2.

MARCO TERICO
I. OVARIO
Las funciones de los ovarios son la secrecin de hormonas y la liberacin de ovocitos capaces de
ser fecundados (Espey y Richards, 2006). Los folculos ovricos, localizados en la corteza ovrica
son considerados como la unidad anatmico-funcional del ovario. Cada folculo est constituido por
un ovocito rodeado por clulas somticas, las cuales participan en la regulacin del metabolismo del
ovocito (Li y Albertini, 2013; Norris et al., 2009).
Con base en la capacidad de respuesta del folculo a las gonadotropinas, el crecimiento de
los folculos se clasifica en dos fases: la primera es independiente de las gonadotropinas, en donde
se encuentran los folculos primordiales que no poseen receptores a FSH o LH. En la segunda fase,
se encuentran los folculos primarios, que poseen receptores a FSH; folculos secundarios o
preantrales, que expresan receptores a FSH en las clulas de la granulosa y a LH en las clulas de
la teca interna y folculos antrales, que presentan receptores a ambas gonadotropinas y que
dependen de ellas hasta que ocurra la liberacin de un ovocito maduro (Orisaka et al., 2009). El
inicio del crecimiento folicular es caracterizado por la proliferacin de las clulas de la granulosa, el
paso de las clulas de la pregranulosa (planas) a clulas cuboidales, crecimiento del ovocito y la
formacin de la zona pelcida. La diferenciacin de las clulas de la pre-granulosa a clulas de la
granulosa es estimulada por factores secretados por el ovocito como ligando Kit (KL) y el factor de
crecimiento fibroblastico bsico (bFGF) (Braw-Tal, 2002).
La expresin de receptores a FSH en los folculos primarios es modulada de manera
estimulante por la noradrenalina (NA) y por el pptido intestinal vasoactivo (VIP) (Mayerhofer et al.,
1997). En ovarios de rata de 2 das de edad mantenidos in vitro, la estimulacin con isoproterenol
(agonista del receptor -adrenrgico), con el pptido intestinal vasoactivo (VIP), o con forskolina,
activador de la enzima adenilato ciclasa, ocasiona el aumento de la expresin del ARNm que
codifica para el receptor de la FSH y en aumento en la concentracin de AMPc, lo que apoya la idea
de que el AMPc estimula la transcripcin del ARNm que codifica al receptor de la FSH, lo que nos
sugiere que la expresin de receptores a FSH en el folculo primario es regulada por los
neurotransmisores y no por vas humorales (Mayerhofer et al., 1997).

La estimulacin con FSH a cultivos de ovarios tratados previamente con isoproterenol, VIP o
forskolina, ocasiona la mayor concentracin de AMPc y la proliferacin de las clulas de la
granulosa. Por ello, se sugiere que la unin de la noradrenalina (NA) y del VIP a sus receptores
ovricos estimula la expresin de los receptores a FSH en las clulas de la granulosa y posibilitan
los efectos de la FSH en la diferenciacin y proliferacin de las clulas de la granulosa durante el
desarrollo folicular temprano (Mayerhofer et al., 1997).
Los folculos secundarios (fase antral temprana) se caracterizan por el aumento en el
dimetro del ovocito, la proliferacin de las clulas de la granulosa y la diferenciacin de las clulas
del estroma en clulas de la teca (Vanderhyden, 2002). El crecimiento y la diferenciacin del
compartimento tecal son estimulados por factores de crecimiento liberados por el ovocito, que
incluyen al factor de crecimiento y diferenciacin 9 (GDF-9), KL, protena morfogentica del hueso
15 y 6 (BMP15, BMP6), y por las clulas de la granulosa que secretan KL y el factor de crecimiento
semejante a la insulina (IGF-I) (Orisaka et al., 2009).
La diferenciacin de la capa tecal es acompaada por cambios en la red de capilares
perivasculares. La vascularizacin del estrato tecal facilita el aporte hormonal y nutricional necesario
durante el desarrollo folicular y maduracin del ovocito (Zhou et al., 2007). Con la vascularizacin del
estrato tecal comienza la formacin del lquido folicular (Rodgers e Irving-Rodgers, 2010). ste est
formado por los productos de secrecin de las clulas de la granulosa y por la difusin de protenas
(< 500 kDa) y agua desde los capilares perivasculares hasta el interior del folculo (Zhou et al.,
2007).
La confluencia de los productos de secrecin de las clulas de la granulosa (hormonas y
componentes de la matriz extracelular [proteoglicanos y versicanos]), de agua y de 183 protenas
provenientes del torrente sanguneo (ceruloplasmina, hemopexina, haptoglobina y de protenas de
fase aguada [APP] cruciales en la respuesta inflamatoria (Angelucci et al., 2006) estimula la
formacin del antro folicular (Rodgers e Irving-Rodgers, 2010).
La formacin de la cavidad antral divide a la poblacin de clulas de la granulosa. Por sus
caractersticas funcionales y ultraestructurales a las clulas de la granulosa se le clasifica en cuatro
grupos: 1) Clulas del cumulus, las cuales se asocian con el ovocito y participan en los mecanismos
que regulan el metabolismo del ovocito, 2) clulas del pice folicular, que por sus caractersticas
4

moleculares limitan la actividad proteoltica de las enzimas a la regin apical del folculo durante la
ovulacin, 3) clulas basales, localizadas cerca de la membrana basal cuya funcional principal es la
sntesis de hormonas esteroides y 4) clulas antrales, cuya morfologa es cubica o poligonal, se
localizan cerca del antro folicular y poseen baja actividad esteroidognica (Eppig, 2001; Harris et al.,
2011).
Las prolongaciones del citoesqueleto de las clulas del cumulus formadas por microtbulos y
F-actina llamadas proyecciones transzonales, modulan el intercambio bidireccional de molculas
(nucletidos cclicos y factores de crecimiento) entre el ovocito y las clulas foliculares que lo
rodean. En los folculos secundarios de la rata se observa un mayor nmero de proyecciones
transzonales que se asocian con el oolema por medio de uniones tipo gap. Las proyecciones
transzonales atraviesan una capa de glicoprotenas, secretadas por el ovocito en crecimiento,
denominada zona pelcida (Alberti et al., 2001). En la cerda, la coneja y en los telesteos, las
clulas de la granulosa (foliculares) tambin participan en la formacin de la zona pelcida (Kang,
1974). sta, mantiene la organizacin estratificada de las clulas de la corona radiada y regula de
manera estimulante la comunicacin bidireccional de molculas entre las clulas del cumulus y el
ovocito (Albertini et al., 2001; Rankin et al., 2001). El transporte continuo de guanosin monofosfato
cclico (GMPc), desde las clulas del cumulus hacia el ovocito, inhibe la progresin del ciclo celular
en el ovocito, dado que el GMPc inhibe la actividad de las fosfodiesterasas lo que resulta en un
aumento en la concentracin de AMPc. Este aumento impide el rompimiento de la envoltura nuclear
y la condensacin de los cromosomas, por lo que resulta en detenimiento de la meiosis del ovocito
(Norris et al., 2009).
En las clulas de la teca, la LH estimula la secrecin de P4 y andrgenos. Este efecto es
tambin estimulado por la NA y el VIP. En las clulas de la granulosa, los andrgenos son utilizados
como precursores en la sntesis del E2 (Vanderhyden, 2002). La regulacin diferencial que efectan
las gonadotropinas sobre la capacidad de sintetizar (clulas de la teca) o metabolizar (clulas de la
granulosa) andrgenos a estrgenos es conocida como el modelo de la doble clula-doble hormona
(Hillier et al., 1994).

