Manual de Micología

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LICENCIATURA: QUMICO FARMACOBILOGO
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA
MANUAL DE PRACTICAS DEL

LABORATORIO DE MICOLOGIA
INTEGRANTES:
MSP. MA DE LA CRUZ MENESES SANCHEZ
MEC. ANA BERTHA ESCOBEDO LOPEZ
MC.
PATRICIA
GUADALUPE
SUAREZ
ALBORES
D.C. ANA MARTA DE LOS ANGELES LOBO
SANCHEZ
MC. ALEJANDRO RUIZ TAGLE

INDICE
Prctica No. 1 Seguridad en el Laboratorio
Prctica No. 2 Aislamiento y siembra de hongos en placa y tubo
Practica No. 3 Reconocimiento de estructuras bsicas de los hongos
Practica No. 4 Estructuras de reproduccin asexual en hongos saprfitos
12
Prctica No. 5 Identificacin macro y microscpica de hongos saprfitos

ms frecuentes
15
Prctica No. 6 Dermatofitos (Tias)
18
Prctica No. 7 Identificacin macro y microscpica de Dermatofitos
22
Prctica No. 8 Cromomicosis y Esporotricosis (Micosis subcutneas)
25
Prctica No. 9 Criptococosis (Micosis oportunistas)
28
Prctica No. 10 Candidiasis (Micosis oportunistas)
31
Prctica No. 11 Aspergilosis (Micosis oportunistas)
37
Prctica No. 12 Accin fungicida de desinfectantes utilizados en la

Eliminacin de hongos en superficies inertes
39
Bibliografa
41

Prctica No. 1
Seguridad en el Laboratorio
Introduccin
Los laboratorios de Micologa son ambientes especiales con respecto a la seguridad de
aquellos que trabajan en ellos, las muestras clnicas de pacientes recibidas para su estudio
significan un riesgo para el personal debido a los agentes infecciosos que pueden contener.
Los cultivos de agentes infecciosos producto de muchas de las actividades del
miclogo clnico tambin constituyen una amenaza.
La educacin del personal que manipula a diario los agentes potencialmente
infecciosos y la educacin por medio de avisos sobre riesgos biolgicos, as como
instrucciones escritas y verbales de aquellos que solo tienen una exposicin limitada al
ambiente del laboratorio son las medidas disponibles ms importantes para prevenir las
infecciones adquiridas en el laboratorio, los riesgos de un laboratorio de Micologa pueden
extenderse a laboratorios adyacentes.
Adems del riesgo por infeccin los laboratorios de Micologa tambin estn
expuestos a todos los riesgos asociados a cualquier ambiente de laboratorio como incendio,
riesgos elctricos, qumicos, materiales radiactivos, mal funcionamiento de los equipos,
peligros dependientes de desastres naturales, situaciones ambientales como pisos
deslizantes, sistemas de circulacin de aire deficiente.
Se debe poseer un manual de seguridad que contenga informacin sobre la conducta
a seguir en caso de una contingencia.
Objetivo
Dar a conocer a los alumnos a travs de un seminario las reglas de seguridad a
seguir durante el desarrollo de las prcticas a realizar.
3
Tcnicas a emplear
Exposicin oral del tema utilizando material didctico (acetatos, diapositivas)
Material a emplear.
Acetatos y diapositivas
Desarrollo de la prctica
1. Exposicin oral
2. Ronda de preguntas
3. Aclaracin de dudas
Reporte
Resumen de lo expuesto durante el Seminario
Cuestionario
1. Defina que es seguridad
2. En un laboratorio que factores pueden alterar la seguridad
3. Que pasos se deben seguir para establecer la seguridad
4. De los factores que pueden alterar la seguridad cual considera el ms importante
5. Una breve crtica acerca del tema

Prctica No. 2
Aislamiento y siembra de hongos en placa y tubo
Introduccin
La mayora de los alimentos y productos agrcolas, son invadidos por diversos
microorganismos durante su desarrollo y su almacenamiento, siendo los hongos los ms
abundantes y la principal causa de los procesos de putrefaccin de los alimentos y de los
granos, ocasionando severas prdidas econmicas.
Algunos hongos se encuentran como flora normal de diversas cavidades y mucosas
del organismo humano, as como estn presentes en el suelo y las plantas, donde se
considera que tales sitios son su hbitat normal.
Objetivo
El alumno se familiarizar y aprender a manejar las diversas tcnicas de
aislamiento y siembra de hongos para su posterior identificacin.
Tcnicas a emplear
A) Tcnica de dilucin y vertido en placa (sustratos slidos o lquidos muy
contaminados).
1. Preparar de 4 a 5 tubos con 9 mL de agua destilada, o bien, solucin salina
isotnica, esterilizar y numerar del 1 al 5.
2. Se suspende en el tubo 1, un mL, o bien, un gramo de alimento muestra a analizar.
3. Homogenizar perfectamente la prueba.
4. Con ayuda de una pipeta estril, tomar 1 mL del tubo 1 y traspasarlo al tubo 2; con
otra pipeta estril, se toma una alcuota de 1 mL y se lleva al tubo 3; as
sucesivamente hasta llegar al tubo 5.
5. De las dos ltimas, tomar 1 mL de cada una y depositarlos respectivamente en las
placas de Petri estriles y vacas.
6. Adicionar aproximadamente 20 mL del medio PDA o SDA, estril, fundido y
enfriado a 45C.
7. Homogenizar por rotacin de las placas sobre la mesa.
8. Dejar solidificar e incubar a 28C por 4 a 5 das.
9. Hacer observaciones cada 48 h hasta la aparicin de colonias caractersticas de
hongos.
B) Tcnica de siembra por puntos en placa o tubo (sustratos slidos poco

contaminados).
1. Fragmentar dentro de una placa el material a estudiar.
2. Con la ayuda de asas micolgicas flameadas y estriles distribuir de 4 a 5
fragmentos de la muestra sobre la superficie de una placa de Petri con medio
SDA o PDA (si utiliza tubo distribuya de 2 a 3 fragmentos de la muestra sobre
la superficie del pico de flauta).
3. Incubar a 28C durante 3 a 4 das observando el desarrollo alrededor de los
fragmentos cada 48 h.
C) Tcnica de exposicin de placa (medio ambiente).

1. Distribuir placas con medio SDA o PDA en los sitios donde se desee hacer el
aislamiento.
2. Destaparlas y exponerlas al ambiente de 5 a 10 min, taparlas.
3. Incubar a 28C durante 4 a 5 das y observando cada 48 h hasta la aparicin de
colonias de hongos.
Material a emplear
1. Suelo.
6
2. Refrescos embotellados.
3. Granos (arroz, trigo, frjol, etc.)
4. Alimento (chocolate, yogurt, queso, etc.)
5. Placas con medio SDA o PDA.
6. Tubos con tapn de rosca con medio SDA o PDA.
7. Tubos con solucin salina isotnica, o bien, agua estril.
8. Placas de Petri y pipetas de 1 mL estriles.
PDA= Papa Dextrosa Agar.

