Relatrio 1 - Extrao e visualizao de DNA da banana a olho nu

Ala Conceptual
Teoria
Teoria Celular
Princpios
Universabilidade e variabilidade da
molcula de DNA.
Conceitos:

Membrana celular

Membrana nuclear

DNA

Nucleoplasma

Citoplasma

Organelos

Clula eucaritica vegetal

Material
- Bananas
-gua
- Sal de cozinha
- Detergente de loia
- lcool etlico
- Almofariz
- Gobels
- Bisturi
-Funil
-Papel de filtro
-Palitos/varetas vidro

Ala Metedolgica

Extrao de
DNA
Procedimento
1. Descasque a banana e corte-a em pedaos, colocando no
almofariz.
2. Junte-lhe 50 ml de gua temperatura ambiente, e uma colher
de sal e misture.
3. Misture toda a soluo no almofariz e triture, durante cerca de
10 minutos.
4. Com o papel de filtro e funil, filtre a mistura resultante para um
gobel.
5. Misture ao filtrado, lentamente para no fazer bolhas, trs
colheres de detergente.
6. Adicione depois lcool soluo, numa quantidade prxima do
filtrado, tambm lentamente,
fazendo-o escorrer pelas paredes do gobel. No misture o lcool
com a soluo, de modo a que este permanea
como uma camada isolada no topo da soluo.
7. Aguarde 5 minutos.
8. Observe a formao de filamentos de DNA e protenas que se
precipitam no limite da camada de lcool.
Com um palito retire estes filamentos de DNA para uma placa de
Petri.
Observaes
Tivemos algumas dificuldades na triturao, pois o almofariz no
tinha as dimenses adequadas.
A filtrao foi muito demorada.
O filtrado que obtivemos estava em menor quantidade que o
indicado no protocolo.
Devido menor quantidade de filtrado, tivemos de adaptar as
quantidades dos restantes reagentes.
O DNA depositou-se no fundo do gobel, em vez de ficar
superfcie do lcool.

Concluses/Resultados
O DNA das clulas localiza-se fundamentalmente no ncleo
das clulas. O DNA contm a informao gentica.
A triturao serviu para romper as paredes celulares
e as membranas citoplasmticas, libertando o contedo
celular. Contudo devido s pequenas dimenses dos
ncleos das clulas, estes e consequentemente o DNA que
se encontra encerrado dentro deles permanecem intactos.
A adio de sal proporcionou ao DNA um ambiente
favorvel, visto que o sal contribuiu com ies positivos que
permitiram neutralizar a carga negativa do DNA.
A filtrao possibilitou separar as paredes celulares e
membranas citoplasmticas do restante contedo celular,
nomeadamente dos ncleos.
Atravs da aplicao de detergente foi possvel penetrar na
estrutura das membranas e separar as molculas de
fosfolpidos que a constituem, desintegrando-a e
permitindo que se liberte o DNA e as protenas.
As molculas de DNA agregam-se formando filamentos
espessos e comprimidos, tornando-se mais visveis.
No lcool etlico com a concentrao e temperatura usadas
na experincia, o DNA no se dissolve. O lcool como
menos denso que a gua. Logo dispem-se numa camada
cima desta. O DNA tambm menos denso que o resto das
estruturas celulares que se depositam no fundo do copo, ao
contrrio deste que flutua no lcool. Assim, o DNA
encontra-se individualizado e agregado de maneira a que se
possa ver a olho nu, visto que se tratam de uma imensa
quantidade de molculas de DNA. Se esta quantidade no
fosse grande, no seria possvel a sua visulaizao d, dada a
microscopidade destas molculas.