La esteroidognesis es regulada de manera crnica y aguda. En la primera, ocurre la regulacin de

la transcripcin de genes que codifican a las enzimas esteroidognicas, mientras que en la segunda
se regula la disponibilidad del colesterol al complejo enzimtico P450scc (Miller 2009).
Las clulas esteroidognicas obtienen el colesterol a partir de la sntesis de novo, a partir de
las reservas de colesterol intracelular (esteres de colesterol almacenados en gotas lipdicas) y de la
absorcin, desde la circulacin, de colesterol transportado por las lipoprotenas de alta densidad. En
el interior de la clula, la protena StarD4 transporta el colesterol libre hacia la mitocondria (Miller
2009). En la membrana mitocondrial externa la enzima reguladora de la esteroidognesis aguda
(StAR) media el flujo rpido de colesterol hacia la membrana mitocondrial interna (Miller 2007). En la
membrana mitocondrial interna ocurre la primera reaccin en la biosntesis de hormonas esteroides,
es decir, la conversin de colesterol a pregnenolona (Norman y Litwack, 1997). El primer paso es la
ruptura del enlace covalente entre el carbono 22 y 20 del colesterol, lo que requiere de la
hidroxilacin en el C-20 seguida de otra en el C-22, formndose 20, 22-dihidroxicolesterol. Esta
reaccin es catalizada por la 20 y 22 hidroxilasa. Posteriormente la 20, 22-esteroide liasa da lugar
a la ruptura de los tomos de C-20 y C-22, obtenindose la pregnenolona de 21 tomos de carbono
y aldehdo iscaproico, fragmento de seis tomos de carbono, el complejo enzimtico que cataliza
esta reaccin se conoce como P450scc (Payne y Hales, 2004).
La pregnenolona puede entrar a la va 5 donde se forma dehidroepiandrosterona (DHEA) o
la va 4 donde ocurre la sntesis de androstenediona a partir de la transformacin de la
pregnenolona a P4. En compartimiento folicular se pueden seguir ambas vas para la produccin de
andrgenos (Norman y Litwack, 1997). En la va 5 la P4 es transformada a 17-hidroxipregnenolona
por accin del complejo enzimtico P450 C17. La actividad de la C17-20 liasa origina a partir de 17hidroxipregnenolona, DHEA y acetaldehdo. Por accin de la 3hidroxiesteroide deshidrogenasa
(3-HSD) la DHEA es transformada a androstenediona (Payne y Hales, 2004).
En la va 4, la pregnenolona es convertida a P4 en la fraccin microsomal, por accin de la
3-HSD. En el citoplasma la P4 es hidroxilada y convertida a 17-hidroxiprogesterona.
Posteriormente, la 17-hidroxiprogesterona es convertida a androstenediona por la accin de la C 1720

liasa. La 17-hidroxiesteroide deshidrogenasa (17-HSD) media la conversin de la

androstenediona, en la ruta 4 o 5, a testosterona. Esta ltima es secretada por las clulas de la

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teca interna e internalizada por las clulas de la granulosa. Las clulas de la granulosa expresan la
enzima P450arom, que media la transformacin de los andrgenos a E2, durante este proceso
ocurre la prdida del tomo de carbono 19 y el anillo A de los andrgenos se transforma en un anillo
aromtico o fenlico (Payne y Hales, 2004). La actividad esteroidognica del folculo vara
gradualmente a lo largo del ciclo estral o menstrual del animal, lo que se debe en parte a la variacin
en la disponibilidad y actividad de las enzimas esteroidognicas (Hanukoglu, 1992).
Las clulas de la granulosa y los ovocitos de los folculos secundarios son ms
susceptibles a factores atretognicos (radicales libres o el TNF-) los cuales estimulan la
degeneracin del folculo (atresia) por apoptosis o autofagia de las clulas que los constituyen. La
apoptosis es un proceso de muerte celular regulado por proteasas (caspasas) que degradan al ADN
y a protenas especificas intracelulares. La muerte celular por autofagia comienza con la formacin
de vesculas que contienen material citoplasmtico u organelos (mitocondria y retculo
endoplsmico) llamados autofagosomas. Este proceso es caracterizado por el aumento en la
expresin de la cadena ligera 3 asociada a microtbulos (LC3) y la protena de membrana asociada
al lisosoma 1 (Lamp 1), las cuales participan en la formacin y degradacin de los autofagosomas,
respectivamente. Segn Escobar-Snchez y colaboradores (2012) la muerte celular de los ovocitos
por apoptosis o autofagia vara de acuerdo al da del ciclo estral y depende de la concentracin de
estrgenos circundantes. En la rata, existe una correlacin negativa entre la concentracin
plasmtica de E2 y el nmero de ovocitos atrsicos. En los ovarios de animales sacrificados en el da
del estro o diestro-1, el nmero de ovocitos atrsicos es mayor comparado con animales sacrificados
en los das del diestro-2 o proestro. En el da del estro o diestro-1 la apoptosis es el mecanismo de
muerte celular ms frecuente. La muerte del ovocito celular por autofagia ocurre con mayor
frecuencia en los das del diestro-2 y proestro. Por ello, los autores sugieren que el E2 estimula
procesos de proliferacin celular, amplifica las posibilidades de supervivencia folicular, decrece las
posibilidades de muerte celular por apoptosis y estimula la muerte celular por autofagia (EscobarSnchez et al., 2012).
En los folculos preantrales, los estrgenos inhiben la expresin de genes pro-apoptticos
(de la familia de protenas del Bcl2) y de protenas precursoras en la formacin de vesculas
autofgicas. Por ello, se ha sugerido que en los folculos la capacidad de secrecin y de respuesta a

los estrgenos disminuye las posibilidades de degeneracin folicular (Escobar-Snchez et al., 2012;
Matsuda et al., 2012).
La ltima fase de desarrollo incluye el crecimiento del folculo antral y la ovulacin, procesos
que dependen de la respuesta del folculo a las gonadotropinas (Orisaka et al., 2006).
I.a OVULACIN
Los folculos preovulatorios que responde al estmulo gonadotrpico experimentan cambios
estructurales y moleculares que resultan en la expulsin de un ovocito II desde un folculo maduro
(Guraya, 2000; Liu et al., 2013; Tsafriri et al., 1972). En la rata, el aumento de la secrecin de GnRH
estimula el inicio de la secrecin preovulatoria de LH y FSH cerca de las 13:30 h del da del proestro
(Freeman, 1994). La secrecin preovulatoria de LH estimula la disrupcin meitica del ovocito
(Tsafriri et al., 1972), ya que estimula la retraccin de las proyecciones tranzonales lo cual inhibe la
permeabilidad de las uniones gap al GMPc (Norris et al., 2009) y en consecuencia se estimula la
actividad de las fosfodiesterasas. La actividad de las fosfodiesterasas disminuye la concentracin de
AMPc al interior del ovocito, lo que resulta en la disgregacin de la membrana nuclear (rompimiento
de la vescula germinal), proceso que permite la condensacin de los cromosomas y la separacin
de los cromosomas homlogos.
En la rata, el rompimiento de la vescula germinal ocurre aproximadamente a las 20:00 h del
da del proestro. Dos horas despus del rompimiento de la vescula germinal, se ha completado la
primera divisin meitica y se obtienen dos clulas haploides (cada una con dos cromatides): 1) El
ovocito II y 2) el primer cuerpo polar; que es liberado al antro folicular (Tsafriri y Kraicer, 1972). La
maduracin meitica del ovocito dentro del folculo se detiene en metafase II (Li y Albertini, 2013).
Solo en caso de fertilizacin, los ovocitos completan la segunda divisin meitica.
En respuesta a la secrecin preovulatoria de gonadotropinas, las clulas del cumulus
oophorus secretan cido hialurnico, proteoglicanos y protenas hacia los espacios intracelulares, lo
que estimula la expansin del cumulus (Tanghe et al., 2002). La expansin del cumulus oophorus
reduce el dao por estrs oxidativo en el ovocito, que es estimulado por la hiperemia y el proceso
inflamatorio que ocurre antes y despus de la ovulacin.

Despus de la liberacin del complejo ovocito-clulas del cumulus, el ovocito requiere de la unin
selectiva de las molculas de la matriz extracelular del cumulus con el epitelio infundibular ciliado del
oviducto, lo que facilita el transporte del ovocito por el lumen oviductal (Russell y Robker, 2007).
La liberacin del complejo ovocito II-cumulus requiere de la degeneracin de la estructura
folicular en un rea de aproximadamente 200 m de dimetro localizada en el pice del folculo
(Zackrisson et al., 2011). La degradacin de la matriz extracelular y el aumento de la permeabilidad
vascular son dos eventos que facilitan la liberacin del ovocito; ambos son estimulados por
mediadores inflamatorios (prostaglandinas, histaminas, citosinas, y especies reactivas de oxgeno)
liberados por las clulas esteroidognicas, fibroblastos, clulas endoteliales y leucocitos (Brannstrom
y Enskog, 2002).
La secrecin preovulatoria de LH estimula la liberacin de ciclooxigenesa-2 (COX-2),
prostaglandina endoperoxido-sintasa-2 (PGS-2), y progesterona (P4) por las clulas de la granulosa.
La COX-2 activa las metaloproteasas -2,-9 y -13, las cuales degradan los componentes de la matriz
extracelular en el epitelio superficial del ovario, de la tnica albugnea y del colgeno localizado en el
compartimiento tecal. La COX-2 tambin cataliza la transformacin del cido araquidnico en
prostaglandina E2 (PGE2) (Richards et al., 1998; Robker et al., 2000). La PGS-2 y la P4 estimulan la
expresin de proteasas especficas (Guraya, 2000) y la secrecin de quimosinas que atraen
leucocitos desde el torrente sanguneo. En el pice folicular, la llegada y activacin de diferentes
subtipos de leucocitos (mastocitos, neutrfilos y macrfagos); interactan con las clulas
endoteliales y estimulan la secrecin del activador plasmingeno, metaloproteasas de matriz y
sustancias vasoactivas (histamina); que incrementan el flujo sanguneo. El aumento en la
permeabilidad vascular mantiene una presin intrafolicular de 20 mmHg, lo que facilita la expulsin
del complejo-cumulus ovocito (Brannstrom y Enskog, 2002).
Las clulas de la granulosa secretan el activador tisular del plasmingeno (t-PA), una serinaproteasa que convierte el plasmingeno en plasmina, en respuesta a una mayor concentracin de
PGE2. La degradacin proteoltica localizada en la zona apical del folculo es el resultado de la
expresin diferencial del receptor a PGE2 tipo 1 (EP1) en las clulas de la granulosa. Las clulas de
la granulosa localizadas en el rea apical expresan un menor nmero de receptores EP1. La
activacin del receptor EP1 estimula la secrecin del inhibidor del activador del plasmingeno tipo
9

1(PAI-1) (Harris et al., 2011). La menor expresin del EP1 en las clulas de la granulosa del pice
folicular, disminuye los efectos del PAI-1 y permite la conversin del plasmingeno a plasmina lo que
resulta en la protelisis de la matriz extracelular en esta rea (Harris et al., 2011).
Seis a nueve horas despus de la secrecin preovulatoria de LH, el fluido sanguneo
disminuye en la regin apical del folculo. En las regiones laterales del folculo aumentan los
periodos de contraccin y dilatacin de los vasos sanguneos (vasomocin). Durante la fase tarda
de la ovulacin (9-12 horas post-secrecin preovulatoria de LH), el flujo sanguneo hacia el pice del
folculo es nulo. Esta zona avascular es una regin circular (con dimetro de 200-300 m)
denominada estigma. La disminucin del flujo sanguneo en la regin apical es el resultado de la
disgregacin de la estructura folicular en esta zona o de la formacin de cogulos que impiden el
flujo sanguneo. En la superficie del estigma se presenta la formacin de un agregado celular; similar
a un cono, o la acumulacin de un material translucido (clulas y fluido folicular) que forma una masa
de aproximadamente 200 m de dimetro. La ruptura de la pared folicular ocurre de dos a tres horas
despus de los cambios observados en el pice del folculo (agregado celular o la acumulacin del
material viscoso) (Zackrisson et al., 2011). Minutos antes de que ocurra la ovulacin, la matriz
extracelular de la tnica albugnea y de la teca externa se encuentran disociadas. Un gran nmero
clulas de la granulosa se localizan en la cavidad antral, mientras que algunas se encuentran
recluidas a la base del estigma (Espey y Richards, 2006). La expulsin del complejo ovocito-cumulus
ocurre entre 2 a 12 minutos despus de la disgregacin de la pared folicular (Zackrisson et al.,
2011).
I.b

REGULACIN

NEUROENDOCRINA DE

LA

SECRECIN

PREOVULATORIA

DE

GONADOTROPINAS
La secrecin preovulatoria de gonadotropinas es estimulada por el aumento en la secrecin de
GnRH. La liberacin de GnRH es modulada por mecanismos neuroendocrinos en los que participan
hormonas de origen ovrico, adrenal, pptidos hipotalmicos y neurotransmisores liberados hacia
los somas o axones de las neuronas GnRHrgicas (Okamura et al., 2013; Radovick et al., 2012;
Smith et al., 2006a; Wolfe y Wu, 2012).

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La actividad de las neuronas GnRHrgicas determina la frecuencia y amplitud del pulso de secrecin
de LH (Fox y Smith, 1985). En la tarde del proestro, el aumento brusco en la secrecin de GnRH
dentro de los capilares fenestrados del sistema porta hipotlamo-hipofisario estimula la secrecin
preovulatoria de la LH (Miller y Takahashi, 2014).
Este aumento en la secrecin de GnRH es estimulado por el aumento en la concentracin
de estrgenos y por una seal neural originada en el ncleo supraquiasmtico (NSQ) (Levine, 1997;
Miller y Takahashi, 2014). Segn Stetson y colaboradores (1978) la secrecin preovulatoria de LH es
regulada por un oscilador central que estimula la liberacin cclica de LH durante una ventana
temporal especfica, mientras que los estrgenos tendran un papel permisivo en el aumento de la
secrecin de GnRH (Everett y Sawyer, 1950; Stetson et al., 1978).
La existencia de una seal neural infradiana, que regula la secrecin preovulatoria de LH, ha
sido evidenciada por los efectos de la inyeccin de barbitricos en el da del proestro a diferentes
horas del da. Se ha mostrado que la inyeccin de ste frmaco entre las 13:30 y 14:30 h provoca el
retraso de la secrecin preovulatoria de LH por 24 horas (Everett y Sawyer, 1950; Stetson et al.,
1981).
Las neuronas del NSQ establecen conexiones mono y multisinpticas con las neuronas
GnRHrgicas localizadas en el rea preptica (POA) medial (mPOA). Fibras de naturaleza VIPrgica
median la comunicacin monosinptica entre el NSQ y neuronas GnRHrgicas localizadas en POA,
en el rea hipotalmica anterior, el rgano vascular de la lmina terminal y en la regin media de la
banda diagonal de Broca (Mahoney y Smale, 2005). Las neuronas GnRHrgicas que expresan c-Fos
durante la secrecin preovulatoria de LH, son inervadas por clulas del NSQ inmunoreactivas a VIP.
Estos resultados sugieren que el VIP acta como una seal circdica que regula la secrecin de
GnRH (van der Beek et al., 1994) en presencia de E2 (Christian y Moenter, 2008).
El NSQ tambin secreta vasopresina (AVP). Neuronas secretoras de AVP se proyectan
hacia las neuronas GnRHrgicas localizadas en el ncleo anteroventral periventricular (AVPV) y en
la regin mPOA. En presencia de E2 la secrecin de GnRH por neuronas localizadas en POA y la
secrecin de AVP por las neuronas del NSQ, es sinrgica. Por ello, los autores sugieren que en
presencia de E2, la AVP proveniente del NSQ estimula el aumento en la secrecin de GnRH
(Funabashi et al., 2000). En AVPV se ha observado la presencia del receptor 1 a AVP (V 1a). En el
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animal con ovariectoma bilateral, la expresin del receptor V1a en AVPV es estimulada con la
inyeccin de benzoato de estradiol (Kalamatianos et al., 2004).
Las neuronas del ncleo AVPV secretan kisspeptina (Colledge, 2008; Christian y Moenter,
2010). En este ncleo hay neuronas inmureactivas a somatostatina (SS), sustancia P (SP), tirosina
hidroxilasa (TH), neurotensina (NT), hormona liberadora de la corticotropina (CRH), hormona
liberadora de la tirotropina (TRH), leucina encefalina y colescitoquinina-8 (Simerly y Swanson, 1987).
La kisspeptina est involucrada con la regulacin de la secrecin de GnRH (Khan y Kauffman, 2012;
Li et al., 2009; Okamura et al., 2013; Smith et al., 2006a).
Durante la secrecin preovulatoria de LH, las neuronas kisspeptidrgicas del AVPV, que
envan eferencias a POA, expresan c-Fos, lo que es un indicador de la activacin de dichas
neuronas (Smith et al., 2006b). La lesin del AVPV bloquea la ovulacin espontnea, induce estro
vaginal persistente y bloquea la secrecin de LH inducida por la inyeccin de P4 (Simerly y Swanson,
1987). Las neuronas del AVPV expresan receptores a P 4 (Gu y Simerly, 1994) y a estrgenos tipo
alfa (Er) y beta (Er) (Smith et al., 2005; Wolfe y Wu, 2012). En el da del proestro, las neuronas
kisspeptidrgicas del AVPV y PVN, son activadas por el efecto de feedback positivo inducido por el
E2 (Khan y Kauffman, 2012; Smith et al., 2005).
La liberacin de kisspeptina sobre el soma de neuronas localizadas en mPOA, estimula la
secrecin de GnRH. La unin a su receptor de membrana, el GPR54 (Colledge, 2008; Dungan et al.,
2007) activa la va de sealizacin de la fosfolipasa C y estimula el aumento intracelular de inositol
trifosfato (IP3) y Ca2+, los que activan la cinasa reguladora de la seal extracelular (ERK 1/2) y la va
de MAP p38 (Colledge, 2008; Novaira et al., 2009), y estimulan el aumento en la concentracin del
del RNAm de la GnRH (Novaira et al., 2009).
La estimulacin del Er en la neurona GnRHrgica estimula la hiperpolarizacin de la
neurona, as como un aumento en la concentracin de la protena de unin al elemento de respuesta
al AMPc (CREB) fosforilada, aumento en las oscilaciones de Ca 2+ y corrientes de potasio (Radovick
et al., 2012) y en una mayor tasa de transcripcin de GnRH. La expresin del Er en la neurona
GnRHrgica es controversial. Sin embargo, en la rata adulta, se ha observado por RT-PCR la
expresin de ambos receptores a estrgenos en la neurona GnRHrgica. En estas neuronas, los
estrgenos regulan la expresin de sus propios receptores por lo que vara a lo largo del ciclo estral.
12

Durante la tarde el proestro, el 18% de las neuronas GnRHrgicas expresan Er- y Er-; en el da
del estro el 54% y en el da del Diestro el 67% de las neuronas GnRHrgicas (Hu et al., 2008).
En el AVPV, la P4 regula de manera estimulante la secrecin fsica de GnRH (Chappell y
Levine, 2000; Zanisi y Messi, 1991). El aumento en la expresin de receptores a P4 es estimulado
por los estrgenos liberados en mayor cantidad en el da del proestro. En animales OVX tratados
con E2, la inyeccin de onapistrona (ZK98299), un antagonista de los receptores a P4, a nivel de la
eminencia media, o de inhibidores de la transcripcin del receptor a P 4 en el ncleo AVPV, resulta en
el bloqueo de la secrecin de GnRH y LH. Estos resultados sugieren la participacin sinrgica de
estas hormonas en la estimulacin de la secrecin de la GnRH (Chappell y Levine, 2000).
II. CICLO ESTRAL
En los mamferos no primates, el ciclo sexual de la hembra se le denomina ciclo estral. El ciclo estral
involucra cascadas de eventos hormonales y de comportamiento que son progresivos, altamente
sincronizados y repetitivos. Los cambios peridicos (peso y distensin uterina, citologa vaginal y
comportamiento sexual) son utilizados como indicadores biolgicos de las fluctuaciones en la
liberacin de hormonas ovricas como reflejo de las variaciones en la secrecin de gonadotropinas
(Kilen y Schwartz, 1999). En la rata adulta el ciclo estral se encuentra dividido en cuatro fases
continuas: proestro, estro, metaestro (diestro-1) y anaestro (diestro-2) (Westwood 2008).
El da del proestro la concentracin plasmtica de gonadotropinas y prolactina se mantiene
basal (09:00-13:00 h). La actividad esteroidognica de los folculos ocasiona el aumento en la
concentracin de E2 (Freeman 1994). La elevada concentracin de E2 ejerce un efecto de
retroalimentacin positiva sobre la secrecin de GnRH, FSH, LH (Levine 1997) y estimula la
expresin de receptores a P4 en el hipotlamo medio basal, POA (Parsons et al., 1980) y en el AVPV
(Chappell y Levine, 2000). Por la tarde del proestro existe un aumento en la secrecin de P4 de
origen ovrico (Smith et al., 1975) y adrenal (Feder et al., 1971) el cual participa en la estimulacin
de la secrecin de GnRH, de gonadotropinas (Chappell y Levine, 2000) y el comportamiento de
lordosis, que permite la receptividad de la hembra al macho. En la vagina se observa la formacin
del estrato granuloso y de la capa mucosa superficial. Al final de esta etapa, se observa la
cornificacin de las clulas epiteliales y la descamacin de las clulas de la mucosa. En el tero se
forma el epitelio columnar, la proliferacin de las clulas epiteliales y poca o nula infiltracin de
13

clulas del sistema inmune. En lo ovarios se observa la degeneracin del cuerpo lteo y la presencia
de folculos antrales maduros (Westwood 2008).
El estro (adaptacin del latn a la palabra griega oistros, que significa picado por un tbano,
loco o frentico) (Nalbandov, 1969) es caracterizado por el periodo de deseo sexual de la hembra.
En este da del ciclo ocurre la ovulacin y comienza la formacin del cuerpo lteo a partir del folculo
postovulatorio. La concentracin de E 2, P4 y de LH (Freeman, 1994; Kilen y Schwartz) se mantienen
basales; sin embargo, la concentracin de FSH se mantiene elevada durante las primeras horas del
da del estro hasta las 13:00 o 14:00 horas de este da (Freeman, 1994; Haisenleder et al., 1990;
Kilen y Schwartz, 1999; Tbar et al., 2000). La elevada concentracin de FSH durante el proestro
tardo y el estro temprano es el resultado de la disminucin de la expresin de inhibina ovrica e
hipofisaria, estimulada por la secrecin preovulatoria de LH, de la disminucin en la expresin de
folistatina, estimulada por la mayor secrecin de P4 y corticosterona en el da del proestro y por el
aumento en la expresin de activina hipofisaria (Tbar et al., 2000). La secrecin de FSH estimula el
desarrollo folicular del siguiente ciclo (Freeman, 1994). En el epitelio vaginal se observa el
desprendimiento del epitelio cornificado. En el tero ocurre la degeneracin del epitelio glandular y la
prdida de la actividad mittica. Existe poco infiltracin leucocitaria (Westwood 2008).
En el da del diestro-1 (metaestro) las concentraciones de E2, prolactina, FSH y LH se
mantiene basales. La concentracin de P4 es mayor como resultado de la actividad esteroidognica
del cuerpo lteo (Freeman, 1994; Kilen y Schwartz, 1999). El epitelio cornificado comienza a
desprenderse por lo que en el lumen vaginal se encuentran clulas escamadas. La infiltracin de
leucocitos aumenta. En el tero se observa la degeneracin del epitelio endometrial; sin embargo
aumenta la actividad mittica (Westwood 2008).
En el da del diestro-2 (anaestro) la concentracin de prolactina, de FHS y LH se mantienen
basales (Freeman, 1994; Kilen y Schwartz, 1999). En el ovario, ambas gonadotropinas estimulan el
crecimiento folicular y la secrecin de E2, mientras que la LH estimula la regresin del cuerpo lteo,
lo que ocasiona la disminucin en la concentracin de P4 en la circulacin perifrica y en la vena
ovrica (Smith et al., 1975). En la vagina se observa la disminucin de la infiltracin leucocitaria y el
aumento en la actividad mittica de las clulas epiteliales. En el frotis vaginal es posible identificar la
presencia de leucocitos, clulas nucleadas basfilas y ocasionalmente clulas vacuoladas. Los
14

cuernos uterinos son pequeos y carecen de vasculatura prominente, el epitelio glandular se

encuentra inactivo (Westwood 2008).
III. GLNDULAS ADRENALES
Las glndulas adrenales secretan hormonas esteroides y catecolaminas en respuesta a estmulos
endocrinos o neurales. La presencia de dos tejidos funcional y embriolgicamente distintos
presentes en la glndula, que incluyen a la corteza adrenal de origen mesodrmico y a la mdula
adrenal, de origen ectodrmico, confieren a la glndula adrenal la capacidad de sntesis de
hormonas esteroides y catecolaminas (Rosol et al., 2001; Sadler, 2012).
El origen embriolgico de la corteza y mdula adrenal, determina el tipo de estmulo
endocrino o neural, necesario en la regulacin de la secrecin de hormonas. En la corteza adrenal,
la secrecin de corticosteroides es regulada por vas endocrinas y neurales. En la regin medular; la
secrecin de catecolaminas, met-encefalina, SP, NT, neuropptido Y (NPY) y cromogranina A es
estimulada por la liberacin de neurotransmisores desde los botones terminales de las fibras
nerviosas pre y post-ganglionares que inervan esta regin (Raum, 2005; Rosol et al., 2001).
Con base en sus funciones biolgicas, los esteroides adrenales son clasificados en tres
grupos: (a) Los glucocorticoides estimulan la gluconeognesis a partir de la inhibicin de la actividad
de la insulina, el catabolismo de protenas en diferentes tejidos y la movilizacin de cidos grasos de
los depsitos lipdicos. Son sintetizados principalmente en la zona fascicular. (b) Los
mineralocorticoides (aldosterona y desoxicorticosterona [DOCA]), son sintetizados en la zona
glomerulosa y la aldosterona es el esteroide ms representativo del grupo. Estas hormonas regulan
el volumen del lquido extracelular y, en consecuencia el volumen sanguneo. En condiciones de
baja ingesta de agua y electrolitos, la aldosterona estimula la reabsorcin de sodio (y agua) en la
regin terminal del tubo contorneado distal de la nefrona, y la excrecin de potasio e iones H+, lo que
resulta en aumento en el volumen sanguneo y la presin osmtica (Harris y Donovan, 1961). (c) La
P4 y los andrgenos (DHEA, DHEA sulfatada [DHEAS] y testosterona) son sintetizados en la zona
reticular de la corteza adrenal (Harris y Donovan, 1961). La DHEA y la DHEAS poseen baja actividad
biolgica; sin embargo, en los folculos pilosos, el folculo del vello genital y en la prstata los
andrgenos adrenales son precursores de la testosterona (Lavoie y King, 2009; Rege y Rainey,

15

2012). En la rata, la zona reticular no expresa la enzima P450c17, por lo que no existe sntesis de
andrgenos en ella (Lavoie y King, 2009; Rege y Rainey, 2012).
La liberacin de catecolaminas (adrenalina y NA) por las clulas de la mdula adrenal, es
estimulada por la liberacin de acetilcolina (AChE) desde las terminales axnicas de los nervios
esplcnicos. El 80% de los productos de secrecin de la mdula adrenal corresponde a adrenalina;
sin embargo, la respuesta fisiolgica depende de la sensibilidad del receptor a las catecolaminas y
de la concentracin de stas en el sito de expresin del receptor (Harris y Donovan, 1961; Raum,
2005).
La dilatacin del msculo liso bronquial, la estimulacin de la liplisis y la frecuencia y fuerza
de contraccin del miocardio, son respuestas fisiolgicas mediadas por la estimulacin de los
receptores -adrenrgicos. En las clulas endoteliales, la activacin de estos receptores estimula la
vasoconstriccin y la inhibicin de la secrecin de insulina y glucagn (Raum, 2005).
III.a REGULACIN DE LAS FUNCIONES DE LA GLNDULA ADRENAL
La secrecin de hormonas esteroides y de catecolaminas es regulada por vas de sealizacin
neuroendocrinas (Gerendai et al., 2009). En condiciones basales, el ritmo de secrecin de
glucocorticoides es circdico. En animales diurnos, el inicio de la secrecin de cortisol comienza al
trmino de la fase de reposo, en respuesta al aumento de la demanda metablica de la fase de
actividad. En animales nocturnos, como la rata, la secrecin de corticosterona comienza al final del
periodo de luz, antes del inicio de la fase de actividad (Sarabdjitsingh et al., 2012).
La variacin diurna en la actividad de la corteza adrenal es el resultado de: 1) la variacin en
la actividad neural simptica preganglionar, la cual regula la secrecin de catecolaminas y
neuropptidos por clulas cromafines y la actividad de las neuronas postganglionares que inervan a
la adrenal, 2) la variacin en la actividad de las neuronas de la regin autnoma del PVN, las cuales
se proyectan hacia las neuronas preganglionares simpticas que inervan a la adrenal y 3) de la
variacin en la actividad de las neuronas que se proyectan desde el NSQ hacia la regin autnoma
del NPV.

16

El NSQ regula la actividad adrenal por vas multisinpticas que incluyen a neuronas
catecolaminrgicas de la regin autnoma del PVN, de la columna intermediolateral (IML) del cordn
espinal; a nivel T7-T11 (Flatmark, 2000; Raum, 2005; Toth et al., 1997), y neuronas simpticas que
originan a los nervios esplcnicos (Aguilera y Liu, 2012). Los nervios esplcnicos regulan la
secrecin circdica de glucocorticoides y la sensibilidad de las clulas adrenocorticales a la ACTH.
En los animales con actividad nocturna, durante la fase de luz o inactividad, los nervios esplcnicos
inhiben la sensibilidad de las clulas adrenocorticales a la ACTH. Unas horas antes del inicio y
durante la fase de actividad (fase de oscuridad) los nervios esplcnicos estimulan la sensibilidad de
la clulas adrenocorticales a la ACTH (Engeland y Arnhold, 2005).
En la rata, el aumento en la concentracin de corticosterona que precede al inicio de la fase
de oscuridad, es estimulada por la secrecin de VIP desde el NSQ hacia las neuronas de la zona
subparaventricular, una regin que se extiende de manera dorsal y caudal desde el borde dorsal del
NSQ hacia el NPV y ncleo dorsomedial. El 50% de las neuronas de esta zona reciben aferencias
GABArgicas. La liberacin del VIP bloquea los efectos de GABA, estimula la excitabilidad de la
membrana celular, la actividad catecolaminrgica en la regin autnoma del PVN y la transcripcin y
liberacin de CRH por las neuronas localizadas en la regin mdPVN (Engeland y Arnhold, 2005;
Hermes et al., 2009).
La participacin del NSQ sobre la actividad de las neuronas de la mdPVN, no ha sido bien
dilucidada. La lesin de la regin mdPVN modifica el ritmo circdico de secrecin de ACTH
(Engeland y Arnhold, 2005). Estudios con inmunohistoqumica, muestran que el NSQ enva
proyecciones VIPrgicas monosinpticas a la regin mdPVN (Teclemariam-Mesbah et al., 1997).
Las neuronas de esta regin expresan receptores al pptido activador del adenilato ciclasa de la
adenohipfisis (PACAP). La unin de VIP al receptor PACAP estimula la transcripcin de CRH,
mientras que glutamato y NA estimulan la liberacin de CRH en la eminencia media (Aguilera y Liu,
2012).
En los corticotropos, la CRH activa la va de sealizacin del adenilato ciclasa. El aumento
en la concentracin de AMPc, estimula la activacin del CREB y promueve la transcripcin de proopiomelanocortina (POMC); molcula precursora de la ACTH, la apertura de canales de calcio

17

dependientes de voltaje tipo L y N, y la liberacin de ACTH y -endorfina a la circulacin perifrica

(Hauger y Dautzenberg, 2000).
El aumento en la concentracin plasmtica de ACTH, por la inyeccin de ACTH o por
induccin de estrs, estimula la deplecin del cido ascrbico en la glndula adrenal de 15 a 30
minutos despus de la estimulacin, disminucin en la concentracin de colesterol adrenal, que
refleja el aumento en la biosntesis y liberacin de hormonas esteroides (glucocorticoides),
acompaado de aumento en el flujo sanguneo de la glndula adrenal (Harris y Donovan, 1961).
Los glucocorticoides liberados al torrente sanguneo ejercen un efecto de retroalimentacin
inhibitoria en la actividad del eje hipotlamo-hipfisis, que incluye la inhibicin de la transcripcin de
POMC, inhibicin de la secrecin de ACTH y CRH, y disminucin en la disponibilidad del receptor a
CRH en los corticotropos (Aguilera y Liu, 2012; Hauger y Dautzenberg, 2000).
III.b REGULACIN DE LA ACTIVIDAD ADRENAL DURANTE EL ESTRS
La exposicin a factores aversivos (emocionales o fsicos), estimula la activacin de dos sistemas
neuroendocrinos que incluyen al eje hipotlamo-hipfisis-adrenal y al sistema simpato-adrenrgico.
Ambos regulan la expresin de respuestas fisiolgicas y de comportamiento que aumenten las
posibilidades de supervivencia y, en caso de ser necesario, la adaptacin del individuo a dichas
condiciones (Engelmann et al., 2004).
El estrs se define como un estado de alteracin del equilibrio homeosttico del cuerpo
(Ferin, 2006). El tiempo de exposicin a los factores estresantes y la respuesta fisiolgica de los
individuos, determina la participacin mayoritaria de alguno de los sistemas neuroendocrinos que
regulan la respuesta al estrs.
La exposicin a un estresor activa a la glndula adrenal por dos vas lo cual va a depender
del tipo de estresor y la de la duracin del mismo. La activacin del sistema simpato-adrenrgico
ocurre durante el desarrollo de estrategias de afrontamiento activas que implica una reaccin
especfica de comportamiento (huida o lucha), precedida por una respuesta de comportamiento
inmediata (susto o congelamiento freezing). Las fibras simpticas que inervan a la mdula adrenal
estimulan la secrecin de adrenalina lo que resulta en el aumento de la presin sangunea, la
18

