INSTITUTO TECNOLOGICO DE

ACAPULCO
INGENIERIA BIOQUIMICA
MICROBIOLOGIA GENERAL

ACTIVIDAD 8
INVESTIGAR LOS ELEMENTOS
NECESARIOS PARA AISLAR,
PURIFICAR E IDENTIFICAR UNA
LEVADURA Y UN MOHO.

PROFESOR: MIGUEL ANGEL DIAZ ALDAY

ESMERALDA FIGUEROA MORENO

#CONTROL: 11320434

NDICE

TEMA

PGINA

INTRODUCCIN..

MTODOS PARA PURIFICAR, AISLAR

E IDENTIFICAR MOHOS Y LEVADURAS
OBJETIVOS, GENERALIDADES.

FUNDAMENTO, MEDIOS DE CULTIVO Y

DILUYENTES, SOLUCIONES REACTIVOS
E INDICADORES..

3-6

MATERIAL Y EQUIPO..

IMAGEN DETERMINACIN DE MOHOS Y LEVADURAS

PROCEDIMIENTO

10-11

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS...

12

INTRODUCCIN
Se denomina levadura a cualquiera de los diversos hongos microscpicos unicelulares que son importantes por su capacidad
para realizar la descomposicin mediante fermentacin de diversos cuerpos orgnicos, principalmente los azcares o hidratos
de
carbono,
produciendo
distintas
sustancias.
El moho es un hongo que se encuentra tanto al aire libre como en interiores. Existen muchas especies de mohos que son
especies microscpicas del reino fungi que crecen en formas de filamentos pluricelulares o unicelulares. Crecen mejor en
condiciones clidas y hmedas; se reproducen y propagan mediante esporas. Las esporas del moho pueden sobrevivir en
variadas condiciones ambientales, incluso en extrema sequedad, si bien sta no favorece su crecimiento normal.
La contaminacin fngica de un alimento tiene mucha importancia, no tan slo por su accin deteriorante, que pudre y malogra
materias primas y productos manufacturados, sino tambin por la capacidad de algunos hongos para sintetizar gran variedad
de micotoxinas, para provocar infecciones y, incluso, para provocar reacciones alrgicas en personas hipersensibles a los
antgenos fngicos. Por estos motivos, para conocer la calidad microbiolgica de un producto, es pertinente realizar un
recuento de hongos y levaduras. Los hongos son microorganismos eucariotas pluricelulares filamentosos, no presentan
pigmentos fotosintticos y son quimiohetertrofos aerobios estrictos. A diferencia de las plantas, presentan un bajo grado de
diferenciacin de los tejidos. Poseen pared celular, contiene quitina2 un polisacrido que le da rigidez y es responsable de su
morfologa y en ocasiones celulosa. Algunos hongos presentan cpsula, formada por polisacridos, con propiedades
inmungenas y antifagocitarias. La estructura o cuerpo vegetativo de un hongo se denomina talo3. El talo est formado por
filamentos, o hifas.
Las levaduras son hongos que crecen generalmente por gemacin, en forma de agregados sueltos de clulas independientes,
que pueden ser globosas, ovoides, cilndricas o alargadas. En algunos casos, forman cadenas de clulas alargadas
(pseudohifas), adheridas de modo suelto (blastospora), semejantes a un micelio, por lo que se les denomina pseudomicelio.
Las levaduras cuando crecen sobre medios slidos, forman colonias de aspecto caracterstico que recuerdan a las colonias
bacterianas. En casi todas las especies de inters industrial, el modo habitual de reproduccin vegetativa es por gemacin. A
diferencia de los mohos, las levaduras no pueden identificarse solamente por sus caracteres morfolgicos; se precisa la ayuda
de pruebas bioqumicas para la identificacin especfica.

MTODOS PARA PURIFICAR, AISLAR E IDENTIFICAR MOHOS Y LEVADURAS.

OBJETIVOS
Realizar adecuadamente mediante el mtodo de cuenta en placa, el nmero de mohos y levaduras viables presentes en
productos alimenticios destinados al consumo humano.
Evaluar la calidad microbiolgica de un alimento, que sea factible de estar contaminado con estos microorganismos, tomando
como referencia la NOM-111-SSA1-1994.

 Comprender el fundamento de todas las etapas del mtodo de deteccin y cuantificacin de mohos y levaduras en alimentos.

GENERALIDADES
Los hongos y las levaduras se encuentran ampliamente distribuidos en el ambiente, pueden encontrarse como flora normal de
un alimento, o como contaminantes en equipos mal sanitizados. Ciertas especies de hongos y levaduras son tiles en la
elaboracin de algunos alimentos, sin embargo tambin pueden ser causantes de la descomposicin de otros alimentos.
Debido a su crecimiento lento y a su baja competitividad, los hongos y levaduras se manifiestan en los alimentos donde el
crecimiento bacteriano es menos favorable. Estas condiciones pueden ser bajos niveles de pH, baja humedad, alto contenido
en sales o carbohidratos, baja temperatura de almacenamiento, la presencia de antibiticos, o la exposicin del alimento a la
irradiacin. Por lo tanto pueden ser un problema potencial en alimentos lcteos fermentados, frutas, bebidas de frutas,
especias, oleaginosas, granos, cereales y sus derivados y alimentos de humedad intermedia como las mermeladas, cajetas,
especias, etc.
Los hongos y levaduras pueden utilizar ciertos sustratos como pectinas, carbohidratos como polisacridos, cidos orgnicos,
protenas y lpidos. Tambin pueden causar problemas a travs de: (a) sntesis de metabolitos txicos (micotoxinas), (b)
resistencia al calor, congelamiento, antibiticos o irradiacin y (c) habilidad para alterar sustratos no favorables permitiendo el
crecimiento de bacterias patgenas. Pueden tambin causar malos olores y sabores y la decoloracin de las superficies de
alimentos. El trmino moho se suele aplicar para designar a ciertos hongos filamentosos multicelulares cuyo crecimiento en la
superficie de los alimentos se suele reconocer fcilmente por su aspecto aterciopelado o algodonoso, a veces pigmentado.
Generalmente todo alimento enmohecido se considera no apto para el consumo. La identificacin y clasificacin de los mohos
se basa en observaciones macroscpicas y microscpicas.
Hifas y micelio. El talo de los mohos est formado por una masa de filamentos ramificados, llamados hifas, llamndose
micelio al conjunto de las hifas. Las hifas pueden ser sumergidas o areas. Tambin se pueden clasificar en hifas vegetativas o
en crecimiento, las cuales se encargan de la nutricin del moho, y en hifas frtiles o hifas que producen los rganos
reproductores. Los mohos se dividen en dos grupos: septados, es decir, provistos de tabiques transversales que dividen a las
hifas, y no septados cenocticos, cuyas hifas estn formadas por cilindros sin tabiques transversales. Este tipo de hifas posee
ncleos diseminados a lo largo del cilindro y se les denomina multicelular. Determinadas estructuras del micelio o
determinados rganos ayudan a identificar a los mohos. Por ejemplo los rizoides o anclajes de los gneros Rhizopus o
Absidia, la clula basal del gnero Aspergillus y la ramificacin dicotmica, o en forma de Y, del gnero Geotrichum.
rganos o estructuras reproductoras. Los mohos se reproducen principalmente por medio de esporas asexuales. Algunos
mohos tambin producen esporas sexuales. A tales hongos se les denomina perfectos, los cuales se dividen en Oomycetes y
Zygomycetes si no son septados, o bien en Ascomycetes y Basidiomycetes si son septados, en contraposicin a los mohos
imperfectos, Fungi Imperfecti, los cuales slo poseen esporas asexuales.
Esporas asexuales. Los mohos producen gran cantidad de esporas asexuales, son pequeas, ligeras y resistentes a la
desecacin. Se diseminan fcilmente por la atmsfera para sedimentar y originar el talo de un nuevo moho. Los tres tipos
principales de esporas asexuales son: (1) conidios, (2) artrosporas u oidios y (3) esporangiosporas. Los conidios se separan, o
crecen, en determinadas hifas frtiles denominadas conidiforos y generalmente son libres, es decir, no se encuentran dentro
de ningn receptculo, en contraposicin a las esporangiosporas, las cuales se encuentran dentro de un esporangio o
receptculo, situado en el extremo de una hifa frtil, el esporangiforo. Las artrosporas se forman por fragmentacin de una
hifa. El extremo engrosado del esporangiforo se denomina columnela y adopta formas tpicas en cada una de las distintas
especies de mohos. Algunos mohos poseen conidios comprimidos uno contra otro, dispuestos en cadenas, y que nacen de
una clula especializada, el esterigma o filide situada en el extremo del conidiforo.
Propiedades fisiolgicas. En comparacin con la mayora de las levaduras y de las bacterias, la mayora de los mohos
necesitan menor cantidad de humedad disponible. Un porcentaje total de humedad por debajo del 14 al 15 por ciento en la
harina o en algunos frutos secos impedir o retardar mucho el crecimiento de los mohos. Los mohos podran considerarse
mesfilos, es decir, que son capaces de crecer bien a temperaturas normales. La temperatura ptima de la mayora se
encuentra alrededor de los 25 a 30C, aunque algunos son psicrtrofos y algunos son termfilos. Son aerobios, esto es cierto
por lo menos en los mohos que crecen en la superficie de los alimentos. Casi todos los mohos son capaces de crecer dentro
de un amplio intervalo de pH (pH comprendido entre 2 y 8.5), aunque la mayora crece mejor a pH cido. Son capaces de

