Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.

Estrs oxidativo.
El estrs oxidativo es un
tema bastante recurrente
por su relevancia en el
contexto de la fisiopatologa.
Un tema muy importante
dentro de lo que es el estrs
oxidativo son los radicales
libres, estos, son entidades
altamente reactivas ya que
poseen un electrn no
apareado en su orbital ms
externo, por lo tanto desde
el punto de vista qumico,
estos son potentes
oxidantes, que son capaces
de oxidar tomos que estn
presentes en
macromolculas relevantes
en la fisiologa y que su alteracin redunda en un efecto fisiopatolgico.

Antecedentes histricos.

Desde el punto de vista del desarrollo de este tema, se pueden generar tres
etapas:
1) Primera etapa: En 1954 se postulaba la existencia de radicales libres en
los sistemas biolgicos, hasta ese momento solo se crea que exista en
la qumica, nadie en el contexto de la biologa hablaba de ellos. En 1956
surge la base de que estos pueden ser responsables de dao a
diferentes niveles, y este dao puede ser responsable de diferentes
patologas, pero todo esto eran solo postulados.
2) Segunda etapa: en 1969 se descubre la enzima superoxido dismutasa, y
eso fue importante porque si en un sistema biolgico, hay una enzima o
un sistema enzimtico que esta vinculado con la presencia de un radical,
quiere decir que la presencia de ese radical es muy importante para ese
organismo. Se conoca como cuprena porque tena cobre en su
estructura.
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 1

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
3) Tercera etapa: parte a finales de la dcada de los 80, donde los radicales
libres se hacen evidentes, y se descubre que estn vinculados no solo
con la fisiopatologa, sino que tambin forman parte de los sistemas de
sealizacin intracelulares, y eso cambia el paradigma negativista que
se tena de ellos.

Formacin de radicales libres.

Las fuentes de radicales libres son extremadamente diversas, partiendo

por la contaminacin ambiental, fumar, exposicin ocasional a radiacin
ionizante, luz UV, el propio metabolismo celular (cadena respiratoria) e
inflamacin, que genera muchos radicales libres.
En el ao 1984 se acua el trmino estrs oxidativo y se define como un
desequilibrio que existe entre los oxidantes y los antioxidantes en cualquier
sistema, ya sea clula, tejido, sistema, etc. Entonces el estrs oxidativo
puede ser causado por el aumento de oxidantes o la disminucin de
antioxidantes.
Dentro de los oxidantes nosotros tenemos oxidantes:
1) Intrnsecos: que vienen del propio metabolismo celular, por ejemplo las
EROs, las ERNs, las molculas oxidadas (ox-LDL).
2) Extrnsecos: que son externos, pueden venir de un pesticida (paraquat) o un
frmaco (adriamicina), y son importantes en aportar oxidantes.
Dentro de los antioxidantes nosotros tenemos:
1) Sistemas enzimticos: la superoxido dismutasa, la catalasa, la glutatin
peroxidasa.
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 2

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
2) Atrapadores de radicales: deben ser ingeridos o son productos del
metabolismo, tenemos el cido ascrbico, el selenio, GSH, flavonoides, alfatocoferol.

Oxidantes celulares.

Los oxidantes celulares estn divididos en dos grandes grupos, las especies
reactivas del oxgeno, y las especies reactivas del nitrgeno. El concepto ms
adecuado es especie reactiva.

Un elemento muy importante dentro de lo que son los radicales libres, es la

corta vida media de estas, por ejemplo el h2o2, su vida media est en los
minutos, el anin superoxido de microsegundos. Pese a ello, la reactividad de
estas molculas es tan alta, que en el corto perodo de tiempo que est activa,
es capaz de generar modificaciones importantes en las macromolculas de la
clula.

