IDENTIFICACIN DE MATERIALES PARA ANLISIS

MICROBIOLGICO
IDENTIFICATION MATERIAL FOR MICROBIOLOGICAL
ANALYSIS
AGAMEZ PABLO-ARBOLEDA KATHERIN-GONZALEZ DANIELA-GUERRERO
DUVAN- SILVA CIELO.

RESUMEN
Este artculo describe los diversos equipos y materiales utilizados para anlisis
microbiolgicos, tambin se muestra el funcionamiento bsico y precauciones
de los equipos y materiales. Da una visin de la estructura de un laboratorio de
microbiologa, Se describe el comportamiento de los micro-organismos y el
funcionamiento de las bacteria mediante un anlisis realizado a la leche; Para
ello se utiliz un colorante especial llamado azul de metileno con el fin de ser
exactos se realizaron algunas pruebas, tomando como referencia diferentes
tipos de leche. Se determin que por la accin reductora de los microorganismos se produce una modificacin de color azul a su color natural de
acuerdo a la carga microbiana que est presente, as que se registr el tiempo
que duro la coloracin en la leche; Con estos anlisis realizados se demostr
que los diferentes tipos de leche cumplen con la NTC399.
PALABRAS CLAVES: Bacterias, NTC399, azul de metileno, reductasa,
enzimas, oxidacin-reduccin, catalizacin.

ABSTRACT
This article describes the various equipment and materials used for
microbiological analyzes, basic operation is also shown and precautions of
equipment and materials. It gives an overview of the structure of a microbiology
laboratory, Is described the behavior of microorganisms and the operation of the
bacterium by analysis performed of milk; For this, a special colorant is used call
methylene blue in order to be precise some tests were conducted with
reference to different types of milk. It was determined that the reducing action of
microorganisms blue a change occurs to its natural color according to the
microbial load that is present, so hard time coloring in milk recorded These
analyzes demonstrated that different kinds of milk meet the NTC399.
KEY WORDS: Bacterium, NTC 399, methylene blue.

INTRODUCCION
Es muy importante tener claridad
sobre
los
conceptos de
la

microbiologa y como se aplica en el

campo
de
la
qumica.
La

microbiologa es
la
ciencia
encargada
del
estudio
de
los microorganismos, seres vivos
pequeos no visibles al ojo humano
tambin conocidos como microbios.
Se dedica a estudiar los organismos
que son slo visibles a travs
del microscopio:
organismos procariotas y eucariotas
simples.
Son
considerados
microbios todos los seres vivos
microscpicos, estos pueden estar
constituidos
por
una
sola clula (unicelulares), as como
pequeos
agregados
celulares
formados
por
clulas
sin diferenciacin celular; estos
pueden ser eucariotas (clulas con
ncleo) tales como hongos y
protistas, procariotas (clulas sin
ncleo definido) como las bacterias.
Sin embargo la microbiologa
tradicional
se
ha
ocupado
especialmente
de
los
microorganismos patgenos entre
bacterias, virus y hongos, dejando a
otros microorganismos en manos
de
la parasitologa y
otras
categoras de la biologa. Aunque el
trmino bacteria, derivado del griego
("bastoncillo"), no fue
introducido hasta el ao 1828
por Christian Gottfried Ehrenberg,
ya
en
1676 Anton
van
Leeuwenhoek,
usando
un
microscopio de una sola lente que l
mismo haba construido basado en
el
modelo
creado
por
el
erudito Robert
Hooke en
su
libro Micrographia, realiz la primera
observacin
microbiolgica
registrada de "animculos", como
van Leeuwenhoek los llam y dibuj
entonces. La bacteriologa (ms

tarde una subdisciplina de la

microbiologa) se considera fundada
por
el
botnico Ferdinand
Cohn (1828-1898).
Cohn
fue
tambin el primero en formular un
esquema para la clasificacin
taxonmica de las bacterias. La
qumica es la base de todos los
compuestos que forman parte de los
organismos vivos pues se hace uso
de la orgnica no slo por sus
reacciones bioqumicas sino por los
compuestos a usar. Tambin cabe
resaltar que es importante tener
claro el uso de los equipos tomando
como implemento la lectura del
manual. NTC399 Esta norma
establece los requisitos que debe
cumplir la leche cruda como materia
prima para su industrializacin. Se
establece que la leche producto de
la secrecin mamaria normal de
animales bovinos lecheros sanos,
obtenida mediante uno o ms
ordeos
diarios,
higinicos,
completos e ininterrumpidos, sin
ningn tipo de adicin o extraccin.
Tambin se estipula el nmero de
colonias permitidas para consumo
humano.

METODOLOGA
Se llev acabo la identificacin de
los equipos y materiales ms
utilizados en un laboratorio de
microbiologa como lo son:
Balanza Analtica: Es un equipo que
tiene gran sensibilidad, hay de
varios Tipos, formas y tamaos.
Balanza: Es un equipo que permite
pesar sustancias, su sensibilidad es
de 1 decima de gramo.

Autoclave: Es un equipo que se

utiliza para la esterilizacin de
material, tanto de limpio como
contaminado, que se basa en la
produccin de vapor contenido a
altas presiones.
Vortex: Es un aparato que permite
agitar
sustancias
en
forma
homognea.
Potencimetro: Es un aparato que
permite medir el pH De las
sustancias.
Cmara de anaerobiosis: Es una
cmara con atmsfera controlada
por medio de gases especiales para
el cultivo de bacterias anaerobias.
Incubadora: Se Usa para mantener
a una temperatura constante los
cultivos microbiolgicos, y asegurar
el
crecimiento
de
los
microorganismos.
Horno: Se usa para secar el
material de vidrio usado en el
laboratorio, y guardar el material
esterilizado.
Neveras: Se usa para almacenar
material limpio y conservar los
microorganismos.
Tambin
se
emplea para conservar reactivos
que requieren bajas temperaturas.
Cuenta Colonias: Se utiliza para
aumentar la vista de las colonias en
la caja de Petri, con el fin de facilitar
la identificacin microscpica y el
conteo.
Plancha de calentamiento: Es un
aparato que permite calentar
sustancias.

