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ESCUELA DE BIOANLISIS
BIOQUMICA CLNICA I
Nombre: Carolina Lpez
Grupo: 3
INTRODUCCIN:
Denominamos espectro de una sustancia a la representacin de absorbancia (A) en
funcin de la longitud de onda (), este grfico presenta ondulaciones con mximos y
mnimos. Para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud de
onda correspondiente a un mximo, pues el error de medicin es mnimo y la sensibilidad
mxima.
Para verificar el cumplimiento de la ley de Beer, se debe realizar la curva de calibracin;
absorbancia (A) en funcin de concentracin (c), para lo cual se preparan soluciones de la
sustancia de concentraciones conocidas y se mide la absorbancia a la longitud de onda
elegida. Si es vlida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relacin
debe ser una recta, que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observan
desviaciones debidas a diversos factores.
CLCULOS:
Curva N. 1
Absorbancia vs Concentracin
1.8
Absorbancia (UA)
1.6
1.4
1.2
1
0.8
y = 0.0016x + 0.0955
R = 0.9725
0.6
0.4
0.2
0
0
100
200
300
400
500
600
Concentracin (mg/dL)
700
800
900
1000
(UA)
(mg/dL)
1
2
3
4
5
6
7
8
0,002
0,119
0,362
0,648
0,956
1,156
1,33
1,426
0
50
150
300
450
600
750
900
Pendiente: 0.0016
Ecuacin: y= 0,0016x + 0,0955
Curva N. 2
% Transmitancia
100
200
300
400
500
600
Concentracin (mg/dL))
Clculos:
Solucin Concentracin Transmitancia
#
(mg/dL)
99,54
50
76,03
150
43,45
300
22,49
450
11,07
600
6,98
750
4,68
900
3,75
700
800
900
1000
Curva N. 3
% Transmitancia
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
3.00
3.50
Log Concentracin
Transmitancia
Log
%
99,54
76,03
43,45
22,49
11,07
6,98
4,68
3,75
Concentracin
0,00
1,70
2,18
2,48
2,65
2,78
2,88
2,95
CONCLUSIONES:
Las curvas de calibracin constituyen una herramienta muy til para la
cuantificacin (e identificacin) de sustancias a partir de sus espectros de
absorcin.
Para poder cuantificar una sustancia por interpolacin a partir de su espectro es
necesario que su concentracin se encuentre en el intervalo de linealidad de la
curva de calibracin, ya que valores por encima (muy concentrada) o por debajo
(muy diluida) no sern cuantificados de manera confiable. Las curvas de Ringbom
constituyen una ayuda valiosa para determinar dichos rangos de concentracin
ptimos.
La eleccin de la longitud de onda ptima para la elaboracin de la curva de
calibracin es determinante a la hora de cuantificar una sustancia por el mtodo
estudiado en esta prctica, pues es a esta (546nm) en donde la relacin entre
Absorbancia y concentracin es ms marcada (mayor dependencia).
RECOMENDACIONES:
BIBLIOGRAFA: