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AO DE LA INVERSIN
PARA EL DESARROLLO
RURAL Y LA SEGURIDAD
ALIMENTARIA
UNIVERSIDAD
CONTINENTAL
ACCION DE AGENTES FISICOS SOBRE
LOS MICROORGANISMOS
2010118791
admin
SECCION: BI 1002
SEMESTRE: 2013-1
GRUPO:MESA 3
INDICE
Contenido
INTRODUCCIN ............................................................................................................................. 3
OBJETIVOS ..................................................................................................................................... 4
GENERAL.................................................................................................................................... 4
ESPECFICO .................................................................................................................................... 4
I.
MATERIALES ........................................................................................................................ 10
2.1 EQUIPOS ............................................................................................................................ 10
2.2 MATERIALES DE LABORATORIO ........................................................................................ 11
2.3 MATERIALES REACTIVOS ................................................................................................... 12
III.
PROCEDIMIENTO: ............................................................................................................ 13
RESULTADOS ................................................................................................................... 15
INTRODUCCIN
Como se ha visto anteriormente los microorganismos deben ser capaces
de
comparacin a los dems reinos, sin embargo tienen ciertas limitaciones con respecto
a algunos factores fsico - qumicos, estos podrn ser usados para limitar, alterar o
inactivar su crecimiento.
Para ello redactamos todo lo sucedido en la prctica de laboratorio de microbiologa,
que tuvo como finalidad Inhibir el crecimiento microbiano por accin de agentes
qumicos fsicos desarrollados en tres sesiones el primer efecto de la temperatura,
aqu las bacterias son capaces de sobrevivir amplios lmites de temperatura, en un
rango entre los 0-90C. Segunda accin de la presin osmtica factor que viene a
ser la presin desbalanceada que da lugar a los fenmenos de difusin y osmosis, en
una solucin que tiene diferentes de concentraciones. Y por ltima accin germicida
de la luz ultravioleta son componentes invisibles de la radiacin solar, todos los
microorganismos son sensibles al tratamiento UV
Finalmente en dicha redaccin presentaremos una estructura detallada de las
sesiones realizadas en laboratorio, resaltando los resultados, discusiones y
recomendaciones para tener un mejor ensayo de prctica de laboratorio.
OBJETIVOS
GENERAL
Identificar los efectos producidos por los agentes
fsicos sobre microorganismos.
ESPECFICO
I.
MARCO TEORICO
1.1.1 TEMPERATURA
aunque
RADIACION: los tipos de radiacin y las formas en que dao o destruye a los
microorganismos se han destruido
desinfectante
de uso
1.6
II.
MATERIALES
2.1 EQUIPOS
Descripcin
Descripcin
Horno
elctrico
Sirve para llevar o elevar
a altas temperaturas las
diferentes muestras que
se desean someter.
Es un mtodo empleado
en, en laboratorio de
qumica, para conferir
temperatura uniforme a
una sustancia lquida o
slida o para calentarla
lentamente.
Estufa
Bao maria.
Radiacin
ultravioleta.
Se denomina radiacin
ultravioleta o radiacin
UV a la radiacin
electromagntica cuya
Imagen
MATERIAL
IMAGEN
Se utiliza en los
laboratorios
para
contener
pequeas
muestras
lquidas,
realizar reacciones en
pequea escala, entre
otras cosas
Tubos de
ensayo
Es utilizada en
laboratorios para
variados fines.
Mechero
Un
instrumento
volumtrico
de
laboratorio
que
permite medir alcuota
de
lquido
con
bastante
precisin.
Suelen ser de vidrio.
Pipeta
Recipiente cilndrico
de vidrio fino que se
utiliza muy
comnmente en el
laboratorio, sobre
todo, para preparar o
calentar sustancias y
traspasar lquidos.
Vasos
precipitados
Instrumento destinado
a medir temperaturas
con escalas en
grados centgrados o
Fahrenheit.
Termmetro
Placas estriles.
Es un recipiente
redondo, de cristal o
plstico, con una
cubierta de la misma
forma que la placa, pero
algo ms grande de
dimetro, para que se
pueda colocar encima y
cerrar el recipiente,
aunque no de forma
hermtica
Carton culquiera
requerido para este
trabajo en laboratorio.
Un cartn circular
de 12 cm. de
dimetro, cortado
en uno de los
cuadrantes.
Descripcin
El medio de cultivo es un
polisacrido sin ramificaciones
obtenido de la pared celular de
varias especies de algas rojas
de los gneros Gelidium,
Euchema y Gracilaria
Contenido de bacterias de E.
Coli listas para ser difundidas
en cualquier medio donde se
requiera
material
Imagen
.
Cultivo en caldo
de E. coli.
III.
Bao de maria
4 placas con
concentraciones
crecientes de
sacarosa o
NaCl al 5%,
10%, 20%,
40%.
PROCEDIMIENTO:
Incubar a 37 c durante 24-48 hrs. Proceder en igual forma con los 7 tubos
restantes, pero elevando la temperatura del bao mara (10) cada vez que se
coloca un nuevo tubo; por lo tanto, para el tubo 8 la temperatura del bao
mara ser de 115 c.
IV.
RESULTADOS
EFECTO DE LA TEMPERATURA
A 65C
A 75C
A 80C
B. NaCl al 10%
C. NaCl al 15%
D. NaCl al 20%
A. Escherichia coli
OBSERVACIONES
Primer
cuadrante
Segundo
cuadrante
Tercer
cuadrante
Cuarto
cuadrante
Existe mayor
presencia de
poblacin
bacteriana
esto se debe
por el tiempo
expuesto que
no era lo
suficiente en el
primer y el
ultimo que no
se expuso
En el segundo
cuadrante
existe una
pequea
poblacin de
E.coli porque
se super la
dosis de la luz
UV que es de
6.600 micro
watt x
segundo/cm2
Igual que el
tercer
cuadrante
existe una
pequea
poblacin de
bacteria
Al igual que el
primer
cuadrante
existe mayor
poblacin
bacteriana
Se observa el
crecimiento de
bacterias pero
en una sola
colonia de
1.5mm.
No se observa
crecimiento de
bacterias.
Tambin se
observa
crecimiento de
bacterias de
medidas de
4mm, 4mm y
3.5mm.
B. Staphylococcus aureus
V:DISCUSIONES
EFECTO DE LA TEMPERATURA
FUENTE:
MATERIALES
Laboratorio de ciencias bsicas
Hidrxido de sodio
cido actico puro. pa
Cultivos puros de bacilos y Cocaceas
Tubos de ensayo taponados estriles (2 por alumno)
Pipetas pasteur taponadas y estriles (2 por alumno)
Chupetes gomas (uno por alumno)
Estufa de cultivo a 37C
Bao mara regulable
Guantes
Jabn desinfectante
Toalla nova
Caldo de cultivo Tripticase soya (distribuido en alcuota de 3 ml por tubo)
Papel indicador de pH
Tubos sometidos a proceso y con modificaciones
Lpiz marcador
PROCEDIMIENTO:
Paso 1: El docente realiza y explica proceso de efecto temperatura, Ph.
Paso 2: Los alumnos organizados en grupo realizan los procedimientos demostrados
por el docente.
Paso 3: Se entregara a cada grupo una alcuota de cultivo puro.
Paso 4: Inocular en dos tubos de caldo Tripticase soya.
Paso 5: Tubo prueba se deber incubar en bao mara a 56C durante 24 horas .
Paso 6.- Tubo control se deber incubar en estufa de cultivo a 37C.
DISCUSIN DE RESULTADOS
Segn la base terica tomada del libro se observa que el rango de temperatura
ptimo para el E. Coli es de 37 - 45C y como mnimo 10C y mximo 55C.
Comparando con nuestros resultados realizados en la universidad continental
observamos mayor crecimiento en las temperaturas de 35C y 45C, no se observ a
25C y se observ poco a 55C, a la sazn podemos decir que nuestros resultados
son vlidos, adems podemos decir que el tipo de agar influye tambin en el desarrollo
microbiano.
MATERIALES
Cepa de E. coli.
4 placas con: NaCl al 5%NaCl al 10%NaCl al 15%
NaCl al 20%
PROCEDIMIENTOS:
En las placas con diferentes concentraciones de NaCI o sacarosa, sembrar
la cepa de
Rotular datos.
Incubar a 37C por 24-48 hrs.
Comparar con crecimiento en placa con agar nutricio (concentracin normal
de NaCI) de E. coli.
RESULTADOS
NaCl a 5%. Observamos que no hay crecimiento en esta placa Petri, tanto
en el estriado con la E. Coli y St. Aureus.
NaCl a 10%. Observamos que si hay crecimiento en esta placa Petri tanto
en el estriado con la E. coli y St aureus pero en poqusimas cantidades.
NaCl a 15%. Observamos que si hay abundante crecimiento en esta placa
Petri tanto en el estriado con la E.coli y St aureus, ya que est bien
estriado.
NaCl a 20%. Observamos que no hay crecimiento en esta placa Petri tanto
en el estriado con la E.coli y St aureus.
