UNNOBA

Licenciatura
en Genetica

CICLINAS EN EL CICLO
CELULAR

Nombre:
Benvino Tomas
Docente:
Melina Beliera
Fecha de entrega:
12 de septiembre de 2013

INDICE
LA MAQUINARIA DEL CICLO CELULAR...3
CICLINAS SE CONVIERTEN EN INHIBIDORES DE G1....4
EL CICLO CELULAR Y LA EVOLUCION....4
CMO MUEREN LAS CICLINAS?.......................................................................5
MONITOREANDO EL HUSO.7
DESPUES DE LA MITOSIS.............7
CMO ENCUENTRAN LOS SUSTRATOS LAS CICLINAS?..............................7
QU HACE LA FOSFORILACION?......................................................................8

LA MAQUINARIA DEL CICLO CELULAR

Las ciclinas fueron el primer ejemplo de subunidades accesorias que activaban proten
quinasas en vez de inhibirlas. Se descubrieron cono un par de ciclinas (A y B) que se
asociaban a una subunidad quinasa, Cdk1, una familia que luego se expandi hasta
poseer mltiples ciclinas y quinasas dependiente de ciclinas, con participacin en
procesos que incluyen al ciclo celular, la transcripcin y la diferenciacin. Cada ciclina
se asocia a una o dos quinasas dependiente de ciclinas, aunque algunas Cdk se
asocian hasta con nueve ciclinas. En el ciclo celular se encuentran ciclinas asociadas
a la fase G1, a la fase S y a la mitosis.
Existen dos maneras de explicar la abundancia de ciclinas: por un lado, las diferencias
bioqumicas de las ciclinas hacen que catalicen la fosforilacin de diferentes protenas,
o que las diferentes ciclinas y Cdk son bsicamente iguales, pero existe en gran
variedad para permitir la regulacin precisa de donde y cuando aparecen.
En los primeros ciclos celulares de clulas de embriones, donde las ciclinas fueron
descubiertas, hay tres ciclinas y dos Cdks. Dos ciclinas, A y B, aumentan mientras las
clulas estn en interfase, y disminuyen en mitosis, mientras que una tercera ciclina,
E, permanece constante a lo largo del ciclo. Cdk1 se une a las ciclinas A y B, mientras
que la Cdk2 se une a las ciclinas A y E. Estos complejos de ciclinas-Cdk inducen dos
procesos: duplicacin de los centrosomas y el ADN durante la interfase, y la mitosis.
La importancia de cada ciclina se estudi mediante el agregado de protenas
recombinantes a extractos defectuosos en ciclinas. Las ciclinas E participa en la
replicacin de ADN y la duplicacin del centrosoma, la ciclina A participa en ambos
procesos y en mitosis, y la ciclina B solamente participa en mitosis. La imposibilidad de
la ciclina B para inducir la replicacin puede reflejar una imposibilidad bioqumica para
catalizar las protenas fosforiladas que requiere la duplicacin de ADN, o una
imposibilidad fsica para llegar al compartimiento donde permanecen esas protenas,
ya que la ciclina A es nuclear y la B es citoplasmtica.
Para probar estas hiptesis, Moore et al. extrajo de huevos de sapo las ciclinas, y
luego recompuso con dos versiones de ciclinas B. Como era esperado, las protena
era un fuerte inductor de mitosis, pero nunca duplico el ADN. Pero si a la ciclina B se le
inserta la localizacin nuclear de la ciclina E, puede llevar a cabo la replicacin de
ADN. En conclusin, la principal razn por la que la ciclina B influye solo en mitosis, es
la imposibilidad de acceder a las protenas para iniciar la duplicacin. La multiplicidad
de ciclinas refleja la duplicacin y la separacin que enva a las diferentes familias a
diferentes zonas en momentos diferentes, permitiendo la regulacin por separado de
las diferentes funciones biolgicas.
Una simple ciclina mittica produce alternancia entre replicacin de ADN y
segregacin cromosmica en levaduras fission, una observacin que sugiere que a
bajos niveles de Cdk1 se induce la replicacin de ADN y bajos niveles derivan en
mitosis. En levaduras budding, las 4 ciclinas mitticas y las dos de interfase pueden
reducirse a una sola ciclina mittica. Los ratones puede desarrollarse normalmente y
sobrevivir en ausencia de Cdk2, y el desarrollo embrional procede normalmente en
ausencia de ciclina E. En una clase particular de ciclinas, la presencia de mltiplos
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miembros es refleja la variacin temporal y espacial de los patrones de expresin, los