Un concepto importante en el estrs oxidativo es el estrs nitrosativo que es

la excesiva formacin de NO y ERNs derivadas del mismo. El descubrimiento
del NO rompi muchos dogmas en la biologa y marc un antes y un despus
en aquella.
Todas estas reactivos tienen un impacto importante en las macromolculas,
estos son capaces de daar al ADN, pueden causar mutaciones, desarrollan
carcinognesis, generan dao importante a membranas, peroxidan los lpidos,
pueden daar protenas, generando as una prdida de funcin de estas,
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 3

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
parcial o total, estos reactivos pueden generar rupturas en los carbohidratos,
puede degradar MEC, estas especies tambin, si estn en demasa, agotan los
sistemas de detoxificacin.
Dao a protenas.
Puede generarse por rupturas o generacin de enlaces cruzados que generan
complejos que tienen poca o ninguna funcionalidad, son capaces de oxidar a,
adems tambin se aumenta el trfico hacia el proteosoma.
Dao a cidos nucleicos.
Aqu se generan un nmero importante de lesiones y dao, se generan
rupturas de simple y doble cadena, se genera modificacin de bases lo que
genera un cambio mutacional en la secuencia de bases nitrogenadas en el
ADN, cuando esta se divide, se genera un dao en la clula hija, las bases que
se pueden generar son la 8-hidroxiguanina, productos de las EROs, y la 8nitroguanina producto de las ERNs. Tambin se pueden generar formacin de
enlaces cruzados entre ADNs, y entre ADNs y protenas.

Dao a Lpidos.
Peroxidacin de lpidos: La modificacin de los lpidos asociada al estrs
oxidativo est centrada en la peroxidacin de estos, estas son reacciones de
oxidacin de cidos grasos poliinsaturados que son abundantes en la
membrana. Esta reaccin es iniciada por el ataque de un radical libre.
Como ejemplo podemos decir al malonilaldehido, este se usaba para
cuantificar estrs oxidativo, sin embargo se dej de usar, ahora se usan los
isoprostanos.
La peroxidacin de los lpidos trae consecuencias importantes en trminos de
funcionalidad de la membrana celular como lo es la alteracin de la fluidez de
la membrana.
Dao a carbohidratos.
Este tipo de dao es importante en la inflamacin. Entre los tipos de dao a
carbohidratos existe la oxidacin de glucosa que tiene consecuencias severas y
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 4

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
la degradacin de cido hialurnico, esta molcula se encuentra en la matriz
extracelular y es muy sensible a especies reactivas, cuando es atacada, se
generan fragmentos de cido hialurnico.

Especies reactivas derivadas del oxgeno (ERO).

En la clula, se pueden producir en muchos compartimentos, algunos de ellos

son:
-El complejo NADPH oxidasa
-Citocromo P-450.
-Sistema XDH/XO.
-Cadena respiratoria.
-Lipooxigenasa y ciclooxigenasa.
-Metales de transicin (Fe+3/+2 y Cu+1/+2).
-Oxidasas y flavoprotenas.

Las mitocondrias son la fuente ms importante de O2-. Estas producen

continuamente O2- y NO. Dentro de la cadena respiratoria de la mitocondria
tenemos los complejos (1, 2, 3 y 4), estos complejos estn implicados en la
creacin de EROs, sobretodo de 02- y H202.

Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 5

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.

Otra fuente de EROs es la NADPH oxidasa, esta tiene funcin en la respuesta

inmune innata, est presente en todas las clulas fagocticas y tambin clulas
T y endoteliales. Si hay mutaciones en los genes que codifican subunidades de
NADPH oxidasa se produce la granulomatosis crnica que consta de infecciones
recurrente causadas por bacterias, dependiendo de qu gen se vea afectado
puede ser ms o menos probable la expresin de la enfermedad. En un 50-70%
de los casos, la mutacin estaba en el gen gp91 que transcribe para la
subunidad cataltica de la enzima; en un 30-40% de los casos estuvo en p47 y
en un 10% estuvo en p47, estos dos codifican para subunidades reguladoras de
la enzima.
La xantina oxidoreductasa tambin es una fuente de EROs, ya que La XO se
encarga de transformar la xantina en O2- y en cido rico. Cuando existe una
hipoxia o presencia de citocinas la XDH se transforma en XO y esta genera el
radical superxido (O2-) ms cido rico.

Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 6

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
En 1975 a 1980 se elabor y acept un mecanismo con participacin de
Fe+2/+3 para la produccin biolgica del radical hidroxilo, este sera generado
por radiacin ionizante por una va, que es la va de Fenton/Haber-Weiss.
Especies reactivas derivadas del nitrgeno (ERN).

La mayora de ellos se descubri que venan del, en ese entonces, factor

relajante derivado del endotelio, luego se descubri que este factor era xido
ntrico.
Este NO responde a las 3 isoformas de NO sintasa, estas isoformas se
nombran en base al tejido donde se clon el gen, as, existen estas tres
isoformas que son, La NOS endotelial, La NOS neuronal y la NOS inducible.

Se ha observado que cuando el xido ntrico coexista con O2-, estos se

juntaban y daban origen al peroxinitrito (ONOO-), el O2- es neutralizado
normalmente por la superxido dismutasa, pero la capacidad de unin del O2es mayor con el NO que con la SOD, debido a esto, cuando coexistan estos dos
elementos, siempre se generar ONOO-.
La NOS pueden generar aniones superxidos, que pueden ser producidos por
NOS disfuncionales o desacoplados; se constat que la baja disponibilidad del
cofactor BH4 provoca que la NOS forme O2-. La BH4 interviene en distintos
procesos celulares, entre ellos, la estabilizacin de L-arginina, el
mantenimiento de la forma redox activa del grupo hemo, la formacin del
homodmero estable de NO sintasa y el favorecimiento de la transferencia de edesde el dominio reductasa a el oxidasa. Se ha visto que en condiciones de
problemas cardiovasculares (como hipercolesterolemia, hiperglicemia,
diabetes, hipertensin, aterosclerosis e inflamacin) La NOS produce en mayor
cantidad O2- y por consiguiente produce ms ONOOEstrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 7

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
Presencia de estrs oxidativo y patologas

En el estrs oxidativo hay muchas patologas que pueden presentarse,

algunas de estas son:

Tambin despus de una obstruccin en un caso sanguneo se pueden

ocasionar daos por isquemia y reperfusin, ya que, cuando hay una isquemia,
aumenta el calcio, este provoca la activacin de proteasas Ca-dependiente,
estas proteasas realizan un corte proteoltico en la xantina deshidrogenasa,
transformndola en xantina oxidasa, esta enzima transforma la hipoxantina en
xantina y O2-. Tambin el estrs oxidativo tiene que ver en la modificacin
oxidativa de la aterosclerosis, en la cual los LDL deben oxidarse.

Debido a los diversos orgenes de los EROs y ERNs deben existir mecanismos
de defensa para contrarrestar estas especies reactivas. Debido a la
concentracin de estas especies reactivas se pueden producir una serie de
daos que pueden llevar a la carcinognesis, algunos de los daos se originan
por la va intrnseca, como la activacin de oncogenes. Otra enfermedad que se
puede generar por el estrs oxidativo es la enfermedad pulmonar obstructiva
crnica.
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 8

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
Estrs carbonlico.

Trmino acuado por lyons y Jenkins en 1997. Estrs carbonlico es un exceso

persistente, en el entorno celular, de molculas solubles que posean dos
grupos carbonilo en su estructura qumica. Los dicarbonilos en exceso pueden
reaccionar con residuos libres de lisinas y argininas, induciendo la formacin
irreversible y la acumulacin de estructuras denominadas productos avanzados
de glicacin (AGEs), estos son muy importantes en la diabetes y la neoplasia.
Estos AGEs consisten de una reaccin no enzimtica entre la glucosa y una
protena, aunque tambin se puede dar con un dicarbonilo como el glioxal (que
proviene de la oxidacin de lpidos), despus de esto de forma una base de
Schiff, se sigue con una serie de reacciones en cadena que finalmente darn
origen a los AGEs.

