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PRACTICA N 7
PEROXIDASA
NOMBRE
CURSO
CICLO
: II ciclo
PROFESORES ENCARGADOS:
Dra. Violeta Morin Garrido
Mg. Carlos Holguin Mauricci.
Piura- Per
2010
ACTIVIDAD ENZIMATICA.
MATERIALES:
Tomate (lycopersicon esculentum)
Trozo de hgado fresco
Trozo de hgado triturado
Papel filtro absorevente
Algodn
Gradillas
Almidon en solucin de 1%
Mortero
Gillette u hoja de bistur
FUNDAMENTO TEORICO:
Definicin
Son catalizadores bilgicos proteicos. Su poder cataltico es mucho mayor que el de los
catalizadores inorgnicos.
Se han identificado unas 2000 enzimas diferentes
Las clulas pueden realizar reacciones qumicas a gran velocidad a temperatura
relativamente baja y un pH biolgico merced a las enzimas que una celula elabora
determinan las funciones biolgicas de la misma, ya que una celula solo puede llevar a
cabo de una reaccin qumica, a un ritmo razonable, se tiene una enzima especifica para
catalizar esa reaccin. Sin enzimas las reacciones serian lentas, que difcilmente se llevan
a cabo.
Enzimas: catalizadores biolgicos.
Las reacciones qumicas en sistemas biolgicos raramente ocurren en ausencia de unjn
catalizador. Estos catalizadores se denominan enzimas y son en su totalidad molculas de
naturaleza proteica
(aunque ha habido estudios acerca de enzimas de naturaleza
glucosidico).
Es razonable pensar en la necesidad que tienen los seres vivos de poseer estos
catalizadores, ya que las funciones vitales de cualquier clula serian imposibles de
mantener si las reacciones que ocurren en ella fueran extremadamente lentas.
Ademas de incrementar la velocidad las enzimas exhiben una elevada especificdad y en
algunos casos pueden ser reguladas por diferentes metabolitos, aumentando y otras veces
pueden ser reguladas por diferentes metabolitos, aumentando y otras veces
disminuyendo, de acuerdo a las necesidades del momento, su actividad.
Todas estas propiedades pueden ser cumplidas por molculas altamente complejas, que al
ser molculas organicas( macromolculas) comparten caractersticas con las protenas no
enzimticas y difieren de los catalizadores inorgnicos:
a) Son termohabiles y su actividad depende en ciertos casos del pH del medio.
b) El reconocimiento de la enzima con el reactivo a procesar (denominado sustrato )
es altamente especifico.
c) Tienen gran eficiencia, es decir, transforman un gran numero de molculas de
sustrato por unidad de tiempo.
d) Estan sujetas a un gran diversidad de controles celulares, genticos y alostericos.
Como todos los catalizadores las enzimas aceleran notablemente la velocidad de una
reaccin qumica y cumplen con las siguientes caractersticas.
1) Son efectivas en pequeas cantidades.
2) No sufren modificaciones qumicas irreversibles durante la catlisis. Es decir, que
luego de la reaccin enzimtica, las molculas de enzimas que reaccionaron son
indistinguibles de las que no lo han hecho,(la estructura de la molecula se mantiene,
al principio y al final de la reaccin, exactamente igual).
3) No afectan la posicin de equilibrio de la reaccin que cataliza.El estado inicial y
final de la reaccin es el mismo, solo que se llega al equilibrio mucho mas
rpidamente.
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE LAS REACCIONES
ENZIMATICAS.
Temperatura
Un aumento en la temperatura provoca un aumento de la velocidad de reaccin hasta
cierta temperatura optima, ya que despus de aproximadamente 45C se comienza a
producir la desnaturalizacin trmica. Las enzimas de muchos mamferos tienen una
temperatura optima de 37C, por encima de esa temperatura comienza a inactivarse y se
destruyen. Sin embargo existen especies de bacterias y algaas que habitan en fuentes de
aguas termales y en el otro extremo ciertas bacterias articas tienen una temperatura
optima cercana a los 0C.
Efecto de pH sobre la actividad enzimtica.
El pH no afecta la actividad enzimtica directamente sino que modifica la concentracin
de protones. Los protones adems de alterar la estructura de la enzima y el substrato o
producto.en esos casos, la concentracin de protones afecta directamente la velocidad de
la reaccion.
Cualquier cambio de pH, sabiendo que las enzimas son protenas, puede alterar el carcter
ionico de los grupos amino y carboxilo en la superficie proteica, afectando asi a las
propiedades catalticas de una enzima.A pH alto o bajo se puede producir la
desnaturalizacin de la enzima y en consecuencia su inactivacin.
