Unidad X: Vacunas.

M. en C. Osvaldo Daniel Casteln Martnez

Las vacunas son la herramienta ms valiosa que la

inmunologa ha generado para la humanidad.
Gracias a la vacunacin, la viruela se ha erradicado del
planeta, la poliomielitis esta en vas de serlo, y la
tuberculosis ha reducido su severidad, pues cada vez son
menos frecuentes los casos mortales de tuberculosis
menngea y de tuberculosis miliar.

Jenner, preocupado por la viruela, concibi la forma de

prevenir la enfermedad.
Pasteur, logro atenuar la virulencia de los microorganismos
causantes del clera aviar, del ntrax y de la rabia, para luego
utilizarlos como vacunas contra esas enfermedades.

Pasteur sostuvo que era necesario emplear microbios vivos o

atenuados para generar inmunidad, sin embargo, las vacunas
contra el clera, la tifoidea y la peste que utilizan
microorganismos inactivados mostraron que tambin podan
conferir inmunidad.
3

La revolucin de los virus, 1930

Se inicia cuando se logran propagar en tejidos de los
animales.
La propagacin de los virus en la membrana corioalantoinea
del embrin de pollo condujo a la produccin de las
vacunas contra la fiebre amarilla y contra la influenza.

Enders y colaboradores
El verdadero desarrollo de vacunas antivirales se inici
cuando estos investigadores lograron la propagacin de los
virus en cultivos celulares

Jonas Salk, 1952

Fue dada a conocer por Salk el 12 de abril de 1955.

La vacuna Salk contra la poliomielitis consiste en una dosis

inyectada de poliovirus inactivados o muertos.
Su introduccin redujo drsticamente la incidencia de la
enfermedad.
6

Sin embargo, un error en la preparacin de un lote de la

vacuna origin 149 casos de poliomielitis, impulso el
desarrollo de la vacuna tipo Sabin con virus atenuados.
La alta eficacia protectora de esta vacuna condujo al
desarrollo de las vacunas contra el sarampin, la parotiditis
y la rubeola, todas con virus atenuados.

OMS, 1974
Decidi aplicar la experiencia obtenida del programa para
erradicar la viruela al control de otras enfermedades
prevenibles por vacunacin y propuso el Programa
Extendido de Inmunizacin (PEI).
El objetivo es proveer proteccin a los 150 millones de nios
que nacen anualmente contra seis enfermedades
universales: difteria, tosferina, sarampin, poliomielitis,
ttanos y tuberculosis.
8

OMS
Los resultados del PEI han sido alentadores, en 1988, el
objetivo era erradicar la poliomielitis para el ao 2000, una
meta que se alcanzo en la mayora de los pases, para el 2005
solo en seis continuo siendo endmica (Egipto, India, Niger,
Pakistn y Nigeria).
Otras enfermedades incluida en el PEI fueron la hepatitis B,
la neumona producida por Hemophilus influenzae tipo b
(HiB) y la fiebre amarilla, en los pases afectados por estas
enfermedades.
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Caractersticas generales de las vacunas

Las vacunas funcionan estimulando la respuesta inmunitaria
del individuo sin que este sufra la enfermedad o ponga en
riesgo su vida.
La vacuna ideal sera aquella capaz de conferir un grado de
inmunidad comparable al provocado por la infeccin
natural.
Como esto no ocurre, las vacunas deben aplicarse ms de
una vez, como refuerzos.
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Caractersticas generales de las vacunas

La mayora de las vacunas estimulan tanto la respuesta
inmune celular como la humoral aunque, a excepcin de la
vacuna contra la tuberculosis, la proteccin conferida por la
vacunas actuales depende casi exclusivamente de la
produccin de anticuerpos.
Aunque el objetivo principal es prevenir la infeccin, existe
el caso de la vacuna de la rabia que se aplica solo despus
de la persona ha sido infectada, este tipo de vacuna se llama
teraputica.
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Vacunas teraputicas
Estn orientadas a mejorar la inmunidad de los individuos
que padecen de infecciones crnicas o recurrentes.

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Caractersticas generales de las vacunas

Las vacunas no slo son tiles para evitar las enfermedades
infecciosas, tambin hay vacunas en fase experimental
contra ciertos tipos de cncer, para el control natal y
vacunas negativas que intentan disminuir la respuesta
inmune exacerbada de los pacientes con enfermedades
autoinmunes o alrgicas.

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Tipos de vacunas
Vacunas de primera generacin, se preparan con los
microorganismos completos (inactivados o atenuados) o
con sus productos de secrecin (toxinas).

Limitaciones: la mayora de los antgenos son irrelevantes

como inductores de inmunidad y pueden comportarse como
toxinas en el organismos husped.
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Tipos de vacunas
Vacunas de segunda generacin, se preparan con los
antgenos identificados como protectores que son aislados,
y purificados.

Los antgenos pueden ser secuenciados y reproducidos por

sntesis qumica para usarse como antgenos sintticos, o sus
genes se identifican y se clonan para obtenerlos de forma
recombinante.
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Tipos de vacunas
Vacunas de segunda generacin.

Limitaciones: La mayora de los antgenos sintticos y

recombinantes son poco inmunognicos y requieren de la
administracin de adyuvantes, lo que dificulta su empleo

16

Tipos de vacunas
Vacunas de tercera generacin o vacunas de DNA, se
preparan con los genes relevantes insertados en plsmidos
o en vectores vacnales.

Estas se encuentran en fase experimental.

17

18

Vacunas con microorganismos vivos atenuados

En general, este tipo de vacunas confieren altos niveles de
proteccin de larga duracin, aunque requieren refuerzos.
Los microorganismos atenuados se multiplican en los tejidos
del individuo vacunado, mimetizando el estimulo generado
en una infeccin natural.
Una desventaja es su capacidad potencial de producir
enfermedad en individuos inmunodeficientes.
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Vacunas con microorganismos vivos atenuados

Otra desventaja es la posibilidad de que por mutacin los
microorganismos atenuados puedan revertir a su estado
virulento, como ya ha ocurrido con la vacuna Sabin (la
incidencia es de 1 de cada 2.1 x 106).
Aunque existe la posibilidad de obtener mutantes carentes
de factores de virulencia, las vacunas mutadas resultan de
baja eficiencia protectora porque esta depende de los
factores mutados.
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Vacunas con microorganismos muertos o inactivados

La inactivacin se realiza por calor, por irradiacin o por
tratamiento con formaldehdo.
Como los microorganismos no se multiplican en los tejidos
del individuo es indispensable administrar dosis de refuerzo.
La gran ventaja que tienen es que se pueden emplear con
seguridad en sujetos inmunocomprometidos.
21

Vacunas con microorganismos muertos o inactivados

Dos vacunas eficaces de este tipo son la vacuna de polio tipo
Salk y la vacuna contra la hepatitis A.
Sin embargo, hay otras vacunas que han sido
descontinuadas por su baja eficacia protectora (clera),
mientras que hay otras que estn en mejora continua
(influenza y tifoidea).
Las vacunas con parsitos no han mostrado eficacia para
aplicarse de forma rutinaria.
22

Vacunas con microorganismos muertos o inactivados

Una vacuna contra la leishmaeniosis preparada con cultivo
de parasito muerto por calor o con fenol y BCG vivo, ha
mostrados una proteccin del 79% en estudios de fase III
realizados en Ecuador.

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Vacunas con toxoides

Para las enfermedades causadas por las toxinas de los
microorganismos, los toxoides son el inmungeno de
eleccin.

Los toxoides se preparan tratando las toxinas con

formaldehdo; de esta manera las toxinas pierden su
actividad txica pero conservan su actividad inmunizante.
Los toxoides tetnico y diftrico son ejemplos exitosos de
este tipo de vacunas.
24

Vacunas con toxoides

En general, los toxoide de enterotoxinas no han dado
buenos resultados.
Una excepcin es el toxoide de la toxina termolbil (LT) de
Escherichia coli. Es preparado por mutagnesis dirigida y ha
mostrado ser eficaz para la prevencin de la diarrea del
viajero.