El estrs oxidativo y el carbonlico convergen ambos en la diabetes, el

aumento de glicemia promueve muchos eventos que ayudan al estrs
oxidativo, algunos de ellos son, el aumento de sorbitol, aumento de la
sealizacin celular por estrs, aumento de la protena kinasa C, aumento de
los AGEs y aumento del flujo de hexosamina, todo esto provoca variadas
patologas vasculares diabticas.
Los AGEs alteran dos elementos vitales en la fisiologa cardiovascular:
disminuyen la produccin de NO por el acortamiento del tiempo de vida del
ARNm de la NO sintasa y alteran la capacidad de barrera semiselectiva que
tiene el que tiene el endotelio vascular.
Tambin a nivel endotelial existe un receptor de AGEs, el RAGE, cuando este
se ve activado genera la disrupcin del complejo VE-cadherina, aumenta la
permeabilidad vascular, se ve favorecida la contraccin por medio del
aumento de vasoconstrictores (como la endotelina-1) y de la disminucin de
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 9

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
vasodilatadores (como el NO y las prostaciclinas). Tambin se activa una
cascada de seales de transduccin por medio de la activacin de NFkB, este
es un factor de transcripcin que depende del estado redox y es activado por
las EROs.

Radicales libres, amigos o enemigos?

El carcter negativo de los radicales libres depender mucho del contexto

celular en el que estos se encuentren, ya que estos cumplen un papel
importante en la sealizacin celular, estos tipos de sealizacin marcaron la
tercera etapa de los antecedentes histricos de los radicales libres, algunos de
los sistemas de sealizacin en los que actan son:

Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 10

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.

Muchas veces se suele definir el concepto estrs oxidativo como un sinnimo

de desbalance redox, y esto no es as, el desbalance redox en una
consecuencia del estrs oxidativo. El estrs oxidativo es producido por un
desbalance de oxidantes y antioxidantes y el desbalance redox es producido
por un desbalance de un pool de tioles que contiene el complejo GSH/GSSG y
grupos sulfidrilos de protenas y de un pool intracelular de NADPH/NADP+ y de
NADH/NAD+.
Para paliar estos desequilibrios nosotros tenemos los antioxidantes, estos son
sustancias que hallndose presentes a bajas concentraciones respecto a las de
un sustrato oxidable, retarda o previene la oxidacin de dicho sustrato, estas
molculas deben tener una serie de caractersticas para actuar como
antioxidantes, en primer lugar deben tener alta distribucin, esto quiere decir
que deben estar presentes en el lugar crtico y en las [ ] adecuadas, ya que
estos tienen una vida media muy corta; tambin deben ser inespecficas para
as, reaccionar con cualquier clase de radical libre; estos tambin deben ser
sintetizados en la clula o bien ser incorporados en la dieta deben ser
reciclados y no deben ser txicos si son sintticos.
Estos antioxidantes pueden ser enzimticos o no enzimticos y entre ellos se
encuentran:

Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 11

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.

Estos sistemas deben estar capacitados para responder ante seales de

estrs, y existen elementos comunes de una va clsica de respuesta al estrs,
en estos hay un transductor que censa o detecta el estrs, este transmite la
seal al sensor que recibe la seal del transductor, este sensor esta acoplado a
un factor de transcripcin el que se une a elementos de respuesta anti estrs.

Tenemos muchos tipos de estrs que son inducidos por diferentes factores,
tambin vemos que en ratones knockout con respecto al sensor, casi todos los
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 12

Biologa molecular de la clula II.

Dr. Armando Rojas Rubio.
ratones son inviables, osea que estos sistemas de defensa contra las especies
reactivas son muy importantes para la vida de estos organismos.

Un ejemplo de va clsica es el sistema Nrf/INrf2(Keap1), o tambin sistema

Nrf2. Este ciplejo es capaz de alcanzar en el ncleo, elementos de respuesta
antioxidante que estn vinculados a genes que codifican a protenas que
controlan y modulan el estrs oxidativo.

Para mantener la salud, y evitar el estrs oxidativo, debemos justamente

mantener el balance haciendo mucho ejercicio que es muy importante, porque
con el ejercicio fsico se activan muchos sistemas detoxificadores de estos
oxidantes.
Estrs oxidativo [Clase 5]

Pgina 13