con rapidez 11
ml de la muestra con pipeta aforada, cuidando que forme un estrato encima del cido y no se
mezcle con l, e inmediatamente agregar 1 ml de alcohol amlico. Se tapa el butirmetro con
el tapn especial correspondiente y se agita en forma efectiva pero con cuidado(9), teniendo en
cuenta que se produce una fuerte elevacin de la temperatura. Se coloca el butirmetro en un
bao de agua a 65-70C por 5-10 min. (con el tapn hacia abajo). Retirado del bao, se seca
exteriormente y se centrifuga 3-5 min. La centrfuga consiste en un plato chato en el cual,
mediante tubos metlicos, se adaptan los butirmetros dispuestos de forma tal que los tapones
de cierre queden dirigidos hacia afuera y la porcin graduada hacia el eje de la centrfuga. Se
vuelve al bao de agua por 4-5 min., se lee inmediatamente el espesor de la capa de grasa
acumulada en la parte superior calibrada del butirmetro. Por ajuste adecuado del tapn de
cierre, se puede hacer coincidir la base de la columna de grasa con el cero de la escala.
Leyendo a la altura del menisco de la columna de grasa, se obtiene directamente el % de
(9) Para proteger la mano del calor que se desprende, conviene tomar el butirmetro con un trapo, sujetndo
con el dedo pulgar el tapn de goma, con firme presin. Los tres lquidos del interior se mezclan volteando
varias veces el butirmetro. En algunos casos, se forman cogulos proteicos que persisten; los mismos se
eliminan agitando (siempre con precaucin) fuertemente, despus de un tiempo prudencial.
25
Butirmetro de Gerber
Notas:
1. Siendo dificultosa la separacin de los glbulos pequeos de grasa en leches
homoeneizadas, se recomienda volver a centrifugar despus de calentar en bao de 6570C, procediendo as hasta que la lectura alcance un mximo.
2. Se recomienda la realizacin de este ensayo por duplicado simultneo, sirviendo cada
butirmetro como mutuo contrpeso para el equilibrio de la centrfuga.
26
27
Reactivos
- NH4OH concentrado
- Etanol
- Eter etlico
- Eter de petrleo
Pesar suficiente cantidad de muestra(11) de muestra en una papel satinado previamente
tarado (lo ms pequeo posible). Encerrar parcialmente la muestra en el papel (debe tomar
contacto con los reactivos) e introducir hasta el fondo de una probeta de 50 ml con tapa.
Agregar 5 ml de agua y agitar hasta que la muestra se disuelva (si es necesario, calentar en
bao Mara a 60C). Enfriar y adicionar 1 ml de NH4OH conc. Agitar y agregar 5 ml de
etanol. Agitar y agregar con pipeta aforada 10 ml de ter etlico. Agitar 30 segundos y
agregar, tambin con pipeta aforada, 10 ml de ter de petrleo Volver a agitar y leer bien el
volumen total de la mezcla. Dejar reposar 4 horas en la heladera (hay que evitar la
evaporacin de solventes; si esto ocurriera se notar una disminucin en el volumen ledo).
Con pipeta aforada tomar 10 ml de la fase superior etrea y evaporarlos en un pequeo
cristalizador tarado. Deja enfriar en desecador, pesar y expresar % de grasas teniendo en
cuenta la alcuota que se pipete.
28
FIBRA DIETARIA
Mtodo de Fibra Insoluble en Detergente Neutro (NDF) (Journal of the A.O.A.C., 50(1):
50-55 (1967))
Reactivos:
- Solucin de detergente neutro (dodecil sulfato de sodio, EDTA, etilenglicol, buffer de pH
6,9-7,1)
- Antiespumante
- Acetona
- Sulfito de sodio anhidro
Pesar exactamente 0,5-1,0 g de muestra y transferirla a un Erlenmeyer de 250 ml
esmerilado. Agregar en el siguiente orden, 100 ml de solucin de detergente neutro, 10 gotas
de antiespumante y 0,5 g de sulfito de sodio. Conectar al condensador y calentar de manera tal
que entre en ebullicin en 5-10 min.. Cuando la solucin entr en ebullicin, reducir el
calentamiento para evitar la formacin de espuma. Hervir exactamente 60 min. (contar el
tiempo a partir del momento en que comenz la ebullicin), agitando peridicamente para
suspender los slidos adheridos a las paredes. Filtrar inmediatamente a travs de un crisol de
vidrio de poro grueso previamente tarado, aplicando vaco en forma suave, Lavar el
Erlenmeyer con un mnimo de agua caliente (80-90 C), volcar en el crisol y succionar hasta
casi sequedad. Repetir el lavado con agua caliente dos veces ms. Luego lavar dos veces con
acetona (aproximadamente 5 ml por vez) y succionar hasta sequedad. Secar el crisol en estufa
a 100 C durante 8 horas o toda la noche.