fenotipos de los ratones que expresan solo una ciclina D proviene de un fallo en la
transcripcin de ese gen, en vez de las diferencias entre propiedades de las diferentes
ciclinas D.
Para terminar, gran parte de las diferencias entre el comportamiento de las ciclinas
reflejan el lugar y el momento en el que se encuentran, y no el efecto sobre el sustrato.
Pueden existir diferencias bioqumicas entre las ciclinas, pero necesitaramos
experimentos ms cuidadosos para distinguir la diferencia entre especificacin de
sustrato, y ubicacin temporal y espacial.
CICLINAS SE CONVIERTEN EN INHIBIDORES DE G1
Levaduras budding y clulas animales tienen largos periodos de G1. Es el momento
en el que los nutrientes y factores de crecimiento regulan el futuro de la clula:
continuar el ciclo celular o entrar a la fase G0. Defectos en el control de G1 es comn
en tumores. La importancia de G1 se refleja en la existencia de ciclinas de G1, que
son necesarias para la progresin del ciclo celular.
En los embriones, donde los niveles de ciclina E son siempre altos, la replicacin
comienza en el momento que la mitosis termina. Una idea es que las clulas postembrionicas inventaron una manera de bloquear ese rpido traspaso y que la funcin
de las ciclinas de G1 era llevar a cabo esa inhibicin. El descubrimiento de inhibidores
de los Cdk apoy esta hiptesis, pero la evidencia ms fuerte proviene que la ausencia
de estos inhibidores le permite a la clula vivir sin ciclinas de G1. En levaduras
budding tres ciclinas G1 marcan por fosforilacin a Sic1, un inhibidor de la fase S y
ciclinas mitticas para la degradacin. Sin el Sic1, la clula puede dividirse sin ciclinas
de G1, y sacando la protena retinoblastoma las clulas de los mamferos pueden
dividirse en condiciones que inhiban la actividad de la ciclina D
Las clulas animales tienen dificultad para terminar G1. La ciclina D es necesaria en
G1 para la expresin de las ciclinas E y A. La expresin de ciclinas D juega un papel
fundamental en el control del tamao, debido a que muchos tumores producen un
sobreexpresamiento de ciclina D, inhiben protenas que las inhiben, o remueven otras
protenas inhibidoras que deben ser inhibidas por ciclinas D. Un rol importante de la
protena Rb es de evitar la transcripcin de ciclina E, lo que sugiere que la ciclina D
tiene como funcin la expresin de la ciclina E. La expresin forzada de ciclina E
induce a la clula a la proliferacin aun cuando esta inhibido el complejo de ciclina DCdk. En embriones de Drosophila eliminando Cdk4 (la quinasa a la que se asocia la
ciclina D) tiene un pequeo efecto a largo tiempo en la proliferacin de las clulas,
sugiriendo que en el organismo, las ciclina D pueden jugar un papel secundario en vez
de ser esenciales en el control de la proliferacin, a pesar de que parece que posee un
papel importante en el control del crecimiento celular. Estos descubrimientos remarcan
la importancia de la pregunta de cmo las ciclinas D y E controlan el crecimiento
celular, siendo imposible el incremento de la proliferacin sin crecimiento celular.
EL CICLO CELULAR Y LA EVOLUCION
La importancia de las ciclinas depende del organismo. En las eucariotas son
indispensables, siendo que en las procariotas ni siquiera existen. Se cree que las Cdks
