Universidade Federal de Mato Grosso

Instituto de Cincias Agrrias e Ambientais

Curso de Agronomia

BIOQUMICA RESUMOS DAS AULAS

Profa. Dra. Carmen Wobeto

Sinop, 06 de novembro de 2013.

CARBOIDRATOS
1. Introduo

Anualmente fotossntese mais de 100 bilhes de toneladas de CO2 e
H2O em celulose e outros. Biomolculas mais abundantes da Terra.

Base da dieta humana.

Funes nos organismos vivos: energtica; estruturais; lubrificantes de
articulaes; ligados a protenas ou lipdios, sinalizam a localizao ou
destino destas molculas hbridas (glicoconjugados).

Conceito: So poliidroxialdedos ou poliidroxicetona ou substncias que
liberam estes compostos por hidrlise.

Frmula geral (CH2O)n, contudo podem apresentar tomos de N, P ou
S.

Trs classes monossacardios, oligossacardios e polissacardios.
2. Monossacardeos

So acares simples, uma nica unidade de poliidroxialdedo ou
poliidroxicetona.

So solveis em gua, porm insolveis em solventes polares.

A maioria tem sabor doce.

Mais abundantes: D-glicose e D-frutose.

Dividem-se em dois grupos: aldoses (carbono carbonila na extremidade
da cadeia carbnica) e cetoses (carbono carbonila em qualquer outro
local da cadeia carbnica).

Monossacardeos mais simples: trioses gliceraldedo e a
diidroxicetona.

Monossacardeos com 4, 5, 6 e 7 tomos de carbono no denominados
tetroses, pentoses, hexoses e heptoses, respectivamente.

Possuem 1 ou mais C assimtricos ocorrem em formas isomricas
opticamente ativas. Exceto: diidroxicetona.

Frmula para determinar nmero de ismeros: n centros quirais 2n
estereoisomeros.

Os estereoismeros podem ser divididos em dois grupos (D e L), que
diferem entre si na configurao ao redor do centro quiral mais distante
da carbonila.

D : OH para a direita D-ismero.

L: OH para a esquerda L-ismero.

Das 16 aldoexoses possveis, 8 so da forma D e 8 so da forma L.

A maioria das hexoses encontradas nos organismos vivos so Dismeros.

Epmeros: Dois acares que diferem somente na configurao ao redor
de um nico tomo de carbono. Ex.: D-manose e D-glicose.

Figura 1. Ismeros D-aldoses.

Em soluo aquosa monossacardeos com 5 C ou mais formam

estrutura cclica O grupo carbonila liga-se ao oxignio de um grupo
hidroxila mais distante. Adedos + lcoois formam hemiacetais. Cetonas
+ lcoois formam hemicetais.

Figura 2- Formao das duas estruturas cclicas da D-glicose.

Formao de um novo centro assimtrico: C anmero (C1 em aldoses e

C2 em cetoses).
Anis de 5 tomos furanoses e anis de 6 tomos piranoses.
Monossacardeos anmeros diferem entre si em sua configurao ao
redor do carbono hemiacetal ou hemicetal. (configurao e ).
Mutarrotao em soluo aquosa os anmeros e da D-glicose
intercomvertem-se.

Figura 3. Piranoses e furanoses.

Figura 4 Estrutura conformacional em cadeira da glicopiranose.

Derivados de hexoses o grupo OH trocado por um outro grupo

substituinte (glucosamina) ou o C da carbonila oxidado a cido
carboxlico (cido glucnico).
Glucosamina ex: N-acetilglucosamina e cido N-acetilmurmico
componentes de polmeros estruturais, presentes em parede celular de
bactrias.

Figura 5 Derivados de hexoses.

Os monossacardeos so agentes redutores o Carbono anomrico
livre pode ser oxidado a carboxila na presena de ons cprico ou

frrico. Teste para a presena de acares redutores reao de

Fehling.
A concentrao de glicose sangnea normalmente determinada pela
medida da quantidade de H2O2 produzido na reao catalisada pela
glicose oxidase. Uma segunda reao catalisada pela peroxidase
converte H2O2 mais um composto incolor em um composto colorido, cuja
a dosagem realizada por espectrofotometria.

Figura 6 Acares como agentes redutores.

3. Oligossacardeos
Compostos por poucas unidades de monossacardeos, unidas por
ligaes glicosdicas;
Mais abundantes: dissacardeos. Ex: sacarose.
Nas clulas a maioria dos oligossacardeos com 3 ou mais unidades
esto unidos a lipdeos ou protenas: glicoconjugados.
Dissacardeos: dois monossacardeos unidos por ligao O-glicosdica:
o grupo funcional hidrolixa de uma molcula de acar reage com C
anomrico da outra molcula de acar.

Figura 7 Reao de condensao de monossacardeos e hidrlise de

dissacardeo.

Figura 8 Dissacardeos redutores e no redutores.

Dissacardeo redutor apresenta carbono anomrico livre para ser

oxidado a carboxila.
Maltose e lactose apresentam extremidade redutora.
A sacarose um acar no redutor.

4. Polissacardeos (Glicanos)
Forma de ocorrncia da maioria dos carboidratos na natureza;
Ocorrem como polmeros de mdia a alta massa molecular. Diferente
das protenas no massa molecular definida, esta caracterstica
uma conseqncia do mecanismo de sntese destas molculas.
Diferem entre si pelo tipo de monossacardeos, pelas ligaes entre
os monossacardeos, pelo comprimento da cadeia e pelo grau de
ramificao.
a) Homopolissacardeos uma nica unidade monomrica.
Armazenamento de energia: amido e glicognio
O armazenamento na forma polimrica torna a molcula
essencialmente insolvel, portanto contribuindo muito pouco para
o aumento da presso osmtica.
Funo estrutural: celulose e quitina.
b) Heteropolissacardeos dois ou mais tipos de unidades monomricas.
Membrana em bactrias peptideoglicanos;
Espao extracelular, unindo as clulas forma e suporte. Porosidade
que permite a difuso das substncias do espao extracelular para o
interior das clulas.
4.1 Amido
Sintetizado pro clulas vegetais: tubrculos e sementes.
Contm apenas glicose como monmero constituinte. Formado por 2
tipos de polmeros: amilose e amilopectina.
Amilose polmero linear de D-glicose com ligaes 4.
Amilopectina polmero ramificado de D-glicose com ligaes 4 e
6. Ramificaes a cada 24 a 30 unidades.
As enzimas que degradam o amido atuam sobre as extremidades
no redutoras da molcula.
4.2 Glicognio
Molcula de reserva de energia em clulas animais: abundante no
fgado e tecido esqueltico.
Mesmas ligaes glicosdicas da amilopetica, porm com uma
ramificao a cada 8 ou 12 unidades de glicose.
Esta ltima caracterstica compatvel com sua funo de reserva
energtica em tecidos animais, uma vez que a molcula de
glicognio ir apresentar mais extremidades no redutoras,
comparando-s com o amido, garantindo uma disponibilidade maior
de unidades de glicose pela ao da fosforilase do glicognio.

