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Cocos!
Camila Alejandra Daz Beltrn

Yenny Alejandra Beltrn Rodrguez

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RESUMEN
Se busc observar clulas procariotas presentes en cultivos especficos y
conocer algunas de las tcnicas y tinciones utilizadas para su reconocimiento e
identificacin. Para ello se utilizaron dos medios de cultivo, uno expuesto en un
bar y otro en una habitacin; tambin se trabajo con microorganismos
presentes en un yogurt. Todos estos reconocidos a travs de tincin de Gram.
ABSTRAC
One sought to observe cells procariotas present in specific cultures and to
know some of the technologies and tints used for his recognition and
identification. For it two means of culture were in use, one exposed in a bar and
other one in a room; also I am employed with present microorganisms at a
yogurt. All these recognized across Gram's tint.

PALABRAS CLAVE

Cocos: Clasificacin morfolgica bacteriana

Tincin: Tcnica de coloracin auxiliar
KEYWORDS

Coconuts: morphologic bacterial classification

Tint: Technology of auxiliary coloration

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INTRODUCCIN
Las bacterias son microorganismos
unicelulares que para desarrollarse
necesitan
una
temperatura
adecuada, nutrientes, humedad,
acidez (pH) y tiempo suficiente. Se
presentan en distintas formas, las
bacterias con forma de bastn
reciben el nombre de bacilos, las
que presentan forma espiral se
denominan espirilos y las bacterias
esfricas se llaman cocos, estos
segn su concentracin pueden
ser cocos, diplococos, estreptococos
o
estafilococos,
apareciendo
individualmente, dos unidos,
en
cadena
o
en
agrupaciones
respectivamente.
La tincin de Gram es un sistema de
clasificacin de las bacterias que
utiliza
las
diferencias
en
la
composicin de su pared celular,
pone de relieve estas diferencias
identificando las bacterias como
Gram positivas y Gram negativas.
Tras la tincin, las bacterias Gram
positivas retienen el tinte y se

colorean de violeta, mientras que

las bacterias Gram negativas liberan
el tinte y se tien de color rosado.
Las especies Gram positivas tienen
paredes celulares ms gruesas que
las Gram negativas. Este mtodo de
identificacin recibe el nombre por
Hans Christian Joachim Gram, el
mdico dans que lo desarroll en
1884. Identifica principalmente la
diferencia estructural de la pared
celular por la concentracin en la
presencia de peptidoglucano que
haya en ella, siendo de mayor
presencia las Gram positivas que las
Gram negativas
y siendo el
causante
de
la
liberacin
o
retencin de la tincin. La tincin
est compuesta por 1 parte de
yodo, 2 partes de yoduro potsico y
300 partes de agua. Algunas
bacterias
presentan
capacidad
variable de tincin de Gram y se
llaman Gram variables.

MATERIALES Y METODOS
Para la realizacin de esta prctica de laboratorio contamos con los siguientes
materiales: yogurt, cultivo de bacterias, lminas y laminillas, microscopio, asa
bacteriolgica, mechero de alcohol, y reactivos como: solucin de cristal
violeta, solucin de lugol, solucin de fucsina, alcohol-acetona, alcohol
cloroformo, azul de metileno y agua destilada.
1 Material encontrado en la caja de Petri.

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El primer paso que realizamos fue tomar una muestra del cultivo de bacterias
con un asa bacteriolgica que esterilizamos previamente con el mechero de
alcohol, realizamos el extendido y fijamos el material al portaobjeto para evitar
que sea arrastrado en el proceso de tincin, para ello, lo pasamos 3 4 veces
por la llama del mechero de alcohol; el siguiente paso fue colocar el preparado
sobre un puente de coloracin y cubrimos la superficie con solucin de cristal
violeta y la dejamos actuar por 5 minutos, pasado este tiempo, lavamos la
preparacin con agua destilada y cubrimos el preparado con solucin de lugol
por 5 minutos y nuevamente lavamos con agua destilada.
Sostuvimos el portaobjetos entre el pulgar y el ndice y baamos la superficie
con unas gotas de decolorante alcohol-acetona hasta eliminar el exceso de
colorante violeta aproximadamente por 10 segundos y lavamos nuevamente
con agua destilada.
Colocamos nuevamente la placa preparada sobre el puente de coloracin y la
cubrimos con fucsina (colorante de contraste) durante 5 minutos y lavamos
con agua destilada, dejamos secar el extendido y lo examinamos al
microscopio con objetivo de inmersin (100x).
2 Observacin de las bacterias de Yogur.
El primer paso que realizamos para la observacin de las bacterias en el yogur
fue tomar una pequea muestra de yogur con un asa se siembra y la
mezclamos sobre un portaobjeto con una gota de agua, hicimos la respectiva
extensin de la muestra y la dejamos secar, luego flameamos ligeramente el
portaobjeto sobre el mechero de alcohol por la cara opuesta a la que tiene la
muestra.
Lavamos la preparacin con una mezcla de alcohol-cloroformo para arrastrar
las gotas de grasa del yogur y dejamos secar al aire, luego, aplicamos el
colorante azul de metileno durante cinco minutos, lo lavamos con agua
destilada para eliminar el exceso de colorante y lo dejamos secar nuevamente.
Finalmente observamos en el microscopio con mayor aumento.
RESULTADOS
En la Figura 1. Encontramos la caja
de petri con el cultivo de bacterias y
el asa con la que tomamos la
muestra respectiva.

