TUTORAT CYTOLOGIE

Anne 2006-2007

Sance n1
Sance du 9/10/2006

Mthodes d'tude de la cellule - Pr. H. Vannereau

QCM n 1
Concernant l'examen de cellules fixes en coupe au MO, quelles sont les propositions vraies:
a) La premire tape est la fixation, elle peut se faire l'aide d'aldhyde (ex: le glutaraldhyde), d'alcool (ex: le formol), ou
de sels de mtaux lourds.
b) La fixation permet de conserver la cellule vivante, comme dans son milieu naturel.
c) L'inclusion n'est possible que si la dshydratation est faite au pralable.
d) Pour faire la dshydratation, on trempe directement l'objet dans un bain d'alcool 100.
e) La coupe se fait l'aide d'un ultramicrotome.

QCM n 2
Concernant les colorants, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

L'osine est un colorant signaltique qui permet de voir le cytoplasme en bleu violac.
Il ne faut jamais oublier de faire la rhydratation, pour un examen de frottis, avant de faire la coloration.
Certains colorants comme le vert Janus B permettent de voir les cellules vivantes; ce colorant est un colorant vital.
Le Bleu de Trypan, toxique pour les cellules, est refoul des cellules vivantes et ne pntre que dans les cellules mortes.
Le MGG : May Grmwald Giemsa est un trichrome, c'est le plus utilis en hmatologie.

QCM n 3
Concernant le frottis, quelles sont les propositions fausses:
a)
b)
c)
d)

Il ne ncessite pas de fixation, les cellules tudies sont donc vivantes.

Il est possible pour tous les liquides biologiques.
C'est une technique transposable au ME.
C'est une technique trs rapide car ncessite moins d'oprations que pour les cellules fixes en coupe.

QCM n 4
Concernant les diffrents types de MO, quelles sont les propositions fausses:
a)
b)
c)
d)

Le microscope contraste de phase permet de faire des dcalages de phases visibles pour l'oeil humain.
Le microscope contraste interfrentiel permet d'observer en couleur et en relief (illusoire) des cellules vivantes.
On ne peut observer des cellules vivantes qu'avec le stromicroscope et le microscope invers.
Le stromicroscope permet de voir la surface des objets mais avec un grossissement moyen utile de 80. On l'utilise donc
peu au bloc opratoire.
e) Le microscope confocal permet de voir des coupes optiques d'un objet en faisant un balayage de l'objet dans les trois
dimensions de l'espace.

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QCM n 5
Concernant le ME, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

Le ME utilise des lectrons, ce qui ncessite que l'objet observ soit plac dans le vide.
Comme le MO, le ME ncessite une simple fixation au glutaraldhyde.
L'enrobage au ME se fait aprs dshydratation et utilise la paraffine.
L'enrobage permet l'ultramicrotome de dbiter des coupes de 50 nm environ.
Aprs la coupe, on peut placer l'objet sur une lame porte objet.

QCM n 6
Concernant le ME, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

La coloration ncessite une rhydratation.

Il n'y a pas rellement de "couleur" au ME, mais plutt un contraste selon si les lectrons sont arrts ou non.
L'actate d'uranyl et l'acide osmique arrtent les lectrons et augmentent le contraste.
Le ME permet l'tude de cellules vivantes et est souvent utilis pour cette indication.
Le MET ne permet pas l'observation d'objet en relief l'oculaire.

QCM n 7
Concernant le ME, quelles sont les propositions vraies:
a) La fixation du MET est similaire celle du MEB.
b) Le MEB permet l'observation de la surface des objets grce un balayage de l'objet.
c) L'tude du MEB ncessite un ombrage mtallique ralis avec des sels de mtaux lourd.
d) Le MEB permet l'tude de cellules vivantes car il ne ncessite pas de coupe.
e) Le grossissement moyen du MET est suprieur celui du MEB; ce dernier apporte donc moins de renseignements que le
MET et on prfre utiliser le MET autant que possible.

QCM n8
Concernant les cryotechniques, quelles sont les propositions vraies:
a) Les cryotechniques n'utilisent pas de fixateur chimique.
b) La cryofracture utilise un cryoprotecteur, contrairement au cryodcapage.
c) Le cryodcapage permet de visualiser les organites en 3 dimensions
d) Il n'y a pas de fixation dans les cryotechniques.
e) Aprs froid, la cryofracture, l'objet se coupe selon ses lignes de plus faible rsistance et on peut l'observer au MEB aprs
ombrage mtallique.

