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Calibracin de material volumtrico y control de

pipetas y micro pipetas en el laboratorio clnico

Interno: Hugo Espndola


Docente: T.M Claudia Araya
La Serena 21-10-14

Introduccin
Al concepto de medir se le conoce como la accin de comparar determinada
magnitud contra un patrn preestablecido. En todo proceso de comparacin existen
factores que causan valores diferentes a los anteriores. Dichas mediciones puedes
ser dispersas o muy parecidas esto puede depender del instrumento utilizado para
la medicin.
La precisin y exactitud son caractersticas de un instrumento de medicin.
La exactitud de un instrumento es el grado de aproximacin de una medida dada
por dicho instrumento comparada con el valor que se obtendra de un instrumento
mucho ms exacto. La precisin es la medida de la reproducibilidad de mediciones
consecutivas. Un instrumento de baja precisin indicara medidas muy dispersas de
una misma magnitud, mientras que un instrumento muy preciso dar mediciones
muy similares.
La repetitividad de los resultados en las mediciones es la cercana entre los
resultados de mediciones sucesivas de la misma magnitud. La repetitividad se
puede expresar en forma cuantitativa.
La reproducividad de los resultados de mediciones es la cercana entre los
resultados de las mediciones de la misma magnitud por medir.
Objetivo general: Introducir al profesional en el manejo de la calibracin del
material volumtrico (bureta, probeta, matraz) y control de pipetas y micro pipetas
del laboratorio clnico, a fin de establecerla como parte de la rutina en el mismo.
Objetivo especfico: Evaluar la precisin y exactitud de los datos generados.

Materiales
-

Balanza analtica y de precisin (previamente calibrada).

Termmetro electrnico.

Vaso precipitado de 100 y 250 ml.

1 pipeta a evaluar.

Vidrio reloj.

Agua destilada.

Propipeta.

Micropipeta a evaluar.

Puntillas.

Material de proteccin personal: guantes de ltex, bata manga larga, lentes


de seguridad, zapatos adecuados (cerrados).

Procedimientos
Control de pipetas y micro pipetas:

Calibracin de una pipeta volumtrica.


1. Controlar la temperatura de aprox. 200 ml de agua destilada a 20 C en un
vaso precipitado de 250 ml.
2. Pesar un vaso precipitado de 100 ml vaco y obtener el valor de su masa (g)
usar guantes de ltex para manipular el vaso.
3. Llenar la pipeta volumtrica por encima del enrase superior con el agua
destilada libre de gases y a temperatura de 20 C. Secar la punta por fuera
y aforar con las precauciones correspondientes. Dejar escurrir lentamente
todo el lquido hasta vaciar la pipeta sin golpearla ni soplar la ltima gota.
4. Pesar el vaso pp. de 100 ml con el agua liberada y por diferencia de peso se
calcula la masa del agua. Secar el vaso.
5. Llenar nuevamente la pipeta y verter el agua en el vaso precipitado seco.
6. Calcular la masa del agua nuevamente. Repetir el procedimiento tres veces,
obteniendo 3 determinaciones en total.
7. Determinar el volumen de la pipeta en base a la siguiente expresin:
Volumen= masa x factor; Donde: factor = 1.0029 para 20 C.
8. Calcular el volumen medio vertido a 20 C y su desviacin estndar.
9. Calcular la exactitud de la medicin y % de coeficiente de variacin
correspondiente. Comparar los resultados con la tolerancia del material.
Calibracin de micro pipetas
1. Procedimiento estandarizado para medir micro pipetas de distintos
volmenes.
2. Controlar la temperatura de aprox. 200 ml de agua destilada a 20 C en un
vaso precipitado de 250 ml.

3. Pesar un vidrio reloj vaco y obtener el valor de su masa en (gr), usar guantes
de ltex para manipular el vidrio reloj.
4. Llenar la micro pipeta que se desea calibrar con el agua destilada libre de
gases y a temperatura de 20 C del vaso pp de 250 ml. Secar la puntilla por
fuera y dispensar el agua con las precauciones correspondientes. Dejar
escurrir lentamente todo el lquido en el vidrio reloj hasta vaciar la micro
pipeta.
5. Pesar el vidrio reloj con el agua liberada y por diferencia de peso se calcula
la masa del agua. Secar el vidrio reloj.
6. Llenar nuevamente la pipeta y verter el agua en el vidrio reloj seco.
7. Calcular la masa del agua nuevamente. Repetir el procedimiento nueve
veces, obteniendo 9 determinaciones en total.
8. Registrar la temperatura del vaso pp de 250 ml que contiene el agua destilada
al finalizar las 9 determinaciones.
9. Determinar el volumen de la pipeta en base a la siguiente expresin:
Volumen= masa x factor; Donde: factor = 1.0029 para 20 C.
10. Calcular el volumen medio vertido a 20 C y su desviacin estndar.
11. Calcular la exactitud de la medicin y % de coeficiente de variacin
correspondiente. Comparar los resultados con la tolerancia del material.
Calibracin de un matraz volumtrico
1. En este caso el recipiente tiene que estar limpio y seco. Tarar matraz, tener
la precaucin de usar guantes de ltex para manipular el matraz.
2. Llenar con agua a 20 C hasta el aforo, evitando que queden gotas de agua
adheridas a la boquilla del matraz, arriba de la marca de aforo y anotar la
masa. Repetir los pasos 1 y 2, dos veces ms.
3. Determinar el volumen del matraz usando la expresin: Volumen = masa x
factor; donde factor = 1.0029 para 20 C.
4. Calcular el volumen medio a 20 C y su desviacin estndar.