25

Vacunas subunitarias
Estas vacunas se preparan con antgenos definidos de los
microorganismo infectantes. En esta categora se incluyen
las vacunas recombinantes y las vacunas con pptidos
sintticos.

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Vacunas recombinantes
Se utilizan cuando los microorganismos son difciles de
cultivar en el laboratorio y en consecuencia dificulta la
elaboracin de vacunas tradicionales.

Para superar esta problema se ha utilizado la tecnologa del

ADN recombinante.
Esta tecnologa permite aislar el gen que codifica para la
sntesis de una protena antignica del patgeno de inters.
27

Vacunas recombinantes
El gen se inserta en un vector de DNA (plsmido) y se
introduce en levaduras, bacterias o clulas eucariotas,
donde se espera que se replique y produzca varias copias de
la protena en cuestin.
La protena producida se extrae, se recupera, se purifica y se
utiliza para preparar la vacuna deseada.
28

29

Vacunas recombinantes
Actualmente, solo se cuenta con la vacuna contra el virus de
la hepatitis B, que contiene el antgeno de superficie del
virus (HBsAg) obtenido por la tecnologa del DNA
recombinante.
Existen otras en desarrollo contra la fiebre tifoidea, el
clera, la malaria, la esquistosomiosis y otras
enfermedades.
30

Vacunas con pptidos sintticos

Estas vacunas se preparan por sntesis qumica y reproducen
las secuencias que tienen los antgenos protectores.
En realidad no han sido muy eficaces, dentro de ellas se
encuentra la vacuna contra el VIH y una vacuna contra la
malaria, en estudios de fase III.

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Vacunas con pptidos sintticos

La vacuna sinttica SPf66 contra la malaria (Desarrollada en
Colombia por M. Patarroyo), de la que se tenan grandes
esperanzas , ha tenido buena eficacia en estudios piloto
realizados en varios pases, incluyendo Gambia y Tanzania
en frica, Papua en nueva Guinea y Brasil en Amrica.

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Vacunas acelulares
La tosferina es una de las causas de muerte ms comunes
provocada por un agente infeccioso, Bordetella pertussis.
La vacuna preparada con el microorganismo integro
inactivado confiere una buena inmunidad pero es altamente
reactognica.
LA bacteria contiene alrededor de 15 factores de virulencia.
33

Vacunas acelulares
Este tipo de vacunas se preparan solo con algunos de los
componentes de la bacteria que no son reactognicas y en
cambio confieren buena proteccin.
Los componentes de la Bordetella son la pertactina,
hemaglutinina filamentosa y la toxina pertusis.
Este tipo de vacunas tambin son consideradas vacunas
subunitarias.
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Adyuvantes
Las vacunas de segunda generacin (pptidos sintticos,
protenas recombinantes y acelulares) han permitido tener
vacunas ms seguras que las preparadas con
microorganismos completos.
Desafortunamente estas vacunas son menos inmunognicas
que las vacunas tradicionales y esto ha planteado la
necesidad de utilizar adyuvantes.
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Adyuvantes
Las vacunas de segunda generacin (pptidos sintticos,
protenas recombinantes y acelulares) han permitido tener
vacunas ms seguras que las preparadas con
microorganismos completos.
Desafortunamente estas vacunas son menos inmunognicas
que las vacunas tradicionales y esto ha planteado la
necesidad de utilizar adyuvantes.
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Adyuvantes
El nico adyuvante adecuado para el uso en el humano es el
hidrxido de aluminio, pero se encuentra en fase
experimental avanzada:
los lpidos con carga negativa,
las emulsiones acuosas de escualeno y
los complejos inmunoestimulantes (ISCOMs) como el Quil
A y el QS-21, que junto con el antgeno, saponina y
colesterol forman micelas estables.
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Vacunas de DNA con vectores vacunales

Son la aportacin de Bernard Moss y Enzo Paoletti, quienes
de forma independiente utilizaron el virus de la vaccinia
como portador de genes forneos codificantes de antgenos
protectores.
Adems del virus de la vaccinia, se han usado otros vectores
como los virus de la polio, del herpes, avipoxivirus y
bacterias vivas como la Salmonella, Shigella y
Mycobecterium bovis BCG.
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Vacunas de DNA con vectores vacunales

El tamao del genoma de estos vectores es muy grande y
permite incluir varios genes forneos, esta caracterstica
permite la proteccin contra ms de una enfermedad.