QCM n 9
Concernant les mthodes cytochimiques, quelles sont les propositions vraies:
a) Le PAS est une mthode immunohistochimique qui permet de dtecter la prsence de polysaccharides.
b) Si aprs raction au PAS, la prparation est rouge, il y a prsence de polysaccharides,
c) Suite la raction prcdence, la disparition de la coloration rouge aprs action de l'amylase conclut la prsence de
glycogne.
d) La cytoenzymologie permet une tude plus spcifique que la cytochimie.
e) Le ractif de Schiff colore en rouge la solution s'il y a prsence de fonctions aldhyde.
f) Il faut au pralable traiter la prparation avec de l' HCl chaud, pour que le ractif de schiff puisse reconnatre les
fonctions aldhyde.

QCM n 10
Concernant les mthodes cytochimiques, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

L 'immunohistochimie est accessible au MO et au ME.

L'immunohistochimie utilise des anticorps pralablement marqus.
L'immunohistochimie permet de dtecter des substances spcifiques grce l'association antigne-anticorps (marqu).
L'anticorps peut tre visible au ME si on le marque avec billes d'or, du fluorochrome, ou de la ferritine.
Les billes d'or peuvent tre de diffrents calibres, ce qui augmente la spcificit.

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QCM n 11
Concernant l'immunohistochimie, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)

La peroxydase de Raifort est dense aux lectrons.

La mthode indirecte permet d'augmenter la sensibilit en utilisant des anticorps anti-anticorps.
Pour la mthode directe, comme pour la mthode indirecte, les anticorps doivent tre marqus.
La mthode indirecte augmente la sensibilit mais diminue la spcificit donc est complmentaire de la mthode directe.

QCM n12
Concernant l'histophotomtrie, quelles sont les propositions fausses:
a) En histophotomtrie, le microscope est associ une cellule photolectrique.
b) Le ractif de Feulgen induit la coloration rouge de l'ADN.
c) (Aprs Feulgen) Une cellule, juste avant mitose (phase S) sera moins rouge qu'une cellule aprs division car elle a moins
d'ADN.
d) L'histophotomtre compte le nombre de cellule avec 2 n ADN et le nombre de cellule avec 4 n ADN.
e) L'hydrolyse acide chaud suivi du ractif de Schiff permet de colorer l'ADN en rouge.

QCM n 13
Concernant l'autoradiographie, quelles sont les propositions vraies:
a) Elle utilise des enzymes radioactives.
b) Elle permet de dterminer le site de synthse d'une substance.
c) On administre un prcurseur chaud pendant un temps court (pulse) puis le mme prcurseur froid pendant un temps trs
long (chase) pour voir le lieu de synthse.
d) On peut augmenter le temps de pulse pour rendre la mthode dynamique.
e) Les cellules observes au microscope sont vivantes, sinon la mthode ne pourrait pas tre rendue dynamique.

QCM n 14
Concernant l'autoradiographie, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

L'observation aprs l'autoradiographie peut tre faite au MO ou au ME.

Au ME, l'autoradiographie ne peut pas tre dynamique car on ne peut pas observer de cellules vivantes.
La mthode dynamique rend compte du transit cellulaire de la substance.
L'autoradiographie est une technique trs rapide (le pulse et le chase tant rapide)
L'mulsion photographique contient des sels d'argent qui s'oxydent.

QCM n 15
Concernant les extemporanes, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

Elles permettent de faire un diagnostic rapide.

Elles n'utilisent que le froid comme fixateur.
Le cryostat est en fait un microtome plac dans une enceinte moins 20C.
On peut procder la coloration immdiatement aprs la coupe.
Les cryostats peuvent aussi tre utiliss en laboratoire pour faire de l'enzymologie.

QCM n 16
Concernant les mthodes d'tude de la cellule, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)

La cytomtrie en flux peut tre utile pour sparer deux types de cellules (charges diffremment) d'un bloc de tissu.
La cytomtrie en flux trie des cellules de charge diffrentes, les cellules non charges ne sont pas tries.
La cytomtrie utilise un champ lectrique.
L'hybridation in situ permet de voir si une sonde est complmentaire d'un brin d'ADN ou d'ARN.
L'hybridation in situ permet de dtecter la prsence d'une protine par complmentarit.

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QCM n 17
Concernant les fixateurs, quelles sont les propositions vraies:
a)
b)
c)
d)
e)
f)

Les fixateurs chimiques sont riches en oxygne.

Ils peuvent tre responsables d'artfacts, notamment dans l'observation de la membrane plasmique.
Le schage d'un frottis ne permet pas de le fixer.
L'chantillon (ou objet) observ au microscope confocal ne ncessite pas de fixation.
La fixation au ME est toujours double, au MET comme au MEB.
Les fixateurs ne tuent pas obligatoirement les cellules.

QCM n 18
Remettez les lgendes correspondantes aux chiffres sur le schma.

Le microscope optique :
7

1
6

2
3
4
5

a)
b)
c)
d)
e)
f)

objectifs
condenseur
oculaire
platine
sortie photo, vido
lumire

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