Calcinar durante 3 horas a 500-550 C, enfriar en desecador y pesar. La diferencia de
peso obtenida se refiere a porcentaje de muestra y se consigna como fibra insoluble en
detergente neutro.
Notas:
1. Debido a inconvenientes de orden prctico, en el laboratorio no se realizar la etapa de
calcinacin. El resultado se informar como el peso obtenido, referido a 100, luego del
secado a 100 C.
rea Bromatologa Departamento Qumica Orgnica
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Universidad de Buenos Aires
29
30
Notas:
1. Debido a inconvenientes de orden prctico, en el laboratorio no se realizar la etapa de
calcinacin. El resultado se informar como el peso obtenido, referido a 100, luego del
secado a 100 C.
2. Para reutilizarlos, los crisoles se deben dejar en solucin sulfontrica (1:1),
preferentemente durante 1 noche; luego enjuagar abundantemente con agua destilada
y, posteriormente, secar a 100.
31
AZUCARES
Los mtodos disponibles para la determinacin de azcares se basan principalmente en la
refractometra, polarimetra o reduccin con cobre. El mtodo que se utilizar depende de
varios factores, por ejemplo del tipo y nmero de muestras, la exactitud, precisin y clase de
informacin que se requiere, y tiempo y aparato de que se dispone.
Preparacin de la muestra :
Para la aplicacin de la mayora de los mtodos es necesario que los azcares estn en
solucin, generalmente acuosa, y eliminar las sustancias interferentes. La necesidad de
eliminar una interferencia depende no slo del alimento sino del mtodo que se va a utilizar.
Generalmente(12) se sigue el siguiente esquema: se pesa una cantidad adecuada de muestra
en un vaso de precipitados, se disuelve en agua y se trasvasa cuantitativamente a un matraz.
Se agrega una cantidad adecuada de agente clarificante y llevar a volumen con agua destilada.
Se deja en reposo unos minutos, se filtra desechando los primeros ml de filtrado y se diluye
convenientemente la solucin para realizar la determinacin de azcares sobre una alcuota de
la dilucin final.
(12) Leche en polvo: Pesar 5 g de leche en polvo en un vaso de precipitados de 100 ml. Disolver en
aproximadamente 50-100 ml de agua destilada a 37C y agitar con varilla hasta homogeinizacin completa.
Trasvasar cuantitativamente a un matraz aforado de 250 ml. Defecar con 10 ml de solucin de Carrez I y 10 ml
de solucin de Carrez II. Llevar a volumen con agua destilada. Homogeneizar. Dejar en reposo al menos 20
minutos. Filtrar, por papel plegado y seco, descartando los primeros 20 ml (solucin A). Diluir la solucin A al
medio y determinar azcares reductores por el mtodo de Munson y Walker sobre 25 ml de la solucin diluda.
Dulce de Leche: Pesar 10 g de dulce de leche en un vaso de precipitados de 100 ml. Disolver en
aproximadamente 50-100 ml de agua destilada a 37C, agitar con varilla hasta homogeinizacin completa.
Trasvasar cuantitativamente a un matraz aforado de 250 ml. Defecar con 5 ml de solucin de Carrez I y 5 ml de
solucin de Carrez II. Llevar a volumen con agua destilada. Homogeneizar. Dejar en reposo al menos 20
minutos. Filtrar, por papel plegado y seco, descartando los primeros 20 ml. Hacer la determinacin de Munson
y Walker sobre 25 ml de la solucin clarificada segn el procedimiento descripto ms adelante.
NOTA: Si no puede completar las determinaciones durante la clase, es posible conservar hasta la semana
siguiente las soluciones de muestra ya preparadas; para ello es NECESARIO agregarles unas gotas de cido
propinico y guardar EN LA HELADERA.
32
Agentes clarificantes:
1. Carrez I: Disolver 15 g de K4[Fe(CN)6] . 3H2O en 100 ml de agua destilada.
Carrez II: Disolver 30 g de ZnSO4 . 7H2O en 100 ml de agua destilada.
Se aaden a la solucin a clarificar 5 ml de Carrez I (el volumen vara segn el producto y
el volumen total de la solucin) y se mezcla bien. Se agrega un volumen igual de Carrez II, se
enrasa con agua, se agita bien y se filtra despus de dejar en reposo al menos 20 min.
2. Solucin neutra de acetato de plomo: se utiliza una solucin saturada que se agrega a la
solucin de azcares antes de enrasar. El exceso de plomo se elimina aadiendo, luego de
la clarificacin, solucin de oxalato de sodio o potasio o de Na2SO4 en pequeas porciones
hasta que no se observa formacin de precipitado. Se deja en reposo 30 min., se filtra y se
lleva a volumen.
3. Crema de almina: se prepara por adicin de un ligero exceso de amonaco a una solucin
saturada de alumbre. Se agrega unos ml a la muestra disuelta en agua, se agita, se deja
reposar unos minutos, se filtra y lleva a volumen.
Mtodo de la reduccin del cobre (Munson y Walker)(A.O.A.C., 920.183,1990)
Reactivos :
- Asbestos
- Solucin CuSO4 7 %
- Solucin alcalina de tartrato (346 g tartrato de Na y K . 4. H2O
de agua).
33
Pasar y arrastrar bien el precipitado que haya quedado en el vaso con ayuda de un
policeman, con 100-150 ml de agua a 60 aproximadamente (realizar varios lavados con
pequeos volmenes de agua cada vez). Cuidar que el crisol mantenga siempre una pequea
cantidad de agua durante la filtracin.
Lavar luego con 10 ml de etanol y finalmente con 10 ml de ter etlico (medir estos
volmenes con probeta). Pasar un algodn impregnado con alcohol alrededor del crisol para
eliminar restos de goma que pudieran haber quedado. Secar durante exactamente 30 min. en
estufa a 100, enfriar en desecador y pesar.
Clculo de resultados
Descontar la masa de Cu2O correspondiente al blanco de reactivos (consultar el valor con
el docente) y calcular el peso de azcar correspondiente a la cantidad de Cu2O obtenida
mediante la tabla correspondiente. Para el clculo de azcares reductores utilizar la columna
de la tabla que corresponde al azcar mayoritariamente presente en la solucin.
Expresar el resultado en % de azcares reductores.
Notas:
1. Esta determinacin debe realizarse por duplicado.
2. Es posible utilizar el mismo crisol para efectuar determinaciones posteriores; para ello es
necesario lavar la capa de asbestos luego de cada determinacin: se deja en contacto con
HNO3 25 % (hasta que se disuelva el precipitado de Cu2O obtenido), y luego se enjuaga
con abundante agua destilada; finalmente se enjuaga con alcohol y luego con ter etlico.
Por lo tanto NO LAVE EL CRISOL cuando finalice su determinacin, DEVULVALO
CON EL PRECIPITADO OBTENIDO, que los docentes se encargarn del lavado
posterior. MUCHAS GRACIAS!
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
ALTERACIONES DE LPIDOS
Indice de cidos grasos libres (IUPAC, II.D.1, modificado)
Los aceites y grasas, debido a la accin de las lipasas, contienen cidos grasos libres en
mayor o menor cantidad segn sean las condiciones de manufactura y tiempo de
almacenamiento del producto. El Cdigo Alimentario Argentino menciona el mximo valor de
acidez libre permitido en aceites comestibles (Art. 525).
Se expresa en mg de KOH requeridos para neutralizar los cidos grasos libres presentes en 1
g de grasa.
Reactivos:
- Sol. de etanol: ter etlico (1:1 v/v) neutralizada = 60 ml.