Figura 9 Amilose (a) e amilopectina (b).

4.3 Celulose
Resistente e insolvel em gua parede celular de vegetais.
Homopolissacardeo linear.
As unidades de glicose tem configurao (ligaes 14).
Vrias cadeias estendidas lado a lado, estabilizadas por ligaes de
hidrognio entre e intracadeias de glicose fibras lineares, estveis e
resistentes a tenso.
As ligaes (14) tornam a celulose no digervel em monogstricos,
enquanto que os poligstricos apresentam no rumem bactrias que
produzem a enzima celulase que catalisa a hidrlise da ligao .

Figura 10 Celulose ligaes de H entre e intra-cadeias de glicose.

4.4 Quitina
Polmero linear forma fibras estendidas exoesqueleto de artrpodes.
Apresenta N-acetil-D-glicosamina em ligaes .
Diferena qumica com a celulose: substituio de um grupo OH no C-2
por um grupo N-acetil.

Figura 11 Estrutura qumica da quitina.

c) Heteropolissacardeos
 Peptdeoglicanos componentes das paredes celulares de bactrias.

Unidades alternadas de N-acetilglicosamina e cido e cido Nacetilmurmico, unidas por ligaes (14).

Polmeros lineares justapem-se interligados por peptdeos
pequenos.

A enzima lisozima hidrolisa a ligao (14) acarretando a
morte da bactria presente na lgrima.
 Glicosaminoglicanos

Fazem parte da matriz extracelular.

Polmeros lineares constitudos por unidades de dissacardeos
repetidas.

Um dos monossacardeos o N-acetilglicosamina ou Nacetilgalactosamina e o outro um cido urnico.

cido hialurnico (Ac. D-glicornico e N-acetilglicosamina).

Figura 12 Peptdeoglicanos de membrana de Staphylococcus aureus.

Figura 13 cido hialurnico.

10

LIPDIOS
1. Introduo
Caracterstica definidora dos lipdios insolubilidade em gua.
Funes: energtica, estrutural (as membranas celulares so compostas
por dupla camada lipdica), cofatores enzimticos, transportadores de
eltrons, pigmentos que absorvem luz, agentes emulsificantes no trato
digestivo, hormnios e mensageiros intracelulares.
2. Lipdios de reserva
As gorduras e os leos so derivados de cidos graxos e, estes por sua
vez derivados de hidrocarbonetos.
Os cidos graxos (AG) so molculas altamente reduzida. A oxidao
completa (at CO2 e H2O) muito exergnica.
AG so cidos carboxlicos com 4 a 36 C, a maioria dos cidos graxos
de ocorrncia natural apresenta nmero par de carbonos.
Podem ter cadeias hidrocarbnicas saturadas ou insaturadas, estes
ltimos na maioria dos AG de ocorrncia natural tem configurao cis.
Ver Figura 1.

Figura 1 cido graxo saturado (a) e AG insaturado (b).

Nomenclatura simplificada: Comprimento da cadeia e o nmero de

duplas ligaes separados por dois pontos; posies de quaisquer
duplas ligaes nmeros sobrescritos na letra grega delta ().
Exemplo: 12:0, 18:0, AG saturados com 12 e 18 C, respectivamente.
18:1 (9), AG com 18 C e uma insaturao em C9.
O comprimento da cadeia carbnica e o grau de insaturao do AG
influenciam suas propriedades fsicas.
Quanto maior a cadeia carbnica e menor o nmero de ligaes duplas
menor a solubilidade do AG.
Na temperatura ambiente (25 oC) AG saturados entre 12 e 24 C tem
consistncia de cera, enquanto que, os insaturados com mesmo nmero
de C so lquidos.

11

Quanto maior a cadeia carbnica, maior o ponto de fuso e, em AG de

mesmo peso molecular aqueles com maior nmero de insaturaes tem
menor ponto de fuso.
O ponto de fuso est relacionado com o grau de justaposio das
molculas, sendo as mesmas mais prximas somente com AG
saturados e, nos insaturados, observa-se uma dobra na molcula devido
a ligao cis, que ir proporcionar um maior distanciamento e, portanto
uma menor energia de ligao intermolecular. Ver figura 2.

(a)
(b)
Figura 2 Justaposio de cidos graxos em agregados estveis: (a) AG
saturados e (b) mistura de AG saturados e indaturados.

Os triglicerdeos (TG) so compostos por trs molculas de AG

estereficados em uma nica molcula de glicerol.

Figura 3 Reao de esterificao que dar origem a um TG.

leos:
TG que so lquidos a temperatura ambiente.
Gorduras: TG que so slidos a temperatura ambiente.
As gorduras possuem a cadeia carbnica saturada, j os leos possuem
de 1 a 4 insaturaes (duplas ligaes) na cadeia carbnica.

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TG simples mesmo tipo de AG em todas as posies; nomenclatura

derivada do AG presente. Ex: 16:0 = tripalmitina.
TG misto: 02 ou mais AG diferentes o nome e a posio de cada AG
deve ser especificado.

Figura 4 Exemplo de triglicerideo misto. 1-estearoil, 2-linoleoil, 3- palmitoil

glicerol.