MATERIALES
en ella
Materiales:
Cultivo de escherichia coli en caldo.
Placa con agar nutritivo
Lampara de luz ultravioleta germicida
Procedimiento:
1: inocular mediante un agotamiento de asa un cultivo mixto en una placa con agar
nutritivo.
2: levantamos la tapa y cubriremos la mitad con el papel de aluminio (sin que ste
toque la superficie del medio).
3: Colocar la placa abierta bajo la accin de la lmpara ultravioleta durante 5 minutos.
Transcurrido este tiempo, quitar el papel de alumnio, cerrar la placa y llevar a incubar a
37C.
4:Tras 24 horas de incubacin observaremos el desarrollo microbiano en la parte
protegida de la radiacin, frente a la ausencia de crecimiento en la parte expuesta.
Resultados
En este estudio los resultados fueron: La parte donde se cubri con
ningn
crecimiento
debido
que
por 5 minutos
la
radiacin
no
UV
no presento ningn
VI: CONCLUSIONES
1: EFECTO DE LA TEMPERATURA
La temperatura es un agente fsico que influye bastante en el crecimiento de la
muestra utilizada (E. coli), es decir puede provocar la muerte trmica de acuerdo a la
resistencia de las bacterias la cual es normalmente de 0-90 para lo cual concluimos
que la temperatura optima de optima de crecimiento para esta bacterias segn lo
observado fue entre los valores de 35 y 45C.
VII: ANEXOS
VIII: BIBLIOGRAFA
http://www.quiminet.com/articulos/como-funciona-el-autoclave22563.htm
http://es.scribd.com/doc/6851390/Virologia-Practica-04-Accion-de-losagentes-fisicos-y-quimicos-sobre-la-particula-viral
http://egg.umh.es/frvalera/manualDePracticas.pdf
http://www.zerbitzu-orokorrak.ehu.es/p258shprevct/es/contenidos/informacion/sp_legislacion/es_leg_upv/adjuntos/
Gu%C3%ADa%20t%C3%A9cnica%20del%20INSHT%20agentes%20qu
%C3%ADmicos.pdf
VIII: CUESTIONARIO
Valor f: es el tiempo
en minutos y a una temperatura determinada
(normalmente a 121c necesario para destruir una poblacin de clulas o
esporas 3,4
3
4
LUZ ULTRAVIOLETA
RADIACIONES
IONIZANTES
6
VENTAJAS Y
DESVENTAJAS
EJEMPLOS
Es una de radiacin no
ionizante Tiene un bajo grado
de penetracin y produce
lesiones celulares formando
DIMEROS DITIMINA EN
ADN que interfieren su
relacin, la longitud de onda
ms eficaz es como
germicida es la 260 nm
La radiacin ionizante ,
especialmente los haces de
Se expresa con el punto de muerte trmica, como el PMT que implica que una
temperatura es letal a pesar de sus condiciones ambientales. Pero la
destruccin decimal D es ms precisa y tiene ms aceptacin, esta tiene un
tiempo de reduccin decimal en un tiempo para destruir el 90% de los
microorganismo.
Pasos para esterilizacin
Las endosporas bacteriana se destruyeran solamente si se mantiene una
temperatura de 121C durante 10 a 12 minutos, cuando hay que esterilizar un
volumen grande, hay que alarga el tiempo de esterilizacin para que el centro
de alcance la temperatura de 121C; cinco litros de lquido pueden precisar
casi 70 minutos, debidos a estos posible inconvenientes, se suele esterilizar en
el auto clave un indicador biolgico junto con el resto de material. Este
indicador consiste normalmente en una ampolla estril con un medio y una
tirada papel cubierta de esporas de bacillius stearothermophilus o clostridium9
8. Defina la dosis reducciones decimal para la radiacin.
La filtracin puede usarse para esterilizar lquidos termos sensibles o gases. Los filtros
pueden ser clasificados como de profundidad, de superficie o filtros de membrana
dependiendo de su composicin y caractersticas de construccin, de sus interacciones con
fluidos y partculas y de sus mecanismos de filtracin.
Porque cuando se utilizan en forma independiente, ningn tipo de filtro es lo suficientemente
efectivo y rentable para lograr los estndares o grados de esterilizacin que requiere la
industria farmacutica. La mejor manera para lograr su efectividad, a costos moderados, es
utilizar primero filtros de profundidad y de superficie para remover grandes partculas,
seguidos posteriormente de una filtracin de alta eficiencia con filtros de membrana.11
1010
11
http://tecnologiafarmaceuticabuap.blogspot.com/p/esterilizacion-de-formas-farmaceuticas.html