5. Calcular la exactitud de la medicin y % de coeficiente de variacin.


Comparar los resultados obtenidos experimentalmente con el valor de
tolerancia o incertidumbre del material.
Calibracin de una bureta
1. Medir la temperatura del agua destilada que se va a utilizar en la calibracin,
la cual deber estar a 20 C.
2. Llenar la bureta con agua destilada y asegurarse que no tenga burbujas en
la punta y dispensar el volumen excedente hasta el valor de 0 ml
3. Verter 10 ml de agua en un vaso pp o recipiente previamente tarado.
4. Pesar el volumen dosificado y anotar la masa. Repetir la operacin de
dosificacin y pesado 3 veces.
5. Calcular el volumen medio su desviacin estndar. Calcular la exactitud de
la media y % de coeficiente de variacin.
Frmulas para realizar los clculos

Ejemplo:
Tabla 1. Resultados experimentales de pipeta volumtrica de 10 ml.
Medicion
N

Masa del
recipiente
(vaso pp.
de 100 ml
en gr)
1
50.011
2
50.011
3
50.011

Masa del
recipiente
+ agua en
gr

Masa del
agua
liberada
en gr

59.739
59.791
59.801

9.728
9.78
9.79

Volumen
a 20 C

9.756
9.808
9.81

Error %

2.44
1.92
1.9

Clculos pipeta aforada de 10 ml


Media
Se utiliz la frmula 2 para su clculo:

9.756+9.808+9.81
3

ml

Media= 9.7913 ml
Desviacin estndar
Se utiliz la frmula 3 para su clculo:
() = (

) (9.756 9.7913)2 + (9.808 9.7913)2 + (9.81 9.7913)

31

(s)= 0.0556
Exactitud
Se utiliz la frmula 4 para su clculo:
10-9.7913= 0.2087 ml
Exactitud= 0.2087 ml
% de Variacin
Se utiliz la frmula 6 para su clculo:
%Cv = (0.0556/9.7913)
%Cv= 0.5678
Incertidumbre o valor relativo
Se utiliz la frmula 7 para su clculo:

Error relativo =

(9.7569.7913)+(9.8089.7913)+(9.819.7913)
3

Error relativo=- 0.00003


Tabla 2. Resultados de los clculos para la pipeta volumtrica de 10 ml.
Desviacin
estndar
Media
% Cv
Exactitud
Errorrelativo

0,0556
9,7913
0,5678
0,2087
0,00003

Si se observa, la exactitud es la diferencia del volumen real con el volumen


obtenido por lo tanto un valor numrico menor significa que las mediciones fueron
ms exactas; el coeficiente de variacin se refiere a la comparacin de la
variabilidad entre dos grupos de datos obtenidos, por lo tanto un menor coeficiente
de variacin correspondera a datos ms precisos.

Seguir las calibraciones en los dems instrumentos en base a este ejemplo.


Se recomienda realizar las calibraciones cada 3 meses, cuando se sospeche
de un mal funcionamiento del material o se incurri en una mala
manipulacin de los instrumentos de laboratorio.

Conclusin
Se comprob que la calibracin y control son factores determinantes para
minimizar el los errores analticos, al igual que otros tipos de errores: humanos,
instrumentales, procedimientos, mtodos, etc. Por lo tanto para obtener resultados
precisos y certeros se debe conocer el correcto manejo de los instrumentos y
equipos de laboratorio.
De esta forma estaremos seguros que los resultados que estamos entregando
son los ms exactos posibles minimizando as toda fuente de error.

Bibliografa

Dharan M. Control de calidad en los laboratorios clnicos. Espaa.2002; 4650.

Anexo.
Flujograma
Calibracin de una pipeta volumtrica

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