INTRODUCCION

En esta segunda unidad de Anlisis Instrumental nos toca hablar acerca de lo que es la
espectroscopia y algunas de sus caractersticas y divisiones, para empezar debemos deber de
antemano que la espectroscopia es un mtodo de anlisis ptico muy utilizado en el rea de
investigaciones qumicas y biolgicas para determinar algunas propiedades de las sustancias o
para saber alguna propiedad con respecto a ella.
Sabemos que el instrumento que se utiliza aqu es el espectrofotmetro el cual no permitir hacer
comparaciones de la radiacin absorbida o transmitida de una solucin que va a contener una
cantidad desconocida de soluto, y contendr igual una cantidad de conocida de la misma
sustancia.
No debemos olvidar el Principio de la Espectrofotometra el cual expresa lo siguiente:
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser
completamente transparente absorbe radiacin de longitudes de ondas que no pertenecen al
espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo.
La absorcin de cualquier tipo de radiacin; ya sea ultravioletas, visibles e infrarrojas solo
depender de la estructura de las molculas la cual ser caracterstica para cada sustancia.
Sabemos que cando la luz atraviesa la sustancia un parte de la energa ser absorbida y la otra
energa radiante no producir ningn efecto sin ser absorbida. Y el color de estas se va a deber a
que estas sustancias absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca (que es la combinacin
de los colores verde, amarillo y rojo) que incide sobre ellas y solo dejara pasara a nuestra alcance
de persuasin aquellas longitudes de onda no absorbidas.
As es como funciona un espectrofotmetro, pero en todo el trabajo vamos a leer acerca de lo que
puede pasar con ella cuando intervienen ciertos factores y de la importancia de este mtodo
analtico.

UNIDAD 2.- METODOS ESPECTROFOTOMETRICOS

2.1 PROPIEDADES DE LA RADIACION ELECTROMAGNETICA
Qu es la radiacin electromagntica?

La radiacin electromagntica es el producto de la variacin peridica de los campos elctrico y

magntico. Un campo es una regin del espacio en la que la materia est sometida a algn tipo de
fuerza. En el caso de la radiacin electromagntica, los campos son producidos por las partculas
cargadas en movimiento. La luz visible es un tipo de radiacin electromagntica. A veces se
comporta como una onda que se propaga en el espacio, y otras veces se comporta como un
conjunto de fotones. A este fenmeno se le denomina dualidad de la radiacin.
Los distintos tipos de radiacin electromagntica dependen directamente de las caractersticas de
la onda, que son: frecuencia, longitud de onda y amplitud o intensidad. En realidad, como veremos

a continuacin, la frecuencia y la longitud de onda estn directamente relacionadas, por lo que

para describir completamente una onda, (la radiacin electromagntica en nuestro caso) basta
con dar informacin acerca de su amplitud y frecuencia (o longitud de onda). Las ondas
electromagnticas transportan energa siempre a la misma velocidad en el vaco: 299792
kilmetros por segundo, lo que se conoce como velocidad de la luz (c). En esta pgina puedes
encontrar ejemplos en espaol de las medidas de la velocidad de la luz, y en sta ms ejemplos en
ingls.

Parmetros de la radiacin electromagntica: frecuencia, longitud de onda y amplitud

Como ya hemos visto, la radiacin electromagntica puede ser descrita como una onda. Vamos a
estudiar los parmetros que la definen.
*La longitud de onda ( )es la distancia entre dos mximos consecutivos de la onda. Se mide en
unidad desde distancia: por ejemplo, metros (m) o cualquiera de sus submltiplos, como el
ngstrom (1 = 10-10-10 m).
*La frecuencia (V) se define como el nmero de mximos que pasan por un punto en un tiempo
determinado. Sus unidades son los hercios (Hz), de forma que 1 Hz equivale a un ciclo por
segundo.

*La amplitud (A) es la distancia que hay entre el punto de inflexin de la onda y el mximo.
Debido a que la velocidad de la luz es constante e igual a c, existe una relacin directa entre la
frecuencia y la longitud de onda, ya que dada una longitud de onda determinada, si sabemos que
la onda se desplaza a velocidad c, para saber el nmero de veces que pasa un mximo por un
punto, slo hace falta dividir la velocidad de la luz entre la longitud de onda. Tenemos, por tanto,
que V=c/

PARAMETROS DE UNA ONDA

Otra caracterstica importante de las ondas es que transportan energa. La energa de una onda
electromagntica est directamente relacionada con su frecuencia, de forma que E = h ,V, y,
utilizando la relacin entre la frecuencia y la longitud de onda, podemos tener tambin que E =
h.c/ , donde h es la constante de Planck, cuyo valor es h=6.63*10-34J.seg. De esta forma,
tendremos que las ondas con una frecuencia alta sern muy energticas, mientras que aquellas
cuyas frecuencias sean bajas (y, por tanto, su longitud de onda grande) transportarn menos
energa.

La ley del cuadrado de la distancia

La radiacin electromagntica se propaga por el espacio siguiendo un comportamiento

determinado. Sabemos que al alejarnos de una fuente luminosa (que es una fuente de radiacin
electromagntica) la intensidad que percibimos se va haciendo cada vez menor, pero vamos a ver
qu regla sigue est disminucin de intensidad.

La superficie de una esfera aumenta con el cuadrado de su distancia al centro

Podemos imaginar que la radiacin est contenida en una esfera que inicialmente es la fuente que
la produce. A medida que la radiacin electromagntica se aleja de la fuente, esta esfera
imaginaria aumentara de tamao de forma que la intensidad que inicialmente se concentraba en
la superficie de una esfera de pequeo radio, ahora tendr que repartirse por la nueva esfera cuya
superficie es mucho mayor. El rea de esta esfera aumenta proporcionalmente al cuadrado de la
distancia que la separa de su centro, en el que se encuentra la fuente. La frmula exacta es donde
A es el rea de la esfera y R la distancia recorrida por la radiacin o, lo que es lo mismo, el radio de
la esfera. Por lo tanto, la intensidad de la seal se debilita a medida que se aleja de la fuente,
fenmeno que se conoce como la ley del cuadrado de la distancia. Podemos ilustrar esta ley con
un ejemplo: Saturno est aproximadamente 10 veces ms lejos del Sol que el planeta Tierra.

Si definimos la Unidad Astronmica (UA) como la distancia media entre la Tierra y el Sol, Saturno
se encuentra a 10 UA. Entonces, la energa contenida en una esfera de radio 1 UA, a la distancia a
la que se encuentra Saturno se habr diluido en una esfera de superficie 100 veces mayor y por lo
tanto, Saturno recibe una centsima parte del flujo (= energa por unidad de superficie y por
unidad de tiempo) de energa solar que recibe la Tierra. La ley del cuadrado de la distancia es muy
importante en Astronoma: implica que la concentracin de energa disminuye muy rpidamente a
medida que nos alejamos de la fuente de radiacin electromagntica. No importa si la fuente es
una nave espacial con un transmisor de baja potencia, una estrella muy brillante o una + radio
galaxia, la distancia a la Tierra es tan enorme que la radiacin electromagntica estara diluida en
una gigantesca esfera de forma que a un detector en la superficie slo le llegara una pequea
cantidad de energa

2.1.1 Espectro electromagntico

El espectro electromagntico es el conjunto de la radiacin electromagntica de todas las

longitudes de onda. La luz, por ejemplo, no es ms que radiacin electromagntica en un rango de
frecuencias a las que el ojo humano (y el de la mayora de las especies dotadas de visin) es
sensible. El hecho de que estemos dotados para la visin en el rango visible, nos permite
aprovechar el mximo de emisin del Sol que se produce en este rango. Probablemente, si nuestro

Sol tuviese su mximo en el infrarrojo, nuestros ojos estaran dotados para ese tipo de visin. Pero
el espectro electromagntico no tiene una frecuencia mxima o mnima, sino que se extiende
indefinidamente, ms all de los estrechos lmites de sensibilidad del ojo humano. En orden
creciente de frecuencias (y por tanto, de energa) el espectro est compuesto por las ondas de
radio, el infrarrojo, la luz visible, el ultravioleta, los rayos X y los rayos gamma.
Estos nombres distinguen distintas frecuencias de un mismo fenmeno: la radiacin
electromagntica.
Los diagramas que se incluyen en esta seccin muestran el rango del espectro electromagntico
en el que se produce la mayor parte de la emisin de fuentes astronmicas. Los lmites entre
distintas regiones del espectro son difusos y, en muchas ocasiones, dependen de las tcnicas
empleadas para detectar o producir la radiacin. A lo largo de este curso nos centraremos ms en
la informacin que se puede de obtener de la luz con frecuencias de entre 5 kHz y 300 GHz (las
"radiofrecuencias"). Dentro de las radiofrecuencias se han definido unas bandas determinadas
estndar que comprenden un pequeo rango de longitudes de onda, de manera que se pueden
ajustar los radiotelescopios para detectar selectivamente radiacin en estas bandas.