- NaOH 0.05 N valorado.
- Sol. de fenolftalena al 1 %
Pesar exactamente, en un Erlenmeyer tarado de 125 ml, 1-2 g de muestra y disolverla en 60
ml de la mezcla de solventes previamente neutralizada a la fenloftalena con NaOH diludo.
Agitar y titular con NaOH 0.05 N valorado, utilizando una pipeta de 2 o 5 ml graduadas al 0.1 ml
(No introducir la pipeta mojada en el frasco del NaOH 0.05 N, sino sacar 10 ml en un vasito y
pipetear de all).
Calcular e informar la acidez libre en mg de KOH por g de aceite y en g de cido oleico por
100 g de aceite, que es otra forma comn de expresarla. (PM cido oleico = 282.4).
Nota: Punto final: que la coloracin rosa del indicador permanezca 15-30 seg.
Clculo de resultados:
IA (g cido oleico / 100 g aceite) = (V x N x f)NAOH MACIDO OLEICO x 100 / (1000 x mM)
rea Bromatologa Departamento Qumica Orgnica
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Universidad de Buenos Aires
46
Donde:
47
clorofrmica. Agregar la solucin de Na2S2O3 gota a gota hasta desaparicin del color azul. Si el
gasto de Na2S2O3 0,1 N es muy pequeo (< 0,5 ml), repetir la determinacin y titular con
solucin de Na2S2O3 0,01 N. Conducir paralelamente un blanco (el volumen gastado debe ser <
0,1 ml de Na2S2O3 0,1 N).
Clculo de resultados:
IPO (meq. de perxido / 1000 muestra = (M B) x N x f x 1000 / mM
Donde:
M = ml de Na2S2O3 gastados en la titulacin de la muestra.
B = ml de Na2S2O3 gastados en la titulacin del blanco.
N = normalidad de la solucin de Na2S2O3.
f = factor de la solucin de Na2S2O3
mM = masa de muestra (g)
48
49
50
Tendencia a retrogradar
3.- OBSERVACIONES
En este apartado puede volcar las observaciones que considere oportunas. Por ejemplo,
explicar por qu tuvo que repetir alguna determinacin, interpretar algn resultado anmalo.
51
Una emulsin es una dispersin de dos lquidos inmiscibles. Uno de ellos formando una
fase dispersa en forma de gotas o glbulos en otra fase continua. Es un sistema
termodinmicamente inestable debido al aumento del rea interfacial, lo que produce un
aumento de la energa libre del sistema.
Las dos fases lquidas inmiscibles en los alimentos son la acuosa y la lipdica. En la
mayora de los alimentos la fase lipdica es la dispersa.
La inversin de fases ocurre cuando una emulsin aceite/agua se transforma en una
agua/aceite, o a la inversa. Esto sucede generalmente en emulsiones en las que la relacin fase
dispersa/fase continua es elevada o cuando la emulsin es sometida a un trabajo mecnico
intenso.
Las protenas, debido a su naturaleza anfiflica, tienen accin tensioactiva, y por su
tendencia a desnaturalizarse y a agregarse en interfases, forman pelculas de rigidez y
elasticidad variables, motivos por los cuales son buenos agentes amulsificantes y
estabilizantes de emulsiones. Para evaluar las propiedades emulsionantes de las protenas se
utilizan mtodos estandarizados, debido a la diversidad de factores que afectan tanto la
formacin como la estabilidad de las emulsiones.
La capacidad emulsionante es la cantidad de aceite que puede emulsionar una solucin de
protena a una determinada concentracin.
Parte experimental
El mtodo consiste en adicionar aceite a una dispersin de una protena con agitacin
continua hasta que se produce la inversin de fases.
Reactivos:
- protena de suero lcteo
- sudn
Se utiliza una licuadora en la que se agregan 100 ml de agua, 300 mg de protena y se pesa
el vaso con el contenido. Se lleva a velocidad mxima de licuado y se agrega aceite (al que se
le adiciona previamente un colorante liposoluble) a un caudal constante de aproximadamente
rea Bromatologa Departamento Qumica Orgnica
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Universidad de Buenos Aires
52
53