Enzimas.
Pepsina 1,5 (pH optimo)
Tripsina 7,7.
Catalasa 7,6.
Arginina 9,7.
Funerasa 7,8.
Ribonucleasa 7,8.
PROCEDIMIENTO
I.
III.
Experimento N06: EFECTO DE PH.
En cada uno de los tres tubos de de prueba bien limpios, coloque un pedacito de hgado
plenamente t4rituradpo, agregue a uno de ellos, un ml de H 2O2 destilada.El pH del otro, 3
ml de Na(OH) y al otro 3 ml de HCl a 0.1M.Vierta a cada tubo de H 2O2 y observe los
resultados.
Observe y describa
El hgado + agua oxigenada + HCl
En este caso no hay reaccin dado que el acido ha desnaturalizado la protena y como la
enzima es una protena ya no reacciona.
El hgado +agua oxigenada +NaOH
En esta situacin ocurre una reaccin pero es moderada dado que la enzima tiene mas
afinidad por las bases que los cidos.
El hgado +agua oxigenada + agua destilada
En esta situacin se observa una reaccin violenta hay mayor burbujeo a comparacin de
los cidos y bases dado que como el PH del agua destilada es neutro entonces no va ha
haber un aspecto inhibitorio de la enzima, al igual que como actua sobre el organismo
humano.
RESULTADOS:
SUSTANCIA 01 02 01
2ml de H2O2 2ml 2ml 2ml
Arena
Perxido de
H2O2
Trocitos de
hgado
Trocitos de
papa
Hgado
fresco
Perxido de
H2O2
Hgado
fresco
triturado
Papa fresca
triturada
Velocidad de
reaccin
Experimento01
02
2ml
01
02
1
trozo
1
trozo
01
02
0c 37c
100c
HCl
ml
neutro
ml
2
gr
++
++
+++
gr
ml
2
trozos
2
trozos
1
trozo
1 ml
2 gr
++++
Experimento2
++
++++ +++
Experimento 3
+++
+
Experimento 4
+++
+
Experimento 5
Experimento 6
CUESTIONARIO:
1. Cul es el beneficio celular de la presencia de la catalasa en las clulas
vivas?
La catalasa es una enzima que acelera las reacciones qumicas en el organismo es
muy importante dado que su funcin es de proteger a las clulas del efecto toxico
del perxido de hidrogeno producida en las diferentes reacciones redox
producidas en la clula
2. para qu sirven las enzimas?
Las enzimas sirven en que Contribuyen al desdoblamiento de las molculas de los
principios nutritivos (protenas, grasa y carbohidratos) en otras ms pequeas
durante la digestin de los alimentos. Asimismo, facilitan su paso a la sangre a
travs de la pared intestinal; catalizan la formacin de molculas grande y
complejas con el fin de producir los constituyentes celulares; y favorecen el
almacenamiento y gasto de energa. Las enzimas, tambin actan en las funciones
de la reproduccin, procesos de la respiracin y en la visin, y todos los dems
mecanismos orgnicos.
3. Comparando los resultados obtenidos, Cmo interpreta la diferencia de la
actividad enzimtica en cada tubo; Indique la razn de ello? Concluya de
manera general
La diferencia radica que en cada experimento que se realiza en cada tubo
participan sustancias diferentes , como tambin cantidades diferentes , adems
que unas en diferentes situaciones de temperatura , de PH , entre otras es decir la
reaccin de la actividad enzimtica depende de muchos factores como acabamos
de mencionar, estos factores modifican la velocidad de reaccin , unos generan
efectos inhibitorios y otros hacern acelerar la reaccin
Por ejemplo a temperaturas mayores que la normal generan que las enzimas se
desnaturalizasen y por lo tanto las enzimas llegan a coagularse y ya no reaccionan
En todos los organismos vivos estn formadas por clulas y estas para su
existencia tienen que realizar su respectiva metabolizacin y en la metabolizacin
de las clulas se genera perxido de agua y esto es toxico para la clula. Entonces
la clula tiene que tener una enzima que descomponga dicha sustancia y es ah
donde acta la peroxidasa generando agua y oxigeno a la clula que es
indispensable para su metabolizacin y supervivencia.
7. Qu es un sistema enzimtico?
BIBLIOGRAFIA
http://es.wikipedia.org/wiki/Cin%C3%A9tica_enzim%C3%A1tica
BIBLIOTECA DE CONSULTA MICROSOFT ENCARTA 2009.
Microsoft Corporation. Reservados todos los derechos
http://es.wikipedia.org/wiki/Grupos_prost%C3%A9ticos
http://www.angelfire.com/ult/bioquimicae07/intentocucs.html