SDA= Sabouraud Dextrosa Agar.
1. Proceder al aislamiento de hongos por la tcnica de dilucin y vertido en placa.
2. Proceder al aislamiento de hongos por la tcnica de puntos en placa o tubo.
3. Proceder al aislamiento de hongos por la tcnica de exposicin de placas.
Cuestionario
1. Defina el trmino aislamiento
2. Cules son las tcnicas de aislamiento para hongos?
3. Cul es la composicin qumica de los medios de cultivo para hongos?
4. Cmo define un hongo contaminante?
5. Cul es la temperatura adecuada de crecimiento de un hongo?
6. Menciona si la muestra estaba libre de contaminacin, en caso de haber estado

contaminada por hongos o levaduras menciona cuantas colonias aislaste por mL de
muestra.

Prctica No. 3
Reconocimiento de las estructuras bsicas de los hongos
Introduccin
La mayora de los que deben relacionarse con la rama micolgica, a menudo se sienten
confundidos y desalentados en sus tentativas para estudiar los hongos debido a la gran
variacin en el aspecto macroscpico de las colonias, a la multiplicidad de las estructuras
microscpicas y a la nomenclatura poco conocida.
Sin embargo, estas dificultades son ms psicolgicas que reales y cuando se llegan a
dominar unos cuantos conceptos bsicos basados en las morfologas macroscpica y
microscpica, la identificacin de los hongos resulta ms fcil y rpida que en otras
bacterias ordinarias.
Los hongos emiten una o ms prolongaciones tubulares llamadas tubos germinales o
tambin llamadas hifas, que se alargan por el crecimiento de su extremo distal. La hifa
puede dividirse por formacin de paredes transversales a intervalos regulares.
Las hifas divididas por tabiques se denominan hifas tabicadas, sin embargo algunos
hongos no desarrollan tabicaciones en las hifas y se denominan no tabicadas o cenocticas.
Finalmente, el conjunto de hifas desarrollan lo que se conoce como micelio, la
diferenciacin de los hongos se basa principalmente en su aspecto colonial y morfologa
microscpica.
A) La morfologa colonial se basa en los siguientes parmetros:

a. Aspecto
b. Consistencia.
c. Pigmentacin de la colonia.
d. Difusin de pigmento al medio.
8
e. Luz reflejada.
f. Luz transmitida.
g. Bordes.
B) Morfologa microscpica ( referente al micelio )
a. Tabicado o septado.
b. Cenoctico.
c. Hialino.
d. Pigmentado (fugilaginoso, carotenoide )
e. Macrosifonado
f. Microsifonado.
Objetivo
El alumno ser capaz de diferenciar las colonias de los hongos y los diversos tipos
de estructuras bsicas, como por ejemplo, el micelio por medio de tcnicas de observacin
en fresco o directa y algunas preparaciones facilitadas por el profesor, valorando estos
parmetros como fundamentales en la identificacin de los hongos.
Tcnicas a emplear
A) Tcnica de resiembra en tubo.
1. Con el asa micolgica en ngulo de 90 tomar un pequeo fragmento de loas
colonias con morfologa diferente y depositarlo en un tubo con medio inclinado
PDA o SDA.
2. Incubar a 28C.
3. Observar cada 40 h el desarrollo de las colonias.
B) Tcnica de observacin microscpica en fresco.

1. Sobre un porta objetos depositar una gota de colorante azul de algodn lactofenol.
2. Con el asa micolgica tomar un pequeo fragmento de la colonia y colocarlo sobre
el porta objetos.
3. Agregar una gota de alcohol al 70% (esto es necesario solo en el caso de hongos con
esporulacin abundante).
4. Dilacerar el fragmento de la colonia con ayuda da agujas de diseccin o bien con la

misma asa micolgica.
5. Colocar sobre la preparacin un cubre objeto evitando formar burbujas de aire.
6. Observar al microscopio a seco dbil y seco fuerte, nunca usar aceite de inmersin.
Material a emplear
1. Colonias de hongos aisladas en la prctica anterior.
2. Colonias de hongos proporcionadas por el profesor.
3. Tubos con medio PDA o SDA.
4. Colorante azul de algodn.
5. Preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.
6. Porta y cubre objetos.
1. Observar las colonias aisladas de los sustratos (prctica # 1).
2. Escoger diferentes tipos de colonias y resembrarlas en tubos con medio PDA o
SDA.
3. Observar comparativamente las caractersticas macroscpicas de las colonias
desarrolladas.
4. Hacer preparaciones en fresco con azul de algodn lactofenol de las colonias
aisladas resultando de la prctica anterior.
5. Observar comparativamente el micelio de las muestras aisladas
con las
preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.
Dibujos:
a)
Hifa.
b)
Micelio.
c)
Micelio macrosifonado septado.
d)
Micelio macrosifonado cenoctico.
e)
Micelio septadofugilaginoso.
f)
Micelio microsifonado.
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Descripcin macroscpica de las cepas tipo proporcionadas por la responsable del

laboratorio.
Cuestionario
1. Defina el trmino hifa y micelio
2. Mencione la clasificacin del micelio segn:

a.- Funcin
b.- Dimetro
c.- Continuidad
d.- Coloracin
3. Por la morfologa macroscpica y microscpica, cmo puede ser un hongo?
4. Cmo fue el crecimiento obtenido de la prctica anterior?

5. Mencione los parmetros utilizados en la lectura de morfologa colonial de hongos
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Prctica No. 4
Estructuras de reproduccin asexual en hongos saprfitos
Introduccin
La espora se refiere a un rgano que tiene como funcin la multiplicacin del hongo, las
esporas tienen una forma definida que puede ser redonda, ovalada, ms o menos larga etc.
Pueden ser unicelulares o pluricelulares; su tamao vara de 2 a varias decenas de
micras, su pared es sencilla o doble. Las esporas asexuadas se forman ya sea en el interior
de un saco por lo que se conoce como endosporas o en el exterior conocindolas como
exosporas, fijadas a la extremidad o sobre el trayecto de una hifa.
Tambin pueden ser producidas por rganos especiales, al ser puestas en libertas las
esporas pueden multiplicarse y dar origen a una colonia. Las esporas asexuadas son el
resultado de la transformacin de la hifa, sin el concurso de fenmenos sexuales y se
dividen en tres grupos:
A) Talosporas que a su vez se subdividen en:

a)
Artrosporas.
b)
Blasrtosporas.
c)
Dictiosporas.
d)
Clamidosporas.
e)
Aleuriosporas.
B) Conidiosporas.
C) Esporangiosporas.
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Objetivo
Que el alumno se introduzca en el conocimiento bsico de las diferentes estructuras