Rancidez Exposio do alimento rico em lipdios ao oxignio e luz

ultravioleta acarreta a clivagem das ligaes duplas originando
cidos carboxlicos de cadeia mais curta ou aldedos, cetonas de peso
molecular inferior portanto, mais volteis.
Hidrlise bsica dar origem ao sabo (sais de cidos graxos)
molculas anfiftica poro polar e apolar na molculas devido a isto
interage com a gordura e a gua formando micelas (emulso). Ver
Figura 5.
Ceras steres de ac. Graxo saturados e insaturados de cadeia longa
(C14 a C36), com lcoois de cadeia longa (C16 a C30).
Diferena entre ceras e leos e gorduras apenas uma ligao ster em
cada molcula.
Ponto de fuso = 60 a 100 oC (+ alto que os do TG).
Mais resistes a hidrlise e a decomposio do que TG mais duras e
quebradias, menos gordurosos.

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Figura 5 Reao de saponificao.

Figura 6 Tricontanoilpalmitato, o principal componente da cera de abelha,

um ster de cido palmtico com o lcool triacontanol.
3. Lipdios estruturais de membrana

Membrana biolgica dupla camada lipdica barreira impedindo a

passagem de molculas polares e ons. So molculas anfipticas
extremidade hidrofbicas e outra hidroflica.
Os agregados lipdios em meio aquoso esto mostrados na Figura 7.
Tipos de lipdios de membrana Fosfolipdios e glicolipdios.

Figura 7 Agregados lipdicos em meio aquoso, (a) micela e (b)

bicamada.

14

Figura 8 Alguns tipos comuns de lipdios de membrana. Em rosa

glicerol ou esfingosina que apresenta um ou mais grupos
alquila de cadeia longa (amarelo) e um grupo cabea-polar
(azul).
a) Glicerofosfolipdos
Glicerofosfolipdio (fosfolipdios) 2 AG unidos por ligao ster
ao C1 e ao C2 do glicerol e, um grupo polar ligado ao C3 (ligao
fosfodister).
Geralmente contm AG saturado C16 ou C18 em C1 (do glicerol)
e um insaturado C18 a C20 em C2 (do glicerol).
b) Esfingolipdos
Possui um grupo-cabea polar e duas caudas apolares, mas no
contm glicerol.
Estrutura qumica bscia = Esfingosina (aminolcool de cadeia
longa) + AG de cadeia longa + grupo-cabea polar.
Lipdios de membrana predominantes em clulas vegetais
galactolipdios nos cloroplastos 70 a 80% - Possivelmente
relacionado a processos evolucionrios - O fosfato um nutriente
limitante no solo.

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Figura 9 Estrutura geral de esfingolipdios.

Figura 10 Pigmentos absorvedores de luz. Apresentam duplas

ligaes alternadas.

16

AMINOCIDOS E PROTENAS
1. Introduo
As protenas so macromolculas.
So os instrumentos moleculares por meio dos quais a informao
gentica expressa Codificadas pelo DNA.
Subunidades monomricas aminocidos chave para a estrutura das
protenas.
Funes: estruturais, de transporte, catlise, imunolgica, movimento,
hormonal, reserva nutricional.
2. Aminocidos
So as unidades fundamentais das protenas. Vinte aminocidos
diferentes so comumente encontrados nas protenas.
Todos os 20 so -aminocidos. Frmula geral:

Os aminocidos diferem entre si pelas cadeias laterais, grupo R.

Enumerando a cadeira carbnicas de aa.

 Exceto a glicina os demais 20 aa tem o carbono ligado a quatro grupos

diferentes. Enantimeros. Os aa L so mais abundantes na constituio
das protenas.

Figura 1 - Relaes entre os enantimeros L e D- Alanina e L e D

gliceraldedo.

17

18

19

20

 Ligao dissulfeto formao do aa cistina. Responsvel pela

estabilizao de muitas protenas.

 Alm dos 20 aa comuns, as protenas podem conter resduos criados

pela modificao de resduos comuns j incorporados dentro de um
polipeptdio.

Os aa existem em soluo aquosa como on dipolar ou zwitterion.

Um zwintterion pode atuar tanto como um cido (doando prtons), assim

como uma base (receptora de prtons).
Substncias que exibem essa natura dupla so anfotricas.
Titulao cido-base envolve a adio ou remoo de ons H+.

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Figura 2. Curva de titulao da glicina. Ponto isoeltrico e regies de

tamponamento.

Figura 3 Curva de titulao do glutamato.

22

ENZIMAS
1. Introduo
Duas condies para manuteno da vida: a capacidade de auto-replicao e a
capacidade de catalisar as reaes qumicas.
Converso de sacarose em CO2 e H2O altamente exegnico, por isso
espontnea, contudo um pacote de acar pode ficar anos na prateleira sem
que se observe qualquer indcio desta reao, enquanto que os seres vivos
so capazes de realizar a reao em segundos.
A reao apesar de ser exegnica muito lenta e no caso de ocorrer nas
clulas a diferena devido a catlise.
A maioria das enzimas so protenas, exceto um pequeno grupo de molculas
de RNA catattico.
A atividade das enzimas depende da integridade de sua conformao nativa.
As enzimas quando desnaturadas perdem a atividade cataltica.
Possuem peso molecular de cerca de 12.000 at 1 milho.
Algumas enzimas requerem co-fatores (ons inorgnicos) ou coenzimas
(complexos orgnicos ou molcula metalorgnicas).
As enzimas so classificadas pelas reaes que catalisam.
Ex.: ATP + D-glicose ADP + D-glicose-6-fosafato
Sistema internacional de nomencaltura hexoquinase - nmero na Comisso
de Enzimas 2.7.1.1 O primeiro nmero (2) indica o nome da classe
(transferase); o segundo nmero (7), a subclasse (fosfotransferase); o terceiro
nmero (1), uma fosfotransferase com um grupo hidroxila como receptor; o
quarto nmero (1), a D-glicose como grupo receptor da fosforila.

Tabela 1 Alguns elementos inorgnicos que funcionam como co-fatores de enzimas

Co-fator
Cu 2+
Fe 2+ ou Fe3+
K+
Mg 2+
Mn2+
Mo
Ni 2+
SeZn2+

Enzima
Citocromo oxidase
Citocromo oxidase, catalase, peroxidase
Piruvato quinase
Hexoquinas, glicose-6-fosfatase, piruvato
quinase
Arginase, ribonucreotdio redutase
Dinitrogenase
Glutationa peroxidase
Anidrase
carbnica,
lcool
desidrogenase, carboxipeptidases A e B

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Tabela 2 Classificao internacional das enzimas

No.
1
2
3
4

Classe
Oxidorredutase
Transferases
Hidrolases
Liases

Isomerases

Ligases

Tipo de reao catalisada

Transferncia de eltrons (ons hidreto ou tomos de H)
Reaes de transferncias de grupos
Reaes de hidrlise
Adio de grupos a ligaes duplas, ou formao de duplas
ligaes pela remoo de grupos.
Transferncias de grupos dentro de molculas para produzir
formas isomricas.
Formao de ligaes C-C, C-S, C-O, C-N pelas reaes de
condensao acopladas clivagem de ATP.