frecuencia cardiaca y la movilizacin de glucosa desde el hgado (Harris y Donovan, 1961) hacia
tejidos como cerebro, corazn y msculos (Breen y Karsch, 2006). Una vez finalizado el estmulo
estresor, la actividad del sistema simpato-adrenrgico retorna a su estado basal gracias a la
activacin del sistema parasimptico, el cual antagoniza los efectos de la actividad simptica
(Porges, 1995).
Las estrategias de afrontamiento pasivas se asocian con la activacin prolongada del eje
hipotlamo-hipfisis-adrenal. Eventos aversivos no controlados y prologados sostienen la activacin
de ste eje. Los cambios hormonales ocasionan la redireccin adaptativa de la energa (direccin de
oxgeno y nutrientes hacia el cerebro, inhibicin del crecimiento o contencin de la respuesta
inflamatoria) y de comportamiento (supresin de la alimentacin y del comportamiento reproductor)
(Engelmann et al., 2004).
Si la exposicin a los factores aversivos es prolongada, y la respuesta del individuo
inadecuada, la hipersecrecin de hormonas adrenales estimula el desarrollo de patologas asociadas
con el estrs (ansiedad, depresin, fallo en el sistema inmune y en la actividad del eje reproductor)
(Pacak y Palkovits, 2001; Timmermans et al., 2013).
La secrecin de glucocorticoides depende de la actividad del eje hipotlamo-hipfisisadrenal (Aguilera y Liu, 2012). El aumento en la concentracin plasmtica de glucocorticoides ocurre
aproximadamente 10 minutos despus de la exposicin al estresor (Ulrich-Lai y Herman, 2009). La
activacin de vas neurales aferentes al PVN (catelaminrgicas o serotoninrgicas) estimula la
liberacin de CRH al sistema portal, lo que resulta en la liberacin de ACTH a la circulacin
perifrica. El PVN recibe inervacin de neuronas catecolaminrgicas localizadas en el ncleo del
tracto solitario (NTS) y en la mdula ventrolateral. El papel central de las catecolaminas en la
regulacin de la actividad del eje hipotlamo-hipfisis-adrenal es de tipo estimulante (Cunningham et
al., 1990). La inyeccin intracerebroventricular de adrenalina estimula la liberacin de ACTH
(Szafarczyk et al., 1987). La activacin del receptor adrenrgico 1, estimula la transcripcin gnica
y liberacin de CRH. Segn Daftary y colaboradores (2000) las neuronas noradrenrgicas del tallo
cerebral (A2/A6) modulan de manera diferencial la actividad de las neuronas parvocelulares del
NPV. La estimulacin de las neuronas parvocelulares del PVN con NA ocasiona el aumento en la
frecuencia de los potenciales post-sinpticos exitatorios en el 36% de las neuronas parvocelulares.
Este efecto es bloqueado por prazosin, un antagonista selectivo de los receptores 1-adrenrgicos y
19

por antagonistas glutamatrgicos. La estimulacin con tetradotoxina inhibe la liberacin de glutamato

estimulada por NA, lo cual sugiere que la estimulacin ejercida por la adrenalina en la secrecin de
CRH, es mediada por interneuronas glutamatrgicas. En el 14% de las neuronas parvocelulares, la
estimulacin con NA result en la hiperpolarizacin de las neuronas, efecto que fue bloqueado por
propanolol y timolol, antagonistas selectivos de los receptores -adrenrgicos, pero no por
tetradotoxina. Por ello, los autores sugieren que en el PVN existen dos subpoblaciones de neuronas
parvocelulares: neuronas que expresan receptores -adrenrgicos, cuya actividad es modulada de
manera inhibitoria y directa por las neuronas noradrenrgicas, y neuronas cuya actividad es regulada
de manera estimulante por neuronas noradrenrgicas A2/A6 y medida por interneuronas
glutamatrgicas (Daftary et al., 2000).
Las neuronas parvocelulares del PVN reciben inervacin serotoninrgica desde el ncleo
medial y dorsal del rafe. Las neuronas del PVN expresan los receptores a serotonina 5HT1A y
5HT2A (Aguilera y Liu, 2012; Ulrich-Lai y Herman, 2009). Animales expuestos a estrs inmunolgico,
por la inyeccin de endotoxinas, y deplecin de serotonina, por inyeccin de para-clorofenilalanina,
inhibidor irreversible de la triptfano-5-hidroxilasa, resulta en la disminucin de clulas
inmunoreactivas a c-Fos, menor tasa de transcripcin de la CRH en las neuronas parvocelulares del
PVN y en una menor concentracin plasmtica de corticosterona. Por ello, se ha sugerido que el
sistema serotoninrgico participa de manera estimulante en la respuesta al estrs (Laflamme et al.,
1999).
III.c INERVACIN DE LA GLNDULA ADRENAL
La secrecin de hormonas esteroides, de catecolaminas, la proliferacin celular, la velocidad del flujo
sanguneo y la respuesta de las clulas adrenocorticales a la ACTH es modulada por la inervacin
que recibe la glndula (Toth et al., 1997; Whitworth et al., 2003).
La glndula adrenal es inervada por microganglios que contienen neuronas bipolares y
multipolares, localizados en las regiones subcpsular, cortical y medular (inervacin intrnseca).
Estas neuronas son inmunoreactivas a AChE, NPY, VIP, met-encefalina y leu-encefalina. La
actividad de estos ganglios es regulada por los nervios esplcnicos. La inervacin extrnseca es
aportada por fibras nerviosas que arriban a la glndula por medio del nervio vago, los nervios
20

esplcnicos y por la vasculatura adrenal (Figura 1) (Parker et al., 1993; Ulrich-Lai y Engeland, 2005,
Dagerlind et al., 1995).
En humanos, aves y anfibios, la AChE estimula la secrecin de aldosterona y cortisol. En la
glndula adrenal de humano, cerdo y rata, el VIP estimula la secrecin de glucocorticoides y
mineralocorticoides (Delarue et al., 2001). En la rata, el bloqueo de los receptores de ACTH por la
inyeccin de antagonistas, inhibe la estimulacin mediada por VIP sobre la secrecin de
mineralocorticoides, por lo que se sugiere que los efectos del VIP dependen de la estimulacin por
ACTH (Mazzocchi et al., 1998).
La corteza y mdula adrenal son inervadas por fibras positivas a NPY. La inyeccin de 150
g/kg de NPY estimula la actividad de las enzimas que participan en la sntesis de aldosterona (11hidroxilasa y 18-hidroxilasa), lo que estimula el aumento en la secrecin de esta hormona
(Mazzocchi y Nussdorfer, 1987). El cultivo de tejido capsular con NPY, ocasiona la estimulacin de
la secrecin de catecolaminas por islotes de clulas cromafines localizados en el tejido conectivo de
la cpsula. La inyeccin de antagonistas a receptores -adrenrgicos atena la estimulacin de la
secrecin de aldosterona inducida por NPY. Por ello, se sugiere que los efectos del NPY en la
estimulacin de la secrecin de aldosterona son mediados por la liberacin de catecolaminas
(Renshaw et al., 2000).
El soma de las neuronas que originan a los nervios esplcnicos se localiza en la IML, en el
ncleo intercalado y en el funculo lateral del cordn espinal a nivel de los segmentos medulares T4T12 (Parker et al., 1993). La mdula adrenal recibe del 50-70% de las fibras que se proyectan por
medio de los nervios esplcnicos. Los nervios esplcnicos proveen inervacin aferente e inervacin
preganglionar simptica, mientras que la inervacin simptica postganglionar entra a la adrenal por
la vasculatura (Ulrich-Lai y Engeland, 2005). La actividad de las neuronas simpticas
preganglionares es regulada por el ncleo caudal del rafe, la mdula ventromedial, ventrolateral
rostral, clulas del grupo A5 y por el PVN.
En la glndula adrenal, el 50% de las fibras que la inervan son de naturaleza noradrenrgica.
Estas fibras se proyectan desde el ganglio celiaco y suprarrenal e inervan la regin subcapsular y la
regin cortical. La inervacin parasimptica que recibe la glndula adrenal es aportada por el nervio
vago (Mravec, 2005). Algunas fibras vagales se proyectan desde el ncleo motor dorsal del vago y
21

ganglio nodoso hasta los ganglios perifricos que inervan a la adrenal (ganglio celaco y suprarrenal)
(Toth et al., 1997; Whitworth et al., 2003).
La inervacin aferente de la glndula adrenal se origina en el ganglio de la raz dorsal (T7T11) y en el ganglio sensorial vagal (Toth et al., 1997). Estas fibras son inmunoreactivas a la SP, el
pptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP), taquininas, galanina y PACAP (Mravec,
2005; Parker et al., 1993; Whitworth et al., 2003). Las fibras aferentes y eferentes participan en los
mecanismos que regulan de manera estimulante el crecimiento compensatorio adrenal (Ulrich-Lai et
al., 2002).
La participacin del nervio vago en la regulacin de las funciones adrenales no ha sido
dilucidada. El estudio individual de los neurotransmisores y neuropptidos transportados va nervio
vago ha sugerido su participacin en la regulacin de la secrecin de corticosteroides, catecolaminas
y en la proliferacin celular (Dallman et al., 1977; Delarue et al., 2001). La P4 de origen adrenal
participa de manera estimulante en la induccin de la secrecin preovulatoria de LH (Putnam, 1991).
Segn la informacin de la que disponemos, a la fecha no existen estudios donde se analice la
participacin del nervio vago en la regulacin de la secrecin de P4, s esta participacin vara en
funcin de la hora y del da del ciclo estral; sin embargo, es posible que participe en la modulacin
de la respuesta de las clulas adrenocorticales a la ACTH.