de reproduccin asexual, parmetro bsico e importante en la identificacin microscpica
de los diferentes hongos filamentosos y levaduriformes.
Tcnicas a emplear
Preparacin de placas para microcultivo.
1. Seleccionar placas Petri de 20 x 100 mm.
2. Colocar dentro de la placa un crculo de papel filtro.
3. Sobre el crculo de papel colocar una varilla de vidrio de 8 mm de dimetro doblada
en V.
4. Sobre la varilla colocar un porta y un cubre objetos (22 x 22 mm).
5. Esterilizar las placas as preparadas.
6. Colocar glicerol al 10% estril.
7. Formol al 10%.
8. Pinzas, pipetas estriles.
9. Placa con medio de cultivo SDA o PDA (se deber seccionar en cuadros pequeos
en una zona estril).
Material a emplear
1. Colonias de hongos aisladas en la prctica anterior.
2. Colonias de hongos proporcionadas por el profesor.
3. Cultivos de Candida albicans en medio de Agar Harina de Maz o medio para
clamidosporas.
4. Preparaciones fijas proporcionadas por el profesor
1. Realizar la tcnica de microcultivo a partir de las colonias obtenidas en tubo.
2. Observar y comparar al microscopio los diversos tipos de esporas asexuales en
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3. Hacer los dibujos y anotar en nombre del hongo correspondiente:

a)
Artrosporas.
b)
Blastosporas.
c)
Clamidosporas.
d)
Esporangiosporas.
e)
Conidiosporas.
f)
Macroconidias.
g)
Dictiosporas.
h)
Fialosporas
Cuestionario
1. Defina el termino espora
2. Mencione los grupos de esporas por las cuales se reproducen los hongos
3. Un hongo filamentoso, porque tipo de esporas se reproduce?
4. Una levadura, porque tipo de esporas se reproduce?
5. Qu tcnica se utiliza para la observacin microscpica de las esporas?
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Prctica No. 5
Identificacin macro y microscpica de los hongos saprofitos ms
frecuentes
Introduccin
La presencia de hongos en alimentos y productos alimenticios no es una novedad, se
conoce desde hace mucho tiempo y de hecho estos hongos, levaduras o mohos han sido
utilizados para alterar de manera deseable el sabor y olor de algn alimento (maduracin de
quesos y carnes, produccin de vinos y cerveza). Los hongos tambin se conocen como
deterioradores de los alimentos, actualmente existen ciencias especializadas en el estudio de
los hongos, ya que stos han demostrado gran relevancia en las reas mdica, alimenticia,
agrcola, etc.
En el rea mdica por los diversos cuadros clnicos que producen en el humano,
causando hasta la muerte (esto es cuando no se lleva a cabo un buen diagnstico de
laboratorio y mdico).
En el rea de la industria alimenticia posee gran valor como
contaminantes de materia prima y producto terminado, causando en la mayora de los casos

perdidas econmicas a la empresa, o bien son utilizados como elementos de gran valor en la
produccin de diversas enzimas, antibiticos y vitaminas. En el rea agrcola, pueden
producir destruccin de cosechas, o bien se asocian a otros microorganismos del suelo
contribuyendo al logro de cultivos frondosos.
Los diferentes tipos de hongos saprfitos pueden entonces tener efectos nocivos o
bien aportar beneficios.
Objetivo.
Que el alumno establezca los diversos parmetros macro y microscpicos para la
identificacin propia y definitiva de los hongos saprfitos ms frecuentes.
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Material a emplear.
1. Preparaciones obtenidas a partir del microculivo.
2. Preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.
3. Cepas de hongos saprfitos proporcionados por el profesor.
Desarrollo de la prctica.
1. Desmontar la preparacin del microcultivo. Teir y sellar.
2. Hacer comparaciones microscpicas entre las preparaciones obtenidas por los
equipos y las preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.
3. Hacer los dibujos correspondientes a:
a. Rhizopus.
b. Mucor.
c. Aspergillus.
d. Penicillum.
e. Geotrichum.
f. Hormodendrum.
4. Describir la morfologa macroscpica de los hongos filamentosos.
5. Describir la morfologa macroscpica de los hongos levaduriformes.
Cuestionario
1. Qu parmetros se deben considerar para hacer una identificacin microscpica de
los hongos?
2. Anote la ficha de identificacin de los siguientes hongos
a. Rhizopus
b. Mucor
c. Aspergillus niger
d. Penicillum sp
e. Ulocladium sp
f. Alternaria sp
g. Sacharomyces cereviceae
h. Rodhotorula sp
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Prctica No. 6
Dermatofitos (tias)
Introduccin
Las tias constituyen un grupo de micosis causadas por hongos taxonmicamente
relacionados que afectan los tejidos queratinizados: piel, cabello, uas en el humano,
plumas, cuernos y piel de animales. Estos hongos pertenecen a numerosas especies
agrupadas en tres gneros: Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton.
Los hongos pertenecientes a estos gneros tienen como caracterstica comn la de
poseer enzimas queratinofilicas para atacar a la queratina presente en la piel y otras
estructuras del hospedero, por lo que se conocen con el nombre de dermatofitos y
dermatofitosis o tias a las enfermedades que ellos producen.
Los dermatofitos manifiestan su estado parasitario a travs de hifas ramificadas o
bien hifas con artrosporas, esta forma la adquieren en el tejido que atacan. En el estado
saprofito o vegetativo estos hongos presentan estructuras ornamentadas y variadas que se
toman como base para la diferenciacin entre diferentes gneros y especies a nivel
microscpico.
Objetivo
Familiarizar al alumno con las diversas tomas de muestras clnicas de acuerdo a la
zona afectada por los dermatofitos; instruirlo en el manejo de las tcnicas en fresco a travs
de la cual buscara el estado parasitario de los mismos en las diferentes muestras clnicas
Tcnicas a emplear
A) Obtencin de escamas.
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1. El laboratorista deber de proveerse de alcohol, gasa, lancetas estriles, placas de

Petri y un marcador.
2. Se localiza la parte afectada y se analiza macroscpicamente la lesin anotando si
hay o no descamacin, resequedad, si hay bordes, etc.
3. Se limpia la zona afectada con gasa y alcohol.
4. Se hace un raspado ligero con uno de los bordes de la lanceta (de ser posible obtener
fragmentos de la lesin con pinzas).
NOTA: Cuando el paciente es un nio y no resiste el raspado, o si la descamacin
no es visible, la muestra se toma adhiriendo a la piel un trozo de cinta "SCOTCH" y
retirndola de golpe, la cual se colocara en un porta objeto para su transporte y
observacin.
5. El producto de la lesin se recolecta en placas de Petri.
6. Se toman los datos del paciente escribindolos con marcador en la parte superior de
la placa.
7. En el laboratorio, con una parte de la muestra se realiza una preparacin en fresco
de la siguiente manera:
a)
Sobre un porta objetos agregar una gota de NaOH o KOH del 5 al 10%
(solucin aclarante).
b)
Se deposita un pequeo fragmento de muestra y se deja reposar por 10 min.
c)
Se deposita un cubre objetos sobre la preparacin, tratando de no formar

burbujas de aire y se deja reposar la muestra por 15 min.
d)
La preparacin se observa al microscopio con el objetivo seco dbil y seco

fuerte, tratando de buscar la fase parasitaria del hongo.
8. En zona de esterilidad junto a un mechero, la muestra clnica sobrante se siembra

por la tcnica de punto en placa y en tubos con medios de cultivo que contengan
SDA, PDA, Agar microbitico, etc.
9. Se encuban las placas a 28C durante 4 a 5 das haciendo la revisin de las siembras
cada 48 h hasta la aparicin de las colonias caractersticas.
B).- Tcnica del raspado de uas.