2. Como as enzimas trabalham

Sitio ativo local confinado da enzima onde ocorre a reao catalisada.
Substrato molcula que liga ao sitio ativo da enzima e ser transformada no
produto.
Uma reao catalisada por enzima pode ser assim descrita:

E + S

Os catalisadores no afetam o equilbrio da reao, mas sim sua velocidade.

Os catalisadores - diminuem a energia de ativao.
A formao do complexo ES chave na compreenso da especificidade e
poder cataltico das enzimas.
Barreira energtica entre S e P energia requerida para o alinhamento dos
grupos que reagem, formao de cargas transitrias instveis e rearranjos de
ligao.
No diagrama da coordenada de reao na figura 1 esta evidenciado o estado
basal (ponto inicial da reao energia livre basal); estado de transio (ponto
onde o decaimento para o estado basal de S ou P igualmente provvel);
energia de ativao (diferena entre os nveis de energia do estado basal e o
estado de transio).

ES

EP

E + P.

Figura 1 Diagrama de coordenadas para uma reao qumica.

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Figura 2 Diagrama de coordenadas de reao comparando as reaes

catalisadas por enzimas e as no catalisadas.

O poder cataltico das enzimas derivado da energia livre liberada na

formao das ligaes e inmeras interaes fracas entre uma enzima e seu
substrato. A energia de ligao contribui para a especificidade e para a
catlise.
As interaes fracas so otimizadas no estado de transio da reao. Os
stios ativos so complementares aos estados de transio dos substratos.

3. Cintica enzimtica
Determina a velocidade de uma reao catalisada enzimaticamente
empregando alteraes de parmetros experimentais.
Fator-chave na velocidade da reao [S].
Vo velocidade inicial quando [S] muito maior do que a [E] condies
tpicas [E] nanomolares e [S] 5 a 6 vezes maior.
Efeito do aumento na [S] sobre o aumento na velocidade da reao. Segue
aumento exponencial at chegar em um plat Vmax saturao ES.
Estado pr-estacionrio durante o qual a concentrao ES se estabelece.
Estado estacionrio no qual [ES] permanece constante com o tempo.
Curva aproxima-se de uma hiprbole retangular expressa matematicamente
pela equao de Michaelis-Menten:
V0 = Vmax [S] / Km + [S].

Figura 3 - Efeito da concentrao do substrato na velocidade inicial de uma reao

catalisada por enzima.

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Enzimas que exibem uma dependncia hiperblica de V0 em funo de [S]

seguem a cintica de Micaelis-Menten.
Regra prtica Km = [S] quando V0 = Vmx
Excees mais importantes enzimas regulatrias enzimas alostricas
efetores ou moduladores alostricos.
Outras enzimas so reguladas por modificaes covalentes reversveis.

4. Inibidores enzimticos
So agentes moleculares que interferem na catlise, diminuindo ou
interrompendo as reaes enzimticas.
Agentes farmacuticos aspirina (acetilsalicilato) inibe a enzima que
catalisa a primeira etapa na sntese de prostaglandinas, envolvidas em
processos que produz a dor, entre outros.
Inibio reversvel competitiva, incompetitiva (no-competitiva) e mista.
Inibio irreversvel ligam-se de forma covalente as enzimas ou destroem
grupos funcionais, essenciais para a sua atividade.
Inibidor competitivo O inibidor compete com o substrato pelo stio ativo da
enzima, por isso somente se liga a enzima, evitando desta forma que o
substrato se ligue a enzima.
Inibidor incompetitivo Liga-se somente ao complexo ES.
Inibidor misto Liga-se tanto ao complexo ES como somente a E.

Figura 4 Inibio competitiva

 Exemplo de inibio competitiva Desintoxicao metanol lcool
desidrogenase catalisa converso de metanol em formaldedo (lesivo aos
tecidos, cegueira) Etanol compete com metanol pelo stio ativo da enzima.
Infuso intravenosa de etanol velocidade e concentrao controlada rins
filtram metanol exceo.

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Figura 5 Inibio incompetitiva.

Figura 6 Inibio mista.

27

INTRODUO AO METABOLISMO
Metabolismo atividade celular altamente coordenada sistemas
multienzimticos (vias metablicas) atuam de forma cooperativa para:
Obter energia qumica (captao da energia solar, degradao de nutrientes
ricos em energia);
Converter molculas nutrientes em molculas prprias de cada clula;
Polimerizar precursores monomricos;
Sintetizar e degradar molculas necessrias a funes celulares
especializadas.
Os organismos vivos podem ser divididos em dois grandes grupos, segundo a
forma como obtm carbono do meio, auttrofos e hetertrofos. Os auttrofos so
fotossintetizantes, so capazes de captar a energia do sol, enquanto que os
hetertrofos obtm energia de nutrientes orgnicos produzidos pelos auttrofos.
O nitrognio necessrio para a sntese de aminocidos, nucleotdios entre
outros. Os vegetais utilizam amnio ou nitratos solveis como fontes de N, j os
animais obtm o nitrognio a partir de aminocidos. As cianobactrias e espcies de
bactrias que vivem simbioticamente nas razes de algumas plantas so capazes de
fixar o N2 do ar atmosfrico em amnia. Outras bactrias, as nitrificantes, convertem
amnia em nitrato e nitrito e, as desnitrifantes convertem nitrato em N2. (ver figura 1).
Desta forma, a reciclagem de carbono, oxignio e nitrognio, que envolve todas
as espcies, depende do equilbrio entre as atividades dos produtores (auttrofos) e
dos consumidores (hetertrofos) na biosfera.

Figura 1 Ciclo do nitrognio na biosfera.