ESPECTRO ELECTROMAGNETICO

Banda | Longitud de onda (cm)

L

| 30-15 | 1-2

| 15-7.5

| 2-4

| 7.3-3.75

| 4-8

| 3.75-2.4

| 8-12 |

| 2.4-0.75

| 12-40 |

| Frecuencia (GHz)

La antena de PARTNeR tiene receptores para banda X y S, por lo que se podr detectar radiacin
de entre 2 y 4 GHz y entre 8 y 12 GHz.

2.1.2 Absorcin de radiacin

En fsica, la absorcin de la radiacin electromagntica es el proceso por el cual dicha radiacin es

captada por la materia. Cuando la absorcin se produce dentro del rango de la luz visible, recibe el
nombre de absorcin ptica. Esta radiacin, al ser absorbida, puede, bien ser reemitida o bien
transformarse en otro tipo de energa, como calor o energa elctrica.

En general, todos los materiales absorben en algn rango de frecuencias. Aquellos que absorben
en todo el rango de la luz visible son llamados materiales opacos, mientras que si dejan pasar
dicho rango de frecuencias se les llama transparentes. Es precisamente este proceso de absorcin
y posterior reemisin de la luz visible lo que da color a la materia.
Los colores que muestra el espectro (arco iris) son la combinacin de los colores primarios, que no
incluyen el blanco ni el negro, pues stos se consideran valores. El blanco estara indicando
presencia de luz y el negro ausencia de luz.

Cuando la radiacin pasa a travs de una capa transparente de un slido, lquido o gas, ciertas
frecuencias pueden ser selectivamente removidas a travs de un proceso de absorcin. Durante
dicho proceso la radiacin electromagntica es transferida a los tomos o molculas que se
encuentran en la muestra; el resultado es que estas partculas son promovidas desde el estado
basal hasta estados de mayor energa o estados excitados.
Los tomos, iones o molculas disponen de un nmero limitado de niveles energticos, los cuales
estn cuantizados. Para que ocurra la absorcin de un cierto tipo de radiacin, cada fotn
incidente deber ser de una energa exactamente igual a la diferencia energtica entre el estado
basal y alguno de los estados excitados de la especie absorbente. Dado que esas diferencias en
energa son nicas para cada especie, un estudio de las frecuencias de radiacin que son
absorbidas por un tomo, ion o molcula, proporcionar las caractersticas especficas de la
entidad qumica en estudio. Para esto lo que generalmente se hace es graficar Absorbancia contra
longitud de onda.
Al grfico obtenido de esta manera se le llama espectro de absorcin. Este espectro es nico para
cada elemento o entidad qumica y podemos decir que dicha grfica es la huella dactilar de la
especie considerada. La apariencia de un espectro depende de la complejidad, estado fsico y
entorno de la especie absorbente. Existen dos tipos de espectros: el que est asociado a la
absorcin en tomos y el que resulta de la absorcin por molculas. La teora que explica la
naturaleza corpuscular de la radiacin predice que la energa de un fotn est cuantizada y su
energa est dada por la relacin de Planck, E=hk.
La teora cuntica predice que si existe una colisin entre un fotn y una especie
Receptora (tomo, ion o molcula), el proceso de transferencia de energa no puede ser parcial. O
se da la cantidad exacta de energa para que ocurra la excitacin o la energa no es absorbida. Este
proceso se representa as.
M = h + M*
De donde M es la especie no excitada; h es la energa del fotn y M* es la especie que ha
absorbido la radiacin.
Aspecto prctico: Para la mayora de las sustancias, la tasa de absorcin vara con la longitud de
onda de la luz incidente, lo que lleva a la aparicin del color en los pigmentos que absorben ciertas
longitudes de onda, pero no para otras. Por ejemplo, con la luz blanca incidente, un objeto que
absorbe las longitudes de onda en el azul, verde y amarillo, aparecer en rojo. Un material negro