Bao Mara: Es un aparato que se

utiliza para des gelificar los medios
de cultivo y mantenerlos a una
temperatura constante.
Asa de siembras: Se usan para
inocular muestras o bacterias puras
en los medios de cultivo.
Jeringas: Se utilizan para tomar e
inocular sustancias.
Cubetas de tincin: Se usan para
contener los colorantes y sumergir
en ellas el material a teir.
Portaobjetos:
Se
usan
para
depositar en ellos las muestras a
observar al microscopio.
Cubreobjetos: Se usan para cubrir
las muestras que estn sobre el
portaobjetos.
Cajas de Petri: Se usan para
contener los medios de cultivo
donde posteriormente se realiza la
siembra.
Tubos de centrifuga: Se usa para
obtener precipitados de lquidos, por
medio de la centrifugacin.
Tambin se reconoce las partes de
un laboratorio de microbiologa
tomando
como
referencia
la
organizacin del laboratorio de la
Corporacin Tecnolgica de Bogot.

En esta parte es muy importante

resaltar como se llev a cabo la
identificacin de bacterias en la
leche por medio de un colorante
especial llamado azul de metileno
en donde se tomo 10 ml de las
diferentes muestras que se tenan y
se le agregaron alrededor de 10
gotas del reactivo indicador y se
puso en reposo para esperar la
decoloracin de este, pasados 35
minutos la primera leche (leche
cruda)
mostros
el
primer
descoloramiento. Luego de una
hora se determino que era
necesario el calentamiento de las
muestras para que el calor
(catalizador) aumentara la velocidad
de reduccin del azul de metileno.
Cuando ya se dio el cambio se toma
el tiempo y se finaliza la practica
con el lavado del material.

RESULTADOS
Tiempo de reaccin de la leche con
el azul de metileno
Coloracin natural: blanca
Coloracin inicial (azul de metileno)azul
Coloracin despus de la reaccinblanca

TIPO DE LECHE
Grupo #1: Leche sin
pasteurizar
Grupo#2:
Leche
alquera
Grupo #3:

TIEMPO
35 min

Leche xito
Grupo #4:
Leche*sin nombre *

01:59 min

Grupo # 5:
Leche Algarra

02:00 horas

Grupo #6:
Leche san Martn
Grupo #7:
Leche la gran vida

03:00 horas
02:28:52 seg

ANLISIS Y DISCUSIN
En esta parte es muy importante
resaltar como se llevo a cabo la
identificacin de bacterias en la
leche por medio de un colorante
especial llamado azul de metileno
(prueba de reductasa: es una
prueba indirecta para estimar el
contenido bacteriano de la leche
cruda. En lugar de contar las
bacterias, se establece una
correlacin entre el tiempo que se
necesita para reducir el colorante en
la leche, a una forma incolora y la
probable poblacin bacteriana de la
muestra), el cual evala la cantidad
aproximada de bacterias en la leche
y, por tanto, la capacidad de
conservacin. El mecanismo del
azul de metileno para valorar la
calidad microbiolgica est
relacionado con la actividad
reductora de las bacterias que en el
proceso de respiracin eliminan el
oxgeno disuelto en la leche y el
colorante se reduce hasta que se
elimina totalmente. Esto fue
presenciado en este laboratorio, el
cual se hizo la prueba como
anteriormente est escrito.

02:21 min

02:12 min

La leche sin pasteurizar demuestra

un contenido bacteriano bastante
alto ya que la reduccin del azul de

metileno (decoloracin). Fue la

nica leche que no tuvo que ser
catalizada por el calor para
aumentar la velocidad de
reproduccin de las bacterias y a su
vez la reduccin de azul de
metileno. Por otro lado la leche que
ya ha tenido algn tipo de
tratamiento, como se supona,
necesit de un calentamiento para
amentar la velocidad de la
reduccin del azul de metileno.
La calidad de la leche se puede
determinar por esta prueba ya que
nos va a decir si el tratamiento
realizado a la leche fue adecuado y
funcional y adems si cumple con
los estndares dados por la norma
NTC-3856 del 2008, que dice que la
leche no debe contener mas
700.000 unidades formadoras de
colonias bacterianas. Aun as el
cambio de la leche sin tratamientos
cumple con esta norma ya que si
hay las 700.000 unidades esta
reducira el colorante en menos de
dos minutos ya que la cantidad de
bacterias tendra la capacidad de
reducirla a gran velocidad.
El calor nos ayuda como segundo
catalizador ya que genera un
crecimiento bacteriano acelerado y
esto genera mas reduccin del azul
de metileno ya que el oxigeno
disuelto es consumido ms rpido.

CONCLUCIONES
Esta
prctica
nos
da
una
perspectiva ms clara sobre el
funcionamiento de los equipos y

cmo manejarlos a la hora de una

prctica.
Por otro lado nos ayuda determinar
la cantidad de bacterias y por ende
la calidad de la leche. Ya que la
velocidad del cambio de color del
azul de metileno nos da una
correlacin con la cantidad de
bacterias.
BIBLIOGRAFIA
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