1. Se sienta al paciente en alto y se procede a limpiar la ua afectada con alcohol.
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2. El borde del dedo afectado se deposita sobre el margen de la placa de Petri.

3. Se raspa la ua con una navaja de afeitar nueva, yendo de la parte proximal a la
distal.
4. La muestra se recolecta en la caja de Petri y se tapa para su transporte.
NOTA: SI ms de una ua est afectada, se debe usar un equipo limpio para cada
ua (navajas limpias).
C).- Tcnica de obtencin de cabellos.

1. Examinar el cuero cabelludo del paciente.
2. Depilar con pinzas los cabellos afectados y al mismo tiempo colectar las escamas
que se encuentren sobre el cuero cabelludo.
3. Depositar las muestras sobre una placa de Petri estril y cerrarla.
4. Cuando el paciente es un nio que no resiste la depilacin los cabellos se toman con
una cinta "Scotch".
5. A partir de entonces se procede igual que en el paso # 7 de la primera tcnica
descrita en esta prctica.
Material a emplear
1. Diversas muestras clnicas parasitadas por dermatofitos.
2. Tubos con medio SDA, PDA, Micobiotico.
3. KOH o NaOH al 5-10%.
4. Cepas de:
a)
Trichophyton
(T.
mentagrophytes,
T.
rubrum,
T.
tonsurans,
T.
concentricum).
b)
Microsporum gypseum.
c)
Epidermophyton floccosum.
1. Hacer preparaciones en fresco con las muestras de pelo y/o escamas, de piel y/o
uas.
2. Buscar artrosporas e hifas ramificadas (fase parasitaria comn de los dermatofitos)
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3. Cultivar las muestras clnicas por la tcnica de punto en placa o en tubo, empleando
los diversos medios de cultivo.
4. Hacer microcultivo de las cepas tipo proporcionadas por el profesor.
5. 5.- Hacer la descripcin macroscpica de las cepas tipo proporcionadas por el
profesor.
Dibujos
Muestra positiva a fase parasitaria.
Descripcin macroscpica de las cepas tipo.
Cuestionario
1. Defina el trmino tia.
2. Por su topografa cmo se clasifican las tias?

3. Qu tcnicas se emplean en la toma de muestras para tias?
4. Qu solucin se emplea para realizar el en fresco de una muestra de tia?
5. Qu se debe observar en la preparacin en fresco para determinar que se trata de
una tia?
6. Hacer un reporte de la muestra utilizada con la siguiente informacin:
a) Tipo de muestra
b) Observaciones de la lesin
c) Microorganismo aislado
d) Conclusiones
20

Prctica No. 7
Identificacin macro y microscpica de los dermatofitos
Introduccin.
Se ha podido llegar a una clasificacin simplificada de los dermatofitos mediante el cultivo
de los mismos y la seleccin de ciertos caracteres morfolgicos especficos como criterios
para la diferenciacin entre gneros y especies.
Por este mtodo, Emmons demostr con claridad mxima que tan solo procede
considerar tres gneros: Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton, la diferenciacin de
los gneros y sus respectivas especies se basa en las caractersticas macroscpicas de las
colonias y en la morfologa microscpica.
Gnero Trichophtyon: Por examen macroscpico, la colonia tiene aspecto
algodonoso, pulverulento o polvoriento o velloso, liso o creo. La pigmentacin vara
notablemente, ya que en cultivo pueden ser blancos, rosados o rojos, purpreos, violetas,
anaranjados, amarillos o pardos. Puede presentarse pigmento difusible al medio, que se
aprecia al reverso de la placa o tubo; este pigmento puede variar del color beige al caf o
rojo vino intenso.
Por examen microscpico las macroconidias son raras o no existen en algunas
especies, a menos que el hongo se desarrolle sobre un medio de cultivo apropiado y se
observan como grandes estructuras fusiformes en mazo, de pared gruesa o lisa de 4 a 6
micras de ancho por 10 a 50 micras de longitud.
Pueden verse tambin otras estructuras como micelio en raqueta, clamidosporas y
cuerpos nodulares o hifas en espiral.
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Gnero Microsporum: En cultivo desarrollo un micelio areo, algodonoso, lanudo,

pulverulento o polvoriento, cuyo color vara del ante al blanco o matices ms intensos del
pardo.
Por examen microscpico, la pared espinosa de las macroconidias caracteriza al
gnero, puede ser pequea (de dos septos) o grande (de 6 a 12 septos), fusiforme u oval, de
pared gruesa o delgada, se presentan microconidias, se advierten tambin hifas septadas
similares a clamidosporas.
Gnero Epidermophyton: Por su aspecto macroscpico, los cultivos son
caractersticamente aterciopelados o pulverulentos, con surcos radiales ventrales y color
amarillo verdoso.
Por examen microscpico solo producen grandes macroconidias de pared delgada,
lisas, multitabicadas y en mazo. En el micelio se ven clamidosporas e hifas en raqueta, este
gnero solo incluye una especie (E. floccosum)
Objetivo
Familiarizar al alumno con los parmetros macro y microscpicos de los dermatofitos en
base a las cepas tipo.
Material a emplear
1. Microcultivos sembrados en la prctica anterior.
2. Cepas tipo proporcionadas por el profesor.
3. Formol al 10%.
5. Barniz de uas transparente.
Desarrollar la prctica
1. Hacer un anlisis macroscpico de los cultivos obtenidos a partir de la muestra
problema y cepas tipo proporcionales por el profesor.
2. Desmontar los microcultivos despus de haber desactivado con formol al 10% por
lo menos 45 min antes y hacer un anlisis microscpico comparativo con
3. Hacer la descripcin macroscpica de las cepas tipo proporcionadas por el profesor.
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Dibujos
a) Trichophyton tonsurans.
b)
Trichophyton rubrum.
c)
Trichophyton mentagrophytes.
d)
Microsporum gypseum.
e)
Epidermophyton floccosum.
Cuestionario
1. De la clasificacin con gnero y especie de Dermatofitos
2. Qu tipo de tejido atacan los Dermatofitos?
3. Cul es el sustrato que degradan los Dermatofitos?
4. Que poseen los Dermatofitos para poder degradar este sustrato?
5. En trminos generales cmo es la morfologa macroscpica de un Dermatofito?
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Prctica No. 8
Cromomicosis y esporotricosis
(micosis subcutneas)
Introduccin.
Esporotricosis, es una micosis generalmente subcutnea y benigna, pero que en raros casos
puede ser generalizada y mortal.
Afecta especialmente las extremidades superiores e inferiores y excepcionalmente
produce enfermedad pulmonar primaria al penetrar por va respiratoria.
La esporotricosis prevalece en campesinos, empacadores de alfarera y vendedores
de diversos zacates, la va de entrada es a travs de la piel, mediante un traumatismo
cutneo con espinas u otros objetos vegetales.
En su fase parasitaria, el hongo se observa como levaduras gemantes alargadas (en
forma de puro) o redondeadas de 3 a 10 micras de dimetro. En la fase saprobia el hongo
tiene micelio delgado (1 a 2 de dimetro), tabicado, ramificado, que esporula mediante
conidiforos en forma de flor de margarita.
El examen directo del pus no permite en general visualizar al hongo; raramente se
pueden observar las formas parasitarias en frotes de pus teidos por el mtodo de
Hotchkiss-Mac Manus.
El cultivo es el mejor mtodo diagnstico de la esporotricosis, mediante la siembra
del pus en placa con SDA, las colonias al principio son pequeas y blancas y crecen de
micelio areo; a medida que aumenta el crecimiento, la superficie de la colonia adquiere
aspecto hmedo, rugoso y membranoso, el color puede variar de crema al negro.
Cromomicosis, es una micosis verrucosa, crnica, de evolucin lenta, generalmente
se localiza en miembros inferiores. Se caracteriza por la formacin de ndulos cutneos
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verrucosos y lesiones ulcerocostrosas que a veces son pedunculadas, dando apariencia de