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aparecieron despus de otras proten quinasas que regulaban el ciclo celular, a pesar
de que las Cdk actualmente las regulan por fosforilacin. Si el anlisis de la evolucin
es correcto, Cmo es posible que, a pesar de la tarda aparicin, hayan podido tener
un amplio control sobre el ciclo celular?
Se especula que las ciclinas y las Cdk comenzaron con funciones de integracin en
vez de componentes de oscilacin central. En las bacterias, la replicacin de ADN
puede tardar hasta el doble de lo que tarda la clula en duplicar la masa. En la
mayora de eucariotas, el ADN parcialmente replicado termina en un dao
cromosmico irreparable. Antes de que el sistema actual aparezca, era necesario unir
los dos procesos. Una forma era un reloj que avisaba a cada proceso cuando
comenzar, con intervalos largo para asegurarse que finalice el anterior.
Inicialmente, ese reloj estaba controlado por el tamao de las clulas. Las ciclinas
debieron aparecer como molculas que se acumulaban en el ciclo y servan como
aproximacin del tamao. Si las ciclinas ancestrales eran estables, en la divisin, su
concentracin se reduca a la mitad, dejando un umbral estrecho entre replicacin de
ADN y mitosis. Este problema se solucionara si las ciclinas eran destruidas por las
enzimas que separaban las cromtidas hermanas. Luego de este avance, las clulas
comenzaran sin ciclinas, permitiendo a la clulas tener seales bien separadas de la
actividad de la Cdk1 para replicacin y segregacin.
Este procedimiento difiere en tres aspectos con respecto al ciclo celular actual.
Primero, las reacciones relacionadas con la replicacin y segregacin estaban
controladas por molculas que no eran Cdk, pero que eran reguladas por ciclinas-Cdk.
Segundo, el reseteo del tiempo estaba acompaado por reacciones de segregacin,
en vez de ser autnomo. Por ltimo, los eventos del ciclo se separaban por tiempo en
vez de por checkpoints que se regulan por seales que enva cada evento.
A medida que paso el tiempo, estas propiedades desaparecieron de la mayora de las
clulas del ciclo. Checkpoints controlaban la actividad de la Cdk1-ciclina por respuesta
a eventos en el ciclo cromosmico. Una nueva forma de proteolizar a las ciclinas
estaba bajo el control de la Cdk1. Las Cdk, gradualmente, comenzaron a controlar
todos los procesos de fosforilacin, obligndolas a duplicarse y separarse a varios
lugares de la clula.
La duplicacin de genes y la divergencia de promotores parece ser una manera ms
efectiva de cambiar el control de genes en vez de evolucionar todo el complejo y los
promotores. A nivel de protenas, la duplicacin y separacin permite que las
diferentes versiones de una protena puedan ser enviadas a todas las partes de la
clula y puedan sufrir modificaciones post-traduccionales
CMO MUEREN LAS CICLINAS?
Todas las ciclinas conocidas son degradasas en el proteosoma por accin de cadenas
de ubiquitina, pero la forma de ubiquitinarse vara en cada ciclina. Las protenas de G1
lo hacen a travs del complejo SCF, mientras que las ciclinas mitticas lo hacen a
travs del APC. Ambos complejos tambin degradan otras protenas, y comparten una
organizacin central, y posiblemente un origen comn.