Figura 1. Cultivo de bacterias y asa

bacteriolgica.

En la Figura 2. Observamos la
muestra que tomamos del cultivo de
bacterias en el portaobjeto.

Figura 3. Preparacin con cristalvioleta.

En la Figura 4. Encontramos la
preparacin cubierta con solucin
de lugol.

Figura 4. Preparacin con solucin

de Lugol.
Figura 2. Muestra de cultivo de
bacterias en portaobjeto.

En la Figura 3. Encontramos la
preparacin sobre un puente de
coloracin con la solucin de cristalvioleta.

En la Figura 5. Notamos cmo se

lava la preparacin con agua
destilada.

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Figura 5. Lavado de preparacin
con agua destilada.
En la Figura 6. Encontramos la
preparacin con el colorante de
contraste (Fucsina).

Figura 8. Preparacin a 100x.

En la Figura 9. Encontramos otra
imagen de la muestra del cultivo de
bacterias al microscopio.

Figura 6. Preparacin con Fucsina.

En la Figura 7. Encontramos las
preparaciones luego de aplicar toda
la tcnica de tincin de Gram.

Figura 9. Preparacin de cultivo de

bacterias al microscopio.

Figura 7. Preparaciones con

tcnica de tincin de Gram.

BACTERIAS DE YOGUR.

En la Figura 10. Encontramos la

imagen de la preparacin de yogur
al microscopio.

En la Figura 8. Encontramos la
imagen de la preparacin observada
al microscopio con un aumento de
100x.

Figura 10. Preparacin de Yogur al

microscopio.

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En la Figura 11. Encontramos la
imagen de otra muestra de
bacterias en el yogur al microscopio.

Figura 11. Muestra de yogur al

microscopio

En la Figura 12. Encontramos otra

de las preparaciones de yogur al
microscopio.

Figura 12. Otra muestra de yogur

al microscopio.

ANALILSIS DE RESULTADOS
Se pudieron observar gran cantidad
de cocos, diplococos y estafilococos,
escasos estreptococos. Estos dos
ltimos
se
presentaron
como
bacterias Gram positivas en su
totalidad, lo que nos denota una
gran
concentracin
de
peptidoglucano en su pared celular.
Los cocos por su parte, presentaron
mayor variabilidad entre Gram
positivos y Gram negativos, estos
de tonalidad roja por su baja

concentracin de peptidoglucano en
la estructura celular.
En
el
desarrollo
de
la
experimentacin
se
debieron
preparar varias muestras, esto
debido a que no se lograba
visualizar nada de manera clara,
probablemente porque haba mayor
presencia del medio de cultivo que
de bacterias en s en el montaje,
obstaculizando el paso de la luz.

CONCLUSIONES

Los
estreptococos
y
estafilococos
son
Gram

positivos por su forma de

agrupacin

La
mayora
de
microorganismos
presentes
en el yogurt eran Gram
positivas y muy pocas Gram
negativas, por lo que se
puede decir que el yogurt
tena una alta concentracin
de peptidoglucano.
El barrido para el montaje de
una muestra debe ser bien

extendido para permitir el

paso de la luz y la optima
visualizacin de la misma.
Estamos
en
constante
contacto
con
microorganismos
de
diferentes
caractersticas,
desde los lugares en los que
estamos hasta los alimentos
que consumimos.

BIBLIOGRAFIA

Gerard J. Tortora,Berdell R.
Funke,Christine L. Case.2008.
Introduccin
a
la
microbiologa.

Enciclopedia Encarta 2009.

Microsoft Corporation.
Bacterias.