coliflor.
Es prevalente en campesinos del sexo masculino, especialmente en los que no
protegen sus pies adecuadamente de los traumatismos causados por plantas, en algunas
lesiones, el hongo se halla en las escamas, en el pus y los tejidos subcutneos a travs de
biopsias.
En el examen en fresco de estos productos biolgicos, se observan unas clulas
redondeadas de color castao y paredes gruesas, aisladas, o en grupos, llamadas
Corpsculos de Meddlar, en ocasiones, estas llamadas clulas fumagoides miden de 6 a 12
de dimetro y aparecen divididas transversalmente.
Esta micosis es producida por diversos hongos negros, todos pertenecientes al grupo
de los Dematiceos, entre los ms conocidos cabe citar al gnero Phialophora, que posee
una sola especie patgena: P. verrucosa, caracterizada por la produccin de filides en
forma de botella que producen esporas en su interior, las cuales son expulsadas por el
cuello de la filide, aparentando un florero
Cladosporium carrionil, nica especie considerada patgena, se identifica porque
slo puede esporular en forma de cladosporio, es decir, cadenas de conidias acroptalas de
longitud moderada.
El gnero Fonsecae comprende a las especies siguientes: F. pedrosoi, F. compacta,
F, dermatitidis, especialmente F. pedrosoi esporula de tres maneras diferentes: acrotecas,
cladosporios y por filides.
Acroteca, se caracteriza por la produccin de conidiforos semejantes a clavas, de
donde nacen las conidias en la punta y a los lados.
Objetivo
Familiarizar al alumno con el manejo y conocimiento macro y microscpico de las
cepas como agentes etiolgicos de la esporotricosis y cromomicosis.
Tcnicas a emplear
A. Tcnica de observacin directa o en fresco.
B. Tcnica de microcultivo (cepas tipo).
25
Material a emplear
1. Placas para microcultivo.
2. Placas con agar Saboraud seccionadas en cuadros.
3. Glicerol estril al 10%.
4. Formol al 10%.
5. Pipetas estriles.
7. Cepas proporcionadas por el profesor.
8. Porta y cubre objetos.
1. Sembrar microcultivo con las cepas tipo.
2. Hacer preparaciones directas a partir de las cepas tipo (es recomendable no usar
colorante para que se observe el tipo de micelio en el caso de los hongos
dematiceos).
3. Hacer la descripcin macroscpica de las cepas tipo.
Dibujos
a)
Sporothrix schenkii.
b)
Phialophora verrucosa.
c)
Fonsecae pedrosoi.
d)
Cladosporium carrionii.

Cuestionario
1. Cules son las micosis subcutneas mas frecuentes en Mxico?
2. Mencione los gneros que pertenecen al grupo de los Demateaceos
3. Los Demateaceos, cmo se observan al microscopio en su fase de levadura?
4. La morfologa macroscpica de un Demateaceo en general cmo es?
5. Mencione el tipo de esporulacin de cada uno de los Demateaceos
26

Prctica No. 9
Criptococosis
(Micosis oportunistas)
Introduccin
La criptococosis es una micosis oportunista que afecta primariamente a pulmones,
producindose una enfermedad que generalmente cursa en forma asintomtica, pudiendo
diseminarse a cualquier rgano de la economa, particularmente a meninges y sistema
nervioso central, donde produce meningitis subaguda o crnica.
El hongo fue aislado por primera vez por Emmons del excremento y nidos de
palomas; Sanfelice lo aisl del zumo de frutas.
El diagnstico de laboratorio se hace en base a los productos biolgicos como
esputo y lquido cefalorraqudeo, el hongo se manifiesta en el producto de la lesin como
un organismo en forma de levadura con pared gruesa y en gemacin, de 5 a 20 micras de
dimetro, rodeado por una cpsula ancha, refrctil.
Deben cultivarse todos los materiales en agar sangre a 37C y en agar Saboraud a
temperatura ambiente, puede aadirse cloranfenicol al medio para evitar la presencia de
bacterias en las muestras, pero nunca cicloheximida, dada la sensibilidad de Criptococcus
neoformasa la misma. Sobre agar glucosa Saboraud a temperatura ambiente, el organismo
crece con lentitud, produciendo colonias en forma de levadura que al principio pueden ser
blancas, rugosas y granulosas.
En las preparaciones macroscpicas se comprueba la presencia de organismos y
clulas en gemacin con tubos germinales, en la etapa de crecimiento no se advierte
cpsula, la colonia se desarrolla a 37C sobre agar Sabouraud con apariencia mucoide,
viscosa, de color crema a pardo, en su morfologa se observan levaduras encapsuladas al
teir con tinta china.
27
Objetivo
Familiarizar al alumno con la bsqueda de la fase parasitaria del hongo a travs de
la tincin con tinta china y que a la vez conozca la morfologa colonial macroscpica del
agente etiolgico.
Tcnicas a emplear
A. Obtencin de esputo.
B. Concentracin de esputo.
C. Obtencin de Lquido Cefalorraqudeo (es preferible que esta muestra sea obtenida
por un profesionista experto en la obtencin de dicho lquido).
CONCENTRACIN DEL LQUIDO CEFALORRAQUDEO.
1. Centrifugar la muestra a 2000 rpm durante 20 min.
2. Con pipeta Pasteur estril separar cuidadosamente el sobrenadante y pasarlo a un
tubo estril.
3. Utilizar el sedimento para las pruebas diagnsticas de rutina.
TINCIN NEGATIVA (con tinta china)
1. En un porta objetos poner una gota de tinta china.
2. Con un asa bacteriolgica poner una o dos asadas del sedimento (ya sea esputo o
LCR)
3. Poner un cubre objetos tratando de no formar burbujas de aire.
4. Montar la muestra y observar al microscopio a seco dbil y seco fuerte, tratando de
hallar la fase parasitaria del hongo.
Material a emplear
1. Frascos de boca ancha estriles.
2. Tinta china.
3. Asa bacteriolgica.
4. Porta y cubre objeto.
28
5. Pepsina al 1%.
1. Obtener muestras patolgicas y concentrarlas siguiendo las tcnicas ya descritas.
2. Hacer preparaciones en fresco con la tinta china.
3. Buscar la fase parasitaria de C neoformans en las preparaciones con tinta china.
4. Observar las caractersticas coloniales de C. neoformans en agar Saboraud.
Dibujos
a)
Criptococcus neoformans.
Cuestionario
1. Qu estructura es caracterstica de Criptococcus neoformans?
2. Qu tcnica de coloracin se utiliza para observar al agente etiolgico de la