Este tipo de vacunas inducen excelentes respuestas de

linfocitos T, incluyendo a las T citotxicas.
Una desventaja es que los vectores podran ser causa de
enfermedad o muerte en individuos inmunodeficientes.
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Vacunas de DNA con vectores vacunales

La produccin de vacunas recombinantes con vectores que
se replican en clulas eucariotas que se transforman con un
plsmido que lleva insertado un gen forneo codificante de
un antgeno inductor de inmunidad flanqueado por
secuencias del virus de la vaccina.
Simultneamente se infectan con el virus de la vaccina y con
el agente vacunal.
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Vacunas de DNA con vectores vacunales

Dentro de las clulas, el virus se desnuda e inicia su
replicacin y al hacerlo interacciona con las secuencias
homologas del mismo virus insertadas en el plsmido y
junto con el gen forneo.
La replicacin del genoma viral y su interaccin con el DNA
plasmdico permite la formacin de genomas virales
recombinantes en los que el gen forneo se integra al
genoma viral de manera estable.
41

Vacunas de DNA con vectores vacunales

El genoma viral recombinante, portador ahora del gen
forastero, continua su replicacin hasta producir partculas
virales completas, todas portadoras del gen (o genes)
forneo codificante de antgenos inductores de inmunidad.
Las vacuna de vaccinia recombinante se administra igual que
la vacuna de vaccinia sola, por perfusin o a travs de la
piel.
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Vacunas de DNA desnudo

Wolf y colaboradores (1990) fabricaron un plsmido con
portador de un gen reportero y lo inyectaron
intramuscularmente en el ratn.

Despus encontraron que la protena codificada por el gen se

encontraba presente en el liquido intersticial de los animales.
Margaret Liu y su grupo (1993) demostraron que se poda
inducir inmunidad protectora en ratones vacunados con DNA
desnudo portador del gen para nucleoprotena del virus de la
influenza tipo A.
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Vacunas de DNA desnudo

A diferencia de las vacunas que emplean vectores vacunales,
la mayora de las vacunas con DNA plasmdico no se replican
dentro del animal inmunizado.
Los plsmidos recombinantes que contienen las secuencias
que codifican para antgenos protectores se amplifican in
vitro en cultivos de E. coli, y su origen de replicacin no
funciona para clulas de mamferos.
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Vacunas de DNA desnudo

Los plsmidos con construidos con:

Un origen de replicacin.
Un gene de resistencia a antibiticos, para uso en humanos
se recomienda kanamicina.
Un promotor fuerte para expresin optima en clulas de
mamfero (como el promotor de citomegalovirus).
Un estabilizador de transcritos mRNA, como la secuencia de
poli-A obtenida del virus SV-40.
45

Vacunas de DNA desnudo

Tambin requieren de oligonucletidos especficos, que
funcionan como adyuvantes al conferir inmunogenicidad a
estas vacunas al interaccionar directamente con el receptor
TLR9 de las clulas.