A pesar de estas similitudes, se regulan de maneras distintas. El complejo SCF es

activo durante el ciclo celular y su actividad depende de la fosforilacin de los
sustratos. El APC es activado al comienzo de la anafase y degrada sus sustratos hasta
el final de la mitosis.
A medida que avanza la mitosis, el APC es activado en dos formas: sus subunidades
son fosforiladas y su interaccin con aun protena de activacin (Cdc20) aumenta.
Ambos cambios estn estimulados por la activacin de la Cdk1. Cuando la clula
termina la mitosis, el APC permanece activo pero cambia de depender del Cdc20 a
depender de otra protena (Hct1/Cdh1) para su actividad. La Hct1 es inhibida por la
Cdk1 y es incierto el por qu el APC debe permanecer fosforilado para poder activarse
y, en ese caso, que quinasa lo modifica. En G1 tardo la reactivacin de Cdk lleva a la
fosforilacin e inactivacin del Hct1, finalizando la actividad del APC hasta que la
clula llegue a la mitosis.
A pesar de que en lneas generales se conoce la regulacin del APC, los detalles son
confusos e importantes. Los detalles importan porque activar el APC desencadena
eventos bioqumicos que finalizan la mitosis, inactivan a la Cdk1 y activan a la
separasa, la enzima que desencadena la segregacin cromosmica. Como Hunt haba
propuesto, las ciclinas mitticas desencadenan su propia destruccin activando el
APC, pero realizando esto antes de que los cromosomas estn alineados en el huso
mittico sera desastroso. Dos mecanismos ralentizan la activacin del APC, que
producen un intervalo entre la activacin de la Cdk1 y el checkpoint del huso mittico.
En algunos ciclos celulares, el checkpoint es tan dbil para frenar la maquinaria, por lo
que el intervalo debe ser an mayor entre la activacin de la Cdk1 y la activacin del
APC para permitir la formacin del huso y el alineamiento de los cromosomas.
Dos mecanismos pueden retrasar el intervalo hacen que la Cdk1 inactiva inhiba al
APC, o que la activacin del APC dependa de muchos eventos que ocurren en
paralelo o en series.
Los detalles de estos mecanismos an no han sido descubiertos en los organismos y
significara descubrir los principios generales y moleculares de mecanismos que
estropean la investigacin en el ciclo celular.
Dada la importancia del Cdc20 y el Hct1 en la regulacin del APC, somos
sorprendentemente ignorante sobre ellos. La pregunta fundamental es si funcionan
como componentes esenciales y estequiomtricos del APC o solo se acercan con
enzimas que activan o inhiben al APC y luego se van.
EL checkpoint del huso mittico frena la mitosis inhibiendo el APC. Si es checkpoint
inhibe al cdc20 y el Cdc20 es continuamente requerido para la actividad del APC, el
APC debera estar completamente inactivo en clulas con huso mittico daado. Pero
fue demostrado que no es as, ya que no previene la destruccin de la ciclina A, que
usa el Cdc20 para su destruccin.
Cmo puede el APC ser regulado segn los sustratos? La explicacin ms simple es
que el APC aade ubiquitinas a los sustratos, y la cantidad refleja cuanto tiempo
estuvo unido al APC, y es necesario un mnimo de ubiquitinas para que el proteosoma
acte.
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El Cdc20 y el Hct1 interaccionan con los sustratos del APC y la diferencia es los
sustratos que marcan y el momento en el que lo hacen. Ambos reconocen secuencias
de destruccin en ciclinas. Como en las ciclinas, la principal diferencia se encuentra en
la regulacin espacio-tiempo que poseen, con la Cdc20 que requiere a la Cdk1 para su
actividad, y la Hct1 es inhibida por la misma.
MONITOREANDO EL HUSO
El checkpoint del huso usa la informacin entre cromosomas y microtbulos para
regular el APC. El paso fundamental parece ser la interaccin con dos complejos en el
cinetocoro. Uno, el complejo de protenas residen en el cinetocoro y el otro es soluble.
En los cinetocoros sin microtbulos, el complejo interacta generando un nuevo
complejo que parece ser el iniciador del checkpoint.
DESPUES DE LA MITOSIS
El final de la mitosis marca el enlace entre el final de un ciclo y el comienzo de uno
nuevo. En las clulas embrionicas, la replicacin de ADN empieza despus que la
envoltura nuclear se genera. Para asegurarse que cada parte se replica solo una vez,
los orgenes de replicacin deben estar distribuidos ordenadamente y no pueden
disparase una vez que se replicaron. La reactivacin de un origen se previene
separando los enlaces.
En la mayora de los ciclos, hay un intervalo (G1) entre la mitosis y la replicacin de
ADN. El Hct1 degrada ciclinas mitticas y de fase S durante G1. Por qu las clulas
destruyen ciclinas y otros sustratos del APC en G1? La respuesta ms simple es que
G1 le da el tiempo a la clula para integrar informacin antes del crecimiento celular y
la replicacin de ADN, que son un trabajo riesgoso.
CMO ENCUENTRAN LOS SUSTRATOS LAS CICLINAS?
Como dijimos anteriormente, la actividad de las ciclinas depende de cuando y donde
aparecen en vez del sustrato que la Cdk puede fosforilar. Experimentos examinaron la
idea de que las ciclinas se podan unir a sustratos de Cdk aumentando la
concentracin para permitir una fosforilacin eficiente de los sitios que podran ser
sustratos dbiles si se presentaban como pptidos libres. Se ha encontrado un parche
hidrofbico en las ciclinas A y en las ciclinas B ya que contienen un complejo para
fosforilar sustratos, pero los residuos que se utilizaron se conservaron entre las
ciclinas A y B.
Examinando la fosforilacin de pptidos por complejos ciclinas-Cdk apoya la nocion de
que ambos, ciclinas y Cdk, tienen un papel importante en el reconocimiento de
sustratos. Pptidos con una secuencia especifica son reconocidos, pero la ausencia
del residuo final con carga reduce abruptamente el enlace, y existe poca diferencia
entre Cdk1 y Cdk2, y entre loas ciclinas A, B y E en los efectos de sustitucin de
aminocidos. El acoplamiento de pptidos con secuencia que interaccionan con el
parche hidrofbico aumenta cien veces la fortaleza del enlace, mostrando que la
interaccin con la ciclina puede mejorar dramticamente el enlace con el sustrato. El
caso ms extremo de es la fosforilacin de la Cdk, ya que todas las Cdk necesitan