A reciclagem de nutrientes, oriunda da atividade dos seres vivos, envolve
processos metablicos que podem ser divididos em duas partes: anabolismo e
catabolismo.
Catabolismo a fase do metabolismo em que as molculas nutrientes
orgnicas (carboidratos, lipdios e protenas) sofrem degradao e so convertidas em
produtos menores e mais simples (CO2, H2O e NH3). Neste processo h liberao de
energia, que parcialmente conservada (uma parte da energia dissipada como

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calor) na forma de ATP e de transportadores de eltrons reduzidos (NADH, NADPH,

FADH2).
Anabolismo (biossntese) a fase do metabolismo em que molculas
precursoras mais simples (cidos graxos, aminocidos, monossacardios) so
condensadas para formar molculas mais complexas (lipdios, protenas,
polissacardios). Neste processo so requeridas fontes de energia, obtidos geralmente
pela tranferncia de grupo fosforila do ATP e do poder redutor do NADH, NADPH,
FADH2.
Desta forma o anabolismo e o catabolismo se inter-relacionam, pois ao passo
que no catabolismo so produzidas molculas de ATP, NADH, NADPH e FADH2, no
anabolismo estas mesmas molculas so consumidas. (Ver Figura 2).

Figura 2 Relaes energticas entre o catabolismo e o anabolismo.

O metabolismo catablico e/ou anablico subdivido em rotas metablicas que
agem de forma coordenada. Os metablitos so os compostos intermedirios entre o
substrato e o produto final de determinada rota metablica.
A maioria das clulas apresenta as enzimas capazes de biossintetisar e de
degradar uma mesma molcula, para evitar ciclos fteis, ou seja a degradao e
sntese (em uma mesma velocidade) sem converso em energia livre (biologicamente
til) ou converso em alguma biomolcula so realizados os seguintes controle em
ambiente celular:
1. Regulao recproca das seqncias de reaes de anabolismo e catabolismo;
2. Algumas reaes das vias so irreversveis caminhos opostos no
metabolismo (catabolismo e anabolismo) requerem enzimas distintas;
3. Compartimentalizao celular (a sntese da molcula ocorre em
compartimento da clula, enquanto que o anabolismo em outro).
Bioenergtica o estudo quantitativo das transdues da energia que
ocorrem nas clulas vivas, bem como a natureza e funo dos processos qumicos
envolvidos.
Primeira lei da termodinmica a energia no universo se mantm constante, a
energia pode mudar de forma ou ser transportada de uma regio para outra, mas ela
no pode ser criada ou destruda.
Segunda lei da termodinmica em todos os processos naturais a entropia do
universo aumenta.

29

Os seres vivos, apesar de sua aparente organizao, obedecem a segunda lei

da termodinmica, porque so sistemas abertos, toda a aparente organizao interna
e compensada pelo aumento da aleatoriedade causada no ambiente ao seu redor.
As reaes que ocorrem nas vias metablicas podem ser endergnicas ou
exegnicas, nas primeiras o valor da variao de energia livre (G) positiva, pois a
energia livre dos produtos maior do que dos reagentes, portanto para a reao
ocorrer ser necessrio absorver energia do ambiente. Enquanto que, nas reaes
exegnicas o valor de G negativo, logo o G dos produtos e menor do que dos
reagentes e ser liberada energia livre para o ambiente.
Duas reaes qumica em seqncia, A B e B C, cada uma delas possui
sua prpria constante de equilbrio e sua variao de energia livre-padro
caracterstica, Go1 e Go2 como so reaes em seqncia o termo B cancelado
resultando em A C, que possui sua prpria constante de equilbrio e sua variao
de energia livre-padro, sendo a mesma a soma de Go1 e Go2.
Observe as reaes abaixo:
Glicose + Pi
ATP + H2O

glicose-6-fosfato + H2O Go = 13,8 kJ/mol

ADP + Pi
Go =-30,5 kJ/mol

Essas duas reaes compartilham Pi e H2O, logo podem ser expressas como
reaes seqenciais:
Glicose + Pi
glicose-6-fosfato + H2O Go = 13,8 kJ/mol
ATP + H2O
ADP + Pi
Go =-30,5 kJ/mol
---------------------------------------------------------------------------------------------------Soma: ATP + glicose
ADP + glicose-6-fosfato Go = -16,7 kJ/mol
Este princpio de bioenergtica explica como uma reao termodinamicamente
desfavorvel (endergnica) em determinado sentido pode ocorrer nesse mesmo
sentido pelo acoplamento, atravs de um intermedirio comum, com uma reao
altamente exergnica.

30

GLICLISE E FERMENTAO
1. Introduo
A glicose uma molcula central no metabolismo. Atua como combustvel e
tambm como precursor de vrias molculas biolgicas. As trs principais vias de
utilizao da glicose esto descritas na Figura 1.

Figura 1 Principais vias de utilizao da glicose.

2. Gliclise
A gliclise uma via metablica que ocorre no citosol de eucariotos e
compreende uma seqncia de 10 reaes, na qual o produto da primeira reao ser
o substrato da prxima. Nesta via metablica a glicose ser degradada em 2
molculas de piruvato.
A gliclise possui duas fases: fase de pagamento e fase preparatria. Na fase
de pagamento para fosforilar os acares sero investidas duas molculas de ATP e
na fase de pagamento sero gerados 4 ATP e 2 NADH.
Na primeira reao a glicose fosforilada a glicose-6-fosfato, neste caso ocorre
o investimento de 1 ATP, demonstrando um processo de acoplamento de energia. Na
segunda reao a fosfohexose isomerase catalisa a converso de glicose-6-fosfato em
frutose-6-fosfato, que ser fosforilada a frutose-1,6-bifosfato, novamente com o gasto
de um ATP. Na quarta reao ocorre a clivagem desta molcula (reao que d o
nome a via gliclise) originando gliceraldedo-3-fosfato e diidroxicentona-fosfato, pela
ao cataltica da aldolase. A diidroxicentona-fosfato formada ser convertida em
gliceraldedo-3-fosfato pela triosefosfato isomerase. Agora na segunda etapa da
gliclise ocorre a oxidao do gliceraldedo-3-fosfato em 1,3 bifosfoglicerato e,
conseqente reduo que originar uma molcula de NADH (enzima gliceraldedo3fosfato desidrogenase); este NADH poder gerar 2,5 ou 1,5 ATP ao nvel de cadeira
respiratria, dependendo da lanadeira de eltrons utilizada. Na stima reao ser
formado um ATP ao nvel de substato, para cada molcula de 1,3-bifosfoglicerato que
ser convertida em 3-fosfoglicerato. A fosfoglicerato mutase converte esta ltima
molcula em 2-fosfoglicerato que ser desidrata a foesfoenolpiruvato. Esta ltima
molcula o substrato da piruvato quinase, enzima responsvel pela catlise da
transferncia do grupo fosfato do fosfoenolpiruvato para o ADP, produzindo piruvato e
ATP. Na Figuras 2 esto descritos todos os passos da gliclise com seu substrato,
produtos e metablitos.