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47

Vacunas de DNA desnudo

La inyeccin intramuscular del plsmido permite la
transfeccin de las clulas musculares y dendrticas.
El plaido entra primero al citoplasma y posteriormente al
ncleo de estas clulas pero no se integran a sus genomas.
Hay expresin de estos antgenos en los miocitos, sin
embargo estos se escurren y son captados por las clulas
dendrticas en un fenmeno llamado cross-printing o
sensibilizacin cruzada.
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Vacunas de DNA desnudo

Otra opcin es inyectar directamente el DNA en las clulas de
Langerhans o a las clulas dendrticas para que estas viajen a
los ganglios linfticos regionales donde expresan, procesan y
presentan los antgenos recombinantes.
Las vacunas de DNA tienen la ventaja de que no hay rearregl
de los antgenos ni modificaciones postranscripcionales que
afecten, por ejemplo, su glucolisacion.
Adems, son muy estables y baratas, y aunque requiere
refuerzos, las dosis sin muy pequeas.
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Vacunas de DNA desnudo

Hasta el momento las vacunas de DNA no han sido
autorizadas para su uso rutinarios en humanos.
Esto se debe a las estrictas regulaciones en el uso del DNA, ya
que se tiene el temor de que estas molculas pudieran sufrir
o causar mutaciones en el genoma celular y promover el
desarrollo de cncer o de autoinmunidad contra el DNA.
Adems, de que la expresin continua podra inducir
tolerancia de larga duracin.

50

Vacunas comestibles
La idea proviene de los trabajos originales de Arntzen, quien
demostr que las plantas transgnicas pueden expresar
protenas recombinantes.
El desarrollo toma en cuenta dos consideraciones favorables:
a) Las plantas pueden ser un sistema de produccin masiva
de antgenos protectores recombinantes.
b) Las vacunas se pueden administrar por va oral,
aprovechando la existencia de tejido linfoide asociado a
mucosas del trato digestivo.
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Vacunas comestibles
En la dcada de 1980, se logro que la planta de tabaco
expresara molculas completas de IgG y se demostr que las
plantas y los mamferos comparten procesos biosintticos
fundamentales.
Las plantas transfectadas pueden expresar vario genes y
producir antgenos correspondientes a un bajo costo,
aprovechando los cultivos que ya existen en cada pas.
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Vacunas comestibles
La planta ideal para preparar vacunas comestibles debe tener
un alto contenido de antgenos recombinantes, ingerirse
cruda, tener una amplia distribucin geogrfica y ser fcil de
manipular genticamente.
Aunque la planta de tabaco no tiene todas estas
caracterstica se utilizo para clonar el gene del antgeno de
superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg). El antgeno
estimulo la produccin de anticuerpos en ratones.
53

Vacunas comestibles
Otras vacunas expresan las subunidades B de las toxinas
termolbiles de E. coli y de V. cholerae.
En un estudio de fase I se logro que 10 de 11 individuos
inmunizados oralmente con pedazos de papa transgnica
para la unidad de la LT de E. coli, produjeran anticuerpos
neutralizantes.
Debido a sus caractersticas, es probable que las primera en
ser autorizadas aquellas para uso en ganado.
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Vacunas empleadas en Mxico

Hasta hace poco tiempo la produccin de vacunas en Mxico
dependa de la Secretaria de Salud y produca todas la
vacunas empleadas en el pas.
Actualmente, algunas vacunas las sigue produciendo la SS
pero otras son importadas, como BCG, HBsAg y Hib.

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Vacunas empleadas en Mxico

En Mxico, se aplica la cobertura el PEI cuyos objetivos son:
a) La erradicacin de la poliomielitis (lograda en 1994).
b) Eliminar el ttanos neonatal.
c) Eliminar el sarampin.
d) Controlar la tosferina.
e) Mejorar las condiciones generales de salud de la
poblacin por erradicacin y control de las enfermedades
prevenibles por vacunacin.
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Vacunas empleadas en Mxico

Para cumplir el ultimo objetivo, el PEI se ha ampliado con la
introduccin de las vacunas contra la rubeola, la parotiditis,
la neumona por H. influenzae tipo b, y la hepatitis B.
Mxico produce las vacunas DPT (difteria, pertusis, ttanos),
TT (toxoide tetnico), TD (toxoide diftrico) y Sabin (polio
oral); acondiciona la vacuna antisarampin y esta en vas de
produccin de la vacuna tripla viral, importa BCG, Hib y HBV.
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Vacunas empleadas en Mxico

La vacuna pentavalente (DPT, Hib y HBSAg), que se aplica en
Mxico de forma obligatoria, es una vacuna interesante
porque protege contra cinco enfermedades sin que ocurra
interferencia entre ellas; en 2003 se reporto una cobertura
del 90%.