estar fosforiladas en el bucle T para ser funcionales. Este proceso es llevado por una
quinasa-ciclina activadora (Cdk7 y ciclina H).
Una segunda aproximacin es encontrar mtodos que puedan revelar que quinasa
fosforila un sustrato en vivo, aun cuando varias quinasas tienen la misma especificidad
de sustrato. Se han modificado quinasas para que solo use anlogos de ATP que
fueron hechos demasiado grandes para entrar en cualquier quinasa. Si un sustrato
recibe un fosfato radioactivo, derivado del ATP modificado, entonces fue fosforilado
directamente de la quinasa. Pero al estar cargado del ATP modificado, solo puede
usarse en extractos de clulas, y aparece la duda de cuan exacto es este mtodo.
Otra aproximacin es identificar clones de cADN que codifican para sustratos de
proten quinasas buscando productos cuya movilidad electrofortica cambie a partir de
la fosforilacin, pero no dio resultados absolutos.
QU HACE LA FOSFORILACION?
La maquinaria del ciclo celular eucariota comienza y frena los eventos que ocurren en
el ciclo. Para entenderlo, necesitamos saber cmo se hace para inducir cada evento y
como estos eventos se coordinan con los dems.
Para comenzar la mitosis es necesario que desaparezca la envoltura nuclear. La
envoltura consiste en una doble membrana contigua al retculo endoplasmtico y
sobre la lmina se encuentra una capa hecha de polmeros. Cuando la clula entra a
mitosis, esa lamina se fosforila y despolimeriza. Esta fosforilacin la puede realizar el
complejo de la ciclina B-Cdk1.
Aunque la habilidad de la Cdk1 para fosforilar y despolimerizar la lmina nuclear es
conocida, aun no se sabe si otras proten quinasas son necesarias. Mientras el ncleo
se rompe, los poros nucleares de desensamblan. Durante la interfase, la ciclina B se
exporta del ncleo bloqueado el acceso a las lminas. Cuando la clula entra en
mitosis, la ciclina B es fosforilada, inactivando las seales de exportacin y acelerando
su importacin.