utilizar muchos tipos de alimentos, que van desde sencillos a complejos. Poseen enzimas hidrolticas, y de aqu que algunos
se utilicen para la produccin industrial de las amilasas, pectinasas, proteasas y lipasas.
Algunos gneros de mohos importantes en alimentos.
Mucor. Intervienen en la alteracin de algunos alimentos y se utilizan en la fabricacin de otros. M. rouxii se utiliza para la
sacarificacin del almidn, para la maduracin de quesos y para la fabricacin de algunos alimentos orientales.
Rhizopus. La especie R. stolonifer, o moho del pan, es muy comn e interviene en la alteracin de algunos alimentos: bayas,
frutas, hortalizas, pan, etc.
Aspergillus. Los aspergilos son mohos muy abundantes. Algunas especies intervienen en las alteraciones que experimentan
los alimentos, mientras que otros son de utilidad para preparar determinados alimentos. A. niger se utiliza para la produccin
industrial de cido ctrico y glucnico y de algunas enzimas. A. flavus se utiliza para la fabricacin de ciertos alimentos
orientales y en la obtencin de enzimas. Se han reportado casi 50 especies de Aspergillus como productores de metabolitos
txicos denominados en general micotoxinas. Las de mayor importancia son: las denominadas aflatoxinas (producidas por A.
flavus, A. parasiticus y A. nomius); la ocratoxina A producida por A. ochraceus, A. carbonarius y A. niger; sterigmatocistina
producida principalmente por A. versicolor; el cido ciclopiaznico producidas por A. flavus y A. tamarii. La citrinina, patulina y
cido peniclico tambin son producidas por especies de Aspergillus, las txinas tremorgnicas son producidas por A. terreus
(territremas), A. fumigatus (fumitremorgenas) y A. clavatus (triptoquivalina). Las aflatoxinas son derivados de la
difurancumarina. Las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2 se producen en la naturaleza por los mohos ya mencionados. Las letras B y
G se refieren a los colores de flurescencia por sus nombres en ingls ( azul y verde, respectivamente) observados bajo
longitudes de onda en la regin UV, y los subndices 1 y 2 se refieren a sus patrones de separacin cromatogrficos. Las
aflatoxinas M1 y M2 se producen por la hidroxilacin de las respectivas aflatoxinas B. La aflatoxina B1 tal vez sea el
carcingeno de hgado ms potente para animales incluyendo al humano. La ocratoxina A y la citrinina afectan la funcin renal.
Las toxinas tremorgnicas afectan el sistema nervioso central.
Penicillium. Es otro gnero de mohos de frecuente incidencia y de importancia en los alimentos, P. expansum produce la
podredumbre blanda de las frutas; P. digitatum y P italicum producen la podredumbre de frutas ctricas. Las especies P.
camemberti, P. roqueforti se utilizan en la maduracin de quesos.
Levaduras y hongos levaduriformes.
El trmino levadura se refiere a aquellos hongos que generalmente no son filamentosos, sino unicelulares y de forma ovoide o
esferoide, y que se reproducen por gemacin o por fisin. Las levaduras que se encuentran en los alimentos pueden ser
benficas o perjudiciales. Las levaduras se utilizan en la elaboracin de alimentos como el pan, la cerveza, vinos, vinagre y
quesos, tambin se utilizan en la obtencin de enzimas y alimentos fermentados. Las levaduras son perjudiciales cuando
producen la alteracin del sauerkraut, de los zumos de frutas, de los jarabes, de la melaza, de la miel, de las carnes, del vino,
de la cerveza y de otros alimentos. Los caracteres morfolgicos de las levaduras se determinan mediante su observacin
microscpica. Su forma puede ser desde esfrica a ovoide, alimonada, piriforme, cilndrica, triangular e incluso alargada. La
mayora se reproducen asexualmente por gemacin multicelular o por gemacin polar. Unas pocas especies se reproducen
por fisin.
En los cultivos en placas de agar es difcil diferenciar las colonias de levaduras de las colonias bacterianas; la observacin
microscpica de los microorganismos es la nica forma segura de diferenciarlas. La mayora de las colonias jvenes de
levaduras son hmedas y algo mucosas; la mayora de las colonias son blancuzcas, aunque algunas tienen un color crema o
rosado. Son oxidativas, fermentativas, o bien su actividad metablica es a la vez de ambos tipos. La mayora de las levaduras
crecen mejor con un alto contenido de humedad. No obstante, crecen mejor que la mayora de las bacterias en sustratos que
contienen elevadas concentraciones de solutos (por ejemplo carbohidratos o cloruro de sodio), es decir son osmotolerantes.
Sin embargo la mayora de las levaduras necesitan mayor humedad que los mohos. Para la mayora de las levaduras la Aw
mnima de crecimiento oscila entre 0.88 y 0.94. El intervalo de temperaturas de crecimiento es parecido al de los mohos, con
una temperatura ptima en torno a los 25 a 30C y una temperatura mxima en torno a los 35 a 47C. Crecen mejor en
aerobiosis, aunque las especies de tipo fermentativo son capaces de crecer, aunque lentamente, en anaerobiosis. Los
Azcares son la fuente energtica ms apropiada para las levaduras, aunque las oxidativas, pueden oxidar los cidos
orgnicos y el alcohol.