Criptococosis?
3. Cules son los cuadros clnicos mas graves que puede ocasionar este hongo?
4. Qu tipo de muestras se pueden utilizar en el diagnstico de una Criptococosis?
5. A qu antibitico es sensible Criptococcus neoformans?
29

Prctica No. 10
Candidiasis
(Micosis oportunista)
Introduccin
La Candidiasis, por los diversos cuadros clnicos que presenta, puede causar desde una
micosis superficial, una subcutnea, hasta una profunda o bien comportarse como
oportunista. Candida albicans puede causar infeccin aguda o subaguda, produciendo
lesiones en boca, vagina, piel, uas, bronquios, pulmones y ocasionalmente, septicemia,
endocarditis o meningitis.
Como pueden aislarse cepas patgenas de Candida albicans en piel normal, mucosa
oral y vaginal normales y en la materia fecal de individuos sanos, salta a la vista que la
mayor parte de las infecciones tienen un origen endgeno y la determinacin de la fuente
de infeccin constituye un problema tan difcil como en el caso de infecciones de
Staphylococcus aureus.
La presencia de Candida en el individuo normal explica la diseminacin durante las
enfermedades debilitantes, padecimientos malignos del sistema hematopoytico, diabetes,
lupus eritematoso, enfermedades granulomatosas, etc...
La Candidiasis ataca a personas de todas las edades y razas y en ambos sexos,
habindose reconocido ciertos factores predisponentes. Los antibiticos de amplio espectro
y las drogas citotxicas favorecen la infeccin por Candida albicans y otras especies de
Candida.
Actualmente, Candida albicans y Candida stellatoidea son los agentes etiolgicos

que se presentan con mayor frecuencias en casos de candidiasis, pero existen otras especies
30
tambin capaces de producir enfermedad en el hombre: Candida krusei; Candida

tropicalis; Candida guillemondii; Candida pseudotropicalis; Candida parakrusei.
Objetivo
El alumno ser capaz de seleccionar las tcticas de trabajo que lo lleven a la
identificacin de Candida albicans a partir de diversos especmenes clnicos.
Tcnicas a emplear
A) Tomar de exudados farngeos.
1. El paciente debe presentarse sin haber tomado alimentos, con aseo bucal hecho al
menos 12 h antes de tomar la muestra.
2. Se coloca al paciente sentado en posicin odontolgica. Auxiliarse con una lmpara
adecuada para visualizar perfectamente la cavidad oral.
3. Mediante un abatelenguas estril sujetar la lengua e introducir un hisopo estril,
raspando con la punta del algodn las partes ms afectadas de las amgdalas, sin
tocar vula.
4. Repetir la operacin con otro hisopo estril.
5. Se colocan los hisopos dentro de un tubo con solucin salina estril.
B).- Toma de exudados vaginales.

1. La paciente debe presentarse sin aseo o aplicacin de medicamentos vaginales por
lo menos 24 h antes de la toma de la muestra y sin estar menstruando, a menos que
sea estrictamente necesario.
2. Se coloca a la paciente en posicin ginecolgica y se introduce en la vagina un
espejo vaginal en posicin paralela a los labios; se debe ir rotando el espejo con
mucho cuidado hasta tenerlo en posicin horizontal. Se localiza con cuidado el
cuello y se fija el espejo (de preferencia evitar el uso de sustancias lubricantes).
3. Se toma la muestra con dos hisopos estriles del sitio donde se localice la lesin (de
preferencia del fondo del saco y cuello de la matriz).
4. Uno de los hisopos se rota sobre un porta objetos, para tincin de Gram.
5. Se introducen los dos hisopos en un tubo con solucin salina isotnica.
31
C).- Tcnica de siembra por punto en tubo y placa.

En el caso de que la muestra sea de escamas o raspado de uas.
D).- Tcnica de observacin en fresco con KOH o NaOH.

Tincin de Gram
1. Fijar el frote por calor.
2. Cubrir el porta objetos con cristal violeta por un minuto.
3. Lavar con agua corriente.
4. Cubrir la preparacin con lugol durante un minuto.
6. Decolorar con solucin alcohol-cetona.
8. Contrastar con safranina por 30 segundos.
10. Examinar al microscopio con aceite de inmersin.
Aislamiento por estra cruzada

1. Depositar suavemente el inculo del hisopo rotndolo sobre la superficie del medio
de cultivo, en la zona perifrica de uno de los sectores de la placa.
2. Extenderlo con el asa bacteriolgica (prevenir flameada y enfriada en el medio), sin
separarla de la superficie del medio: dibujar de 4 a 5 trozos en zig-zag continuo y
separado.
3. Quemar el asa y enfriar dentro del medio.
4. Repetir la operacin anterior cuidando de tocar solamente los extremos de las
ltimas estras.
5. La siguiente estra se lleva hasta el centro del medio sin tocar en ningn momento
las estras de los otros sectores.
Identificacin rpida de Candida albicans
A).- Tubo germinativo en suero.
32
1. Inocular una pequea cantidad de clulas en 0.5 mL del suero (de preferencia de
pacientes diabticos).
2. Incubar a 37C en agitacin durante 30 a 60 min o en condiciones estacionarias
durante 2 h.
3. Montar entre portada y cubre objetos una gota de la suspensin y observar al
microscopio a seco dbil y seco fuerte.
B).- Produccin de clamidosporas (Tcnica de Dalmov)
1. Marcar en dos partes iguales el reverso de las placas de Petri con medio Oxgall y
Clamidosporas o bien Harina de Maz.
2. En uno de los sectores de cada medio, descargar el inoculo de la cepa problema,
trazando un zig-zag abierto con el asa, procurando no sobrepasar la superficie de 2
cm cuadrados.
3. Flamear el asa y repasar la estra en sentido contrario.
4. Flamear el cubre objetos y colocarlo sobre la siembra, presionndolo ligeramente
con el extremo contrario del asa.
5. Repetir la misma operacin en el sector contrario y con cepa testigo.
6. Incubar las placas a 28C durante 48 a 96 h.
7. Destapar las placas y observar al microscopio directamente sobre el agar y cubre
objetos a seco dbil y seco fuerte.
De la cepa problema hacer una suspensin en solucin salina estril para sembrar los
medios para la fermentacin y asimilacin de carbohidratos.
Zimograma:
1. Utilizar una serie de tubos de hemlisis conteniendo cada uno 4 mL de medio base
de Wickerham y 1 mL de los azcares a probar al 6%. Adicionar una campana de
Durham como indicador de la produccin de gas.
2. Inocularlos con dos gotas de la suspensin.
3. Incubar a 28C durante 72 h.
4. Hacer las lecturas de produccin de cido y gas.
33
Auxonograma:
1. Utilizar una serie de tubos de 16 x 150 mm con tapn de rosca, conteniendo cada
uno 4.5 mL del medio base y 0.5 mL de los azcares a probar al 5%.
2. Inocular con dos gotas de la suspensin.
3. Incubar a 28C y observar el crecimiento cada 48 h.
Material a emplear
1. Cepa del gnero Candida (Candida albicans).
2. Exudado farngeo.
3. Exudado vaginal.
4. Suero humano.
5. Placas Petri con:
a)
Gelosa sangre.
b)
Saboraud dextrosa.
c)
Clamidospora.
d)
Oxgall y Biggy.
6. Tubos de medio de:

a)
Saboraud inclinado.
b)
Micobiotico inclinado.
7. Medio base de Wickerham.

8. Medio base para asimilacin de carbohidratos.
9. Solucin salina estril.
10. Abate lenguas e hisopos estriles.
a. Pipetas Pasteur estriles.
11. Equipo de tincin de Gram.
12. NaOH o KOH al 10%.
13. Preparaciones fijas.
1. Proceder a la toma del exudado farngeo.
34
2. Trabajarlo simultneamente con las muestras proporcionadas por el profesor

(exudado vaginal y/o uas o escamas), siguiendo la metodologa para el diagnstico
de Candida.
3. Identificar hasta especie las levaduras aisladas de las muestras problema.
4. Observar la morfologa parasitaria de Candida albicans en preparaciones fijas
proporcionadas por el profesor.
Dibujos
a)
Observacin en fresco de exudado farngeo.
b)
Observacin en fresco de exudado vaginal.
c)
Frote de exudado farngeo. Tincin de Gram.
d)
Frote exudado vaginal. Tincin de Gram.
Cuestionario
1. Aparte de Candida albicans, qu otras especies existen?
2. Cules son los cuadros clnicos que con mayor frecuencia produce Candida
albicans?
3. Para la produccin de Clamidosporas, en qu medio de cultivo se debe hacer crecer

a Candida?
4. En una tincin de Gram, cmo se observa a este agente etiolgico?

5. Qu pruebas de laboratorio se utilizan para determinar la especie de este hongo?
35

Prctica No. 11
Aspergilosis
(Micosis oportunistas)
Introduccin
La Aspergilosis es micosis de animales y seres humanos causadas por hongos oportunistas
del gnero Apergillus en especial A. fumigatus, A. nigery A. flavus.
Pueden dar enfermedad pulmonar alrgica o invasora, aspergiloma, diseminarse a
sistema nervioso central u otros rganos o localizarse, en inmunodeprimidos es sistmica y
letal. Es una enfermedad cosmopolita y rara que afecta a cualquier edad, raza o sexo,
predomina en varones adultos, los aspergilomas se ha observado en tuberculosos curados.
Las formas alrgicas parecen ms frecuentes en campesinos y en quienes trabajan
con granos, como los empleados de silos y molinos. Como factores predisponentes estn el
uso de antibiticos de amplio espectro, citotxicos y glucocorticoides, leucemia, trasplantes
de rganos en especial mdula sea, infecciones por citomegalovirus, no suele observarse
en pacientes con SIDA.
En aves como pavos y pollos hay epidemias de aspergilosis de vas respiratorias por
consumo de granos contaminados, en bovinos y ovinos ocasionan abortos.
Objetivo
Familiarizar al alumno con la bsqueda de la fase parasitaria del hongo a travs del
examen en fresco y que a la vez conozca la morfologa colonial macroscpica del agente
etiolgico.
36
Tcnicas a emplear
A. Obtencin de expectoracin, escamas, exudados, raspado de uas
B. Realizar examen directo empleando KOH al 10% o SSI
C. Cultivo en Agar Saboraud o Agar Papa Dextrosa de 1 a 3 das a 28C
Material a emplear
1. Frascos de boca ancha estriles, placas Petri estriles, medio de transporte
2. KOH al 10%.
3. Asa micolgica, lancetas estriles
4. Porta y cubreobjetos.
5. Agar Saboraud y/o Agar Papa Dextrosa.
1. Obtener muestras patolgicas siguiendo las tcnicas ya descritas.
2. Hacer preparaciones en fresco con KOH AL 10% o SSI.
3. Buscar la fase parasitaria de las especies de Aspergillus
4. Observar las caractersticas coloniales de las especies de Aspergillus en el agar
correspondiente.
Dibujos
a)
Especies de Aspergillus.
Descripcin macroscpica de cada una de las cepas tipo.

Cuestionario
1. Qu estructura es caracterstica de las especies de Aspergillus?
2. Qu tcnica de coloracin se utiliza para observar a los agentes etiolgicos de la
Aspergilosis?
3. Cules son los cuadros clnicos mas graves que puede ocasionar las diferentes
especies de este hongo?
4. Qu tipo de muestras se pueden utilizar en el diagnstico de una Aspergilosis?
5. A qu antifngico son sensibles las diferentes especies de Aspergillus?
37