31

b
Figura 2 Gliclise fase preparatria (a) e fase de pagamento (b).
Conforme observado na Figura 2 a gliclise apresenta trs reaes
irreversveis, estas so catalisadas pela hexoquinase, fosfofrutoquinase 1 e piruvato
quinase, sendo estas as regulatrias da via metablica. O fluxo de degradao da
glicose regulado para manter constante a concentrao de ATP. Os ajustes
necessrios na velocidade da gliclise so conseguidos pela interao entre o
consumo de ATP, a reoxidao de NADH e a regulao alostrica das enzimas
hexoquinase, fosfofrutoquinase 1 e a piruvato quinase.
3. Vias tributrias da gliclise
Alm da glicose outros carboidratos encontram na gliclise. Os polissacardos,
amido de tecidos vegetais e o glicognio, dos tecidos animais, sofrem a ao da
fosforilase do amido e do glicognio, respectivamente, liberando a glicose 1-fosfato

32

que isomerisada a glicose-6-fosfato, entrando na via glicoltica para ser degradada

em 2 molculas de piruvato.
Os demais carboidratos, dissacardios e monossacardos tambm so
degradados pela via glicoltica e seus caminhos metablicos esto descritos na Figura
3.

Figura 3 Formas de entrada do glicognio, do amido, dos dissacardios e das

hexoses na fase preparatria da via glicoltica.

33

CICLO DE KREBS
1. Introduo
A respirao celular ocorre em trs grandes estgios (Figura 1). No primeiro
estgios molculas combustveis, carboidratos, cidos graxos e aminocidos, so
oxidados em fragmentos de dois carbonos, acetil-CoA. No segundo estgio
molculas de acetil-CoA so oxidadas atravs do ciclo do cido ctrico originado
molculas de CO2 e a energia liberada nas oxidaes e conservada na forma de
NADH e FADH2. E no terceiro estgio os co-fatores reduzidos so oxidados,
desfazendo-se de prtons (H+) e eltrons. Esses eltrons so transportados at o
O2 atravs dos intermedirios da cadeia respiratria e a energia proveniente desta
transferncia de eltrons acoplada a sntese de ATP.

Figura 1 Os trs estgios da respirao celular.

2. Ciclo de Krebs
O piruvato proveniente da oxidao de carboidratos atinge a matriz
mitondrial, atravs de transportadores de membrana especficos, e sofre uma
descarboxilao oxidativa originando o acetil que ativado pela ligao com a
CoA. Esta reao catalisada pelo complexo da piruvato desidrogenase, que
envolve trs enzimas (E1, E2 e E3) e requer cinco coenzimas, tiamina pirofosfato
(TPP), flavina adenina dinucleotdio (FAD), coenzima A (CoA), nicotinamida
adenina dinucleotdio (NAD) e lipoato. Sendo que, estas coenzimas so
biossintetizadas a partir de vitaminas: tiamina (TPP), riboflavina (FAD), niacina
(NAD) e pantotenato (coenzima A).

34

Figura 2 Descarboxilao oxidativa do piruvato.

Para iniciar uma volta no ciclo de Krebs o acetil-CoA transfere seu grupo
acetil para o oxaloacetato originando citrato. Este transformado em isocitrato e
depois sofre uma descarboxilao oxidativa liberando um CO2, formando cetoglutarato e NADH. Uma nova descarbolixao oxidativa libera mais um CO2 e
origina mais um NADH e succinil-CoA que convertido em succinato, processo
acoplado a sntese de GTP (ATP ao nvel de substrato). Na prxima reao o
succinato oxidado a fumarato liberando um FADH2. Aps fumarato desidratado
a malato e, este ltimo atravs de uma oxidao regenera o oxaloacetato e produz
mais uma molcula de NADH.

Figura 3 O ciclo do cido ctrico.

A energia do ciclo de Krebs conservada na forma de ATP produzido ao nvel
de substrato e de NADH E FADH2, que sero responsveis pela produo de ATP ao
nvel de cadeia respiratria, na tabela 1 est descrito o balano energtico da
oxidao completa de uma molcula de glicose.

35

Tabela 1 A estequimometria da reduo das coenzimas e da formao de ATP na

oxidao aerbia de uma molcula de glicose atravs da via glicoltica
seguida da reao do complexo da piruvato desidrogenase, do ciclo do cido
ctrico e da fosforilao oxidativa
Reao

n . de ATP ou de
coenzima reduzida
formada diretamente

n . de ATP
formado ao
final do
processo*

* Cada NADH produzido gera 2,5 ATP ao nvel de fosforilao oxidativa, enquanto que cada
FADH2 gera 1,5 ATP.