absorbe todas las longitudes de onda (convertidas en calor, mientras que un material blanco las
reflejar.
Investigadores del Instituto Politcnico Rensselaer ha creado un material de nanotubos de
carbono que puede absorber el 99,955% de la luz.[1]
Espectro de transmisin de la atmosfera coeficiente de absorcin de agua en cm -1
2.1.3 Ley de Beer
La Ley de Beer declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la
concentracin en la solucin.
Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azcar disuelta y en otro vaso tenemos la
misma cantidad de agua pero con mayor cantidad de azcar en solucin. El detector es una celda
fotoelctrica, y la solucin de azcar es la que se mide en su concentracin. Segn la ley de Beer, si
hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro
lado seria mayor que si repitiramos esto en el segundo; ya que en el segundo, las ondas
electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y son absorbidos por
estos.
Expresin

Diagrama de la absorcin de un haz de luz atravesando una cubeta de tamao l.

Dentro de un fotmetro de optek, se utiliza un haz de luz enfocado de manera precisa para
penetrar el elemento del procesado. Una clula fotoelctrica de silicio mide la intensidad
resultante de luz. La alteracin de la intensidad de la luz, causada por la absorcin y/o difusin
est explicada en la Ley Lambert-Beer.

La Ley Lambert Beer es un medio matemtico de expresar cmo la materia absorbe la luz. Esta ley
afirma que la cantidad de luz que sale de una muestra es disminuida por tres fenmenos fsicos: 1.
La cantidad de material de absorcin en su trayectoria (concentracin) 2. La distancia que la luz
debe atravesar a travs de la muestra (distancia de la trayectoria ptica) 3. La probabilidad de que
el fotn de esa amplitud particular de onda sea absorbido por el material (absorbencia o
coeficiente de extincin)Esta relacin puede ser expresada como: Donde |
|A=

| Absorbencia |

|=

| Coeficiente molar de extincin

|d=

| Distancia en cm

|c=

| Concentracin molar |

A = dc
A = dc

|
|
Transmitancia |
T = 10-cd or T = 10-A
T = 10-cd or T = 10-A
A medida que un haz de luz atraviesa un medio absorbente, la cantidad de luz absorbida en
cualquier volumen es proporcional a la intensidad de luz incidente multiplicado por el coeficiente
de absorcin. Consecuentemente, la intensidad de un haz incidente decae exponencialmente a
medida que pasa a travs del absorbente. Esta relacin cuando se expresa como Ley de Lambert
es: |

Donde |
|T=

| Transmitancia|

|=

| Coeficiente molar de extincin

|c=

| Concentracin molar del absorbente |

|d=

| Distancia en cm

En un enfoque simplificado, la transmitancia puede ser expresada como la intensidad de la

radiacin incidente, Io, que divide a la luz emergente de la muestra, I. Se refiere a la relacin I/Io
como transmitancia o sencillamente T. |
Absorcin

A = -log10 (I/Io) or A = -log10 (T)

A = -log10 (I/Io) or A = -log10 (T)
La transmitancia puede ser trazada en relacin a la concentracin, pero la relacin no es lineal. El
logaritmo negativo en base 10 de la transmitancia s es, sin embargo, lineal con la concentracin.
De esta manera, la absorcin es medida como: |
La ley explica que hay una relacin exponencial entre la transmisin de luz a travs de una
sustancia y la concentracin de la sustancia, as como tambin entre la transmisin y la longitud
del cuerpo que la luz atraviesa. Si conocemos l , la concentracin de la sustancia puede ser
deducida a partir de la cantidad de luz transmitida.
Las unidades de c y dependen del modo en que se exprese la concentracin de la sustancia
absorbente. Si la sustancia es lquida, se suele expresar como una fraccin molar. Las unidades de

 son la inversa de la longitud (por ejemplo cm-1). En el caso de los gases, c puede ser expresada
como densidad (la longitud al cubo, por ejemplo cm-3), en cuyo caso es una seccin
representativa de la absorcin y tiene las unidades en longitud al cuadrado (cm2, por ejemplo). Si
la concentracin de c est expresada en moles por volumen, es la absorbencia molar
normalmente dada en mol cm-2.
El valor del coeficiente de absorcin vara segn los materiales absorbentes y con la longitud de
onda para cada material en particular. Se suele determinar experimentalmente. La ley tiende a no
ser vlida para concentraciones muy elevadas, especialmente si el material dispersa mucho la luz.
La relacin de la ley entre concentracin y absorcin de luz est basada en el uso de
espectroscopia para identificar sustancias.
2.2 ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIN EN EL VISIBLE Y EN EL UV