58

59

60

Vacunas contra parsitos

Hasta el momento no existen vacunas contra enfermedades
parasitarias de eficacia comprobada en el humano y solo
algunas de relativa utilidad en el rea veterinaria.

61

Vacunas para prevenir enfermedades no infecciosas

En esta categora se incluyen las vacunas contra el cncer, las
vacunas para el control natal, y las llamadas vacunas
negativas, empleadas en enfermedades autoinmunes y en la
alergia.

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Vacunas contra el cncer

A finales de la dcada de 1950 se demostr que los tumores
inducidos con carcingenos o con virus eran inmunognicos y
esta observacin sirvi de base para desarrollar las primeras
vacunas.
Desafortunadamente, algunos tumores, como el cncer de
mama y el pulmonar, son poco inmunognico, por lo que
difcilmente son susceptibles a la vacunacin.
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Vacunas contra el cncer

Ciertos tipos de cncer estn asociados con una infeccin
viral, ejemplo los virus de la hepatitis B o C, el virus de Eptein
Barr y el virus del papiloma humano.

Estos tipos de cncer son susceptibles a controlarse por

medio de la vacunacin contra el virus.

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Vacunas para el control de la natalidad.

La idea es que puedan generar una respuesta inmune que
evite la fecundacin por periodos definidos de tiempo y que
garanticen la recuperacin de la fertilidad cuando la vacuna
sea suspendida.
La vacuna no debe perturbar el ciclo menstrual ni generar
enfermedad autoinmune.
El candidato en este caso es la gonadotropina corinica
(hCG).
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Vacunas para el control de la natalidad.

Otro enfoque es la inmunizacin con molculas de
espermatozoides esperando que los anticuerpos inmovilicen
a los espermatozoides impidiendo su unin con el vulo. El
nombre de esta vacuna es SAGA-1, y esta en estudios de fase
III.

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Vacunas para enfermedades autoinmunes.

En el caso de enfermedades autoinmunes, la alergia y los
trasplantes, es deseable contar con vacunas que supriman la
respuesta inmunitaria.
Las vacunas diseadas para este fin pretenden introducir un
estado de tolerancia inmunolgica o de modulacin de la
respuesta inmune, eliminando al funcin de los linfocitos
indeseables.
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Vacunas para enfermedades autoinmunes.

Se ha observado que los ratones inoculados
subcutneamente con la protena bsica de mielina (MBP)
desarrollan encefalitis experimental, mientras que la
inoculacin oral genera tolerancia especifica y no se
desarrolla encefalitis cuando se inoculan con MBP
subcutnea.

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Vacunas para enfermedades autoinmunes.

Se ha observado que los ratones inoculados
subcutneamente con la protena bsica de mielina (MBP)
desarrollan encefalitis experimental, mientras que la
inoculacin oral genera tolerancia especifica y no se
desarrolla encefalitis cuando se inoculan con MBP
subcutnea.

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Vacunas para enfermedades autoinmunes.

Otras vacunas de este tipo (llamadas vacunas negativas) son
las que suprimen la artritis inducida por colgena, la uvetis
autoinmune y la diabetes autoinmune espontanea que
desarrolla la cepa de ratones NOD.
Esta vacunas estn en fases tempranas de experimentacin.
Tambin se ha logrado inducir tolerancia cuando el antgeno
se administra por va respiratoria a travs de aerosoles.
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Fechas importantes
20 de Mayo de 2014, tercer examen parcial.

28 de Mayo de 2014 de 8:00-11:00 en el L-203, ordinario A.

04 de Junio de 2014 de 8:00-11:00 en el L-203, ordinario B.

26 de junio de 2014 de 10:00 - 14:00 L-203, extraordinario.

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