Algunos gneros de importancia en alimentos son:

Schizosaccharomyces. Levaduras de este gnero se han encontrado en frutas tropicales, en la melaza y en la miel.
Saccharomyces. La especie S. cerevisiae se emplea en muchas industrias alimentarias, como en la fermentacin del pan,
fermentacin de la cerveza, fermentacin de los vinos, en la produccin de alcohol, glicerol e invertasa.
Kluyveromyces. K. marxianus (antes Saccharomyces fragilis) se utiliza en la obtencin de productos lcteos por su capacidad
de fermentar la lactosa.
Zygosaccharomyces. Las levaduras de este gnero son importantes por su capacidad para crecer en medios con elevadas
concentraciones de azcar (osmfilas), intervienen en la alteracin de la miel, jarabes y melazas, y tambin en la fermentacin
de la salsa de soya y de algunos vinos.
Pichia. Crecen en la superficie de los lquidos formando una pelcula. P. membranafaciens produce una pelcula en la
superficie de las cervezas y vinos. Debaromyces. Forman pelcula en la superficie de las salmueras. D. kloeckeri crece en la
superficie de los quesos y de los embutidos.
Hanseniaspora. Estas levaduras tienen forma de limn y crecen en los zumos de frutas. Torulopsis. Originan problemas en las
fbricas de cervezas. T. sphaerica fermenta la lactosa, alterando productos lcteos. Otras especies alteran la leche
condensada azucarada, los concentrados de zumos de frutas y los alimentos cidos.
Candida. La especie C. utilis se cultiva para la obtencin de protena unicelular para incorporarla tanto a alimentos destinados
al consumo humano como a piensos. La especie C. krusei se utiliza junto con los cultivos iniciadores de productos lcteos. C.
lipolytica produce alteracin de la mantequilla y margarina.
Brettanomyces. Producen grandes cantidades de cido e intervienen en la fermentacin de la cerveza belga de tipo lambic,
de las cervezas inglesas y de los vinos franceses.
Trichosporon. Estas levaduras crecen mejor a temperaturas bajas, encontrndose en las fbricas cerveza y en la superficie
de vacuno refrigerada.
Rhodotorula. Estas levaduras de color rojo, rosa o amarillo, pueden producir manchas en la superficie de los alimentos como
en la superficie de las carnes, o zonas de color rosado en el sauerkraut.

FUNDAMENTO
El mtodo se basa en inocular una cantidad conocida de muestra, en un medio de cultivo selectivo especfico, aprovechando
la capacidad de este grupo microbiano de utilizar como nutrientes a los polisacridos que contiene el medio. La hidrlisis de
estos compuestos se efecta por enzimas que poseen estos microorganismos. La sobrevivencia de los hongos y levaduras a
pH cidos se pone de manifiesto al inocularlos en el medio de cultivo acidificado a un pH de 3.5. As mismo, la acidificacin

permite la eliminacin de la mayora de las bacterias. Finalmente, las condiciones de aerobiosis y la incubacin a una
temperatura de 25 1 C da como resultado el crecimiento de colonias caractersticas para este tipo de microorganismos.