Aunque el descubrimiento de la dispersin de la luz por Newton data de 1704 el desarrollo de las
tcnicas experimentales en este campo fue muy lento. Slo ms de un siglo despus Fraunhofer
cre un sistema ptico, que mediante uso de prismas y rendija (slit), permiti detectar en el
espectro de la luz solar las lneas de absorcin que llevan su nombre. El conocimiento de que cada
elemento qumico posee un espectro de emisin de lneas caracterstica se debe a Bunsen y
Kirchhoff (1859), que pueden considerarse los fundadores del anlisis espectral y los primeros que
construyeron un equipo capaz de ser utilizado prcticamente. (Descubrimiento de los nuevos
elementos Rb, Cs, Sr, presencia del He en el sol). Mientras que la Espectroscopia de Emisin
Atmica posea ya a fines del siglo XIX aplicaciones prcticas, en especial para la determinacin de
metales en minerales, la Espectroscopia de Absorcin Molecular en las regiones Ultravioleta y
Visible slo alcanz desarrollo a partir de los aos 30 del siglo XX. El desarrollo de sistemas de
deteccin fotoelctrica permiti en los aos 40 la sustitucin de los equipos de deteccin
fotogrfica, poco eficientes, y la generalizacin de esta tcnica espectroscpica.

La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioleta-visible (UV/VIS) es una

espectroscopia de fotones y una espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz) de
las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro
electromagntico. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro
provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se
utiliza para identificar algunos grupos funcionales de molculas, y adems, para determinar el
contenido y fuerza de una sustancia.
Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes de soluciones
de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos altamente conjugados.
Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar pequeas
cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la concentracin de
cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.

Una diferencia obvia entre ciertos compuestos es su color. As, la quinona es amarilla; la clorofila
es verde; los 2,4-derivados del dinitrofenilhidrazona de aldehdos y de cetonas se extienden en
color de amarillo brillante a de color rojo oscuro, dependiendo de la conjugacin del enlace doble;
y el aspirin es descolorido.
* Longitud de onda: se define como la distancia entre los picos adyacentes y puede ser medida en
metros, centmetros, o nanmetros (meters).
* Frecuencia: es el nmero de ondas por ciclos usualmente sus unidades estn dadas en Hertz que
son ciclos por segundos (Hz).
La luminiscencia ocurre debido a la emisin de luz por una sustancia determinada y esto ocurre
cuando un electrn regresa a su estado inicial despus de haber sido excitado y libera una energa
como un fotn. Podemos encontrar tres tipos de nombres para la espectroscopia de
luminiscencia, para diferentes tcnicas:
* Espectroscopia de fluorescencia molecular
* Espectroscopia de fosforescencia molecular
* Espectroscopia de quimioluminiscencia

Espectrofotmetro ultravioleta-visible.
El instrumento utilizado en la espectrometra ultravioleta-visible se llama espectrofotmetro UVVis. Mide la intensidad de luz que pasa a travs de una muestra (I), y la compara con la intensidad
de luz antes de pasar a travs de la muestra (Io). La relacin I / Io se llama transmitancia, y se
expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisin: A =
- log (%T) Las partes bsicas de un espectrofotmetro son una fuente de luz (a menudo una
bombilla incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lmpara de arco de deuterio en
el ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difraccin o monocromador para separar
las diferentes longitudes de onda de la luz, y un detector.
El detector suele ser un fotodiodo o un CCD. Los fotodiodos se usan con monochomadores, que
filtran la luz de modo que una sola longitud de onda alcanza el detector. Las rejillas de difraccin
se utilizan con CCDs, que recogen la luz de diferentes longitudes de onda en pxeles. Un
espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un solo haz (como el
Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula muestra. La Io debe medirse retirando la
muestra. Este fue el primer diseo, y todava est en uso en la enseanza y laboratorios
industriales. En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la
muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs de la muestra.
Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y el haz de referencia y el
de la muestra se miden al mismo tiempo. En otros instrumentos, los dos haces pasan a travs de
un bloqueador que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de
muestra y la del haz de referencia. Las muestras para espectrofotometra UV-Vis suelen ser
lquidas, aunque la absorbancia de los gases e incluso de los slidos tambin puede medirse. Las
muestras suelen ser colocadas en una clula transparente, conocida como cubeta. Las cubetas