Prctica No. 12
Accin fungicida de Desinfectantes utilizados en la eliminacin de hongos
en superficies inertes
Introduccin.
Los desinfectantes son preparaciones con propiedades germicidas es decir que eliminan
microorganismos patgenos, deben su accin a los ingredientes activos que contienen.
Entre los principales tenemos: fenol, cresol, aceite de pino, alcohol isopropilico, los
ingredientes activos son completamente emulsificantes y otros ingredientes inertes como el
agua, colorantes,fijadores, teniendo las siguientes caractersticas :
Deben tener una buena concentracin de ingredientes activos lo cual garantiza su
efectividad y poder residual.
Si son desinfectantes para ambientes domsticos deben tener un aroma agradable,
para lo cual se pueden adicionar esencias aromticas, las cuales no alteran en absoluto el
poder del ingrediente activo.
No deben contener sustancias txicas para el organismo humano o para animales
menores, esto quiere decir que al aplicarse el producto este no contamine
Objetivo
Determinar la accin de desinfectantes utilizados en la eliminacin de hongos a
nivel de superficies inertes.
Tcnicas a emplear
A. Preparacin de placas Petri con en medio de cultivo seleccionado
B. Preparacin de los diferentes desinfectantes a las concentraciones a probar
C. Purificar las cepas de hongos causantes de contaminacin ambiental.
38
Material a emplear
1. Placas Petri
2. Agar Saboraud y/o Agar Papa Dextrosa.
3. Asa micolgica
4. Benzal, hipoclorito de sodio, fenol, aceite de pino, alcohol isoproplico
5. Cepas a probar
1. Previamente las placas fueron preparadas con una mezcla entre los desinfectantes y
el agar correspondiente
2. Sembrar las diferentes cepas a probar en las cajas Petri con la mezcla previa
3. Debern prepararse 2 placas por cada una de las cepas, una solo con agar, la
segunda con agar y el desinfectante
4. Los desinfectantes debern encontrarse a una concentracin conocida, la primera
placa ser la relacin del desinfectante con el agar correspondiente de uno a uno, la
segunda sin ninguna concentracin del agente
5. Diariamente por aproximadamente una semana ser medido el crecimiento radial de
cada una de las placas, para poder llevar as un control de crecimiento.
Reporte
Todas las mediciones sern graficadas para denotar la relacin de crecimiento entre estas,
para poder identificar as el mejor desinfectante
Cuestionario
1. Defina que es un desinfectante
2. De los desinfectantes conocidos cual o cuales son los ms efectivos
3. Que desinfectantes presentan una elevada toxicidad
4. Que otros desinfectantes se conocen
5. Los hongos pueden crear resistencia a los desinfectantes
39

BIBLIOGRAFA
a) Segretain, G., E. Drouhet y F. Mariat. 1995. Diagnstico de Laboratorio en
Micologa Mdica. 7 reimpresin. Traduccin de Ernesto Macotela Ruiz. La prensa
Mdica Mexicana. Mxico.
b)
Arenas, R. 2008. Micologa Mdica. 3 Ed; Ed. Interamericana.
c)
Bonifaz, A. 2010. Micologa Mdica Bsica. 3 Ed; Ed. McGraw-Hill

Interamericana.
d)
Conant, N.F., D. Trillersonsmith, R. Denia Baker, J. Lamar. 1994. Micologa.

Nueva Editorial Interamericana.
e)
Koneman. Diagnostico Microbiolgico. 6 Ed. Ed. Mdica Panamericana. (2006)
f)
Lpez, M.R., F. Hernndez. 2009. Principios de Micologa Mdica, Clnica,

Diagnostico y Teraputica. 1 Ed. Ed. Mndez Editores
g)
Murray, P.R. 2012. Microbiologa Mdica. 6 Ed; Ed. Elsevier Mosby.
h)
Velasco, C.O., J. Tay Zavala. 1995. Introduccin a la Micologa Mdica. Ed.

Francisco Mndez Cervantes.
i)
Torres, R.J. 1995. Micologa Mdica. 4 Ed; Ed. MASSON.
j)
Torres, R.J. 1996. Micosis que afectan piel y mucosas. 3 Ed; Ed. DOYMA.
k)
Clayton, Y.M., G. Garoth, R.J. Hay, A. Lagni, P. Vanbreuseghem. 1994.

Biomedicaltopics. Micosis Superficiales. Ed. Centro de Publicaciones Cientficas.
Farmitalia Carlo Erba. Milano, Italia.
l)
Zapater, R.C. 1996. Micologa Mdica. 6 Ed; Ed. El Ateneo.
m)
Ramrez Cueto, M.A. Manual de Laboratorio de Micologa. Facultad de Ciencias

Qumicas, Departamento de Microbiologa. BUAP.
40

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BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

MANUAL DE PRACTICAS DEL

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

Prctica No. 1 Seguridad en el Laboratorio

Prctica No. 2 Aislamiento y siembra de hongos en placa y tubo

Practica No. 3 Reconocimiento de estructuras bsicas de los hongos

Practica No. 4 Estructuras de reproduccin asexual en hongos saprfitos

Prctica No. 5 Identificacin macro y microscpica de hongos saprfitos

Prctica No. 6 Dermatofitos (Tias)

Prctica No. 7 Identificacin macro y microscpica de Dermatofitos

Prctica No. 8 Cromomicosis y Esporotricosis (Micosis subcutneas)

Prctica No. 9 Criptococosis (Micosis oportunistas)

Prctica No. 10 Candidiasis (Micosis oportunistas)

Prctica No. 11 Aspergilosis (Micosis oportunistas)

Prctica No. 12 Accin fungicida de desinfectantes utilizados en la

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

B) Tcnica de siembra por puntos en placa o tubo (sustratos slidos poco

C) Tcnica de exposicin de placa (medio ambiente).

PDA= Papa Dextrosa Agar.

2. Cules son las tcnicas de aislamiento para hongos?

3. Cul es la composicin qumica de los medios de cultivo para hongos?

4. Cmo define un hongo contaminante?

5. Cul es la temperatura adecuada de crecimiento de un hongo?

6. Menciona si la muestra estaba libre de contaminacin, en caso de haber estado

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

A) La morfologa colonial se basa en los siguientes parmetros:

B) Tcnica de observacin microscpica en fresco.

4. Dilacerar el fragmento de la colonia con ayuda da agujas de diseccin o bien con la

preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.

Micelio macrosifonado septado.

Micelio macrosifonado cenoctico.

Descripcin macroscpica de las cepas tipo proporcionadas por la responsable del

2. Mencione la clasificacin del micelio segn:

3. Por la morfologa macroscpica y microscpica, cmo puede ser un hongo?

4. Cmo fue el crecimiento obtenido de la prctica anterior?

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

A) Talosporas que a su vez se subdividen en:

Que el alumno se introduzca en el conocimiento bsico de las diferentes estructuras

3. Hacer los dibujos y anotar en nombre del hongo correspondiente:

3. Un hongo filamentoso, porque tipo de esporas se reproduce?

4. Una levadura, porque tipo de esporas se reproduce?

5. Qu tcnica se utiliza para la observacin microscpica de las esporas?

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

En el rea de la industria alimenticia posee gran valor como

contaminantes de materia prima y producto terminado, causando en la mayora de los casos

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

1. El laboratorista deber de proveerse de alcohol, gasa, lancetas estriles, placas de

Se deposita un pequeo fragmento de muestra y se deja reposar por 10 min.

Se deposita un cubre objetos sobre la preparacin, tratando de no formar

La preparacin se observa al microscopio con el objetivo seco dbil y seco

8. En zona de esterilidad junto a un mechero, la muestra clnica sobrante se siembra

B).- Tcnica del raspado de uas.

2. El borde del dedo afectado se deposita sobre el margen de la placa de Petri.

C).- Tcnica de obtencin de cabellos.

2. Por su topografa cmo se clasifican las tias?

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Gnero Microsporum: En cultivo desarrollo un micelio areo, algodonoso, lanudo,

Descripcin macroscpica de las cepas tipo.

2. Qu tipo de tejido atacan los Dermatofitos?

3. Cul es el sustrato que degradan los Dermatofitos?

4. Que poseen los Dermatofitos para poder degradar este sustrato?