22

Figura 1. Inervacin de la glndula adrenal. La glndula adrenal es inervada por fibras que se originan en neuronas
ganglionares (CG) localizadas en la regin subcortical, cortical y medular. Dichas neuronas envan proyecciones hacia la
corteza donde modulan la actividad de las clulas adrenocorticales. La inervacin extrnseca se origina a partir de fibras
postganglionares simpticas que se proyectan desde los ganglios simpticos (GS) y que inervan la corteza y a las
clulas cromafines de la mdula adrenal (CC) y a las CG (las cuales se proyectan de regreso a los nervios esplcnicos).
La inervacin preganglionar proviene de las neuronas simpticas preganglionares (NSP) localizadas en la columna
intermediolateral del cordn espinal a nivel T4-T12 y que se proyectan a la glndula va nervios esplcnicos. El nervio
vago provee la inervacin de tipo parasimptica, que se origina en el ganglio nodoso (GN) y el ncleo motor dorsal del
vago. La inervacin sensorial lleva informacin hacia neuronas localizadas en el ganglio de la raz dorsal. Algunos
axones ascendentes (AA) de las clulas ganglionares se proyectan hacia los nervios esplcnicos, por lo que es posible
que participen en la regulacin la actividad de dichos nervios. Tomada y modificada de Mravec, 2005.

IV. VINCULACIN DE LAS FUNCIONES REPRODUCTORAS CON LA ACTIVIDAD DEL EJE

HIPOTLAMO-HIPFISIS-ADRENAL
La existencia de una interaccin funcional entre el eje hipotlamo-hipfisis-ovario y el eje
hipotlamo-hipfisis-adrenal ha sido descrita por varios autores (Chrousos et al., 1998; Gerendai et
al., 2009; Magiakou et al., 1997; Toth et al., 2008; Whirledge y Cidlowski, 2010). Estudios realizados
23

con la inoculacin de virus neurotrpicos dentro de la glndula adrenal y ovario, muestran que hay
neuronas localizadas en la mdula ventrolateral, NTS, ncleo caudal del rafe, clulas
noradrenrgicas del grupo A5 y NPV que reciben informacin nerviosa de las adrenales y los ovarios
(Toth et al., 2008).
Los glucocorticoides son los efectores finales de la va humoral del eje hipotlamo-hipfisisadrenal. Los efectos del aumento de la concentracin plasmtica de los glucocorticoides sobre la
secrecin de gonadotropinas dependen en mucho del modelo experimental que se use para su
estudio. Segn Mahesh y Brann (1998) los efectos estimulantes o inhibitorios de la activacin del eje
hipotlamo-hipfisis-adrenal dependen de dos variables: 1) del tiempo de exposicin al estresor o al
aumento endgeno o exgeno de ACTH, de corticosteroides o ambos, puesto que la exposicin
prolongada a estos factores ocasiona la supresin de la secrecin de gonadotropinas, mientras que
la exposicin aguda tiene un efecto de tipo estimulante y 2) de la estimulacin previa con
estrgenos, la cual es esencial para ejercer un efecto estimulante sobre la secrecin de
gonadotropinas (Mahesh y Brann, 1998).
Los glucocorticoides estimulan la secrecin preovulatoria de FSH y LH (Mahesh y Brann,
1992) y modulan de manera estimulante la respuesta del ovario a las gonadotropinas (Mandl, 1954).
En la rata adulta la adrenalectoma ocasiona la disminucin en el nmero de folculos antrales, el
peso de los ovarios y aumento el ndice de atresia folicular. La estimulacin con gonadotropina del
suero de la yegua preada (PMSG, por sus siglas en ingls) en animales con adrenalectoma no
modifica el peso de los ovarios ni la dinmica del compartimiento folicular; sin embargo, la
estimulacin con cortisona restablece estos parmetros. En la rata pber el efecto de la inyeccin de
hCG sobre el peso de los ovarios y nmero de folculos en desarrollo es bloqueado por la extirpacin
de las glndulas adrenales y restablecido por la estimulacin con cortisona. Por ello, la autora
sugiere que la cortisona modula de manera estimulante la respuesta del ovario a las gonadotropinas
(Mandl, 1954).
En el tejido ovrico los glucocorticoides modulan de manera inhibitoria la respuesta
inflamatoria del tejido ovrico durante la ovulacin (Hillier y Tetsuka, 1998; Michael et al., 2003) por
sus efectos inhibitorios sobre la expresin de la COX-2 y fofolipasa A, enzimas limitantes en la
sntesis de prostaglandinas (Goppelt-Struebe, 1997). Estos resultados nos sugieren que las

24

adrenales participan de manera estimulante en la regulacin de la actividad del eje hipotlamohipfisis-ovario.

En la rata ovariectomizada estimulada previamente con estrgenos, la inyeccin de un
corticosteroide sinttico (triamcinolona acetonida) o de un corticoide natural (deoxicorticosterona)
estimula la secrecin de gonadotropinas, efecto que se asemeja a la secrecin preovulatoria de FSH
y LH estimulada por la inyeccin de P4 (Brann et al., 1990). Los corticosteroides estimulan de
manera preferencial la secrecin de FSH por sus efectos inhibitorios sobre la transcripcin de la
inhibina (Tbar et al., 2000; Tohei y Kogo, 1999), folistatina (Tbar et al., 2000) y por la estimulacin
de la transcripcin de la subunidad de la FSH (McAndrews et al., 1994). Esto explicara los efectos
inhibitorios de la adrenalectoma bilateral sobre el desarrollo folicular y la ovulacin (Mahesh y
Brann, 1992; Peppler y Jacobs, 1976; Pimentel, 2011; Velasco, 2007).
En la rata de 27 das de edad, la inyeccin subcutnea de un glucocorticoide sinttico
(dexametasona) aumenta la respuesta ovulatoria cuando los animales son estimulados
secuencialmente con gonadotropinas. Los autores sugieren que los glucocorticoides estimulan el
desarrollo folicular por medio de los efectos mediados por la prolactina o por la inhibicin de la
expresin de factores atretognicos durante el desarrollo folicular (Rockwell y Koos, 2009).
En el ovario la actividad biolgica de los glucocorticoides es regulada por la actividad
enzimtica 11-hidroxiesteroide deshidrogenasa (11-HSD). La isoforma 1 (11-HSD1) promueve la
activacin de los glucocorticoides biolgicamente inactivos a cortisol o corticosterona. La isoforma 2
(11-HSD2) inactiva a los glucocorticoides y los transforma en cortisona o 11-dehidrocorticosterona
(Michael et al., 2003).
La 11-HSD1 y su RNAm se expresan en una mayor concentracin en los ovocitos de los
folculos preovulatorios. La transcripcin del RNAm que codifica a esta enzima es inhibida durante la
disrupcin de la meiosis y durante la segunda divisin meitica del embrin de dos clulas. Por ello
se sugiere que la corticosterona participa de manera estimulante en la maduracin meitica del
ovocito (Benediktsson et al., 1992).
La exposicin a factores aversivos o estresantes (fsicos, inmunolgicos o fisiolgicos)
durante periodos de evaluacin crnicos o agudos (Whirledge y Cidlowski, 2010) provoca el
aumento en la concentracin de glucocorticoides, el cual se asocia con la supresin de las funciones
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reproductoras (Breen et al., 2012; Chrousos et al., 1998; Whirledge y Cidlowski, 2010). La inyeccin
de glucocorticoides o la estimulacin de la secrecin endgena por exposicin a estrs ocasionan la
disminucin en la concentracin de gonadotropinas (Baldwin et al., 1974; Dubey y Plant, 1985;
Johnson et al., 1982; Suter y Schwartz, 1985). A nivel hipotalmico los glucocorticoides inhiben la
actividad de las neuronas GnRHrgicas, por medio de la estimulacin de la expresin del ortlogo de
la hormona inhibidora de las gonadotropinas (GnIH, por sus siglas en ingls) (Kirby et al., 2009). La
GnIH hiperpolariza las neuronas GnRHrgicas localizadas en el ncleo dorsomedial del hipotlamo y
POA y a nivel hipofisario, inhibe la respuesta del gonadotropo a la GnRH (Kirby et al., 2009) y la
transcripcin de la subunidad de la LH (LH) (Breen et al., 2012). Los efectos de los
glucocorticoides en el hipotlamo y la hipfisis son mediados por la expresin del receptor a
glucocorticoides tipo II (Attardi et al., 1997; Kononen et al., 1993).
En los ovarios, los glucocorticoides inhiben la secrecin de hormonas esteroides, estimulan
la apoptosis de las clulas foliculares, disminuyen la expresin del receptor a LH (Whirledge y
Cidlowski, 2010), la capacidad de unin a su ligando (Schoonmaker y Erickson G, 1983) y la
actividad de la enzima P450arom (Whirledge y Cidlowski, 2010).
El modelo del animal con adrenalectoma es utilizado en la evaluacin de la participacin de
las glndulas adrenales sobre la regulacin de las funciones reproductoras. Segn Peppler y Jacobs
(1976) la adrenalectoma bilateral disminuye el desarrollo folicular. Estudios en nuestro laboratorio
han mostrado que la P4 de origen adrenal estimula la secrecin preovulatoria de LH, la ovulacin
(Pimentel, 2011; Velasco, 2007), y la sensibilidad del ovario a las gonadotropinas (Flores et al.,
2008). Estos resultados nos sugieren la existencia de interacciones funcionales entre el eje
hipotlamo-hipfisis-ovario y los productos de secrecin de las glndulas adrenales, los cuales
participan activamente en la regulacin de las funciones ovricas.
V. PARTICIPACIN DEL NERVIO VAGO EN LA REGULACIN DE LAS FUNCIONES
REPRODUCTORAS
El nervio vago est formado por fibras motoras, parasimpticas y sensoriales. Las fibras motoras y
parasimpticas se originan en el ncleo motor dorsal del vago (NMDV) y ncleo ambiguo (Amb),
mientras que el soma de las fibras sensoriales se localiza en el ganglio superior o yugular e inferior o
nodoso (ste ltimo es tambin conocido como ganglio sensorial vagal o plexiforme). Los axones de
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las neuronas sensoriales establecen sinapsis con el NTS y con el ncleo espinal del nervio
trigmino, por lo que se ha considerado que estos dos ncleos tambin originan al nervio vago
(Martin et al., 2001). Las fibras de los nervios vago transportan alguno o algunos de los siguientes
neurotranmisores: SS, SP, VIP, NPY, CGRP, NA, gastrina y AChE (Berthoud y Powley, 1996; Dissen
y Ojeda, 1999; Gilbert et al., 1980; Ondicova y Mravec, 2010).
La inoculacin del virus de la pseudorabia en el ovario izquierdo muestra el marcaje de
neuronas localizadas en el tallo cerebral, diencfalo y en el cordn espinal. S se realiza la seccin
del nervio vago izquierdo el marcaje desaparece en el rea postrema, NTS, Amb, complejo dorsal
vagal, clulas del grupo A7, ncleo de Barrington, locus cerulus y en el hipotlamo dorsal. Por ello,
los autores sugieren que en el animal intacto los nervios vago son un va neural de comunicacin
entre los ovarios y el sistema nervioso central (Gerendai et al., 2000).
Segn Burden y Lawrence (1978) los nervios vago inervan la regin hiliar y medular del ovario. La
vagotoma subdiafragmtica es uno de los modelos utilizados para dilucidar la participacin del
nervio vago en la modulacin de la respuesta del ovario a las gonadotropinas.
El efecto de la seccin de ambos nervios vago no es la sumatoria de la seccin del vago
izquierdo ms la del derecho. As, la vagotoma bilateral, realizada en la rata adulta, provoca la
menor concentracin de LH, disrupcin de la ciclicidad estral (Allen et al., 1985; Burden et al., 1981)
y bloqueo de la induccin de la pseudopreez (Burden et al., 1981). En el animal prepber, la
vagotoma bilateral resulta en una menor concentracin de E2, mayor concentracin de andrgenos
y retraso en la edad de apertura vaginal, lo que nos sugiere que el nervio vago participa en la
regulacin de la actividad del compartimiento tecal, intersticial y posiblemente en la actividad de la
enzima aromatasa (Ojeda et al., 1983). Veinticuatro a 48 horas despus de la seccin de ambos
nervios vago realizada en el da del proestro, aumenta el nmero de folculos secundarios, los cuales
se vuelven atrsicos 96 horas despus de la ciruga (Leonard et al., 1984).
La vagotoma uni o bilateral realizada a los 24 o 28 das de edad resulta en un retraso del
inicio de la pubertad y en una menor concentracin de E2. A los 24 das de edad la vagotoma uni o
bilateral no modifican la cuota ovulatoria. A los 28 das, la vagotoma bilateral resulta en mayor
nmero de ovocitos liberados y en una menor concentracin de P4. Por ello, los autores sugieren
que la interrupcin de la inervacin ovrica afecta la regulacin de las funciones ovricas por el
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sistema nervioso central y que los efectos varan de acuerdo a la edad en la que se realiz la
denervacin vagal (Morales-Ledesma et al., 2004).
La vagotoma bilateral evaluada de 25 a 40 das despus de la ciruga ocasiona un mayor
nmero de ovocitos liberados y mayor nmero de folculos secundarios. Por ello, se sugiere que el
nervio vago modula de manera inhibitoria la respuesta del ovario a las gonadotropinas (Cruz et al.,
1986). En los animales estimulados secuencialmente con gonadotropinas, la seccin del de ambos
nervios vagos ocasiona menor nmero de ovocitos liberados (Cruz et al., 1986). Estos resultados
nos sugieren que el nervio vago modula de manera estimulante la respuesta del ovario a las
gonadotropinas exgenas.
Los efectos de la seccin unilateral del nervio vago dependen del tiempo de evolucin de los
animales y del da del ciclo estral en el que se realice la ciruga. La vagotoma derecha realizada en
el da del estro y evaluada 4 das despus de la ciruga result en mayor nmero total de ovocitos
liberados sin modificaciones en el nmero de animales ovulantes. La vagotoma izquierda provoca
menor nmero total de ovocitos liberados, sin modificaciones en la tasa de animales ovulantes. Si
los efectos de la vagotoma se evalan 20 das despus de la ciruga, la seccin derecha del nervio
vago resulta en un menor nmero de animales ovulantes. La vagotoma izquierda result en un
menor nmero de animales ovulantes y en menor nmero de ovocitos liberados por el ovario
izquierdo. Con base en estos resultados, los autores sugieren 1) que la informacin que transcurre
por el nervio vago izquierdo es diferente a la que lo hace por el nervio vago derecho, y que 2) los
efectos de la seccin unilateral del nervio vago dependen del tiempo de evolucin de los animales
(Snchez., 1986).
Segn Chvez y colaboradores (1989) los efectos de la seccin unilateral del nervio vago
sobre la ovulacin y ciclicidad estral dependen del 1) nervio vago seccionado y del 2) da del ciclo
estral en el que se realice la ciruga. La vagotoma unilateral realizada en el da del estro o diestro-1
resulta la prdida de la ciclicidad estral. La vagotoma izquierda realizada en el da del estro o
diestro-1 result en un menor nmero de ovocitos liberados por el ovario izquierdo. La vagotoma
derecha no modific la cuota ovulatoria. Los autores sugieren que durante la primera mitad del ciclo
estral (estro y diestro-1), el ovario izquierdo requiere de la presencia del nervio vago izquierdo para
mantener la respuesta ovulatoria, que el ovario izquierdo es ms sensible a las manipulaciones
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neurales que lo que lo es el derecho y que la participacin del nervio vago vara en funcin del da
del ciclo estral (Chvez et al., 1989).
En animales adultos, la adrenalectoma unilateral seguida de la seccin bilateral del nervio
vago resulta en menor nmero de animales ovulantes, efecto que es ms evidente cuando esta
ciruga se realiza en el da del diestro-2 o estro (Guzmn, 2011). Nosotros sugerimos que los efectos
de la seccin del nervio vago en el animal con adrenalectoma sobre el nmero de animales
ovulantes es el resultado de la disminucin en la secrecin de GnRH, LH, FSH, de la disminucin en
la capacidad de respuesta del folculo a las gonadotropinas o de ambas.
En este estudio se analiz la posibilidad de que la seccin del nervio vago, en animales con
adrenalectoma izquierda o derecha, modifique la capacidad de respuesta de los folculos a las
gonadotropinas.

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