MEDIOS DE CULTIVO Y DILUYENTES

1 matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad, conteniendo 90.0 mL de solucin amortiguadora de fosfatos de pH 7.2 agua
peptonada al 0.1%, estril a.
3 tubos de 16 x 150 mm, conteniendo 9.0 mL de solucin amortiguadora de fosfatos de pH 7.2 agua peptonada al 0.1%,
estriles con tapn de algodn a.
4 tubos 22 x 175 mm con 20.0 mL de agar papa dextrosa a.
4 tubos 22 x 175 mm con 20.0 mL de agar extracto de malta a.

NOTA
La Norma Oficial Mexicana utiliza nicamente el agar papa dextrosa para la deteccin y cuantificacin de estos grupos de
microorganismos. Sin embargo se sugiere para la cuantificacin de las levaduras, la utilizacin del agar extracto de malta
acidificado ya que es un medio ms rico en nutrientes y adecuado para el desarrollo de este grupo microbiano.

SOLUCIONES, REACTIVOS E INDICADORES

Solucin colorante de lactofenol azul de algodn b.
Colorantes para tincin de Gram b.
Solucin estril de cido tartrico al 10.0 % a.

MATERIAL Y EQUIPO
Vaso de licuadora estril o bolsa para Stomacher a.
Motor para licuadora o Stomacher a.
Pipetas graduadas estriles de 1 mL con tapn de algodn a.
Pipetas graduadas estriles de 10 mL con tapn de algodn a.
Pipetas Pasteur estriles a, b.
Propipeta a, b.
Cajas de Petri estriles (una se utiliza para pesar la muestra) a.

 Utensilios estriles para la manipulacin de muestras: cuchillos, cucharas, tenedores, etc. a.

Incubadora con termostato que pueda ser mantenido a 251C a.
Bao de agua con control de temperatura y circulacin mecnica mantenida a 451C a.
Portaobjetos, cubreobjetos, diurex

Microscopio ptico b.
Asa bacteriolgica y asa micolgica b.
Contador de colonias de campo oscuro, con luz adecuada, placa de cristal cuadriculada y lente amplificador b.

NOTA
a Material necesario para el inicio de la prctica.
b Material necesario para los 3, 4 y/o 5 das despus de iniciada la prctica.

Imagen 1 Determinacin de Mohos y Levaduras

Camacho, A., M.Giles, A.Ortegn, M.Palao, B.Serrano y O.Velzquez. 2009. Tcnicas para el Anlisis Microbiolgico de Alimentos. 2 ed.
Facultad de Qumica, UNAM. Mxico. 10/11/14 10:25 am

