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PONTFICIA UIVERSIDAD CATLICA DEL ECUADOR

ESCUELA DE BIOANLISIS
BIOQUMICA CLNICA I
Nombre: Carolina Lpez

Grupo: 3

Tema: Curva de Calibracin Glucosa


OBJETIVOS:

Realizar una curva de calibracin de glucosa


Determinar el rango de linealidad para dicho compuesto
Realizar grficas en base a la concentracin y absorbancia obtenidas

INTRODUCCIN:
Denominamos espectro de una sustancia a la representacin de absorbancia (A) en
funcin de la longitud de onda (), este grfico presenta ondulaciones con mximos y
mnimos. Para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud de
onda correspondiente a un mximo, pues el error de medicin es mnimo y la sensibilidad
mxima.
Para verificar el cumplimiento de la ley de Beer, se debe realizar la curva de calibracin;
absorbancia (A) en funcin de concentracin (c), para lo cual se preparan soluciones de la
sustancia de concentraciones conocidas y se mide la absorbancia a la longitud de onda
elegida. Si es vlida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relacin
debe ser una recta, que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observan
desviaciones debidas a diversos factores.
CLCULOS:
Curva N. 1

Escala: (Y) 1cm = 0.4UA ; (X) 1cm = 76.92 mg/dL

Absorbancia vs Concentracin
1.8

Absorbancia (UA)

1.6
1.4
1.2
1
0.8
y = 0.0016x + 0.0955
R = 0.9725

0.6
0.4
0.2
0
0

100

200

300

400
500
600
Concentracin (mg/dL)

700

800

900

1000

Rango de Linealidad: 0 450 mg/dL

Solucin Absorbancia Concentracin


#

(UA)

(mg/dL)

1
2
3
4
5
6
7
8

0,002
0,119
0,362
0,648
0,956
1,156
1,33
1,426

0
50
150
300
450
600
750
900

Pendiente: 0.0016
Ecuacin: y= 0,0016x + 0,0955

Coeficiente Pearson: 0.9725

Curva N. 2

Escala: (Y) 1cm = 20UA


(X) 1cm = 76.92 mg/dL

% Transmitancia

% Transmitancia vs. Concentracin


100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0

100

200

300

400

500

600

Concentracin (mg/dL))

Clculos:
Solucin Concentracin Transmitancia
#

(mg/dL)

99,54

50

76,03

150

43,45

300

22,49

450

11,07

600

6,98

750

4,68

900

3,75

700

800

900

1000

Curva N. 3

Escala: (Y) 1cm = 20UA ; (X) 1cm = 0.33

% Transmitancia

% Transmitancia vs Log Concentracin


100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0.00

0.50

1.00

1.50

2.00

2.50

3.00

3.50

Log Concentracin

Transmitancia

Log

%
99,54
76,03
43,45
22,49
11,07
6,98
4,68
3,75

Concentracin
0,00
1,70
2,18
2,48
2,65
2,78
2,88
2,95

Rango de Linealidad: 0 450 mg/dL

CONCLUSIONES:
Las curvas de calibracin constituyen una herramienta muy til para la
cuantificacin (e identificacin) de sustancias a partir de sus espectros de
absorcin.
Para poder cuantificar una sustancia por interpolacin a partir de su espectro es
necesario que su concentracin se encuentre en el intervalo de linealidad de la
curva de calibracin, ya que valores por encima (muy concentrada) o por debajo
(muy diluida) no sern cuantificados de manera confiable. Las curvas de Ringbom
constituyen una ayuda valiosa para determinar dichos rangos de concentracin
ptimos.
La eleccin de la longitud de onda ptima para la elaboracin de la curva de
calibracin es determinante a la hora de cuantificar una sustancia por el mtodo
estudiado en esta prctica, pues es a esta (546nm) en donde la relacin entre
Absorbancia y concentracin es ms marcada (mayor dependencia).

RECOMENDACIONES:

Se debe tener en cuenta la tcnica de pipeteo para lograr mayor exactitud y


precisin al momento de realizar las curvas
Es importante revisar que los controles y reactivos de trabajo estn en condiciones
ptimas de uso

BIBLIOGRAFA:

Casares, W. A. (2006). Anlisis Ultravioleta-visible. . Yucatn: Ediciones de la Uiversidad Autnoma


de Yucatn.
Harris, D. C. (2007). Anlisis qumico cuantitativo. Barcelona: Revert.

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