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FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS

PROGRAMA ACADEMICO DE BIOLOGIA


Fisiologa Animal
Pre-informe 1:
POTENCIAL DE ACCIN COMPUESTO DEL NERVIO CITICO
1. Usted tiene dos nervios que llamaremos A y B. Descritos en la Tabla
1 y Tabla 2.
TIPOS DE NERVIOS
Nervio A
Nervio B
Axn tipo A
60%
Axn tipo A
50%
Axn tipo A
20%
Axn tipo C
30%
Axn tipo C
10%
Axn tipo A
20%
Tabla 1.Descripcin de la composicin de axones presentes en dos
nervios diferentes de vertebrados.
Tipo
de
Axn

Mieli
na

Dimet
ro (M)

Duracin del
potencia de
Accin (ms)

Periodo
Refractario
Absoluto

Funcin

Motoneurona
s
Sensoriales
A
Si
5-13
0.4-0.5
0.2-1
(Presin)
Motoneurona
A
Si
3-8
0.4-0.7
0.5-1
s
Sensoriales
C
No
0.2-1.2
2
2
(dolor)
Tabla 2. Descripcin general de las propiedades de los axones
presentes en los nervios de vertebrados
A

Si

12-22

0.4-0.5

0.2-1

a. Asumiendo que ambos nervios son estimulados con la misma


corriente Cmoesperara que fuera laamplitud mxima del PAC
en el nervio A con respecto a B?
R//No se presentan datos suficientes que permitan resolver este
interrogante, pero si tenemos en cuenta una variable como por
ejemplo la temperatura, la amplitud mxima del PAC se
encontrara en el nervio A, ya que los canales de sodio y potasio
son sensibles a la temperatura, lo que quiere decir que el estmulo
originar que el PAC abra los canales inicos, pero si tenemos
temperaturas bajas los canales tardaran ms tiempo en cerrarse y
viceversa, ahora bien de acuerdo a los propiedades inherentes a

los Nervios la amplitud mxima del PAC se dar en el Nervio B, ya


que la mayor parte de sus axones presentes tienen mielina (80%)
con un (70%) del Nervio A y el dimetro de sus axones es mucho
mayor, lo que se esperara que entre ms se demoren los canales
en cerrarse y con caractersticas de una velocidad de conduccin
muy alta, los canales de sodio y potasio del Nervio A dejen pasar
muchos ms iones que permitan obtener una amplitud mucho
mas alta.
b. Cul de los dos nervio esperara usted que condujera un estmulo
determinado con mayor velocidad?
R// Se esperara que se condujera un estmulo cualquiera con
mayor velocidad en un Nervio A ya que sus caractersticas
inherentes a sus axones como por ejemplo la mielina (80%) en el
Nervio A y (70%) en el Nervio B, Adems que los dimetros
presentes tambin son mayores, ver tabla 2. Permitir un flujo de
iones mucho ms fcil. Tambin cabe recordar que la duracin del
potencial de accin de los axones en el Nervio a es mucho menor
que en el Nervio B.
Los canales inicos al tardar ms en cerrarse a temperaturas bajas,
permiten el paso deun nmero mayor de iones que en su estado normal,
mientras que a altas temperaturas los canales inicos se cierran ms
rpido y dejan que entren menos iones. De esta forma, si sometemos un
nervio citico a tres temperaturas diferentes desde (0>, hasta 37C) y
un estmulo constante mximo de 0,250 mV, se esperara que a bajas
temperaturas hayan mayores amplitudes en el PAC y a altas
temperaturas menores amplitudes en el PAC.
Ho: No hay diferencias en las amplitudes para las distintas temperaturas
Uno de los principales factores que regulan la amplitud de los
potenciales de accin compuesto es la temperatura, ya que el aumento
de la misma incrementa la cintica de los canales, asumiendo que a una
menor temperatura los canales de sodio y de potasio se mantengan
mayor tiempo abiertos y se observe un pico ms alto. (Best & Taylor,
2010) En contraste, a temperaturas ms altas los canales inicos
contaran con picos ms cortos. Ramrez, L. M., 2010)
Materiales
Espcimen de Rana toro
(Litobathescatesbeianus)
Unidad de adquisicin de datos
Iworx/ 214

Equipo de diseccin
Pipeta Pasteur

Cajas de Petri
Cmara para nervio NBC-40
Hielo
Cable estimulador C-STIM-BNCP2
Cable de registro CAAMI-504 y
Termmetro
electrodos.
Solucin de Ringer para Anfibios: NaCl 85 mM, KCl 1.8 mM,
Na2,HPO4 2.75 mM, CaCl2, 1.7 mM, NaHCO3 25 mM
Metodologa
Extraccin del Nervio Citico de una Rana Toro
1. Colocar un espcimen de Rana toro en un bao de agua hielo por
15 minutos. Al retirarlo sacrificar el animal.
2. Destruir la medula espinal, con el fin de evitar reflejos motores
medulares durante la diseccin del nervio.
3. Realizar una incisin en la piel a travs de la parte baja del
abdomen. Luego cortar las conexiones entre la piel y el cuerpo,
especialmente alrededor de la base de la cintura plvica.
Posteriormente, remover la piel de las extremidades en una sola
pieza.
4. Ubicar la Rana en posicin dorsal en una bandeja de diseccin.
Humedecer cada 5 minutos con solucin Ringer para anfibios las
extremidades posteriores.
5. Localizar el urostilo y remover el tejido a ambos lados.
Posteriormente levantarlo y dejar al descubierto el par de nervios
citicos originados desde la columna vertebral, Ver figura 1.
Cortar el Urostilo cerca de la columna vertebral y humedecer con
solucin Ringer para anfibios.

Figura 1. Observacin del Urostilo y los Nervios citicos. a) Urostilo b)


localizacin de los Nervios citicos

6. Separar los msculos del muslo en una de las extremidades para


exponer el nervio citico desde la columna vertebral hasta la
rodilla
7. Separar con un gancho de Vidrio el nervio de las fascias y vasos
sanguneos.
8. Sujetar el nervio con un hilo negro la parte ms proximal de la
columna vertebral y con un hilo blanco la parte ms distal (en la
rodilla).
9. Cortar los extremos del nervio y ubicarlo en una caja Petri con
solucin Ringer.
Despus de obtener el nervio se proceder al montaje de la Cmara:
1. Conectar el electrodo de estimulacin positivo rojo (S+) en el
extremo izquierdo de la cmara, mientras el electrodo de
estimulacin negro (S-) en el lado opuesto siguiente de la cmara.
2. Enchufar luego los electrodos de respuesta, el verde (Comn, G o
polo tierra) en la parte derecha del electrodo de estimulacin
negativo (S-), siguiente el electrodo de registro proximal (R-) y por
ltimo el electrodo de respuesta distal en el extremo derecho de la
cmara para el nervio (R+).
3. Ubicar el extremo proximal del nervio sobre los electrodos de
estimulacin y el extremo distal sobre el de registro.
4. Verter en la parte inferior de la cmara para nervio solucin Ringer
y cubrir con un portaobjetos para prevenir de la solucin de
Ringer.

Figura 3. Montaje de los electrodos en la cmara para nervio.


En la figura se ilustra la disposicin que deben tener los electrodos de
estimulacin S y de respuesta R en la cmara para nervio. De igual
manera se ilustra la disposicin que debe tener el electrodo comn G.
No conecte los electrodos S uno frente al otro porque se ocasiona un
cortocircuito.
Para comprobar si hay diferencias en las amplitudes del PAC en
distintas temperaturas se realizar el procedimiento anterior
sometiendo el nervio en primera instancia en hielo (>0C), luego
gradualmente se aumentar la temperatura y cada 5 grados se
registrar el PAC. Adems, se utilizar el programa de adquisicin de
datos LabScribe descrito a continuacin.
1. Se debe comprobar la viabilidad del Nervio, esto se realizar
mediante la aplicacin de un estmulo que registrar un PAC.
Confirmando la viabilidad del mismo.Para ello, seleccionar la opcin
Stimulator Preferences para abrir el panel de control del
estimulador.
2. Configurar los parmetros de estimulacin, amplitud del pulso (Amp)
0,250 V; el Numero de pulsos (#pulses) 1; y la duracin del pulso en
0,1 ms. Seleccionar la opcin Apply para finalizar los cambios en
los parmetros del estimulador. Y luego seleccionar el botn
Record para estimular el nervio y registrar el potencial de accin. El
registro sedetiene automticamente despus de un barrido, cuya
amplitud es de 30 milisegundos. En la tabla 3, se han establecido
los valores que se tabularan el programa para dicho experimento
Parmetros usados para
estimular el
nervio
Amplitud del estmulo (Amp)
Nmero de pulsos (#pulses)
Duracin del pulso (W)

Valor
0,250 mV
1
0.1 ms

Valor potencial (HP)


0
Tabla 3. Parmetros del estimulador requeridos para medir el la
respuesta del nervio citico mediante alteraciones en la
temperatura
Temperatura

Amplitud del
Estimulo mV

Amplitud del PAC en


MV

>0C
5C
10C
15C
20C
0,250 mV
25C
30C
35C
Temperatura ambiente
(Control)
Tabla 4. Tabla de datos relacin entre estmulo y respuesta de acuerdo
a variaciones en la temperatura
Bibliografa
BEST & TAYLOR. 2010. Bases Fisiolgicas de La Prctica Mdica,
14 Ed. Editorial Mdica Panamericana. Madrid, Espaa. Pg. 232
RAMIREZ, L M.Evaluacin de los efectos de diversas intensidades
de estimulacin nerviosa sobre la amplitud de la respuesta de
diferentes especies. Int. J. Morphol., 28 (1):227-238,2010

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