PROCEDIMIENTO
1. Pesar 10.0 g de muestra en una caja Petri estril y pasarla a un matraz Erlenmeyer que contenga 90.0 mL de una solucin
amortiguadora de fosfatos de pH 7.2 agua peptonada al 0.1%.
2. Homogeneizar la muestra con la solucin anterior en un vaso de licuadora estril o pasarla a una bolsa de Stomacher y
homogeneizar durante 10.0 seg en el caso de la licuadora a velocidad mnima, 30.0 seg en el Stomacher a una velocidad
normal. Esta es la dilucin primaria.
3. De la suspensin o solucin anterior, tomar 1.0 mL y transferirlo a un tubo de ensayo que contenga 9.0 mL de solucin
amortiguadora de fosfatos de pH 7.2, agitar y repetir esta operacin tantas veces como diluciones sean necesarias. Se debe
utilizar una pipeta estril para cada dilucin.
NOTA
Los microorganismos filamentosos forman las colonias a partir de una espora o de un fragmento de hifa o de un cmulo de
hifas. Debido a esto, el nmero de UFC/mL puede variar dependiendo de las condiciones de homogeneizacin de la muestra
(a mayor tiempo de homogeneizacin mayor ser la ruptura de las hifas y por lo tanto se aumentaran las UFC / mL), por lo
que se debe poner especial cuidado en esta etapa. Los tiempos de homogeneizacin citados en esta metodologa son los
recomendados en la Norma Oficial Mexicana para este grupo microbiano.
4. Colocar por duplicado en cajas Petri estriles, 1.0 mL de cada una de las diluciones de la muestra, utilizando una pipeta
estril.
5. Fundir el medio contenido en los tubos de 22 x 175 mm con 20.0 mL de agar papa dextrosa y/o de agar extracto de malta
estriles. Enfriarlos y mantenerlos a 45C.
6. Para lograr acidificar los medios a un pH de 3.5, adicionar por cada 100.0 mL de agar, 1.4 mL de cido tartrico al 10%
esterilizado por filtracin en membrana, o bien esterilizar la solucin a 121C1C durante 15 minutos. Esto significa que a
cada tubo conteniendo 20.0 mL del medio fundido y mantenido a 45C se le deber adicionar 0.3 mL del cido, o colocarlas
en la caja de Petri teniendo precaucin de que no toque la muestra antes de agregar el medio de cultivo.
7. Despus de la acidificacin, utilizar un tubo de medio acidificado como testigo y medir el pH para corroborar que se
encuentre a 3.5 utilizando un potencimetro.
8. En cada caja de Petri con inculo, verter de 15.0 a 20.0 mL de agar papa dextrosa acidificado y/o agar extracto de malta
acidificado, fundidos y mantenidos a 45C. El tiempo transcurrido entre la preparacin de las diluciones y el momento en que
es vertido el medio de cultivo no debe de exceder de 20.0 min.
9. Mezclar cuidadosamente el medio con seis movimientos de derecha a izquierda, seis en el sentido de las manecillas del
reloj, seis en sentido contrario y seis de atrs hacia adelante, sobre una superficie lisa, teniendo cuidado de no humedecer con
el medio la tapa de la caja de Petri. Permitir que la mezcla en las cajas Petri solidifique, dejndolas reposar sobre una
superficie horizontal fra.
10. Verificar la esterilidad de los medios acidificados para lo cual se verter en una caja de Petri sin inculo, de 15.0 a 20.0 mL
del agar papa dextrosa acidificada y/o agar extracto de malta acidificado. Despus de la incubacin estas cajas no debern
presentar desarrollo de colonias.
11. Invertir las cajas y colocarlas en la incubadora a 251C.
12. Contar las colonias de cada placa despus de 3, 4 y 5 das de incubacin. Despus de 5 das, seleccionar aquellas placas
que contengan entre 10 y 150 colonias. Si alguna de las cajas muestra crecimiento extendido de mohos o si es difcil contar
colonias bien aisladas, considerar la cuantificacin de 4 das de incubacin o incluso las de 3 das. En este caso, se informa el
perodo de incubacin en los resultados de los anlisis.
13. Realizar una tincin hmeda para mohos con colorante de lactofenol azul de algodn, para un examen microscpico y una
posible identificacin de los mohos que se hayan desarrollado.

14. Realizar una tincin de Gram para la observacin microscpica de las levaduras obtenidas.
15. Contar las colonias de cada placa representativa, despus de 3, 4 y 5 das de incubacin (a 26 1C o a temperatura
ambiente).
16. Considerar las cuentas de placas con 10 a 150 colonias como las adecuadas para el informe. Multiplicar por el inverso de
la dilucin.
17. Informar las unidades formadoras de colonias por gramo o mililitro (UFC/g o mL) de mohos y levaduras (cada uno en forma
independiente), incubadas a 251C durante 5 das.
18. Describir las caractersticas macroscpicas y microscpicas observadas, de los mohos y/o levaduras desarrollados a partir
de la muestra analizada.
19. Si alguna parte de la caja muestra crecimiento extendido de hongos, o si es difcil contar las colonias, considerar el
desarrollo de estos microorganismos a los 4 das de incubacin y an a los 3 das. En este caso se debe informar el periodo
de incubacin de 3 4 das, en los resultados del anlisis. 1

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
1. METODOS PARA AISLAR, PURIFICAR E IDENTIFICAR MOHOS Y LEVADURAS.
Camacho, A., M. Giles, A. Ortegn, M. Palao, B. Serrano y O. Velzquez. 2009. Tcnicas para el Anlisis
Microbiolgico de Alimentos. 2 ed. Facultad de Qumica, UNAM. Mxico.

Imagen 2Determinacion de Mohos y Levaduras

Fuente: Camacho, A., M.Giles, A.Ortegn, M.Palao, B.Serrano y O.Velzquez. 2009. Tcnicas para el Anlisis
Microbiolgico de Alimentos. 2 ed. Facultad de Qumica, UNAM. Mxico. 10/11/14 10:22 am

10