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AGAR R2A

O-P.PD-202
Versin 1

Medio solido para la enumeracin de microorganismos

heterotrficos en aguas tratadas.

mas efectivo. Las placas pueden ser protegidas contra la

deshidratacin.
CONTROL DE CALIDAD

FORMULA
Peptona proteosa
Caseina hidrolizada (tryptona)
Extracto de levadura
D(+) - Glucosa
Almidn
Piruvato de sodio
Dipotasio hidrgeno fosfato
Sulfato de Magnesio (anhidro)
Agar

0.50 gr
0.50 gr
0.50 gr
0.50 gr
0.50 gr
0.30 gr
0.30 gr
0.024 gr
15.0 gr

pH final 7.2 +/- 0.2

FORMA DE ACTUACIN
El Agar R2A fue propuesto en 1979 por Reasoner and
Geldenreich y pocos aos mas tarde aceptado por el
APHA como un medio alternativo para la enumeracin de
clulas estresadas en agua potable tratada.
El uso de este medio, rico en nutrientes como el PCA
(Agar Plate Count) y TSA (Agar Tripticasa de Soya),
permiten
el
crecimiento
de
la
mayora
de
microorganismos, pero no permiten la recuperacin de
clulas estresadas o microorganismos resistentes al
Cloro. Usando un medio como el R2A con pocos
nutrientes en combinacin con una baja temperatura y un
perodo de incubacin prolongado, es posible inducir la
resucitacin de esas clulas daadas.
En el Agar R2A la fuente de nitrgeno es la peptona y el
extracto de levadura provee las vitaminas y los factores
de crecimiento. La fuente de carbono es la dextrosa y el
sulfato de magnesio y el fosfato de potasio mantienen la
presin osmtica. El almidn es un desintoxicante y el
Piruvato de sodio incrementa la recuperacin de clulas
estresadas. EL agar acta como agente solidificante.
TECNICA
Las muestras de agua deben ser procesadas tan pronto
como sea posible; si no es posible procesarlas antes de
las primeras 6 horas, debe refrigerarse, pero no por mas
de 30 horas.
El Agar R2A puede ser usado en placas o filtracin. El
mtodo en placa puede afectar la capacidad de
recuperacin del medio debido al choque trmico cuando
se mezcla el agar fundido con la muestra.
La incubacin a 35C por un perodo de 3 5 das es
recomendado. En la mayora de los casos, una
temperatura de incubacin de 20 28C por 5 7 das, es

Microorganismo
Bacillus subtilis
ATCC 6633
S. aureus
ATCC 25923
P. aeruginosa
ATCC 9027
E. coli
ATCC 25922
C. albicans
ATCC 10231

Crecimiento
Productividad > 0.70
Productividad > 0.70
Productividad > 0.70
Productividad > 0.70
Productividad > 0.70

CONSERVACION: Las placas se conservan entre 4 y 12

C en su empaque original hasta la fecha de vencimiento,
protegidas de la luz directa. La Duracin de las placas
desde su produccin es de 3 meses.

DISPOSICIN FINAL Y PRECAUCIONES EN LA

MANIPULACIN
La inoculacin de un medio de cultivo con bacterias,
deliberadamente o accidentalmente, lleva al crecimiento
rpido de estos en el medio, y altas concentraciones de
cualquier microorganismo son potencialmente peligrosos,
y deben ser descartados de manera segura y por mtodos
aprobados, como la inactivacin en hipoclorito de sodio a
5000 p.p.m. por no menos de 4 horas, descartando luego
los agares en sus cajas contenedoras en doble bolsa roja
para luego descartarlo como material de riesgo biolgico;
o por autoclavado, sin remover previamente el agar,
colocando todo el contenido en bolsa roja doble y ser
luego descartado como material de riesgo biolgico.
Todos los medios de cultivo deben ser manipulados por
personal calificado y que hayan sido entrenados en
procedimientos y tcnicas microbiolgicas.
PRECAUCION!!
Examine la fecha de vencimiento y signos de
quebraduras de las cajas.
Examine los medios preparados antes de uso.
Observe cualquier evidencia de contaminacin,
burbujas en la superficie del agar, mal llenado,
cambios de color, hemlisis y signos de
deshidratacin y prdida de volumen o
hendiduras en la superficie.
Despus de abierto el Rack de 10 unidades, debe
usarse durante la semana siguiente para evitar
posible contaminacin.

***INFORMACIN TCNICA A PARTIR DE BASE

DESHIDRATADA***