suelen ser rectangulares, con una anchura interior de 1 cm. Esta anchura se convierte en la
longitud de ruta, L, en la Ley de Beer-Lambert. Tambin se pueden usar tubos de ensayo como
cubetas en algunos instrumentos. Las mejores cubetas estn hechas con cuarzo de alta calidad,
aunque son comunes las de vidrio o plstico. El cristal y la mayora de los plsticos absorben en el
UV, lo que limita su utilidad para longitudes de onda visibles.

Espectro ultravioleta-visible
Un espectro ultravioleta-visible es esencialmente un grfico de absorbancia de luz frente a una
longitud de onda en el rango del ultravioleta o la luz visible. Este espectro puede ser producido
directamente con los espectrofotmetros ms sofisticados, o bien pueden registrarse los datos de
una sola longitud de onda con los instrumentos ms simples. La longitud de onda se representa
con el smbolo . Del mismo modo, para una determinada sustancia, puede hacerse un grfico
estndar del coeficiente de extincin () frente a la longitud de onda (). Este grfico estndar
sera efectivamente "la concentracin corregida" y, por tanto, independiente de la concentracin.
Para una sustancia determinada, la longitud de onda en la cual se produce el mximo de
absorbancia en el espectro se llama max, y se pronuncia "lambda-max".

Las reglas de Woodward-Fieser son un conjunto de observaciones empricas que pueden utilizarse
para predecir max, la longitud de onda de la absorcin UV-Vis, para compuestos orgnicos
conjugados como dienos y cetonas.

Las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos de enlace
en una determinada molcula, y son valiosos para determinar los grupos funcionales dentro de la
molcula. La absorcin UV-Vis no es, sin embargo, una prueba especfica para ningn compuesto
determinado. La naturaleza del disolvente, el pH de la solucin, la temperatura, la concentracin
de electrolitos, y la presencia de sustancias interferentes pueden influir en los espectros de
absorcin de los compuestos, as como las variaciones en la anchura de la hendidura (ancho de
banda efectivo) en el espectrofotmetro.

Modos de excitacin electrnica

Cuando un fotn UV-Visible de energa adecuada incide en una especie absorbente, un electrn es
promovido desde su fundamental a un estado electrnico excitado. En absorcin UV-Visible,
pueden observarse las distintas transiciones electrnicas:

* Transiciones

<150 nm . Este tipo de transiciones se dan sobre todo en hidrocarburos que nicamente poseen
enlaces C-H o C-C. La energa requerida para que tenga lugar esta transicin es relativamente
grande, perteneciente a la regin espectral denominada ultravioleta de vaco.

* Transiciones n
entre 150-200 nm . Correspondientes a hidrocarburos que poseen tomos con pares de
electrones no compartidos (electrones de no enlace). La energa necesaria para que se produzca
esta transicin sigue siendo alta (aunque menor que en las ) perteneciendo stas a la regin
espectral UV Lejano.

* Transiciones n y
entre 200-700 nm. La mayora de las aplicaciones de espectroscopia UV-Visible estn basadas en
transiciones que ocurren en esta zona. Se requiere que las especies participantes aporten un
sistema de electrones (grupos cromforos: compuestos con insaturaciones, sistemas aromticos
multicclicos, etc.). Las energas de excitacin en las transiciones son medianamente altas,
correspondiendo a la regin UV Lejano y Prximo, mientras que las n son considerablemente
menores, correspondiendo a la regin visible del espectro. En espectroscopia UV-Vis se irradia con
luz de energa conocida suficiente como para provocar transiciones electrnicas, es decir
promover un electrn desde un orbital de baja energa a uno vacante de alta energa.
Transiciones electrnicas posibles entre orbitales n: orbital que contiene par de electrones no
compartidos (ejemplo en : O, N, Cl) Las transiciones ms favorecidas son entre el orbital ocupado
de energa ms alta (HOMO) y el orbital desocupado de energa ms baja (LUMO) El
espectrmetro UV-Vis registra las longitudes de onda donde se registra absorcin y cuantifica la
absorcin.
El espectro se registra como absorbancia (A) Vs. longitud de onda (), las bandas del espectro UV
son anchas por que incluyen la estructura fina de transiciones vibracionales y rotacionales de
menor energa.
La absorcin de las radiaciones UV, visibles e IR depende de la estructura de las molculas, y es
caracterstica para cada sustancia qumica. El color de las sustancias se debe a que absorben
ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y slo dejan pasar a nuestros ojos
aquellas longitudes de onda no absorbida.
Esta espectrofotometra utiliza radiaciones del campo UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a
400 nm (UV cercano) y de luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran utilidad para
caracterizar las soluciones en la regin ultravioleta-visible del espectro. Se rige por una ley muy
importante: la ecuacin de Beer-Lambert.