As enzimas regulatrias do ciclo de Krebs so: complexo da piruvato desidrogenase,

citrato sintase, isocitrato desidrogenase e -cetoglutarato desidrogenase. Na Figura 4
esto descritos os moduladores alostricos destas enzimas.
O ciclo de Krebs uma via anfiblica, ou seja, utilizada em processos anablicos e
catablicos. Conforme observado na Figura 5, o oxaloacetato tambm precursor de
glicose, sendo um intermedirio tambm da gliconeognese. Enquanto que, cetoglutarato e tambm o oxaloacetato so precursos para a biossintese de
aminocideos e o citrato metablito da sntese de cidos graxos e hormnios
esterides.
3, Ciclo do glioxilato
Nos vertebrados os AG no so convertidos em Glicose, pois as reaes
catalisadas pela Piruvato quinase e piruvato desidrogenase so consecutivas e
irreversveis. Alm disso, pela estequiometria do ciclo de Krebs o esqueleto carbnico
do acetil-CoA proveniente da gliclise no produz oxaloacetato.
Os vegetais e microorganismos produzem glicose a partir do ciclo do glioxilato,
devido a existncia de duas enzimas isocitrato liase e malato sintase, presentes
somente nestes tecidos vivo.
As sementes com reserva lipdica utilizam a via do glioxilato para converter
lipdio em carboidratos, este processo necessrio devido a impossibilidade de
realizar a fotossntese.
Balano lquido do ciclo do glioxilato entrada de 2 acetil-CoA e sada de 1
succinato (ver Figura 6).
Diferentes compartimentos celulares citosol, glioxissomos e mitocrndrias
(ver Figura 7). Por isso a regulao recproca (Figura 8). A isocitrato desidrogenase
regulada por modificao covalente, uma quinase catalisa a fosforilao e inativao
da isocitrato desidrogenase (o isocitrato encaminhado para o ciclo do glioxilato,
originando glicose), enquanto que uma fosfate especfica remove grupo fosfato e ativa
a isocitrato desidrogenase, desta forma mantendo o isocitrato no ciclo de Krebs e,
comprometendo a molcula com a via catablica.

36

Figura 4 Ezimas regulatrias do ciclo de Krebs e seus moduladores alostricos.

Figura 5 O ciclo de Krebs: uma via anfiblica.

37

Figura 6 Ciclo do glioxilato.

Figura 7 Relaes entre o ciclo do cido ctrico (mitocndria) e o ciclo do glioxilato

(glioxissomo).

38

Figura 8 Regulao recproca do ciclo de krebs e do glioxilato.

39

CADEIA TRANSPORTADORA DE ELTRONS E FOSFORILAO OXIDATIVA

1. Introduo
A fosforilao oxidativa o estgio final do metabolismo energtico nos
organismos aerbicos. Todas as etapas oxidativas na degradao dos carboidratos,
lipdios e aminocidos convergem para esta via e a energia da oxidao das
biomolculas acoplada a sntese de ATP.
A fosforilao oxidativa ocorre nas mitocndrias e envolve a reduo do O2 a
H2O com eltrons doados pelo NADH e FADH2.
O entendimento atual da sntese de ATP explicado pela teoria quimiosmtica,
na qual diferenas na concentrao transmembrana de prtons so os reservatrios
para a energia extrada das reaes de oxidao biolgicas.
Os mecanismos de transporte de eltrons e de sntese de ATP (fosforilao
oxidativa do ADP) so distintos, porm esto intimamente relacionados. O fluxo de
eltrons atravs de uma cadeia de transportadores de membrana da mitocndria
fornece energia livre que acoplada ao transporte de prtons (membrana
impermevel a prtons) para o espao transmembrana, e, este gradiente de prtons
por sua vez fornece a energia livre para a sntese de ATP.
2. Cadeia transportadora de eltrons
A mitocndria apresenta membrana dupla, a membrana externa permevel a
ons e molculas pequenas. Enquanto que, a membrana interna impermevel a ons
(incluindo H+) e as molculas que a atravessam utilizam transportadores especficos.
A membrana interna contm os componentes da cadeia respiratria e a ATP
sintase.
A cadeia respiratria consiste de uma srie de transportadores de eltrons que
atuam seqencialmente. Estes transportadores esto organizados em complexos
ezimticos ligados a membrana interna da mitocndria. Cada um desses complexos
capaz de catalisar a transferncia de eltrons (reao de oxidao-reduo) de uma
parte da cadeia.
Os complexos I e II catalisam a transferncia de eltrons para a ubiquinona (Q)
a partir de dois doadores de eltrons diferentes: o NADH (complexo I) e o succinato
(complexo II). O complexo III transporta eltrons da ubiquinona at o citocromo c e o
complexo IV completa a seqncia transferindo eltrons do citocromo c para o O2.
Os carreadores de eltrons funcionam em ordem crescente do potencial de
reduo (Eo), pois os eltrons fluem espontaneamente do Eo menor para carreadores
de maior Eo. Portanto, a seqncia do transporte de eltrons da cadeia respiratria :
NADH Q citocromo b citocromo c1 citocromo c citocromo a citocromo
a3 O2. Observe Tabela 1 abaixo.

40

Tabela 1 Potenciais de reduo da cadeia respiratria e dos transportadores de

eltrons relacionados

______________________________________________________________________
Reaes redox (meia-reao)

Eo (V)

_____________________________________________________________________
3. O acoplamento da oxidao fosforilao
A energia liberada pela oxidao dos nutrientes utilizada pelos organismos
sob a forma de energia qumica do ATP. A produo de ATP na mitocndria o
resultado da fosforilao oxidativa, na qual o ADP fosforilado, obtendo-se ATP. A
cadeia transportadora de eltrons conduz a um bombeamento de prtons (ons
hidrognio) atravs da membrana interna da mitocndria, criando um gradiente de
prtons, tal gradiente representa uma forma de energia estocada e proporciona a base
do mecanismo de acoplamento.
O gradiente de prtons fornece a energia (na forma de fora prton-motiva)
para a sntese de ATP a partir de ADP e Pi. Pela ATPsintase (complexos Fo e F1)
presente na membrana interna da mitocndria.
A ATP sintase executa a catlise rotiva, nela o fluxo de prtons atravs de Fo
provoca alteraes no stio ativo, que unem ADP e Pi, formando uma ligao fosfato
de alta energia, originando, portanto, ATP.
A razo entre o nmero de molculas de ATP sintetizadas por O2 reduzido a
H2O de aproximadamente 2,5 ATP quando os eltrons entram na cadeia respiratria
atravs do complexo I (NADH) e 1,5 ATP quando entram pela coenzima Q (FADH2).
A fosforilao de cada mol de ATP necessita de 30,5 kJ. Das reaes de
transferncia de eltrons 3 produzem energia suficiente para permitir o acoplamento
para sntese de ATP, sendo as mesmas reaes so responsveis pelo bombeamento
de prtons para o espao transmembrana da mitocndria. So estas reaes: a
oxidao de NADH no complexo I e as reaes catalisadas pelos complexos
enzimticos III e IV (ver Figura 1).
O NADH produzido no citosol, na 6. reao da gliclise, na qual o
gliceraldedo-3-fosfato oxidado a 1,3-bifosfoglicerato, entra na mitocndria pela
atividade de duas lanadeira. A lanadeira malato-aspartato (Figura 2) e do glicerol-3fosfato (Figura 3), sendo que quando utilizada a primeira lanadeira so produzidos
2,5 ATP pelo processo de fosforilao oxidativa acoplado a transferncia de eltrons
e, quando a lanadeira empregada a do glicerol-3-fosfato so produzidos 1,5 ATP.

