EVALUACIN DE UN TEST DE INMUNOCROMATOGRAFA

(CRYPTO-STRIP) PARA LA DETECCIN DE

Cryptosporidium parvum EN MUESTRAS FECALES.
LLORENTE, M.T., CLAVEL, A., VAREA, M., OLIVERA, S., GONZLEZ-ASN, V, CASTILLO, F.J., RUBIO, M.C., GMEZ-LUS, R.
Departamento de Microbiologa. Facultad de Medicina. Zaragoza. Espaa.

INTRODUCCIN

MATERIAL Y MTODOS

Cryptosporidium es un protozoo frecuente en nuestro medio

como causa de diarrea.

El test se basa en la utilizacin de un sistema

inmunocromatogrfico con partculas de oro coloidal.

El diagnstico de la criptosporidiosis se lleva a cabo en el

laboratorio por tcnicas de tincin de ZN modificado, IF,
ELISA. Estas tcnicas son laboriosas, las dos ltimas costosas,
y necesitan realizarse por personal especializado.

El procedimiento consiste en disolver aproximadamente 50 mg de heces

en 0.5 ml de buffer. Posteriormente se introduce la varilla
inmunocromatogrfica que utiliza anticuerpos monoclonales dirigidos
contra un antgeno de la pared de los ooquistes de C. parvum.

Coris BioConcept ha diseado un test de inmunocromatografa

capaz de detectar ooquistes de Cryptosporidium parvum
directamente de las heces.

RESULTADOS
De las 50 muestras positivas, 49 fueron verdaderos positivos y
1 falso negativo, dando una sensibilidad del 98%. Tras
genotipar la muestra negativa se observ que corresponda a
una especie diferente a C. parvum: C. meleagridis.

homogneo

Hemos realizado el test con 50 muestras mantenidas a 4C sin

conservantes, positivas a Cryptosporidium por ZN modificado.
Hemos incluido 25 controles negativos, tanto de muestras sin parsitos,
como positivas a otros organismos: Giardia lamblia, Entamoeba coli,
Endolimax nana, Blastocystis hominis, Trichuris trichiura, Ascaris
lumbricoides y Strongyloides stercoralis.
Para determinar el umbral de deteccin de la prueba, hemos realizado
diluciones sucesivas de heces positivas mezcladas con heces negativas a
Cryptosporidium en cinco muestras, y medido la ltima concentracin
detectada y la primera no detectada mediante microscopia de
fluorescencia.

De los controles negativos, todos ellos resultaron verdaderos

negativos con una especificidad del 100%.
La prueba es capaz de detectar concentraciones de 1.000
ooquistes/ml, que corresponden a 10.000 ooquistes/g de heces .

TEST DE INMUNOCROMATOGRAFIA
ZIEHL-NIELSEN

POSITIVOS

NEGATIVOS

POSITIVOS

49

NEGATIVOS

25

Lnea de validacin
Lnea de deteccin

SENSIBILIDAD = 98 %

1. Positivo
2. Positivo dbil
3. Negativo

ESPECIFICIDAD = 100 %

CONCLUSIONES
CONCLUSIONES
1La
1La concentracin
concentracin de
de ooquistes
ooquistes /g
/g de
de heces
heces excretados
excretados por
por los
los pacientes
pacientes suele
suele estar
estar por
por encima
encima de
de los
los rangos
rangos de
de detecci
deteccin
n de
de la
la
prueba,
prueba, lo
lo que
que hace
hace que
que su
su sensibilidad
sensibilidad sea
sea muy
muy alta.
alta. La
La especificidad
especificidad es
es del
del 100%.
100%.
2Los
2Los resultados
resultados obtenidos
obtenidos indican
indican que
que el
el test
test de
de Crypto-strip
Crypto-strip (Coris
(Coris BioConcept)
BioConcept) puede
puede ser
ser un
un sistema
sistema alternativo
alternativo til
til para
para la
la deteccin
deteccin
de
de C.
C. parvum
parvum en
en heces
heces de
de una
una forma
forma rpida,
rpida, con
con resultados
resultados en
en menos
menos de
de 10
10 minutos,
minutos, yy fcil
fcil de
de interpretar,
interpretar, sin
sin necesidad
necesidad de
de personal
personal
especializado
especializado para
para su
su realizacin.
realizacin.

BIBLIOGRAFA
1- Depierreux, C., Leclipteux,T. 2000. Comparison of an immunochromatographic test with ELISA to detect Cryptosporidium parvum in stools specimens. Seventh Conference of
the Federation of Infection Societies. Manchester, United Kingdom.

VII Congreso Ibrico de Parasitologa . Oporto 18-21 de septiembre de 2001