Regiones del espectro Ultravioleta-Visible.

La regin del espectro electromagntico que corresponde a las transiciones que involucran a
electrones de la capa de valencia se extiende por longitudes de onda de 100 a 1000nm (regiones
ultravioleta-visible e infrarroja cercana). No toda esta zona es de igual utilidad para la elucidacin
de estructuras orgnicas.
La regin por debajo de 200nm, conocida como Ultravioleta lejano, presenta caractersticas que
hacen complicada su utilizacin:

* En esta zona absorben las molculas componentes del aire, lo que hace imprescindible trabajar
con equipos evacuados (de aqu el nombre alternativo de la regin: Ultravioleta de vaco).
* Los materiales usuales para la construccin de componentes pticos (celdas, lentes, elementos
dispersivos), el cuarzo y el vidrio, absorben fuertemente en esta zona. Se requiere trabajar con
otros materiales, menos verstiles y ms costosos (LiF, CaF2, zafiro, utilizables hasta 115, 125 y
140 nm respectivamente).
* Los solventes absorben fuertemente en esta regin. Los hidrocarburos saturados pueden usarse
hasta 170 nm, los hidrocarburos perfluorados hasta 150nm.
* La sensibilidad de los detectores es generalmente baja.
* La absorcin en esta zona es poco selectiva. Casi todos los compuestos presentan absorcin en
esta regin.

La regin entre 200 y 400nm, llamada Ultravioleta cercana, es de gran utilidad en la determinacin
estructural de insaturacin conjugada, aromaticidad o de ciertos grupos insaturados con pares
electrnicos libres (carbonilo, nitro, etc.), sin presentar los serios inconvenientes del Ultravioleta
de vaco. Se requieren materiales pticos de cuarzo si se quiere acceder a la zona de longitudes de
onda inferiores a 350nm, mientras que el vidrio es utilizable en el resto de la regin Ultravioleta
cercana y toda la regin visible.
La regin Visible, de 400 hasta cerca de 800nm, es la nica del espectro electromagntico
detectable por el ojo humano. Las transiciones que se presentan en esta zona corresponden a
transiciones electrnicas de muy baja energa. Todos los compuestos coloreados absorben
selectivamente en esta regin. Los compuestos fuertemente conjugados y ciertos complejos de
metales de transicin absorben significativamente en la regin.
Ciertas transiciones electrnicas pueden presentarse a longitudes de onda superiores a 800nm
pero estas no son comunes en los compuestos orgnicos.
En la Figura se muestra la regin Ultravioleta Visible del espectro electromagntico, as como sus
caractersticas.

Caractersticas de las bandas de absorcin en la regin Ultravioleta-Visible.

Las transiciones electrnicas en molculas se presentan en forma de bandas, como ya se vio