41

Figura 1- Modelo quimiosmtico da fosforilao oxidativa.

Figura 2 Lanadeira malato-aspartato.

42

Figura 3 Lanadeira glicerol-3-fosfato.

GLICONEOGNESE E VIA DAS PENTOSES-FOSFATO

1. Gliconeognese
A gliconogenese a via metablica responsvel pela produo de glicose a
partir de precursores que no so carboidratos. Em animais os precursores so:
piruvato, lactato, glicerol e aminocidos.
Em vegetais atravs da via de fixao de CO2 produzido 3-fosfoglicerato,
que pela gliconeognese idntica aos animais, transformado em glicose.
Em sementes em germinao as gorduras e protenas armazenadas so
convertidas em glicose e sacarose.
A gliclise e gliconeognese apresentam fluxos opostos, porm a gliclise
irreversvel.
Gliconegnese 3 desvios da gliclise: piruvato a fosfoenolpiruvato; frutose 1,6,
bifosfato a frutose 6-fosfato e glicose 6 fosfato a glicose. Ver Figuras 1e 2.

43

Figura 1 Primeiro desvio da gliconeognese.

Figura 2 Segundo e terceiro desvio da gliconeognese.

A gliclise e a gliconeogenese so reguladas de forma recproca, o principal
stio de regulao na converso de frutose-1,6-bifosfato em frutose-6-fosfato. O
modulador alostrico da frutose-1,6-bifosfatase e da fosfofrutoquinase-1 a frutose
2,6-bifosfato, que ativa a gliclise ao mesmo tempo que inibe a gliconeognese.

44

2. Via das pentoses-fosfato

A maioria das molculas de glicose so oxidadas pela via glicoltica e o ciclo de
Krebs, porm uma poro menor destas molculas oxidada pela via das pentosesfosfato.
A funo da via das pentoses fosfato produzir molculas de NADPH e
pentoses.
O NADPH empregado como poder redutor para a biossntese de lipdios.
Alm de ser empregado nos mecanismos de seqestramento de radicais livres.
Enquanto que, as pentoses so necessrias a biossntese de nucleotdios.
A via das pentoses-fosfato apresenta uma fase oxidativa e uma no-oxidativa
(ver Figura 1).
Na fase oxidativa so gerados a pentose e o NADPH
Na fase no-oxidativa 6 molculas de pentoses so regeneradas em 5
molculas de hexoses (ver Figura 2).

Figura 1 As fases oxidativa e no oxidativa da via das pentoses-fosfato.

45

Figura 2 O balano de carbono da fase no oxidativa da via das pentoses-fosfato.

Em tecidos especializados na sntese de lipdios as fases oxidativa e no
oxidativa da via so estimuladas, para manter constante a produo de NADPH.
Enquanto que, em tecidos em intensa multiplicao celular somente a fase oxidativa
estimulada, pois a ribose-5-fosfato empregada na sntese de nucleotdios, no
sendo, portanto, empregada na fase no oxidativa para regenerar a molcula de
glicose.
OXIDAO DE CIDOS GRAXOS
As molculas de TG so reduzidas, produzem 2 vezes mais energia do que
carboidratos ou protenas de mesma massa molecular.
Alm desta caracterstica os lipdios so molculas hidrofbicas e apresentam
inrcia qumica relativa. Devido a estas caractersticas os lipdios so excelentes
combustveis.
Porm, para serem metabolisados necessitam ligar-se a protenas especficas
de transporte (apolipoprotenas).
Alm disso, a estabilidade da ligao C-C quebrada pela ativao devido a
ligao da coenzima A com o carbono carbonila, neste processo h o gasto de 2
molculas de ATP, ver Figura 1.

46

Figura 1 Ativao do cido graxo pela ligao com CoA, reao que requer gasto
energtico de 2 ATP.
O principal stio de catlise dos cidos graxos em animais mitocndrias em
vegetais e animais peroxissomo glioxissomo em sementes em germinao. Os AG
com 14 carbonos ou mais requerem transportador especfico, acil-carnitina-graxo. Esta
reao catalisada pela enzima carnitina aciltransferase I. (Ver Figura 2).

Figura 2 Transporte do AG para o interior da mitocndria.

A catlise de AG realizada em trs etapas: beta-oxidao, ciclo do cido
ctrico e cadeia transportadora de eltrons (ver Figura 3). A beta-oxidao de cidos
graxo saturados compreende 4 passos consecutivos, que envolvem uma oxidao
(com produo de FADH2), uma hidratao, mais uma oxidao (com produo de
NADH) e uma ruptura da molcula para liberar uma molcula de acetil-CoA.
Novamente o AG desprovido de dois carbonos entra na beta-oxidao para liberar de
cada vez uma molcula de acetil-CoA (Figura 4).
Regulao da oxidao de cidos graxos. Passo limitante da velocidade - alta
[malonil-CoA] inibe a carnitina aciltransferase I. Alta relao [NADH] / [NAD+] inibe a hidroxiacil-CoA desidrogenase. Alta [acetil-CoA] inibe a tiolase.

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Os peroxissomos so compartimentos celulares enclausurados por membranas

animais e vegetais.
Vegetais peroxissomos de tecidos foliares e nos glioxissomos das sementes
em germinao.
Etapas de oxidao idnticas, porm nos peroxissomos a flavoprotena acilCoA oxidase dupla ligao passagem direta dos eltrons para O2 produzindo H2O2.
(Figura 5).
O processo nos peroxissomos mais ativo sobre AG de cadeia longa (26:0).
Papel biolgico em vegetais fornecer precursores biossintticos e no
energia (Figura 6).

Figura 3 Etapas da oxidao de AG

48

Figura 4 -oxidao de AG.

Figura 5 Comparao da oxidao de AG na mitocndria e no peroxissomo e

glioxissomo.

49

Figura 6 Lipdios estocados em sementes de vegetais so convertidos em

carboidratos, aminocidos, nucleotdios e energia.

50