anteriormente, con modificacin simultanea de los niveles de energa vibracionales y rotacionales.
En molculas pequeas en fase gaseosa es posible observar la estructura fina vibracional de las
bandas electrnicas con subestructura rotacional no bien resuelta. En molculas ms complejas la
multiplicidad de los niveles vibracionales hace que el gran nmero de transiciones de similar
energa produzca bandas de absorcin continuas sin estructura fina vibracional evidente. Esto es
tambin lo usual cuando se registran los espectros de absorcin UV en fases condensadas
(soluciones, slidos). Las principales caractersticas de una banda de absorcin son: posicin del
mximo, intensidad y anchura. La posicin de una banda, dada por la del mximo de absorcin,
depende de la energa de la transicin (relacin de Bohr) y se reporta usualmente como max /nm
o nmero de onda max/cm-1.La intensidad de una banda de absorcin puede expresarse como
absortividad molar en el mximo,, o ms correctamente como intensidad integrada. Esta
intensidad depende del cuadrado del momento dipolo de la transicin (cambio en la distribucin
de cargas elctricas durante la transicin). Se producen absorciones intensas cuando una
transicin es acompaada por un gran cambio en la distribucin de cargas (max del orden de
104), por otra parte las transiciones con pequeo cambio en la distribucin de cargas producen
dbiles bandas de absorcin (max del orden de 102 o inferiores). Dados los valores tpicos de las
absortividades molares en el UV, es comn trabajar con soluciones de concentraciones 10-3 a 10-5
molL-1. La anulacin del momento dipolo de transicin y por lo tanto la ausencia o baja intensidad
de una banda de absorcin est vinculada con la simetra de las funciones de onda y se expresa a
travs de las reglas de seleccin que estudiaremos posteriormente.
La anchura de una banda de absorcin electrnica depende del nmero e intensidad de los
componentes vibracionales de la transicin correspondiente. La distribucin de intensidades entre
los componentes vibracionales de una transicin electrnica depende de los cambios en la
geometra de equilibrio de los estados base y excitados y es interpretada sobre la base del
Principio de Franck Condon

Terminologa
Resulta conveniente definir algunos trminos usuales en espectroscopia UV-Vis que tienen en
parte origen en antiguas teoras sobre el origen del color de las sustancias.
Grupo cromforo: grupo covalente insaturado que origina bandas de absorcin electrnicas (*).
Ejemplos tpicos son los grupos vinilo, carbonilo, fenilo, nitro.
Grupo auxcromo: grupo saturado (generalmente conteniendo pares electrnicos libres) que
unido a un cromforo altera tanto la posicin como la intensidad de la banda de absorcin de
ste. Auxcromos tpicos son los grupos OH, -NH2, -Cl, -Br, -CH3.

Reglas de seleccin

Existen ciertas reglas que establecen bajo qu condiciones la integral del momento dipolo de la
transicin se anula y por lo tanto la transicin es prohibida. Estas reglas son denominadas reglas
de seleccin.
Las propiedades de simetra de las funciones de onda y de los operadores involucrados son
determinantes en la anulacin o no de la integral correspondiente. Dado que toda molcula
pertenece a un grupo puntual de simetra, tanto las funciones de onda como el operador son
clasificables respecto a las operaciones de simetra del grupo y cualquiera de sus representaciones
es reducible a las representaciones irreducibles del grupo puntual de simetra molecular Podemos
ver de forma simple como la simetra de las funciones determina la anulacin o no de integrales
asociadas con las mismas. Tomemos dos funciones, la parbola (y=x2) y la parbola cbica
(y=x3).La primera de las funciones es simtrica respecto al eje de las ordenadas (y) mientras que la
segunda es anti simtrica. Las integrales de ambas funciones en intervalos de integracin
simtricos se muestran en la Figura Observamos que cuando el integrando es anti simtrico la
integral se anula cuando se integra en un intervalo simtrico de las variables independientes. En
general si el integrando resulta anti simtrico a alguna de las operaciones de simetra, la integral
del momento dipolo de transicin se anular. Veamos las reglas de seleccin asociadas con la
simetra molecular.
Aplicaciones

La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin cuantitativa de soluciones

de iones metlicos de transicin y compuestos orgnicos muy conjugados.

Soluciones de iones metlicos de transicin : Las soluciones de iones metlicos de transicin

pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz visible) debido a que los electrones en los tomos
de metal se pueden excitar desde un estado electrnico a otro. El color de las soluciones de iones
metlicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como algunos aniones o ligandos.
Por ejemplo, el color de una solucin diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco
se intensifica el color y cambia la longitud de onda de absorcin mxima.

Compuestos orgnicos: Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de
conjugacin, tambin absorben luz en las regiones del espectro electromagntico visible o
ultravioleta. Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los
compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes
orgnicos pueden tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son
adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente en la mayora de
longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la absorcin del espectro
de un compuesto orgnico.

Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores, stos son a menudo
demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas.
La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es directamente
proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la espectrometra UV/VIS puede usarse
para determinar la concentracin de una solucin. Es necesario saber con qu rapidez cambia la
absorbancia con la concentracin.